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  • 观察中药骨疏康治疗绝经后骨质疏松症的临床疗效

    作者:钟晓凤;卫云

    目的 观察分析中药骨疏康在临床治疗绝经后骨质疏松症的疗效.方法 选取我院2011年4月~2012年4月期间收治的100例骨质疏松女性患者,将其随机平均分成研究组和对照组,对照组进行常规的口服阿法迪三药物治疗,研究组则是在常规治疗的基础上,进行阿法迪三、骨疏康的药物治疗,并对患者在治疗前后的骨代谢标记物护骨素(OPG)、血清碱性磷酸酶(ALP)以及骨密度指标进行比较.结果 两组患者在治疗前的OPG、ALP含量以及骨密度的比较均没有统计学意义,没有可比性.在治疗1年、2年后进行血清OPG含量比较,发现均比治疗前低,P<0.01,并且和相应时期的对照组患者对比差异显著,P<0.01,具有统计学意义.在治疗1年、2年后进行血清ALP含量比较,发现均比治疗前低,P<0.01.并且和相应时期的对照组患者对比差异显著,P<0.01,具有统计学意义.在治疗1年及2年后相应的BMD值和治疗前相比有显著差异,研究组与对照组进行比较,P<0.01,差异有显著的提高.结论 中药骨疏康用于治疗绝经后骨质疏松的治疗可以有效减少骨转换率,改善血清中骨代谢的标记物,增强骨质结构,增加骨质的密度等,效果令人满意,值得在临床上进行推广.

  • RANKL/RANK/OPG通路在牙周病进程中的免疫机制研究

    作者:赵秋怡;陶思雨;郭竹玲

    随着国民对口腔健康的日益重视,伴有牙周疾病而寻求治疗的患者随之增加.RANKL/RANK/OPG通路在牙周炎症发生过程中对牙槽骨有不可代替调节作用,其中RANKL、OPG作为骨改建中主要调控蛋白,能较为精确地反映牙周免疫系统概况.本综述从牙周病治疗过程中RANKL/RANK/OPG通路的免疫表达角度探讨其对牙周炎患者治疗过程中的影响.

    关键词: RANKL RANK OPG 牙周病 免疫
  • OPG、RANKL在大鼠牙周炎联合血管钙化龈沟液的表达和意义

    作者:张朋梅;潘克清;尚淑贤;陈艳青;李慧;娄秀秀

    目的 研究血清中骨保护素(OPG)和核因子-kB受体活化因子配体(RANKL)在牙周炎联合血管钙化大鼠龈沟液(Gingival crevicular fluid,GCF)中的表达及其作用.方法 按照相应的方法建立矛周炎、血管钙化及牙周炎联合血管钙化动物模型,采用ELISA法检测龈沟液中OPG、RANKL的表达.结果 牙周炎、血管钙化及联合组龈沟液中OPG、RANKL及RANKL/OPG比值与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);联合组与牙周炎、血管钙化组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 OPG、RANKL在牙周炎与血管钙化关系中有一定作用.

  • “补肾健脾”针刺法对去势雌鼠OPGmRNA、ODFmRNA基因表达的影响

    作者:黎喜平;李灿;徐远坤;沈骏;秧荣昆

    目的:观察“补肾健脾”针刺法对去势雌鼠模型骨组织OPG、ODF基因表达的影响,为该法治疗绝经后骨质疏松症提供理论依据。方法:将32只健康雌性 Wistar 大鼠,随机等分为4组:正常组、模型组、针刺组及雌激素组。除正常组外,对其他3组大鼠进行双侧摘卵巢手术制造绝经后骨质疏松症模型,而正常组行假手术,暴露卵巢而不摘除。正常组和模型组每日同时灌服等量生理盐水,针刺组使用36号美容针刺入双侧“足三里”“肾俞”“命门”“关元”“大杼”“脾俞”穴,雌激素组用己烯雌酚溶液灌胃,3个月后取腰3锥体液氮冻存,经Trizol法抽提总RNA, RT-PCR检测OPG、ODF基因表达。结果:各组与模型组ODF mRNA表达强度相比较均极显著地降低,以雌激素组和针刺组尤为明显,而雌激素组ODF mRNA表达强度明显低于针刺组(P<0.01)。结论:补肾健脾针刺法对去势大鼠骨组织可明显抑制ODF基因的表达,促进OPG基因的表达。

  • 基于RANK/RANKL/OPG系统探讨阳和汤对阳虚证乳腺癌骨转移裸鼠模型的影响

    作者:冯磊;毛丹;陈州华;李玲;肖玉洁;黄立中

    目的 探讨阳和汤对阳虚证乳腺癌骨转移裸鼠模型的影响及其相关机制.方法 将70只裸鼠随机分为空白对照组(NS组),阳虚骨转移组(YG组),阳虚骨转移+唑来膦酸组(YGZ组),阳虚骨转移+阳和汤等临床剂量组(YGY组),阳虚骨转移+阳和汤2倍临床剂量组(YG2Y组),骨转移+唑来膦酸组(GZ组),骨转移+阳和汤等临床剂量组(GY组)7组.肌注氢化可的松建立阳虚证裸鼠模型;再将NS组以外的所有裸鼠左心室注射乳腺癌细胞MDA-MB-231悬液建立裸鼠骨转移模型;YGY、YG2Y、GY组造模后第5天开始中药煎剂灌胃干预,YGZ、GZ组于造模后第5、7、9、12、14、16、19天腹腔注射唑来膦酸,YG组造模1周后灌胃蒸馏水.用药20天后对裸鼠进行X线摄像、影像学评分、病理组织观察,取骨转移组织进行RT-PCR和Western-blot检测骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、核因子κB受体活化因子配体(receptoractivator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)的基因及蛋白表达量.结果 阳和汤能在一定程度上改善裸鼠模型的生存质量(P<0.05),抑制骨转移,治疗骨转移引起的溶骨性骨质破坏(P<0.05),并能明显增加裸鼠OPG的表达(P<0.01)、抑制RANKL的表达(P<0.01).结论 阳和汤等临床剂量能有效治疗阳虚证乳腺癌骨转移,其可能机制是通过增加OPG的表达、抑制RANKL的表达,从而抑制乳腺癌骨转移的发展.

  • 葛根素对破骨细胞形成以及成骨细胞OPG/RANKL mRNA表达的影响

    作者:袁斯远;何芳;孔蓓蓓;刘连起;张允岭;马涛;刘雪梅;郑宏;闫妍

    目的:观察葛根素对破骨细胞的形成以及成骨细胞OPG、RANKL mRNA表达的影响.方法:通过培养小鼠破骨前驱细胞RAW 264.7诱导产生破骨细胞,在培养液中分别加入葛根素(10-5、10-6、10-7mol/L),利用TRAP染色观察破骨细胞形成数目.通过培养小鼠成骨细胞MC3T3-E1,在培养液中加入葛根素(10-6mol/L),利用RT-PCR方法观察成骨细胞OPG、RANKL mRNA的表达.结果:葛根素组破骨细胞形成数目随着葛根素浓度增加而显著减少(P<0.05).与空白对照组比较,葛根素组成骨细胞OPG mRNA表达升高,但差异无统计学意义,RANKL mRNA表达降低(P<0.05),OPG/RANKL mRNA升高.结论:葛根素能够直接抑制破骨细胞形成和上调成骨细胞OPG/RANKL mRNA表达而间接地调控破骨细胞,可能是葛根素抗骨吸收作用的重要细胞分子机制.

  • 淫羊藿总黄酮对去势大鼠骨组织BMP-2和OPG mRNA表达的影响

    作者:李晶;宋敏;罗晓;谢兴文

    目的:研究淫羊藿总黄酮(TFE)对去势大鼠骨组织BMP-2和OPG mRNA表达的影响,进一步揭示淫羊藿“补肾壮阳,益精健骨”的作用机制.方法:采用卵巢切除的方法建立大鼠骨质疏松模型,将大鼠随机分为正常对照组,模型对照组,TFE低、中、高剂量组,β-雌二醇组6组,每组10只,分别予相应药物灌胃90d,处死后取胫骨,用剪子剪下约1cm3,放入预冷的研钵中,加入液氮后将其研磨成粉末状提取总RNA,鉴定后采用琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行检测,研究它们对BMP-2和OPG mRNA表达的影响.结果:与模型对照组相比,TFE低、中、高剂量组BMP-2和OPG mRNA表达显著升高(P<0.05,P<0.01).结论:淫羊藿总黄酮通过灌胃后能上调去势大鼠BMP-2和OPG mRNA的表达,说明淫羊藿总黄酮代谢产物具有促进骨形成活性.

  • 巴戟天对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及机理探讨

    作者:王莹;王少君;潘静华;刘红;李艳;付小卫;汪文来;周晟芳;李亚楠;赵红霞;于峥;赵宏艳;张治国;刘梅洁;Gary Guishan Xiao;鞠大宏

    目的:探讨巴戟天对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理.方法:将60只雌性Wistar大鼠随机分为5组,即空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组和巴戟天组,每组12只.摘除大鼠双侧卵巢1个月后,灌胃给予巴戟天水煎剂,给药3个月.采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用免疫组化方法检测OB和MSC OPG、RANKL的蛋白表达.结果:与模型组比较,巴戟天组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%以及TFS%、MAR明显降低,同时OB、MSC RANKL蛋白表达皆显著降低.结论:巴戟天对卵巢切除所致的大鼠骨质疏松症具有一定的治疗作用,能抑制OB和MSC RANKL的蛋白表达,是其能够治疗骨质疏松症的机理之一.

  • 杜仲、千年健对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理探讨

    作者:张颖;Gary Guishan Xiao;荣培晶;刘梅洁;汪文莱;王少君;于智敏;刘红;潘静华;于峥;赵宏艳;鞠大宏

    目的:探讨具有温补肾阳作用的单味中药杜仲、千年健对去卵巢所致大鼠骨质跳松症的治疗作用及其机理.方法:将72只雌性Wistar大鼠随机分为空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组、杜仲组以及千年健组6组.给药3个月后,采用骨组织形态计量学方法对不脱钙骨切片进行形态计量,免疫组化和原位杂交法检测大息怒胫骨OR和MSC OPG、RANKL蛋白及其mRNA表达.结果:与模型组相比.杜仲组、千年健组胫骨TBV%显著增高,TRS%明显降低,千年健组TFS%、MAR、OSW明显降低,杜仲组无显著性变化;千年健组OB和MSC OPG蛋白及其mRNA的表达显著升高,RANKL蛋白及其mRNA表达明显降低;杜仲组OB和MSC RANKL蛋白及其mRNA表达明显降低.结论:千年健不仅可以增加OB和MSC OPG蛋白及其mRNA表达,还能抑制RANKL蛋白及其mRNA的表达,而杜仲是通过抑制OB和MSC RANKL蛋白及其mRNA表达达到治疗骨质硫松症作用的.

  • "肾主骨"的机理研究——左归丸含药血清对破骨细胞分化调控因子OPG、RANKL蛋白表达的影响

    作者:刘梅洁;鞠大宏;赵宏艳;刘红;王燕;卢贺起

    目的:通过观察左归丸含药血清对破骨细胞分化调控因子OPG和RANKL表达的影响,探讨肾主骨的机理.方法:体外分离、培养成骨细胞(OB)和破骨细胞(OC),实验分为两部分:(1)左归丸含药血清对OC所致骨吸收陷窝面积的影响;(2)左归丸含药血清对成骨细胞OPG、RANKL表达的影响,采用免疫细胞化学染色法,检测成骨细胞OPG、RANKL蛋白的表达.结果:(1)在培养的第7天,OC+OVX含药血清组骨吸收陷窝面积与OC+OVX血清组相比,显著减少,但仍明显大于OC+正常血清组.OC+OB+OVX含药血清组与OC+OB+OVX血清组相比,明显减小,而与OC+OB+正常血清组比,无显著性差异.与OC+OVX血清组相比,OC+OB+OVX血清组骨陷窝面积显著增大;而OC+OB+OVX含药血清组与OC+OVX含药血清组相比,骨陷窝面积明显减小;(2)OB+OVX含药血清组与OB+OVX血清组相比,成骨细胞OPG蛋白的表达明显上调,RANKL蛋白的表达明显下调;而与OB+正常血清组相比,无显著性差异.结论:左归丸含药血清可通过调节破骨细胞分化调控因子OPG、RANKL的表达来实现对破骨细胞的抑制作用,这也提示中医的"肾"可通过对OPG、RANKL的调节而达到"主骨"的作用.

  • 山药对卵巢切除大鼠骨质疏松症的治疗作用及其机理探讨

    作者:贾朝娟;鞠大宏;刘梅洁;于智敏;汪文莱;卢贺起;藤静如;李艳;王少君;刘红;潘静华;赵红霞;李浈;王燕平;赵宏艳;王燕

    目的:探讨山药对卵巢切除所致大鼠骨质疏松症的治疗作用,并通过观察其对OB和MSC OPG、RANKL蛋白及其mRNA表达的影响,探索其作用机理.方法:将60只雌性Wistar大鼠随机分为5组,即空白对照组、假手术组、模型组、阳性对照组和山药组,每组12只.摘除大鼠双侧卵巢1个月后,灌胃给予山药水煎剂,共给药3个月.采用骨组织形态计量学的方法对大鼠胫骨不脱钙骨切片进行形态计量;采用免疫组化和原位杂交的方法分别检测OB和MSC OPG、RANKL蛋白及其mRNA的表达.结果:与模型组比较,山药组大鼠胫骨TBV%显著增高,TRS%以及TFS%、MAR、OSW和mAR均明显降低;同时OB和MSC OPG蛋白和mRNA表达皆显著增高,而RANKL蛋白和mRNA表达皆显著降低.结论:山药对卵巢切除所致的骨质疏松症具有明显的治疗作用,能促进OB和MSC OPG的表达并抑制RANL的表达,是其能够治疗骨质疏松症的机理之一.

  • 壮骨止痛方全方提取物对去势雌鼠骨保护素的影响

    作者:张国民;黄娟;宁炯杰;李筠芝;莫新民;刘慧萍

    目的:观察双侧卵巢摘除(去势法)对雌性大鼠血清雌二醇和骨保护素(OPG)的变化.方法:用去势法造成去势雌鼠模型,喂养13周后处死.结果:壮骨止痛方全方提取物组雌二醇含量增加,OPG的含量升高,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论;壮骨止痛方全方提取物通过增加雌二醇含量、提高OPG的含量而起到抗骨质疏松的作用.

  • 低频振动对骨髓基质细胞成骨能力影响及机制的研究

    作者:叶超群;纪树荣;杨键;潘立冬;王子羲

    目的 了解低频振动对骨髓基质细胞(BMSCs)成骨能力及其OPG基因、RANKL基因表达的影响.方法 分离、培养10周龄雌性SD大鼠BMSCs,随机分为静止培养对照组和振动组,振动组于培养的第11天开始接受振动干预7 d;振动结束后对两组BMSCs的增殖、碱性磷酸酶(ALP)、钙化结节及OPG mRNA、RANKL mRNA进行检测.结果 振动组BMSCs增殖能力较对照组明显提高(P<0.05),但ALP活性、钙化结节无明显改变.振动组BMSCs OPG基因表达明显上调(P<0.05),RANKL基因表达无明显变化.结论 低频振动可促进BMSCs的增殖,可能与其促进OPG基因表达上调有关;但未发现能使BMSCs成骨能力出现明显改变.

  • Cu2+对MC3T3-E1细胞增殖分化影响及对OPG、MEPE表达的影响

    作者:解婷茹;常刘;孙秋爽;魏巍;吴立鹏;刘爽

    目的 观察Cu2+对小鼠成骨细胞(MC3T3-E1)增殖、分化以及OPG与MEPE表达.方法 采用不同浓度1×10(-4~-6)mol/L Cu2+作用于MC3T3-E1细胞,分别在24、48、72、96 h后采用MTT法检测Cu2对细胞增殖的影响;ALP(碱性磷酸酶)试剂盒检测细胞培养液中ALP活性;RT-PCR方法检测1×10(-4~-6) mol/L Cu2+作用下细胞中OPG和MEPE的mRNA表达水平,探讨MC3T3-E1细胞增殖分化的分子机制.结果 作用48 h和96 h时,1×10-6mol/L Cu2+明显促进MC3T3-E1细胞增殖;作用24 h时,此浓度对细胞增殖无影响;作用72 h时,1×10-6mol/L Cu2+明显抑制细胞增殖;1×10-4mol/L、1×10-5mol/L的Cu2+对MC3T3-E1细胞增殖无影响或抑制其增殖.ALP试剂盒检测1 × 10-6mol/LCu2+在作用24 h时,对细胞分化无影响,其他时间均可促进细胞分化;1×10-4mol/L的Cu2+抑制细胞分化,1×10-5 mol/LCu2+在作用96 h时,可显著促进MC3T3-E1细胞分化,其他时间对细胞分化无影响.琼脂糖凝胶电泳图片可见1×10(-4~-6)mol/LCu2+作用于MC3T3-E1细胞48 h时,OPG和MEPEmRNA均有表达.实时荧光定量PCR结果表明,在CU2+浓度为1×10-6mol/L作用48 h时OPG与MEPEmRNA明显增加.结论 作用48 h时,1×10-6 mol/L Cu2+可以促进MC3T3-E1细胞增殖和分化,其机制与OPG、MEPEmRNA相关.

  • 骨保护素作为预测心血管疾病发病率和死亡率的新标志物的研究进展

    作者:谢钦菁;罗助荣

    骨保护素(osteoprotegerin,OPG)是1997年Tsuda等[1]在人胚胎肺纤维细胞中发现的一种分泌蛋白,是肿瘤坏死因子受体(TNFR)超家族的一员,具有调节骨密度的作用.在随后的更多研究中,OPG与心血管疾病的关系越来越被重视,它可保护血管内皮细胞、抑制血管钙化和动脉粥样硬化,在动脉粥样硬化的发生发展中起着重要的调节作用.近来,许多研究发现心血管疾病患者血浆巾OPG水平与其预后有着密切的关系,血浆OPG水平可以作为评估冠状动脉病变风险及危险分层的指标,预测心血管疾病的发病率和死亡率.因此,为了对OPG/核因子KB受体活化冈子配体(receptor activator of nuclear factor KB ligand,RANKL)系统在动脉粥样硬化病理生理过程中的作用有一个系统的了解,本文对前人的一些研究进行了归纳总结,希望能为临床诊治提供新的途径.

  • RANKL与骨代谢

    作者:张志梅;李玉坤

    核因子κB受体活化因子配基(receptor activator of NF-κB Ligand, RANKL) 是一种Ⅱ型跨膜蛋白,是目前发现的惟一具有诱导破骨细胞分化、发育、发挥功能的因子.NF-κB受体激活子(receptor activator of NF-κB,RANK)是一种Ⅰ型跨膜蛋白,是RANKL的惟一受体,是RANKL发挥功能的关键.骨保护蛋白(osteoprotegerin,OPG)是一种分泌型糖蛋白,与RANKL竞争性与RANK结合抑制骨吸收、促进骨形成.近年来通过许多对RANKL的研究发现,它不仅在骨质疏松症的发病中起重要作用,而且也在骨代谢过程中受多种因素影响,并为骨质疏松症及其他骨骼疾病的治疗开辟了广阔的前景.

    关键词: RANKL RANK OPG denosumab
  • 绝经后血液透析患者中血清骨保护素与骨质疏松症的相关性:初步研究

    作者:何书励

    骨保护素(Osteoprotegerin,简称OPG)是破骨细胞有力的抑制物,对骨代谢有重要影响.发表于<妇女健康杂志>,介绍了台湾慈济大学对血液透析患者血清OPG水平与骨密度(BMD)的相关性进行了初步研究.

  • 携带人护骨素基因的腺相关病毒在关节炎大鼠膝关节转导的初步研究

    作者:鲍礼智;赵东宝;韩星海;管剑龙;蔡青;戴生明;施冶青;张兰玲;刘菁

    护骨素(OPG)是一种分泌型糖蛋白和缺乏跨膜结构域的肿瘤坏死因子受体超家族成员,主要通过与NF-кB受体活化因子配体(RANKL)结合而发挥骨保护作用.OPG不仅抑制破骨细胞生成,还抑制破骨细胞的骨吸收功能.各种上游因子如甲状旁腺激素、前列腺素、TNF、IL等终均通过改变RANKL/OPG的比率而发挥作用,血清RANKL/OPG对早期类风湿关节炎的骨破坏具有预测作用[1].

  • 阿仑膦酸钠对假体周围骨溶解中OPG及RANKL的影响

    作者:孟海;马立峰;白晓冬;苏楠;郭艾

    目的 探讨阿仑膦酸钠对聚乙烯颗粒诱导假体周围骨溶解中OPG及RANKL影响.方法 将钛金属棒植入新西兰大白兔左侧股骨内,每2周向左膝关节内注射聚乙烯颗粒,使用随机数字表随机分成实验组和对照组,各6只.实验组给予阿仑膦酸钠灌胃,而对照组给予等量的0.9%的氯化钠溶液灌胃.12周后处死动物,取出假体周围界膜组织,用ELISA方法检测组织中OPG及RANKL的浓度,用两独立样本t检验进行统计学分析.结果 实验组OPG的浓度(0.905 ±0.243) ng同对照组(0.702 ±0.066) ng比较差异无统计学意义(P>0.05),而RANKL的浓度(5.686±0.788) pg同对照组(7.945±1.112) pg比较差异有统计学意义(P<0.01),OPG/RANKL比率同对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 阿仑膦酸钠能够显著影响聚乙烯颗粒诱导假体周围骨溶解中RANKL的浓度以及OPG/RANKL,进而阻止聚乙烯颗粒诱导的假体周围骨溶解,对兔的假体松动有明显的预防和治疗作用.

  • TGF-β对成骨细胞增殖、分化及OPG基因mRNA表达的影响

    作者:石义刚;陶天遵;徐强;吉光荣;孟祥智;王立春;陶树清

    目的观察不同剂量TGF-β对成骨细胞增殖、分化及OPGmRNA基因表达的影响,明确其作用机理.方法取新生24h内的Wistar大鼠颅盖骨分离成骨细胞,在TGF-β为0μg/L、1μg/L、10μg/L、100μg/L的浓度中培养.对细胞的生长及钙结节的形成观察其生长状态,经MTT法测定细胞增殖,细胞分化由碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)水平测定得到.用RT-PCR技术测定TGF-β对成骨细胞OPG基因mRNA表达的影响.结果成骨细胞在7d可铺满瓶壁,30d可形成钙结节,TGF-β可促进成骨细胞的增殖、ALP和OCN的分泌,以TGF-β为1μg/L时作用明显.TGF-β可促进OPG基因的表达在为1μg/L时作用明显.结论 1μg/L可促进大鼠成骨细胞的增殖、分化,促进成骨细胞OPG基因mRNA的表达.TGF-β可能通过影响OPG而调节成骨细胞、破骨细胞的平衡,使骨重建.

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