中华流行病学杂志
Chinese Journal of Epidemiology 중화류행병학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 1.98
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0254-6450
- 国内刊号： 11-2338/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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云南省8个少数民族聚居地亚克汀病流行情况调查
目的调查云南省8个少数民族聚居地亚克汀病的患病率,研究其流行规律、特点,为今后的防治工作提供科学依据.方法用<中国联合型瑞文测验(CRT-C2)>测定智商;用<津医精神运动成套测验(JPB)>进行精神运动测验.结果调查8～12岁少数民族儿童4 222名,平均智商(IQ)91±19,其中IQ 55～69者277人,查出精神运动障碍119例;儿童甲状腺B超平均肿大率为5.4%,尿碘中位数466.9 μg/L,盐碘合格率为94.9%.结论 4 222名少数民族儿童中,轻度智力落后兼有精神运动障碍者119例,由此估算亚克汀病患病率为2.8%.
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原发性肝癌与出生顺序的研究
目的分析原发性肝癌患者的出生顺序,探讨环境因素与肝癌的关系.方法根据Greenwood及Haldane的出生顺序方法,对来自江苏省海门市8年随访队列的100个家系中100例先证者及22例患病同胞进行出生顺序研究. 结果 Greenwood法分析结果显示,患者出生顺序在1～3胎次的个体较多,当控制了乙型肝炎病毒感染的影响后,结果仍显示肝癌病人好发在出生顺序较早的个体.Haldane法计算∑6A实际值=1 806,∑6A理论值=1 988,实际6A值与期望6A值相差两个标准差以上,︱∑6A实际值-∑6A期望值︱/∑V6A=2.165 7,差异有显著的统计学意义(0.02＜P＜0.05),实际6A值比期望6A值小,说明出生顺序越小的个体越容易患肝癌.生态学研究结果显示,海门市普及自来水10年后的肝癌死亡率随时间推移明显下降,经Spearman相关显著性检验,相关系数为-0.818(P＜0.01).提示早期出生的个体中肝癌的发病与当地饮用水的水质有关.结论肝癌的发生与出生顺序有关,发生在出生较早的个体,这与国外报道的肝癌好发于出生顺序较晚个体的结论不一致.生态学研究表明,长期饮用沟塘水与肝癌好发在出生顺序较早的个体有关,提示环境因素对肝癌的发生有一定的影响.
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男性不育症危险因素的病例对照研究
目的探讨男性不育症的危险因素.方法对94对病例和对照1∶1配比进行病例对照研究.结果长期大量吸烟(OR=3.45,95%CI:1.95～6.10)、婚外性生活史(OR=7.29,95%CI:2.54～20.89)、高温大棚蔬菜种植(OR=6.73,95%CI:1.91～23.69)、苯类化学品接触(OR=20.53,95%CI:4.67～90.25)、解脲支原体感染(OR=5.55,95%CI:2.28～13.53)与男性不育症有关联,为其危险因素.结论男性不育症是由多种因素长期反复作用的结果,其预防应从整治环境污染、加强职业防护、提高自我防护能力、改变不良工作及生活习惯等方面做起.
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心肌钙蛋白-Ⅰ在小儿病毒性心肌炎诊断中的价值
病毒性心肌炎(VMC)的临床特点是病情轻重悬殊,缺乏特异性表现,常造成诊断困难.心肌钙蛋白-I(cTnI)属心肌结构蛋白,具有特异的抗原性.为探讨其在小儿VMC诊断中的价值,自1998年起进行了临床研究,报告如下.
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流行病学在《实施卫生和植物卫生措施协定》中的应用
实施卫生和植物卫生措施(SPS)协定是WTO规则之一,适用于所有可能直接或间接影响国际贸易的动植物卫生检疫措施.笔者简要分析流行病学在SPS协定中的应用.
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以化脓性感染就诊的艾滋病一例报告
患者男性,24岁,农民,未婚.2001年5月就诊.自诉8天前臀部感染伴发热,创面迅速增大、增深,行动困难.曾用青霉素治疗,不能完全控制.查体:急性病容,体温39.5℃,脉搏120次/min,呼吸30次/min,右臀部有一化脓灶,基本局限,面积6 cm×7 cm,充满浓液,表面破溃.实验室检查:白细胞2.0×109/L,分叶0.75,淋巴0.20,红细胞2.60×1012/L,血红蛋白56 g/L;谷草转氨酶70.4 U/L,总蛋白44.6 g/L,白蛋白18.3 g/L,白/球比值为0.70.心电图显示窦性心动过速.X线检查:肺部纹理增粗,其余未见异常.
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唐山市居民肥胖患病率现状调查
肥胖作为现代社会的流行病已引起人们广泛重视.近年来,我国国民患肥胖病比例迅速上升,对健康形成威胁.作者旨在评估唐山市居民肥胖患病率状况及发展趋势.
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高原环境下急性高原病预后及与再患率关系的随访研究
为探讨急性高原病(AHAD)患者在高原环境条件下的预后(AHAD再患率)情况,对西藏军区总医院(海拔3 658 m)40年间(1955年12月至1995年12月)收治的AHAD患者的随访资料进行总结.
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浙江省狂犬病新发疫源地调查及其流行特征
狂犬病是一种人畜共患的急性传染病.人被带有狂犬病病毒的犬、猫等肉食动物咬伤而得病,病死率极高,几乎达100%.2000年12月9日温州市泰顺县发生首例狂犬病病人,至2001年底全市共发生狂犬病病人10例,全部死亡.
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从一起副伤寒疫情分析实验室病原学检查的结果
柳城县2001年10月爆发一起甲型副伤寒,发病292例.此起疫情实验室病原菌血培养、粪便培养、血清肥达反应阳性率均较低,有19.12%血培养阳性患者的血清肥达反应呈阴性.
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一起小学生流行性腮腺炎爆发的调查
2002年6月23日横县卫生防疫站接到疫情:长寨村委白花小学有数例流行性腮腺炎(流腮)病人,立即会同县第二人民医院有关人员组成联合调查组前往疫区调查.
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广东省小儿川崎病流行病学调查
自从1967年日本川崎富作医生首次报道川崎病以来,日本已观察到15万余例川崎病患儿,北美、欧洲、中国等地的病例亦逐年增多[1-4].但迄今为止,其病因尚未明了.为了解广东省川崎病的发病率、分布及流行特征,以探索川崎病的病因及其影响发病的因素,我们进行了广东省川崎病流行病学调查,结果报告如下.
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北京部分地区1995～1999年腔隙性脑梗死发病率变化趋势
为了更准确地反映人群腔隙性脑梗死发病率的变化趋势,为人群脑血管病的预防提供更加可靠的数据.我们按照统一标准、统一的方法对北京部分社区人群进行了5年(1995～1999年)的监测,结果报告如下.
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安徽省学生伤害的流行病学调查
我国每年有70万人死于各种伤害,造成了大量的永久性残疾,给社会带来严重的经济负担.伤害已经成为严重威胁年轻一代健康的重要公共卫生问题.安徽省地形地貌呈现多样性,长江和淮河自西向东横贯全境,本次调查了皖南、皖中、皖北的大、中、小学生,较好的代表了安徽学生的伤害发生情况.现将结果报告如下.
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中国城乡老年人1998、1999、2000年死因别顺位
用1995年全国1%人口抽查资料,对1998、1999、2000年全国卫生统计年报资料中60岁及以上年龄组城乡居民年龄别、疾病别死亡率进行标化,计算出我国1998、1999、2000年死因顺位(表1～3).
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深圳地区1999年手足口病患儿中肠道病毒71型的监测
世界上许多国家和地区相继报道了肠道病毒71型(enterovirus type 71, EV71)的流行[1-3].目前已知EV71的感染可以导致手足口病,无菌性脑膜炎、脑炎和脊髓灰质炎样的麻痹性疾病等多种与神经系统相关的疾病.我们于1999年对深圳地区出现手足口病病例进行了EV71的监测,结果报告如下.
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甘肃省缺碘致儿童智力损伤影响的探讨
甘肃省饮水调查结果提示80%以上的人口聚集区水碘低于10 μg/L,碘缺乏病流行广泛.1995年开始全民食盐加碘,但碘盐质量不够稳定,非碘盐时有冲击,全省居民户碘盐合格率1995、1997、1999年分别为55.5%、61.0%、69.5%.近30余年典型地方性克汀病无新发病例,但病区存在着相当数量的弱智儿童(亚克汀病)认为是补碘不足造成的较为轻微的亚临床损伤.正是这种症状不够典型,易被忽略,但数量较多的亚克汀病是病区社会经济、文化发展的大障碍.为评估我省目前碘缺乏造成的脑损伤的程度和状况,我们于1997年进行了以下的调查.
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计划免疫时期一起罕见麻疹爆发的流行病学调查
2001年2月1日府谷县麻疹爆发,共发病2 233例,发病率为1 075/10万,无死亡病例.1.流行病学特征:首发病例为3岁男孩,发病前一直在家,2月1日出现发热、伴全身不适、食欲不振、头痛、咳嗽、喷嚏、流涕、畏光、流泪和结膜充血等症状.4日面、颈、躯干和肢体出现红色斑丘疹,约1周后皮疹开始脱屑,留有色素沉着,发病后在门诊治疗,亦未报告,经调查,未接种麻疹疫苗(MV)和无外出史.首发病例后,病例继续发生,至3月份门诊、住院病例出现高峰,即首发病例后1个月余,为第二、三代病例,发病数占64.31%(1 436/2 233).
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脑卒中临床流行病学分析
脑卒中已成为现今致死、致残的主要因素,我们就天津中医学院第一附属医院近3年收治的2 535例脑卒中住院患者临床有关资料进行统计分析,以探究脑卒中的发病规律及流行病学变化,提高脑卒中的防治水平.
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单独发生的非综合征型唇腭裂的病因学研究进展
唇腭裂(oral clefts)是由于胚胎时期间充质发育受阻而导致的一组出生缺陷,根据解剖部位的不同可分为单纯唇裂(cleft lip, CL),唇裂合并腭裂(cleft lip with palate,CLP)和单纯腭裂(cleft palate,CP)三种形式.唇腭裂是常见的严重出生缺陷之一,在我国出生时严重畸形的发生顺位中占第一或第二位,其病因学研究是目前出生缺陷研究中的焦点问题之一.
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中国人群肺癌发病危险因素的Meta分析
目的探讨中国人群肺癌发生的主要危险因素,为预防决策提供依据.方法利用Meta分析方法综合国内1990～2001年关于肺癌发病危险因素的研究文献41篇.累计病例5 600例,对照6 892例.结果各因素合并比值比分别为:精神因素(3.34)、吸烟(3.04)、室内煤烟污染(3.20)、室内油烟污染(2.72)、肺癌家族史(2.61)、饮食蔬菜摄入(0.49)、水果摄入(0.69)、体重指数(1.57)、家族肿瘤史(2.97)、呼吸系统疾病史(2.66)、厨房通风情况(2.13)、生活用煤(1.50)、被动吸烟(1.42).结论目前影响中国人群肺癌发生的主要因素为精神因素、吸烟、室内环境污染、呼吸系统疾病史及家族史、蔬菜和水果摄入量等.
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性别间和家庭聚集的幽门螺杆菌感染的Meta分析
目的综合分析并探讨幽门螺杆菌感染情况.方法运用Meta分析方法对幽门螺杆菌性别间和家庭聚集的研究进行综合定量分析.结果性别间幽门螺杆菌感染率有细微差别(95%CI:0.057 9～0.096 3);父母均阳性子女幽门螺杆菌感染率较父母均阴性者为高(95%CI:0.337 8～0.504 2).结论幽门螺杆菌感染率存在性别差异和家庭聚集现象,幽门螺杆菌流行病学研究涉及很多方面,但均缺乏足够调查和证据,尚需进一步研究.
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中国居民高血压病主要危险因素的Meta分析
目的为评价中国居民高血压病的主要危险因素与高血压发生的关联.方法对检索并入选的国内24篇有关高血压危险因素的病例对照研究进行综合定量分析.结果过量饮酒、吸烟、嗜盐、高血压家族史、性格急躁、超体重(BMI＞24)合并OR值(95%CI)分别为1.194(1.184～1.203)、1.100(1.096～1.104)、1.165(1.157～1.173)、2.662(2.550～2.779)、2.524(1.902～3.348)、1.616(1.600～1.633).结论过量饮酒、吸烟、嗜盐、高血压家族史、性格急躁以及超体重均为中国居民高血压病的主要危险因素.
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DNA修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶在人群肺癌发生中的作用
目的探讨DNA修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,hMGMT)在人群肺癌发生中的作用. 方法用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测150例肺癌组织、40例正常肺组织、50对肺癌病例和对照外周血单个核细胞中hMGMT基因mRNA的表达;用免疫组化检测p53、C-MYC、K-RAS基因表达;并分析有关暴露因素对修复基因hMGMT表达的影响,以及hMGMT基因与p53、C-MYC、K-RAS等癌变相关基因的关系.结果32.7%(49/150)的肺癌组织和5.0%(2/40)的正常肺组织存在hMGMT基因表达低下,hMGMT基因表达低下与肺癌发生的危险度OR值为9.22(2.05～57.65).20.0%(10/50)的肺癌病人外周血和4%(2/50)的正常人外周单个核细胞血细胞也可检出hMGMT基因表达低下.探讨影响hMGMT基因表达的各种暴露因素,发现吸烟可抑制hMGMT基因表达.另外发现,K-RAS癌基因的过度表达与hMGMT表达低下有关(P＜0.05);而p53、C-MYC基因的表达与hMGMT无关. 结论 DNA修复基因hMGMT可能在肺癌发生中起着重要的作用,其表达低下是人群发生肺癌的危险因素之一,该基因的低表达可作为有价值的肺癌易感性标志.
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一氧化氮合酶基因G894T变异与高血压病关系的研究
目的探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因第7外显子G894T变异(Glu298Asp)与高血压病的关系.方法以人群中筛检出的、未经药物治疗的116例高血压病患者及136名血压正常者为研究对象,运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)检测G894T变异.结果G894T变异与高血压病显著相关,894T等位基因频率高血压病组显著高于血压正常组(16.0%∶8.8%,P=0.019),OR＝1.96,95%CI:1.14～3.37.在病例组、对照组及两组合计中,G894T变异基因型的收缩压及舒张压水平皆显著升高(P＜0.05).用多元协方差分析调整年龄、性别、吸烟、饮酒、体重指数、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇后,在病例与对照合计中,G894T 变异基因型对收缩压及舒张压水平仍具有正显著影响(P＜0.01).结论 eNOS基因第7外显子G894T变异可能是该研究人群中高血压病发病的重要危险因素之一.
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中国北方5城市慢性乙型肝炎患者中SEN病毒检测
目的了解SEN病毒D和H(SENV-D/H)在中国慢性乙型肝炎患者(CHB)中的感染情况.方法应用巢式聚合酶链反应法(nPCR),对中国北方5城市595例CHB患者和北京市96名正常人血清检测SENV-D/H DNA,并用PCR产物直接测序法对7株SENV进行了序列分析.结果CHB患者SENV感染率为61.3%,正常人为62.5%,两者差异无显著性(χ2=0.047,P=0.829).但不同城市CHB患者中SENV感染率存在一定差异.从不同城市分离的SENV 的核苷酸序列同源性较高,4株SENV-D同源性为91%～98%,3株SENV-H同源性为95%～98%.结论在5城市CHB患者中存在SENV-D/H感染,其感染率与正常人群相似,提示SENV- D/H可能没有直接致病性.
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双生子研究中二分结局变量的统计分析方法
用来分析双生子样本中二分结局变量(如是否患某病或是否具有某种性状)的方法很多.传统的方法包括同病率(concordance rates)法和配对优势比(matched pair odds ratios)法.前者主要是用来确定遗传因素对疾病发展的影响;后者则是以同卵双生子同胞作为对照,检验环境暴露对疾病的作用.这两种方法计算简单,容易解释,但也有不尽人意之处.同病率法的结果受人群中基础患病率的影响很大,且无法利用两个都未患病的双生子对的信息,也不能利用测量到的环境指标;而配对比值比法无法评价遗传因素对疾病的影响.
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加强监测 迎接流行性感冒新挑战
流行性感冒(流感)是由流感病毒引起的急性传染病,以其病原的易变性和疾病的传播速度快而著称.流感的影响主要表现在流行期间急性病人的高发病率,就诊人数增加,住院率甚至死亡率增加,对老年人、儿童和有潜在健康问题的人有合并并发症甚至致命的危险.据史料记载,早在1173～1875年之间全球共发生流感大小流行299次.20世纪发生4次世界性大流行,严重的是1918～1919年A1(H1N1)亚型的大流行,为人类现代史上大的瘟疫,累计发病达7亿多人,造成2 000多万人的死亡,超过第一次世界大战的战亡总人数.
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京郊房山区1987～2001年肾综合征出血热发病状况及预防接种效果分析
肾综合征出血热(HFRS)是一种以鼠类为主要传染源的自然疫源性传染病.北京市房山区于1987年发生首例HFRS后,进入20世纪90年代发病呈明显上升趋势,疫区范围逐渐扩大,在局部地区呈多发、爆发性流行状况.通过对每起疫情进行调查处理,落实灭鼠、小范围和大面积接种预防等措施,控制了HFRS疫情的蔓延,使HFRS发病处于低水平,为进一步探索HFRS防治计划和免疫策略提供依据.现将1987～2001年房山区HFRS发病状况及预防接种效果分析如下.
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循证医学和循证保健 第五讲 应用证据
在以上几讲中,我们对循证医学已经有了初步的了解,这一讲,主要讨论如何应用证据.评价证据的目的是为了使用,卫生保健工作者应当充分利用这些评价后的佳证据来制订决策,进行采购和管理卫生服务,然后改变资金流向和实现卫生资源的有效配置.通常各种临床治疗/预防指南、社区预防服务指南都是经过评价、得以肯定的佳证据,临床医生或保健系统工作者可以直接用来指导自己日常的实践.在没有指南可借鉴的情况下,应严格按照循证的步骤来制定一个治疗或预防的模式,并进一步进行研究.无论是哪种方式,都应当考虑所获得的证据是否可以应用于自己的病人或人群,以及他们自己的观念和期望[1].
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流行性感冒疫苗保护效果和成本效益分析
近年来西方发达国家除了继续做好流行性感冒(流感)的动态监测外,主要把重点放在流感疫苗的研究上,并在人群中开展接种流感疫苗预防流感.我国也在1996年引进了流感疫苗,1998年由于北京市发生了A3亚型引起的流感流行,人们对流感疫苗的认知度越来越高,接种流感疫苗的人数也越来越多.虽然接种流感疫苗预防流感已普遍被人们接受,但接种流感疫苗的策略仍有一些问题引起人们的争议,其中以流感疫苗的成本效益为突出.以下通过抽样调查的方法对北京市应用流感疫苗后的保护效果和成本效益进行初步评估.
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食管癌高发现场的综合防治研究
食管癌是我国高发肿瘤之一,居全国恶性肿瘤死亡的第四位,每年平均死亡15万人.由于食管癌患者通常就医较晚,其5年相对生存率很低.因此,食管癌的防治,即成为迫切而艰巨的任务.肿瘤的预防是控制肿瘤的希望所在.食管癌一级(病因学)预防,是食管癌综合防治研究的重要组成部分,是针对食管癌可能的致病因素,即亚硝胺、霉菌及其毒素、营养不平衡与不良的饮食生活习惯和行为,研究、探索和提供能有效控制这些因素的策略、方案和措施,并逐步应用和推广,使食管癌发生率出现稳定下降的趋势.
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如何在因特网上查找流行病学信息Ⅰ.事实数据库与应用软件
要认识并利用因特网上流行病学信息资源,必须充分重视美国疾病预防与控制中心(CDC)、WHO等世界权威机构网站上的相关数据库及应用软件,同时关注一些大型相关网站及专业学术机构网站上的信息.
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准确定位 严把质量 彰显特色--中华流行病学杂志现况及展望
中华流行病学杂志第五届编委会已经成立,并于2002年10月在杭州举办的第五次全国流行病学学术会议上,召开了第一次编辑委员会议.在中华医学会杂志社的领导及关怀下,以及广大作者及读者多年来对本刊一如既往的厚爱及支持下,二十余年来<中华流行病学杂志>已有了很大的发展,目前正处于发展中的一个重要里程碑.本刊于1981年成为中华医学会系列杂志中的一员;2000年改为大开本;2002年诞生了第五届编委会,编委平均年龄为51.7岁,补充了新鲜血液;2003年本刊的刊期由双月刊变更为月刊.但是目前期刊行业竞争十分剧烈,争夺稿源及读者的形势十分严峻,我们要抓住机遇,面对挑战,将本刊的今天作为一个新的起点,以求得更大发展.
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中国2000～2001年流行性感冒流行概况
目的了解中国2000～2001年流行性感冒(流感)流行及抗原性变异情况. 方法鸡胚传代病毒用于抗原性分析;病毒液提取RNA进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),扩增产物纯化后测序.然后用MegAlign(Version 1.03)和Editseq(Version 3.69)软件进行基因种系发生树分析.结果 2001年流行的H1N1亚型病毒血凝素蛋白重链(HA1)区氨基酸序列与A/上海/7/99(H1N1)相比,在抗原决定簇D区的第190位发生了氨基酸替换;基因种系发生树表明2001年的H1N1亚型流感病毒存在基因特性不同的两系病毒株.国内人群中仍然同时流行着两种抗原性明显不同的B型流感病毒(Yamagata 系和Victoria系),Yamagata 系病毒占大多数,Victoria系的HA1区基因与B/山东/7/97毒株相比,其197和199位氨基酸发生了替换.B型的基因种系发生树也证实Victoria系病毒株的抗原性改变.2000年分离的H3N2亚型流感病毒的HA1区氨基酸序列与A/悉尼/5/97(H3N2)间有7～8个氨基酸的差异;2001年分离的H3N2病毒株与2000年的病毒株相比,又在83、186、202、222位发生了氨基酸替换,表明H3N2亚型病毒株间的抗原性发生了较明显的变异.结论 2000～2001年中国流感的流行情况较为平静;H3N2亚型的抗原性发生了变异;H1N1亚型和B型病毒的抗原性虽没发生明显的变异,但它们均同时流行着两系抗原性不同的毒株.
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天津市儿童流行性感冒病原学检测分析
目的对天津市2001～2002年流行性感冒(流感)患儿进行病原学分析.方法用狗肾传代(MDCK)细胞和鸡胚双腔法进行流感病毒分离.用鸡红细胞和人O型红细胞凝集试验证实病毒的存在,用红细胞凝集抑制试验进行型和亚型的鉴定.结果 2001年10月至2002年3月共采集14岁以下流感样患儿咽拭子标本238份,分离出64株流感病毒,检出率为26.9%;其中A(H3N2)亚型42株,占检出数的65.6%;A(H1N1)亚型13株,占20.3%;B型9株,占14.1%.所分离的64株流感病毒都具有适应于MDCK细胞株生长及与人O型红细胞凝集良好的生物学特性.转种鸡胚后,绝大多数(62/64株)能适应鸡胚生长;但64份阳性咽拭子标本液直接接种鸡胚,仅有3份血凝阳性.此外,96.4%(53/55株)A型流感病毒均可由O相转为D相,有2株A(H3N2)为O相特征.B型流感病毒均为D相特征.结论天津地区流感病毒存在A(H3N2)、A(H1A1)和B三个型,以A(H3N2)为优势流行型.
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浙江省与日本A3型流行性感冒病毒株的血凝特性及HA1序列比较
目的比较近年来在浙江省与日本流行的A3(H3N2)型流行性感冒(流感)毒株的血凝特征与血凝素重链(HA1)区域的序列差异.方法对浙江省不同性状的流感代表株进行了抗原性分析,并与日本同期的毒株作了血凝特性及HA1区域的氨基酸序列比较分析.结果近年在浙江流行的A3型流行株,其抗原性已发生较大变异,其中绝大部分是对鸡红细胞缺乏凝集特性的O相毒株,它与A/武汉/359/95株二者在HA1区域的氨基酸同源性仅为94.82%,存在较大差异,这些O相毒株可以通过在MDCK细胞上的传代而转变为D相毒株,日本的同期毒株,其情况也相似.结论 A3型流感病毒在HA1区域发生的变异,是近年引起浙江省流感流行的主要因素.
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分子生物学方法在儿童流行性感冒监测中的应用
目的建立一种能够快速、特异、有效地直接从临床标本中检测流行性感冒(流感)病毒并进行病毒型和亚型鉴别的方法,同时了解近年来北京地区A3型流感病毒血凝素重链(HA1)区基因的变异特点.方法根据编码A、B型流感病毒膜蛋白M基因的核苷酸序列设计两对引物,用于同一逆转录(RT)-PCR反应中(多重RT-PCR),根据A、B型毒株扩增产物的大小(分别为506 bp和261 bp)鉴别A、B型流感病毒.另根据编码A1和A3型流感病毒糖蛋白HA基因的核苷酸序列设计两对引物,与B型M基因引物用于同一RT-PCR反应中,可区分A1、A3或B型流感病毒(扩增产物分别为944 bp、1 072 bp和261 bp).为提高检测临床标本的敏感性,针对A1和A3型病毒HA基因和B型病毒M基因又设计了3对引物作为外侧引物,进行巢式-PCR反应.根据第二次PCR的扩增产物在1.2%的琼脂糖凝胶电泳中的大小即可确定型别.经PCR扩增1996～2002年间分离的北京地区A3型流感病毒株HA1区基因,测序并进行序列分析.结果用上述多重RT-PCR鉴定流感病毒分离株156株,与血凝抑制试验阳性符合率为100%.用多重巢式-PCR检测92份已经病毒分离确定为流感的儿科临床呼吸道标本,与病毒分离和血凝抑制试验阳性符合率分别为76.9%(A1型)、57.1%(A3型)、86.5%(B型).对5株1996～2002年间A3型分离株HA1区基因序列分析结果显示,不同年份的分离株HA1区基因具有较高的核苷酸和氨基酸同源性,而且年份越近的毒株之间同源性越高.结论多重RT-PCR和巢式-PCR可同时检测不同型别的流感病毒,并可直接对临床标本进行检测,为流感监测提供更加快速的新方法.北京地区A3型流感病毒分离株HA1区基因持续不断地发生点突变,糖基化位点不断增多,可能是导致其抗原漂移的原因.
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