细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
细胞凋亡与消化系肿瘤
1细胞凋亡概述细胞凋亡是指细胞在一定条件下，受自身基因调控，自行结束生命活动的过程，也是细胞衰老死亡的一种主动过程，因其发生受基因的调控并按一定的程序进行，故又称为细胞程序性死亡(programmed cell death, PCD)。
-
树突状细胞与恶性血液病的免疫治疗
树突状细胞(dendritic cell, DC)是目前发现的功能强的抗原递呈细胞(antigen-presenting cells,APC),其对肿瘤的免疫治疗是现今肿瘤和免疫学研究的热点和重点。有关DC免疫治疗的基础研究较多，而对其临床应用的研究较少。
-
Ig融合蛋白在配体研究中的应用
免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig)融合蛋白是指在基因水平上，将目的蛋白基因同Ig部分片段基因相连，并在真核或原核细胞中表达具有上述2部分结构域的重组蛋白。
-
细胞工程技术在肿瘤免疫治疗药物中的现状和应用
细胞工程是生物工程的一个重要组成部分，近年取得了极大发展，已被广泛应用于医药、畜牧业和环境保护等许多领域，取得了较好的社会效益和经济效益。
-
温育温度对ELISA一步法检测HBsAg的影响
目前大多数实验室对HBsAg检测的质量控制仅停留在阴、阳对照及质控物的结果上，而忽略了其它很多问题，如温育温度、时间、加样、洗板等。其中温度是ELISA实验的重要影响因素之一，下面讨论在相同温育时间内不同温度对HBsAg结果的影响，以阐明全面质量控制的重要性。
-
哇巴因抗体Iodogen法标记125I及其应用
自从1775年，英国人 Villian Withering 应用毛地黄(foxglove)的提取物治疗充血性心衰以来，心脏糖苷(包括：地高辛、哇巴因和其它毛地黄样化物质)已被用作治疗心力衰竭和某些心律失常。1991年，Hamlyn等[1]发现，从血浆中纯化的内源性类洋地黄物质(EDLS)与哇巴因无区别，并通过监测非胃肠途径给予营养1 wk的人、牛和鼠3种动物证实，动物血液中ouabain是内源性的，是新发现的一种类固醇激素。EDLS不仅存在于正常血液中，在许多疾病中也有病理变化，尤其在高血压的发生。
-
流式细胞术在巨细胞病毒感染诊断中的应用
巨细胞病毒(cytomegalovirus, CMV)感染是器官移植受者、AIDS患者和其它严重免疫抑制患者的常见并发症之一，也是优生优育监测的重要指标〔1〕。CMV早期即刻抗原(immediate early antigen IEA)是GMV感染的客观依据之一，其检测方法主要有离心培养法(centrifuged culture)〔2〕和免疫组织化学技术等。
-
梅毒螺旋体 TpsAg-1抗原特性分析
梅毒是由梅毒螺旋体(Treponema pallidum)感染所致的疾病，据估计世界上每年约有200万新感染的病例[1]。近年来，随着对外开放和旅游事业的发展，在许多城市又出现了梅毒患者，而且有逐年增多的趋势。因此，加强对梅毒螺旋体的研究具有必要性。本文中，我们采用SDS-PAGE、免疫荧光技术及免疫印迹技术，对梅毒螺旋体Tp-sAg-1抗原进行了特异性研究。
-
影响DNA测序的因素及解决方法
全自动DNA测序以其快速、准确和读序长等优点得到广泛应用。美国PE公司373A型DNA测序仪以其模板用量小、测序长度长和无同位素污染等特点应用多。我室于1995年引进该仪器，仪器专管共用，为全校测序数千份样品，测序成功率达90％。其中影响测序成败的因素很多，我们对其主要因素进行了综合比较分析，提出了一些可行的解决方法。
-
离子交换色谱一步法纯化Ⅱ型胶原蛋白
类风湿性关节炎(RA)是常见的危害性和致残率极大的自身免疫性疾病。近年来的研究提示80％～90％均为Ⅱ型胶原的软骨胶原蛋白所诱发的自身免疫可能是RA发病的重要因素之一。在口服耐受对动物关节炎模型治疗作用的研究中发现，口服Ⅱ型胶原蛋白(CⅡ)可使动物关节炎症明显减轻，病程缩短。国外已有学者将用鸡肋软骨提纯的CⅡ用于活动期RA患者的治疗，并取得了较好疗效[1]。由于鸡肋软骨来源较少，我们以牛软骨为原料，采用酶消化法[2]提取了CⅡ，并对其进行了纯化和鉴定。
-
蔗糖-SDS-PAGE测定多肽的相对分子质量
SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是测定蛋白质相对分子质量(Mr)常用的方法，尤其在低Mr蛋白质(10 000～100 000)测定中得到广泛应用；而对小分子多肽Mr的测定目前主要采用甘油SDS-PAGE法〔1,2〕和脲SDS-PAGE法〔3〕。这些方法操作繁琐、结果也不够理想。我们在多次实验的基础上，建立了用蔗糖-SDS-PAGE两层胶系统测定多肽(Mr为2 500～17 000)的新方法。
-
广东省免疫学检验室间质评与室内质控总结
广东省临床检验中心于1989年12月在全省开展乙肝病毒标志物检验室间质评，12年中增加了丙肝抗体、AFP和梅毒血清学检测项目，同时要求实验室回报室内质控结果。
-
两种检测Ⅳ型胶原蛋白ELISA法相关分析
Ⅳ型胶原蛋白(COL-Ⅳ)是基膜的重要组分，在正常人血清中含量极微，大约100 μg/L左右，而当患者有肝脏疾病或/和并发生纤维化时，血清COLⅣ的水平有不同程度升高，且在许多情况下与病程和病情相平行。因此，检测血清COL-Ⅳ的水平，不仅可辅助诊断肝脏是否纤维化，也可对病情、预后及疗效进行评估〔1〕。
-
PCR-SSCP银染方法的改进
PCR产物的单链构象多态性(PCR-SSCP)分析法，是近年来发展的一种检测DNA单碱基变异的新方法。自1989年日本学者Orita等[1]首先利用非变性凝胶进行DNA单链构象多态性分析以后，该方法在DNA序列的多态性分析、临床遗传基因诊断，以及肿瘤基因和抑瘤基因点突变的分析中得到了广泛应用。尤其是与PCR技术相结合，使分析过程更为灵敏、快速和准确[2,3]。
-
ABO血型天然凝集素来源之探讨
1900年，兰德斯坦纳(Landsteiner)首次报道人类血细胞存在ABO血型抗原糸统。这一发现克服了由于不同血型间输血引起的致命后果，极大地推动了临床输血的研究，逐渐使输血成为重要的医学治疗方法和急救医学必不可少的抢救手段，因此成为人类医学史上的一个里程碑。从发现红细胞上ABO血型系统近百年的时间里，人类已经证实人类红细胞上有26个血型糸统，抗原数达417种之多。尽管在输血领域里只进行ABO血型的检查还不够，但仍以ABO血型的糸统普遍、重要，因仅人类均存在ABO血型抗原糸统[1,2,5,6]。
-
影响HIV-1整合酶活性因素的探讨
目的探讨HIV-1整合酶活性的影响因素，优化其活性测定条件。方法以同位素标记的寡核苷酸链为底物，体外模拟HIV-1病毒DNA整合过程，检测HIV-1整合酶的3＇端加工、链转移和去整合活性，并考察HIV-1整合酶活性测定中，二价离子、酸碱度、温度和时间等的影响。结果 Mn2+对整合酶活性的辅助作用，明显强于Mg2+，而3＇端加工反应对二价离子的依赖性较小。酸碱度对各种反应的影响较大，温度和时间影响较小。结论整合酶活性检测的佳反应条件为pH7.0～7.5，37℃，15mmol/L Mn2+及反应时间1 h。
-
血清裂解质粒DNA能力的初步研究
1989年，Paul等[1,2]在哮喘患者体内发现能水解肠血管活性肽(vasoactive intestinal polypeptide,VIP)的自身抗体，而后又相继分别在SLE患者血清[3]及肝炎[4]、AIDS患者[5]体内发现了具有催化裂解活性的自身抗体。这些具有催化裂解活性的抗体可催化蛋白质、多肽、DNA和RNA等裂解，故简称为裂解抗体(catalytic antibodies),它们的底物是多种多样的。
-
恶性骨肿瘤患者T细胞亚群、红细胞免疫功能与Ag-NORs定量分析的关系及临床意义
目的定量分析恶性骨肿瘤患者T细胞亚群、红细胞免疫功能及核仁组成区相关嗜银蛋白(Ag-NORs)的关系及其临床意义。方法采用单克隆抗体直接免疫荧光法、红细胞花环试验及肿瘤免疫图像分析方法，分别对23例骨肿瘤患者和20例正常人(对照组)的外周血T细胞亚群、红细胞免疫功能及核仁银染区面积/细胞核面积比值(I.S％)进行分析。结果患者CD3+，CD4+T细胞及CD4+/CD8+比值以及E-C3bRR和I.S％值均明显降低，CD8+及E-ICR明显升高，与对照组相比较差异显著(P＜0.01)。结论上述结果显示，恶性骨肿瘤患者免疫功能低下；Ag-NORs的检测与T细胞亚群、红细胞免疫功能的检测，能较全面地反映肿瘤患者的免疫功能状态，并可指导临床治疗。
-
重组单链Fv段融合TNFα(mscFv25-TNFα)的导向治疗
目的希望能得到具有临床应用价值的抗肝癌重组单链Fv段-免疫毒素。方法将抗肝癌重组单链Fv段-免疫毒素(mscFv25-TNFα)在大肠杆菌JM109中以IPTG诱导进行表达。将包涵体形式的表达产物溶解和折叠后，以GST亲合层析色谱纯化。用间接免疫荧光染色测定纯化后目的蛋白的活性，MTT试验鉴定mscFv25-TNFα对靶细胞SMMC-7721的杀伤活性。通过对荷肝癌(SMMC-7721)裸鼠进行体内初步抑瘤实验，检测mscFv25-TNFα的导向治疗的效果。结果纯化的目的蛋白间接免疫荧光染色呈阳性。MTT实验提示，在放线菌素D存在的情况下，体外mscFv25-TNFα对靶细胞SMMC-7721具有细胞毒作用。实验组14只裸鼠中4只的移植瘤的生长完全得到抑制，而TNFα对照组无完缓解。结论间接免疫荧光染色表明，mscFv25-TNFα的特异性和亲和力与亲本抗体HAb25相比较没有明显下降。荷肝癌裸鼠体内的抑瘤实验显示，mscFv25-TNFα对荷肝癌裸鼠体内直径2～4mm左右的肿瘤具有一定的杀伤作用，初步证明mscFv25-TNFα具有一定的临床应用潜力。
-
自身免疫性肝炎与自身抗体的临床探讨
自身免疫肝炎(AIH)是1992年在英国召开的消化系统国际会议上由自身免疫肝炎组的专家们提出，用以代替自身免疫活动性肝炎的一个自身免疫病[1]。以前，AIH未曾被注意被诊断为慢性活动性肝炎，乙型肝炎病毒的出现使人们认识到慢性活动性肝炎的多因性和异质性。病毒、药物、免疫异常都是AIH的病因。随着自身抗体和淋巴细胞介导对肝细胞的细胞毒反应在病毒标记阴性的慢性活动性肝炎的出现。可以说明以往的慢性活动性肝炎中有一部分是AIH。
-
抗meso-四(α,α,α,α-o-苯乙酰苯)卟啉的单克隆抗体制备
抗体酶是将抗体赋予酶的活力。自1986年，Schulz〔1〕和Lerner〔2〕首先报道具有水解酯键的抗体酶以来，抗体酶已成为酶工程研究领域新的生长点。近年来，国际上对抗体酶的研究已取得较大的进展。
-
P16蛋白表达与垂体腺瘤侵袭和复发的关系
目的探讨P16蛋白表达与垂体腺瘤侵袭及复发的关系。方法应用免疫组化染色技术检测57例垂体腺瘤中P16蛋白的表达水平，并对患者进行了5年随访观察。结果垂体腺瘤组织中P16蛋白表达的阳性率为31.6％；侵袭性组中该蛋白表达的阳性率显著低于非侵袭性组(P＜0.01)。复发组11例未见该蛋白表达。结论 P16蛋白的表达阳性率与垂体腺瘤激素分泌功能无明显的相关性，但其表达水平可作为临床评价垂体腺瘤的侵袭性和预测患者复发的指标。
-
Connexin43基因在宫颈癌细胞系HeLa中的瞬时表达
目的探讨细胞间隙连接基因connexin43在宫颈癌细胞系HeLa中的表达以及对该细胞生长的影响。方法应用流式细胞术(FCM)研究connexin43基因在HeLa细胞中的表达，以及对生长抑制及细胞增殖周期的影响。结果connexin43基因表达阳性的细胞计数率由0.7％上升至26.5％，细胞生长明显受抑。结论 connexin43基因可能是潜在的肿瘤抑制基因。
-
骨肉瘤患者血清Zn、Cu、Fe水平及Mф吞噬功能的检测及意义
巨噬细胞(Mф)为抗肿瘤免疫的主要效应细胞，可通过吞噬及ADCC效应，参与杀伤肿瘤细胞。微量元素可通过其在体内的含量及元素氧化状态的变化，存在形式的不同，对肿瘤的发生发展产生影响[1]。近年，有关微量元素与免疫的关系报道较少，因此，我们测定了52例骨肉瘤患者血清中微量元素锌(Zn)，铜(Cu)、和铁(Fe)的含量，以及它们对手术切除肿瘤前、后患者Mф吞噬功能的影响。
-
人乳头状瘤病毒感染与卵巢癌关系的研究
目的初步探讨人乳头状瘤病毒(human papillomavirus，HPV)16型和18型的感染与卵巢癌的关系。方法应用聚合酶链反应(PCR)检测了56例卵巢癌、30例卵巢上皮性良性肿瘤和30例正常卵巢组织内的HPV16 DNA和HPV18 DNA。结果 56例卵巢癌中，26例(46.4％)HPV16 DNA的表达呈阳性，20例(35.7％)HPV18 DNA的表达呈阳性，二者相比较无显著性差异(x2=2.12，P＞0.05)，但二者的感染均与卵巢癌的组织学分级有关(x2=4.70，4.79，P均＜0.05)，与临床分期及组织学类型无关(x2=0.004，0.750，P均＞0.05)。良性卵巢肿瘤和正常卵巢组织中，HPV16 DNA和HPV18 DNA的表达均为阴性。结论HPV16和18型感染可能与卵巢癌的发生有关。
-
含TK自杀基因真核表达载体的构建和鉴定
基因治疗恶性肿瘤是当前国内外研究的热点之一，其中以药物敏感基因治疗系统引人注目。药物敏感基因(drug sensitive gene)又称为“自杀基因”(suicide gene)，可以编码某些病毒或细菌的酶类，从而催化对真核细胞无毒或低毒的药物前体转变为具有毒性的代谢产物，干扰细胞DNA的合成，选择性地杀死快速增殖的肿瘤细胞，而对正常组织无毒、副作用。
-
胃癌相关抗原MG7-Ag免疫PCR检测系统有关影响因素的分析
目的应用免疫PCR技术检测胃癌相关抗原MG7-Ag时，对影响该系统的相关因素进行分析比较。方法以ELISA法与免疫PCR同时检测胃癌抗原MGAg，以比较这两种方法检出抗原的敏感性和特异性。同时检测抗体浓度、反应时间、链亲和素的浓度，以及DNA拷贝数对免疫PCR系统的影响。结果免疫PCR法检出抗原的敏感性远远高于ELISA法，显著提高了胃癌患者外周血中MGAg抗原的检出率。与ELISA法相比较，相应的抗体浓度、反应时间、链亲和素的浓度不会导致非特异性条带的出现。同时确定DNA的适拷贝数为10-3ng，即对系统非特异性的影响小。结论免疫PCR方法检测抗原的敏感性优于常规ELISA法，特异性较好，可成为检测患者外周血中肿瘤抗原的有效手段。
-
移植前诱导抗独特型抗体对小鼠皮肤排斥反应的抑制作用
目的探讨抗独特型抗体诱导对异品系小鼠皮肤移植排斥反应的影响。方法以C57BL/6小鼠脾细胞免疫Balb/c小鼠制备抗同种异品系抗体(Ab1)。将Ab1与KLH交联后，免疫Balb/c小鼠诱导产生抗独特型多克隆抗体(Ab2)，并以之为受体，观察Ab2对小鼠皮肤移植排斥反应的影响。结果 Ab1交联KLH加弗氏佐剂免疫可有效地诱导抗独特型抗体(Ab2)产生。与对照组相比较，Ab2诱导组小鼠移植物存活时间明显延长。结论移植前在受体体内诱导产生以移植物抗原为模拟抗原的抗独特型抗体，可对移植排斥反应产生有效的抑制作用。
-
TGF-β1对人肾间质成纤维细胞PAI-1表达的作用
目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在肾间质纤维化中的作用机理。方法体外分离培养人肾间质成纤维细胞，应用不同浓度(0,2,5,10ug/L)的TGF-β1培养刺激24 h，和以5 μg/L TGF-β1作用不同时间(0,6,12,24,48 h)，以逆转录-PCR技术检测成纤维细胞表达纤溶酶原激活剂的抑制物(PAI-1)mRNA的变化。结果TGF-β1在0～10 μg/L浓度范围可促进肾间质成纤维细胞PAI-1 mRNA的表达，且呈剂量效应相关性；在0～48 h内，5 μg/LTGF-β1刺激后PAI-1 mRNA的表达呈时间效应相关性。结论 TGF-β1可刺激PAI-1表达，参与肾纤维化中基质的合成和降解过程，从而在肾间质纤维化过程中发挥作用。
-
人MAdCAM-1胞外区基因在原核系统的表达及重组蛋白纯化
目的制备高纯度的重组人MAdCAM-1蛋白。方法采用PCR技术从pUC21/hMAdCAM-1质粒上，选择性扩增编码成熟MAdCAM-1胞外区两个Ig域的基因片段。将其克隆至pQE30载体中，转化大肠杆菌后，以IPTG诱导表达，产物经Ni-NTA亲和层析纯化。结果诱导表达出相对分子质量(Mr)约29 000的融合蛋白。薄层凝胶扫描显示，其表达量占菌体总蛋白质的50％左右。经亲和层析纯化得到高纯度的蛋白产品。结论获得了重组人MAdCAM-1胞外区蛋白，为后续功能研究及其单抗研制奠定了基础。
-
日本脑炎病毒内影像组抗独特型单克隆抗体的制备及初步鉴定
目的制备具有内影像作用的分泌日本脑炎病毒(JEV)抗独特型单克隆抗体(AId mAb)杂交瘤细胞系。方法以传统免疫法和硝酸纤维素膜(NC膜)皮下包埋免疫法，用具有高中和活性的抗JEV mAb 2H4和2F2分别免疫Balb/c小鼠，按常规方法融合，经多种ELISA、表面等离子共振和动物免疫实验筛选并鉴定具有内影像作用的AId mAb。结果获得了3株可分泌AId mAb的杂交瘤细胞系。结论所获AId mAb均能模拟JEV抗原，为JEV受体的分离、纯化提供了条件。
-
神经酰胺在γδ+T细胞活化及活化诱导的细胞死亡信号传导过程中的作用
目的研究神经酰胺在γδ+T细胞活化及活化诱导的细胞死亡信号传导过程中的作用。方法用结核杆菌耐热性多肽抗原(Mtb)刺激正常人PBMC，并用磁珠阳性分选法获得γδ+T细胞。通过MTT试验观察Mtb、神经酰胺、鞘磷脂酶以及Fumonisin B1对γδ+T细胞的活化作用；FACS检测其对γδ+T细胞活化诱导的细胞死亡作用。结果Mtb刺激获得的γδ+T细胞可达73％，磁珠分选后可高达98％；高浓度Mtb、神经酰胺及鞘磷脂酶能抑制γδ+T细胞的活化增殖，而出现活化诱导的细胞死亡，Fumonisin B1则对γδ+T细胞的活化增殖及活化诱导的细胞死亡无明显影响。结论 Mtb可有效地调节γδ+T细胞活化及活化诱导的细胞死亡，水解鞘磷脂产生的神经酰胺参与了γδ+T细胞活化及活化诱导的细胞死亡信号传导。
-
单纯疱疹病毒囊膜糖蛋白模拟短肽的筛选
目的获得可替代单纯疱疹病毒(HSV)囊膜糖蛋白作为该病毒亚单位疫苗免疫原的小片段短肽。方法将1株具有强动物保护活性的抗HSV糖蛋白C型共同性单克隆抗体(mAb)1A12生物素化后，淘筛噬菌体随机12肽库，经4轮筛选后进行ELISA检测。随机挑取14个克隆DNA测序，得到保守序列(Motif)为-SG(L)RHII-，并进行了ELISA阻断实验。结果携有此短肽的噬菌体可与mAb 1A12特异结合，并可部分阻断抗体与HSV囊膜抗原的反应。结论所筛选到的保守序列可模拟mAb 1A12针对的抗原表位，可能是HSV的替代抗原。这一研究方法有望使短肽替代庞大的糖蛋白全长氨基酸序列，为研制更有效及更广谱的基因工程疫苗提供依据，也使研制基于抗原表位水平的特异诊断试剂成为可能。
-
人肝癌细胞系在不同免疫状态小鼠体内生长特性的研究
目的观察3种不同免疫状态小鼠对人类肝癌细胞系(HHCC)移植瘤的影响。方法将培养的HHCC以不同途径接种于3种不同免疫状态的小鼠中，观察成瘤情况，并用流式细胞仪测定CD4+和CD8+T的细胞百分率及CD4+/CD8+T细胞的比例。结果肿瘤在裸鼠中逐渐长大，Balb/c小鼠不成瘤，CBA/N小鼠随接种瘤细胞数量和途径的不同有不同的表现；不同组别的小鼠中CD4+T细胞的百分率都下降，CD8+T细胞变化不大，CD4+/CD8+T细胞比值均下降。结论小鼠的免疫状态对移植的HHCC的生长具有明显的影响。接种部位和接种的瘤细胞数的不同对成瘤与否也有一定的影响。
-
p53基因表达在辐射诱导骨髓细胞凋亡和修复中作用研究
目的探讨p53基因表达在辐射诱导的骨髓细胞凋亡和修复中的改变与作用。方法经60Coγ射线以5.5Gy全身照射78只LACA小鼠。于照后4 wk内分批活杀，将骨髓分别进行HE染色和超薄切片，并进行P53蛋白LSAB免疫组化染色和突变型p53(mtp53) cDNA-DNA原位杂交。结果照射后小鼠骨髓出现明显损伤及损伤后重建现象；照射后6 h，造血细胞凋亡显著，并出现凋亡的典型改变；P53蛋白于造血细胞凋亡及修复时均明显增多，而mtp53DNA仅于修复期呈阳性。结论 p53基因表达参与了辐射诱导的骨髓细胞凋亡和凋亡后的修复过程。
-
全长人穿孔素cDNA的克隆与3'端部分表达
目的克隆人穿孔素(perforin, PFP)基因并选择性地体外表达抗原特异性C端肽段。方法利用RT-PCR技术，从人肝总RNA中克隆全长PFP cDNA并进行序列测定分析。将编码PFP C端(hPFP-C)125个氨基酸的cDNA片段亚克隆，并插入载体pGEX-2T中用IPTG诱导融合蛋白表达。目的肽段采用谷胱甘肽琼脂糖亲和层析和凝血酶酶切纯化，并用溶血法测定其生物学活性。结果克隆的全长人PFP cDNA与已发表的PFP基因序列相比较，有4个碱基不同，导致3个氨基酸残基改变。重组基因在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达的融合蛋白的相对分子质量(Mr)为40 000，纯化后的hPFP-C肽段Mr为14 000。重组hPFP-C肽段与兔红细胞共育，呈现钙依赖的溶血活性。结论人PFP基因可能存在多态性，其C端肽段亦有溶解兔红细胞的活性。
-
抗人血小板/T细胞活化抗原1(PTA1)不同表位单克隆抗体的制备及鉴定
目的研制一套可识别PTA1分子不同功能性表位的单克隆抗体(mAb)。方法采用亲和层析法从血小板裂解液中纯化的天然PTA1分子免疫Balb/c小鼠，以间接ELISA筛选阳性杂交瘤，并以PTA1 cDNA转染COS7细胞，进行间接免疫荧光染色和流式细胞术鉴定mAb的特异性。竞争结合试验确定mAb识别PTA1分子的表位。纯化的PTA1经SDS-PAGE后，转移到PVDF膜，确定mAb是否可用于Western blot。结果共获得7株可稳定分泌mAb的杂交瘤细胞株，分别命名为FMU1，FMU2，FMU3，FMU4，FMU5，FMU6和FMU7。所有mAb与纯化天然PTA1和PTA1/Ig融合蛋白均有良好的免疫反应性，均可识别PTA1 cDNA转染的COS7细胞。流式细胞仪检测阳性荧光峰型与PTA1阳性对照Leo Al mAb的荧光峰型相似；7株mAb识别PTA1分子的5个不同表位；FMU1，FMU2，FMU4，FMU5，FMU6和FMU7可应用于Western blot。结论成功地制备7株抗PTA1分子的特异性mAb，这些mAb可分别识别PTA1的5个表位，为PTA1分子结构与功能的研究提供了新的手段。
-
凋亡调节基因bcl-2及p53在早期胚胎中的表达
目的探讨两种重要的细胞凋亡调控基因bcl-2及p53在着床前小鼠胚胎中的表达及其其对着床前胚胎发育的作用。方法建立超排卵小鼠早孕的模型，获取着床前胚胎，采用免疫组化LSAB法，检测bcl-2及p53蛋白。结果在小鼠2细胞、4细胞、8细胞和桑葚胚中，均检测到bcl-2和p53蛋白。结论 bcl-2和p53凋亡调控基因在小鼠着床前胚胎的表达可能与细胞碎片形成有关，对于维护胚胎正常发育，促进发育异常的胚胎细胞发生凋亡，从而提高胚胎质量有重要意义。体内增殖与凋亡处于一个动态平衡，共同调节胚胎发育。
-
金属螯合亲和层析法纯化人源抗TNF-α重链可变区蛋白
近年采用基因工程技术进行抗体基因的筛选、改造，获得了大量有用的抗体基因，但如何使之适当地表达和分泌，并获得有效的纯化已成为一个急待解决的问题。就目前研究的进展来看，抗体的表达和分泌不只局限于淋巴细胞和骨髓瘤细胞，在酵母、哺乳动物的非淋巴细胞和大肠杆菌乃至植物细胞中，都能获得抗体的功能性表达、分泌和组装[1-5]。大肠杆菌具有经济、简便和容易操作等特点，将其表达的抗体片段进行有效地纯化，是得到有实用价值制品的重要环节。本文使用表达质粒pQE30，对已获得的人源抗TNFα抗体基因片段进行了高效表达，并用Ni-NTA金属螯合法对表达的抗体片段进行了纯化。
-
用EBV转化的大肠癌患者B细胞构建噬菌体抗体库
目的构建全人源化的噬菌体抗体库。方法采用EBV转化技术，ELISA技术，PCR技术，噬菌体表面呈现技术。结果 EBV转化8例大肠癌患者PBMC，其中七例有抗大肠癌抗体产生，多次PCR扩增出5种VH(γ,μ)和9种VL(к,λ)基因，经简并组合成15种ScFv基因。在体外与表达载体fUSE5连接，电导入大肠杆菌MC1061，经四环素抗性筛选，得到库容为1.1×107的初级噬菌体抗体库。全长ScFv基因的插入率为70％。结论应用EBV转化技术联合噬菌体抗体库技术，制备全人源化的抗肿瘤单链抗体(ScFv)，这一策略是完全可行的。
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
