细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
G蛋白偶联受体37(GPR37)上调促进人胶质瘤U251细胞的增殖
目的 探讨G蛋白偶联受体37(GPR37)表达上调对人胶质瘤U251细胞增殖的影响.方法 构建携带GPR37基因的重组质粒,采用脂质体转染法在U251细胞上调表达GPR37,采用实时荧光定量PCR检测GPR37 mRNA水平,Western blot法检测GPR37、磷酸化的蛋白激酶B[p-AKT(Ser473)]蛋白水平,CCK-8法检测U251细胞增殖情况,流式细胞术检测U251细胞的细胞周期.结果 与阴性对照组相比,过表达GPR37组细胞的GPR37 mRNA和蛋白水平显著提高.上调细胞的GPR37水平后,明显增加U251细胞的增殖、G1/G0期细胞比例降低,S期和G2期细胞比例升高,并增加p-AKT(Ser473)蛋白水平.结论 上调U251细胞的GPR37水平可加速U251细胞周期进程、活化AKT途径并促进细胞增殖.
-
D-半乳糖刺激小鼠睾丸TM4支持细胞分泌功能的衰退及其机制
目的 采用D-半乳糖(D-Gal)刺激小鼠TM4睾丸支持细胞,建立衰老所致TM4细胞分泌功能衰退模型.方法 将小鼠TM4睾丸支持细胞分为正常对照组、(25、50、100、150、200、250) mmol/L D-Gal刺激组.MTT法检测TM4细胞活力、流式细胞术检测细胞周期、光镜观察细胞形态、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察衰老细胞百分率;反转录PCR检测P21、P16、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和干细胞因子(SCF)的mRNA水平;Western blot法检测GDNF、SCF、红系2样核因子2(nuclear factor,erythroid 2 like 2,NRF2)、血红素加氧酶1(HO-1)、醌氧化还原酶1(NQO-1)的蛋白水平.结果 与正常对照组比较,D-Gal刺激组细胞活力显著下降;处于G1期的细胞比例增高、S期细胞比例降低,细胞阻滞于G0/G1期;SA-β-Gal染色阳性率明显增多,衰老基因P21 mRNA表达上调,GDNF和SCF mRNA及蛋白水平均显著下调;氧化应激相关蛋白NRF2、HO-1和NQO-1的蛋白水平显著降低.结论 成功建立D-Gal刺激的TM4睾丸支持细胞分泌功能衰退模型,衰老机制可能与下调NRF2信号通路有关.
-
化学发光ELISA检测可溶型CD100(sCD100)方法的建立及其应用
目的 建立可溶型CD100 (sCD100)的微孔板式化学发光检测试剂盒,并初步用于临床脑脊液标本的检测.方法 利用空军军医大学免疫学教研室制备的2株抗CD100单克隆抗体(mAb),在夹心ELISA的基础上,优化实验条件,建立sCD100化学发光免疫检测方法;对该方法的灵敏度、精密度进行评价;并检测了18例脑脊液标本的sCD100水平.结果 化学发光法检测sCD100在0.098 ng/mL～ 12.5 ng/mL范围内线性关系良好,检测敏感性能达到0.12 ng/mL.批内变异系数为3.8％ ～6.6％,批间变异率为6.2％～14.1％.用该方法检测病毒性脑炎患者脑脊液,平均sCD100水平显著升高,2例患者标本分别高出正常均值9.4及13.8倍.结论 成功建立了快速、敏感和稳定的sCD100化学发光检测法,可用于脑脊液标本中微量sCD100的定量分析.
-
Polo样激酶1(PLK1)的敲低及其对宫颈癌HeLa细胞生长的抑制作用
目的 研究敲低Polo样激酶1(PLK1)后对宫颈癌HeLa细胞生长的作用.方法 流式细胞术评测LAH4-L1载体对小干扰绿色荧光蛋白基因(siGFP)的递送效率;反转录PCR检测PLK1 mRNA水平,Western blot法检测PLK1蛋白水平;敲低PLK1水平后,采用CCK-8法检测HeLa细胞活性和生长抑制情况.结果 LAH4-L1-siPLK1纳米复合物可下调HeLa细胞PLK1约70％,并降低PLK1蛋白的表达,敲低PLK1后,可明显抑制HeLa细胞增殖.另外,LAH4-L1载体的基因递送效率能够稳定维持在较高水平.结论 敲低HeLa细胞PLK1抑制癌细胞生长,LAH4-L1是一个较好的基因递送载体.
-
高三尖杉酯碱阻断mTOR信号通路抑制HT29人结直肠肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡
目的 探讨高三尖杉酯碱(HHT)对HT29人结直肠肿瘤细胞增殖和凋亡调控的分子机制.方法 用(0、0.0078125、0.015625、0.03125、0.0625、0.125、0.25、0.5、1、2、4、8)μg/mL HHT分别处理HT29细胞24、48、72 h.CCK-8法检测HT29细胞的增殖,集落形成实验检测细胞的集落形成能力;Hoechst33258染色观察染色质凝集情况,流式细胞术检测细胞凋亡;实时定量PCR检测BAX、Bcl2、胱天蛋白酶3(caspase-3)、caspase-9、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、丙酮酸脱氢酶激酶(PDK1)、蛋白激酶B(AKT)、雷帕霉素靶蛋白调节相关蛋白(raptor)、雷帕霉素不敏感的伴侣蛋白(rictor)的mRNA水平;Western blot法检测BAX、Bcl2、胱天蛋白酶3前体(pro-caspase-3)、裂解型caspase-3(c-caspase-3)、pro-caspase-9、裂解型caspase-9(c-caspase-9)、多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、裂解型PARP(c-PARP)、mTOR、raptor、rictor、PI3K、PDK1、AKT、p-AKT的蛋白水平.结果 与对照组相比,HHT能抑制HT29细胞增殖,诱导细胞核破裂,染色质凝聚,凋亡小体形成;同时,HHT处理能够提高HT29细胞中BAX/Bcl2比值、caspase-3、caspase-9、raptor的mRNA水平,降低PI3K、AKT、rictor的mRNA水平;并上调HT29细胞中c-caspase-3、c-caspase-9、c-PARP、BAX、raptor蛋白水平,下调pro-caspase-3、pro-caspase-9、PARP、PDK、PDK1、AKT、mTOR、rictor蛋白水平.结论 HHT能够通过阻断mTOR信号通路,进而抑制HT29人结直肠肿瘤细胞增殖并诱导其凋亡.
-
CD226基因敲除小鼠血小板的结构异常与功能障碍
目的 研究共刺激分子CD226对小鼠血小板功能的调控作用.方法 取40周龄老年CD226基因敲除(CD226KO)小鼠为实验组,同龄野生型(WT) C57 BL/6小鼠为对照组.取尾静脉血进行血小板计数,剪取小鼠尾尖,检测出血时间;分离小鼠血小板,透射电镜观察血小板超微结构;建立三氯化铁(FeCl3)诱导的小鼠颈动脉血栓模型,观察CD226KO小鼠与WT小鼠血栓形成的差异.获取人血小板蛋白,通过免疫沉淀和质谱分析,获得与血小板CD226相互作用蛋白的信息.结果 与同龄WT小鼠相比,老年CD226KO小鼠血小板数量明显减少,出血时间明显延长.CD226KO小鼠血小板内质网形态发生明显弯曲皱缩变形.在FeCl3诱导的小鼠血栓模型中,CD226KO小鼠血栓形成时间明显延长,血栓稳定性显著下降.质谱检测结果提示,人血小板中CD226与脑源性神经生长因子(BDNF)、脂肪酸结合蛋白5(FABP5)、载脂蛋白1(ApoA1)等蛋白具有相互作用.结论 CD226KO小鼠血小板功能障碍,CD226参与血小板生物学活性的发挥.
-
小鼠抗人B7-1(CD80)单克隆抗体的制备及其对肿瘤细胞的抑制作用
目的 制备小鼠抗人B7-1 (CD80)单克隆抗体(mAb),研究其对天然表达B7-1的恶性肿瘤细胞体外生长和迁移的影响.方法 以人B7-1基因转染的L929-B7-1细胞免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术制备mAb,并通过流式细胞术检测mAb对肿瘤细胞膜型B7-1的识别.以天然表达B7-1的Daudi细胞、Raji细胞及8266细胞为观察对象,分别加入(5、10、20、40) μg/mL B7-1 mAb处理,采用噻唑蓝(MTT)法检测mAb对肿瘤细胞体外增殖的影响,TranswellTM法分析mAb对肿瘤细胞体外迁移的影响,流式细胞术分析mAb对肿瘤细胞凋亡的诱导作用.结果 成功制备1株能稳定分泌小鼠抗人B7-1 mAb的杂交瘤,命名为5G10.经流式细胞术分析,该抗体与Daudi、Raji、8266、U266、BEL-7402及MCF-7肿瘤细胞的阳性结合率分别为(96.30 ±2.12)％、(95.70±1.79)％、(96.80±2.48)％、(23.20 ±2.35)％、(1.68±0.35)％、(0.55±0.04)％;与对照组相比,20μg/mL 5G10 mAb明显抑制Daudi细胞、Raji细胞及8266细胞的增殖,肿瘤细胞迁移率明显降低,细胞凋亡率明显增加.结论 小鼠抗人B7-1 mAb能特异性识别和结合不同肿瘤细胞膜表面的B7-1,并能显著抑制天然表达B7-1的肿瘤细胞的体外生长、迁移并促进其凋亡.
-
重度烧伤大鼠肠道组织HMGB1和TLR4表达增强且肠道免疫功能紊乱
目的 探讨重度烧伤大鼠肠道高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)的表达及其与肠道免疫功能的关系.方法 取40只雄性SD大鼠,随机分为对照组10只、重度烧伤组30只.对照组仅麻醉,重度烧伤组大鼠背部及腹侧造成全身60％烫伤.烧伤组大鼠在伤后6、12、18 h,各取10只颈椎脱臼处死,对照组大鼠10只麻醉后即刻处死.采用Westernblot法检测肠组织中HMGB1和TLR4蛋白水平,流式细胞术测量CD3+T细胞的纯度和Th1细胞和Th2细胞亚群比率,ELISA检测肠组织匀浆γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)和IL-10含量.结果 与对照组相比,重度烧伤组伤后6、12、18 h,大鼠肠道组织中HMGB1和TLR4蛋白水平均显著高于对照组,且随着烧伤后时间的增加,蛋白水平均逐渐增加,重度烧伤组HMGB1及TLR4蛋白表达呈正相关.烧伤组伤后6、12、18 h,Th1细胞亚群比例显著增加,而Th2细胞亚群比例降低,Th1细胞/Th2细胞比值显著增加,Th1细胞比例与HMGB1及TLR4呈正相关,而Th2细胞比例与HMGB1及TLR4呈负相关.与对照组相比,重度烧伤组伤后6、12、18 h,大鼠肠道IFN-γ及IL-4水平均显著增加,而IL-10水平显著降低.且随着烧伤后时间的增加,IFN-γ及IL-4水平均逐渐增加,而IL-10水平逐渐降低.结论 大鼠重度烧伤后,肠道组织内募集HMGB1激活TLR4信号通路,进一步激活下游信号转录因子,并释放一系列炎性细胞因子引起炎症反应,从而参与大鼠Th1细胞和Th2细胞介导的免疫功能障碍.
-
IL-12有助于化疗药物处理后肿瘤患者及小鼠的细胞免疫功能重建
目的 探讨白细胞介素12(IL-12)是否能够恢复化疗药物对肿瘤患者和小鼠细胞的免疫抑制作用.方法 分离顺铂化疗前后肿瘤患者及正常人外周血单个核细胞(PBMC),在抗CD3抗体和抗CD28抗体共刺激条件下,加或不加IL-12.培养后,ELISA检测上清中γ干扰素(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平,流式细胞术检测不同亚群T细胞IFN-γ的水平.建立顺铂毒性小鼠模型,采用以上方法检测IFN-γ、TNF-α水平.结果 肿瘤患者产生的IFN-γ和TNF-α显著低于正常人;与化疗前患者相比,化疗后患者IFN-γ和TNF-α的产生明显减少,IL-12可以显著增强IFN-γ和TNF-α的产生;T细胞亚群分析的结果表明,IL-12可以恢复化疗后CD4+T细胞和CD8+T细胞中IFN-γ的水平.小鼠体内实验证明,化疗药物抑制小鼠T细胞的免疫功能,IL-12能完全恢复T细胞免疫功能.结论 化疗药物抑制肿瘤患者和小鼠细胞的免疫应答,而IL-12能够恢复化疗药物对细胞因子的抑制作用,从而对肿瘤化疗患者重建免疫功能起到非常重要的作用.
-
石蒜碱通过下调细胞周期蛋白D1表达抑制SGC-7901胃癌细胞增殖并促进其凋亡
目的 探讨石蒜碱对胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响.方法 CCK-8法检测(0、2、4、8)μnnol/L石蒜碱对SGC-7901细胞增殖的影响,确定石蒜碱的半数抑制浓度(IC50).以IC50的石蒜碱处理SGC-7901细胞48 h,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,实时荧光定量PCR检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1) mRNA水平,Western blot法检测cyclin D1蛋白水平.结果 石蒜碱能够明显抑制胃癌SGC-7901细胞增殖,且呈浓度、时间依赖关系.石蒜碱处理24、48 h,对胃癌细胞的IC50分别为(20.85±2.36) μmol/L和(13.29±1.28) μmol/L.采用13 μmol/L石蒜碱处理SGC-7901细胞48 h,可将其细胞周期阻滞在G0/G1期并促进细胞凋亡,且细胞cyclin D1 mRNA和蛋白水平明显降低.结论 石蒜碱能够抑制SGC-7901胃癌细胞增殖,诱导细胞周期阻滞在G0/G1期并促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调cyclin D1表达有关.
-
卵清蛋白致过敏性腹泻小鼠血清和胃组织中5-羟色胺系统的代谢分析
目的 探讨卵清蛋白(OVA)致过敏性腹泻小鼠5-羟色胺(5-HT)信号系统的变化.方法 7～8同龄雌性BALB/c小鼠分为模型组、色甘酸钠处理组和对照组.模型组和色甘酸钠处理组分别在0d和14 d,腹腔注射OVA I(50 μg/只).28 d后,隔天对小鼠进行口服灌胃OVAⅡ(50 mg/只)激发(共8次).色甘酸钠处理组从28 d开始,隔天(口服灌胃激发前)给予色甘酸钠(78.0 mg/kg)(共8次).OVA口服灌胃后对小鼠进行综合评分、粪便评分及测定体温变化.43 d后,处死动物.摘眼球取血离心取血清并取胃组织.ELISA检测血清OVA特异性IgE(OVA-SIgE).液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)测定血清中的5-HT及其上下游代谢产物犬尿酸(KYN)、色氨酸(TRP)、5-羟色胺酸(5-HTP)和5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)含量,利用实时定量PCR检测过敏小鼠胃组织5-HT代谢相关基因色氨酸羟化酶1(TPH1)、吲哚胺-2,3-双加氧酶1(IDO1)、单胺氧化酶A(MAO-A)、5-HT选择性再摄取转运体(SERT)及其受体5-羟色胺1A受体(HTR1 A)、HTR3A、5-羟色胺4受体(HTR4)的mRNA水平.结果 OVA致敏后,小鼠产生严重的过敏性腹泻,血清中的OVA-SIgE明显升高.血清中的KYN显著上升,5-HT、5-HIAA和5-HTP显著下降.胃组织IDO1及其受体HTR1A、HTR3A的mRNA水平增加,TPH1、MAO-A mRNA水平降低.给予色甘酸钠后综合评分、粪便评分、体温及OVA-SIgE明显降低,并且腹泻率也低于模型组,血清中的5-HIAA及胃组织中MAO-AmRNA水平升高,胃组织IDO1、5-HT1A、5-HT3A mRNA水平降低.结论 OVA致过敏性腹泻小鼠5-HT信号系统激活,给予色甘酸钠后,缓解过敏症状并使5-HT代谢相关产物、代谢基因和受体基因的表达发生改变.
-
白藜芦醇增加体外培养人卵泡颗粒细胞ATP的生成并促进其增殖
目的 探讨白藜芦醇(Res)对体外培养的人卵泡颗粒细胞的增殖及ATP生成的影响.方法 收集不孕症患者的卵泡液,进行卵泡颗粒细胞分离、培养,经纯化和卵泡刺激素受体(FSHR)免疫组织化学染色鉴定后体外培养.实验分为空白对照组、30μmol/L二甲基亚砜(DMSO)溶剂对照组、(10、20、30) μmol/L Res处理组.处理24、48 h,采用CCK-8法检测细胞增殖活性、增强型ATP检测试剂盒检测10 μmol/L Res处理组和空白对照组24h后的ATP生成量.结果 分离培养的颗粒细胞特异性表达FSHR,阳性物质位于胞质中,阳性细胞90％以上.人卵泡颗粒细胞体外培养24～72 h,进入对数生长期.与对照组比较,(10、20、30) μmol/L Res处理24h均可增加入卵泡颗粒细胞增殖活性.10 μmol/L Res处理细胞的ATP生成量较对照组明显增加.结论 Res可以促进人卵泡颗粒细胞的增殖活性及ATP的生成.
-
23例Kidd血型不规则抗体血清学检测及分析
目的 探讨Kidd血型不规则抗体的血清学特征及其临床意义.方法 采用微柱凝胶卡对23例Kidd血型不规则抗体筛选阳性患者的血标本进行ABO及Rh血型鉴定,采用试管盐水法和间接抗人球蛋白法进行不规则抗体特异性鉴定及效价测定,采用抗Jk抗体定型血清检测患者红细胞Kidd血型抗原.结果 在23例Kidd血型不规则抗体中,男3例(13.0％),女20例(87.0％).抗Jka抗体13例(56.5％),抗Jkb抗体10例(43.5％).ABO血型鉴定为A型血7例(30.4％),B型血8例(34.8％),O型血7例(30.4％),AB型血1例(4.3％).Kidd血型抗原为Jka-b+ 13例,Jka+b-10例.23例患者血标本在不规则抗体筛选及交叉配血中出现1+ ～2+意外凝集,抗体性质为IgG型,抗体效价为1∶2～1∶8.结论 患者Kidd血型抗原为Jka-b+或Jka+b-,血型不相合的妊娠或多次输血可产生免疫性IgG型抗Jk抗体,导致溶血性输血反应和新生儿溶血病,输血相容性检测中也可引起抗体筛选阳性及交叉配血不合.
-
从单个B细胞扩增全人源抗体重链和轻链基因方法的建立
目的 建立从单个B细胞扩增天然配对的B细胞受体(BCR)重链和轻链基因的方法.方法 以用于亚洲人全基因组测序的“炎黄(YH)”细胞的永生化细胞系为材料,运用流式细胞术得到CD19+的单个B细胞,在单管里对单细胞进行裂解,获得总RNA,逆转录生成cDNA,两步巢式PCR扩增来源于同一个B细胞的天然配对的抗体重链和轻链,获得单个B细胞的全人源抗体的可变区序列信息.结果 建立了稳定的单细胞BCR扩增方法,抗体基因扩增成功率高达80％以上.运用此方法,流式细胞术分选的单个B细胞在-80℃冻存2周以内仍能成功扩增;同一管里扩增产物经TA克隆和Sanger测序验证,既包含同一个B细胞的抗体重链基因,也包含其轻链基因,即含有天然抗体配对信息.自主设计和整理了一套行之有效的单细胞BCR引物.结论 成功建立从单个B细胞扩增全人源抗体重链和轻链基因的方法.
-
需肌醇酶1(IRE1)激活NLRP3炎性体在动脉粥样硬化中的作用
动脉粥样硬化(AS)是缺血性心脑血管疾病的主要病理基础,炎症反应在疾病进程中发挥重要影响.内质网应激(ERS)下游传感蛋白需肌醇酶1(IRE1)可以通过多条途径激活含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)炎性体,二者与AS发生发展关系密切.涉及相关信号通路的关键蛋白p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、核因子κB(NF-κB)、X盒结合蛋白1(XBP1)、NADPH氧化酶(NOX)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)等与AS之间均有关联,提示ERS刺激下IRE1参与活化NLRP3炎性体是AS的可能发病机制.我们总结了IRE1激活NLRP3炎性体的分子机制及相关信号通路的节点蛋白在AS中的作用,以期为研究AS发病机制和防治策略提供新思路.
-
小胶质细胞在帕金森病发生发展中的作用
帕金森病(PD)是由于中脑黑质区多巴胺能神经元变性缺失引起的神经退行性疾病,伴有路易体中α突触核蛋白(α-synuclein)的聚集.临床上多表现为静止性震颤、肌肉强直、共济失调等运动症状,同时伴发抑郁、疲劳及便秘等非运动症状.PD的发病机制尚不明确,其发生发展与神经炎症和免疫反应相关,小胶质细胞作为脑内的固有免疫细胞参与其中.在PD的发病过程中小胶质细胞被激活,转变成经典的促炎M1型小胶质细胞,使Toll样受体2(TLR2)介导的核因子κB(NF-κB)信号通路上调,释放促炎因子,如白细胞介素6(IL-6)、CX3趋化因子配体(CX3CL)、单核细胞趋化蛋白3(MCP-3)等,诱发炎症反应,促进多巴胺能神经元的死亡.我们总结了小胶质细胞在PD发生发展中作用的分子机制.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
