细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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阿尔法骨化醇联合地塞米松减轻小鼠的肺纤维化及其机制
目的 研究阿尔法骨化醇联合地塞米松对肺纤维化影响.方法 C57BL/6小鼠40只,随机分为正常对照组、肺纤维化组、阿尔法骨化醇组、地塞米松组、地塞米松联合阿尔法骨化醇组.正常对照组予以0.5 μ,L/g生理盐水一次性气管注射,同时每天胃内灌注生理盐水0.2mL;其他组予以0.5 μL/g博来霉素溶液一次性气管注射,肺纤维化组每天给予生理盐水0.2 mL灌胃,地塞米松组予以地塞米松[0.5 mg/(kg·d)]灌胃,阿尔法骨化醇组予以阿尔法骨化醇[0.5μg/(kg·d)]灌胃,地塞米松联合阿尔法骨化醇组给予地塞米松[0.5 mg/(kg·d)]联合阿尔法骨化醇[0.5μg/(kg·d)]灌胃,21 d后处死.行HE及Masson染色观察肺组织病理变化,收集血清检测各组羟脯氨酸(Hyp)值,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),沉淀重悬行细胞计数,上清液行ELISA检测白细胞介素1β (IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)及转化生长因子β1(TC,F-β1).结果 阿尔法骨化醇联合地塞米松组IL-1β、IL-6、TNF-α及TGF-β1,细胞计数、Sazpiel评分、Hyp值均低于除对照组外其他各组,其肺泡炎情况及纤维沉积也均低于除对照组外其他各组.结论 阿尔法骨化醇联合地塞米松对肺纤维疗效优于地塞米松及阿尔法骨化醇单药疗效,其机制可能与抑制TG-F-β1、炎性因子相关.
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蛋白激酶CβⅡ(PKCβ2)抑制剂LY333531减少心肌梗死后心肌肥大细胞浸润
目的 探讨蛋白激酶CβⅡ(PKC β2)特异性抑制剂LY333531对心梗后心衰大鼠心肌组织中肥大细胞浸润的影响.方法 利用左冠状动脉降支(LAD)结扎制备大鼠心梗模型,将手术4周后出现心衰的大鼠分为对照组和LY333531治疗组,分别给予生理盐水和LY333531处理6周,同时设置假手术组.检测各组大鼠体质量和各项心功能指标,采用天狼星红染色观察心肌组织胶原沉积情况,甲苯胺蓝染色观察肥大细胞密度,ELISA检测血清中组胺和白细胞介素4(IL-4)的含量.结果 与假手术组大鼠相比,手术后4周心衰大鼠(生理盐水组和LY333531组)左心室短轴缩短率(FS)显著减少,左心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)以及左心室后壁厚度(PWT)明显增加;心肌组织可观察到胶原沉积、肥大细胞浸润,血清中组胺和IL-4的含量增加.与生理盐水对照组相比,经LY333531治疗6周后,FS、.LVESD以及PWT明显改善;但是LVEDD的改善无显著性差别,胶原蛋白沉积降低约50％,心肌组织肥大细胞数减少,血清中组胺和IL-4的含量降低.结论 使用LY333531选择性抑制PKCβ2能够通过抑制心肌炎症反应,改善心梗后心力衰竭模型大鼠心脏功能和抑制病理性心肌重塑.
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过表达前列腺特异性膜抗原和荧光素酶的PC3稳定细胞系的建立及成瘤性鉴定
目的 利用慢病毒感染的方法建立能稳定表达前列腺特异性膜抗原(PSMA)和荧光素酶的PSMA+-PC3细胞系,并将其接种到裸鼠皮下检测其成瘤能力.方法 包装表达PSMA的慢病毒和表达荧光素酶的慢病毒,将其感染PC3细胞后,用嘌呤霉素进行筛选,建立能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA+-PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA--PC3细胞;利用流式细胞术检测PSMA的表达情况.将PSMA+-PC3和PSMA--PC3细胞接种于裸鼠皮下建立荷瘤模型,利用生物发光成像法观察其在体内的成瘤情况,利用免疫组织化学染色法检测PSMA+-PC3和PSMA--PC3肿瘤组织中PSMA的表达情况.结果 成功建立了能够稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA+-PC3细胞和仅表达荧光素酶的PSMA--PC3细胞,流式细胞术检测证实PSMA+-PC3细胞上PSMA呈阳性表达,小动物活体成像结果显示PSMA+-PC3和PSMA--PC3细胞均可有效成瘤,免疫组织化学染色检测证实PSMA+-PC3肿瘤上PSMA的表达为阳性.结论 成功建立了能稳定表达PSMA和荧光素酶的PSMA+-PC3细胞系,并在裸鼠体内证实其可有效成瘤,为靶向PSMA的研究提供了有用的细胞和动物模型.
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雌二醇缩短哮喘小鼠引喘潜伏期并促进气道炎症
目的 观察雌二醇对哮喘小鼠引喘潜伏期及气道炎症的影响.方法 雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照组、卵清蛋白(OVA)诱发哮喘组、400μg/kg雌二醇处理组、400μg/kg雌二醇联合7 mg/kg他莫昔芬组,每组10只.OVA诱发哮喘组、雌二醇处理组、雌二醇联合他莫昔芬组通过OVA致敏、激发建立哮喘模型,正常对照组以生理盐水替代.雌二醇处理组、雌二醇联合他莫昔芬组于每次激发前4h给予400 μg/kg雌二醇腹腔注射,雌二醇联合他莫昔芬组在注射雌二醇前30 min给予7 mg/kg他莫昔芬腹腔注射.正常对照组、OVA诱发哮喘组腹腔注射生理盐水作对照.于末次激发后24h,测定各组小鼠弓喘潜伏期.收集支气管肺泡灌洗液(BALF)检测白细胞总数并进行嗜酸性粒细胞和淋巴细胞分类计数,ELISA检测BALF中白细胞介素4(IL-4)、IL-13水平.HE染色观察肺组织病理变化.结果 与正常对照组比较,OVA诱发哮喘组、雌二醇处理组、雌二醇联合他莫昔芬组引喘潜伏期均缩短;雌二醇处理组较OVA诱发哮喘组、雌二醇联合他莫昔芬组引喘潜伏期缩短;OVA诱发哮喘组与雌二醇联合他莫昔芬组引喘潜伏期无显著性差异.与正常对照组比较,OVA诱发哮喘组、雌二醇处理组、雌二醇联合他莫昔芬组IL-4、IL-13水平升高;雌二醇处理组较OVA诱发哮喘组、雌二醇联合他莫昔芬组IL-4、IL-13水平升高;OVA诱发哮喘组与雌二醇联合他莫昔芬组IL-4、IL-13水平相当.与正常对照组比较,OVA诱发哮喘组、雌二醇处理组、雌二醇联合他莫昔芬组BALF白细胞总数及嗜酸性粒细胞、淋巴细胞分类计数增加;雌二醇处理组较OVA诱发哮喘组、雌二醇联合他莫昔芬组白细胞总数及嗜酸性粒细胞、淋巴细胞分类计数增加;OVA诱发哮喘组与雌二醇联合他莫昔芬组比较,白细胞总数及嗜酸性粒细胞、淋巴细胞分类计数无显著性差异.正常对照组小鼠气道黏膜无充血肿胀,气道周围无炎性细胞浸润;OVA诱发哮喘组、雌二醇联合他莫昔芬组小鼠气道黏膜充血水肿,支气管壁及周围有较多炎细胞浸润;雌二醇处理组较OVA诱发哮喘组、雌二醇联合他莫昔芬组上述改变更为严重.结论 雌二醇能缩短哮喘小鼠引喘潜伏期,促进气道炎症细胞浸润及IL-4、IL-13的表达.
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IL-1β促进星形胶质细胞增殖并下调Kir4.1的表达
目的 探讨白细胞介素1β(IL-1β)对星形胶质细胞增殖及其内向整流性钾离子通道4.1(Kir4.1)表达的影响.方法 体外培养新生SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞;用IL-1β或者和白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)处理培养的星形胶质细胞,流式细胞术检测IL-1β对星形胶质细胞细胞周期的影响;荧光定量PCR检测IL-1β对星形胶质细胞Kir4.1 mRNA表达的影响;Western blot法检测IL-1β对星形胶质细胞Kir4.1蛋白表达的影响.结果 IL-1β可以以剂量和时间依赖的方式促进星形胶质细胞的增殖.用10 ng/mL的IL-1β处理星形胶质细胞24h后,Kir4.1 mRNA和蛋白的表达均下降,IL-1Ra可以有效对抗由IL-1β引起的Kit4.1 mRNA和蛋白的表达下降;Kir4.1 mRNA和蛋白的表达下调也能因IL-1β的去除而部分被恢复.结论 IL-1β可以促进星形胶质细胞的增殖,IL-1β是影响星形胶质细胞Kir4.1表达的关键因素.
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精氨酸酶抑制剂nor-NOHA诱导HepG2肝癌细胞凋亡并抑制其侵袭和迁移
目的 探讨精氨酸酶抑制剂nor-NOHA对HepG2肝癌细胞的抑制作用及其机制.方法 采用CCK-8法及流式细胞术检测(0.0、0.5、1.0、2.0、3.0) ng/μL nor-NOHA对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制作用和细胞凋亡的促进作用;Westem blot法检测其对细胞内精氨酸酶1(Argl)、P53、基质金属蛋白酶2(MMP-2)以及上皮钙黏素(ECD)蛋白表达的影响;实时定量PCR检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA的表达;Griess法检测各组HepG2细胞产生的一氧化氮(NO)浓度;TranswellTM实验及细胞划痕实验测定HepG2细胞的侵袭、迁移能力.结果 nor-NOHA抑制肝癌细胞的增殖并诱导其凋亡;nor-NOHA降低Arg1、MMP-2的表达水平,升高P53、ECD的水平并增加NO的合成;nor-NOHA降低肝癌细胞的侵袭、迁移能力.结论 nor-NOHA通过抑制Arg1,可诱导肝癌细胞凋亡并降低其侵袭、迁移能力,其机制与升高iNOS的表达,产生高浓度NO有关.
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2-氯化腺苷通过调节戊四氮点燃癫痫小鼠脑组织P糖蛋白水平减轻组织脑损伤
目的 观察2-氯化腺苷(2-CArdo)对戊四氮(PTZ)点燃癫痫小鼠脑内P糖蛋白(PGP)表达的影响.方法 随机将C57BL/6小鼠40只,分为对照组(n=8)、PTZ组(n=16)和2-CAdo组(n=16),PTZ组和2-CAdo组小鼠腹腔注射30 mg/(kg·d)PTZ制备慢性点燃癫痫模型,对照组腹腔注射等量生理盐水,观察小鼠在PTZ点燃过程中癫痫发作情况(点燃率、点燃潜伏时间、发作开始时间和发作持续时间).癫痫模型成功后,2-CAdo组小鼠连续腹腔注射2-CAdo[0.6 mg/(kg·d)]2周,对照组和PTZ组腹腔注射等量生理盐水.2周后将小鼠全部处死,采用HE染色观察小鼠大脑皮层和海马区的形态,Western blot法检测小鼠大脑皮层和海马中PGP水平,免疫组织化学染色检测PGP在小鼠大脑皮层和海马中的表达和定位.结果 癫痫发作时,小鼠表现出全身颤抖、毛发竖起,精神萎靡、食欲不振、冲撞笼栏等异常行为.HE染色结果显示,2-CAdo组小鼠大脑皮层及海马脑组织损伤程度较PTZ组轻.在小鼠大脑皮层中,2-CAdo组PGP蛋白表达量明显低于对照组和PTZ组;而在海马中组织中,2-CAdo组和PTZ组PGP蛋白表达量又显著性高于对照组,尤其以2-CAdo组为明显.结论 2-CAdo能够减轻癫痫所致的脑组织损伤,并且能下调大脑皮层PGP蛋白表达和上调海马区PGP蛋白的表达.
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细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白2A(CDKN2A/p16INK4a)在MCF7细胞中的可诱导表达并引起F-actin的重分布
目的 使用四环素操纵子(Tet-on)可控表达系统研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制蛋白2A(CDKN2A/p16INK4a)对MCF7乳腺癌细胞形态及细胞骨架的影响.方法 以p16INK4a表达缺失的MCF7乳腺癌细胞为宿主细胞,用慢病毒通过“两步感染法”建立MCF7-pTet-on-p16INK4a可诱导表达细胞系,加入诱导剂强力霉素(Dox)诱导目的基因表达;细胞计数检测细胞生长变化;采用免疫细胞化学染色检测上皮钙黏素(E-cadherin)表达,采用鬼笔环肽(phalloidin)标记纤维型肌动蛋白(F-actin),观察p16INK4a对细胞间黏附连接、细胞骨架的影响;用显微镜对细胞拍照后,用Image J软件进行形态分析.结果 成功建立了可诱导表达p16INK4a的MCF7稳定细胞系,Dox可以有效诱导p16INK4a的表达;诱导条件下稳定表达p16INK4a的MCF7细胞增殖受抑制,细胞体积增大,轮廓线延长;而对照MCF7细胞F-actin主要定位于胞质,p16INK4a表达的细胞内F-actin向细胞边缘分布增加.结论 p16INK4a在MCF7细胞中的表达可以导致细胞体积增大、细胞间黏附连接弱化、F-actin向细胞外周重新分布.
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miR-21通过抑制PTEN/PI3K/AKT信号通路减轻小鼠肝细胞缺氧/复氧损伤
目的 探讨体外实验中miR-21对C57BL/6J小鼠原代肝细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响及其可能的分子机制.方法 建立体外原代培养肝细胞H/R模型,采用实时定量PCR检测miR-21的表达;Western blot法检测肝细胞中第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)、Bcl-2、Bax的蛋白表达水平;流式细胞术检测肝细胞凋亡.结果 原代培养肝细胞在H/R处理后miR-21表达下调;而外源性miR-21模拟物处理的肝细胞经H/R后PTEN表达降低、p-AKT表达升高、Bcl-2表达水平及Bcl-2/Bax比值升高,肝细胞凋亡减少,而抑制AKT磷酸化可导致肝细胞Bcl-2表达水平及Bcl-2/Bax比值降低,肝细胞凋亡增加.结论 miR-21可通过抑制PTE N/PI3 K/AKT信号通路减轻H/R导致的肝细胞凋亡,减轻H/R过程中肝细胞的损伤.
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黄芪多糖联合顺铂抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤生长及其机制
目的 观察黄芪多糖(APS)及联合顺铂(DDP)对Lewis肺癌(LLC)移植瘤小鼠凋亡蛋白细胞色素C(CytC)和高温必需丝氨酸蛋白酶A2(Omi/HtrA2)表达的影响.方法 90只C57BL/6J小鼠,随机分为正常组、模型组、(50、100、200) μg/mL APS处理组、6 mg/kg DDP处理组、3mg/kg DDP联合(50、100、200) μg/mL APS处理组,每组10只.除正常组外,其余80只均接种1x107 LLC细胞0.2mL于右前肢腋窝皮下,建立荷瘤小鼠模型.造模次日起,治疗组的小鼠给予腹腔注射0.3mL药物.每周注射1次DDP,其余药物每天1次,正常组和模型组注射等体积生理盐水,连续20d,于第21天处死.采用HE染色观察肿瘤组织病变情况;免疫组织化学染色和图像分析法检测移植瘤细胞中的CytC及Omi/HtrA2的表达和定位.结果 (100、200) μg/mL APS处理及3 mg/kg DDP联合(100、200)μg//mL APS的荷瘤小鼠肿瘤质量减轻.与模型组小鼠比较,200 μg/mL APS联合3mg/kg DDP小鼠的肿瘤细胞坏死为明显,各处理组的肿瘤组织中CytC、Omi/HtrA2蛋白水平均增加,200μg/mL APS联合3mg/kg DDP小鼠的肿瘤组织增加明显.结论 APS及联合DDP能抑制小鼠Lewis肺癌细胞的生长,可能与肿瘤细胞CytC、Omi/HtrA2表达增加有关.
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胰岛素样生长因子1(IGF-1)促进人牙周膜干细胞增殖并诱导其向牙周膜成纤维细胞分化
目的 明确外源性胰岛素样生长因子1(IGF-1)多肽对体外培养的人牙周膜干细胞(hPDLSC)增殖及分化的影响.方法 有限稀释法分离培养hPDLSC,流式细胞术检测细胞表面标志物的表达.结晶紫染色观察细胞集落形成.采用成骨及成脂诱导液诱导hPDLSC分化.采用CCK-8法分析(1、10、30、50、100) ng/mL IGF-1处理对hPDLSC增殖活性的影响.实时定量PCR检测IGF-1处理的hPDLSC中1型胶原蛋白α1(Col1 α1)、3型胶原蛋白α1(Col3α1)、抗Runt相关转录因子2(Runx2)、骨涎蛋白(BSP)、骨桥蛋白(OPN)、牙骨质蛋白1(CEMP1)、scleraxis(SCXA) mRNA的表达.Western blot法检测Col1、Col3、Runx2、CEMP1及SCXA蛋白表达的水平.结果 有限稀释法分离培养的hPDLSC高表达干细胞表面标志物CD105 (95.4％)和CD90 (96.1％),而低表达造血细胞标志物CD34(1.58％)、CD45(1.74％).hPDLSC可形成集落并具有向成骨和成脂分化能力.IGF-1可提高hPDLSC的增殖活性,并呈剂量依赖效应.与对照组相比,IGF-1处理的hPDLSC中Runx2、BSP、OPN及CEMP1 mRNA的表达水平无明显变化,而Col1 α1、Co13α1、SCXA显著增加.并且IGF-1处理后hPDLSC中Col1、Col3及SCXA的蛋白含量增加.结论 IGF-1可促进hPDLSC增殖和胶原蛋白合成,加速其向牙周膜成纤维细胞分化.
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过表达尿嘧啶DNA糖苷酶2(UNG2)可增强HepG2细胞的抗氧化作用
目的 检测尿嘧啶DNA糖苷酶2(UNG2)的糖苷酶活性,研究UNG2在肝癌细胞HepG2抗氧化损伤过程中的作用.方法 构建UNG2的过表达载体,利用Western blot法检测UNG2过表达效果.在HepG2细胞过表达UNG2,免疫荧光细胞化学染色观察UNG2在细胞中的表达和定位,利用含脱氧尿苷的寡核苷酸为底物测定UNG2的DNA糖苷酶活性,利用H2O2毒性实验研究UNG2在HepG2肝癌细胞抗氧化存活中的作用.结果 在HEK293FT细胞中成功表达了UNG2,并发现UNG2主要定位在HepG2细胞核中.酶活性实验表明UNG2可以有效地切割寡核苷酸中的脱氧尿苷位点.H2O2毒性实验表明过表达UNG2可以显著提高HepG2肝癌细胞在H2O2处理后的存活率.结论 UNG2具有特异的尿嘧啶糖苷酶活性,并且UNG2能够保护HepG2肝癌细胞抵抗氧化应激损伤.
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恒河猴XC趋化因子受体1(XCR1)基因的克隆和体外表达
目的 了解恒河猴XC趋化因子受体1(XCR1)基因特征,并在HEK293T细胞上表达.方法 采用反转录PCR和cDNA末端快速扩增法(RACE)克隆恒河猴XCR1基因、并与GenBank中其他物种XCR1的cDNA序列进行比对.构建真核表达载体3.1-XCR1并转染HEK293T细胞,采用流式细胞术、Western blot法和激光扫描共聚焦显微镜技术检测XCR1蛋白的表达.结果 恒河猴XCR1 cDNA序列全长1665bp,包含415 bp的5’非翻译区(5'UTR)、1003 bp的编码区和248 bp的3'UTR;恒河猴XCR1编码区氨基酸序列与人XCR1的相似性为96.8％,而且具有相似的结构特征:含有七次跨膜结构,酸性N端以及保守的G蛋白锚定功能性基序HRYLSVV.与基因组序列比对和跨外显子反转录PCR结果表明,在恒河猴多种组织中只存在缺失第二外显子的剪接变异体.恒河猴XCR1可在HEK293T细胞中表达Mr 40 000左右的分子、主要分布于细胞质和细胞膜上.结论 除mRNA剪接异构体以外,恒河猴XCR1分子与人高度相似,并且能在HEK293T细胞中有效表达.
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IL-37通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的磷酸化而诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡和自噬
目的 观察白细胞介素37(IL-37)诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡和自噬的机制.方法 体外培养SMMC-7721细胞,SMMC-7721细胞分为处理组和对照组,处理组分别予以不同剂量(50、100、200)ng/mL的重组人IL-37(rhIL-37).CCK-8法检测SMMC-7721细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测凋亡和自噬相关蛋白Bax、Bcl-2、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和beclin 1及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的水平,透射电子显微镜观察自噬体的形成情况.结果 IL-37可抑制SMMC-7721肝细胞癌细胞的增殖、诱导SMMC-7721细胞凋亡和自噬;IL-37处理组Bax、LC3和beclin 1水平增加,Bcl-2水平降低,mTOR的磷酸化被抑制;可见明显自噬体形成.结论 IL-37可诱导肝细胞癌SMMC-7721细胞发生凋亡和自噬,可能与mTOR的磷酸化有关.
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共培养的角膜上皮细胞诱导人羊膜上皮细胞分化为角膜上皮样细胞
目的 探讨体外培养人羊膜上皮细胞(HAEC)并定向诱导分化为角膜上皮样细胞的可行性.方法 采用Ⅱ型胶原酶和胰蛋白酶消化分离培养HAEC,通过TranswellTM非接触共培养系统与人角膜上皮细胞(CEC)进行共培养2周,诱导HAEC分化;通过免疫荧光细胞化学染色法检测诱导后HAEC中细胞角蛋白3+12(CK3+ 12)、CK14、CK19、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测分化细胞CK12、CK14、CK19、P63 mRNA水平,Western blot法检测HAEC诱导前后CK3+ 12、CK14、CK19、P63的蛋白水平.结果 体外培养的HAEC和CEC形态相似,免疫荧光细胞化学染色检测到HAEC诱导分化细胞CK3 +12、CK14、CK19、PCNA呈阳性表达,诱导后HAEC中P63、CK12、CK19、CK14 mRNA相对表达量分别为共培养前的3.35、6.76、2.42、1.06倍.结论 在与CEC共培养2周后,HAEC可以转分化为角膜上皮样细胞,HAEC可用作组织工程角膜重建的种子细胞.
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多聚甲醛处理的昆明小鼠T细胞及其亚群存放不同时间分析
目的 确定昆明小鼠CD3e+ CD4+T细胞和CD3e+ CD8a+T细胞两种淋巴细胞的可存放时间.方法 无菌收集昆明小鼠抗凝血和脾脏并制备单细胞悬液,经荧光基团标记的抗体对CD3e、CD4、CD8a进行标记、多聚甲醛处理后运用三色标记流式细胞术分点检测4℃避光保存的待检样品的可存放情况,采用小二乘法拟合佳回归曲线,计算各时间点上淋巴细胞含量并进行统计学分析,同设多聚甲醛未处理组.结果 昆明小鼠脾组织内CD3e+ CD4+T细胞和CD3e+ CD8a+T淋巴细胞经多聚甲醛处理后分别在第11天和第16天显著降低,未经多聚甲醛处理样品的这两个亚群细胞则在第8天和第11天显著降低;经多聚甲醛处理的外周血T淋巴细胞的可存放时间较长(均为第18天),高于未处理组(第10天和第15天).结论 流式细胞术检测多聚甲醛处理的昆明小鼠脾组织和外周血T淋巴细胞应在第11天前完成.
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吞噬PUVA处理的人脾细胞的未成熟树突状细胞具有调节性树突状细胞特性
目的 探讨吞噬经补骨脂素长波紫外线(PUVA)处理的人脾淋巴细胞的未成熟树突细胞(imDC)的表型及功能.方法 分离人外周血单个核细胞(PBMC),利用白细胞介素4(IL-4)和重组人粒细胞、巨噬细胞集落刺激因子诱导培养.培养第6天收获imDC;其中一部分加入脂多糖(LPS)1 d诱导为成熟DC.PUVA处理人脾脏淋巴细胞(PUVA-SP)分别将PUVA-SP、SP与imDC共培养,获得体外光化学治疗性树突状细胞(ecpDC)和SP-DC.收集各组DC,检测其表面抗体CD11c、CD83、CD86的表达情况.获取上述细胞上清,ELISA检测IL-10和IL-12含量.结果 经PUVA处理后的SP早期凋亡率为(94.21±3.75)％.SP-DC组CD83、CD86的阳性率明显高于imDC,而ecpDC组CD83、CD86的阳性率与imDC相近,但低于DC.结论 吞噬凋亡的SP得到的DC为imDC,具有负向免疫调控作用.
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哮喘患者嗜酸性粒细胞富集群中IL-18及其结合蛋白和受体水平增加
目的 探讨哮喘患者血液嗜酸性粒细胞富集群中白细胞介素18(IL-18)、白细胞介素18结合蛋白(IL-18BP)和白细胞介素18受体(IL-18R)的表达变化及其相关性.方法 收集哮喘患者和门诊正常人群的外周静脉血,用蒿草花粉、尘螨和梧桐花粉粗提液刺激血液,流式细胞术检测嗜酸性粒细胞富集群中IL-18、IL-18BP及IL-18R的表达并分析其相关性.结果 哮喘患者嗜酸性粒细胞富集群中IL-18+细胞比例较正常人升高达15倍.尘螨、梧桐花粉粗提液刺激哮喘患者血液后,嗜酸性粒细胞富集群中IL-18+细胞比例分别升高约1.3倍和1.5倍;梧桐花粉粗提液刺激哮喘患者血液后,嗜酸性粒细胞富集群IL-18BP+细胞的平均荧光强度(MFI)升高约1.5倍,IL-18R+细胞比例升高约2倍.此外,哮喘患者血液经过敏原激发后嗜酸性粒细胞群中IL-18 BP+细胞和IL-18R+细胞的表达呈正相关(r=0.639).然而,正常人血液嗜酸性粒细胞富集群中IL-18、IL-18BP和IL-18R的变化不明显.结论 嗜酸性粒细胞表达的IL-18、IL-18BP和IL-18R可能与哮喘炎症反应有关.
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STAT4 rs7574865位点单核苷酸多态性与江苏部分地区汉族人群原发性胆汁性肝硬化相关
目的 探讨信号转导子与转录活化子4(STAT4)基因rs7574865位点单核苷酸多态性(SNP)与江苏地区汉族人群原发性胆汁性肝硬化(PBC)的相关性.方法 收集江苏省常州三院住院的PBC患者138例和116例无血缘关系健康人群外周血标本.采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法检测STAT4基因rs7574865位点的基因型,使用,检验对两组人群中基因型及等位基因频率的分布进行比较,明确该基因位点是否为PBC易感位点;并分析该位点与PBC患者血清抗线粒体M2(AMA-M2)抗体、抗核抗体(ANA)、抗着丝粒蛋白B(Cenp B)抗体、抗糖蛋白210(GP210)抗体、抗骨架蛋白100 (SP100)抗体间的相关性.结果 STAT4 rs7574865位点存在GG、GT、TT三种基因型,基因型TT在PBC患者中的频率为20.3％,明显高于对照组的6.9％,OR为3.436,等位基因T的频率分别为42.4％和31.9％,OR为1.571;基因型TT和等位基因T与PBC患者血清自身抗体间不存在相关性.结论 江苏地区汉族人群STAT4 rs7574865基因位点多态性与PBC存在相关性.
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鼻咽癌组织p-eIF4E和p-4EBP1高表达与预后不良正相关
目的 探讨磷酸化的真核细胞翻译起始因子4E (p-eIF4E)和磷酸化的eIF4E结合蛋白1(p-4EBP1)与鼻咽癌(NPC)临床病理特征和预后的相关性.方法 免疫组织化学染色法检测314例NPC组织中p-eIF4E和p-4EBP1蛋白表达,利用SPSS16.0软件分析p-eIF4E和p-4EBP1蛋白表达与NPC临床病理特征及预后的相关性.结果 NPC组织中存在p-eIF4E和p-4EBP1蛋白异常高表达,阳性表达率分别为74.2％ (233/314)、72.9％(229/314);p-eIF4E和p-4EBP1蛋白表达在淋巴结转移NPC组织中阳性表达率显著高于无淋巴结转移NPC组织,但与性别、年龄、临床分期和组织类型无关;NPC组织中p-eIF4E与p-4EBP1蛋白表达呈正相关,且p-eIF4E和p4EBP1蛋白阳性的NPC患者生存时间明显短于p-eIF4E和p-4EBP1阴性患者,是NPC判断预后的独立因素.结论 p-eIF4E和p-4EBP1蛋白过表达可能与NPC的发生、发展及不良预后密切相关,p-eIF4E和p-4EBP1有望成为NPC临床诊治和判断预后的分子标志物.
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抗ATRX-C2193-2492多克隆抗体的制备和鉴定
目的 制备X连锁的α地中海贫血/精神发育迟滞综合症(ATRX)蛋白C端的多克隆抗体,分析ATRX蛋白在宫颈组织中的表达和定位.方法 将纯化后的6 His-ATRX-C2193-2492蛋白免疫BALB/c小鼠,获得抗血清;饱和硫酸铵盐析沉淀法以及亲和层析法纯化抗血清,制备抗ATRX-C2193-2492多克隆抗体.采用ELISA检测抗体效价;并用Western blot法鉴定其特异性;利用免疫组织化学技术检测宫颈癌组织细胞中ATRX的表达与定位.结果 制备的ATRX-C2193-2492抗血清效价可达1:12 800,该抗体能特异性识别ATRX-C2193-2492蛋白;并检测出在宫颈癌癌旁组织中ATRX具有较高表达并主要定位在细胞核,而在宫颈癌组织细胞中虽仍主要表达于细胞核,但表达量明显减少.结论 成功制备了抗ATRX-C2193-2492多克隆抗体,能够应用于宫颈组织中的ATRX蛋白表达的检测.
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HIV-1CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定
目的 真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性.方法 构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定.结果 制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1:81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型.Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白.结论 成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体.
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力学刺激对白细胞淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)影响的研究进展
白细胞黏附和穿越内皮细胞迁移是免疫反应过程中关键步骤之一,在此过程中,淋巴细胞功能相关抗原1(LFA-1)与配体细胞间黏附分子1(ICAM-1)起重要调控作用.LFA-1的活化主要通过蛋白激酶C(PKC)和磷酸肌醇3-激酶(PBK)等介导的由内而外(inside-out)信号通路调控,其中踝蛋白(talin)和肌动蛋白(actin)与LFA-1的活化关系密切,通过与LFA-1胞内段相互作用活化LFA-1.在力学刺激下,LFA-1与ICAM-1的黏附能力受到影响,且活化机制与静止状态下存在不同.本文就力学刺激对LFA-1的影响可能机制进行简要综述.
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可溶型CD100分子生物学及相关疾病研究进展
CD100属脑信号蛋白(semaphorin)家族成员,在神经系统神经元的发育和免疫系统抗体的产生、免疫细胞的黏附等过程中发挥重要作用.多种蛋白水解酶可以将CD100切割下来产生可溶型CD100(sCD100),其生物学功能与CD100类似.尽管CD100脱落的机制还未完全阐明,但研究发现多种疾病的发生与sCD100表达异常有关.本文对sCD100的产生、生物学功能及其与相关疾病如免疫性疾病、肿瘤、骨代谢疾病等的关系进行综述,并讨论其作为疾病早期检测诊断标志物及治疗靶点的可能性.
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树突状细胞在支气管扩张症炎症微环境中的作用机制
支气管扩张症为支气管异常持久的扩张,气道结构的破坏导致细菌的侵入、炎症细胞释放的炎症介质是导致气道的慢性炎症主要原因.流行病学调查发现铜绿假单胞杆菌为支气管扩张症的主要致病菌,且研究也证实Th17细胞、CD8+T细胞及肿瘤坏死因子α(TNF-α)参与支气管扩张症的气道炎症,而铜绿假单胞杆菌释放的内毒素及TNF-α可刺激树突状细胞(DC)诱导T细胞分化;因此本文对DC介导T细胞免疫中的作用、炎症环境中的功能改变及其在支气管扩张症的炎症中的作用进行综述,以探讨DC在支气管扩张症炎症微环境中的免疫炎症相关机制.
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蜕膜NK细胞与不明原因复发性流产关系的研究进展
蜕膜自然杀伤(dNK)细胞是妊娠时聚集在母胎界面的蜕膜组织中的NK细胞,是妊娠早期蜕膜组织主要的淋巴细胞.该群NK细胞具有促进滋养层细胞侵袭、促血管生成以及促进免疫耐受等功能;而它们的功能异常直接影响妊娠的发展,是导致复发性流产发生的原因之一.对蜕膜NK细胞功能和其上游或下游调控分子的研究将为复发性流产治疗提供新的思路.本文总结了蜕膜NK细胞的特征、功能、对妊娠的影响以及与复发性流产的关系.
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IL-33与心脏移植免疫关系的研究进展
白细胞介素33 (IL-33)是IL-1家族成员,参与多种机体炎症与免疫反应过程.IL-33既可以通过增加Th2细胞和调节性T细胞(Treg)的比例在组织修复、器官移植和保持体内平衡中起重要作用,也可以通过增加Th1细胞比例从而增加免疫力.IL-33可以参与多种组织器官移植的免疫耐受,在心脏移植中,IL-33可以通过增加Th2细胞、Treg和髓源性抑制细胞(MDSC)的比例或增加抑制炎症的IL-4、IL-5和IL-10等细胞因子进行免疫调节,从而延长移植心脏的存活时间.本文主要对IL-33以及其与心脏移植免疫方面的研究进行综述.
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Th17细胞对肺癌双向调节作用的研究进展
辅助性T细胞17(Th17细胞)对肺癌有促进和抑制作用,一方面表现为Th17细胞分泌的IL-17A在介导炎症的同时可介导肿瘤的发生,其机制可能为积聚细胞因子、促进内皮损伤、促进细胞增殖、促进血管生成、抑制肿瘤免疫、增加细胞黏附;另一方面通过分泌特异细胞因子,介导自身免疫反应或者趋化效应性T细胞等几个方面,在抗肿瘤免疫中发挥重要作用.Th17细胞对肺癌的这种双向调节作用主要与肿瘤微环境和Th17细胞/调节性T细胞比例失衡有关.此外,Th17细胞往往提示较好的肺癌预后.
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免疫球蛋白超家族成员CD147与黑素瘤生物学特性的相关性研究进展
黑素瘤致死率高,尽管近年靶向治疗及免疫治疗取得了一定进展,但仍存在效率低等问题,因此,深入了解其生物学特性及内在机制,发现新的免疫治疗靶点具有重要意义.CD147是免疫球蛋白超家族成员,属于高度糖基化的1型跨膜蛋白,在黑素瘤中高表达,且在促进黑素瘤侵袭、转移、增殖、生存等生物学特性中发挥重要作用,提示CD147可能是潜在的黑素瘤治疗靶点.本文综述了近年CD147与黑素瘤生物学特性及其内在机制相关性的研究进展,旨在阐明CD147在黑素瘤发展进程中的作用,为黑素瘤临床治疗提供有前景的新型靶点分子.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
