细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
- 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子: 0.81
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1007-8738
- 国内刊号: 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
Brd3通过促进IL6基因启动子区乙酰基转移酶CBP的募集和组蛋白H3乙酰化修饰促进IL-6产生
目的 探索巨噬细胞中含bromodomain蛋白3(Brd3)对脂多糖(LPS)诱导的白细胞介素6(IL-6)产生的调控作用.方法 利用CRISPR-Cas9技术筛选出Brd3敲除的细胞,以Brd3敲除细胞为实验组,正常表达Brd3的细胞为对照组.100 ng/mL LPS刺激后ELISA检测细胞培养上清中IL-6的水平;采用Western blot法检测核因子κB(NF-κB)和丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路的表达活化情况;染色质免疫沉淀实验检测IL6基因启动子区乙酰基转移酶CREB结合蛋白(CBP)的募集和组蛋白H3乙酰化修饰水平.结果 小鼠腹腔巨噬细胞中Brd3 mRNA和蛋白表达水平在LPS刺激后显著降低.与对照组相比,Brd3敲除细胞中LPS诱导产生的IL-6水平显著降低.NF-κB和MAPK信号通路相关分子的表达无差异;Brd3敲除细胞IL6启动子区乙酰基转移酶CBP的募集显著下降,组蛋白H3的乙酰化水平显著降低.结论 Brd3通过促进IL6启动子区乙酰基转移酶CBP的结合和组蛋白H3的乙酰化修饰,促进巨噬细胞中LPS触发的IL-6的产生.
-
犬卵透明带3(CZP3)DNA疫苗免疫有效降低小鼠生育能力
目的 构建以犬卵透明带3(CZP3)为靶抗原的DNA避孕疫苗,并对其免疫效果及抗生育能力进行初步评价.方法 提取犬卵巢总RNA,反转录PCR扩增CZP3基因,利用ProtScale、TMHMM、Signal P、InterProScan、PREDICT PROTEIN、同源模建等生物信息学方法对CZP3基因进行分析,构建携带目标抗原CZP3的DNA疫苗pcDNA-CZP3,进行小鼠免疫实验,对DNA疫苗的免疫效果、抗生育水平进行综合评价.结果 CZP3基因序列共编码426个氨基酸,其在N端和C端各有1个疏水区,N端前22个氨基酸为信号肽,C端有1个由细胞外到细胞内的跨膜螺旋.CZP3有8个B细胞表位.DNA避孕疫苗pcDNA3-CZP3能够诱导小鼠产生较高的抗体水平,免疫组小鼠平均产仔数显著低于空白对照组和阴性对照组.结论 成功构建能显著降低小鼠生育能力的犬避孕DNA疫苗pcDNA3-CZP3.
-
大黄素通过抑制TGF-β1/ADAMTS-1通路的活性减轻大鼠肺纤维化
目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/含1型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路在大黄素抗肺纤维化中的作用.方法 按随机数字表法将60只雄性SD大鼠分为6组:正常对照组、假手术组、模型组、大黄素低剂量组(20 mg/kg)、大黄素高剂量组(80 mg/kg)和泼尼松组(5 mg/kg),每组10只大鼠.假手术组大鼠气管内注人生理盐水,而后4组大鼠气管内注入博莱霉素A5建立肺纤维化模型,次日起,大黄素低、高剂量组大鼠分别以20 mg/kg、80 mg/kg大黄素2 mL灌胃,泼尼松组予5 mg/kg醋酸泼尼松2 mL灌胃,其余3组则以生理盐水2mL灌胃.造模后第28天处死大鼠,取血并分离肺组织.常规HE和Masson染色观察肺组织病理改变,荧光实时定量PCR检测各组大鼠肺组织中TGF-β1、ADAMTS-1、1型胶原蛋白(Col1)、Col3 mRNA的水平,Western blot法检测肺组织TGF-β1、ADAMTS-1、Col1、Col3蛋白水平,ELISA测定血清中1型前胶原蛋白羧基端前肽(P1CP)和3型前胶原蛋白氨基端前肽(P3NP)水平.结果 与模型组比较,各药物处理组肺泡炎及肺纤维化程度明显减轻.与正常对照组、假手术组比较,模型组肺组织TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平以及血清P1CP、P3NP浓度升高,而肺组织ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平降低.与模型组相比,给予低、高剂量大黄素或泼尼松处理后,肺组织TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平及血清P1 CP、P3NP浓度则下调,肺组织ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平上调.与大黄素低剂量组相比,大黄素高剂量组和泼尼松组上述指标明显改善,但后二者相比无明显差异.结论 大黄素抑制TGF-β1/ADAMTS-1途径的活性引起肺组织Col1、Col3降解增多,是其抗肺纤维化的重要机制.
-
蛋白激酶A抑制剂H-89通过调节核糖体蛋白S6激酶1的磷酸化阻断SP600125诱导的CMK细胞多倍体化
目的 研究核糖体蛋白S6激酶1 (S6K1)翻译后修饰在巨核细胞倍体化调控方面的作用.方法 c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H-89单独或联合处理CMK原始巨核细胞白血病细胞.碘化丙啶(PI)染色,结合流式细胞术检测DNA的相对量,从而进行DNA倍体分析;Western blot法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)下游靶分子S6K1表达和磷酸化修饰(Thr389和Thr421/Ser424)的变化.使用分子对接和激酶活性检测分析H-89与S6K1结合的关系以及对激酶活性的影响.结果 SP600125以时间和剂量依赖的方式诱导CMK细胞多倍体化,同时,上调S6K1的Thr421/Ser424磷酸化和下调Thr389的磷酸化.H-89不但部分阻断SP600125诱导CMK细胞多倍体化,而且下调S6K1的Thr421/Ser424磷酸化和上调Thr389磷酸化.分子对接和激酶活性分析发现H-89通过占据ATP结合位点,抑制S6K1活性.值得注意的是,H-89和SP600125均抑制PKA的活性,而且两者联合进一步抑制了PKA的活性,表明H-89阻断SP600125诱导CMK多倍体化与其对PKA的作用无关,而与S6K1磷酸化修饰状态的改变有关.结论 H-89通过调节S6K1磷酸化阻断SP600125诱导CMK细胞多倍体化.
-
重组高迁移率族蛋白1(rHMGB1)体外诱导小鼠骨髓细胞向髓源性抑制性细胞(MDSC)分化
目的 探讨重组高迁移率族蛋白1(rHMGB1)对髓源性抑制性细胞(MDSC)的体外分化作用.方法 分离BALB/c小鼠的骨髓细胞,分别使用rHMGB1、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子联合白细胞介素6(GM-CSF-IL-6)、GM-CSF、IL-6和rHMGB1三者联合(GM-CSF-IL-6-rHMGB1)进行体外刺激48 h,流式细胞术检测CD11b+ Gr1+ MDSC、CD11c+和F4/80+巨噬细胞的比例.用免疫磁珠体外分选出粒细胞源性MDSC (G-MDSC)和巨噬细胞源性MDSC(M-MDSC)分别用rHMGB1刺激48 h,流式细胞术检测各组细胞中CD11b+ Gr1+ MDSC、CD11c+细胞和F4/80+巨噬细胞的比例.结果 与对照组相比,rHMGB1、GM-CSF-IL-6、GM-CSF-IL-6-HMGB1刺激48 h后,CD11b+ Gr1+ MDSC比例增加,CD11c+细胞和F4/80+巨噬细胞的比例减少;免疫磁珠体外分选出G-MDSC和M-MDSC,用rHMGB1蛋白刺激48 h,与对照组相比,rHMGB1刺激后,CD11b+ Gr1+ MDSC、CD11c+细胞和F4/80+巨噬细胞的比例无显著性差异.结论 rHMGB1体外可以诱导分化MDSC比例增加,GM-CSF、IL-6与rHMGB1联用可以增强诱导效果.
-
IL-2或IL-15协同结核分枝杆菌抗原诱导人外周血单个核细胞体外扩增细胞的特性比较
目的 分析白细胞介素2(IL-2)或IL-15协同结核分枝杆菌抗原(MTB-Ag)诱导人外周血单个核细胞(PBMC)扩增细胞的生物学特性.方法 采用MTB-Ag联合IL-2或MTB-Ag联合IL-15体外分别刺激正常人PBMC,培养至第12天时,经流式细胞术检测扩增细胞中γδT细胞、自然杀伤(NK)细胞和CD4+T细胞所占的比例,以及分析3种淋巴细胞扩增的绝对数量.同时用MTT法检测两组扩增细胞对肿瘤细胞的杀伤活性.结果 与MTB-Ag联合IL-2刺激组相比,MTB-Ag联合IL-15刺激组扩增细胞中γδ T细胞所占比例明显高于前者,NK细胞所占比例明显低于前者;而两组扩增细胞中CD4+T细胞所占比例并无显著性差异.与2个刺激组中3种淋巴细胞数量的分析结果一致.并且MTB-Ag联合IL-15刺激组扩增细胞对不同肿瘤细胞均具有显著的杀伤活性,但与MTB-Ag联合IL-2刺激组相比,并无显著性差异.结论 IL-15协同MTB-Ag可高效诱导人PBMC产生以γδ T细胞增殖为主的效应细胞,该扩增细胞在体外对肿瘤细胞具有显著的杀伤活性.
-
线粒体信号肽引导葡萄糖调节蛋白75-增强型绿色荧光蛋白(GRP75-EGFP)融合蛋白定位于线粒体
目的 构建葡萄糖调节蛋白75(GRP75)不同结构域、不同形式突变体与线粒体信号肽重组蛋白并鉴定其亚细胞定位.方法 通过重叠延伸PCR,将线粒体靶向信号肽序列分别与GRP75不同结构域基因拼接.利用定点突变PCR分别扩增实现62和65位氨基酸突变的磷酸化失活型、磷酸化激活型突变体、482位氨基酸突变的底物结合缺陷型突变体及三位点同时突变重组体.将上述重组基因克隆入pEGFPC1真核表达质粒,酶切和测序验证后分别用脂质体转染HeLa细胞,Western blot法检测重组蛋白表达水平,激光共聚焦显微镜观察比较重组蛋白亚细胞定位情况.结果 成功构建了线粒体信号肽融合或缺失的GRP75结构域、磷酸化失活和激活突变体、底物结合缺陷突变体真核表达质粒.各重组质粒的片段插入、位点突变、信号肽融合情况均符合设计目的,在HeLa细胞表达后产物的相对分子质量大小均符合预期.EGFP蛋白C端插入信号肽能引导下游融合的GRP75全长蛋白、结构域片段、突变体蛋白表达定位于HeLa细胞线粒体中,而缺失信号肽的对应重组蛋白则主要分布于胞质和局部核周.结论 构建了一系列GRP75重组真核表达质粒,EGFP融合信号肽能引导重组蛋白在线粒体中表达定位.
-
锌离子依赖金属蛋白酶1(Zmp1)抑制小鼠RAW264.7细胞增殖以及吞噬体-溶酶体的融合
目的 观察卡介苗(BCG)的锌离子依赖金属蛋白酶1(Zmp1)对RAW264.7小鼠巨噬细胞的增殖以及吞噬体-溶酶体融合的影响.方法 在大肠杆菌BL21(DE3)中克隆表达Zmp1,用金属螯合磁珠纯化;用纯化的Zmp1处理RAW264.7细胞,采用CCK-8法检测(0、24、48、72、96)h的细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞周期分布;用减毒沙门菌感染RAW264.7细胞诱导吞噬体形成后,用Zmp1处理细胞,在吞噬体内的减毒沙门菌和溶酶体的溶酶体相关膜蛋白1(LAMP1)分别用相应Alexa Fluor((R)) 350抗沙门菌抗体(蓝色荧光)和Cy5抗LAMP1抗体(红色荧光)标记,通过荧光显微镜观察RAW264.7细胞内两种荧光,将其重合分析吞噬体与溶酶体融合情况.结果 用Zmp1蛋白处理细胞48 h后,细胞增殖活性明显降低;处理48 h后,细胞周期中G1期细胞比例下降,S期比例增高;采用双荧光标记感染沙门菌的RAW264.7细胞,Zmp1处理后显示紫色荧光的吞噬溶酶体融合减少.结论 Zmp1抑制小鼠RAW264.7巨噬细胞增殖,抑制吞噬体-溶酶体融合.
-
小檗碱抑制糖尿病大鼠心肌纤维化
目的 观察小檗碱对糖尿病大鼠血清转化生长因子β1(TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)、心肌组织1型胶原蛋白(Co11)和Col3的表达,探讨其对糖尿病心肌纤维化的影响.方法 采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法复制糖尿病大鼠模型,将造模成功的43只大鼠随机分为模型组、(50、100、150)mg/(kg·d)小檗碱组,灌胃给药12周;另设正常对照组和140 ms/(kg·d)二甲双胍组.用药结束后,检测大鼠空腹血糖、左心室收缩压(LVSP)和左心室舒张末压(LVEDP)水平,取大鼠心脏,计算心脏质量指数;ELISA测定血清TGF-β1、CTGF的含量;心肌组织Masson染色观察心肌的纤维化程度;Western blot法检测心肌组织Col1、Col3的表达水平.结果 与正常组相比,模型组大鼠空腹血糖水平、心脏质量指数、LVSP水平、LVEDP绝对值、TGF-β1、CTGF、心肌纤维化程度以及Col1、Col3的水平均明显升高;与模型组相比,(100、150) mg/(kg·d)小檗碱组和二甲双胍组大鼠空腹血糖水平、心脏质量指数、LVSP水平、LVEDP绝对值、TGF-β1、CTGF、心肌纤维化程度以及Col1、Col3的水平均明显降低.结论 小檗碱可降低糖尿病大鼠TGF-β1、CTGF的含量,减少Col1、Col3在心肌间质沉积,对糖尿病大鼠的心肌纤维化有一定的抑制作用.
-
中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白对肾小管上皮HK-2细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及机制
目的 观察中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)在HK-2肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤中的作用以及对自噬的调控作用.方法 设计并合成3组NGAL基因的特异性短发夹RNA(shRNA)序列并转入HK-2细胞,实时定量PCR检测HK-2细胞中NGAL mRNA水平、Western blot法检测NGAL蛋白水平,筛选抑制效率佳的一组用于后续实验.对NGAL敲减的HK-2细胞进行缺氧/复氧处理,检测微管相关蛋白1轻链3(LC-3) Ⅱ和beclin-1表达水平,并用Cell Titer-Blue细胞活性检测系统和CCK-8法检测细胞活力.结果 成功构建3组NGAL基因沉默shRNA质粒,转染HK-2细胞后NGAL mRNA和蛋白水平表达均低于空白载体对照;缺氧/复氧处理后,NGAL敲减的HK-2细胞LC-3 Ⅱ和beclin-1表达水平低于空白载体对照,而外加400ng/mL NGAL的HK-2细胞LC-3 Ⅱ及beclin-1水平高于缺氧/复氧对照;用Cell Titer-Blue和CCK-8法检测NGAL敲减组的细胞活力均低于空白载体对照组.结论 NGAL在HK-2肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤起一定保护作用,可能与增强自噬相关.
-
表面展示有前列腺酸性磷酸酶多肽(PAP114-128)的PP7噬菌体样颗粒的制备及其活性验证
目的 获得表面展示有前列腺酸性磷酸酶多肽片段(PAP114-128)的PP7噬菌体样颗粒,并证实其保留原有的生物活性.方法 用基因突变和重叠PCR技术扩增出PP7衣壳蛋白单链二聚体(简称为2PP7)基因,将其插入到载体pETDuet-1中,获得质粒pETDuet-2PP7,然后通过普通PCR获得携带有PAP114-128编码基因的PP7衣壳蛋白基因,将其插入到质粒pETDuet-2PP7中,获得质粒pETDuet-2PP7-PAP114-128;将上述重组质粒转化大肠杆菌,诱导表达产物用SDS-PAGE、双向免疫扩散以及ELISA进行鉴定.结果 以Ex Taq DNA聚合酶行重叠PCR可获得2PP7基因,其表达产物衣壳蛋白单链二聚体与野生型PP7噬菌体衣壳蛋白的抗原性相同;展示于PP7噬菌体样颗粒表面的PAP114-128表位与天然的人PAP蛋白相应表位无异,且能诱导较高水平的抗体产生.结论 含重复序列的2PP7基因可通过将基因突变和重叠PCR技术联用获得,且以其为基础成功制备表面展示有PAP114-128的PP7噬菌体样颗粒,不仅可解决多肽不稳定的问题,也为研究多肽的递送及功能奠定基础.
-
核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)介导SP600125诱导的巨核细胞白血病细胞系多倍体化依赖于细胞分化程度
目的 探讨核糖体蛋白S6激酶1(S6K1)在不同分化程度巨核细胞白血病细胞系多倍体化中的调控作用.方法 采用c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125诱导Dami、Meg-01和HEL细胞多倍体化,使用蛋白激酶A抑制剂H-89阻断SP600125药物作用,流式细胞术分析表型(CD41a、CD42a和CD42b)和DNA倍性,Western blot法检测S6K1相关蛋白的表达及磷酸化修饰位点的变化.结果 SP600125诱导多倍体化和真核翻译起始因子4E结合蛋白1(4E-BP1)磷酸化.然而,SP600125诱导多倍体化的程度不同,对Dami细胞作用强、HEL细胞次之、Meg-01细胞弱.而且SP600125上调Dami细胞的S6K1Thr421/Ser424磷酸化并下调Thr389磷酸化,仅上调HEL细胞的Thr389磷酸化,对Meg-01细胞的S6K1无影响.虽然H-89下调SP600125诱导的3种细胞系中4E-BP1磷酸化,但只部分阻断Dami细胞多倍体化及下调S6K1 Thr421/Ser424磷酸化和上调Thr389磷酸化.尽管H-89上调Meg-01细胞和HEL细胞的S6K1 Thr389磷酸化,但其对Thr421/Ser424磷酸化无影响,而且也不能阻断两者的多倍体化.表型分析显示3种细胞系处于不同的分化水平,即Dami细胞高、HEL细胞次之、Meg-01细胞低.结论 SP600125诱导巨核细胞白血病细胞系的多倍体化依赖于不同分化程度的细胞系内S6K1对SP600125诱导磷酸化修饰的应答.
-
锌指蛋白185(ZNF185)在小鼠睾丸精子细胞、间质细胞和支持细胞中的表达和定位
目的 研究锌指蛋白185(ZNF185)在小鼠睾丸精子、间质和支持细胞中的表达变化.方法 应用免疫荧光组织化学染色法检测ZNF185在精子、间质、支持细胞和睾丸组织中的定位;实时定量PCR和Western blot法分别检测三种细胞中ZNF185 mRNA和蛋白表达水平的差异.结果 免疫荧光细胞分析显示ZNF185在小鼠睾丸精子、间质和支持细胞中均表达,主要分布于间质和支持细胞胞质、精子细胞头部和尾部;实时定量PCR和Western blot结果显示,支持细胞ZNF185 mRNA和蛋白表达水平显著低于间质和精子细胞.结论 ZNF185分布于小鼠睾丸不同细胞,表达量存在差异.
-
人胎盘胎儿来源间充质干细胞通过下调髓样分化因子88和转化生长因子β信号通路减轻小鼠肺纤维化
目的 探讨无血清培养人胎盘胎儿来源间充质干细胞(hfPMSC)对博来霉素所致小鼠肺纤维化的疗效及分子机制.方法 培养并采用流式细胞术鉴定hfPMSC,取无特定病原体级雄性6周龄C57BL/6J小鼠随机分为博来霉素组、hfPMSC治疗组和阴性对照组.博来霉素组和hfPMSC治疗组分别经气管内注入50 μL博莱霉素(1 g/L)制备肺纤维化模型,阴性对照组经气管内注入50 μL PBS.hfPMSC治疗组,在造模3d后,经尾静脉注射200 μL含5×105个hfPMSC.第21天全部处死各实验组小鼠,取肺组织进行HE染色、Masson染色以及胶原蛋白含量测定;提取各组肺组织总蛋白,Western blot法检测髓样分化因子88(MyD88)、转化生长因子β(TGF-β)的表达;ELISA检测各组血清中TGF-β的浓度.结果 所培养具有典型的间充质干细胞形态特征并表达表面标志分子CD73、CD90和CD105,而不表达CD14、CD34和CD45.与博来霉素组比较,HE和Masson染色显示,hfPMSC治疗组可显著性降低肺组织纤维化程度、降低肺组织胶原蛋白含量以及MyD88和TGF-β蛋白水平.结论 hfPMSC可通过MyD88下调TGF-β的表达减轻小鼠肺纤维化.
-
HIV-1感染过程中CD8+T细胞PD-1水平增高与其活化状态正相关
目的 分析人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)感染者CD8+T细胞程序性死亡蛋白1(PD-1)、CD38、人白细胞抗原DR(HLA-DR)及KI-67抗原(ki67)的表达水平,探讨HIV-1感染过程中CD8+T细胞PD-1表达水平与免疫活化和免疫耗竭的关系及意义.方法 收集HIV-1感染者87例,健康志愿者22例,密度梯度法分离外周血单个核细胞;采用流式细胞术分析其CD8+T细胞PD-1、CD38、HLA-DR、ki67的表达水平;观察用抗PD-L1 mAb阻断PD-1/PD-L1通路后CD8+T细胞分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)、γ干扰素(IFN-γ)的水平变化.结果 HIV-1感染者CD8+T细胞PD-1表达水平显著高于健康对照组;CD8+T细胞PD-1水平与病毒载量呈正相关,与CD4+T细胞数呈负相关;CD8+T细胞PD-1与CD38、HLA-DR表达呈正相关,与ki67表达无相关性;体外阻断PD-1/PD-L1通路后TNF-α、IFN-γ的表达量增加.结论 HIV-1感染者外周血CD8+T细胞PD-1表达增加;PD-1过表达与HIV感染过程中CD8+T细胞功能受抑、免疫耗竭及疾病进程相关;体外阻断PD-1/PD-L1通路可恢复CD8+T细胞功能.
-
甲状腺乳头状癌组织中STAT3和核因子κB水平增加
目的 研究甲状腺癌组织中核因子κB(NF-κB)和信号转导子与转录激活子3(STAT3)的表达情况.方法 选取69例甲状腺癌和58例正常甲状腺组织标本,荧光定量PCR检测NF-κB以及STAT3 mRNA水平,ELISA检测其组织匀浆中NF-κB和STAT3蛋白含量、免疫组织化学检测NF-κB和STAT3定位.结果 与正常甲状腺组织相比,甲状腺癌组织中NF-κB和STAT3的mRNA和蛋白表达水平显著升高,免疫组织化学结果显示,甲状腺癌组织中STAT3阳性率(89.3%)显著高于正常甲状腺组织(10.2%).结论 STAT3介导的NF-κB信号通路在甲状腺癌患者的组织活性增强.
-
肺腺癌c-Src及核仁磷蛋白/B23(NPM1)蛋白的高表达与化疗疗效负相关
目的 观察c-Src蛋白及核仁磷蛋白/B23(NPM1)在肺腺癌组织中的表达并探讨与化疗疗效的关系.方法 选择2012-10-10/2015-06-30期间怀化市第一人民医院确诊的肺腺癌患者的肿瘤标本共107例,采用免疫组织化学染色方法检测c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达情况,分析c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达与肺腺癌发生、发展的关系,其中Ⅲ-Ⅳ期患者55例予以吉西他滨联合顺铂方案规则化疗4疗程,探讨c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达与化疗疗效的关系.结果 c-Src蛋白和NPM1蛋白在肺腺癌组织中皆为阳性表达,临床分期越高,c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达越高,同时c-Src蛋白和NPM1蛋白在肿瘤细胞的表达随分化程度的升高而降低,化疗疗效随c-Src蛋白和NPM1蛋白的表达升高而降低.结论 高表达c-Src、NPM1的肺腺癌化疗敏感性较差,高表达c-Src和NPM1可能与肺腺癌低分化有关.
-
新生儿细菌性肺炎患者外周血自然杀伤细胞及CD3- CD56- CD16bright亚群比例减少
目的 探讨外周血自然杀伤(NK)细胞及其亚群在新生儿细菌性肺炎中的变化及临床意义.方法 44例细菌性肺炎新生儿根据住院天数分为两组,即住院≤10 d组,住院>10d组;根据入院时白细胞(WBC)的数量分为轻度感染组和重度感染组,轻度感染即5.0×109/L< WBC< 20.0×109/L,重度感染即WBC< 5.0×109/L或>20.0×109/L.采用流式细胞术测定44例新生儿细菌性肺炎及22例正常新生儿总NK细胞及其亚群在外周血总淋巴细胞中所占的百分率.结果 细菌性肺炎患儿外周血总NK细胞及其亚群CD3- CD56- CD16bright的百分率明显低于对照组新生儿;住院≤10 d组患儿外周血CD3- CD56- CD16bright亚群占淋巴细胞的百分率明显低于正常对照组新生儿,而总NK细胞及CD3- CD56dim CD16bright、CD3- CD56bright CD16-/dim亚群无明显差异.住院>10d组患儿外周血总NK细胞及CD3- CD56- CD16bright亚群占淋巴细胞的百分率明显低于正常对照组;住院>10 d组外周血总NK细胞及CD3- CD56- CD16bright、CD3- CD56dim CD16bright、CD3- CD56bright CD16-/dim各亚群占外周血总淋巴细胞的百分率显著低于住院≤10 d组患儿;重度感染的患儿总NK细胞数及其亚群CD3- CD56- CD16bright、CD3- CD56dim CD16bright、CD3- CD56bright CD16-/dim占外周血淋巴细胞的百分率明显低于轻度感染组;细菌性肺炎患儿外周血中NK细胞CD3- CD56bright CD16-/dim和CD3- CD56dim CD16bright亚群占总NK细胞的百分率明显高于正常对照组,而外周血CD3- CD56- CD16bright亚群占总NK细胞的百分率明显低于正常对照组.结论 新生儿细菌性肺炎患儿病情越严重,住院时间越长,总的NK细胞数量及其各亚群占NK细胞的百分率越低.
-
新风胶囊通过抑制miR-155/SOCS1/NF-κB通路降低干燥综合征患者血液高凝状态
目的 探讨新风胶囊(XFC)改善干燥综合征(SS)患者高凝状态与miR-155/细胞因子信号传送阻抑物(SOCS1)/核因子κB(NF-κB)信号转导通路的关系.方法 将66例SS患者随机分为XFC治疗组和硫酸羟氯喹(HCQ)治疗对照组各33例,分别予XFC及HCQ治疗.另选20名健康者作为正常对照组.全自动凝血仪测定凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、纤维蛋白原(FIG)、凝血酶时间(TT)、D-二聚体(D-D);ELISA检测外周血血清白细胞介素1β(IL-1β)、IL-4、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、P50、P65、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)水平;同时采用实时荧光定量PCR检测p65、p50、IκBα mRNA水平;一步法荧光定量PCR反应测定miR-155含量;Western blot法检测P65、P50、SOCS1蛋白水平;魏氏法测定血沉(ESR);全自动生化分析仪测定超敏C反应蛋白(hs-CRP).结果 与NC组比较,SS患者凝血参数D-D、FIB明显升高;SS患者外周血miR-155、IL-1 B、TNF-α、P50、P65、IκBα及炎症指标hs-CRP、ESR水平明显升高;IL-4、IL-10水平明显降低;凝血参数与细胞因子、NF-κB信号转导通路及炎症指标明显相关.药物干预后,两组凝血参数和相关实验室指标均有部分改善;与对照组比较,XFC组有效率显著高于HCQ组,且在降低FIB、D-D、miR-155、TNF-α、IL-1β、P50、P65、ESR、hs-CRP水平,增加SOCS1,IL-4、IL-10水平方面明显优于HCQ组.结论 XFC能有效降低SS患者血液高凝状态,其机制与抑制miR-155/SOCS1/NF-κB信号通路有关.
-
456例婴幼儿ABO血型正反定型及IgM型抗体的分析
目的 探讨婴幼儿ABO血型正反定型相符率及IgM型抗体产生情况.方法 采用微柱凝胶法对456例婴幼儿血标本进行ABO血型正反定型,对正反定型不相符者再采用增强试管法进行IgM型抗体对比检测,观察IgM型抗体的凝集强度及效价.结果 在456例婴幼儿血标本中,ABO血型正反定型相符率为79.4% (362/456),其中年龄1个月以内患儿的相符率为66.2% (96/145),2~6个月患儿的相符率为74.5% (102/137),7~12个月患儿的相符率为91.9% (114/124),13~24个月患儿的相符率为100% (50/50).微柱凝胶法对婴幼儿血清IgM型抗体检出率为79.5% (329/414),增强试管法检出率为93.2%(386/414).抗体凝集强度为±~2+,抗体效价为1∶2 ~ 1∶8.结论 部分6个月以内的婴幼儿IgM型抗体尚未产生或效价很低,常规方法容易漏检,是引起ABO血型正反定型不相符的主要原因,采用增强试管法可提高对婴幼儿血清IgM型抗体的检出率.
-
口腔鳞癌患者外周血髓源性抑制细胞和Th17细胞数量及IL-17水平增加
目的 探讨口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者外周血髓源性抑制细胞(MDSC)、白细胞介素17 (IL-17)水平、Th17细胞数量及其相关性.方法 募集34例OSCC患者(Ⅰ、Ⅱ期OSCC患者18例、Ⅲ、Ⅳ期OSCC患者16例)和健康自愿者16例.分别采集其空腹静脉血,流式细胞术检测外周血MDSC、Th17细胞比例,ELISA检测血清IL-17水平.结果 与健康志愿者相比,OSCC患者外周血MDSC、Th17细胞比例增加,IL-17水平升高.中晚期(Ⅲ、Ⅳ期)OSCC患者MDSC、Th17细胞数量、IL-17水平均较早期(Ⅰ、Ⅱ期)OSCC患者增加.MDSC数量与IL-17水平存在相关性,而MDSC数量与Th17细胞数量无相关性.结论 OSCC患者外周血MDSC、Th17细胞增加,IL-17水平升高,MDSC与IL-17可能存在相互调节作用,IL-17的主要来源并非Th17细胞,而可能来自其他固有免疫细胞.
-
丙型肝炎病毒感染者血清IL-12降低和IL-10增加与疾病转归的关系
丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)是导致慢性肝炎的主要病原之一[1],HCV感染后20%~30%患者能自主清除,近70%可发展为慢性感染[2].免疫应答过程中分泌的各种细胞因子在病毒性肝炎转归期起重要作用[3],白细胞介素10(interleukin 10,IL-10)和IL-12在宿主防御、免疫稳态中起重要调节作用.IL-10由Th2细胞、巨噬细胞和B淋巴细胞等产生,能抑制免疫应答[4-5].IL-10能直接靶向作用幼稚HCV特异性CD8+T细胞,使其不能有效的分化形成效应性CD8+T细胞,导致T细胞衰竭和病毒持续[6],使用IL-10R阻断剂可使CD8+T细胞分泌IL-12增加[7].IL-12是重要的促炎因子之一,主要由抗原提呈细胞产生[8],诱导Th1细胞分化成熟,启动免疫应答[9].本研究比较慢性丙型肝炎患者、丙型肝炎自发清除者以及健康对照者血清IL-12和IL-10水平差异,了解其对丙型肝炎转归的影响.
-
ABO同型血交叉配血不合的影响因素及其处理对策
目的 探讨ABO同型血交叉配血不合的影响因素及其处理对策.方法 采用微柱凝胶法进行交叉配血,对交叉配血不合的血标本再以凝聚胺法及抗人球蛋白试验进行验证,同时进行不规则抗体筛选及特异性鉴定,结合临床病史资料进行综合分析,找出交叉配血不合的影响因素及适当的处理对策.结果 在98例交叉配血不合的血标本中,由不规则抗体引起的有35例(35.7%),冷凝集素引起的有24例(24.5%),自身抗体引起的有18例(18.4%),新生儿溶血病引起的有12例(12.2%),血浆蛋白异常引起的有6例(6.1%),输注药物引起的有3例(3.1%).98例交叉配血不合中,主侧配血不合68例(69.4%),次侧配血不合18例(18.4%),主次侧均不合12例(12.2%).结论 ABO同型血交叉配血不合时,首先应找出交叉配血不合的影响因素,按操作规程进行相关试验,结合临床病史资料进行综合分析,以提高交叉配血结果的准确性.
-
一株特异性识别B7-H3杂交瘤单克隆抗体Y4F11的分析和鉴定
目的 研制小鼠抗人恶性胸水细胞表面分子的单克隆抗体(mAb),并对其中Y4F11识别的抗原进行鉴定和验证.方法 以胸水细胞为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠、采用杂交瘤技术进行细胞融合和筛选阳性杂交瘤克隆;选取Y4F11为实验对象,采用流式细胞术分析其在初始和活化免疫细胞(T细胞、B细胞、NK细胞和单核细胞)上的结合情况;通过免疫共沉淀法获得与Y4F11特异性结合的条带、割胶、蛋白质谱测序后拼接出肽段,并进行BLAST分析比对;采用Western blot法、Dot-blot法及流式细胞术验证Y4F11与B7同源物3(B7-H3)的抗体抗原关系.结果 获得78株能持续分泌识别恶性胸水细胞表面表达分子的抗体的杂交瘤细胞株,其中Y4F11与胸水细胞结合高;Y4F11特异识别的条带相对分子质量(Mr)大小约为50 000,质谱结果经BLAST比对为B7-H3分子;继而的结合实验显示,Y4F11可以与B7-H3的转基因细胞结合,也可以与B7-H3融合蛋白有效地结合,B7-H3在免疫细胞表面表达的模式与Y4F11抗体在这些细胞上的结合一致,表明Y4F11识别的抗原分子为B7-H3.结论 成功获得1株持续表达B7-H3 mAb的杂交瘤细胞株Y4F11,为进一步研究分析B7-H3的生物学功能提供了物质基础.
-
大鲵虹彩病毒主要衣壳蛋白主要抗原表位区的原核表达及抗血清制备
目的 表达大鲵虹彩病毒(CGSIV)主要衣壳蛋白(MCP)主要抗原表位区蛋白,并制备兔抗血清.方法 以大鲵虹彩病毒略阳株(CGSIV-LY)基因组为模板,PCR扩增MCP基因,然后克隆到pET-21a(+)表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot法检测重组蛋白的表达和免疫活性,用镍柱亲和层析法纯化重组蛋白.以纯化的重组蛋白为免疫原免疫兔制备抗血清,采用Western blot法和ELISA检测抗血清的免疫特异性并测定效价,利用间接免疫荧光法检测鲤鱼上皮瘤(EPC)细胞CGSIV.结果 表达了相对分子质量(Mr)为29 000的重组蛋白.制备的兔抗MCP血清具有良好的特异性和高滴度,间接免疫荧光法检测结果显示制备的多抗血清能识别EPC细胞中的CGSIV.结论 成功表达了大鲵虹彩病毒MCP主要抗原表位区蛋白,并制备高滴度和良好特异性的兔抗血清.
-
Th2细胞因子与肿瘤髓系来源抑制细胞相关性的研究进展
髓系来源抑制细胞(MDSC)是骨髓细胞的一种异质性群体,对肿瘤发挥着免疫抑制作用.白细胞介素4(IL-4)、IL-6、IL-10、IL-13、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、血管内皮生长因子(VEGF)、环氧合酶2(COX2)等相关因子可以调控MDSC的生成、增殖、迁移和活性,并通过多种途径介导MDSC发挥免疫抑制作用.而IL-4、IL-6、IL-10、IL-13等Th2类细胞因子主要参与调控MDSC的产生和活性,促进MDSC的增殖,提高MDSC的抑制功能.如通过诱导MDSC生成精氨酸酶1(Arg1)、转化生长因子β(TGF-β),促进T细胞的凋亡,以及MDSC通过产生Th2细胞因子与巨噬细胞之间相互联系,引起促进肿瘤进展的Th2型免疫反应的发生.
-
G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白2(GIT2)参与免疫调控的研究进展
G蛋白偶联受体激酶相互作用蛋白2(GIT2)是一类多结构域的信号支架蛋白.GIT2通过与不同蛋白质的相互作用调节细胞功能,主要参与整合素介导的细胞黏附、肌动蛋白细胞骨架组装以及胞内信号传递过程.GIT2在免疫系统中也扮演着重要角色,促进中性粒细胞趋化性,抑制其过度产生超氧化物,促进胸腺细胞的阳性选择和趋化性,抑制炎症性肠病,介导肝脏免疫性损伤,且GIT2敲除小鼠具有多种免疫缺陷症状.本文简述了GIT2在免疫体系中的调控作用.
-
中草药及其组分抑制免疫反应研究进展
中草药在预防和治疗哮喘、糖尿病、关节炎等自身免疫性疾病方面已有几千年的历史,人们对其有效成分的分离、鉴定及潜在的作用机制进行深入的研究.中草药可以抑制炎症反应、超敏反应等针对自身抗原或过敏性抗原的免疫反应.中草药可调节机体内细胞因子的水平、T细胞亚群分化及细胞亚群之间的平衡、信号转导途径等,对免疫异常引起的炎症、超敏反应、自身免疫性疾病和移植排斥反应有一定预防和治疗作用.
-
RNA病毒逃避天然免疫机制的研究新进展
病毒感染后通过信号转导引发机体免疫反应.环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)识别病毒DNA,与干扰素基因刺激蛋白(STING)相互作用,介导产生1型干扰素(IFN1).维甲酸诱导基因1(RIG-1)受体识别病毒RNA,通过线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)引发RIG-1信号通路,激活IFN1.STING不仅可以作为DNA病毒信号通路蛋白,还可与MAVS相互作用,参与RNA病毒信号通路.然而,登革病毒、丙型肝炎病毒等RNA病毒的蛋白酶通过与STING相互作用逃逸免疫系统监视,抑制IFN产生.本文对STING与MAVS的相互作用机制,以及RNA病毒通过STING逃逸免疫系统监视进行综述,以期为研究病毒逃逸天然免疫调节机制提供新思路.
-
T淋巴细胞在新月体肾小球肾炎发病中作用的研究进展
新月体肾小球肾炎是肾脏急进性恶化的病理学表现,常在数周至数月内发展为少尿、无尿等肾功能衰竭症状.其发病基础是由免疫细胞参与介导的肾脏损伤.T淋巴细胞在肾小球肾炎的发生发展中的作用一直备受关注,不仅可作为辅助细胞发挥作用,也可在肾内作为效应细胞通过产生炎性因子等发挥效应.T淋巴细胞包括多种细胞亚群,如Th1细胞、Th2细胞、Th17细胞、调节性T细胞、γδT细胞和自然杀伤T细胞等,分别以不同的方式介导免疫应答.目前,新月体肾小球肾炎的研究成果主要来自实验动物模型,本文就T淋巴细胞在实验性新月体肾炎动物模型中取得的研究成果进行综述.
-
间充质干细胞对免疫细胞的调节及其在自身免疫性疾病中的应用
间充质干细胞(MSC)是干细胞家族的重要成员,来源于发育早期的中胚层和外胚层,具有多向分化潜能、造血支持、免疫调控和自我复制等特征.利用MSC的特殊免疫学特性治疗相关疾病,并取得一定的疗效,但是其具体机制尚不明确且多集中在体外MSC对免疫细胞的影响,而动物模型以及人类疾病的关系很少涉及.鉴于此,本文先从MSC的一般生物学特性入手,进而分析MSC分别与T淋巴细胞、B淋巴细胞和树突状细胞(DC)共培养后对T细胞、B细胞和DC等细胞的免疫调节作用,同时利用MSC对不同细胞的免疫调控作用分析比较其临床应用的具体机制.
-
富含半胱氨酸蛋白61(CYR61/CCN1)与风湿病关系的研究进展
富含半胱氨酸蛋白61(CYR61/CCN1)在人体细胞中广泛表达,但在不同器官、细胞中表达存在明显差异,具有调节细胞外基质形成,影响细胞增殖、趋化、黏附、凋亡等作用,与骨形成、血管发生、组织炎症及修复密切相关,在肿瘤、心血管、发育领域研究深入.CCN1在类风湿性关节炎、干燥综合征、系统性硬化症、系统性红斑狼疮、骨关节炎等风湿病患者血清或组织中差异表达,参与介导炎症因子产生,炎细胞浸润,成纤维细胞样滑膜细胞增殖,软骨成熟、分化,血管生成等过程,与疾病活动度显著相关,且在不同机制信号通路中发挥作用.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 01 02 |
1995 | 01 02 03 |
1994 | 01 02 |
1993 | 01 02 03 04 |
1992 | 01 02 03 04 |
1991 | 01 02 03 04 |
1990 | 01 02 |
1989 | 01 02 03 04 |