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细胞与分子免疫学

细胞与分子免疫学杂志

Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지

CSCD核心期刊
  • 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 影响因子: 0.81
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1007-8738
  • 国内刊号: 61-1304/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 52-184
  • 曾用名: 单克隆抗体通讯
  • 创刊时间: 1985
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 《细胞与分子免疫学杂志》编辑部
  • 出版地区: 陕西
  • 主编: 杨安钢
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • 醛糖还原酶在小鼠视神经损伤后的表达及作用

    作者:白倩;刘玲;陈鹏;于才勇;姚安会;孙丽娟;雷润佳;胡丹;王键

    目的 观察视神经中醛糖还原酶(AR)在小鼠视神经横断(ONT)损伤后的表达变化及其对视网膜神经节细胞存活和再生的影响.方法 采用C57BL/6-AR+/+(野生型)小鼠、C57BL/6-AR-/-(AR基因敲除)小鼠、Thy1-YFP/AR+/+(AR+/+ YFP 小鼠)小鼠和Thy1-YFP/AR-/-小鼠(AR-/-YFP小鼠),建立视神经横断模型.通过Western blot方法,检测横断损伤后的视网膜中AR分子的表达变化;利用视网膜组织冰冻切片计数观察比较AR基因敲除小鼠和野生型小鼠视神经横断损伤后存活的视网膜神经节细胞数目;通过Western blot法,观察比较神经生长相关蛋白43(GAP-43)在AR基因敲除小鼠和野生型小鼠视神经横断后的表达变化.结果 Western blot检测发现AR分子在野生型小鼠视神经横断后表达随时间延长逐渐升高.AR敲除小鼠在视神经横断损伤后其存活的视网膜神经节细胞数目多于野生型小鼠.AR敲除小鼠在视神经横断损伤后GAP-43的表达量高于野生型小鼠组(P<0.05).结论 AR参与了视神经横断损伤后的视网膜神经节细胞存活的调节,AR缺失会促进视神经横断损伤后的再生修复.

  • 层黏连蛋白受体1单克隆抗体抑制博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化

    作者:陈冬玲;江涛;冯燕梅;周蜜;韩晓黎

    目的 研究层黏连蛋白受体1(LAMRl)单克隆抗体(mAb)干预博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化.方法 雄性SD大鼠72只,随机分为LAMRl mAb组(L)、对照组(C)和模型组(M)3组,气管内滴入博莱霉素(5 mg/kg体质量)制备肺纤维化模型.3组分别给予LAMRl mAb、地塞米松、生理盐水3次/周,腹腔注射,于第7、14、28天处死8只大鼠.HE染色观察肺纤维化程度;免疫组化方法检测肺组织中表面活性物质A(SP-A)的含量;ELISA测定血清中羟脯氨酸(Hyp)的含量;PCR方法检测肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及转化生长因子β1(TGF-β1) mRNA的含量.结果 各时间段,M组肺纤维化程度及Hyp含量均高于C组和L组,SP-A的含量均低于其余两组,M组肺组织的MMP-9和TGF-β1的mRNA的含量明显高于其余两组.结论 LAMRl mAb可明显减轻博莱霉素诱导的肺纤维化程度.

  • 锚定蛋白CD59与接头分子Cbp在T细胞上的定位及功能研究

    作者:高美华;姬静;王冰;张蓓;张树超;秦云

    目的 研究CD59、Src羧基末端激酶结合蛋白(Cbp)在细胞膜的定位,及其在细胞活化及增殖中的相互作用.方法 应用免疫荧光细胞化学技术,通过荧光显微镜分析系统对CD59、Cbp的定位进行了分析;Jurkat细胞转染pSUPER-siCD59重组质粒,并行RT-PCR和Western blot法检测转染细胞中CD59的表达及蛋白酪氨酸激酶癌基因家族(fyn)磷酸化水平.利用MTT比色法检测转染各组细胞的增殖效应.结果 CD59、Cbp主要分布在细胞膜上.转染pSUPER-siCD59重组质粒的Jurkat细胞中CD59表达量减少,磷酸化的fyn含量也随之减少,细胞增殖能力也低于其他各组.结论 CD59是一种膜蛋白,在细胞活化及增殖中与Cbp分子共同发挥作用.

  • PDCD4重组慢病毒载体的构建、包装及其对前列腺癌细胞增殖的影响

    作者:张克克;张小芳;王福利;张翔;武国军;王磊;杨安钢;张瑞;袁建林

    目的 构建表达程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的慢病毒表达载体,建立能够稳定表达目的基因的前列腺癌PC3细胞亚株.研究PDCI4分子对前列腺癌细胞增殖的影响.方法 利用PCR扩增PDCD4编码区片段,克隆入pENTRA-3C入门载体,利用LR clonaseⅡ重组酶将目的基因片段转接入pLenti-6.3慢病毒表达载体并包装相应的慢病毒,以表达红色荧光蛋白mCherry的pLenti-6.3-mCherry慢病毒载体包装的慢病毒为对照,感染人前列腺癌PC3细胞,通过杀稻瘟素(blasticidin)筛选出能够稳定过表达PDCD4蛋白的细胞亚株.利用Western blot法检测PDCD4蛋白的表达量,MTI法和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化.结果 构建了重组慢病毒载体pLenti6.3-PDCI4.利用重组慢病毒表达系统筛选稳定过表达PDCD4蛋白的细胞亚株,并用Western blot法进行了验证.MTT法及平板克隆形成实验结果显示PDCD4高表达的PC3细胞亚株的增殖能力受到抑制.结论 成功构建了表达PDCD4分子的慢病毒表达载体,筛选出稳定表达PDCD4的PC3细胞株.过表达的PDCD4分子可以显著抑制PC3前列腺癌细胞的增殖.

  • 肺炎支原体P1C-IL-2融合基因疫苗鼻饲对小鼠免疫效果的检测

    作者:朱翠明;余敏君;高顺利;曾焱华;游晓星;吴移谋

    目的 研究肺炎支原体(Mp) P1C-IL-2融合基因疫苗经鼻饲免疫小鼠后的免疫应答水平和免疫保护作用,了解IL-2对P1C核酸疫苗的免疫佐剂效应.方法 将构建的P1C-IL-2核酸疫苗鼻饲免疫BALB/c鼠,ELISA检测免疫小鼠血清IgG滴度、IgG亚类和支气管肺泡灌洗液中IgA及IFN-γ、IL-4的水平;建立小鼠Mp感染模型,观察Mp攻击后小鼠肺组织炎症情况和支气管肺泡灌洗液中Mp菌落数的变化.结果 P1C-IL-2双基因疫苗组小鼠血清中的总IgG、IgG1、IgG2a亚类和支气管肺泡灌洗液中IFN-γ和IL-4水平均较PIC疫苗组小鼠显著增高(P<0.05),但两组支气管肺泡灌洗液IgA差异无显著性(P>0.05).用Mp滴鼻感染免疫小鼠,第1、3、6天P1C-IL-2双基因融合疫苗组小鼠肺组织炎症病理评分显著高于P1C单基因疫苗免疫组小鼠,两组小鼠支气管肺泡灌洗液中的Mp菌落数差异无显著性(P>0.05).结论 IL-2能显著增强PIC疫苗的免疫应答水平,但在感染早期也激发了较强的肺组织炎症.

  • Endoglin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

    作者:李蒙蒙;陆沈栋;刘欣欣;赵军;张洪涛;凌春华

    目的 研究不同转移潜能非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系中以及癌与癌旁组织中endoglin (ENG)的表达情况,探讨ENG在NSCLC的发生发展和转移复发中的作用.方法 体外培养5株NSCLC细胞及1株正常支气管上皮细胞(HBE),随机选取22例NSCLC手术切除后癌与癌旁组织样本,分别采用real time PCR及Western blot法检测其中ENG mRNA和蛋白表达情况.采用x2检验分析ENG的表达和临床资料之间的相关性.结果 高转移性3株肺癌细胞系中ENG mRNA和蛋白表达显著升高,而正常细胞株及低转移性2株肺癌细胞中ENG表达缺失.22例肺癌样本中,其中19例癌组织中ENG mRNA和蛋白呈阳性表达(86.36%),且表达量明显高于相对应的癌旁组织(P<0.01).ENG表达与患者临床病理特征年龄、性别、肿瘤大小、临床分期、病理分级、组织类型等均无关,而与患者淋巴结转移情况密切相关(P<0.01).结论 ENG在NSCLC中的表达与淋巴结转移显著相关,有可能作为预测NSCLC转移及预后的分子标志.

  • BPIFB1在铜绿假单胞菌引起的炎症反应中的调节作用

    作者:周伟强;冯秀艳;肖纯凌;李舒音;王春胜

    目的 研究杀菌性/通透性增强蛋白折叠结构1(BPIFB1)在铜绿假单胞菌引起的炎症反应中的作用机制和调节途径.方法 应用RNA干涉、特异性蛋白激酶抑制剂阻断法,通过ELISA、Western blot法测定BPIFB1与脂多糖(LPS)共同作用于RAW264.7细胞后膜表面CD14、TLR受体以及胞内相关信号转导通路分子表达水平的变化情况.结果 BPIFB1与LPS作用后RAW264.7细胞表面CD14、TLR4和MyD88的表达水平明显下降;当细胞中MyD88、TRAF6、NF-kB等蛋白分子的表达被各自特异性siRNA所阻断后,BPIFB1与LPS抑制细胞因子TNF-oα过表达的能力也被显著抑制;当用BPIFB1与LPS处理过的细胞用相应蛋白激酶抑制剂作用后,细胞内相关通路蛋白p38、pERK1/2、Akt1磷酸化水平被明显抑制.结论 BPIFB1与LPS结合通过阻抑相关胞内细胞因子的表达,降低了铜绿假单胞菌所产生的细胞炎性反应程度.

  • CXCR1/2拮抗剂G31P对大剂量顺铂所致小鼠急性肝损伤的保护作用

    作者:李传刚;舒晓宏;李媛媛;王曼睿;张金宝;孙彦翠;周婧媛;张肖;李墨林

    目的 利用趋化因子受体拮抗剂G31P探讨CXC趋化因子在大剂量顺铂(DDP)所致小鼠急性肝损伤中的作用及其可能的作用机制.方法 利用大剂量DDP(15 mg/kg体质量)诱导小鼠急性肾功能衰竭的动物模型,C57 BL/6小鼠被随机分为DDP用药组、DDP+ G31P用药组(G31P用药组)和生理盐水(NS)对照组.15 mg/kg体质量DDP单次腹腔内注射,500 μg/kg体质量G31P每日皮下注射1次,连用3d,等量NS对照.分别取每组小鼠各10只,观察其用药后的反应及生存时间.取对照组小鼠及DDP用药后3、6、24、48 h的DDP用药组和G31P用药组小鼠各10只,称重后内眦静脉取血检测肝、肾功能.剖腹取肝组织,制备10%肝组织匀浆检测其中髓过氧化物酶(MPO)及白细胞介素6(IL-6)的含量,HE染色进行肝组织形态学观察.结果 DDP用药后1周内,70%的DDP用药组小鼠死亡,而G31P用药组小鼠全部存活.DDP用药后48 h小鼠出现急性肾功能衰竭,G31P可有效预防DDP所致的小鼠肾损害.DDP用药3~6h后,小鼠外周血谷丙转氨酶(ALT)增高,并出现肝细胞变性、灶状坏死及炎细胞浸润;G31P能有效预防大剂量DDP所致的肝细胞坏死及炎细胞浸润.此外,DDP用药后6h,G31P用药组小鼠肝组织MPO及IL-6的含量显著低于DDP用药组小鼠(P<0.01).结论 G31P通过抑制中性粒细胞在肝组织内浸润及MPO和IL-6在肝组织内的释放从而对DDP所致的肝损害有保护作用,提示CXC趋化因子在大剂量DDP所致肝肾损害中发挥重要作用.

  • 肝内胆汁淤积症胎鼠脑组织中NPY的表达定位及意义

    作者:李红霞;刘伯锋;姚珍薇;邵勇

    目的 观察妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)孕鼠肝脏、胎鼠脑组织结构变化;分析神经肽Y(NPY)在妊娠期肝内胆汁淤积症(ICP)胎鼠脑组织中的表达及意义.方法 选择孕15dSD大鼠,用孕酮及乙炔雌二醇建立孕鼠ICP模型,观察孕鼠肝脏和胎鼠脑组织的病理变化;应用免疫组织化学染色方法及图像分析检测ICP孕鼠(20例,实验组)及正常孕鼠(20例,对照组)脑组织中NPY的表达及定量.结果 ICP孕鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆酸(TBA)明显升高;光镜下见部分肝细胞有颗粒样变性和空泡变性.电镜下见肝组织中毛细胆管扩张、微绒毛肿胀,毛细胆管周围肝细胞内见电子致密物沉积.胎鼠脑组织疏松,空泡样变性明显,部分细胞溶解,甚至消失.实验组胎鼠脑组织NPY表达免疫阳性神经元主要位于海马区,免疫阳性细胞被染成棕黄色,免疫阳性颗粒主要分布在胞质和细胞膜表面.对照组海马区仅少部分细胞膜着色或无免疫着色.胎脑组织NPY的免疫组化结果用图像分析仪测定,结果显示:实验组NPY平均光密度值(1.0486 +0.0182)明显高于对照组的(0.6297±0.0278),两者比较有显著性差异(P<0.05).结论 ICP母鼠肝脏及胎鼠脑组织有明显病变,胎鼠脑组织中的NPY表达升高,可能与胎脑组织受损有关.

  • 带myc标签的人HER2基因真核表达载体的构建及其生物学功能

    作者:宋金洁;王涛;徐小洁;符静;刘家宏;叶棋浓;江泽飞

    目的 构建人类HER2基因的真核表达载体,并对其促进乳腺癌细胞增殖效果及靶向药物敏感性进行验证.方法 采用PCR技术扩增出HER2基因,将其插入到pXJ-40-myc载体中,酶切和测序验证后,将其转染到乳腺癌ZR75-1细胞中,Western blot法检测其表达情况;CCK8法测定细胞生长曲线;加入靶向药物曲妥珠单克隆抗体后,观察转染细胞对药物的反应.结果 酶切和测序结果证实表达质粒构建成功;Western blot法结果显示,myc-HER2蛋白在转染细胞中成功表达;转染myc-HER2的乳腺癌细胞较空载体细胞生长较快;加入曲妥珠单克隆抗体后,转染myc-HER2的细胞生长明显受到抑制.结论 成功构建了带myc标签的HER2基因真核表达载体,为进一步研究曲妥珠单抗的耐药奠定了实验基础.

  • 2型猪链球菌双组分调控系统SalK/SalR抗吞噬机制的初步研究

    作者:付忠琳;骈亚亚;李雪琴;郑玉玲;马世良;袁媛;霍春月

    目的 确定双组分调控系统SalK/SalR在2型猪链球菌抵抗THP-1单核细胞来源的巨噬细胞(THP-MΦ)吞噬中的作用.方法 透射电子显微镜观察野生株05ZYH33和突变株△salKR荚膜的变化,革兰氏染色及免疫荧光方法观察猪链球菌与THP-MΦ细胞的相互作用,通过THP-MΦ细胞吞噬模型评价猪链球菌的抗吞噬能力.结果 透射电子显微镜观察发现突变株△salKR荚膜消失,革兰氏染色结果和免疫荧光标记实验显示salKR缺失导致更多的猪链球菌被THP-MΦ细胞吞噬,THP-MΦ细胞吞噬模型进一步证实突变株△salKR比野生株更容易被THP-1细胞吞噬.结论 双组分调控系统SalK/SalR通过调控荚膜的形成来抵抗THP-MΦ细胞的吞噬.

  • 嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强蛋白的表达和纯化及其在血清学诊断中的应用

    作者:刘黎;曹秀琴;杨志伟

    目的 表达和纯化出嗜肺军团菌巨噬细胞感染增强(MIP)蛋白,研究其在军团菌肺炎血清学诊断中应用价值.方法 将已构建成功的重组质粒pET-mip转化E.coli BL21感受态细胞,诱导MIP蛋白表达,运用SDS-PAGE分析和亲和层析法纯化.用DRG军团菌IgG/IgM/IgA的ELISA检测试剂盒筛出40份阳性血清和30份阴性血清,用纯化的MIP蛋白建立间接ELISA,同时与R&D的ELISA IgG、IgM、IgA试剂盒分别检测已筛选血清中的IgG、IgM、IgA抗体,然后对这两种方法进行比较,通过敏感性、特异性以及不同检测结果的一致性,来评价该方法的应用价值.结果 诱导相对分子质量(Mr)大约40 000的MIP融合蛋白在E.coli BL21中表达并纯化.纯化蛋白建立的间接ELISA分别检测筛选血清中IgG、IgM、IgA抗体与国外ELISA试剂盒(R&D)进行比较,IgG抗体的灵敏度88.5%,特异度95.5%,一致性Kappa值0.846(P <0.05),ROC曲线下面积0.927.IgM抗体的灵敏度89.3%,特异度97.6%,一致性Kappa值0.88(P <0.05),ROC曲线下面积0.947.IgA抗体的灵敏度90%,特异度95.2%,一致性Kappa值0.856(P<0.05),ROC曲线下面积0.931.结论 成功诱导了嗜肺军团菌MIP蛋白稳定表达并纯化,运用MIP作为包被抗原的军团菌肺炎的血清学诊断方法具有较高的诊断价值.

  • miR-203真核表达载体的构建和重组慢病毒的制备及其对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的影响

    作者:朱华宇;张翔;张晓;张瑞;杨安钢

    目的 构建含有人源microRNA-203(miR-203)的慢病毒表达载体并制备重组慢病毒,感染人脐静脉内皮细胞系(HUVEC-12),观察其对细胞增殖和迁移的影响.方法 使用PCR方法克隆miR-203前体分子的DNA片段,构建并包装过表达miR-203的重组慢病毒.利用慢病毒感染系统建立稳定过表达miR-203的人脐静脉内皮细胞株(HUVEC-Lv-miR-203).实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外源导入miR-203的表达情况.MTT法检测miR-203对HUVEC体外生长的影响,利用划痕恢复实验检测miR-203对HUVEC迁移能力的影响.结果 成功构建了过表达miR-203重组慢病毒表达系统.MTT法证实miR-203可在体外抑制HUVEC增殖,划痕恢复实验结果提示该细胞株的迁移能力受到显著抑制.结论 miR-203可以抑制体外培养的HUVEC增殖和迁移.

  • 血管紧张素-(1-7)抑制低氧诱导的大鼠肾小管上皮细胞转分化

    作者:任婷婷;贺红焰;喻小兰;樊均明;谭剑;刘建

    目的 观察血管紧张素-(1-7)[Ang(1-7)]对氯化钴(Co)诱导的低氧状态下正常大鼠近端肾小管上皮细胞(NRK52E)间质转分化的影响并探讨其可能机制.方法 体外培养NRK52E细胞,分为对照组、Co组、Ang-(1-7)组、Co+ Ang-(1-7)组,培养6d.免疫细胞化学染色法检测NRK52E细胞低氧诱导因子-1α (HIF-1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况;Westem blot法、细胞免疫化学染色法检测p-ERK1/2蛋白表达水平;酶联免疫吸附法检测细胞上清液I型胶原蛋白(Col-I)的含量.结果 6d后,与对照组比较,Co组与Co+ Ang-(1-7)组细胞HIF-1α、α-SMA、Col I及p-ERKI/2表达量显著增加(P<0.05);与Co组比较,Co+ Ang-(1-7)组细胞HIF-lα、α-SMA、Col I及p-ERK1/2表达量明显减少(P<0.05).结论 Ang-(1-7)可抑制Co诱导的低氧状态下肾小管上皮细胞间质转分化,减少细胞外基质的生成,可能是通过p-ERK1/2信号通路实现的.

  • 地塞米松对哮喘小鼠肺组织IL-21及其受体表达的干预作用

    作者:宫静;任敦强;罗雅玲;赖文岩;李俊红;王慰盈

    目的 研究慢性哮喘小鼠肺组织IL-21与IL-21受体(IL-21R)表达的变化,探讨地塞米松(Dex)对小鼠肺组织IL-21与IL-21R表达的影响.方法 SPF级BALB/c雌性小鼠33只,随机分为对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组,每组11只.卵清白蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠支气管哮喘模型;HE染色观察气道炎症程度;测量支气管壁厚度及平滑肌厚度;免疫组织化学和免疫印迹法分析小鼠支气管肺组织中IL-21蛋白与IL-21R蛋白的表达.结果 哮喘组小鼠支气管壁厚度及平滑肌厚度较对照组增加(P<0.01),地塞米松组支气管壁厚度与平滑肌厚度低于哮喘组(P<0.01).哮喘组小鼠肺组织IL-21蛋白与IL-21R蛋白的表达高于对照组(P<0.05),地塞米松组IL-21蛋白与IL-21R蛋白表达低于哮喘组(P<0.05).结论 哮喘小鼠肺组织IL-21与IL-21R的表达增强,地塞米松抑制哮喘小鼠肺组织IL-21与IL-21R的表达.

  • Wnt2在乳腺癌组织及患者血清中的表达及意义

    作者:郭变琴;吴立翔;汪先桃;涂植光

    目的 检测乳腺癌细胞株(MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7)、乳腺癌患者组织中Wnt2的表达,同时检测乳腺癌患者血清中Wnt2及CA-153表达量,并对二者的相关性进行分析.方法 采用实时荧光定量PCR及Western blot技术检测MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7中Wnt2 mRNA及蛋白水平;采用免疫组织化学对5例配对的癌旁组织、9例乳腺原位癌及9例侵袭性乳腺癌进行检测;同时采用ELISA检测15例健康成年女性、30例乳腺癌患者血清中Wnt2蛋白水平;电化学发光技术检测CA-153水平,并收集完整的病理资料与血清中Wnt2蛋白水平比较分析.结果 Wnt2在乳腺癌细胞株MDA-MB-231、ZR-75-30、MCF-7中未见表达;在乳腺癌组织上皮及间质细胞中呈高表达,而在配对的癌旁组织呈不表达或弱表达状态;30例乳腺癌患者血清中Wnt2及CA-153平均表达量显著高于健康成年女性(P<0.05),且Wnt2表达水平与CA-153呈正相关.结论 血清Wnt2可与CA-153同时作为乳腺癌筛查的血清学辅助指标,有助于提高乳腺癌检出的灵敏度.

  • 哮喘患者外周血单个核细胞不同细胞亚群上Notch分子的表达

    作者:龚芳;苏强;陈江;姜东林;潘宇红;黄璇

    支气管哮喘是一种由多种炎症细胞和炎症介质参与的慢性气道炎症性疾病,其中肥大细胞、嗜酸性粒细胞、T淋巴细胞为主要效应细胞[1].哮喘的发病机制迄今尚不完全明了,研究发现免疫功能异常是重要的致病因素[2].近来研究表明,Notch信号通路在中枢和外周免疫系统中各种细胞发育成熟的不同阶段,尤其是外周T细胞的分化过程中发挥重要作用[3],推测其可能与哮喘中细胞免疫功能异常有关.因此本研究应用实时荧光定量PCR和流式细胞染色的方法,对哮喘患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)不同细胞亚群上Notch分子的表达进行分析,以期为哮喘的发病的分子机制提供新的思路.

  • 2型糖尿病外周血调节性T细胞和脂肪因子水平与下肢动脉病变的关系

    作者:周小娟;何媛;荀春华;冷耀明;张娅;周洁;高恬

    2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)是一种伴有自身免疫反应、慢性低度炎症性疾病;免疫功能紊乱及脂肪细胞因子参与了T2D的发生发展.T2D患者中有5%~20%出现周围动脉病变(peripheral arterial disease,PAD),而PAD的主要病理变化是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS).CD4+ CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是一类具有免疫调节功能的T淋巴细胞,在维持机体免疫自稳、调控免疫应答方面起重要作用.Foxp3作为Treg发育关键的核转录因子[1],是目前公认的Treg特异性标记物.研究表明,CD4+ CD25+ Treg在AS的发生、发展过程中,可以抑制Thl和Th2病理反应,控制多种免疫炎症疾病的发展,在免疫耐受的维持中起重要作用[2].

  • T淋巴细胞活化在严重发热伴血小板减少综合征疾病发展中的作用

    作者:韩亚萍;李军;张永祥;严友德;吴玉英;刘艳;党旖旎;孔练花;邢益平

    目的 探讨严重发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSv)感染过程中,外周血T淋巴细胞活化对血液细胞、组织损伤和疾病发展的影响.方法 应用流式细胞术,动态定量监测严重发热伴血小板减少综合征(SFTS)患者外周血中T淋巴细胞表面CD69、HLA-DR、CD28和CTLA-4等表达水平,分析其细胞表面分子变化与血清酶学以及白细胞和血小板异常的关系.结果 SFTS患者T细胞活化分子CD69和HLA-DR在整个病程中表达水平明显增加(P<0.05);CD4+细胞表面CD28的表达在SFTSV感染早期明显减低,但随病程发展而逐渐回升至正常范围,而T细胞表面CTLA-4的高表达则出现在感染后的中晚期.SFTS患者病程中,血清ALT、AST和LDH、CK等均明显高于正常范围,并伴随着T细胞表面CD69、HLA-DR等活化分子下调和CTLA-4表达水平上调而逐步恢复正常;白细胞和血小板计数的低值出现在病程初期,伴随着T细胞表面CD69、HLA-DR等活化分子下调和CTLA-4表达增加逐渐回升至正常范围.结论 T淋巴细胞的过度活化可能是组织损伤的主要因素之一,而CTLA-4高表达,则可能是对机体T淋巴细胞过度活化的一种负反馈调节,在SFSTV感染者的免疫应答调节中发挥重要作用.

  • 可溶型B7-H3在原发性肝细胞癌患者血清中的表达及临床意义

    作者:王斐斐;于国华;刘同慎;王国艳;杨静;张光波;栾希英

    目的 检测协同刺激分子B7-H3在肝细胞癌患者血清及组织中的表达,并探讨其临床意义.方法 选取原发性肝细胞癌63例患者的癌组织和血清标本;5例肝血管瘤的瘤旁组织作为正常肝组织对照;同期收取50例健康体检人员外周血标本为正常对照.采用ELISA检测肝癌患者和正常人血清中可溶型B7-H3(sB7-H3)的含量,免疫组化检测正常肝组织和肝细胞癌组织中B7-H3的表达.结果 肝细胞癌患者外周血清sB7-H3含量为(4143.47±976,27) pg/mL,显著高于正常对照组(2076.18±605.42)pg/mL(P <0.05);且其表达水平与临床分期,是否远处转移及肝癌组织中是否阳性表达B7-H3等参数有关(P<0.05),与年龄、性别、组织学类型、淋巴结转移及肿瘤大小等临床病理参数无关;与血清学指标CA19-9呈明显正相关(P<0.05),但与AFP和CEA水平无相关性.结论 肝癌患者血清中sB7-H3表达明显高于正常人,B7-H3表达与疾病临床病理指标相关,表明检测sB7-H3可能对原发性肝癌的诊断有一定价值.

  • 抗人心脏型脂肪酸结合蛋白单克隆抗体的制备、表位鉴定及其应用

    作者:韩起;丛珊;易维京;陈莎;梁文斌;陈安;胡川闽;李淑慧

    目的 制备抗人心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)单克隆抗体(mAb),鉴定其基本特性并通过配对检测临床样本血清,对已配对的mAb进行表位鉴定.方法 通过已制备的H-FABP抗原和合成肽免疫BALB/c小鼠,常规融合筛选后进行抗体亚型鉴定、效价和亲和力检测,纯化mAb后通过间接ELISA、Western blot法对mAb进行特异性检测;将获得的mAb分别作为捕获和检测抗体,经过配对建立检测重组H-FABP的ELISA体系,并初步用于临床血清检测;采用生物信息学分析设计2段HFABP表位,通过原核表达获得其短肽并纯化,通过Western blot法对配对的mAb进行表位鉴定.结果 成功获得4株抗HFABP特异性mAb,亚类分别为IgG2a和IgG2b,抗体效价为1:51 200~1:1024 000,亲和力高可达到9.02×109 mol/L;经Western blot法和间接ELISA鉴定均能够特异检测重组H-FABP蛋白,经过配对发现mAb 3-H5和1-F10能够检测重组H-FABP,并在其临床血清样本检测中发现正常组和急性心梗组之间H-FABP水平具有显著性统计学差异;通过表位鉴定发现未知表位的mAb 1-F10能够特异识别位点为H-FABP的第86到第133位氨基酸.结论 制备了4株高特异性和高亲和力的抗H-FABPmAb,成功建立了检测临床样本血清中的ELISA体系,并对其表位进行了分析鉴定.

  • 植原体免疫主导膜蛋白A的原核表达载体构建、表达及其抗血清制备

    作者:梁楠楠;张丽君;赵海泉;刘仲健;罗焕亮;林彦星;刘宵宵

    目的 构建植原体免疫主导膜蛋白A (IdpA)的原核表达载体,表达并纯化目的蛋白,制备抗血清.方法 以重组克隆质粒pMD18-T-IdpA为模板PCR扩增IdpA基因片段,经酶切连接将IdpA基因克隆到原核表达载体pET-28a(+),重组质粒转化感受态E.coli BL21(DE3),PCR和双酶切进行鉴定.IPTG诱导重组菌表达IdpA蛋白,并进行纯化和鉴定,以纯化获得的IdpA蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠制备抗血清,并采用ELISA和Western blot法检测抗血清的效价和特异性.结果 成功构建了原核表达载体pET-28a(+)-IdpA,并在大肠杆菌中能稳定表达IdpA蛋白,经纯化获得了纯度大于90%的高纯度目的蛋白,用纯化的IdpA蛋白免疫BALB/c小鼠,获得了效价高于1:320 000的强特异性抗IdpA蛋白抗血清.结论 成功进行了IdpA的原核表达并制备了抗血清.

  • Sema 4D/CD100的基础和临床研究进展

    作者:刘蓓;金伯泉

    Sema4D/CD100是一种免疫信号素,参与了免疫和非免疫系统的多种重要的生理功能.本文对Sema4D/CD100分子及其受体的结构、生物学功能及其参与的多种病理生理过程进行综述.

  • mRNA疫苗研究进展

    作者:林曼;曾宪成;洪敏;马璟

    mRNA疫苗是具有免疫性、安全性及灵活性的基因疫苗.相比传统疫苗,mRNA疫苗能够刺激免疫系统产生平衡、长效的保护;被以Toll样受体为主的受体识别,进入细胞,在胞液中表达,通过刺激免疫系统产生B、T细胞等多种机制,达到预防流行病及抗肿瘤等作用.部分mRNA疫苗本身具有的疫苗佐剂特性,通过产生多种细胞因子等不同方式刺激免疫系统,增强免疫机体反应能力,缩短免疫应答时间,加大抗体合成释放能力,在新型疫苗制备具有极大的应用价值.本文系统介绍了mRNA疫苗的组成、研究进展及其优势.

    关键词: mRNA 疫苗 免疫系统
  • 诱发性系统性红斑狼疮小鼠模型研究进展

    作者:李荣达;董莉;林玲

    建立系统性红斑狼疮小鼠模型对于探索人类系统性红斑狼疮的病因、发病机制和治疗有重要意义.目前研究较充分的诱发性狼疮小鼠模型有:慢性移植物抗宿主病模型、烃类化合物诱发的模型、肽诱发的模型、脂多糖诱发的模型、空肠弯曲杆菌与弗氏完全佐剂诱发的模型、药物诱发的模型等.其常用品系、诱导方法、诱导所需时间及诱导后形成的自身免疫病变等有各自的特点.

  • 调节性T细胞在肝移植中的研究进展

    作者:王英;施明;刘振文;王福生

    同种异体排斥反应一直是阻碍器官移植发展的重要因素,诱导受体产生针对移植物的免疫耐受成为移植免疫学研究领域富挑战性的课题之一.调节性T细胞(Treg)是一群具有免疫抑制作用的细胞,在诱导免疫耐受方面扮演着不可或缺的角色.随着科技的发展,对Treg研究的不断深入,人们试图利用其免疫调节作用对器官移植进行干预和治疗.本文重点综述了Treg在肝移植中的特点及作用.

  • 调节性B细胞的研究进展

    作者:仇昊;王立新

    B细胞主要通过递呈抗原和分泌各种抗体发挥免疫学作用.近来研究发现,在B细胞中存在一种新的细胞亚群——调节性B细胞,它们可以通过分泌白细胞介素-10和转化生长因子-β1等抑制性细胞因子抑制获得性免疫介导的炎症反应发展和(或)加快炎症的恢复.相关研究表明这种细胞在感染性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤中发挥重要作用.本文综述了调节性B细胞的发现与来源、免疫调节作用机制及其与相关疾病的研究进展.

  • 新型壳聚糖纳米氧化铁磁珠的制备和理化性能测定

    作者:殷思贝;黄庆;府伟灵

    目的 研制一种新型壳聚糖纳米氧化铁磁珠,并检测其理化性质,为更加优化的免疫磁珠技术奠定基础.方法 采用凝聚沉淀的方法,通过在纳米氧化铁磁珠表面包被一层壳聚糖分子,制备出壳聚糖纳米氧化铁磁珠.并对磁珠的粒径大小、显微特征、壳聚糖外壳和磁珠内核的关系以及壳聚糖磁珠的理化性能进行检测、分析.结果 制作过程简便、易行,制作出的壳聚糖纳米氧化铁磁珠粒径均匀,成球性与稳定性好.结论 成功制备了新型纳米壳聚糖氧化铁磁珠,为靶向药物载体、细胞分离、核酸提取等应用提供了实验材料.

  • 靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328的构建及免疫原性分析

    作者:赵林;吴梅芝;陈展歌;李黄金;周联

    目的 构建靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328并分析其免疫原性.方法 采用重叠延伸PCR来扩增P64k-EGFR262-328融合基因,克隆至pMD18-T,经测序鉴定后与pET-21b构建重组表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3).目的蛋白经IPTG诱导表达后用Source Q阴离子层析和Ni-NTA亲和层析纯化,纯化的融合蛋白乳化后免疫BALB/c小鼠分析其免疫原性.结果 获得了2031 bp的融合基因,IPTG诱导后获得了相对分子质量(Mr)70 000大小的目的蛋白,经两步柱层析后,融合蛋白达到了95%以上的纯度,并在小鼠体内产生了高达1:16 000以上的抗体滴度.结论 成功制备了肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328.

细胞与分子免疫学分期目录
期数
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2012 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
2011 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
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