细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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过表达JNK2增强SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖及抗凋亡能力
目的 探讨c-Jun氨基末端激酶1(JNK1)或JNK2过表达对SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制.方法 将JNK1、JNK2分别与pHBAD-EF1-MCS-3FLAG-CMV-GFP载体结合,构建JNK1和JNK2的重组腺病毒表达载体,感染SCL-1细胞,优化感染条件,实时荧光定量PCR和Western blot法鉴定过表达效果.CCK-8法测定SCL-1细胞的增殖活性,细胞克隆形成实验观察细胞集落形成能力,划痕实验检测细胞划痕愈合率;流式细胞术检测细胞凋亡水平,实时荧光定量PCR检测JNK1、JNK2、c-Jun mRNA水平;Western blot法检测磷酸化c-Jun的蛋白水平.结果 JNK1、JNK2过表达腺病毒载体佳感染条件为感染复数(MOI)=100,感染48 h后,SCL-1细胞的JNK1和JNK2的表达水平显著升高.与对照组相比,过表达JNK1对SCL-1细胞的增殖和抗凋亡能力无显著影响,过表达JNK2的SCL-1细胞增殖和抗凋亡能力明显增强,且磷酸化c-Jun蛋白水平上调.结论 过表达JNK2可以增强SCL-1人皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖能力和抗凋亡能力.
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抑制葡萄糖转运蛋白1表达可降低神经母细胞瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力
目的 研究抑制神经母细胞瘤细胞中葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)的表达对肿瘤细胞增殖和侵袭迁移能力的影响.方法 运用特异性的小分子抑制剂WZB117抑制神经母细胞瘤细胞中GLUT1的表达,实时定量PCR检测GLUT1 mRNA水平表达,Western blot法检测其蛋白水平表达,CCK-8法检测细胞增殖能力,TranswellTM侵袭、迁移实验分别检测细胞侵袭、迁移能力.结果 WZB117作用于细胞后,GLUT1 mRNA水平增高,蛋白水平降低;细胞增殖受到抑制,细胞侵袭和迁移能力降低.结论 抑制神经母细胞瘤细胞中GLUT1的表达能减弱肿瘤细胞恶性生物学行为.
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miR-27a-3p通过阻断Wnt3a/β-catenin途径抑制大鼠肺纤维化
目的 探讨微小RNA-27a-3p(miR-27a-3p)对博莱霉素A5所致大鼠肺纤维化(PF)的影响及分子机制.方法 雄性SD大鼠45只,随机分为对照组、miR-27a-3p激动剂(miR-27a-3p agomir)组和miR-27a-3p拮抗剂(miR-27a-3p antagomir)组,每组15只.经气管内注入博莱霉素A5建立PF模型,给药后次日分别予生理盐水、miR-27a-3p agomir、miR-27a-3p antagomir尾静脉注射,每3d注射1次,共9次.第28天收集血液,ELISA检测血清1型前胶原蛋白羧基端前肽(P1CP)和3型前胶原蛋白氨基端前肽(P3NP)水平;处死大鼠,取肺组织,HE染色和Masson染色评价PF病变程度,实时荧光定量PCR检测miR-27a-3p、1型胶原蛋白(col)、Col3的mRNA水平,Western blot法检测Col1、Col3、Wnt3a、β联蛋白(β-catenin)的蛋白水平.结果 miR-27a-3p agomir处理明显增加肺组织miR-27a-3p表达,miR-27a-3p antagomir则降低miR-27a-3p表达,提示miR-27a-3pagoir/antagomir转染效率较高.与对照组相比,miR-27a-3p agomir显著减轻大鼠肺泡炎症和PF程度,而miR-27a-3p antagomir则明显加重大鼠肺泡炎症和PF程度.miR-27a-3p agomir组血清P1CP、P3NP水平降低、下调肺组织Col1、Col3、Wnt3a、β-catenin水平,miR-27a-3p antagomir组则作用相反.结论 miR-27a-3p通过抑制Wnt3a/β-catenin信号通路,下调Col1、Col3表达,发挥抗PF作用.
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呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿外周血心房钠尿肽和GATA3水平上调
目的 研究在不同程度毛细支气管炎患儿外周血中心房钠尿肽(ANP)信号变化和GATA结合蛋白3(GATA3)表达的关系,探讨ANP信号参与毛细支气管炎发病的可能机制.方法 选取正常儿童20例、轻度毛细支气管炎患儿16例、中重度毛细支气管炎患儿14例.ELISA检测血浆中ANP及白细胞介素4(IL-4)含量,实时荧光定量PCR检测外周血单个核细胞(PBMC)中钠尿肽受体A(NPRA)和GATA3 mRNA表达,Western blot法检测PBMC中NPRA、GATA3的蛋白水平.结果 随疾病炎症程度升高,患儿血浆内ANP、IL-4水平明显升高,同时PBMC中NPRA和GATA3的mRNA及蛋白表达也随之升高.结论 毛细支气管炎患儿外周血ANP、NPRA、IL-4和GATA3水平升高.
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CD11b激动剂leukadherin-1通过促进髓源性抑制细胞聚集和活化缓解小鼠内毒素休克发病
目的 研究CD11b激动剂白细胞黏附素1(LA1)对髓源性抑制细胞(MDSC)的聚集和免疫抑制功能的影响,并检测其对脂多糖(LPS)诱导的内毒素休克模型小鼠的治疗效果.方法 C57BL/6雌性小鼠腹腔注射LA1(40μg/g),12 h和48 h后,流式细胞术检测脾脏MDSC及其亚型粒细胞性髓源性抑制细胞(G-MDSC)和单核细胞性髓源性抑制细胞(M-MDSC)的比例.取C57BL/6雌性小鼠股骨及胫骨,体外诱导MDSC,通过实时定量PCR分析LA1处理对其免疫抑制相关因子白细胞介素10(IL-10)、NADPH氧化酶1(NOX1)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA水平的影响.用C57BL/6雌性小鼠随机分为PBS组、LA1组、PBS联合LPS组和LA1联合LPS组,通过流式细胞术检测MDSC、G-MDSC及M-MDSC的比例及巨噬细胞表面CD86和CD40的表达,HE染色检测肝肺组织病理损伤,原位末端转移酶标记技术(TUNEL)检测肝肺组织细胞凋亡情况,观察小鼠死亡率反映小鼠病情的严重程度.通过以上检测指标分析LA1对内毒素休克小鼠体内MDSC的聚集及对病情的影响.结果 LA1处理12、48 h,均显著上调小鼠脾脏中MDSC的比例.与对照组相比,LA1处理12 h可显著上调G-MDSC的比例;体外实验发现,LA1可诱导MDSC中IL-10、NOX1及iNOS高表达;体内实验中,与PBS联合LPS组相比,LA1联合LPS组脾脏MDSC及G-MDSC的比例显著增加,肝、肺组织损伤减轻,死亡率下降,巨噬细胞活化程度显著降低.结论 CD11b激动剂LA1可通过促进MDSC的聚集及其免疫抑制相关因子的表达缓解内毒素休克的发病.
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曲美他嗪激活自噬增加巨噬细胞胞外诱捕网抑制炎性体减少泡沫细胞胆固醇含量
目的 探讨曲美他嗪(TMZ)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导泡沫细胞形成的影响及可能的作用机制.方法 应用ox-LDL刺激RAW264.7细胞建立泡沫细胞模型,分为对照组(培养基)、模型组(60 μg/mL ox-LDL刺激)、氯喹(CQ)组(60 μg/mL ox-LDL联合10 mmol/L CQ处理)、TMZ联合CQ组(60 μg/mL ox-LDL联合80 μmol/LTMZ和10 mmol/L CQ处理).油红O染色评估泡沫细胞形成情况,ELISA试剂盒检测细胞内总胆固醇(TC)及游离胆固醇(FC)含量;单丹磺酰尸胺(MDC)染色观察自噬;Picogreen荧光染色及荧光定量PCR检测巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成及其含量;实时定量PCR检测自噬相关指标微管相关蛋白1轻链3β(LC3B)、泛素结合蛋白P62、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)、含胱天蛋白酶结构域凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、胱天蛋白酶1(caspase-1)及胆固醇流出相关基因ATP结合盒亚家族A成员1(ABCA1)、ATP结合盒亚家族G成员1(ABCG1)的mRNA水平.结果 与模型组相比,TMZ联合CQ组LC3B表达增加、P62表达减少,同时TC、FC、胆固醇酯(CE)/TC含量降低,此外NLRP3、ASC及caspase-1的mRNA表达水平均显著下调,MET形成增加.CQ组结果相反.结论 曲美他嗪可以通过激活自噬、增强巨噬细胞胞外诱捕网(MET)形成并抑制炎性体形成,从而促进泡沫细胞的胆固醇流出.
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枸杞多糖抑制核因子κB(NF-κB)通路降低骨关节炎软骨细胞炎性细胞因子水平
目的 探讨枸杞多糖对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖、细胞中免疫相关细胞因子水平的影响及其潜在机制.方法 收集骨关节炎样本,分离培养OA软骨细胞.以(0、100、200、400、800) μg/mL枸杞多糖作用OA软骨细胞,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖确定佳枸杞多糖剂量.以400 μg/mL枸杞多糖处理OA软骨细胞,实时荧光定量PCR检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、生长转化因子β(TGF-β)、核因子κBp65(NF-κBp65)的mRNA水平,Western blot法检测细胞iNOS、TGF-β、NF-κBp65的蛋白水平,ELISA检测培养OA软骨细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平.结果 当枸杞多糖剂量为(200、400、800) μg/mL时,OA软骨细胞活力明显低于0μg/mL组,且400 μg/mL组、800 μg/mL组细胞活力低于200 μg/mL组,而400μg/mL组和800 μg/mL组细胞活力无明显变化,选取400 μg/mL为适剂量.与对照组相比,400 μg/mL枸杞多糖处理的OA软骨细胞上清液中IL-1β和TNF-α水平降低,细胞中iNOS在mRNA和蛋白水平上表达下调,而TGF-β表达上调,同时,NF-κBp65蛋白水平降低.结论 枸杞多糖能够降低OA软骨细胞炎性细胞因子水平,抑制NF-κB信号通路,从而改善骨关节炎症损伤.
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转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)促进缺氧诱导的肾小管间皮细胞转分化
目的 研究长链非编码RNA转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)参与缺氧诱导的肾小管上皮细胞上皮间质转分化(EMT)调控的机制.方法 HK-2肾小管上皮细胞缺氧处理0、12、24、48、72 h,实时定量PCR检测MALAT1 mRNA和miR-100-3p水平.HK-2细胞分别感染特异性lncRNA慢病毒和miRNA慢病毒下调MALAT1和miR-100-3p,采用实时定量PCR检测MALAT1 mRNA和miR-100-3p水平,免疫荧光细胞化学染色检测上皮钙黏素(ECD)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅳ型胶原蛋白α1链(COL4A1)的表达.构建单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型,设置单侧输尿管未结扎组(对照组)、结扎7d组(UUO7d组)、结扎3周组(UU03周组)、腺相关病毒(AAV)组.在UUO动物模型中,采用AAV感染下调MALAT1水平后,采用HE和Masson染色检测各组肾组织病变情况,采用免疫组织化学染色检测肾组织ECD和α-SMA的表达.结果 在缺氧诱导的HK-2细胞中,随缺氧刺激时间延长,MALAT1表达逐渐升高,而miR-100-3p表达逐渐减低;缺氧诱导HK-2细胞72 h后,慢病毒感染下调MALAT1水平,miR-100-3p水平升高,同时ECD表达增加、COL4A1和α-SMA表达降低;缺氧诱导HK-2细胞72 h后,转染下调miR-100-3p水平,MALAT1水平无显著变化,miR-100-3p水平降低,ECD表达降低,COL4A1和α-SMA表达增加;体内实验:与对照组相比,UUO动物模型组MALAT1表达显著升高,而miR-100-3p表达明显降低;AAV组与3周组比较,ECD表达显著升高,而α-SMA表达显著降低.结论 MALAT1可通过负向调控miR-100-3p,进而促进COL4A1表达,促进缺氧诱导的HK-2细胞EMT,并且可以促进UUO肾病小鼠肾脏纤维化.
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TNF-α激活Wnt信号通路促进人结肠癌干细胞侵袭
目的 探讨炎症环境下Wnt信号通路对人结肠癌干细胞侵袭的影响.方法 以人结肠癌细胞系HT29细胞为材料,用流式细胞荧光分选技术(FACS)分选CD44+ CD133+的人结肠癌干细胞;流式细胞术及单细胞克隆形成实验对分选出的干细胞进行鉴定;肿瘤坏死因子α(TNF-α)处理CD44+ CD133+ HT29细胞建立炎症细胞模型,噻唑蓝(MTT)实验筛选TNF-α作用的适剂量及佳作用时间;Wnt信号通路抑制剂Dickkopf相关蛋白1(DKK1)作用于CD44+ CD133+ HT29炎症细胞,实验分为空白组、TNF-α处理组、加DKK1的TNF-α处理组.MTT实验检测各组细胞增殖情况,Western blot法检测Wnt信号通路中相关蛋白β联蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、c-Myc及上皮间质转化(EMT)相关蛋白上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)的表达情况,TranswellTM侵袭实验检测各组细胞侵袭情况.结果 流式细胞分选术成功分选出结肠癌CD44+CD133+ HT29干细胞.MTT实验筛选出TNF-α作用的适剂量为10 ng/mL,佳作用时间为48h.与空白组相比,TNF-α处理组中CD44+ CD133+ HT29细胞的相对存活率增加,TranswellTM穿膜的细胞数增加,β-catenin、cyclin D1、c-Myc表达升高,E-cadherin表达降低、vimentin表达升高;与TNF-α处理组相比,加DKK1的TNF-α处理组CD44+ CD133+ HT29细胞的相对存活率降低,TranswellTM穿膜细胞数减少,β-catenin、cyclin D1、c-Myc表达降低,E-cadherin表达升高、vimentin表达降低.结论 TNF-α通过激活Wnt信号通路促进结肠癌干细胞的侵袭能力.
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系统性红斑狼疮合并骨质疏松或骨坏死患者外周血IL-10、TGF-β1的水平检测及分析
目的 检测白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β1(TGF-β1)在系统性红斑狼疮(SLE)合并骨损害患者外周血中的含量并分析其临床意义.方法 本研究纳入56例SLE患者,ELISA检测患者血清IL-10和TGF-β1的水平.对56例患者临床资料进行回顾性分析,主要记录合并骨质疏松症及骨坏死情况.根据不同骨量分为:骨量正常组(14例)、骨量减少组(26例)、骨质疏松组(16例).根据是否合并骨坏死分为:未发现骨坏死组(49例)和骨坏死组(7例).采用SPSS18.0软件进行统计分析.Kolmogorov-Smirnov t检验数据是否正态分布.正态分布的计量资料,用双尾t检验分析;对于非正态分布的计量资料,采用Mann-Whitney U检验进行分析.结果 与骨量正常的SLE患者组相比,骨质疏松的SLE患者组TGF-β1水平降低、IL-10水平增加.与无骨坏死组的SLE患者相比,有骨坏死的SLE患者组IL-10水平升高,TGF-β1水平无显著变化.结论 伴有骨质疏松的SLE患者组外周血血清TGF-β1水平降低、IL-10水平升高,伴有骨坏死的SLE患者血清IL-10水平高于不伴骨坏死的患者.
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敲低丝酶抑制蛋白E2(serpin E2)抑制SW480结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移
目的 探讨丝酶抑制蛋白E2(serpin E2)对结肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响.方法 免疫组织化学染色对30名结肠癌患者癌组织和癌旁组织中serpin E2的表达量进行差异性检测,通过转染serpin小干扰RNA (si-serpin)至SW480细胞中,实时定量PCR检测SW480细胞中serpin E2 mRNA水平,Westemblot法检测serpin E2蛋白水平,CCK-8法和平板克隆形成实验检测SW480细胞的增殖,TranswellTM实验分别检测SW480细胞的侵袭与迁移能力.结果 结肠癌组织中serpin E2表达明显增加,敲低SW480细胞serpin E2水平后,SW480细胞的增殖、侵袭、迁移能力均显著降低.结论 下调SW480细胞中serpin E2水平抑制SW480细胞的增殖、侵袭和迁移.
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肾综合征出血热患者血浆褪黑素水平降低且与疾病严重程度及分期相关
目的 探讨肾综合征出血热(HFRS)患者血浆褪黑素(MLT)水平的变化及其与疾病分期或病情的关系.方法 分别采集14例HFRS患者急性期与恢复期血浆,同时采集14例正常对照者血浆,经萃取后,用竞争法酶联免疫吸附实验(CELISA)检测正常人和不同病情或病期HFRS患者血浆中MLT含量,分别比较正常人与不同病期、不同病情HFRS患者血浆中MLT水平,同时分析MLT水平与白细胞(WBC)计数等临床指标的相关性.结果 HFRS患者急性期血浆中MLT水平较正常人血浆MLT水平明显降低,较恢复期血浆MLT水平也明显降低.急性期中型、重型HFRS患者血浆中MLT水平较危重型患者低,且HFRS患者急性期与恢复期血浆中MLT水平与WBC计数呈负相关.结论 MLT可能参与调控HFRS患者体内炎症反应,从而影响HFRS的发病和疾病进程.
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阻断型抗人CD258(LIGHT)单克隆抗体的研制及生物学特性的鉴定
目的 分析CD258 (LIGHT)/单纯疱疹病毒侵入介体(HVEM)介导的信号通路对T细胞的协同刺激作用与机制.方法 以基因转染细胞L929/LIGHT为免疫原免疫小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶脱氧核苷(HAT)选择性培养基培养杂交瘤细胞.流式细胞术分析筛选阳性克隆,经过4次亚克隆化培养,获得1株小鼠抗人LIGHT单克隆抗体(mAb),检测其是否识别特异性抗原位点,体外外周血单个核细胞(PBMC)与LIGHT mAb共培养.结果 反复筛选并亚克隆获得一株鼠抗人LIGHT单克隆抗体7A8,亚类为IgG2b,轻链为κ型.流式细胞术分析该mAb特异性识别细胞表面的LIGHT分子.LIGHT mAb与转基因细胞的结合率受到HVEM-Ig融合蛋白干预而有所降低.PBMC与LIGHT转基因细胞体外共培养实验证实,该mAb阻断淋巴细胞活化和增殖,进一步减少细胞因子分泌.结论 成功获得一株特异性识别人LIGHT分子的单克隆抗体7A8,与HVEM-Ig融合蛋白结合L929/LIGHT的抗原表位不完全相同,是一株有阻断效应的功能型抗体.
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抗羊口疮病毒囊膜蛋白B2L小鼠多克隆抗体的制备和应用
目的 获取羊口疮病毒(ORFV)囊膜蛋白B2L并制备鼠抗B2L蛋白多克隆抗体.方法 采用PCR扩增获得B2L基因,并将其分别克隆至原核表达载体pET-32a和真核表达载体p3×FLAG-CMV-14.两个重组表达载体均经过鉴定,重组原核表达载体使用BL21大肠杆菌表达,异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达目的蛋白.通过Tris-尿素溶液洗去非目的蛋白,Western blot法鉴定.将定量的纯化蛋白免疫BALB/c小鼠,制备鼠抗ORFV B2L多克隆抗体.将真核表达重组质粒p3×FLAG-B2L转染Vero细胞、BHK-21细胞,使用间接免疫荧光法(IFA)对抗B2L蛋白的多克隆抗体鉴定,并应用于免疫组织化学染色检测患病羊唇部组织ORFV的表达.结果 Western blot法确定了制备的B2L蛋白的特异性;IFA结果表明制备的小鼠抗B2L多克隆抗体有特异性和反应原性,免疫组织化学染色法结果表明该抗体可以检测出患病羊唇部组织的ORFV.结论 成功制备了特异性的小鼠抗B2L多克隆抗体.
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S100A8和S100A9的天然免疫作用
天然免疫是机体免疫的第一道防线,小分子肽S100钙结合蛋白A8(S100A8)即钙粒蛋白A(calgranulin A)和S100A9在先天防御中有多效性.S100A8和S100A9可由粒细胞、单核细胞及上皮细胞等产生,是低分子量钙结合蛋白,常可形成二聚体,与肿瘤、抗菌、损伤修复等活动密切相关,并且在修复作用中可能对损伤引起的炎症反应有反馈调节并激活指纹图谱重编程.我们主要总结了S100A8和S100A9在肿瘤、黏膜防御、损伤修复中的天然免疫作用研究进展.
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肠道杯状细胞在肠道免疫调控中作用的研究进展
杯状细胞(GC)是人和哺乳动物的一种单细胞腺,分布于人体呼吸道、消化道、生殖道等部位的上皮中.肠道内的黏蛋白2(MUC2)主要由GC分泌,黏蛋白和水、无机盐等在肠道黏膜上皮表面形成黏液屏障,在抵御外源细菌和肠道固有微生物侵袭、维持肠黏膜动态平衡、调控微生物-宿主免疫应答中起重要作用.更重要的是GC及其分泌黏蛋白的缺陷与肠道多种疾病密切相关.我们总结了GC的结构和功能及其在肠道免疫调控中的研究进展.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
