细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
敲低Runt相关转录因子2(Runx2)表达抑制结肠癌细胞生长和迁移
目的 构建稳定低表达Runt相关转录因子2(Runx2)的HCT-8结肠癌细胞,检测对结肠癌细胞生长和迁移等生物学行为的影响.方法 首先采用Western blot法检测Runx2在不同结肠癌细胞系中表达,确定HCT-8结肠癌细胞高表达Runx2;将含有Runx2的慢病毒短发卡RNA(shRNA)的干扰载体与慢病毒包装辅助质粒共转染人胚肾HEK293FT细胞后,收集病毒上清,感染HCT-8结肠癌细胞.经嘌呤霉素筛选后,获得慢病毒介导的Runx2 shRNA的稳定表达细胞,利用实时定量PCR和Western blot法检测Runx2的shRNA的干涉效果;用CCK-8法检测细胞增殖活性、平板克隆形成实验检测癌细胞生长、TranswellTM侵袭实验和划痕愈合实验检测Runx2 shRNA转染对癌细胞侵袭和迁移的影响.结果 建立了稳定敲低Runx2水平的HCT-8结肠癌细胞;敲低HCT-8细胞Runx2表达水平后,癌细胞的生长、侵袭和迁移受到明显抑制.结论 敲低Runx2抑制结肠癌细胞的生长、侵袭和迁移.
-
大黄素抑制肺成纤维细胞增殖及转分化和胶原蛋白合成
目的 探讨大黄素对肺成纤维细胞增殖、向肌纤维母细胞转化、胶原合成的影响及相关机制.方法 用二甲基亚砜(DMSO)和(0、10、20、40、80、160) μmol/L大黄素处理MRC-5人胚肺成纤维细胞24、48、72 h,采用MTT法检测细胞增殖.根据细胞增殖实验结果,以DMSO及(40、80) μmol/L大黄素分别培养MRC-5细胞48 h后,采用荧光实时定量PCR检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β1(TGF-β1)、含1型血小板结合蛋白基序的去整合素样金属蛋白酶1(ADAMTS-1)、1型胶原蛋白(Col1)、Col3 mRNA表达水平;Western blot法检测上述分子的蛋白水平.结果 MRC-5细胞增殖抑制率随着大黄素浓度的增加和处理时间的延长而逐渐增高.在处理48 h后,与对照组相比,(40、80) μmol/L大黄素处理组α-SMA、TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平均降低,而ADAMTS-1 mRNA与蛋白水平升高;与40 μmol/L大黄素处理组比较,80 μmol/L大黄素处理组α-SMA、TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达进一步下调,ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达进一步上调.结论 大黄素可抑制肺成纤维细胞增殖及其向肌纤维母细胞转化,并通过抑制TGF-β1/ADAMTS-1信号通路减少Col1、Col3合成.
-
β干扰素联合全反式维甲酸通过抑制JAK2/STAT3信号通路抑制HepG2人肝癌细胞增殖并促进其凋亡
目的 研究β干扰素(IFN-β)和全反式维甲酸(ATRA)联合应用对HepG2人肝癌细胞增殖和凋亡的影响,并探讨Janus激酶2/信号转导子与转录激活子3(JAK2/STAT3)通路在其中可能的机制.方法 分别用1000 U/mL IFN-β、10μmol/L ATRA及1000 U/mL IFN-β联合10 μmol/L ATRA处理HepG2细胞24h,采用MTT法检测HepG2细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡.Western blot法检测磷酸化的Janus激酶2(p-JAK2)和磷酸化的信号转导子与转录激活子3(p-STAT3)、维甲酸-干扰素诱导死亡相关基因19(GRIM-19)、Bcl-2、Bcl-xl、Bax蛋白的表达.结果 IFN-β、ATRA作用于细胞后,HepG2细胞增殖受到抑制,同时诱导细胞发生凋亡,IFN-β联合ATRA联合处理作用更强;HepG2细胞中p-JAK2和p-STAT3蛋白的表达在IFN-β或ATRA作用下减弱,GRIM-19和Bax蛋白表达升高.IFN-β联合ATRA处理作用更强.结论 IFN-β联合ATRA通过抑制JAK2/STAT3信号通路抑制HepG2人肝癌细胞的增殖并促进其凋亡.
-
柚皮苷改善侧脑室灌注HIV-1糖蛋白120(gp120)所致的大鼠学习和记忆障碍
目的 研究柚皮苷对配体门控离子通道7嘌呤能P2X受体(P2X7)介导的1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)包膜糖蛋白120(gp120)所致大鼠认知障碍的保护作用.方法 水迷宫实验观察柚皮苷对侧脑室灌注gp120拟痴呆大鼠认知功能障碍的影响,反转录PCR检测海马组织P2X7受体mRNA的水平,Western blot法检测海马组织P2X7受体蛋白的水平.结果 Morris水迷宫可见柚皮苷治疗组大鼠的逃避潜伏期和寻找目标错误次数与gp120模型组相比缩短.Western blot法和PCR检测结果显示,柚皮苷治疗组P2X7受体蛋白和mRNA的表达与模型组相比有所下降.结论 柚皮苷具有改善侧脑室灌注gp120所致大鼠学习记忆障碍的作用,其机制可能与对抗P2X7受体表达上调有关.
-
吴茱萸碱增强Eca-109食管鳞癌细胞的放射敏感性
目的 探讨吴茱萸碱(Evo)对Eca-109食管鳞癌细胞放射敏感性的影响,探索其可能机制.方法 采用MTT法检测(10、20、40、60、80、100、120) μg/mL吴茱萸碱对Eca-109细胞生长的抑制作用,确定佳处理剂量.实验分为放射组(仅给予0、2、4、6、8GyX线照射处理)、联合组(给予80μg/mL吴茱萸碱和0、2、4、6、8GyX线照射处理),克隆形成实验检测吴茱萸碱对Eca-109细胞克隆形成能力的影响,流式细胞术检测细胞周期;Western blot法检测Eca-109细胞中Ku70、Ku80、DNA激活蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)、DNA双链修复蛋白Rad51蛋白水平.结果 吴茱萸碱呈剂量依赖性抑制Eca-109细胞的生长,80 μg/mL吴茱萸碱的抑制作用大.克隆形成实验结果显示80 μg/mL吴茱萸碱联合放射治疗后,平均致死剂量(D0)、准域剂量(Dq)值显著小于单纯放射时的值,放射增敏比(SER)为1.86±0.06,拟合的生存曲线左移.吴茱萸碱可减少放射诱导的细胞G2/M期阻滞,可显著抑制放射诱导的Ku70、Ku80、DNA-PKcs、Rad51蛋白上调.结论 吴茱萸碱具有增加食管鳞癌细胞株Eca-109放射敏感性的作用,可能与抑制细胞周期G2/M期阻滞和降低DNA损伤修复蛋白表达水平有关.
-
低氧联合TNF-α通过激活STAT3而非ERK1/2途径介导人肺微血管内皮细胞凋亡
目的 探讨低氧联合肿瘤坏死因子α(TNF-α)介导人肺微血管内皮细胞(HPMVEC)凋亡的信号通路.方法 低氧6、12、24h及(10、20、50、100) ng/mL TNF-α分别处理HPMVEC,使用MTT比色法检测各组的细胞活性;选用佳的低氧时间及TNF-α剂量联合刺激HPMVEC,流式细胞术检测caspase-3的活性,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexin Ⅴ-FITC/PI)检测各组细胞的凋亡情况,采用Western blot法检测各组细胞中磷酸化信号转导子与转录因子3(pSTAT3)及磷酸化胞外信号调节激酶1/2 (pERK1/2)的水平.结果 MTT法显示,低氧24h组的相对细胞活性低,100 ng/mL TNF-α处理组的相对细胞活性明显降低且对细胞活性的抑制呈现剂量依赖性;选用低氧24h及100 ng/mL TNF-α作为联合处理组,与空白对照组及单独处理组相比,联合处理组的caspase-3活性及细胞凋亡率均升高.Western blot结果显示,与空白对照组相比,联合处理组的pSTAT3表达明显升高,而pERK1/2的变化无统计学意义.而STAT3通路阻断剂S3I-201可使联合处理组的细胞凋亡率下降.结论 低氧状态联合TNF-α通过激活STAT3而非ERK1/2介导HPMVEC凋亡.
-
磷脂酰肌醇3激酶抑制剂BKM120抑制U251神经胶质瘤细胞增殖并促进其凋亡
目的 探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)抑制剂BKM120对U251神经胶质瘤细胞凋亡的诱导作用.方法 用(1、5、20) μmol/L BKM120处理U251细胞48 h后,采用CCK-8法检测BKM120对U251细胞增殖的影响,用异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexin Ⅴ-FITC/PI)双染法标记结合流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测Bax和Bcl-2的蛋白水平.结果 BKM120能抑制U251神经胶质瘤细胞的增殖并呈一定的浓度依赖性,大抑制率为78.3％.BKM120处理可引起U251细胞凋亡.Western blot结果显示BKM120处理可引起Bax蛋白水平增加,同时Bcl-2蛋白水平降低.结论 BKM120能抑制U251细胞的增殖并促进细胞凋亡.
-
Toll样受体7激动剂T7-利尿酸偶合物联合ROR1具有更强的抗乳腺癌作用
目的 探讨Toll样受体7激动剂T7-利尿酸偶合物(T7-EA)联合受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)抗乳腺癌的作用.方法 采用Syfpeithi表位预测软件预测ROR1的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位;ELISA检测4μmol/L T7-EA、4mol/L ROR1和4μmol/L T7-EA联合4μmol/L ROR1诱导小鼠脾淋巴细胞产生的γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素12(IL-12)和骨髓来源的树突状细胞(DC)产生的肿瘤坏死因子α(TNF-α);BALB/c小鼠皮下接种乳腺癌4T1细胞建立移植瘤模型,腹腔分别注射3 mg/kg T7-EA、15 mg/kg ROR1、3 mg/kg T7-EA联合15 mg/kg ROR1,每周1次,免疫治疗4次后处死小鼠检测肿瘤质量;ELISA检测血清中针对4T1细胞肿瘤蛋白的IgG水平;乳酸脱氢酶(LDH)法测定特异性CTL活性.结果 在预测的多条ROR1 CTL表位肽中选取序列PYCDETSSV作为疫苗多肽;体外实验显示T7-EA活化淋巴细胞呈现剂量依赖性,与ROR1相关多肽混合后不改变其活性;T7-EA与ROR1合用诱导小鼠脾淋巴细胞产生IFN-γ和IL-12,刺激DC产生TNF-α;体内实验显示T7-EA联合ROR1抑制肿瘤生长效果显著强于单用T7-EA组和ROR1组,T7-EA联合ROR1诱导的针对4T1细胞肿瘤蛋白的血清IgG水平显著高于T7-EA和ROR1单独给药组,T7-EA联合ROR1诱发的T细胞杀伤作用显著强于T7-EA和ROR1单独处理组.结论 T7-EA和ROR1联合应用具有更强的抗乳腺癌效果.
-
1,25-(OH)2-VD3下调糖尿病肾病肾脏组织p38MAPK和胶原蛋白的表达
目的 研究2型糖尿病肾间质纤维化中p38丝裂原激活蛋白激酶(p38MAPK)、Ⅲ型胶原蛋白(Col3)和Ⅳ型胶原蛋白(Col4)表达,及1,25-(OH)2-VD3对其表达的影响;探讨p38MAPK与Col3和Col4表达的相关性.方法 以高糖高脂饮食联合30mg/kg链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠2型糖尿病模型.将60只大鼠随机平均分为对照组、模型组、1,25-(OH)2-VD3治疗组[建模后给予6 ng/(100g·d)1,25-(OH)2-VD3治疗]、胰岛素组(建模后给予2～3U胰岛素治疗).干预8周后检测4组血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、24h蛋白尿水平;过碘酸希夫反应(PAS)染色观察肾脏病变情况;采用Western blot及免疫组织化学染色检测大鼠肾间质p38MAPK、Col3和Col4的表达;采用Spearman法进行相关性分析.结果 与模型组相比,1,25-(OH)2-VD3治疗组和胰岛素治疗组血清肌酐、尿素氮、24h蛋白尿和肾间质受损面积均降低;与对照相比,模型组p38MAPK、Col3和Col4水平增加,1,25-(OH)2-VD3治疗组和胰岛素治疗组明显降低;相关性分析发现24h蛋白尿与p38MAPK、Col3和Col4免疫组织化学的结果呈正相关,p38MAPK的表达与Col3和Col4表达呈正相关.结论 2型糖尿病大鼠肾间质组织p38MAPK、Col3和Col4表达上调,1,25-(OH)2-VD3可能通过p38MAPK下调Col3、Col4的表达改善糖尿病肾病肾组织纤维化.
-
脉冲电场抑制荷黑素瘤小鼠肿瘤生长但造成心肌损伤
目的 观察脉冲电场对荷黑素瘤小鼠肿瘤生长的抑制作用及对心肌细胞和心脏电活动的影响.方法 皮下移植B16黑素瘤细胞建立荷黑素瘤小鼠模型,随机分为4组.治疗组分别采用1 ms、3 ms、5ms脉冲宽度,100 V/cm场强、10 Hz频率的脉冲电场,10 min/d连续刺激15d.记录小鼠的心电活动,游标卡尺测定肿瘤体积,HE染色观察肿瘤病变情况,采用实时荧光定量PCR检测肿瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA) mRNA的水平,免疫荧光组织化学技术检测肿瘤组织PCNA蛋白的表达,透射电子显微镜观察心脏组织的超微结构改变,ELISA测定小鼠血清中肌钙蛋白T(cTnT)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)的水平.结果 与对照组相比,电刺激第7天后,各治疗组肿瘤体积均减小;治疗组瘤细胞胞质内充满黑素颗粒;各治疗组PCNA mRNA和蛋白表达均降低,其表达强度变化随着脉冲宽度增加而增强;3 ms组、5ms组小鼠心肌细胞出现损伤,且血清中cTnT、CK-MB表达均明显高于对照组.结论 脉冲电场可抑制荷黑素瘤小鼠的肿瘤生长,脉冲宽度增加,会加重心肌细胞的损伤.
-
枸杞多糖增加缺氧肺血管平滑肌细胞SIRT1表达并降低MMP-9及HIF-1α表达
目的 监测在缺氧条件下进行枸杞多糖处理后肺血管平滑肌细胞中沉默接合型信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达.方法 血管平滑肌细胞分为常氧(200 mL/L O2)培养的正常细胞、2 μmol/mL枸杞多糖处理的常氧细胞、DMSO处理的常氧细胞、DMSO处理的缺氧(100 ml/L O2)细胞、(0.5、1、2) μmoL/mL枸杞多糖处理的缺氧细胞、SIRT1的特异性激动剂10 mol/L白芦藜醇处理的缺氧细胞、非特异性激动剂1 μmol/L SRT-1720处理的缺氧细胞、SIRT1抑制剂0.5 μmol/L EX-527处理的缺氧细胞,培养于6、12、24h,实时定量PCR、Western blot法分别检测SIRT1、MMP-9及HIF-1α的mRNA和蛋白表达;在缺氧的血管平滑肌细胞中加入枸杞多糖处理12 h,实时定量PCR、Western blot法分别检测血管平滑肌细胞中SIRT1、MMP-9及HIF-1 α的表达.结果 缺氧条件下血管平滑肌细胞SIRT1 mRNA和蛋白水平降低,MMP-9及HIF-1α mRNA和蛋白水平升高.缺氧条件下用枸杞多糖处理后,SIRT1的含量随枸杞多糖剂量的增加而增加,同时MMP-9、HIF-1α的含量降低.SIRT1的特异性激动剂白藜芦醇可抑制MMP-9的表达.结论 枸杞多糖增加缺氧肺血管平滑肌细胞SIRT1水平、降低MMP-9及HIF-1α的水平.
-
IL-12通过AKT/mTOR/STAT3信号通路诱导肝癌细胞自噬
目的 探讨白细胞介素12(IL-12)对HepG2和SMMC-7721肝癌细胞自噬的影响及其可能的作用机制.方法 10 ng/mL 的IL-12处理肝癌细胞6h,通过Western blot法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC-3)和Beclin 1以及相关信号通路蛋白:蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、信号转导子与转录激活子3(STAT3)磷酸化水平的变化,免疫荧光技术及透射电镜观察细胞自噬的发生情况;使用STATHC或siSTAT3抑制STAT3的活性以及胰岛素样生长因子1(IGF-1)活化AKT之后,再次观察IL-12诱导细胞自噬的变化情况.10 ng/mL的IL-12处理肝癌细胞1、2、3、4、5d,CCK-8法检测细胞的增殖;10 ng/mL的IL-12处理肝癌细胞48 h,台盼蓝染色检测细胞死亡率;利用小干扰RNA (siRNA)沉默Beclin 1基因抑制自噬后,再次用CCK-8法和台盼蓝染色法检测IL-12对肝癌细胞增殖和死亡的影响.结果 IL-12能够诱导肝癌细胞发生自噬,抑制其增殖,降低其存活率;siRNA沉默Beclin 1基因后,细胞存活率降低;IL-12处理后p-AKT、p-mTOR、p-STAT3水平都显著降低;STATHC预处理可增强IL-12诱导的细胞自噬,而IGF-1预处理后,IL-12诱导的细胞自噬减弱.结论 IL-12通过抑制AKT/mTOR/STAT3信号通路来诱导HepG2和SMMC-7721肝癌细胞发生自噬,该自噬可减弱IL-12抑制肝癌增殖的能力.
-
锌指蛋白146(RNF146)对吡柔比星引起的小鼠睾丸精原细胞DNA损伤的保护作用
目的 评价锌指蛋白146(RNF146)对化疗药吡柔比星引起的GC-1小鼠睾丸精原细胞DNA损伤的保护作用.方法 采用1.0μg/mL吡柔比星处理的方法复制DNA损伤的小鼠GC-1精原细胞模型.构建小鼠rnf146慢病毒过表达载体pCDH-rnf146并包装rnf146过表达慢病毒,感染GC-1细胞上调rnf146的表达,Western blot验证过表达效率.评价RNF146对吡柔比星引起的GC-1细胞增殖抑制、凋亡增多及DNA损伤的保护作用.结果 成功构建了pCDH-rnf146重组质粒并包装具有良好感染效率的RNF146过表达慢病毒.溴脱氧尿苷(BrdU)掺入标记显示RNF146能够减轻吡柔比星引起的GC-1增殖抑制.原位末端转移酶标记技术(TUNEL)提示RNF146能够抑制吡柔比星诱导的GC-1细胞凋亡.彗星实验显示RNF146过表达能够有效保护吡柔比星作用下GC-1细胞DNA的完整性.结论 RNF146对化疗药吡柔比星引起的小鼠睾丸精原细胞损伤具有保护作用.
-
IL-23通过PI3K/AKT途径诱导甲状腺上皮细胞凋亡
目的 探讨白细胞介素23(IL-23)对人甲状腺上皮细胞增殖、凋亡的影响.方法 用(10、50、100) ng/mL IL-23处理Nthy-ori 3-1甲状腺上皮细胞24h后,用MTT法检测细胞增殖能力改变,藻红蛋白标记的膜联素Ⅴ/7-氨基放线菌素D(annexin Ⅴ-PE/7-AAD)双标记结合流式细胞术检测细胞凋亡水平变化,Western blot法检测磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、Bcl-2、Bcl-xL、活化caspase-3蛋白的水平.结果 与对照组相比,随着IL-23剂量增加,甲状腺上皮细胞的增殖能力逐渐下降;IL-23下调PI3 K/AKT信号蛋白的磷酸化水平并促进甲状腺上皮细胞凋亡.结论 IL-23通过调节PI3K/AKT途径促进甲状腺上皮细胞凋亡.
-
内源性β干扰素维持M1型巨噬细胞极化状态抑制肝癌细胞增殖和侵袭
目的 研究内源性β干扰素(IFN-β)对M1型巨噬细胞极化状态及M1型巨噬细胞介导抗肝癌细胞增殖和侵袭的影响.方法 体外建立单核系肿瘤细胞U937来源的M1巨噬细胞U937-M1模型,用实时定量PCR、ELISA及流式细胞术鉴定其表型.通过干扰IFN-β1基因或用抗体中和IFN-β,检测M1/M2巨噬细胞表型标志物表达的变化;用实时定量PCR和Western blot法检测干扰素调节因子1(IRF1)及IRF5的表达.收集不同处理组的U937-M1细胞培养上清为条件培养基(CM),分别培养HepG2细胞及SMMC-7721细胞,用CCK-8法和TranswellTM侵袭实验分别检测CM对肝癌细胞增殖和侵袭的影响.结果 与未激活型U937-M0细胞相比,U937-M1细胞白细胞介素12p35 (IL-12p35)、IL-12p40、IL-12p70、IL-23p19、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和CD86表达显著增强;而两组均低表达CD206.阻断内源IFN-β作用后,与U937-M1细胞相比,上述M1型巨噬细胞相关表型标志物表达明显减弱;反之,M2型巨噬细胞表型标志物IL-10和CD206表达增强;且IRF1及IRF5表达均减弱;阻断IFN-β作用后,M1型巨噬细胞对肝癌细胞增殖及侵袭的作用从抑制转变为促进.结论 阻断内源IFN-β后,M1型巨噬细胞极化状态以及U937-M1介导抗肝癌效应受到抑制;IFN-β可能参与调节IRF1和IRF5的表达,维持M1型巨噬细胞极化状态和功能.
-
短管兔耳草总黄酮降低阿尔茨海默病模型小鼠大脑皮层及海马组织炎性细胞因子的水平
目的 探讨短管兔耳草总黄酮(TF-LBM)治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制.方法 8月龄SAMP8小鼠50只,随机分为模型组,阳性药物组,低、中、高剂量TF-LBM组5组,每组10只;8月龄SAMR1小鼠10只为正常老化组.低、中、高剂量TF-LBM组以(150、300、600) mg/kg TF-LBM灌胃,阳性药物组以0.65 g/kg盐酸多奈哌齐灌胃,模型组和正常老化组用溶解TF-LBM等量蒸馏水灌胃.8周后,进行Morris水迷宫实验,计算各组小鼠定位航行潜伏期.行为学实验后进行取材,分别取各组小鼠大脑皮层组织及海马CA1区组织进行检测,应用放射免疫法检测药物对小鼠大脑皮层及海马白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量的影响.结果 短管兔耳草总黄酮对小鼠行为学干预结果观察:与模型组相比,正常老化组、阳性药物组、高剂量组小鼠逃逸潜伏期明显缩短;与正常老化组相比,模型组小鼠皮层组织中IL-1β、IL-6、TNF-α显著增高;与模型组相比,低剂量TF-LBM组IL-1β含量无明显差异,而中剂量TF-LBM组、高剂量TF-LBM组及阳性对照组IL-1β含量降低.低剂量TF-LBM组、中剂量TF-LBM组、高剂量TF-LBM组及阳性对照组IL-6含量均降低.低剂量TF-LBM组及中剂量TF-LBM组TNF-α含量无明显差异,而高剂量TF-LBM组及阳性对照组TNF-α含量降低.与正常老化组相比,模型组小鼠海马组织中IL-1β、IL-6、TNF-α显著增高;与模型组相比,低、中、高剂量TF-LBM组及阳性对照组IL-1β、IL-6、TNF-α含量均降低.结论 短管兔耳草总黄酮可以使SAMP8小鼠行为学得到改善,TF-LBM能够降低脑皮层及海马CA1区组织IL-1β、IL-6、TNF-α含量.
-
厄贝沙坦减轻液压脑损伤大鼠神经系统的炎症反应
目的 研究血管紧张素Ⅱ受体1(AT1)抑制剂厄贝沙坦对侧位液压脑损伤模型大鼠神经系统炎症反应的影响.方法 利用改良的侧位液压损伤装置建立大鼠颅脑损伤(FPBI)模型,术前及术后给予厄贝沙坦治疗.用激光多普勒测定局部脑区血流(rCBF)的变化,术前及术后1、3、5、7d,利用神经功能评分评估大鼠神经功能损伤,免疫组织化学染色检测大鼠皮质小胶质细胞和巨噬细胞活化.结果 FPBI手术后损伤局部脑区rCBF明显下降,神经功能评分降低,损伤区周围脑组织小胶质细胞和巨噬细胞明显增多,厄贝沙坦治疗组大鼠rCBF显著高于单纯FPBI组,神经功能得到明显改善,损伤区周围脑组织小胶质细胞和巨噬细胞活化程度较轻.结论 厄贝沙坦预处理能够缓解大鼠脑损伤造成的神经功能障碍,减轻炎症反应,发挥神经保护作用.
-
胰岛素联合硒抑制糖尿病心肌病大鼠p38MAPK/CBP通路减少心肌细胞凋亡
目的 观察胰岛素联合硒对糖尿病心肌病大鼠p38丝裂原激活蛋白激酶/CREB结合蛋白(p38MAPK/CBP)通路的影响.方法 50只SD大鼠随机分为空白对照组、糖尿病心肌病组、糖尿病心肌病胰岛素治疗组、糖尿病心肌病硒治疗组、糖尿病心肌病胰岛素联合硒治疗组.流式细胞术检测细胞周期;末端脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法观察心肌细胞凋亡;Western blot法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、cyclinE、Bax、Bcl-2、p38MAPK/磷酸化p38丝裂原激活蛋白激酶(p-p38MAPK)、CBP及Ku70的水平;免疫共沉淀法检测Ku70的乙酰化.结果 胰岛素联合硒明显抑制心肌细胞凋亡,增加Bcl-2表达,降低Bax、cyclin D1、cyclin E、p38MAPK/p-p38MAPK、CBP、Ku70和乙酰化Ku70的表达水平.结论 胰岛素联合硒通过抑制p38MAPK/CBP通路抑制心肌细胞凋亡.
-
下调T细胞肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)促进T细胞增殖并增强其免疫活性
目的 利用RNA干扰技术沉默小鼠脾脏T淋巴细胞肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)基因表达,观察TIPE2基因沉默对T淋巴细胞增殖及免疫活性的影响.方法 磁珠分选T739小鼠脾脏T细胞,采用Western blot法筛选能有效沉默T淋巴细胞TIPE2基因的小干扰RNA (siRNA)序列.采用TIPE2特异性siRNA、阴性对照siRNA转染T细胞,在转染24h后,流式细胞术检测T细胞表面CD69水平;转染72 h后,CCK-8法检测转染T淋巴细胞增殖情况,同时,ELISA检测转染T细胞上清液中白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)分泌水平.结果 成功筛选出特异性沉默TIPE2水平的siRNA序列,下调TIPE2基因表达后,T细胞CD69水平增加;T淋巴细胞增殖能力显著增强,IL-2和IFN-γ水平增加.结论 下调TIPE2基因水平,促进T淋巴细胞增殖和免疫活性.
-
Blimp-1和Bcl-6在不明原因复发性流产患者蜕膜组织中表达增强
目的 通过检测B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp-1)和B细胞淋巴瘤分子6(Bcl-6)在不明原因复发性流产(URSA)患者蜕膜组织中的表达水平,探讨两因子与URSA的关系.方法 收集URSA患者(URSA组)和正常怀孕者(对照组)的蜕膜组织,采用实时定量PCR法检测蜕膜组织Blimp-1和Bcl-6的mRNA水平,免疫组织化学技术检测蜕膜组织Blimp-1和Bcl-6的蛋白水平,采用Pearson相关分析Blimp-1和Bcl-6的相关性.结果 与对照组相比,URSA组蜕膜组织中Blimp-1和Bcl-6的mRNA均增加,Blimp-1的蛋白水平也显著增加,而Bcl-6蛋白表达水平增加不明显.Blimp-1和Bcl-6的mRNA表达水平显著正相关.结论 URSA组患者蜕膜组织中Blimp-1和Bcl-6表达增强.
-
巨噬细胞过表达miR-125b促进其凋亡
目的 探讨肺结核患儿外周血单个核细胞(PBMC)中miR-125b和靶基因Raf1原癌基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(RAF1)表达;观察miR-125b对巨噬细胞凋亡和细胞活力的调节.方法 收集和分离肺结核患儿和健康儿童的PBMC,采用荧光定量PCR检测miR-125b和RAF1的mRNA表达水平,Western blot法检测RAF1的蛋白水平.THP-1巨噬细胞分别转染miR-125b模拟物(miR-125b mimic)、阴性对照模拟物(NC-mimic)、miR-125b抑制物(miR-125b inhibitor)以及阴性对照抑制物(NC-inhibitor),共培养48 h;利用Western blot法检测THP-1巨噬细胞中RAF1表达,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexin Ⅴ-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡,CCK-8法检测细胞活力.结果 在结核患儿PBMC的miR-125b表达下调,RAF1的mRNA和蛋白水平都升高.在THP-1巨噬细胞中过表达miR-125b时,RAF1表达下调,促进巨噬细胞凋亡,降低细胞活力;在THP-1巨噬细胞中miR-125b表达被抑制时,RAF1表达升高,抑制巨噬细胞凋亡,提高细胞活力.结论 结核患儿PBMC中miR-125b水平降低,上调THP-1巨噬细胞miR-125b水平促进巨噬细胞凋亡并抑制细胞活力.
-
纯化血清不同倍比稀释法检测孕妇IgG型抗A或抗B抗体效价的比较
目的 探讨纯化后的血清不同倍比稀释法检测孕妇ABO血型IgG型抗A抗体效价、抗B抗体效价的可行性.方法 采用1∶16、1∶32、1∶4倍比稀释法对同一份效价为512的IgG型抗A抗体的孕妇血清进行检测,再采用以上倍比稀释法检测200例孕妇IgG型抗A抗体效价、抗B抗体效价.结果 三种倍比稀释法对同一份效价为512的IgG型抗A抗体孕妇血清检测的凝集强度与效价积分为45、47、45分;再采用三种倍比稀释法检测200例孕妇IgG型抗A抗体效价、抗B抗体效价,异常率为35.5％、36.0％、35.0％,三种方法检测的结果无显著性差异.结论 采用更高倍比稀释纯化后血清检测孕妇血清中IgG型抗A抗体或抗B抗体效价,具有敏感性适当、缩短批量检测时间、节约试剂耗材等优点,适合对大批量血标本进行检测,具有一定实际应用价值.
-
肺结核患者血清中可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTim-3)和IL-4水平升高但IFN-γ水平降低
目的 检测肺结核患者血清中可溶性T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(sTim-3)、γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素4(IL-4)水平.方法 收集48例肺结核患者和20例健康体检者外周血,ELISA检测血清中sTim-3水平;流式细胞微球捕获芯片技术(CBA)检测血清中IFN-γ、IL-4水平.Pearson法分析肺结核患者血清中sTim-3、IFN-γ及IL-4水平的相关性.结果 与对照组相比,肺结核患者血清中sTim-3和IL-4水平显著升高,IFN-γ水平显著降低;Pearson分析显示:sTim-3与IFN-γ、IFN-γ与IL-4呈负相关;而sTim-3与IL-4呈正相关.结论 肺结核患者血清中sTim-3和IL-4水平升高、但IFN-γ水平降低.
-
人牙髓细胞的三维培养及其白细胞介素1β的表达
目的 通过体外三维培养牙髓细胞,观察牙髓细胞形成细胞集落时炎症因子白细胞介素1β (IL-1β)的表达水平,探讨牙髓炎症发生的可能机制.方法 用U形底铺有琼脂糖的96孔板形成非黏附表面,每孔接种104个细胞形成三维培养体系.在细胞接种的0、24、48、72、96 h收集细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测体系中牙髓细胞IL-1β mRNA的表达水平,ELISA检测体系中牙髓细胞IL-1β蛋白的水平.结果 光镜下可见牙髓细胞接种20h后即可形成紧密的细胞聚集球体,培养至40h,细胞球体聚集更紧密.与培养0h的牙髓细胞相比,实时定量PCR检测发现三维培养24、48、72、96 h的牙髓细胞IL-1β mRNA表达水平明显增加,培养72、96 h牙髓细胞IL-1 β mRNA表达量高于培养24h的牙髓细胞;ELISA检测发现三维培养24、48、72、96 h的牙髓细胞较培养0h的细胞IL-1β蛋白水平明显增高,且培养72、96 h牙髓细胞IL-1β蛋白量高于培养24h的牙髓细胞.结论 三维培养牙髓细胞形成细胞集落能诱导牙髓细胞自发性表达和释放IL-1β.
-
人源性抗人FKBP52 IgG的表达和纯化
目的 将噬菌体抗体库中筛选到的抗52-kDa FK506结合蛋白(FKBP52)人源单链抗体(scFv)转换为完整人IgG并在真核细胞中表达.方法 噬菌体抗体库获得的5株抗人FKBP52-scFv,PCR扩增其轻重链可变区(VH/Vκ),利用同源重组技术将5对VH、Vκ拼接至分别包含有人K链及IgG1恒定区的真核表达载体pCMV/R-L、pCMV/R-H上,转染HEK293F细胞进行完整抗体表达,ELISA鉴定抗体活性,蛋白A柱分离纯化活性高的抗体,SDS-PAGE、Western blot法鉴定纯化后抗人FKBP52-IgG.结果 PCR及测序结果证实正确构建得到5对抗人FKBP52真核表达载体,转染HEK293F细胞后经ELISA鉴定均有完整抗体表达,对活性高的5号克隆进行抗体分离纯化,经SDS-PAGE及Western blot验证获得高纯度的特异性人源抗FKBP52-IgG.结论 成功将原核表达的抗人FKBP52-scFv转换为真核表达的完整人IgG.
-
CD4+TNFR2+调节性T细胞在免疫相关疾病中作用机制的研究进展
调节性T细胞(Treg)是一种具有免疫抑制功能的效应性T淋巴细胞,在维持机体的免疫自稳中发挥重要作用.肿瘤坏死因子受体2(TNFR2)主要表达于淋巴细胞并参与调节淋巴细胞的分化和存活.TNFR2可以稳定CD4+ CD25+ Treg的数量及其抑制功能.作为人和小鼠体内抑制功能强的Treg,CD4和肿瘤坏死因子受体双阳性(CD4+ TNFR2+)Treg参与多种疾病如肿瘤、移植排斥、结肠炎、关节炎、寄生虫感染等的免疫反应过程.CD4+ TNFR2+ Treg在各种免疫相关疾病中的作用及其机制已成为新的研究热点.
-
组织固有巨噬细胞的研究进展
组织固有巨噬细胞属于单核吞噬细胞系统,是一类异质性和可塑性很强的固有免疫细胞,在机体内各组织受局部微环境的调控,发挥吞噬、抗感染、免疫应答和免疫调节等功能,在内环境稳态的维持和各类病理生理过程中发挥重要作用.本文就组织固有巨噬细胞的来源、活化、调节及其在炎症反应及肿瘤发生发展中的作用等方面进行综述,旨在为更深入的研究及更好地应用于疾病的诊断和治疗提供新思路,以实现基础研究的临床医学转化.
-
过继T细胞免疫治疗的临床应用研究进展
过继T细胞免疫治疗是一种新的肿瘤治疗方法,其中细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞技术是目前临床开展应用多的一种过继免疫细胞治疗;而基因修饰的T细胞,即T细胞受体修饰的T细胞和嵌合抗原受体修饰的T细胞技术则是目前过继免疫细胞治疗的热点,已从基础研究开始转变为临床应用,尤其是嵌合抗原受体修饰的T细胞,由于其汇集单克隆抗体技术、疫苗技术、细胞免疫技术的优势于一体,在血液病的临床应用中显示出其显著的治疗效果,并且已被逐步扩展到实体瘤临床应用方面,本文简要综述了三种过继免疫细胞治疗的原理及临床应用.
-
IL-35与人类自身免疫性疾病的关系
白细胞介素35(IL-35)是IL-12家族成员之一,主要发挥抗炎及免疫抑制作用.IL-35是调节性T细胞发挥大抑制效应所必需的一种抑制性细胞因子,IL-35诱导的调节性B细胞在自身免疫性和感染性疾病中也发挥关键调控作用.自身免疫性疾病的小鼠模型研究结果提示,IL-35可通过IL-10依赖的机制在调控免疫反应性方面发挥作用,重组型IL-35可增强自身免疫调控,推测IL-35在人类疾病中也有相似的作用,并对IL-35的靶向治疗充满期待.现就IL-35的结构、功能以及在人类自身免疫性疾病方面的研究进展进行综述.
-
少突胶质细胞与小胶质细胞的细胞间通讯研究进展
正常生理情况下,大脑小胶质细胞与神经元之间存在广泛的细胞通讯,但少突胶质细胞与小胶质细胞之间的细胞通讯却知之甚少.当脱髓鞘疾病(如多发性硬化)发生时,少突胶质细胞是主要受损细胞.其实少突胶质细胞也具有较强免疫功能,它可通过表达多种受体调节中枢神经免疫反应、启动一系列保护或再生机制应对大脑应激并阻止进一步神经退行性变的发生.加强对小胶质细胞和少突胶质细胞之间细胞通讯的认识将有助于发现脑中免疫调节的新途径,有利于神经炎症和神经退行性疾病的治疗,本文将对这两种细胞之间的细胞通讯进行综述.
-
酸性鞘磷脂酶对免疫细胞的调节及与疾病的关系
酸性鞘磷脂酶(ASM)是一种鞘磷脂酶家族,在多种细胞内表达.ASM不仅介导了溶酶体代谢作用,还参与膜结构的调节和信号转导.其在调节各种生物学进程如细胞凋亡、细胞增殖、细胞代谢和疾病发生中发挥重要作用.ASM参与诱导免疫细胞分化、激活免疫细胞,从而发挥促炎效应;参与免疫细胞表面分子信号活化、启动凋亡过程,从而靶向治疗肿瘤.本文将从ASM介导的信号转导、免疫细胞分化调节和对疾病的影响等方面对ASM与免疫相关的作用进行综述.
-
交叉呈递的分子机制研究进展
交叉呈递是将外源性的抗原呈递给组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类的途径,对增强CD8+T细胞的免疫反应有着非常重要的作用.交叉呈递过程中增强抗原的稳定性可显著提高细胞交叉呈递的能力,而具有交叉呈递能力的细胞有多种潜在的分子机制来抑制蛋白酶的活性,从而降低抗原的降解速度来增强抗原的稳定性.此外,通过特异性的内体受体可以使抗原具有更好的稳定性,从而提高交叉呈递的效率.通过不同抗原装配模式可进一步提高细胞交叉呈递的能力.随着对交叉呈递的分子机制的不断深入了解,利用其潜在的免疫治疗效用将为疾病的治疗提供新的思路.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
