细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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组织工程支架的隔离层对新生软骨Ⅱ型胶原蛋白表达的影响
目的 研究隔离层在组织工程骨软骨复合支架中,对新生软骨Ⅱ型胶原蛋白表达的影响.方法 将向软骨方向诱导后的兔骨髓间充质干细胞接种到骨软骨复合支架的软骨支架上,然后将具有隔离层和没有隔离层的骨软骨复合支架分别植入兔膝关节骨软骨全层缺损处.术后3月和6月分别取材,进行新生软骨Ⅱ型胶原蛋白蛋白的免疫组化染色、Western blot法检测Ⅱ型胶原蛋白的表达、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定Ⅱ型胶原蛋白相关基因的表达.结果 与无隔离层的对照组相比,具有隔离层的骨软骨复合支架所形成的新生软骨的Ⅱ型胶原蛋白和基因的表达均明显增强(P＜0.05).结论 隔离层加入骨软骨复合支架后,能显著提高新生组织工程软骨Ⅱ型胶原蛋白表达的能力.
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日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj14-3-3)疫苗免疫BALB/c小鼠诱导免疫应答的动态检测
目的 研究日本血吸虫重组双歧杆菌属两歧双歧杆菌(Bb) (pGEX-Sjl4-3-3)疫苗免疫小鼠后其免疫应答的动态变化.方法 将重组疫苗分别采用口服灌胃和鼻内接种免疫BALB/c小鼠,分别于免疫后2、4、6、8、10、12、14、16、18、20和22周ELISA法测小鼠血清中IgG及其亚类、IgE和IgA及脾细胞培养液中IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平；MTT法测定脾细胞增殖；流式细胞仪检测脾细胞凋亡率及CD4+和CD8+T细胞亚群百分率.结果 口服组血清IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgE和IgA水平分别在免疫后8、6、6、4、8、10和6周达峰值.脾淋巴细胞增殖和凋亡水平均在免疫后4周达峰值；CD4+T细胞于8周达峰值,CD8+T细胞于14周达峰值.IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别于8、8、6和4周达峰值.鼻内接种组血清IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、IgE和IgA分别于4、6、4、4、8、10和8周达峰值.脾淋巴细胞增殖及凋亡水平也均在4周达峰值；CD4+T细胞于8周达峰值,CD8+T细胞于4周达峰值.IFN-γ、IL-12、TNF-α和IL-10水平分别于2、2、4和4周达峰值.口服及鼻腔内接种是两种较好的免疫途径,且后者优于前者.结论 该疫苗可诱导小鼠产生有效的免疫应答.
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降香中黄酮类化合物对脂多糖诱导的RAW264.7细胞抗炎作用研究
目的 筛选分离并鉴定降香中具有抗炎的化合物.方法 在脂多糖刺激的巨噬细胞模型上,筛选分离降香活性化合物,运用质谱与核磁分析鉴定化合物结构.采用Griess试剂法测定NO释放量,采用ELISA试剂盒检测TNF-α的分泌量.结果 从降香中分离得到sativanone(化合物Ⅰ)具有较强的抗炎活性,IC50为12.48 g/mL.异甘草素(化合物Ⅲ)、柚皮素(化合物Ⅳ)和甘草素(化合物V)具有一定的抗炎活性,IC50分别为18.33、42.59、29.43 g/mL.化合物Ⅱ和Ⅵ在50 g/mL不具有抗炎活性.在浓度3.125 ～50g/mL范围内sativanone、异甘草素、甘草素和柚皮素可以抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO释放,sativanone(化合物Ⅰ)能抑制脂多糖诱导RAW264.7分泌的细胞因子TNF-α的释放.结论 降香中的甘草素、异甘草素、柚皮素和sativanone可以降低LPS诱导的RAW264.7细胞NO的释放,呈剂量依赖关系,sativanone通过抑制炎症因子TNF-d发挥作用.
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人脐带间充质干细胞对血液恶性肿瘤细胞增殖的影响
目的 探讨脐带间充质干细胞(UC-MSCs)体外对白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤8种血液肿瘤细胞株增殖的影响.方法 用羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记肿瘤细胞,UC-MSCs与肿瘤细胞以不同比例体外共培养作为实验组,以肿瘤细胞单独培养作为对照组,流式细胞仪检测3d后肿瘤细胞的平均荧光强度及分裂的代次.结果 UC-MSCs对HL60、THP1、K562、RPMI8226细胞增殖起抑制作用；对Raji及NCIH929细胞增殖起促进作用；对Jurkat细胞仅在1∶1时起促进作用；而对于U937细胞,在UC-MSCs与U937比例为2∶1时起抑制作用,1∶4及1∶16时起促进作用,1∶1时无明显影响.结论 UC-MSCs对不同血液肿瘤细胞株增殖的作用不同.对4株白血病细胞系无明显的促进作用,对淋巴瘤细胞株及多发性骨髓瘤细胞株具有促进和抑制的双向作用,U937细胞株可能是进一步研究这种对立现象的良好模型.
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辅酶Q10对脑缺血再灌注损伤大鼠海马区Bcl-2的表达增强及Bax和GSK-3β表达的抑制
目的 探索辅酶Q10预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠Bcl-2、Bax和糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)表达的影响.方法 36只雄性SD大鼠随机分成假手术组(sham)、缺血再灌注组(I/R)和辅酶Q10预处理组(Q10).采用线栓法阻断大脑中动脉制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,HE染色观察组织学变化,免疫组化染色和Western blot法检测海马区Bcl-2、Bax和GSK-3β蛋白表达情况.结果 免疫组化染色显示海马区Ql0组较I/R组Bcl-2蛋白阳性表达率明显升高,Bax和GSK-3β蛋白阳性表达率明显下降；与I/R组相比,Western blot法结果表明Ql0组Bcl-2蛋白表达水平升高,Bax和GSK-3β蛋白表达水平下降,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论 辅酶Q10增强缺血再灌注损伤大鼠海马区Bcl-2蛋白表达,抑制Bax和GSK-3β 蛋白表达.
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肝细胞癌中ZHX2基因启动子甲基化增强AFP的表达
目的 探讨肝细胞癌中锌指和同源框2(ZHX2)基因启动子甲基化表达与血清AFP水平的关系,分析AFP基因的表达调控机制.方法 以0.5、1.0及5.0 μmol/L甲基化抑制剂5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-Dc)培养人肝癌细胞株HepG2,采用RT-PCR及Western blot法检测用药前后ZHX2及AFP基因的mRNA和蛋白表达差异.运用甲基化特异性PCR检测肝细胞癌组织38例中ZHX2基因启动子表达情况,分析其与血清AFP水平的关系.结果 HepG2可见少量ZHX2 mRNA扩增,未检测到ZHX2蛋白表达,而AFP却高表达；应用终浓度为1.0 μmol/L和5.0 μmol/L的5-Aza-Dc处理肝癌细胞6d,ZHX2表达明显增加,而AFP却表达下调.血清AFP高于25 ng/mL肝细胞癌组织中ZHX2启动子甲基化51.6％,明显高于血清AFP小于25 ng/mL组(P＜0.05).结论 ZHX2基因启动子甲基化与AFP基因的表达有关.
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不同毒力结核分枝杆菌感染对巨噬细胞铁蛋白及铁转运蛋白表达的影响
目的 探讨结核分枝杆菌国际标准强毒株H37 Rv株(简称H37Rv株)和卡介苗菌株(简称BCG菌株)分别感染巨噬细胞后,各感染组巨噬细胞内铁蛋白(Fn)和铁转运蛋白(FPN)表达量及其时相性变化.方法 分别用结核分枝杆菌H37Rv株和BCG菌株感染巨噬细胞RAW264.7细胞株,于感染后1、6、12、18、24h,应用ELISA检测各组感染巨噬细胞培养上清液中Fn和FPN的含量；应用Western blot技术检测上述时间点各组感染巨噬细胞内Fn的表达量.结果 不同菌株感染巨噬细胞后,巨噬细胞内Fn随处理时间延长表达逐渐增强；感染1h,正常对照组Fn的表达高于H37Rv组和BCG组；感染6h,感染组表达高于正常对照组,感染12 h,H37Rv组高于正常对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05)；感染18h和24h,H37Rv组＞BCG组＞正常对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).FPN的表达量随时间变化逐渐降低.与正常对照组相比,H37Rv组、BCG组FPN的表达均呈现较低水平,为H37Rv组＜BCG组＜正常对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 结核杆菌感染导致巨噬细胞内Fn表达增高,FPN表达降低,并且感染巨噬细胞Fn和FPN的表达均与结核分枝杆菌的毒力强弱有关.
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肾脏来源的间充质干细胞对大鼠急性肾脏损伤的保护作用
目的 研究肾脏来源的间充质细胞(KDMSC)对大鼠肾脏急性缺血损伤的作用并探讨其作用机制.方法 建立肾脏缺血再灌注模型,实验动物随机分为4组,每组10只:对照组、缺血模型组、培养基对照组、干细胞治疗组.贴壁法分离筛选获得间充质干细胞,并原代培养至第3代,采用CM-DiI荧光染料标记后,应用微量注射器将干细胞直接注射入缺血的肾脏部位,3d后观察大鼠血浆肌酐,尿素氮含量；RT-PCR观察肾脏组织IL-6,TNF-α表达情况；免疫组织化学检测KDMSC存活及血管内皮生长因子(VEGF)表达.结果 与模型组相比,干细胞组血浆肌酐(Cr)与尿素氮(BUN)水平明显下降(P＜0.05)；IL-6与TNF-α表达降低(P＜0.05)；免疫组织化学染色显示,3d后干细胞仍然存活,部分细胞与VEGF阳性细胞共存.结论 KDMSC移植能明显改善大鼠缺血再灌注大鼠肾功能,可能与抑制炎症因子释放有关.
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胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3在肺鳞癌的表达及预后分析
目的 探讨胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IMP3)在肺鳞癌中的表达及评价预后的意义.方法 应用免疫组化染色,检测92例肺鳞癌及癌旁组织中IMP3蛋白的表达,结合临床病理学指标及总生存期进行统计学分析.结果 肺鳞癌组织中IMP3阳性表达率明显高于癌旁正常组织(x2=70.145,P＜0.01),IMP3蛋白在肺鳞癌中的表达与组织分化程度低、有转移以及病理分期高密切相关(x2分别为9.811、11.926和7.136,P＜0.01)；癌组织中IMP3蛋白的表达与患者术后总生存期呈负相关(Log-rank=23.889,P＜0.01),IMP3阳性表达是预后的独立风险因素(风险比:0.436,95％置信区间:0.247 ～0.768,P＜0.01).结论 IMP3表达的肺鳞癌预后较差,可作为新的肺鳞癌标记物.
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半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1的基因克隆真核表达及细胞定位
目的 构建带FLAG标签的半胱氨酸和甘氨酸富集蛋白1(CRP1)的真核表达载体,明确该融合蛋白在人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞和乳腺癌ZR75-1细胞中的表达及定位情况.方法 采用PCR技术从乳腺cDNA文库中扩增出人CRP1基因,并将其插入到pCMV-Tag2B表达载体中；将重组质粒转染人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞,Western blot法检测转染细胞的表达情况；荧光显微镜观察pCMV-FLAG-CRP1在人胚肾293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞中的定位.结果 双酶切和测序鉴定表明,pCMV-FLAG-CRP1真核表达质粒构建成功；Western blot法检测pCMV-FLAG-CRP1转染293T细胞、肝癌HepG2细胞、乳腺癌ZR75-1细胞后成功表达；荧光显微镜下观察,在293T、HepG2、ZR75-1细胞中,CRP1在细胞质和细胞核中均有分布,且胞质信号强于胞核.结论成功构建pCMV-FLAG-CRP1真核表达载体,CRP1可在不同细胞中的胞质和胞核表达.
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丹参联合川芎嗪对肺纤维化大鼠血清、支气管肺泡灌洗液中TNF-α和TGF-β1水平的影响
目的 观察丹参联合川芎嗪腹腔注射对博来霉素(BLM)致肺纤维化大鼠血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、TGF-β1水平的影响.方法 将90只健康雄性SD大鼠,随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、地塞米松(DXM)组、不同剂量中药联合干预组(即C1组:小剂量、C2组:中剂量、C3组:大剂量)6组.NS组大鼠气管内灌注NS,其余各组大鼠气管内灌注BLM造模,每天给予NS(NS组、BLM组)、DXM(DXM组)或不同剂量中药联合(C1、C2、C3组)腹腔注射,各组分别于气管内灌注药物后第7、14、28天处死大鼠各5只.肺组织HE染色和Masson染色观察肺泡炎和肺纤维化改变；ELISA检测血清和BALF中TNF-α、TGF-β1的水平.结果 与NS组相比,BLM组第7天时肺泡炎较明显,第14天时有所减轻,出现肺纤维化,第28天时肺泡炎继续减轻,肺纤维化程度加重；DXM组不同时间点肺泡炎及肺纤维化程度均较BLM组减轻；C1组与BLM组相比,肺纤维化程度没有明显减轻；C2组和C3组大鼠第14天时肺泡炎及肺纤维化程度较BLM组明显减轻；C2组和C3组大鼠第28天时肺纤维化程度较BLM组明显减轻.与NS组比较,各组大鼠血清和BALF中TNF-α、TGF-β1水平均明显增加；与BLM组比较,DXM组和C2组、C3组不同时间点大鼠血清和BALF中TNF-α、TGF-β1水平均降低；与DXM组比较,不同剂量中药联合干预组不同时间点大鼠血清和BALF中TNF-α、TGF-β1表达均降低；以上比较差异均有统计学意义(P＜0.05)；C2组和C3组不同时间点血清和BALF中TNF-α、TGF-β1水平差异无统计学意义(P＞0.05).各组大鼠血清和BALF中TNF-α、TGF-β1的水平呈高度一致性.结论 中、大剂量丹参联合川芎嗪腹腔注射可减轻BLM致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,其机制可能与降低血清和BALF中TNF-α、TGF-β1的表达水平有关.
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白藜芦醇对小鼠CD4+T淋巴细胞活化的影响
目的 研究白藜芦醇对小鼠CD4+T细胞活化的影响.方法 将BALB/c鼠(SPF,雌性,9～10周龄)脾脏单个核细胞与不同浓度(0、10、20、40 mmol/L)的白藜芦醇共同孵育30 min后,分别采用刀豆蛋白A(ConA)、抗CD3抗体、抗CD3/抗CD28抗体刺激继续培养；分别共培养6h、36 h后收集细胞采用单克隆抗体抗CD4-PerCP和抗CD69-FITC或抗CD71-FITC染色后,流式细胞术检测CD4+T细胞CD69、CD71的表达.结果 白藜芦醇(≥10 mmol/L)可显著抑制抗CD3抗体引起的CD4+T淋巴细胞CD69表达(P＜0.01),其抑制作用呈剂量依赖关系.白藜芦醇(≥20 mmol/L)可显著抑制由ConA、抗CD3/CD28抗体引起的CD4+T淋巴细胞CD69表达(P＜0.05),其抑制作用呈剂量依赖关系.白藜芦醇(≥10 mmol/L)可显著抑制ConA引起的CD4+T淋巴细胞CD71表达(P＜0.05),其抑制作用呈剂量依赖关系.白藜芦醇(≥20 mmol/L)可显著抑制由抗CD3抗体、抗CD3/抗CD28抗体引起的CD4+T淋巴细胞CD71表达(P＜0.05),其抑制作用呈剂量依赖关系.结论 白藜芦醇具有抑制小鼠CD4+T细胞活化的作用,其抑制作用呈剂量依赖关系.
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慢性乙型肝炎患者外周血单核细胞Tim-3表达的检测及意义
目的 研究慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血单核细胞中T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(Tim-3)的表达及对其炎症因子生成的影响.方法 利用多色流式技术和荧光实时定量PCR(qRT-PCR),分别检测不同状态的CHB患者外周血单核细胞亚群表面Tim-3分子和Tim-3 mRNA表达水平.给予重组人galectin-9和脂多糖(LPS)共刺激CHB活动期患者外周血单核细胞,用ELISA检测培养上清中TNF-α、IL-1β和IL-6水平.结果 慢乙肝免疫耐受期患者(IT)外周血单核细胞表面Tim-3表达水平显著高于健康对照组(HC)和免疫活动期患者(IA)(P＜0.01),其中IT患者CD14+ CD16-和CD14+ CD16+单核细胞亚群中Tim-3的表达均高于IA患者,差异均有统计学意义.qRT-PCR结果进一步证实IA患者外周血单核细胞中Tim-3 mRNA的表达高于HC (P =0.040).IA患者CD14+单核细胞上Tim-3的表达与血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平呈正相关(r=0.362,P=0.028).重组人galectin-9和LPS共刺激IA患者外周血单核细胞比单独使用LPS刺激分泌更高水平的TNF-α,IL-1,IL-6.结论 CHB患者外周血单核细胞Tim-3表达上调,与血清ALT水平呈正相关,Tim-3/galeetin-9通路能够促进LPS诱导的单核细胞的炎症因子的分泌.
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子痫前期患者外周血树突状细胞对Th1/Th17细胞分化的影响
目的 观察正常妊娠妇女和子痫前期患者外周血单个核细胞(PBMC)来源的树突状细胞(DC)对Th1、Th17细胞分化的影响.方法 实验组为子痫前期疾病患者32例；对照组为正常妊娠妇女20例.分离正常妊娠组和子痫前期组PBMC,经贴壁获得单核细胞,加GM-CSF,IL-4和LPS培养诱导为成熟DC,流式细胞术检测表面分子标志CD14,CD80,CD83,CD86的表达,ELISA检测培养上清液中IL-23的含量.磁珠分选出CD4+T淋巴细胞,与正常妊娠孕妇外周血单核细胞来源的树突状细胞(N-DC)共同培养,同时添加细胞因子IL-2,或与子痫前期患者外周血单核细胞来源的树突状细胞(P-DC)、IL-2共同培养；或与N-DC共同培养,同时添加细胞因子IL-1p、IL-6;或与P-DC共同培养,并添加细胞因子IL-1β、IL-6.以上各组培养到第6天用流式细胞术检测CD4+ IFN-γ+ Th1、CD4+ IL-17+ Th17细胞比例.结果 P-DC中CD83、CD80、CD86的表达高于N-DC,差异有统计学意义(P＜0.05).P-DC与不同的细胞因子共同作用,促使CD4+T细胞分化为Th1、Th17细胞的能力高于N-DC,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 子痫前期患者外周血DC表型和功能的改变可能与患者免疫失衡有一定关系.
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冠心病患者血浆IL-35水平的变化及意义
冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary atherosclerotic heart disease,CHD)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)性疾病中常见也是严重的类型.AS是一种慢性炎症性疾病,往往表现为促炎相关因子活性升高和抗炎细胞与因子活性下降[1].具有抑制免疫活性作用的调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)及其自身分泌的抗炎细胞因子IL-10和TGF-β1 对AS有明确的保护作用.Treg分泌一种新型抑制性细胞因子白介素35(IL-35),IL-35具有调节免疫反应、阻止和延缓多种炎症性疾病发生、发展的功能[2].但IL-35在CHD患者外周血中水平的变化及其意义未见报道.本研究检测98例CHD患者和33例正常人血浆中IL-35水平变化,并分析与冠脉病变的关系,探讨IL-35在CHD发病机制中的可能作用.
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呼吸道合胞病毒感染细支气管炎患儿外周血树突状细胞的数量及其与临床症状的相关性
目的 检测呼吸道合胞病毒(RSV)感染细支气管炎患儿外周血髓样树突状细胞(mDC)及浆细胞样树突状细胞(pDC)的数量,并分析它们与疾病严重程度之间的关系.方法 采用PCR方法检测鼻咽部分泌物的呼吸道合胞病毒.通过流式细胞仪检测71例RSV感染(轻度、中度和重度)细支气管炎患儿及48例正常婴幼儿外周血mDC及pDC的数量.结果 RSV感染细支气管炎患儿外周血mDC数量明显高于正常婴幼儿(P＜0.01),pDC数量明显低于正常婴幼儿(P＜0.01).重度RSV感染细支气管炎患儿入院时外周血mDC、pDC数量均明显低于轻度组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 RSV感染细支气管炎患儿早期外周血mDC明显升高、pDC降低.mDC数量越高,提示其病情越轻；pDC数量越低,提示喘息越重.
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急性白血病患者浆细胞样树突状细胞TLR9的表达及功能分析
目的 检测Toll样受体9(TLR9) mRNA在急性白血病(AL)患者外周血浆细胞样树突状细胞(pDCs)内的表达水平及pDCs的功能.方法 免疫磁珠分选13例初诊未治急性髓细胞白血病(AML)、11例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者和15例健康对照外周血pDCs,real time-PCR检测pDCs内TLR9mRNA表达水平；用CpG ODN2216与pDCs共培养24h,ELISA检测上清液中IFN-α、IL-6、TNF-α水平.结果 AML-pDC和ALL-pDCs产生的IFN-α、IL-6、TNF-α水平分别为[(378.24±89.96)pg/mL,(57.98±29.68)pg/mL,(60.24±26.75) pg/mL]、[(352.56±67.34) pg/mL,(68.78±31.45) pg/mL,(53.67±25.98) pg/mL]明显低于正常对照组[(685.86±102.16) pg/mL,(91.25±32.12) pg/mL,(86.65±28.69)pg/mL] (P＜0.05)；AML-pDC、ALL-pDC中TLR9 mRNA的表达水平分别为0.34±0.25、0.41±0.23,均明显低于正常对照组(P＜0.05).结论 急性白血病患者pDCs内TLR9mRNA水平明显降低,可能与患者pDCs功能缺陷有关.
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人绒毛滋养细胞体外对T淋巴细胞的调节作用
妊娠是子宫和成熟的囊胚之间复杂的相互作用的结果[1].随着对滋养细胞研究的深入,发现母胎免疫是发生在母胎之间的免疫对话,且贯穿整个妊娠过程[2].作为半同种移植物的胎儿,在母体内安然成长至足月,得益于母胎之间的免疫耐受.母胎界面的胎儿面主要由滋养细胞组成,其起源于上皮细胞,是唯一与母体免疫系统直接接触的胎儿细胞,主要分泌β类趋化因子参与蜕膜免疫细胞的募集.近年来研究发现,RANTES(regulated upon activation normal T-cell expressed and secreted)、 CXCL12和CCL2是母胎界面起关键作用的趋化因子[3],但关于RANTES在妊娠早期对外周血T淋巴细胞Th1/Th2的影响却未见报道.本实验通过体外分离共培养滋养细胞和外周血T淋巴细胞,观察滋养细胞及其分泌的趋化因子RANTES对T淋巴细胞Th1/Th2型细胞因子的影响,为探讨早孕期母胎免疫机制提供实验依据.
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干扰素β1b对Th17细胞介导的复发-缓解型多发性硬化无效
目的 探讨干扰素β1b(IFN-β1b)在复发-缓解型多发性硬化(RRMS)中的疗效与外周血中Th17细胞的关系.方法 收集11例RRMS患者,给予6个月IFN-β-1b治疗.评估治疗前后扩展残疾状态评分(EDSS)及核磁共振(MRI)T2病灶数的变化.并通过流式细胞术检测治疗前患者外周血单个核细胞(PBMC)中Th17细胞的数量.结果 11例RRMS患者根据EDSS评分的变化分为治疗有效组和无效组.两组之间EDSS评分及MRI T2病灶数在治疗前无统计学差异(P＞0.05),治疗后有效组EDSS评分和MRI T2病灶数较无效组明显减少(P＜0.05).治疗前PBMC中Th17细胞数量在无效组较有效组明显增加(P＜0.05).结论 IFN-β-1b治疗对Th17细胞介导的RRMS无明显疗效.
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副溶血性弧菌鞭毛蛋白单克隆抗体的制备及其活性分析
目的 制备副溶血性弧菌鞭毛蛋白单克隆抗体(mAb)并建立双抗夹心ELISA.方法 采用差速离心法提取副溶血性弧菌ATCC 17802菌株的鞭毛蛋白,并以此为抗原免疫BALB/c小鼠,抗血清效价达到1∶32 000时,取脾细胞与生长良好的对数期Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合.多次克隆化培养后获得杂交瘤细胞株并制备腹水,纯化后得到抗体.结果 获得6株持续、稳定分泌抗副溶血性弧菌鞭毛蛋白mAb的杂交瘤细胞株,命名为VpNo.1～VpNo.6,抗体效价高达1∶2×106.对抗体进行了Ig类和亚类检测以及Western blot法鉴定,其Ig亚类依次为IgGl、IgG1、IgM、IgG1、IgG2a和IgM.SDS-PAGE结果显示,提取出的鞭毛蛋白相对分子质量(Mr)为42 000并且纯度较高.采用VpNo.6抗体建立了副溶血性弧菌双抗夹心ELISA,该方法的检测灵敏度达到103 CFU/mL菌液,通过采用134株副溶血性弧菌和74株非副溶血性弧菌进行特异性实验,结果表明134株副溶血性弧菌呈阳性反应,74株非副溶血性弧菌呈阴性反应,VpNo.6抗体具有非常好的特异性.在基质添加试验中,低检出限为21CFU/g样品.结论 成功制备了副溶血性弧菌鞭毛蛋白mAb,并将其应用于双抗夹心ELISA,该方法的检测灵敏度达到1×103 CFU/mL菌液,与所测试的非副溶血性弧菌没有交叉反应.
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小鼠多囊蛋白1氨基端多克隆抗体的制备和其生物特性分析
目的 制备针对多囊蛋白1(PC1)胞外区的抗体,为分析PC1胞外区生物特性和功能提供工具.方法 根据生物信息学分析结果,PCR扩增编码小鼠Pkd1的氨基端474E-640L的eDNA片段.将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上,在IPTG诱导下产生小鼠Pkdl抗原(mPkd1-N).纯化浓缩目的蛋白并制备兔抗PC1氨基端多克隆抗体(mPkd1-Np),并以Western blot法、免疫组化以及免疫荧光方法分析该兔抗PC1氨基端抗体的特异性.结果 成功地构建了mPkd1-N片段真核及原核表达载体,在大肠杆菌中实现表达,并制备了抗小鼠PC1氨基端的多克隆抗体mPkd1-Np.通过生化和细胞学方法证实了该抗体针对PC1的特异性.结论 成功制备了高效价、特异性的兔抗mPkdl-Np多克隆抗体.
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玉米赤霉烯酮单克隆抗体的制备及胶体金免疫层析法的建立
目的 制备并鉴定玉米赤霉烯酮(ZEN)单克隆抗体(mAb),并初步建立ZEN的胶体金免疫层析检测方法.方法 采用活泼酯法制备人工抗原ZEN-OVA和ZEN-BSA,以ZEN-OVA作为免疫原制备ZEN mAb.ELISA法鉴定抗体效价、亚类、特异性等.ZEN mAb-胶体金复合物包被于胶体金结合垫上,检测原ZEN-BSA和山羊抗小鼠lgG分别结合于硝酸纤维膜上作为检测线(T线)和质控线(C线),建立ZEN的胶体金免疫层析检测法.结果 经紫外分光光度法和SDS-PAGE鉴定,ZEN人工抗原合成成功.经3次克隆化后,筛选出1株能稳定分泌ZEN mAb的杂交瘤细胞株1G4,腹水效价为1∶1.6×105;抗体亚类为IgG2b；对ZEN的IC50为10.2 ng/mL,检测限为0.58 ng/mL.mAb对ZEN具有高度的特异性,除与β-玉米赤霉烯醇的交叉反应率为12.8％外,与其他ZEN代谢物α-玉米赤霉醇、β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮及其他相似毒素呕吐毒素、伏马毒素、赭曲霉素A等几乎无交叉反应.制备的胶体金免疫层析试纸条在5 min内即可肉眼观察到结果,对ZEN的低检测限为100 ng/mL.结论 成功制备出1株ZEN mAb,并初步建立了其胶体金免疫层析检测方法,低检测限为100 ng/mL.
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Th17细胞、调节性T细胞的平衡及与缺血性脑卒中的关系
Th17细胞与调节性T细胞(Treg)是近年来研究发现的与Th1、Th2细胞完全不同的CD4+T细胞系,二者在功能和分化过程中相互对抗.机体在正常状态下二者保持平衡,有利于免疫稳定状态的维持；若二者失衡就会产生一系列免疫病理反应.Th17细胞与Treg的失衡与人类许多疾病有密切关系.缺血性脑卒中后激活炎症级联反应,引发局部和(或)全身的免疫应答,进一步加重脑组织的损伤.本文综述了Th17/Treg平衡的调节,以及二者与缺血性脑卒中的关系.
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CTLA-4单克隆抗体的研究进展
细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)为共刺激分子,表达于活化的CD4+和CD8+T细胞,与其配体B7分子结合后产生抑制性信号.CTLA-4阻断性抗体可用于治疗多种肿瘤如前列腺癌、黑素瘤等,抗体引起抗肿瘤反应同时可能导致机体病理性损伤.迄今,研究为深入的CTLA-4抗体是Ipilimumab,Ipilimumab已经用于Ⅲ期黑素瘤的临床研究.现就CTLA-4单克隆抗体(mAb)药物在疾病治疗中的研究进展进行综述.
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诱骗受体3与肿瘤关系的研究进展
诱骗受体3(DcR3)是新近发现的肿瘤坏死因子受体超家族新成员,是一种可溶性受体,在一些疾病尤其是恶性肿瘤中过表达,与死亡受体3(DR3)相反,DcR3缺乏死亡结构域.过去对于DCR3的研究集中肿瘤,即DcR3可阻断细胞的凋亡进而造成免疫逃逸和化疗耐受,近来对于DcR3的研究多集中于炎症,以及DcR3及其类似物在特定疾病如自身免疫性疾病中的预防和治疗作用,本文综述了DcR3在肿瘤、炎症及其临床应用中的研究进展.
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巨噬细胞的极化及其调控的信号分子和转录因子
巨噬细胞作为机体重要的免疫细胞,在炎症反应中具有重要的调节作用.研究表明,巨噬细胞具有较强的可塑性和异质性,在体内外不同微环境的影响下,尤其是在炎症反应过程中可分化成具有不同功能的表型即极化.由于巨噬细胞的极化和分型与炎症相关性疾病的发生发展有着密切关系,因此相关研究已成为近年来研究的热点.本文就相关领域的新研究进展进行综述.
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国内丙型肝炎病毒抗体酶联免疫法试剂评价参考品体系的建立
目的 建立国内丙型肝炎病毒抗体酶联免疫法(EIA)诊断试剂评价参考品.方法 收集2009-03/2010-10期间来自全国不同省份4833份供血人员血清样品,用国产5种抗HCV EIA试剂和国外2种抗HCV EIA试剂分别进行初筛和复检；用Chiron的RIBA HCV 3.0 SIA、Roche HCV定量试剂对筛选样品进行了确认试验,对确认阳性样品进行HCV基因型检测；选择不同强度的确认阳性、阴性样品、混合阳性系列稀释样品、部分特殊样品等建立抗HCV诊断试剂评价参考品.结果 设立了抗HCV诊断试剂评价参考品,包含30份强、中、弱阳性的抗HCV混合阳性样品,10份单片段抗体阳性确认阳性样品,6份评价灵敏度系列稀释样品,30份抗HCV确认阴性样品.结论 本研究设立的抗HCV评价参考品检测结果可靠,样品涵盖背景丰富,对新产品研发和筛选评价高质量的抗HCV诊断试剂有一定参考价值.
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复制子荧光素酶表达质粒pSVK-luc的构建与应用
目的 为研究复制子DNA疫苗在生物活体内的表达情况,构建含有荧光素酶报告基因的复制子表达质粒pSVK-luc.方法 PCR扩增荧光素酶报告基因,克隆入DNA复制子载体pSVK,酶切鉴定和测序分析筛选阳性重组质粒pSVK-luc；化学法转染人胚肾293T细胞,流式细胞术和免疫荧光法检测荧光素酶基因在293T细胞中的表达；利用基因电穿孔导入仪递送重组质粒至BALB/c小鼠股四头肌,活体成像仪动态观测荧光素酶基因在小鼠体内的表达.结果 pSVK-luc经相应酶切和测序鉴定,与预期设计完全一致.流式细胞术和免疫荧光检测均可见荧光素酶基因表达；同时活体成像仪也能检测到该基因在小鼠体内的表达.结论 pSVK-luc表达质粒的构建成功将为复制子DNA疫苗体内作用机制研究和体内电穿孔递送条件的优化奠定实验基础.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
