细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
- 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子: 0.81
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1007-8738
- 国内刊号: 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
白薇根部提取物上调部分肝切除后血管再生相关蛋白的表达促进肝脏新生血管形成
目的 观察白薇提取物对部分肝切除后血管再生过程的影响,探讨其调节作用的相关分子及机制.方法 昆明种小鼠20只,随机分为对照组、白薇组.两组分别采用一次性切除部分肝左外叶.实验组则在术后开始灌胃给药白薇提取液(50 g/ks),2次/d.术后1~8d,每天处死2组小鼠各1只,取肝左外叶.免疫组织化学技术检测血管内皮生长因子C(VEGF-C)、VEGF-A、淋巴管内皮透明质酸受体1(LYVE-1)、CD34的表达.结果 与对照组相比,白薇组中CD34表达明显升高,分布范围扩大,VEGF-C、VEGF-A、LYVE-1的表达早期下降,后期则显著增加.结论 白薇上调VEGF-A、VEGF-C、LYVE-1的表达,促进血管新生.
-
流式细胞术检测全血白细胞吞噬白念珠菌方法的建立和应用
目的 建立全血白细胞吞噬白念珠菌的流式细胞术检测方法.方法 绘制白念珠菌生长曲线后,取生长对数中期的白念珠菌,以活体细胞示踪荧光探针二乙酰羧基荧光黄琥珀酰亚胺酯(CFDA-SE)标记,与以PC5标记的CD45单克隆抗体预标记的全血白细胞,在37℃分别反应10、30、60 min(MOI≈10∶1),以流式细胞术观察CD45阳性细胞对白念珠菌的吞噬情况.结果 白念珠菌在液体酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(YPD)中37℃、50 mL/L CO2培养,第5~11 h为对数生长期.10 mmol/LCFDA-SE染色30 min,可使白念珠菌均匀着色;CD45阳性细胞和标记的白念珠菌作用10、30、60 min,CD45阳性细胞中中性粒细胞的吞噬率分别为(80.1±6.1)%、(83.8±7.7)%和(92.3±11.2)%;单核细胞的吞噬率为(11.2±3.6)%、(15.8±4.4)%和(27.7±6.8)%,淋巴细胞作为无明显吞噬作用内参,其吞噬率为(0.9±0.3)%、(0.8±0.4)%和(5.2±1.6)%.结论 成功建立流式细胞术检测全血白细胞吞噬白念珠菌的方法,全血白细胞与白念珠菌共孵育30 min是较为合适的作用时间.
-
天然免疫相关蛋白分子SPLUNC1载体构建及蛋白稳定表达
固有免疫应答在保护机体避免细菌感染中发挥着重要作用,如果固有免疫应答出现紊乱,则会加重感染和炎症反应.在呼吸道,黏膜分泌的多种蛋白如杀菌性/通透性增强蛋白(bactericidal/permeabilityincreasing protein,BPI)等能够通过参与固有免疫应答来清除呼吸道入侵的细菌,避免呼吸道感染[1].短上腭、肺及鼻咽上皮克隆基因1(short palate lung nasal epithelium clone 1,SPLUNC1)在口腔及整个呼吸道黏膜均有表达,且结构与BPI类似,目前大量研究表明其作为呼吸道黏膜分泌的重要蛋白,主要参与呼吸道黏膜固有免疫应答,抑制细菌的侵入和控制炎症[2-3].
-
丁酸钠下调CNE2鼻咽癌细胞IFN-γ诱导的吲哚胺2,3双加氧酶表达并促进其乙酰化和泛素化
目的 探讨丁酸钠(NaB)对CNE2鼻咽癌细胞γ干扰素(IFN-γ)诱导的吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)表达调控及分子机制.方法 采用Western blot法、免疫共沉淀等方法检测鼻咽癌细胞内IDO的表达及乙酰化、泛素化修饰情况.结果 与单独加IFN-γ对照组相比,Western blot结果显示,IFN-γ和NaB联合处理的CNE2细胞IDO蛋白表达增加;免疫共沉淀实验结果表明,联合处理CNE2细胞乙酰化IDO水平和泛素化IDO水平均明显增高;与NaB和IFN-γ联合处理的CNE2细胞相比,NaB、IFN-γ和硼替佐米(bortezomib)联合处理的CNE2细胞的IDO表达量增加.结论 NaB能以剂量依赖性的方式下调鼻咽癌细胞内IFN-γ诱导的IDO表达,IFN-γγ和NaB联合处理促进IDO的乙酰化和泛素化.
-
肝细胞特异性杀伤载体的构建和应用
目的 间充质干细胞(MSC)有重要的免疫调节和组织再生作用,但其治疗肝损伤的机制尚不完全清楚,既可能通过旁分泌因子调节炎症,也可直接转分化为肝细胞.为明确这两种机制,拟构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动的膜定位绿色荧光蛋白(GFP)与白蛋白启动子调控的PE40毒素的共表达质粒,以期杀伤转染MSC中向肝细胞转分化的细胞.方法 用PCR获得GFP以及DLL1(Delta-like 1)跨膜区基因片段,融合成膜定位GFP基因并插入pFlag-CMV-1载体.将白蛋白基因启动子和PE40基因片段插入已构建好的膜定位GFP序列下游,构建真核表达载体,荧光显微镜检测GFP的表达.应用可表达白蛋白的人正常肝脏细胞检测该载体对肝细胞的杀伤.结果 成功构建肝细胞特异性杀伤载体,该载体转染后对正常肝脏细胞具有杀伤作用,提示该载体可用于探索MSC治疗肝损伤的机制.结论 成功构建能特异性杀伤肝细胞的载体.
-
IL-37抑制脂多糖诱导的小鼠树突状细胞活化
目的 探讨白细胞介素37 (IL-37)对细菌脂多糖(LPS)诱导的小鼠树突状细胞(DC)活化的调节作用.方法 应用GM-CSF和IL-4诱导小鼠骨髓细胞向DC分化,抗CD11c磁珠分选DC.IL-37预处理DC后,进行LPS刺激.流式细胞术检测DC表面共刺激分子(CD80、CD86)表达水平,实时荧光定量PCR检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6和IL-1α mRNA表达水平,流式细胞微球芯片试剂盒(CBA试剂盒)检测细胞培养上清中IL-1α、IL-6、TNF-α等因子的浓度.结果 DC诱导成功,磁珠分选能够获得高纯度的DC(>90%).IL-37降低LPS诱导的DC表面共刺激分子CD80、CD86的表达,并抑制DC合成IL-1α、IL-6、TNF-α.结论 IL-37可以通过降低共刺激分子和炎症因子的表达抑制LPS刺激的DC活化.
-
太白银莲花皂苷6抑制U87细胞增殖并诱导凋亡
目的 探讨太白银莲花皂苷6对U87胶质母细胞瘤细胞增殖的影响及可能机制.方法 用(0.0、1.6、3.2、6.4、12.8) μg/mL太白银莲花皂苷6处理U87细胞24h、48 h,采用MTT法检测太白银莲花皂苷6对细胞增殖的抑制作用;annexin V-FITC/PI双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot法检测活化的caspase-3蛋白表达.结果 与对照组相比,太白银莲花皂苷6能明显抑制U87细胞增殖,并且呈时间、剂量依赖性;随着药物浓度增加,U87细胞的凋亡率增加,活化caspase-3蛋白表达增强.结论 太白银莲花皂苷6可呈剂量依赖性抑制U87细胞增殖,增加活化caspase-3蛋白表达,促进凋亡.
-
靶向ezrin、radixin、moesin的siRNA慢病毒感染原代肺微血管内皮细胞促进流感病毒的复制
目的 构建分别靶向ezrin(E)、radixin (R)、moesin (M)的siRNA慢病毒表达载体,转染原代大鼠肺微血管内皮细胞,观察其对E、R、M基因表达及流感病毒复制的影响.方法 根据siRNA设计原理,化学合成靶向大鼠E、R、M基因的siRNA序列,克隆入慢病毒表达质粒GV248,构建分别靶向E、R、M基因的慢病毒siRNA载体Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA,同时构建靶向无关序列的Lenti-control-siRNA;组织块法分离培养大鼠原代肺微血管内皮细胞(PMVEC);Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA转染原代大鼠PMVEC后,荧光定量PCR检测E、R、M的mRNA的表达,Western blot法检测ERM蛋白的表达,激光共聚焦显微镜技术检测ERM蛋白的分布;FM1流感病毒鼠肺适应株感染慢病毒转染的PMVEC后,荧光定量PCR检测慢病毒载体对流感病毒复制的影响.结果 重组质粒经测序鉴定,Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA、Lenti-control-siRNA构建成功.慢病毒载体转染大鼠PMVEC,感染复数(MOI)为10时感染率达80%以上.Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA明显抑制PMVEC中E、R、M的转录及表达.流感病毒感染PMVEC中,慢病毒空载体及Lenti-control-siRNA抑制流感病毒的复制,而Lenti-E-siRNA、Lenti-R-siRNA、Lenti-M-siRNA增加PMVEC中流感病毒的mRNA水平.结论 成功构建靶向ERM基因的慢病毒载体,证实其可稳定转染PMVEC特异高效地抑制E、R、M基因表达;慢病毒载体本身能抑制PMVEC中流感病毒复制,而靶向E、R、M的慢病毒siRNA却促进流感病毒的复制.
-
芍药苷激活2型大麻素受体保护脑缺血再灌注大鼠海马神经元
目的 探究芍药苷通过激活2型大麻素受体(CBR2)对脑缺血再灌注大鼠神经的保护作用.方法 144只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、溶媒组、10 mg/kg芍药苷组、40 mg/kg芍药苷组、CBR2选择性拮抗剂3 mg/kg AM630组、40 mg/kg芍药苷联合3 mg/kg AM630组、CBR2选择性激动剂3 mg/kg HU308处理组.线栓法制作大鼠局灶性脑缺血/再灌注模型.观察芍药苷对神经功能缺损评分、梗塞体积、脑水肿的影响;采用HE染色观察脑组织病理形态学改变;采用免疫组织化学染色法观察芍药苷对海马区环氧合酶2 (COX-2)和caspase-3表达的影响.结果 芍药苷能显著改善脑缺血大鼠神经功能评分,降低梗塞体积及缺血侧脑含水量,减轻脑组织病变,抑制海马区caspase-3和COX-2的表达;但预先注射AM630可显著拮抗芍药苷的脑神经保护作用.结论 CBR2可能参与芍药苷对脑缺血再灌注大鼠海马神经元的保护作用.
-
巨噬细胞特异的人工miRNA表达载体的构建与鉴定
根据小RNA(microRNA,miRNA)前体分子结构特点而设计并合成的人工miRNA(artificial miRNA,amiRNA)也可以在体内通过与内源miRNA相同或相似的途径发挥RNA干扰(RNA interference,RNAi)作用,目前amiRNA技术在调控基因表达、抗病毒领域得到了广泛应用[1-4].amiRNA由表达载体生成,弥补了人工合成小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)容易出现合成错误、体内降解快等缺点,而且能采用具有组织和时序表达特异性的RNA聚合酶Ⅱ(RNA polymeraseⅡ,polⅡ)启动子,具有毒性较低、靶基因沉默效果较好等优点[5].
-
用DNAStar软件预测Rv1410c结核分枝杆菌蛋白抗原表位
目的 预测Rv1410c结核分枝杆菌(MTB)的抗原表位.方法 利用DNAStar软件包中Editseq软件将Rv1410c MTB氨基酸序列进行编辑保存,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,预测Rv1410c MTB的二级结构、B细胞抗原表位及T细胞抗原表位,然后再用BLAST分析其与人类抗原表位的同源性.结果 Rv1410c具有丰富的二级结构,含有较多潜在的B细胞抗原肽表位,主要位于1 ~ 10、67 ~77、129 ~ 137、189 ~205、222~235、253 ~ 267、296 ~ 306、330 ~ 338、359 ~367、462~467、494~517氨基酸残基或其附近,这些区域基本上含有β转角结构,亲水性、表面可能性和柔韧性指数都较高;也含有较多潜在的T细胞表位,主要位于16 ~37、84 ~102、108 ~115、137~ 160、202 ~ 207、219 ~222、245 ~263、321 ~325、355 ~362、387 ~391、417 ~445、486 ~494氨基酸残基或其附近.结论 Rv1410c MTB既含有较多潜在的B细胞抗原表位,也含有较多潜在的T细胞抗原表位.
-
含miR-193b前体基因的重组腺病毒感染K562细胞可抑制其增殖
目的 构建小RNA193前体(pre-miR-193b)重组腺病毒,观察miR-193b对慢性髓系白血病K562细胞增殖的影响.方法 化学合成miR-193b cDNA序列,克隆进入pAdTrack-CMV穿梭质粒;重组穿梭质粒经PmeⅠ酶切线性化后,转入含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞中进行同源重组,获得pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经PacⅠ线性化后转入HEK293细胞包装、扩增.倍比稀释法测定病毒滴度.实时荧光定量PCR检测K562细胞中miR-193b表达水平,MTT法检测K562细胞增殖能力.结果 pAd-miR-193b重组腺病毒质粒,经限制性内切酶鉴定和测序分析显示构建成功,并能够高效转染K562细胞;与对照组相比,荧光定量PCR检测显示重组腺病毒载体感染K562细胞后,miR-193b基因表达明显增加;同时高表达miR-193b基因的K562细胞增殖水平低于对照组.结论 K562细胞高效表达的miR-193b可抑制K562细胞的增殖.
-
黄芪注射液抑制压疮缺血再灌注损伤大鼠的炎症反应并增强其抗氧化损伤能力
压疮是由于局部组织受压超过临界时间而引起的缺血、缺氧反应,当缺血组织压力解除并重新恢复血液灌流后又可发生缺血/再灌注损伤,表现为软组织的溃烂和坏死.压疮是长期卧床患者常见的并发症之一,严重影响患者的预后,已成为长期困扰医护人员的一个难题.压疮缺血/再灌注损伤是一个复杂的病理过程,炎症反应、氧化应激及凋亡参与了其发生、发展,是引起压疮迁延不愈的重要原因[1-3].
-
低剂量脂多糖预处理上调Nrf2表达减轻大鼠脊髓损伤的炎症反应
目的 探讨低剂量脂多糖预处理对大鼠脊髓损伤的神经保护作用及其可能机制.方法 48只雌性SD大鼠随机分为4组:空病毒(EV)组、脂多糖联合空病毒(LPS-EV)组、核因子E2相关因子2(Nrf2)干扰病毒(NIV)组、脂多糖联合Nrf2干扰病毒(LPS-NIV)组,每组各12只.采用改良Allen’s打击法建立创伤性脊髓损伤(TSCI)模型,术后3d进行BBB后肢运动神经功能评分,获取脊髓损伤段组织标本,HE染色观察其组织病理变化;Nissl染色观察神经元中Nissl体变化及神经元生存指数;免疫组织化学染色及Western blot法检测Nrf2、核因子κB (NF-κB)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的蛋白表达变化.结果 与EV组比较,NIV组脊髓组织Nrf2蛋白表达降低,NF-κB、IL-1β、TNF-α蛋白表达增高,与LPS-NIV组比较无显著性差异;与EV组、LPS-NIV组比较,LPS-EV组Nrf2蛋白表达上调,NF-κB、IL-1β、TNF-α蛋白表达降低,神经元生存指数明显提高,脊髓组织病理损伤明显改善;各组之间BBB评分无统计学差异.结论 低剂量LPS预处理对大鼠脊髓损伤起神经保护作用,其机制是通过介导Nrf2的表达,下调NF-κB及促炎症因子水平,从而减轻炎症反应.
-
荷瘤小鼠卵巢癌细胞miRNA和髓源性抑制细胞的检测及相关性分析
目的 检测卵巢癌荷瘤小鼠癌组织miR-21-5p、miR-155-5p、miR-218-5p、miR-222-3p、miR-494-3p的水平和外周血和脾脏中髓源性抑制细胞(MDSC)的数量,并分析它们的相关性.方法 12例卵巢癌荷瘤小鼠的癌组织和癌旁组织,实时荧光定量PCR检测癌组织和癌旁组织中miR-21 a-5p、miR-155a-5p、miR-218-5p、miR-222-3p、miR-494-3p的水平,流式细胞术检测上述荷瘤小鼠中外周血和脾脏中MDSC的表达.采用Spearman法分析MDSC和microRNA的相关性.结果 与正常小鼠相比,荷瘤小鼠外周血和脾脏中的MDSC明显增加.miR-21 a-5p、miR-218-5p和miR-222-3p在癌组织中含量高于癌旁组织,相反miR-155a-5p和miR-494-3p在癌组织中的表达低于癌旁组织.miR-222-3p与MDSC的数量无相关性,miR-494-3p的水平与MDSC的数量负相关,miR-21a-5p、miR-155a-5p、miR-218-5p在癌组织与癌旁组织的表达差值与MDSC的数量呈正相关.结论 卵巢癌荷瘤小鼠癌组织中miR-21a-5p、miR-155a-5p、miR-218-5p、miR-494-3p水平和外周血及脾脏中MDSC的数量有一定的相关性.
-
miR-143-3p在人腹膜间皮细胞转分化过程中的作用及机制
目的 探讨miR-143-3p在高糖刺激的人腹膜间皮细胞(HPMC)转分化中的作用及相关机制.方法 将永生化的HPMC给予50 mmol/L高糖刺激72 h后,反转录PCR及Western blot法检测miR-143-3p、血清反应因子(SRF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素(E-cadherin)及Snail的mRNA和蛋白表达变化;利用miR-143-3p的模拟物、模拟物阴性对照、抑制剂及抑制剂阴性对照;pcDNA3.1空载体与pcDNA3.1-SRF质粒;SRF-siRNA和阴性对照分别转染高糖刺激72 h后的HPMC,反转录PCR及Western blot法检测miR-143-3p、SRF、α-SMA、E-cadherin及Snail的mRNA和蛋白表达水平.结果 反转录PCR及Western blot法检测结果显示,高糖刺激HPMC 72 h后,miR-143-3p、SRF、α-SMA及Snail表达增加,而E-cadherin表达下降;上调miR-143-3p的表达后,SRF、α-SMA及Snail表达增加,而E-cadherin表达降低.下调miR-143-3p的表达后,SRF、α-SMA及Snail表达减少,而E-cadherin表达增加.利用pcDNA3.1-SRF质粒上调SRF表达,则miR-143-3p、α-SMA及Snail表达增加,而E-cadherin表达下调;SRF-siRNA沉默SRF后,miR-143-3p、α-SMA及Snail表达下调,而E-cadherin表达增加.结论 SRF/miR-143-3p信号通路轴参与了高糖刺激所引起的人腹膜间皮细胞的转分化过程,其机制可能是通过SRF上调miR-143-3p的表达,间接参与人腹膜间皮细胞的转分化.
-
Wnt3a联合BMP9诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化
目的 探讨Wnt3a单独以及联合骨形态发生蛋白9(BMP9)诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化的作用.方法 利用HEK293细胞扩增重组腺病毒AdGFP、AdBMP9、AdWnt3a;分别转染C3H10T1/2细胞3周后,倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞形态及绿色荧光蛋白表达;流式细胞术检测细胞转染效率;Western blot法、免疫荧光技术及实时定量PCR(qRT-PCR)分别检测缝隙连接蛋白43(Cx43)、肌钙蛋白T(cTnT)、GATA结合蛋白4(GATA4)、心肌细胞增强因子2C(MEF2C)的表达.结果 经HEK293细胞扩增可得到高滴度的重组腺病毒;转染C3H10T1/2细胞3周后,Wnt3a组Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C的表达量与空白组比较无明显差异;Wnt3a联合BMP9组的Cx43、cTnT、GATA4、MEF2C基因的表达量显著高于空白组、GFP组和Wnt3a组,与单独BMP9组相比无显著性差异.结论 Wnt3a不能单独诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化;Wnt3a联合BMP9可诱导C3H10T1/2细胞向心肌细胞样细胞分化.
-
鸡和疣鼻栖鸭Ia-相关的恒定链交叉免疫原性研究
目的 探索鸡和疣鼻栖鸭Ia-相关的恒定链(CIi和MDIi)的交叉免疫原性.方法 用间接ELISA检测抗CIi小鼠血清与原核表达MDIi的反应性、抗MDIi小鼠血清与原核表达CIi的反应性;通过荧光免疫组织化学法鉴定抗CIi小鼠血清与疣鼻栖鸭脾组织MDIi的荧光反应强度、抗MDIi小鼠血清与鸡肝组织CIi的荧光反应强度.结果 抗MDIi小鼠血清与原核表达CIi的反应滴度为1∶8000,抗CIi小鼠血清与原核表达MDIi的反应滴度为1∶16 000;采用抗MDIi小鼠血清、抗CIi小鼠血清进行免疫荧光组织化学染色,均能检测异种鸟类组织内的Ii抗原,但荧光染色强度均弱于同种鸟类Ii抗原组织的荧光反应强度.结论 CIi和MDIi具有交叉免疫原性,CIi和MDIi的序列保守性是形成共同抗原表位的分子基础,从免疫学角度揭示了鸟类Ii的高度保守性.
-
活动性肺结核患者血浆IL-37的检测及其临床意义
目的 检测活动性肺结核(ATB)患者血浆中IL-37的含量,探讨其临床意义.方法 采用ELISA夹心法检测30例ATB患者血浆中白细胞介素37(IL-37)的含量,并对15例患者进行了治疗后跟踪检测,21例健康志愿者作为对照组.结果 ATB患者血浆中的IL-37含量明显高于健康对照组,15例跟踪患者治疗后血浆中IL-37含量较治疗前明显下降;结核抗体阳性患者血浆IL-37含量高于结核抗体阴性患者,痰涂片阳性患者血浆IL-37含量显著高于痰涂片阴性患者;ATB患者血浆IL-37含量与患者外周血白细胞总数呈负相关.结论 ATB患者血浆中的IL-37含量明显升高,血浆IL-37的检测有可能成为ATB疗效评估的指标.
-
胰岛素抵抗和血清IL-18水平与冠心病斑块纤维帽厚度负相关
胰岛素抵抗(insulin insistence,IR)是指各种原因造成的胰岛素促进葡萄糖摄取和转化的效率降低,机体为保持血糖稳定会代偿性地分泌过多的胰岛素,导致高胰岛素血症.导致IR的机制不十分明确,但肥胖以及缺乏锻炼会导致IR的产生[1-3].研究发现IR参与动脉粥样斑块的发生、发展[4],与冠心病的严重程度强烈相关[5].白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)是一种炎性因子,在感染、变态反应、自身免疫性疾病等多种病理过程中发挥重要作用.IL-18介导的炎症反应和免疫反应可以损伤血管内皮细胞,促进动脉粥样斑块形成[6].
-
头孢地嗪增加老年细菌性肺炎患者外周血CD4/CD8和Th1/Th2细胞比例
目的 探讨头孢地嗪对老年细菌性肺炎患者外周血T淋巴细胞CD4/CD8和Th1/Th2细胞比例的影响.方法 选取老年细菌性肺炎患者63例,以随机数字表分为两组;对照组31例采用头孢三嗪静脉滴注疗法,观察组32例采用头孢地嗪静脉滴注疗法治疗.分别于治疗前后抽取患者空腹静脉血,以流式细胞仪测定CD4/CD8和Th1/Th2的细胞计数比;以ELISA试剂盒测定Th1细胞分泌因子白细胞介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)与Th2细胞分泌因子IL-4、IL-10的血清浓度.结果 治疗前,两组患者的各项指标均无明显差异.治疗后,观察组患者CD4+细胞、Th1细胞比例增加,Th2细胞比例降低,CD4/CD8和Th1/Th2比值均显著高于对照组;同时,观察组患者血清IL-2、IFN-γγ浓度显著高于对照组,IL-4、IL-10浓度显著低于对照组.结论 头孢地嗪能够提高老年细菌性肺炎患者细胞免疫功能,纠正外周血T淋巴细胞CD4/CD8和Th1/Th2比例失调.
-
HLA-E基因多态性及血浆可溶性HLA-E水平与乳腺癌遗传易患性的关系
目的 探讨人类白细胞抗原E(HLA-E)基因多态性及血浆可溶性HLA-E(sHLA-E)水平与中国张家口地区汉族女性乳腺癌遗传易患性的关系.方法 采用聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)法对中国张家口地区200例乳腺癌患者和228例健康对照人群HLA-E等位基因进行检测;同时用ELISA检测乳腺癌患者和健康对照人群sHLA-E水平.结果 乳腺癌患者和健康对照组均检出2种等位基因:HLA-E* 0101和HLA-E*0103;3种基因型:HLA-E* 0101/HLA-E*0101、HLA-E*0101/HLA-E*0103和HLA-E* 0103/HLA-E* 0103.其中HLA-E* 0103等位基因和HLA-E* 0103/HLA-E* 0103基因型在乳腺癌患者组的分布频率明显高于健康对照组,且携带HLA-E* 0103/HLA-E*0103基因型的个体乳腺癌发病风险明显增加;血浆sHLA-E水平在乳腺癌患者组和健康对照组分布无明显差异,进一步分析发现携带HLA-E * 0103/HLA-E* 0103基因型患者血浆sHLA-E水平明显高于健康对照组;且HLA-E基因多态性及血浆sHLA-E水平与乳腺癌临床分期无明显相关性.结论 HLA-E基因多态性与中国张家口地区汉族女性乳腺癌遗传易患性相关;HLA-E* 0103/HLA-E * 0103基因型可能是中国张家口地区汉族女性乳腺癌的易感基因;而血浆sHLA-E水平可能与乳腺癌的遗传易患性无明显相关性.
-
NDRG2和Bcl-2在胃癌组织中的表达及意义
目的 分析N-myc下游调节基因2(NDRG2)、B细胞淋巴瘤分子2(Bcl-2)在人胃癌组织中的表达情况并初步探讨二者间的关系及临床意义.方法 采用免疫组织化学检测NDRG2和Bcl-2在胃癌组织、癌旁组织及胃正常组织中的表达,并分析胃癌组织中二者的表达相关性及与临床病理资料间的关系.结果 在组织芯片中,胃癌组织NDRG2的阳性表达率低于正常组织,Bcl-2的阳性表达率高于正常组织,二者且呈负相关.在206例胃癌组织及癌旁组织中NDRG2和Bcl-2表达与组织芯片结果相似,并发现NDRG2和Bcl-2在胃癌组织中的表达阳性率与年龄、性别无关,而与肿瘤分化程度、临床分期、淋巴结有无转移相关.结论 在胃癌组织中NDRG2表达缺失而Bcl-2表达增加、二者呈显著负相关,提示二者可能协同参与胃癌的发生发展.
-
依那西普抑制类风湿性关节炎滑膜炎症并降低黏附相关分子表达
目的 观察肿瘤坏死因子(TNF)拮抗剂依那西普治疗的类风湿性关节炎(RA)患者滑膜组织炎症评分及相关分子标志物表达的改变.方法 行膝关节镜下滑膜切除术治疗的RA患者16例,其中8例既往接受依那西普治疗,8例未接受依那西普或其他生物制剂治疗.滑膜组织HE染色比较2组患者Rooney炎症评分,免疫组织化学染色检测滑膜组织中增殖细胞核抗原(PCNA)及血管黏附分子1(VCAM-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)和钙黏素11(cadherin-11)的表达.结果 依那西普组Rooney评分明显低于非生物制剂组,滑膜衬里层PCNA与cadherin-11表达明显降低,衬里下层PCNA及cadherin-11表达也显著降低.两组间滑膜衬里层及衬里下层VCAM-1与ICAM-1表达无显著性差异.临床炎性指标[红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、血小板计数(PLT)]及28个关节疾病活动指数(DAS28)与Rooney评分之间无统计学相关性.结论 依那西普可抑制RA滑膜细胞增生和淋巴细胞浸润,并降低与增生及黏附相关分子的表达,缓解RA滑膜组织炎性病变;临床炎性指标不能完全反映局部关节滑膜组织学改变.
-
神经营养因子受体同源物2通过上调proNGF、sortilin、p75NTR表达诱导脑出血后血肿周围脑组织细胞凋亡
目的 探讨脑出血后不同时期血肿周围脑组织中神经营养因子受体同源物2(NRH2)、神经生长因子前体(proNGF)、sortilin、神经营养因子受体p75 (p75NTR)表达及与细胞凋亡的关系.方法 收集临床脑出血后实施血肿清除术的周围组织标本,根据脑出血距离标本取出时间,分为6h以内(包括6h)、6h以上至24h(包括24h)、24h以上至72 h(包括72 h)、72 h以上4组,同时取10例手术过程中血肿远隔部位掉落的组织块作为对照组,通过末端脱氧核糖核酸转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL)测定脑细胞的凋亡指数(AI),采用实时荧光定量PCR、Western blot法分别检测脑组织中NRH2、proNGF、sortilin、p75NTR mRNA和蛋白表达,Western blot法检测脑组织中Bcl-2、Bax的表达.体外培养大鼠皮层星形胶质细胞,经NRH2 siRNA或scramble siRNA转染后,Western blot法检测proNGF、sortilin、p75NTR蛋白表达.结果 与对照组以及6h以内的脑出血组相比,脑出血后6h以上各组AI升高,以24h以上至72 h内组为高,但6h以内的脑出血组AI与对照组无区别.随着脑出血时间的延长,proNGF、p75NTR mRNA和蛋白表达水平逐渐升高,24h以上至72 h达到高峰,72 h后仍处于较高水平.与对照组和6h以内的脑出血组比较,脑出血后6h以上至24h内(包括24h),脑组织NRH2、sortilin的mRNA与蛋白表达水平及Bax表达水平即增加,24h以上至72 h内达高峰,72 h后仍维持在较高水平.但与对照组比较,6h以内的脑出血组上述指标无显著性差异.与对照组相比,6h以内的脑出血组Bcl-2表达水平无明显变化,脑出血后6h以上的脑出血各组脑组织Bcl-2表达水平降低,以24h以上至72 h内处于低值.NRH2 siRNA组proNGF、sortilin、p75NTR蛋白表达水平明显低于空白对照组、scramble siRNA组.结论 NRH2在脑出血后血肿周围脑组织中表达增加,通过促进proNGF、sortilin、p75NTR表达增加Bax/Bcl-2比率,从而诱导脑细胞凋亡.
-
人颗粒蛋白前体F片段结构域单克隆抗体的制备与鉴定
目的 制备抗人颗粒蛋白前体F片段(GrnF)的单克隆抗体(mAb),并初步鉴定其生物学特性.方法 通过分子生物学技术构建含人GrnF编码序列的酵母表达载体,表达并纯化酵母来源的融合人血清白蛋白(HSA)的GrnF片段HSA-GrnF.用纯化的HSA-GrnF免疫BALB/c小鼠,然后将免疫小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0进行融合,用ELISA筛选阳性克隆,并采用有限稀释法进行亚克隆;采用免疫荧光染色及Western blot法对所获得的mAb的特异性进行鉴定,并用抗体亚类测定试剂盒检测所获得单克隆抗体亚类.结果 成功获得2株可分泌特异性抗GrnF的杂交瘤细胞株(1G6及4E8),经鉴定这2株抗体重链亚类均为IgG1亚类.结论 成功制备了抗人GrnF片段结构域的单克隆抗体.
-
肿瘤相关抗原胰岛素样生长因子2mRNA结合蛋白3多克隆抗体的制备和鉴定
目的 构建胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白3(IGF2 BP3)的原核表达载体,在大肠杆菌中表达并纯化IGF2BP3-His融合蛋白,制备和鉴定小鼠抗人IGF2BP3多克隆抗体.方法 用PCR方法扩增IGF2BP3基因,构建到pET-28a原核表达载体中,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导IGF2BP3蛋白的表达.所获得的蛋白经镍柱亲和层析纯化,并用透析方法脱去尿素使蛋白复性,获得IGF2BP3原核表达蛋白.将制备的原核表达蛋白免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体,再用ELISA、Western blot法、免疫组织化学法对抗体的反应性及特异性进行鉴定.结果 成功克隆出IGF2BP3基因,经测序与GenBank公布的序列一致;PCR酶切鉴定证实成功构建了pET-28a-IGF2 BP3原核表达载体;质粒在BL21(DE3)中成功表达出相对分子质量(Mr)为70 000左右的融合蛋白,纯化后经SDS-PAGE分析纯度在90%以上.ELISA确定抗体效价在1∶50 000以上,且Western blot法和免疫组织化学技术均证实多克隆抗体能特异性识别目的蛋白.结论 成功制备了特异性的小鼠抗人IGF2BP3的多克隆抗体.
-
P2X7受体基因多态性与痛风
部分高尿酸血症患者一生中并未发展为急性痛风性关节炎,这表明痛风的发生还需要其他因素的参与.在免疫系统中,P2X7受体一直参与加工和释放各种炎症因子,如白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18和肿瘤坏死因子α.因此,嘌呤受体P2X家族中的P2X7R一直被视为一种促炎症的受体.IL-1β是炎症调节的始动因素,是启动急性炎症反应的重要细胞因子,并在痛风发病机制中发挥了关键作用,具有维持急性痛风性关节炎病理的功能.本文综述了ATP受体-P2X7R基因[rs1718119(Ala348Thr),rs208294 (His155Tyr),rs3751143(Glu496Ala),rs28360457(Arg307 Gln)和rs2230911(Thr357Ser)]单核基因多态性(SNP)与痛风发病的相关性,推测P2X7R基因多态性与IL-1β的分泌能力相关联,影响炎症的启动,而痛风是一种炎症性疾病,因此得出P2X7R基因的多态性在痛风发病机制中可能起着至关重要的作用.
-
IL-33与病毒和寄生虫感染的关系
IL-33作为IL-1家族的新成员,具有双重作用,作为胞外炎症介质,当组织或细胞损伤时IL-33被释放,并与细胞膜上的受体ST2结合,激活胞内的信号通路,从而增强Th1细胞和Th2细胞反应,参与机体的多种微环境的免疫调节;作为核内DNA结合蛋白,调节蛋白质的合成.IL-33广泛分布于各组织中,参与炎症反应的各个阶段,其在病毒和多种寄生虫感染性疾病的作用研究中已取得重大突破,尤其在病毒性肝炎、单纯疱疹病毒感染和过敏性哮喘等疾病中具有重要作用;在寄生虫感染方面,如委内瑞拉粪类圆线虫、肠道线虫和杜氏利氏曼原虫等感染中,IL-33具有抑制炎症反应的作用.因此,现就IL-33在病毒和寄生虫方面的研究进行综述.
-
细胞自噬在病毒感染与免疫过程中的作用
自噬是细胞维持内环境稳态的一种保护机制,不仅调节细胞代谢,在应激条件下,自噬通过降解并回收利用细胞成分促进细胞存活.在病毒感染过程中,自噬作为监督机制将病毒抗原传递给富含免疫感应器的内体/溶酶体,激活固有免疫反应,自噬还可加工提呈病毒抗原激活适应性免疫反应,此外,自噬体本身就可降解病毒.然而,病毒为了逃避自噬,也进化出许多阻止自噬的方式.由于自噬的抗病毒作用,人们期望利用自噬对微生物感染进行治疗.本文对自噬在抗病毒免疫中的作用及其潜在应用价值的研究进展进行综述.
-
TLR的结构与功能及其肝癌免疫应答的研究进展
Toll样受体(TLR)主要位于免疫细胞表面,由胞外区、跨膜区和胞内区3部分组成,是模式识别受体家族之一.已发现的TLR家族成员共有12种,参与病原体及其产物等特异性配体的识别与信号转导,这可在病原体入侵机体的早期启动机体固有免疫应答,并诱导机体产生获得性免疫,从而清除入侵的病原体.此外,TLR与肝癌的发生、发展、转移有密切关系.本文综述了TLR的结构、分类、分布、功能以及其与肝癌的关系.
-
Bruton酪氨酸激酶及Ibrutinib应用于B细胞肿瘤的研究进展
Bruton酪氨酸激酶(BTK)是非受体酪氨酸激酶肝脏肿瘤中表达的酪氨酸激酶家族的一员,是B细胞受体信号通路中的关键蛋白分子,在正常B淋巴细胞的成熟以及B细胞肿瘤中发挥重要的作用.Ibrutinib是BTK的小分子抑制剂,它能不可逆地与BTK结合,有效抑制包括慢性淋巴细胞白血病、非霍奇金淋巴瘤和多发性骨髓瘤等血液系统B细胞恶性肿瘤细胞的生存和发展.Ibrutinib的作用已经在体内实验以及临床试验中获得肯定.现就BTK的分子结构、作用机制,以及Ibrutinib临床前和临床研究等方面进行综述.
-
Toll样受体与配体复合物结构的研究进展
Toll样受体(TLR)是一类模式识别受体,通过识别病原微生物的保守结构分子模式,触发先天免疫反应和基本的抗原特异适应性免疫.一些TLR结合配体复合物及胞内外结构域的晶体结构已经通过X射线晶体衍射分析确定.尽管配体结合位点各有不同,但是TLR家族胞外结构域均为马蹄状结构,其配体复合物的“m”外形也极度相似,C末端中心汇聚对胞内Toll/白细胞介素1受体(TIR)结构域紧靠一起非常重要,是启动下游信号的必需步骤.本文主要总结了TLR胞内外功能结构域及配体复合物的结构.
-
γδT细胞过继细胞免疫治疗恶性实体肿瘤研究进展
近年来对恶性实体瘤的治疗效果有了显著提高,但发生复发和转移的比例仍较高.免疫治疗是恶性肿瘤治疗的有效方法之一,其中过继免疫细胞治疗是目前研究的热点.与需要抗原提呈并具有主要组织相容性复合体(MHC)限制性的αβT细胞不同,γδT细胞对肿瘤细胞的识别、杀伤显现出MHC非限制性,因此γδT细胞作为种子细胞的过继免疫治疗得到了人们的关注.目前已证实γδT细胞针对多种恶性实体瘤具有杀伤作用,尤其重要的是临床验证了γδT细胞对部分恶性实体瘤的有效性.本文综述了γδT细胞的分型、作用机制和应用现状,重要的是,讨论了γδT细胞联合双磷酸盐、基因调整的αβ TCR转染γδT细胞治疗恶性实体瘤的可能策略.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 01 02 |
1995 | 01 02 03 |
1994 | 01 02 |
1993 | 01 02 03 04 |
1992 | 01 02 03 04 |
1991 | 01 02 03 04 |
1990 | 01 02 |
1989 | 01 02 03 04 |