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细胞与分子免疫学

细胞与分子免疫学杂志

Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지

CSCD核心期刊
  • 主管单位: 中国免疫学会;第四军医大学
  • 主办单位: 陕西省免疫学会,中国免疫学会
  • 影响因子: 0.81
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1007-8738
  • 国内刊号: 61-1304/R
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 52-184
  • 曾用名: 单克隆抗体通讯
  • 创刊时间: 1985
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 《细胞与分子免疫学杂志》编辑部
  • 出版地区: 陕西
  • 主编: 杨安钢
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • 核因子κB抑制蛋白α在膀胱癌细胞系的表达与上皮-间质转化及体外侵袭能力负相关

    作者:王新阳;程鹤鹏;陈玉乐;李宏宏;贺大林

    目的 探讨核因子-κB抑制蛋白α(IκBα)在不同膀胱癌细胞系的表达与上皮-间质转化(EMT)及肿瘤细胞体外侵袭能力的关系.方法 Western blot法比较人膀胱癌RT4细胞、5637细胞、235J细胞、J82细胞、T24细胞IκBα、上皮性钙黏素(E-cadherin)、神经钙黏素(N-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达差异;通过TranswellTM实验比较5种细胞体外侵袭能力的差异;显微镜下观察并比较5种细胞形态学差异.结果 RT4细胞和5637细胞具有上皮细胞的形态学特征,253J细胞、J82细胞和T24细胞具有间质细胞的形态学特征.RT4细胞和5637细胞具有较高的E-cadherin表达水平,但不表达vimentin和N-cadherin.253J细胞、J82细胞和TT24细胞E-cadherin表达部分(253J)或完全(J82、T24)缺失,但vimentin和N-cadherin表达水平较高.RT4细胞和5637细胞的体外侵袭能力明显弱于253J细胞、J82细胞和T24细胞.RT4细胞和5637细胞IκBα表达水平明显高于253J细胞、J82细胞和T24细胞.结论 IκBα在膀胱癌细胞的表达水平与EMT及体外侵袭能力负相关.

  • 表达丙型肝炎病毒核心蛋白的人肝癌稳定转染细胞株的建立与鉴定

    作者:乔卿华;吕欣;雷迎峰;杨敬;姚敏;韩佩君;党品香;赵海卫;翁代慧

    目的 建立能表达丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV core)的人肝癌细胞SMMC-7721的稳定转染细胞株.方法 构建含目的基因HCV core的重组质粒,转染HEK293T细胞,包装获得含ZsGreen和HCV core基因的慢病毒后,感染SMMC-7721人肝癌细胞,采用实时荧光定量PCR检测HCV core mRNA表达,采用免疫荧光细胞化学染色和Western blot法检测HCV core蛋白表达,筛选稳定表达HCV core的细胞株.结果 质粒酶切和序列测定证实重组载体构建正确;慢病毒包装48 h后可见清晰ZsGreen表达,感染SMMC-7721细胞后筛选获得稳定转染的细胞株,实时荧光定量PCR检测到HCV core mRNA,免疫荧光细胞化学染色和Western blot法均检测出HCV core蛋白表达.结论 成功构建了表达HCV core蛋白的SMMC-7721人肝癌细胞的稳定转染细胞株.

  • 表达HIV-1 gag蛋白的重组乳酸乳球菌诱导小鼠产生体液免疫应答

    作者:赵晓飞;张彩荣;刘晓娟;马正海

    目的 分析表达HIV-1 gag蛋白的重组乳酸乳球菌通过口服、滴鼻、皮下注射以及上述3种方式联合免疫小鼠诱导的体液免疫反应.方法 将50只BALB/c小鼠随机分成5组,每组10只.表达gag的重组乳酸乳球菌分别通过口服、滴鼻、皮下注射以及上述3种方式联合免疫小鼠,对照组口服含PMG36e空载体的乳酸乳球菌,接种菌量均为109菌落形成单位(CFU),连续免疫3次,每次间隔2周,其中口服和滴鼻每次连续免疫3d.采集免疫前和每次免疫后2周小鼠的血清,ELISA检测gag特异性的IgG水平.结果 表达gag的重组乳酸乳球菌经口服、滴鼻、皮下注射以及3种方式联合免疫均诱导小鼠产生了gag特异性IgG,且联合免疫组gag IgG水平显著高于其他各实验组(P<0.01).初次免疫后6周,口服和皮下注射免疫组gag IgG水平显著高于滴鼻免疫组(P<0.01).免疫3次后各组血清中gag抗体的阳性率:口服免疫组分别为40%、40%、90%;滴鼻免疫组分别为10%、20%、20%;皮下免疫组分别为10%、60%、90%;联合免疫组的阳性率在初次免疫后2周已达到100%.结论 表达HIV-1 gag的重组乳酸乳球菌载体疫苗经口服、滴鼻、皮下注射及3种方式联合免疫均能诱导小鼠产生特异性的体液免疫反应,多种途径联合免疫可增强乳酸乳球菌载体疫苗的免疫效果.

  • 腺病毒介导的IL-24增强紫杉醇对A549肺腺癌细胞生长的抑制作用

    作者:徐明菊;李敏敏;杨吉成;郭锦锦;孙万邦

    目的 探讨腺病毒介导的白细胞介素24(Ad-IL-24)联合紫杉醇对体外培养的人肺腺癌A549细胞生长的影响.方法 用Ad-IL-24、紫杉醇、Ad-IL-2联合紫杉醇处理A549细胞,以CCK-8法测定细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的变化.结果 Ad-IL-24可明显抑制人肺腺癌A549细胞生长并诱导细胞凋亡,与紫杉醇联合处理后,其抑制肺癌细胞生长及诱导细胞凋亡作用明显优于单用紫杉醇组及Ad-IL-24组,并引起G2/M期阻滞.结论 Ad-IL-24感染肺癌A549细胞可增强紫杉醇对肿瘤细胞生长的抑制作用.

  • 全骨髓贴壁法分离骨髓间充质干细胞并诱导其定向神经元样细胞的分化

    作者:闫峰;张越林;刘宁;胡守业;王刚;毛国超

    脑卒中和中枢神经系统损伤是神经科学领域的研究热点,如何改善神经元坏死、缺失和神经环路中断导致的神经系统活动及学习记忆障碍是研究的难点.已发现,海马齿状回(dentate gyrus,DG)和侧脑室下区(subventricular zone,SVZ)是成年人脑内源性神经干细胞(neural stem cell,NSC)存在的2个主要脑区[1].我们前期实验也已经描绘出了成年SD大鼠在脑皮层切除性损伤后所引起的大脑室下区的NSC或神经祖细胞增殖的时间历程[2].

  • PI3K/AKT信号通路的抑制促进B7-H4分子的核转移

    作者:宋慧;谢炜;练启慧;陈敏吉;徐荣;曾双;章良

    目的 探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3 K/AKT)信号通路对负性共刺激分子B7-H4细胞定位的调控作用.方法 体外培养稳定转染B7-H4/HEK293细胞,采用PI3K/AKT特异性抑制剂LY294002和/或出核转运抑制剂来普霉素B(LMB)处理细胞之后,免疫荧光技术结合激光共聚焦显微镜检测B7-H4蛋白在B7-H4/HEK293细胞中亚细胞定位的变化;Western blot法检测B7-H4蛋白在细胞膜、细胞质和细胞核表达水平的变化.结果 激光共聚焦显微镜观察结果显示,PI3K抑制剂LY294002作用于B7-H4稳定转染的B7-H4/HEK293细胞后,与空白对照组相比,B7-H4发生核转移,加入出核转运抑制剂LMB后,核转移的程度显著增加;Western blot法结果显示,LY294002抑制PI3K/AKT信号通路活性24h后,B7-H4在细胞膜和细胞质中的定位均显著降低(P<0.05),而细胞核中B7-H4的定位显著增加(P<0.05).结论 PI3K/AKT信号通路可抑制B7-H4的核转移.

  • 血清型2型猪链球菌烯醇化酶参与猪链球菌抗吞噬作用

    作者:霍春月;纪颖;任丽丽;张静;孔军伶

    目的 制备高纯度的猪链球菌烯醇化酶(SsEno)重组蛋白并通过抗体封闭实验评价SsEno对猪链球菌抗吞噬能力的影响,鉴定其与人纤维蛋白原(hFg)结合的活性.方法 构建hisSsEno重组表达质粒,将其转入大肠杆菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达后,通过SDS-PAGE分析蛋白表达情况,镍柱亲和纯化目的蛋白并用Western blot法进行验证.用hisSsEno免疫兔制备其高滴度的抗血清并通过人全血杀伤模型评价Eno对猪链球菌抗吞噬能力的影响.采用ELISA和Far-Western blot法鉴定hisSsEno与hFg结合活性.结果 成功构建了His标签蛋白原核表达质粒并获得了高纯度的hisSsEno重组表达蛋白.SsEno免疫的抗血清能显著降低强致病的猪链球菌05ZYH33在人全血中的存活能力.hisSsEno能特异地与hFg结合.结论 获得了hisSsEno重组表达蛋白,通过抗体阻封和全血杀伤模型发现SsEno是猪链球菌潜在的抗吞噬因子,且hisSsEno能特异性结合hFg.

  • 肾上腺髓质素通过Smad2/3信号途径抑制TGF-β1刺激的肺成纤维细胞前胶原蛋白的合成

    作者:郝淑玲;王卫平;于忠和;李建东

    目的 观察肾上腺髓质素(AM)对转化生长因子β1 (TGF-β1)促进肺成纤维细胞1型前胶原蛋白α1 (Col1α1)、3型前胶原蛋白α1(Col3α1)基因表达及Smad2/3通路的影响,探讨AM对TGF-β1促肺成纤维细胞胶原合成作用的机制.方法 体外原代培养人胚肺成纤维细胞(HFLF),利用反转录PCR(RT-PCR)观察AM及TGF-β1对HFLF的Col1α1、Col3α1 mRNA表达的影响;Western blot法观察AM及TGF-β1对HFLF磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)蛋白表达的影响.结果 TGF-β1可以刺激HFLF的Col1α1、Col3α1 mRNA和p-Smad2/3蛋白表达,AM则可抑制基础条件下TGF-β1促进的Col3α1mRNA表达,同时也抑制Smad2/3蛋白的表达.结论 AM可能通过Smad2/3信号转导途径,抑制TGF-β1促进的HFLF前胶原蛋白的合成作用.

  • 稳定过表达TOX3的乳腺癌MDA-MB-231细胞系的建立

    作者:韩翠翠;岳丽玲;杨莹;简白羽;马立威;刘吉成

    目的 构建人TOX高迁移率蛋白家族成员3(TOX3)基因慢病毒表达载体并建立稳定过表达TOX3的MDA-MB-231人乳腺癌细胞系.方法 通过全基因合成法合成TOX3基因序列片段,并进行PCR扩增.将TOX3基因克隆到pLVEF-1 a/GFP-Puro载体中,构建pLVEF-1 a/GFP-Puro-TOX3慢病毒载体.经酶切和测序鉴定后,将构建好的慢病毒载体进行病毒包装和病毒滴度检测.用获得的慢病毒液转染MDA-MB-231人乳腺癌细胞系,通过嘌呤霉素选择性培养,用荧光显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,采用实时定量PCR(qRT-PCR)检测MDA-MB-231细胞中TOX3 mRNA的表达,Western blot法检测MDA-MB-231细胞中TOX3蛋白的表达.结果 经酶切和测序鉴定,成功构建了pLVEF-1a/GFP-Puro和pLVEF-1 a/GFP-Puro-TOX3慢病毒表达载体,病毒包装后检测病毒滴度分别为2×108 TU/mL和1×108 TU/mL,转染MDA-MB-231细胞后,GFP表达的细胞达95%以上.与阴性对照组相比,qRT-PCR和Western blot结果显示,MDA-MB-231-TOx3细胞中TOX3的mRNA和蛋白表达水平均明显升高.结论 成功构建了TOX3慢病毒表达载体并建立了稳定过表达TOX3的MDA-MB-231细胞系.

  • 共表达口蹄疫病毒VP1-2A与猪IFN-α的重组腺病毒增强小鼠免疫功能

    作者:苏春霞;段相国;曹瑞兵;郑洁;陈溥言

    目的 构建串联表达口蹄疫病毒VP1-2A和猪干扰素-α的重组腺病毒,并研究重组病毒对小鼠特异性免疫的影响.方法 将FMDV VP1-2A基因和α干扰素基因先后克隆到腺病毒的穿梭载体中,得到的阳性穿梭质粒与腺病毒骨架载体在大肠杆菌BJ5183中进行同源重组.重组腺病毒质粒感染HEK293A细胞,获得重组腺病毒rAd5VP1-2A-poIFN-α.用rAd5VP1-2A-poIFN-α免疫BALB/c小鼠,同时设注射单独表达FMDV VP1的重组腺病毒(rAd5VP1)和空腺病毒的对照组.通过ELISA检测血清中特异性IgG、IgG1、IgG2a及细胞因子IL-4、IFN-γ的表达水平;MTT法检测淋巴细胞增殖指数.结果 成功构建了共表达FMDV VP-2A和IFN-α的重组腺病毒rAd5VP1-2A-poIFN-α.小鼠免疫实验结果显示,与单独表达FMDV VP1基因的重组腺病毒rAd5VP1相比,重组腺病毒rAd5VP1-2A-poIFN-α能增强特异性IgG、IgG1和IgG2a的分泌,促进IL-4和IFN-γ的分泌,并能增强小鼠淋巴细胞增殖功能.结论 重组腺病毒rAd5VP1-2A-poIFN-α能明显增强小鼠特异性免疫应答.

  • pCMV-LC3-Ag85B重组质粒DNA疫苗对结核的免疫保护作用

    作者:胡东;杨小康;王婉;邢应如;王文洋;杜昭弘;尤其;章力;陈丽萍

    目的 构建结核分枝杆菌Ag85B抗原基因与微管相关蛋白轻链3(LC3)基因融合的DNA疫苗,探究其抗结核分枝杆菌保护效应.方法 构建pCMV-LC3-Ag85B重组质粒并转染RAW264.7细胞,Western blot法检测目的蛋白的表达水平.分别以pCMV、pCMV-Ag85B、pCMV-LC3-Ag85B质粒免疫BALB/c小鼠.末次免疫2周后,Ag85B刺激下培养各组小鼠脾脏淋巴细胞,ELISA检测IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10分泌水平.末次免疫3个月后,用H37Rv标准株尾静脉注射感染小鼠,计数肺和脾脏结核分枝杆菌载量.结果 pCMV-LC3-Ag85B在RAW264.7细胞的表达水平与质粒浓度呈剂量依赖性.与pCMV-Ag85B免疫组相比,pCMV-LC3-Ag85B免疫组的IL-2、IFN-γ分泌显著增加,而肺和脾脏内结核分枝杆菌载量降低.结论 pCMV-LC3-Ag85B可显著增强Th1型免疫应答,并显示较好的抗结核分枝杆菌免疫保护效应.

  • Graves病患者外周血免疫调节细胞及其亚群比例异常

    作者:何珂;胡蕴;毛晓明

    目的 观察Graves病(GD)患者外周血各种免疫调节细胞及其亚群的变化.方法 采用流式细胞术(FCM)分别检测32例GD患者及30例健康人外周血调节性T细胞(Treg)、Th1细胞、Th2细胞、调节性B细胞(Breg)、树突状细胞(DC)等免疫细胞亚群,并进行比较.结果 与正常对照组相比,GD患者Treg比例降低,Th1细胞、Th2细胞数量增加;Breg数量减少;DC数量下降,髓样DC(mDC)占DC比例下降,而浆细胞样DC(pDC)比例升高,成熟型DC比例升高.结论 GD患者外周血中存在免疫调节细胞的失衡,可能在GD的发生、发展中起一定作用.

  • 活动期系统性红斑狼疮患者调节性T细胞数量变化的Meta分析

    作者:项勇刚;夏凌云;曾宪涛;张勇;刘胜武

    目的 采用Meta分析探讨活动期系统性红斑狼疮(SLE)患者调节性T细胞(Treg)的改变.方法 计算机检索PubMed及中国生物医学文献数据库(CBM)中公开发表的中英文文献,检索时限均为从建库至2013年8月31日,对符合纳入标准的研究进行质量评价及数据提取后,采用Comprehensive-Meta Analysis (CMA) v2.2软件进行Meta分析.结果 共纳入22个病例-对照研究,其中有12个研究报道了调节性T细胞(Treg)数量变化,12个研究报道了Treg占CD4+T细胞的比例变化.结果显示,活动期SLE患者较健康者外周血中,调节性Treg数量降低1.23%(WMD=-1.23%,95% CI=-1.87%~-0.59%),以Treg表面标志物的不同进行亚组分析,结果显示CD4+ CD25+ Treg数量减少1.56%(WMD=-1.56%,95% CI=-2.18% ~-0.94%),CD4+CD25high Treg数量减少0.91%(WMD=-0.91%,95% CI=-1.52% ~-0.29%);活动期SLE患者较健康者外周血中,Treg占CD4+T细胞的比例变化与对照组相比无统计学差异.敏感性分析显示结果稳健性好,未有发表偏倚.结论 当前证据表明,SLE可能更主要的是Treg的数量减少所致,而不是T细胞中Treg比例异常所致的免疫功能的改变.

  • 急性心肌梗死患者胆红素、CCR1、肌钙蛋白Ⅰ和IL-6的检测

    作者:康邦国;毛玉忠

    目的 检测血清胆红素、C-C趋化因子受体1(CCR1)、血清肌钙蛋白Ⅰ和白细胞介素6(IL-6)在急性心肌梗死(AMI)患者血浆中的水平.方法 采用重氮法检测AMI组(65例)和正常对照组(65例)血清总胆红素(TBIL)及直接胆红素(DBIL)水平,ELISA检测血浆CCR1水平;化学发光法分别测定2组血清肌钙蛋白Ⅰ水平,放射免疫分析法检测IL-6的水平.结果 与正常对照组相比,AMI组TBIL为(15.07±2.87) μmol/L、IBIL为(9.32±4.58) μmol/L,低于对照组[TBIL (20.15±3.26) μmol/L、IBIL(14.48±3.90)μmol/L] (P<0.05);AMI组CCR1、肌钙蛋白Ⅰ、IL-6分别为(3.76±0.85) ng/mL、(15.88±2.43) U/mL、(207.60±23.94) U/mL,显著高于对照组[CCR1 (0.66±0.19 ng/mL)、肌钙蛋白Ⅰ(0.33±0.07) U/mL、IL-6(103.55±16.86) U/mL] (P <0.05).结论 AMI患者血清胆红素水平降低、而CCR1、肌钙蛋白Ⅰ、IL-6水平升高.

  • 外周血白细胞CD64和CD11b指数在老年慢性阻塞性肺疾病急性期的早期诊断价值

    作者:毛卫未;江永青;欧阳良良;王文娟;吴蔚

    目的 探讨外周血白细胞CD11b指数、CD64指数在老年慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者的早期诊断价值.方法 收集2011-03/2013-12期间九江学院附属医院入院就诊的稳定期COPD患者82例(稳定组),急性期COPD患者86例(加重组)及84例健康志愿者(对照组).各组分别检测血常规、超敏C反应蛋白(hs-CRP),流式细胞术检测外周血白细胞CD64及CD11b的平均荧光强度(MFI),并换算成CD64指数和CD11b指数.筛选出诊断COPD急性加重期有差异的指标,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,进行曲线下面积、临界值、灵敏度及特异性比较.结果 与稳定期相比,老年COPD急性加重期CD11b指数降低和CD64指数升高,差异具有统计学意义(P<0.01),但老年COPD稳定组与健康对照组差异无统计学意义(P>0.05).以CD11b指数<0.94、CD64指数>1.83为临界值阳性标准,其诊断COPD急性加重期的敏感度分别为62.65%和77.11%,特异性分别为79.52%和98.80%.结论 外周血白细胞CD11b指数降低和CD64指数升高可作为早期诊断老年COPD急性加重的实验室依据,动态观察其水平变化,对评价治疗效果有一定价值.

    关键词: COPD CD64 CD11b ROC曲线
  • Caspase-14在恶性黑素瘤中的表达及意义

    作者:王馨苑;张霁;承尧;杜吉佩;陈德高;杨志梅;王玉芳;黄宁

    目的 明确caspase-14在恶性黑素瘤细胞和组织中表达水平及其对肿瘤细胞耐药的影响.方法 运用反转录PCR和Western blot技术检测人黑素细胞和恶性黑素瘤细胞内caspase-14的表达.恶性黑素瘤和皮内痣组织中caspase-14表达采用原位杂交和免疫组织化学方法检测.结果 Caspase-14在恶性黑素瘤细胞和黑素细胞中均有表达.T细胞识别的黑素瘤相关抗原1(MART-1)阳性肿瘤细胞中caspase-14表达高于MART-1阴性细胞.Caspase-14表达水平低的肿瘤细胞对化疗药物更敏感(P<0.01).在临床样本中,caspase-14在皮内痣中阳性率为70%,恶性黑素瘤组织中阳性率为97%,差别有统计学意义(P<0.05).结论 Caspase-14在恶性黑素瘤细胞和组织中均有表达.Caspase-14表达水平高的恶性黑素瘤细胞对化疗药物喜树碱和顺铂,以及放射治疗更加抵抗.

  • 脱落细胞人乳头瘤病毒L1壳蛋白的半定量检测有助于宫颈病变的鉴别诊断

    作者:徐小艳;杨金花;林妮;杨广英

    目的 研究人乳头瘤病毒L1 (HPV L1)壳蛋白的表达量与宫颈上皮内瘤变的关系及其临床意义.方法 采用免疫细胞化学方法检测153例宫颈脱落细胞中HPV L1壳蛋白的表达,用ImagePro Plus图像分析软件对HPV L1壳蛋白阳性单位(PU)进行半定量检测,并以宫颈活检的组织病理学结果为确诊标准.结果 HPV L1壳蛋白PU在宫颈细胞学分类为正常/炎症、未知意义的不典型鳞状细胞(ASCUS)、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变组别中定量结果依次为46.87±24.46、27.23±24.30、24.10±22.45、9.36±19.82,差异具有统计学意义(P<0.01);其PU在组织学正常/炎症、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变分组中分别为41.30±26.66、24.84 ±22.18、8.69±19.20,差异具有统计学意义(P<0.01);HPV L1壳蛋白PU与宫颈疾病的严重程度在细胞学分组和组织学分组中均呈负相关(r=-0.458,r=-0.441,P<0.01).在高危型HPV感染的细胞中,HPV L1壳蛋白PU在HPV16、HPV18中的含量低于其他分型,差异具有统计学意义(P<0.01),HPV L1壳蛋白PU与年龄无关(P>0.05).结论 半定量分析HPV L1壳蛋白在诊断宫颈癌前病变中具有一定的指导作用.

  • 脊髓灰质炎病毒2型和3型D抗原单克隆抗体的制备及鉴定

    作者:张春梅;宋朝君;李娜;董芸;田莹;张赟;金伯泉;李琦

    目的 制备脊髓灰质炎病毒2型(PV2)和3型(PV3)D抗原的单克隆抗体(mAb),并对抗体的特性进行初步鉴定.方法 以PV2及PV3的D抗原为免疫原,常规方法制备小鼠源性mAb,用间接ELISA检测小鼠腹水效价、型别特异性及与C抗原的交叉反应.结果 获得4株PV2特异性并与PV2的C抗原不交叉的mAb,2株PV3特异性并与PV3的C抗原不交叉的mAb.结论 成功制备了PV2及PV3特异性并与C抗原不交叉的D抗原mAb.

  • 小鼠抗人前B细胞白血病同源盒基因3多克隆抗体的制备与鉴定

    作者:张媛;王力民;赵威;韩海勃

    目的 制备前B细胞白血病同源盒基因3(PBX3)多克隆抗体.方法 采用反转录PCR扩增PBX3基因区序列,并重组入原核表达载体pGEX-4T-1,重组载体转化BL21大肠杆菌,异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导GST-PBX3融合蛋白的表达.SDS-PAGE纯化融合蛋白,并用GST-PBX3融合蛋白免疫BALB/c小鼠,收集经过免疫的小鼠血清即抗PBX3的多克隆抗血清,采用间接ELISA检测其效价,通过免疫细胞化学技术及Western blot法鉴定其特异性.结果 成功构建pGEX-4T-1/PBX3原核表达载体,转化BL21菌株后可高效表达GST-PBX3融合蛋白,且以不可溶包涵体形式存在.SDS-PAGE纯化蛋白并免疫小鼠产生的抗PBX3血清可特异识别细胞外源过表达的PBX3蛋白,同时可检测到细胞外源性PBX3蛋白的细胞内定位情况.结论 获得效价和特异性良好的PBX3多克隆抗体.

  • S100A10蛋白的表达及其抗体的制备

    作者:辛丹丹;邹晓华;佐满珍;刘朝奇

    目的 制备S100A10蛋白及其特异性抗体.方法 用PCR扩增编码S100A10的基因序列,将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,表达的蛋白产物经镍柱亲和层析纯化后,作为抗原皮内接种免疫日本大耳白兔,制备多克隆抗体,分别以ELISA,Western blot法检测抗体的滴度和抗原特异性.结果 成功构建原核表达载体pET28a(+)-(S100A10)2,得到纯化的(S100A10)2蛋白,制备的多抗具有较高的抗体滴度和抗原特异性.结论 建立了S100A10原核表达及纯化系统,成功制备了S100A10的多克隆抗体,为S100A10的进一步研究提供了工具.

  • pH值对胶体金标记单克隆抗体性能的影响

    作者:孙园园;王云龙;李玉林;王继创;程蕾;邓黎黎

    目的 探讨pH值对胶体金标记单克隆抗体(mAb)性能的影响.方法 用K2CO3调整胶体金溶液的pH值,得到pH值在5.0 ~9.0范围内的胶体金溶液,并用抗肠道病毒71型(EV71) VP1 mAb进行标记,牛血清白蛋白(BSA)封闭.用紫外-可见光谱扫描监测该标记过程中胶体金的性能改变.采用Mey氏稳定化实验检测免疫金的稳定性并检测制得的成品胶体金试纸条的灵敏度.结果 EV71-VP1 mAb在胶体金溶液pH值为7.0 ~8.5范围内制备的免疫金较稳定,且制得试纸条灵敏度高.结论 pH值是影响胶体金稳定性、决定胶体金与mAb间作用力的重要因素,并证实了紫外-可见光谱扫描评价pH值对胶体金标记的效果,建立了用紫外-可见光谱选择适标记pH的方法标准.

  • 单核-巨噬细胞的分化和功能研究进展

    作者:杨继乐;张莉;王莉

    单核-巨噬细胞系统的发现已愈百年.近年发现单核-巨噬细胞系统不仅在机体的自身稳态、免疫监视和抗感染等方面发挥关键作用,还参与了众多疾病的发生和发展.在发育来源上,成年个体的单核-巨噬细胞系统的成员不仅来源于骨髓造血,还来源于胚胎原始造血;在功能上,单核-巨噬细胞系统更是展现出广泛的异质性,尤其是近年来发现该系统具有重要的免疫调节功能.阐明单核-巨噬细胞系统的分化、激活、效应的细胞和分子机制,对深刻认识机体自身稳态、免疫应答、以及相关疾病发生发展,终建立有效的干预手段,具有重要的理论和实际意义.

  • 免疫活性细胞非神经乙酰胆碱系统的研究进展

    作者:刘志刚;韩波;李培杰

    免疫活性细胞表达胆碱乙酰转移酶(ChAT)、乙酰胆碱合成酶(AChE)、毒蕈碱和烟碱型乙酰胆碱受体(mAChR/nAChR),刺激免疫活性细胞上mAChR和nAChR,免疫细胞可以产生各种生化和功能的变化.活化免疫细胞,可以通过上调ChAT的表达,增加ACh的合成,而上调ChAT的表达.免疫细胞的免疫功能和淋巴细胞胆碱能活性密切相关.免疫细胞(如T细胞、B细胞、单核细胞)表达所有5种亚型的毒蕈碱型乙酰胆碱受体(mAChR M1~M5),同时表达不同亚型的烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR),如α3、α5、α7、α9和α10.用卵白蛋白(OVA)免疫敲除M1和M5基因小鼠,上调脾脏单核细胞的TNF-α、IFN-γ和IL-6产生.导致血清抗OVA特异性IgG1增加.而敲除α7基因小鼠,α7烟碱受体下调促炎因子,减少抗OVA特异性IgG1的产生.免疫活性细胞,通过mAChR和nAChR调节细胞因子及抗体的产生.非神经胆碱能系统(NNCS)参与调节免疫细胞功能,二者相互影响.

  • 单核/巨噬细胞脂质代谢和炎症在动脉粥样硬化中的作用

    作者:刘红利;孙颖;郎艳松;王宏涛

    动脉粥样硬化(AS)是慢性炎症性疾病,以胆固醇在动脉管壁积聚形成斑块为特征,炎症与脂质代谢相伴并相互协同共同促进AS病变进展.单核-巨噬细胞是机体防御系统的重要细胞之一,在AS早期单核细胞趋化黏附至内皮下分化为巨噬细胞,巨噬细胞内胆固醇摄入、合成、流出异常引起脂质积聚形成泡沫细胞是组成脂质条纹的主要成分,其平衡机制也是对炎症反应的适应性过程.同时巨噬细胞作为炎症细胞分泌多种细胞因子,对脂质代谢过程中的多种受体和基因也具有调控作用.针对巨噬细胞脂质代谢和炎症反应的共同环节将在治疗动脉粥样硬化性疾病中发挥重要作用.

  • IL-15参与调控肌肉与脂肪组织代谢的新进展

    作者:李颖慧;李凤娜;林彬彬;唐宇龙;印遇龙

    骨骼肌分泌的白细胞介素15(IL-15)能调控多种细胞的增殖与分化,并以内分泌和旁分泌的方式调节肌肉和脂肪组织代谢,从而维持整个机体的稳态.该领域的研究,有助于从分子水平上揭示畜禽生产中肉品质的调控途径,并提出其在治疗人类疾病(如肥胖、糖尿病、恶病质、肌肉萎缩等)方面的潜在意义.

  • 组蛋白泛素化、去泛素化以及与其他组蛋白修饰间的“串扰”

    作者:陈旭;杨安钢;王涛

    组蛋白泛素化、去泛素化是重要的组蛋白修饰方式,在基因转录调控、细胞周期及DNA损伤修复等过程中发挥着重要作用.组蛋白的泛素化及去泛素化修饰与组蛋白的其他共价修饰具有密切的联系,相互之间存在复杂的“串扰(crosstalk)”.组蛋白通过各种修饰之间的“串扰”形成精密的“组蛋白密码”,精细地调控着细胞核内重要的DNA事件.本文主要概述了组蛋白泛素化、去泛素化以及它们与其他组蛋白修饰间的“串扰”,揭示了组蛋白泛素化、去泛素化与其他组蛋白共价修饰的内在联系.

  • Annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的比较

    作者:张伟;梁智辉

    目的 比较annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的优缺点.方法 用DEX诱导胸腺细胞凋亡和H2O2诱导K562细胞系细胞凋亡,应用Hoechst33342/PI和annexin V-FITC/PI双色标记流式细胞术检测体系检测细胞凋亡情况.结果 Annexin V-FITC/PI双标记法能准确地反映2种模型中的细胞凋亡情况,与其检测原理一致;而Hoechst33342/PI双标记法虽能准确反映DEX诱导胸腺细胞的凋亡情况,但在检测H2O2诱导的K562细胞凋亡时,其早期凋亡细胞的分布与其检测原理明显不符.结论 与annexin-V-FITC/PI双标记法相比,Hoechst33342/PI双标记法有一定的局限性.

  • 小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白生物信息学分析

    作者:沈培;苏兆亮;王胜军;许化溪

    目的 获取小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体相关蛋白(GITR)氨基酸序列,并预测其结构和功能.方法 利用网络平台及相关生物学软件对小鼠GITR氨基酸序列进行生物信息学分析.结果 小鼠GITR氨基酸序列与人等其他物种具有56%的同源性,具有信号肽、胞外区、跨膜区及胞内区等结构;小鼠GITR蛋白胞外区位于第22~153号氨基酸序列区间;可能含有4个N-糖基化位点、4个丝氨酸磷酸化位点、1个苏氨酸磷酸化位点以及1个酪氨酸磷酸化位点.结论 小鼠GITR氨基酸序列的生物信息学分析为进一步表达该蛋白及其相关功能研究奠定了基础.

细胞与分子免疫学分期目录
期数
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2011 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12
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