细胞与分子免疫学杂志
Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology 세포여분자면역학잡지
- 主管单位： 中国免疫学会；第四军医大学
- 主办单位： 陕西省免疫学会,中国免疫学会
- 影响因子： 0.81
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-8738
- 国内刊号： 61-1304/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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自噬调控脂多糖诱导的巨噬细胞炎症因子水平
目的 探讨细胞自噬调控对脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞引发炎症反应的影响及其分子机制.方法 分离小鼠骨髓间充质干细胞,经过诱导分化获得骨髓来源的巨噬细胞,通过LPS刺激巨噬细胞建立炎症反应细胞模型.利用绿色荧光蛋白-微管相关蛋白1轻链3(GFP-LC3)质粒转染观察自噬体的形成;利用3-甲基腺嘌呤(3-MA)和雷帕霉素(Rap)分别抑制和促进细胞自噬,研究自噬干预对LPS诱导巨噬细胞炎症反应的影响;实时定量PCR检测LC3B、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β (IL-1β)、IL-6和IL-12p40的mRNA水平,Western blot法检测LC3B、核因子κB(NF-κB)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)的蛋白水平.结果 LPS刺激巨噬细胞2、4、6h,诱导巨噬细胞LC3B mRNA和蛋白高表达,巨噬细胞中自噬体增加.与单独LPS刺激相比,3-MA可抑制细胞自噬,显著增加炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-12p40 mRNA表达,而Rap处理减少自噬数量,降低TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-12p40 mRNA水平;自噬抑制后,可通过降低IκBα和增加p-NF-kBp65的表达而影响NF-κB信号通路,进而调节炎症细胞因子表达.结论 自噬可调控LPS刺激巨噬细胞引起的炎症反应.
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肿瘤相关巨噬细胞促进索拉非尼耐药肝癌细胞的增殖及侵袭和迁移
目的 探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAM)与表皮生长因子受体/β联蛋白(EGFR/β-catenin)信号通路在肝癌索拉非尼耐药中的机制.方法 采用Ficoll密度梯度分离法获取外周血单个核细胞,M-CSF培养诱导成TAM,并对其进行表型鉴定,ELISA检测TAM分泌的表皮生长因子(EGF)的水平,CCK-8法检测EGF对HepG2和SMMC7721肝癌细胞增殖的影响,TranswellTM实验检测EGF对HepG2和SMMC7721肝癌细胞侵袭和迁移的影响.将TAM与肝癌细胞共培养探讨下游信号通路,采用药物敏感实验培养R-HepG2和R-SMMC7721索拉非尼耐药细胞株,Western blot法和免疫组织化学染色检测β-catenin、EGFR蛋白水平和表达情况.结果 初步分离并鉴定TAM,与HepG2、SMMC7721细胞相比,培养获得索拉非尼耐药R-HepG2和R-SMMC7721细胞的增殖、侵袭、迁移能力明显增加;索拉非尼耐药细胞中加入TAM后,其生长率明显高于对照组,索拉非尼耐药细胞和肝癌组织标本中的β-catenin、EGFR的蛋白表达均高于对照组.结论 TAM与EGFR/β-catenin信号通路促进索拉非尼耐药肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移.
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欧亚旋覆花总黄酮通过抗氧化作用降低衰老大鼠骨髓间充质干细胞的凋亡
目的 探讨欧亚旋覆花总黄酮(IBFTF)对衰老大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)的改善效果及其机制.方法 用D-半乳糖(D-galactose)诱导大鼠BMSC建立衰老细胞模型,采用(12.5、25、50) μg/mL IBFTF处理BMSC.CCK-8法检测细胞增殖,试剂盒测定过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)的含量,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测BAX、Bcl-2、裂解的胱天蛋白酶3(c-caspase-3)的蛋白水平.结果 衰老组细胞的增殖率、SOD和CAT活性较对照组明显降低,而不同剂量的IBFTF促进D-Gal诱导的衰老细胞的增殖、增加SOD和CAT活性.衰老组的凋亡细胞比例、ROS含量、MDA水平、BAX/Bcl-2比值和c-caspase-3的蛋白表达量增加,而用不同浓度IBFTF治疗可显著降低衰老大鼠BMSC的凋亡、ROS的生成、MDA水平、BAX/Bcl2比值和c-caspase-3的蛋白水平.结论 IBFTF通过增强抗氧化作用减少衰老大鼠BMSC的凋亡.
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敲低鞘氨醇激酶1增强人结肠癌RKO细胞对顺铂的敏感性
目的 探讨沉默结肠癌RK0细胞鞘氨醇激酶1(SphK1)基因对顺铂(DDP)敏感性的影响及作用机制.方法 构建靶向SphK1基因的慢病毒载体并感染RKO细胞后,实时定量PCR检测SphK1的mRNA水平,Western blot法检测SphK1蛋白水平.然后将RKO细胞分为SphK1低表达组(shSphK1组)、阴性感染对照组(shControl组)和空白对照组.培养24、48、72 h,MTT法检测细胞增殖活性;(0、2、4、8、16、32) μg/mL DDP处理细胞后,MTT法再次检测细胞增殖活性,TUNEL检测细胞凋亡,Western blot法检测KI-67抗原(ki67)、Bcl-2、胱天蛋白酶9(caspase-9)和caspase-3蛋白的水平.结果 敲低SphK1基因能抑制RKO细胞的增殖,促进细胞凋亡.DDP呈时间和浓度依赖性抑制各组细胞的增殖,与对照组和shControl组相比,敲低SphK1的细胞增殖能力显著降低;DDP呈剂量依赖性诱导细胞凋亡,且敲低SphK1的细胞凋亡率明显高于对照组和shControl组.此外,敲低SphK1后,抑制ki67和Bcl-2的表达,增加caspase-9和caspase-3的表达,经DDP处理后,ki67和Bcl-2蛋白的表达水平明显下降,caspase-9和caspase-3蛋白的表达水平显著增加.结论 敲低SphK1基因降低Bcl-2水平、增加caspase-9、caspase-3水平,抑制RKO结肠癌细胞增殖并促进其凋亡,并增强RKO细胞对DDP的敏感性.
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过表达miR-134b抑制CD133+U87胶质瘤干细胞增殖及侵袭
目的 探讨微小RNA-134b (miR-134b)在胶质瘤干细胞(GSC)中的作用及相关机制.方法 实时定量PCR检测U87胶质瘤细胞系分离出的CD133+ GSC和CD133 GSC中miR-134b的表达量;包装慢病毒,构建过表达miR-134b的GSC,实时定量PCR检测其miR-134b、CD133、神经干细胞蛋白(nesfin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9和MMP-12 mRNA表达水平;Western blot法检测过表达miR-134b的GSC中Notch2、MMP-2、MMP-9和MMP-12蛋白表达;TranswellTM侵袭实验检测过表达miR-134b对GSC侵袭能力的影响;建立U87细胞裸鼠成瘤模型,皮下注射过表达miR-134b(实验组)及空载体(对照组)的CD133+ GSC,定期测量肿瘤大小,70 d后处死裸鼠,测定肿瘤质量,以探讨过表达miR-134b对在体肿瘤生长的影响.结果 实时定量PCR检测结果表明,与CD133-GSC相比,CD133+ GSC中miR-134b表达显著下调;通过慢病毒包装的方法成功构建过表达miR-134b的GSC,其miR-134b的表达显著高于空载体对照细胞,而MMP-2、MMP-9 mRNA及蛋白表达无显著变化,而MMP-12的mRNA及蛋白表达均显著下降;TranswellTM侵袭实验结果表明,与对照组相比,过表达miR-134b抑制CD133+ GSC的侵袭能力;实验组裸鼠体内肿瘤体积显著低于对照组,与对照组相比,过表达miR-134b的实验组肿瘤质量也降低了42％.结论 过表达miR-134b抑制CD133+ GSC的生长和侵袭.
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重组嗜肺军团菌鞭毛蛋白A(rflaA)体外诱导小鼠RAW264.7巨噬细胞分泌IL-6和IL-1β
目的 探讨重组嗜肺军团菌鞭毛蛋白A(rflaA)对RAW264.7巨噬细胞分泌白细胞介素6(IL-6)、IL-1β的影响及其机制.方法 采用(0.000、0.125、0.250、0.500、1.000、2.000、4.000、8.000) μg/mL rflaA处理RAW264.7细胞,并设细胞对照组,用CCK-8法确定rflaA的半数效应剂量(EC50).采用(0.04、0.08、0.16) μg/mL rflaA处理RAW264.7细胞24、36、48 h,采用ELISA检测IL-6、IL-1β分泌水平;(0.04、0.08、0.16)μg/mL rflaA处理RAW264.7细胞6、12、24、36、48 h,收集细胞,实时定量PCR检测IL-6、IL-1β、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(caspase-1)mRNA的含量;Western blot法检测NLRP3、c~pase-1蛋白水平.结果 rflaA可促进RAW264.7细胞因子分泌,RAW264.7细胞被不同剂量的rflaA作用24、36、48 h,随rflaA剂量的递增,IL-6、IL-1β水平增加,以0.16 μg/mL剂量时作用显著,36 h达高峰;rflaA可增加RAW264.7细胞的IL-6、IL-1β、NLRP3、caspase-1RNA水平,0.16μg/mL rflaA作用显著,12 h达高峰;RAW264.7细胞被不同剂量的rflaA作用6、12、24、36 h,随rflaA剂量增加NLRP3、caspase-1表达水平增加,以0.16 μg/mL剂量时作用显著,24h达高峰.结论 rflaA通过刺激NLRP3、caspase-1而增加RAW264.7细胞IL-6、IL-1β的分泌.
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敲低钙黏素17(CDH17)抑制那可丁耐药性SW480人结肠癌细胞的增殖并促进其凋亡
目的 探讨钙黏素17(CDH17)对那可丁耐药性人结肠癌细胞增殖和凋亡的作用.方法 采用小干扰RNA(siRNA)敲低那可丁耐药性SW480人结肠癌细胞CDH17的水平,采用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测SW480细胞中CDH17 mRNA和蛋白水平.那可丁处理CDH17下调后的SW480细胞,平板克隆形成实验和MTT实验检测细胞的增殖及细胞活性情况;异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexinV-FITC/PI)双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测凋亡蛋白多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、caspase-3的蛋白水平.结果 与空载感染的SW480细胞以及对照组相比,CDH17-siRNA感染的SW480细胞中CDH17 mRNA和蛋白水平均下调.与空载感染的SW480细胞及对照组相比,那可丁处理后,CDH17-siRNA感染的SW480细胞克隆形成率下降、细胞存活率下降;细胞凋亡率升高,PARP、caspase-3蛋白切割活性增强.结论 下调CDH17水平可抑制SW480细胞增殖,同时促进细胞凋亡,增强耐药株SW480细胞对那可丁的敏感性.
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瑞喹莫德(R848)具有更强的免疫佐剂效应
目的 选择目前常用的几种商业化Toll样受体(TLR)配体进行对比,考察各候选物在小鼠体内外诱导增强Th1型细胞免疫反应的特点,为新疫苗佐剂的研究和筛选提供支持.方法 TLR配体多肌胞苷酸[poly(I:C)]、单磷酰脂质A(MPLA)、瑞喹莫德(R848)、含CpG序列寡核苷酸C(CpG-C)体外刺激小鼠树突状细胞(DC),采用ELISA检测细胞上清液白细胞介素12(IL-12)的水平;以卵清蛋白(OVA)为抗原,各TLR配体为佐剂免疫小鼠后,流式细胞术检测引流淋巴结中DC、自然杀伤(NK)细胞比例和表型变化以及CD4+T细胞、CD8+T效应细胞比例的变化;ELISA检测免疫小鼠血清中抗OVA抗体IgG2a的浓度.结果 在体外实验中,仅CpG-C和R848能显著增强IL-12的分泌.在体内实验中,与其他TLR配体佐剂相比,R848更有效地促进DC和NK细胞向小鼠淋巴结中聚集并诱导CD4+和CD8+效应T细胞生成,以及刺激产生大量抗OVA特异性IgG2a.结论 与其他免疫佐剂相比,R848更具增强Th1细胞免疫作用.
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鼠李糖乳杆菌改善卵清蛋白诱导的食物过敏小鼠症状及其机制
目的 考察鼠李糖乳杆菌GG株(LGG)对卵清蛋白诱导的食物过敏小鼠外周血白细胞介素4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)水平的影响.方法 将食物过敏小鼠分为食物过敏组、LGG低剂量组[1×108菌落形成单位(CFU)/mL,每天每只小鼠灌胃200 μL]、LGG高剂量组(1×109 CFU/mL,每天每只小鼠灌胃200 μL),以同期10只正常小鼠为对照.造模成功后开始给药,LGG连续灌胃给药22 d,过敏模型组和正常小鼠连续灌胃生理盐水22d.检测23 d的过敏症状,测定体质量和胸腺指数、脾脏指数,ELISA检测血清卵清蛋白(OVA)特异性IgE、IL-4和IFN-γ水平,HE染色检测小肠组织病变情况和细菌培养法检测粪便菌群的改变.结果 各组小鼠的胸腺指数和脾脏指数差异不明显.与对照组比,过敏小鼠模型组IL-4水平、过敏评分、大肠杆菌和类杆菌明显增加,IFN-γ水平降低、IFN-γ/IL-4比值、IgE、体质量、双歧杆菌和乳酸杆菌明显减少;肠道黏膜坏死,部分上皮细胞水肿,坏死.与过敏小鼠模型组比,LGG处理的小鼠IL-4水平、过敏评分、大肠杆菌和类杆菌明显降低,IFN-γ水平升高、IFN-γ/IL-4比值、IgE、体质量、双歧杆菌和乳酸杆菌明显增加,且呈剂量依赖性关系;LGG小鼠肠道黏膜完整,小肠细胞排列紧密.结论 LGG可显著改善OVA诱导的食物过敏小鼠的过敏症状,可能与降低外周血IL-.4/IFN-γ比值有关.
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乳鼠海马神经元的分离和原代培养
目的 建立一种简单、稳定的乳鼠海马神经元的分离及原代培养方法.方法 选用出生24h内的乳鼠,分离双侧海马区,机械吹打分散,获得细胞悬液.用含胎牛血清的DMEM/F12培养基培养24h后,换成添加B27的Neuralbasal培养基进行原代培养,第7天采用神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫荧光细胞化学染色鉴定神经元纯度.结果 在体外培养条件下海马神经元细胞结构特征明显,能形成典型的神经细胞网络,100％细胞呈NSE阳性.结论 依靠简单的机械分散并配合特定培养条件可获得生长状态良好、纯度高的海马神经元.
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伊马替尼通过上调A20抑制Jurkat T细胞NF-κB通路
目的 研究伊马替尼(imatinib)对Jurkat T细胞中A20、A20结合的核因子κB抑制物1(ABIN1)表达的影响.方法 用(25、50、100) nmol/L imatinib处理Jurkat T细胞24h,应用实时定量PCR检测A20、ABIN1、核因子κB(NF-κB)的mRNA水平,Western blot法检测A20、ABIN1、NF-κB蛋白水平.结果 佛波酯/离子霉素混合物刺激Jurkat T细胞,可明显上调ABIN1和A20的mRNA和蛋白的表达.Imatinib明显抑制Jurkat T细胞ABIN1、NF-κB mRNA和蛋白的水平,上调A20 mRNA和蛋白水平.结论 Imatinib通过上调A20水平抑制NF-κB通路激活,该作用不需要ABIN1参与.
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五味温通除痹胶囊促进佐剂性关节炎大鼠滑膜组织细胞自噬活性及机制
目的 观察五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎(AA)大鼠滑膜组织中磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素白蛋白(PI3 K/AKT/mTOR)信号通路关键基因表达的影响,探讨其防治类风湿性关节炎的可能机制.方法 SD大鼠,随机分为正常组、模型组、(0.80、1.60、3.20) g/kg五味温通除痹胶囊治疗组、40 mg/kg雷公藤多甙片治疗组,每组10只.除正常组外,采用Freund完全佐剂诱导AA大鼠模型.致炎后第12天灌胃给药,每天1次,连续12 d.实验结束后,取非致炎侧踝关节,HE染色观察病理组织学改变,实时定量荧光PCR测定滑膜组织中PI3K、AKT、mTOR、p70s6、beclin 1 mRNA的水平,免疫荧光组织化学染色和Western blot法检测滑膜组织中PI3K、AKT、磷酸化的AKT (p-AKT)、mTOR、p-mTOR、p70s6、p-p70s6、beclin 1蛋白的表达.结果 与模型组相比,(1.60、3.20) g/kg五味温通除痹胶囊治疗组不仅可减轻AA大鼠踝关节病理组织学损伤程度,还可降低PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR、p70s6、p-p70s6的水平,提高beclin 1的水平.结论五味温通除痹胶囊可抑制PBK/AKT/mTOR信号通路,上调AA大鼠滑膜细胞自噬活性,减轻关节软骨损伤.
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二甲双胍对大鼠催乳素瘤MMQ细胞增殖和凋亡的影响及机制
目的 探讨二甲双胍对大鼠催乳素瘤MMQ细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响及其机制.方法 采用(1.25、2.5、5、10、20) mmol/L二甲双胍处理MMQ细胞48 h,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,Western blot法检测AMP活化的蛋白激酶α1/2 (AMPKα1/2)、磷酸化的AMPKα (p-AMPKα)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化的mTOR(p-mTOR)、胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)、胞外信号调节激酶1/2 (ERK1/2)、磷酸化的ERK1/2 (p-ERK1/2)、蛋白激酶B(PKB/AKT)、磷酸化的AKT(p-AKT)、P21、细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、裂解的caspase-3(c-caspase-3)、Bcl-2、Bcl-2相关X蛋白(BAX)的变化.结果 二甲双胍处理后,抑制MMQ细胞增殖,使细胞周期阻滞在G0/G1期,诱导细胞凋亡;细胞周期相关蛋白P21增加,CDK4、cyclin D1水平降低;c-caspase-3增加,caspase-3、Bcl-2降低;p-AMPKα水平增加、p-mTOR水平降低;IGF-1R、p-AKT及p-ERK水平降低.结论 二甲双胍可能通过激活AMPK/mTOR通路、抑制IGF-1R通路从而抑制MMQ细胞增殖,诱导细胞周期阻滞及细胞凋亡.
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不良心理应激通过上调乳酸脱氧酶A水平促进胶质瘤增殖和侵袭
目的 探讨乳酸脱氢酶A(LDHA)表达在不良心理应激促进脑胶质瘤细胞增殖及侵袭中的作用.方法 将胶质瘤荷瘤裸鼠分为荷瘤组、荷瘤应激组、阴性对照组、短发夹RNA (shRNA)-乳酸脱氧酶A(LDHA)组、shRNA-LDHA应激组.束缚应激4周后,测量各组裸鼠肿瘤大小;利用ELISA检测血清中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(EPI)的含量;通过比色法检测瘤组织中乳酸的量;Western blot法检测各组瘤组织LDHA蛋白表达.采用CCK-8法和平板克隆形成实验检测NE对胶质瘤LN229细胞增殖的影响;TranswellTM法检测其侵袭能力;实时定量PCR检测LN229细胞LDHA mRNA表达水平;Western blot法检测LDHA、胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、缺氧诱导因子1oα(HIF-1α)蛋白表达;利用荧光素酶报告基因活性检测实验研究NE调节LDHA表达的分子机制.结果 与荷瘤组比较,荷瘤应激组肿瘤的大小、EPI、NE、乳酸的含量及LDHA蛋白表达水平均明显增加;而沉默LDHA后,肿瘤的增殖速度、乳酸的含量显著降低;与对照组比较,NE促进LN229细胞LDHA mRNA水平,上调LDHA蛋白表达、ERK1/2和HIF-1α蛋白磷酸化水平,且细胞增殖速度、侵袭能力均增强;荧光素酶报告基因实验证实NE通过HIF-1α上调LDHA的表达.结论 不良心理应激通过上调LDHA表达促进胶质瘤增殖和侵袭.
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莽草酸抑制大鼠RBL-2H3细胞脱颗粒和组胺释放
目的 研究莽草酸对大鼠RBL-2H3细胞增殖和化合物48/80(C48/80)诱导后细胞脱颗粒情况及其机制.方法 MTT法检测(3、10、30) μg/mL的莽草酸处理后,RBL-2H3细胞的增殖情况,甲苯胺蓝染色观察C48/80诱导RBL-2H3细胞脱颗粒的情况,底物法检测(0、12.5、25、50、80、100) μg/mL C48/80处理后,RBL-2H3细胞内β-氨基己糖苷酶的释放,ELISA检测各处理组细胞上清液中组胺的含量.结果 (3、10、30)μg/mL莽草酸对RBL-2H3细胞增殖无明显抑制作用,RBL-2H3细胞脱颗粒与C48/80的剂量有一定量效关系;莽草酸能抑制大鼠RBL-2H3细胞脱颗粒;与阳性对照组相比,莽草酸处理C48/80刺激后的RBL-2H3细胞,其β-氨基己糖苷酶释放率和组胺释放量均显著降低.结论 莽草酸可抑制大鼠RBL-2H3细胞脱颗粒,减少组胺释放.
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叉头结构域抑制物6(FDI-6)通过下调细胞核FoxM1增加喉癌细胞凋亡并抑制其侵袭和迁移
目的 探讨新型小分子抑制剂叉头结构域抑制物6(FDI-6)对喉癌Hep-2细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及机制.方法 采用MTT法检测(5、10、20、40、80) μmol/L FDI-6处理12、24h后,Hep-2细胞的增殖情况.采用流式细胞术检测(10、20) μ.mol/L FDI-6处理Hep-2细胞24h后细胞凋亡情况,TranswellTM法检测细胞侵袭、迁移能力的变化.实时荧光定量PCR检测叉头盒M1(FoxM1)的mRNA水平,Western blot法检测FoxM1、Bcl-2、BAX的蛋白水平.结果 FDI-6可明显抑制喉癌Hep-2细胞的增殖,并呈浓度和时间依赖性.与对照组相比,FDI-6组可诱导Hep-2细胞凋亡,抑制细胞的侵袭和迁移,且浓度越大,抑制作用越明显.FDI-6处理喉癌Hep-2细胞24h后,FoxM1 mRNA和蛋白水平无明显改变.Bcl-2蛋白水平下降,BAX蛋白水平升高,而在细胞核中FoxM1的蛋白水平随FDI-6浓度升高而降低.结论 FDI-6可抑制喉癌Hep-2细胞的增殖、侵袭、迁移,并诱导细胞凋亡,可能与下调细胞核中FoxM1有关.
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敲低DAB2相互作用蛋白(DAB2IP)促进膀胱癌细胞增殖并抑制其凋亡
目的 研究残疾基因同源物2 (DAB2)相互作用蛋白(DAB2IP)在人膀胱癌组织中的表达并分析与肿瘤病理分级、临床分期的相关性,同时观察DAB2IP与膀胱癌化疗耐药的关系.方法 通过免疫组织化学染色方法检测初发和复发膀胱癌中DAB2IP的表达差异.应用RNA干涉(RN Ai)技术敲低5637和253J膀胱癌细胞中DAB2IP的表达后,采用MTT法、克隆形成实验验证癌细胞对吡柔比星的敏感性的变化,流式细胞术检测吡柔比星处理后DAB2IP低表达细胞的凋亡率.结果 DAB2IP的表达与膀胱癌TNM分期、病理分级及淋巴结转移等负相关,复发的膀胱癌组织DAB2IP的表达低于初发膀胱癌组织.DAB2IP的低表达与膀胱癌细胞抗药性相关,敲低DAB2IP的水平增强膀胱癌细胞的集落形成能力,促凋亡蛋白PARP和caspase-3表达减少,抑制凋亡蛋白Bcl-2和Mcl-1的表达增加,癌细胞凋亡能力降低、引起化疗耐受.结论 敲低DAB2IP的水平可促进膀胱癌细胞的增殖并抑制凋亡,同时增强其化疗耐受性.
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急性早幼粒细胞白血病的细胞表面免疫分子的检测和分析
目的 研究急性早幼粒细胞白血病(APL)表型特征及临床意义.方法 采用流式细胞术四色方案对APL进行免疫分型,以CD45/SSC-lin图定位白血病细胞,依据抗原表达强度将抗原表达划分为五级分析.结果 典型APL细胞抗原表达强度及所占比例依次为:CD33(100％)、髓过氧化物酶(MPO) 100％、CD38(82.35％)、CD13(64.71％)、CD64(50％)、CD123(47.06)、CD117 (44.12％),HLA-DR和CD34基本不表达;伴淋系表达APL患者化疗后缓解率明显低于阴性APL患者.结论 APL免疫分型典型表型特征为高侧向角散射(high SSC)、CD33+(Ⅰ级)、CD38+(Ⅰ级)、MPO+(Ⅰ级)、CD13+(Ⅲ级)、CD64+(Ⅰ级/Ⅲ级)、CD117+(Ⅱ级/Ⅲ级/Ⅳ级)、CD123+(Ⅲ级/Ⅳ级)、CD11b-、HLA-DR-、CD34-.掌握APL免疫表型特征有助于APL快速诊断,且对MRD检测有指导意义.
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中国西南地区汉族甲状腺乳头状癌患者IL-27基因多态性分析
目的 探索中国西南地区汉族人群白细胞介素27(IL-27)基因多态性与甲状腺乳头状癌(PTC)的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)对211例PTC患者和216例健康对照组IL-27基因多态性进行分析.结果 PTC患者和健康对照组之间IL-27基因rs153109、rs17855750和rs181206多态性无显著性差异,与PTC患者中rs153109 A/A基因型相比,PTC患者中rs153109 G/G基因型更容易出现甲状腺被膜浸润.IL-27基因3个单核苷酸多态性(SNP)存在GTC组合的个体存在发展为PTC的风险.结论 IL-27基因多态性与PTC的发生并无显著关系,但rs153109 G/G基因型与甲状腺被膜浸润有一定关系,具有GTC单体型的个体较易发生PTC.
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慢性乙型病毒性肝炎患者外周血单个核细胞ICOS/ICOSL水平升高并与病情相关
目的 检测慢性乙型肝炎(CHB)患者不同阶段外周血单个核细胞(PBMC)中诱导性共刺激分子(ICOS)及诱导性共刺激分子配体(ICOSL) mRNA的水平,并探索其临床意义.方法 收集80例CHB患者以及20例健康对照者(HC)的外周血,检测血清中的丙氨酸转氨酶(ALT)、HBV血清标志物乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)和HBV DNA定量;采用实时荧光定量PCR检测PBMC中的ICOS、ICOSL mRNA的水平.结果 与正常对照相比,HBeAg+和HBeAg-患者ICOS、ICOSL的mRNA水平均明显升高,但HBeAg+和HBeAg-患者间无显著差异.根据其血清ALT、HBsAg、HBeAg和HBV DNA定量结果将CHB患者其分为免疫耐受期、免疫活跃期、免疫低复制期、HBeAg阴性慢性肝炎期,分析其结果发现免疫活跃期ICOS和ICOSL的mRNA水平较其他各期明显增加.结论 CHB患者PBMC中ICOS和ICOSL的mRNA水平升高,且与疾病活动度和病程相关.
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36例淋巴细胞白血病患者ABO血型抗原减弱的凝集强度分析
目的 了解淋巴细胞白血病患者ABO血型抗原减弱的凝集强度及抗体变化情况,探讨适宜的血型血清学检测方法.方法 采用全自动血型分析仪对淋巴细胞白血病患者血标本进行ABO血型、RhD血型鉴定,对正定型凝集强度小于3+的患者血标本,再采用试管法进行抗原凝集强度检测、吸收放散试验及血清抗体检测.结果 在36例ABO血型抗原减弱的淋巴细胞白血病患者中,A抗原减弱者19例(52.8％)、B抗原减弱者14例(38.9％)、AB抗原减弱者3例(8.3％),A抗原减弱者高于B抗原减弱者.血型抗原减弱的凝集强度强凝集者13例(36.1％)、较强凝集者10例(27.8％)、混合外观凝集者8例(22.2％)、不凝集者5例(13.9％).血清中抗体凝集强度弱于2+(2+w)5例(13.9％),其中抗A抗体减弱者2例(5.6％),抗B抗体减弱者3例(8.3％).对患者红细胞进行吸收放散试验,凝集强度由阴性至强凝集增加到较强凝集至极强凝集,检出了与患者血清中抗体相对应的预期血型抗原.结论 对血型抗原减弱的淋巴细胞白血病患者采用ABO正反定型、吸收放散试验及血清抗体检测,可正确鉴定ABO血型,确保临床输血安全有效.
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H1N1型流感病毒小鼠杂交瘤单克隆抗体的制备和鉴定
目的 纯化H1N1流感病毒作为抗原免疫小鼠制备单克隆抗体(mAb),并以mAb为工具分析病毒对宿主细胞的感染情况.方法 鸡胚培养A/PR/8 (H1N1),收获尿囊液,蔗糖密度梯度离心纯化病毒,透射电镜鉴定病毒颗粒,甲醛灭活病毒后免疫小鼠,评价抗原免疫效果,取鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合制备mAb.用ELISA、免疫荧光细胞化学染色、Western blot法、血凝抑制试验和微量中和试验对mAb特性进行鉴定.依据流式细胞术用血凝素mAb分析流感病毒感染MDCK细胞后血凝素蛋白在宿主细胞膜上展示特征和病毒感染对细胞凋亡的影响.利用血凝素mAb建立基于细胞的ELISA(Cell-based ELISA)并对病毒增殖和感染动态进行分析.结果 纯化出的A/PR/8病毒在电镜下呈圆形、椭圆形和棒状,免疫小鼠血清中流感病毒IgG滴度动态增长,免疫6周后IgG滴度达106.免疫小鼠脾细胞与Sp2/0细胞融合制备出6株流感病毒mAb,其中PR8-10 mAb血凝抑制活性和中和活性均高,分别为1:2048和1:640.免疫荧光细胞化学染色和Western blot结果表明该mAb可与血凝素结合.流式细胞术显示PR8-10也可识别细胞膜上的血凝素,同时发现病毒感染细胞后会引起细胞凋亡.依据PR8-10可识别细胞膜上的血凝素原理建立的Cell-based ELISA可分析病毒增殖情况.结论 纯化出完整病毒颗粒免疫小鼠可刺激产生抗病毒IgG,并制备出高亲和活性和中和活性的H1N1病毒mAb,该mAb可分析病毒感染特征以及病毒对细胞的影响.
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长链非编码RNA的免疫调节作用及其与疾病的关系
长链非编码RNA (lncRNA)是指不编码蛋白质且长度大于200个核苷酸的RNA.越来越多的研究发现,起初被认为是“噪音”的IncRNA通过参与细胞的活化、增殖和分化等影响人体的生理病理活动,在人体免疫系统中,有多种免疫细胞在保护机体和维持免疫稳态发挥着重要的作用,IncRNA在免疫系统中通过调控免疫相关基因的表达、与T淋巴细胞某些细胞因子结合、参与B淋巴细胞与树突状细胞(DC)的分化发育等,影响免疫炎症相关疾病的发生和发展.本文主要介绍lncRNA的分类以及IncRNA在免疫系统调节和相关免疫炎症疾病的差异表达和分子机制方面研究进展.
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胃肠道间质瘤的免疫治疗研究进展
胃肠道间质瘤(GIST)是胃肠道常见的间叶来源肿瘤.外科切除是佳的治疗手段,伊马替尼是目前有效的治疗药物.由于耐药的存在,部分患者预后不佳.机体的免疫状态与肿瘤进展密切相关,且肿瘤的免疫治疗具有良好的前景,大量研究探索了GIST与免疫的关系并尝试进行GIST的免疫治疗.GIST肿瘤组织内存在大量浸润的巨噬细胞、淋巴细胞、树突状细胞(DC)、自然杀伤(NK)细胞等免疫细胞,且这些细胞的亚型、数量和表型与肿瘤的临床病理特征及预后密切相关.在药物治疗过程中,免疫细胞及相关细胞因子也发挥了重要作用.GIST的免疫治疗也取得了较好的疗效,尤其是基于免疫检查点的治疗具有良好的前景.
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IL-6介导免疫炎性反应作用及其与疾病关系的研究进展
白细胞介素6(IL-6)在免疫系统中具有多效性和多功能性.IL-6主要由巨噬细胞产生,通过去除传染性病原体、诱导受损组织愈合、急性期免疫反应以及凝血级联反应从而执行保护功能.IL-6的表达调控严格遵循转录机制,但转录后机制失调后,持续产生的IL-6在自身免疫性疾病和慢性炎症中有重要作用.近年来,用人源化的抗IL-6受体抗体阻断IL-6能对疾病的治疗产生明显疗效,相关的分子靶向制剂也正在研究中.
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NK细胞及其在靶向治疗中的应用
自然杀伤(NK)细胞是一群来源多样、分布广泛的异质性固有免疫细胞.NK细胞以多种细胞表型出现在中枢和外周免疫器宫及多个非免疫器官如肝脏、子宫和肺脏等.传统NK细胞和组织驻留NK细胞的表型差异与细胞功能相关.基于NK细胞的细胞毒等免疫学特性,NK细胞免疫靶向治疗如单克隆抗体、过继转移和多价特异性杀伤细胞衔接体(kiuer cellengager)的应用,在肿瘤免疫治疗中已经取得了一定的成果,为肿瘤细胞免疫治疗提供了重要的基础数据和临床经验.为此,我们总结了NK细胞亚群分布、表型特征、功能特点及相关免疫治疗方案等.
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疱疹病毒诱导天然免疫应答的分子机制
天然免疫是机体抵御病原微生物入侵的第一道防线.疱疹病毒感染宿主后,宿主细胞可通过Toll样受体、维甲酸诱导基因1(RIG-1)样受体和胞质DNA受体等模式识别受体(PRR)识别和监测病原相关分子模式(PAMP)的存在,快速启动天然免疫应答,介导1型干扰素(IFN-1)和炎症细胞因子的大量产生以及激活自然杀伤(NK)细胞等,从而影响病毒的早期复制和致病机制.我们重点总结了几类关键PRR对疱疹病毒的识别以及病毒感染诱导的天然免疫应答机制.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 |
| 1995 | 01 02 03 |
| 1994 | 01 02 |
| 1993 | 01 02 03 04 |
| 1992 | 01 02 03 04 |
| 1991 | 01 02 03 04 |
| 1990 | 01 02 |
| 1989 | 01 02 03 04 |
