胃动力检测方法的研究新进展

胃动力性疾病是近年来的研究热点.其诊断除依据临床表现,更有赖于胃动力和功能的检测.本文就近年来国内外胃动力检测方法的研究新近展进行综述如下.

幽门螺旋杆菌疫苗的研究现状

幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,H.pylori)是寄居于胃黏膜的人类常见的病原菌之一,危害大,抗生素的治疗存在缺陷(高费用、耐药等),故早在20世纪90年代初,有几个国外实验室开始进行口服接种H.pylori疫苗防治其感染的研究,至今已投入了大量的人力、物力.这必将加快疫苗研制的进程,但目前仍有几个关键性问题尚未解决.

隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)感染

乙型肝炎病毒(HBV)感染是主要的病毒性感染之一.多数感染可无临床症状,依赖于血清病毒标志物(HBVM)检测可明确诊断,其中血清乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性是HBV感染的重要依据.而HBsAg的阴转及抗-HBs的出现一直认为是HBV清除和临床痊愈的标志.而近年来,随着分子生物学技术在病毒检测技术中的应用,这一传统观点逐渐受到挑战:己发现部分复制水平较低的病毒携带者血清中HBsAg阴性,但血清或肝组织中HBVDNA持续存在,从而提出"隐匿性HBV感染"的概念[1].这种感染状态可发生于抗-HBs和(或)抗-HBc阳性的患者,也可见于乙型肝炎抗原、抗体5项检测全为阴性的个体.

幽门螺杆菌感染相关的炎症反应和胃酸分泌

全球超过50%的人感染Helicobecter pylori,但感染造成的结局却各不相同.多数感染者表现为慢性胃炎,仅少数人发展为更严重的疾病:消化性溃疡、胃癌及胃MALT淋巴瘤.导致不同结局的因素可能为:①H.pylori菌株毒力的不同;②宿主对H.pylori感染反应的差异;③环境因素;④处于H.pylori感染的不同阶段.目前认为,H.pylori感染的炎症反应与胃酸分泌间的相互影响是决定临床预后的重要因素之一[1].

便秘型肠易激综合征肛门直肠动力学的临床研究

目的 观察便秘型肠易激综合征(IBS)的肛门直肠动力学改变.方法采用灌注式测压装置测定18例便秘型IBS患者和15例健康人的肛门直肠压力、直肠对容量刺激的低敏感量、大耐受量及直肠顺应性.结果便秘型IBS的直肠、肛门内外括约肌静息压力、内括约肌主动收缩压、模拟排便时直肠收缩压、内外括约肌净减压与对照组相比无显著性差异.肛门-直肠屏障压便秘型IBS组高于对照组(P＜0.05).直肠对容量刺激的低敏感量便秘型IBS组低于对照组(P＜0.05),大耐受量及顺应性均高于对照组(P＜0.01).结论便秘型IBS存在肛门直肠动力学异常,这种异常可能是导致便秘的原因.

非糜烂性反流病临床和动力特征的初步研究

目的 对非糜烂性反流病(NERD)临床和食管功能检查的特征进行初步的探讨.方法74例根据内镜检查、24h食管pH和胆汁联合监测的结果分为NERD组(36例)和反流性食管炎(RE)(38例),对其进行一般状况、内镜表现和动力检查等方面的比较分析.结果NERD组的女性发病倾向、合并食管裂孔疝少,与BE存在显著差异.两组24b食管pH监测无显著差异,但NERD组24h食管胆汁监测的各项指标:光吸收值＞0.14时间百分比(%)、反流＞5 min的次数分别为8.6±11.8、3.0±3.8,均显著RE低于相应的17.1±22.2、5.4±6.0,体部收缩波幅则高于RE患者(P＜0.05).结论NERD与RE患者的临床、食管动力特征存在差异,RE患者中十二指肠胃食管反流(DGER)发生更频繁,相对更为严重,提示两者病理生理机制可能有不同之处.

幽门螺杆菌鞭毛基因PCR-RFLP分析及其与胃十二指肠疾病关系的研究

目的 探讨幽门螺杆菌(helicobacter pylori H.pylori)鞭毛基因(flaA和flaB)PCR-RFLP分型及其与胃十二指肠疾病的关系.方法用PCR技术分别扩增46株从消化性溃疡(25株)和非消化性溃疡(21株)患者胃黏膜中分离得到的H.pyloriflaA和flaB基因,并用HpaⅡ和HindⅢ消化PCR扩增产物,琼脂糖凝胶电泳分离酶切片段,将酶切片段编码后输入SPSS10.0软件进行聚类分析,并比较不同的基因型别在溃疡组和非溃疡组的分布.结果46株H.pylori菌株flaA基因HpaⅡ和HindⅢ酶切后分别产生4种和3种酶切图谱;flaB基因HpaⅡ和HindⅢ酶切后分别产生1种和2种酶切图谱.综合flaA和flaB基因酶切结果,46株菌株可分为四个基因型别.但这四个基因型别在溃疡组和非溃疡组的分布差异无统计学意义(P=0.513).结论应用PCR-RFLP方法可以将H.pylori fla基因分为不同的基因型别,但胃十二指肠溃疡和非溃疡组的菌株fla基因型别无差别.

人食管癌Eca-109细胞膜抗原筛选的初步研究

目的 从人食管癌Eca-109细胞入手,寻找能引起CTL免疫反应的肿瘤抗原,筛选出高效肿瘤抗原的大致范围.方法采用敏感的序列特异性引物-聚合酶链反应(PCR-SSP)来确定Eca-109细胞HLA基因分型,用HLA血清学分型技术(Terasaki改良的微量细胞毒试验)筛选健康志愿者;用MTT法测定致敏T细胞的细胞毒活性.结果Eca-109细胞的HLA的基因分型为A*03,A*24;B*35,B*37;DRB1*01,DRB1*12;DRB3;筛选到一例表型为A03杂合子的健康志愿者.根据MTT检测,Eca-109细胞小于10KD膜蛋白免疫原性较未使用去垢剂的总膜蛋白的免疫原性高,小于3KD膜蛋白的免疫原性高.结论Eca-109细胞膜蛋白中存在能引起特异性的抗肿瘤CTL免疫反应的肿瘤抗原,其中小于3KD的膜蛋白成分中可能存在人食管癌的高效肿瘤抗原.

二甲亚砜对人食管癌Eca109细胞细胞周期及DNA聚合酶β表达的影响

目的 研究二甲亚砜(DMSO)对人Eca109细胞细胞周期及DNA聚合酶β(pol β)表达的影响.方法用1.5%DMSO处理Eca109细胞,流式细胞仪分析细胞周期的改变,RT-PCR法检测pol β表达水平的变化.结果DMSO处理后的Ecal09细胞,pol βmRNA表达明显下调,且细胞周期明显改变,G1/G0期细胞增多,S期细胞减少.结论DMSO可抑制Eca 109细胞pol β的表达,使Eca109细胞生长停滞于G1/G0期.

人食管癌Eca-109细胞膜蛋白分离纯化方法的研究

目的 建立人食管癌细胞株Eca-109细胞膜蛋白分离和初步纯化方法.方法使用改良的Neville法提取细胞膜,在pH 6.3的条件下,用去垢剂Triton X-100和辛基β-葡糖苷把细胞膜上的蛋白溶解下来,以超滤法纯化膜蛋白并分组.结果在pH6.3的条件下,适当的去垢剂与膜蛋白之比(即mg去垢剂/mg膜蛋白),使用辛基β-葡糖苷时为6:1;使用TritonX-100时为2:1.超滤法将膜蛋白分为＜3KD、3～10KD、＜10KD、10～30KD、30～100KD、＞100KD共6个组.结论为进一步研究食管癌Eca-109细胞肿瘤抗原奠定基础.

慢性特发性便秘患者肛门直肠的动力改变

目的 测定慢性特发性便秘患者肛门直肠压力,探讨肛门直肠动力障碍在便秘发病机制中的作用.方法采用美国Sandhill公司生产的BioLAB动力学参数监测系统及固态压力传感器导管,对40例CIC患者进行肛门直肠压力测定,并与40例正常人进行对比.结果便秘组肛管静息压、大缩榨压、大缩榨间期及缩榨指数均明显低于对照组(P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01);模拟排便动作时肛管剩余压明显高于对照组(P＜0.001),肛管松弛率、排便指数均低于对照组,统计学处理具有显著性差异;初始感阈值容量大于对照组(P＜0.001),排便感阈值大于对照组(P＜0.05),大耐受量明显低于对照组(P＜0.01).结论慢性特发性便秘病人存在肛管直肠的动力学异常及直肠敏感性降低.

酒精性肝病的危险因素分析

目的 明确ALD患病率与酒精摄入的量、饮酒的方式习惯、种类及肥胖等的关系.方法对西安城乡4115名各种不同职业人群进行整群随机抽样调查及流行病学资料分析.每一调查对象均经调查员上门按统一要求详细询问其饮酒的种类、品牌、度数、时间、频度、方式及饮酒后不良事件的发生次数等,必要时还询问其家人,以便能更准确的估计其酒精摄入的量.所有饮酒人群均经B超检查,并抽取外周血查肝功,HBsAg、抗HCV.结果①每日饮酒精≥40g,持续饮用5年以上,ALD患病率明显增加,高的OR值出现在日酒精消耗量≥160g时,此时ALD患病率高达18.7%.而每日饮酒精＜20g,饮酒时间＜5年时,无ALD发生.②空腹饮酒者各种酒类的日均消耗量均大于只在进餐时饮酒者,空腹单纯饮用白酒和多种酒混合饮用患病率高,分别达18.9%和15.4%.单纯饮用啤酒等有色酒者ALD发生率较低.③BMI≥25的203例日均酒精消耗量低于BMI＜25的人群,患病率11.5%,明显高于人群患病率6.5%.结论日均酒精消耗量＜20g,短于5年是发生ALD的相对安全域值.日均酒精消耗量＞40g,＞5年则ALD的发病率明显增加;空腹饮用白酒和混合饮用多种酒类,ALD患病率较高.肥胖者饮酒,可增加ALD各阶段发病的危险.

13C-美沙西丁呼气试验联合血清胰岛素样生长因子及其结合蛋白测定对肝硬化患者肝功能状况的评估

目的 探讨13C-美沙西丁呼气试验联合血清胰岛素样生长因子-1(insulin like growth factor-1,IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白.3(insulin-like growth factor binding protein-3,IGFBP-3)测定对肝硬化患者肝功能状况评估的临床意义.方法随机选取肝炎后肝硬化14例,隔夜空腹,服用13C-美沙西丁75 mg后,通过13C红外线能谱分析仪检测10个时间段呼出碳13的含量,得出Mvmax40(40分钟前13C代谢速率峰值与正常值的比值)、CUM 40(40分钟13CO2累积呼出丰度与正常值的比值)及CUM 120(120分钟13CO2累积呼出丰度与正常值的比值),并同步采用免疫放射法定量测定血清IGF-1、IGFBP-3水平.结果肝硬化患者Mvmax 40、CUM 40、CUM 120值,在Child A、B、C各组间,除A组与B组的CUM 120值外,差异有显著性(P＜0.05).IGF-1,IGFBP-3值在Child A、B、C组间除Child A组与B组间外,差异有显著性(P＜0.05).13C Mvmax 40、CUM40、CUM 120及IGF-1、IGFBP-3值与Child pugh积分呈明显负相关(r:-0.881,-0.878,-0.833,-0.700,-0.815),13C Mvmax 40、CUM 40、CUM 120值与IGF-1、IGFBP-3值呈明显正相关.结论13C美沙西丁肝功能呼气试验能对即时的肝细胞贮备功能及代偿功能进行量化评估,结合IGF-1、IGFBP-3检测,是对临床传统方法肝功能判断的有益补充.

木黄酮对人胃癌细胞SGC-7901作用的研究

目的 探讨木黄酮对体外培养的人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用.方法用MTT法检测药物效应,透射电镜及流式细胞仪观察木黄酮处理SGC-7901细胞后细胞周期和细胞凋亡.细胞免疫化学观察木黄酮处理SGC-7901细胞后,SGC-7901细胞PCNA,FAS,C-myc的变化.结果①MTT法证实木黄酮对SGC-7901细胞生长有抑制作用,并呈剂量-效应关系.②流式细胞仪分析木黄酮处理SGC-7901细胞后细胞滞留于G2/M期,并可见凋亡峰.③透射电镜可见SGC-7901细胞出现典型的细胞凋亡及坏死形态学改变.④木黄酮下调PCNA及C-myc表达,上调FAS表达.结论木黄酮对人胃癌细胞SGC-7901有抑制作用,其抑制作用可能通过下调C-myc基因表达,上调Fas蛋白表达,下调PCNA表达,从而多途径诱导胃癌细胞凋亡和坏死、阻抑细胞周期进程,抑制SGC-7901细胞增殖.

大肠癌APC基因15外显子突变分析

目的 探讨APC基因突变在大肠癌发生中的作用及与临床病理参数和微卫星不稳(MSl)的关系.方法采用多重PCR、DGGE电泳和DNA测序技术检测76例大肠癌APC基因15外显子突变;采用PCR为基础的方法检测MSI.结果76例大肠癌中检出APC基因15外显子突变29例,突变率为38.2%;APC基因突变多见于左侧大肠癌,但与肿瘤大小、分化程度、浸润深度和临床病理分期无显著相关.高频率微卫星不稳(MSI-H)大肠癌APC基因突变率显著低于低频率微卫星不稳(MSI-L)和微卫星稳定(MSS)大肠癌(P＜0.05～0.01).结论APC基因可能是散发型大肠癌的易感基因,APC基因突变在大肠癌的发生中可能参与了染色体不稳途径.

survivin和hTERT在大肠黏膜癌变中表达及其与c-myc关系

目的 研究survivin和端粒酶催化亚单位(hTERT)在大肠黏膜癌变中表达及其与c-myc关系.方法采用原位杂交和免疫组化(SP法)检测hTERTmRNA、survivin、c-myc蛋白在45例大肠腺癌、20例腺瘤、10例正常组织的表达,并对各指标阳性率和相关性分析.结果肠腺癌中survivin阳性率66.7%,hTERTmRNA85%,c-myc 53%,三者在腺瘤中分别为30%、45%、20%,正常黏膜为0%、10%、0%,survivin和hTERTmRNA表达与大肠癌的分化程度及临床参数无明显相关性,与c-myc明显相关,survivin与hTERTmR-NA呈正相关性(x2=10.235,P=0.001).结论survivin和hTERT在大肠癌中高表达,非癌组织中低表达,可成为诊断治疗的新靶点,但不能作为肿瘤进展的标志物,survivin、hTERT、c-myc可能在大肠癌变中起协同作用.

含青黛成分中药导致便血的临床特点及可能致病机制

目的 分析青黛引起消化道出血的临床特点,讨论可能的致病机制.方法对6例内服含青黛成分的中药后发生消化道出血病人的病史、临床表现、实验室检查、内镜特点及病理表现进行总结分析,结合文献报道分析其可能的致病机制.结果患者均在服药1个月内发病,首发症状为下腹痛,随之出现血便,早期可有血白细胞升高.病变范围较为广泛,常见直肠受累.内镜下可表现为黏膜充血、水肿,点片状糜烂,纵形或不规则形溃疡.病理显示有黏膜萎缩、退行性变和小血管内纤维素性血栓形成.患者在停药、予丹参或罂粟碱等治疗后症状很快消失,肠道损伤恢复.继续服用同类药物可引起复发.结论含青黛成分中药可引起消化道出血,临床表现与缺血性结肠炎相似.此类药物的肠道不良反应引起重视.

凋亡相关基因caspase-3及Bcl-2在人类大肠腺瘤和大肠癌中的表达及意义

目的 探讨凋亡相关基因caspase-3和Bcl-2在大肠腺瘤及大肠癌组织中的表达及其意义.方法应用免疫组织化学ABC法检测20例大肠正常黏膜、30例大肠腺瘤及40例大肠癌组织中caspase-3和Bcl-2的表达.用TUNEL法检测细胞凋亡.结果大肠正常黏膜、腺瘤和大肠癌组织中caspase-3的阳性表达分别为95%、70%、65%.Bcl-2的阳性表达分别为15.00%、86.67%、62.5%.正常黏膜组织caspase-3的表达高于大肠腺瘤和大肠癌(P＜0.05),而Bcl-2表达低于后两者(P＜0.05).caspase-3及Bcl-2的表达与凋亡指数密切相关(r=0.73及-0.89 P＜0.001),但均与大肠癌临床病理分期无关.结论大肠腺瘤及大肠癌组织中caspase-3低表达和Bcl-2的高表达与细胞凋亡异常密切相关,可能在大肠腺瘤癌变及大肠癌的发生和发展过程中起重要作用.

食管癌组织中VEGF和P53及血管密度的研究

目的 探讨VEGF、p53及血管密度(MVD)在食管鳞癌组织中的表达及其与预后的关系.方法应用免疫组化技术检测食管鳞癌组织中VEGF、p53及MVD的表达.结果41例VEGF阳性病例MVD平均为52.35±14.13,24例VEGF阴性病例MVD平均为40.67±10.27,VEGF表达与MVD呈正相关,P＜0.05.在39例p53蛋白阳性病例中VEGF阳性表达30例,在26例p53蛋白阴性病例中VEGF阳性表达12例,p53蛋白阳性表达与VEGF表达呈正相关,P＜0.05.39例p53阳性病例MVD平均为53.38±12.16,26例p53蛋白阴性病例MVD平均为41.27±11.67,两者差异具有显著意义,P＜0.05.38例生存期小于5年的患者VEGF阳性27例、p53阳性26例、MVD平均为50.12±10.64,27例生存期5年以上病例VEGF阳性14例、p53阳性13例、MVD平均为39.72±12.67,VEGF、p53、MVD与生存期长短呈负相关,P＜0.05.VEGF、p53、MVD在食管鳞癌中的表达存在有异质性.结论VEGF、p53、MVD与食管癌血管生成密切相关,可作为食管癌预后判断的一个重要指标.

大肠癌患者外周血及肿瘤浸润淋巴细胞Fas/FasL的表达

目的 探讨Fas及其配体FasL与大肠癌患者肿瘤局部及全身免疫反应的关系.方法用流式细胞仪(FCM)对40例大肠癌患者外周血淋巴细胞(PBL)及肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)的Fas及其配体FasL表达进行定性、定量分析,以40例正常人的PBL作对照.结果大肠癌患者TIL上Fas分子表达率为16.8%,PBL上Fas分子表达率为8.0%,正常人PBL上Fas分子表达率为12.6%,前者表达率明显高于后两者(P＜0.05),大肠癌患者PBL上Fas分子表达明显低于正常人PBL上Fas分子表达(P＜0.05).结论Fas分子在大肠癌患者PBL与TIL中的表达不同;Fas/FasL在大肠癌患者肿瘤微环境和全身水平均参与了免疫系统与肿瘤的相互作用.

121例非酒精性脂肪肝的临床研究

目的 研究非酒精性脂肪肝(NAFL)的临床特点及其与胰岛素抵抗的关系.方法B超确诊NAFL 121例,研究其肝功能、体重指数及胰岛索敏感性并与对照组比较.结果脂肪肝组体重指数、腰围、臀围、腰臀比均高于正常组;男性发病早,且多为中心性肥胖;胰岛素敏感性明显低于正常人;ALT、TG高于对照组.不同严重程度病人,ALT,GGT有差别.结论脂肪肝的发生与体重、体态、胰岛素敏感性有关,肝损害的程度与疾病程度、性别有关.

COX-2与MMP-2蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨COX-2和MMP-2蛋白在胃癌组织中的表达、相互关系及意义.方法应用免疫组化S-P法检测45例胃癌及20例正常胃组织MMP-2、COX-2蛋白的表达情况.结果45例胃癌组织COX-2的表达阳性率为60%(27/45),20例正常胃组织COX-2的表达阳性率为15%O(3/20),COX-2在胃癌组织中的表达阳性率显著高于正常胃组织中的表达阳性率(P＜0.01);45例胃癌组织中MMP-2的表达阳性率为64.4%(29/45),20例正常胃组织MMP-2表达阳性率为25%(5/20),MMP-2在胃癌组织中的表达阳性率显著高于在正常胃组织中的表达阳性率(P＜0.01);在胃癌组织中MMP-2、COX-2蛋白的表达之间存在显著正相关(rs=0.569,P＜0.01).结论胃癌组织中存在COX-2、MMP-2的高表达,且两者之间的表达强度具有等级相关性.COX-2蛋白可通过诱导MMP-2蛋白的表达上调,增加胃癌细胞的侵袭力,从而成为其促进胃癌浸润、转移的途径之一.

肝癌消减片段P02在消化系恶性肿瘤中表达状况的研究

目的 探讨肝癌消减片段P02在消化系恶性肿瘤如肝癌、食管癌、胃癌、结肠癌中的表达情况.方法从肝癌组织中抽取RNA,进行RT-PCR,然后对PCR产物进行探针标记,用此标记的探针对肝癌、食管癌、胃癌、结肠癌及其相应的正常组织进行检测.结果肝癌消减片段P02不仅在肝癌及肝硬化组织中存在着差异表达,而且在食管癌、胃癌、结肠癌及其相应的正常组织中也存在着差异表达.结论肝癌消减片段P0在消化系恶性肿瘤如肝癌、食管癌、胃癌、结肠癌中均呈差异表达,提示肝癌消减片段P02与消化系恶性肿瘤的发生密切相关,有可能成为消化系恶性肿瘤检测的一个重要的标志物.

血清-腹水白蛋白梯度与门脉高压症关系的探讨

目的 探讨血清-腹水白蛋白梯度(SAAG)与门脉压力是否存在相关.方法28例肝硬化腹水行胃镜检查了解有无食管静脉曲张(EV)及其程度,并测定SAAG.SAAG=当日血清白蛋白-腹水白蛋白,以11g/L为界值分为高SAAG及低SAAG.采用Pearson相关分析SAAG与EV之间的关系.结果26例高SAAG中有22例有EV,而2例低SAAG均无EV.SAAG与EV存在相关(r=0.53,P＜0.01;r=0.55,P＜0.01),但高SAAG的水平与EV的程度并不相关(P＞0.05).结论SAAG与门脉压力密切相关.

慢性肝病中抗肝抗原自身抗体的检测

目的 探讨中国人不同病因所致慢性肝病患者中抗肝抗原自身抗体的存在状况及自身免疫性肝病的自身抗体特征.方法166例肝功能异常患者分为6组:自身免疫性肝炎(AIH)12例、原发性胆汁性肝硬化(PBC)20例、原发性硬化性胆管炎(PSC)13例、HBV组66例、HCV组22例、肝豆状核变性(HDL)39例.用间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA)、平滑肌抗体(SMA)、抗肝肾微粒抗体I型抗体(anti-LKM1)、抗线粒体抗体(AMA)和抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA),免疫印迹法检测抗肝细胞胞溶质抗原1型抗体(anti-LC1)、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体(anti-SLA/LP)、抗肝肾微粒抗体1型(anti-LKM1)、AMA-M2亚型等多种肝抗原自身抗体.结果166例中ANA、AMA、M-2、pANCA阳性率在7组中有显著差异(P＜0.01).PBC中AMA、M-2阳性检出率均为100%,PSC中pANCA阳性检出率为53.8%,Fisher精确检验在a=0.002水准与其他各组比较有显著差异.AIH与PBC的ANA阳性率分别为100%和60%,Fisher精确检验在a=0.002水准二者无显著差异.与其他各组比较有显著差异.在AIH组SMA阳性率为25%,LKM-1、LC-1、SLA/LP阳性率均为8.3%,统计学处理与其他组无显著差异(P＞0.05),可能与病例少有关.PBC中分别有1例ANA、SMA以及ANA、LKM-1同时阳性,PSC中有1例ANA、SLA/LP同时阳性,此3例患者结合性别、生化、自身抗体等资料符合AIH诊断条件;AIH中有1例M-2阳性综合各项资料符合PBC(重叠综合征).而正常对照、乙肝、丙肝、肝豆状核变性组自身抗体检出率及种类均低.结论肝抗原自身抗体、ANA、AMA及M-2亚型的检测有助于自身免疫性肝病的诊断.存在PBC/AIH及PSC/AIH等自身免疫性肝病重叠综合征.对肝炎病毒血清标志物阴性的肝功能异常者应该行肝抗原自身抗体检测协助诊断.

氯沙坦对实验性肝硬化大鼠胰岛素抵抗的研究

目的 本实验旨在研究血管紧张素Ⅱ受体(Atl)阻断剂氯沙坦对实验性肝硬化大鼠血脂、胰岛素敏感性的作用,探讨氯沙坦治疗肝硬化胰岛素抵抗的可行性.方法雄性Wister大鼠35只,随机分为3组,正常组9只,模型组及氯沙坦组各13只,采用CCl4、高脂饲料等复合因素造模法.造模结束后,用放免法测定血清胰岛素,检测血糖、血脂,肝组织行切片病理学观察.结果氯沙坦组与模型组相比较:①血清胰岛素、血糖含量降低,胰岛素敏感性增加均有非常显著性意义(P＜0.01);②血清甘油三脂(TG)、胆固醇(Ch)和高密度脂蛋白(HDLC)含量降低有非常显著性意义(P＜0.01),低密度脂蛋白(LDLC)含量无显著性降低(P＞0.05);③肝组织纤维化程度有显著性改善(P＜0.01).结论氯沙坦可增加肝硬化大鼠胰岛素敏感性,改善异常的糖代谢和脂代谢.

霍乱弧菌毒素协同调节菌毛基因tcpA的克隆及序列分析

目的 以新疆分离0139霍乱弧菌XJ93006株的DNA为模板,自行设计引物克隆毒素协同调节菌毛亚单位A(tcpA)基因(包括侧序列)并构建重组载体.方法以0139霍乱弧菌新疆分离株XJ93006基因组DNA作为模板;根据Ol群E1Tor型霍乱弧菌N16961全基因组序列设计tcpA PCR引物,高保真酶扩增tcpA片段:限制性内切酶切PCR产物和pNEBl93空质粒,T4DNA连接酶连接酶切产物,重组质粒转化大肠杆菌TB1工程菌,蓝白斑菌落试验筛选阳性克隆;提取质粒经酶切鉴定后测序并利用生物信息数据库对该序列进行序列分析,比较.结果DNA限制性内切酶可从重组质粒pNEBl93-tcpA的EcoRⅠ和SalⅠ位点之间切出一个1037bp的DNA片段,测序结果与O1群E1Tor型霍乱弧菌N16961、O139霍乱弧菌标准株M045的tcpA同源性均达到99.9%以上.结论成功构建O139霍乱弧菌新疆分离株XJ93006毒素协同调节菌毛亚单位A(tcpA)基因的重组质粒pNEBl93-tcpA;序列分析表明霍乱弧菌毒素协同调节菌毛亚单位A(tcpA)基因在O1群EITor型霍乱弧菌和O139霍乱弧菌中是一类高度保守的原核基因,可作为霍乱弧菌疫苗的候选基因.另外为研究O139霍乱弧菌的来源奠定基础.

稳定表达点突变型DNA聚合酶β的细胞系的建立

目的 建立稳定表达点突变型DNA聚合酶β的细胞系.方法将已构建的点突变型DNA聚合酶β的真核表达载体用脂质体法转染中国仓鼠卵巢细胞,经G418筛选后得到稳定转染的细胞株,用RT-PCR方法鉴定点突变型DNA聚合酶β mRNA水平的表达.结果与结论建立稳定表达DNA聚合酶β的细胞株,为进一步研究突变的DNA聚合酶β的功能变化奠定基础.

环氧合酶-2在大鼠酒精性肝炎中的表达及作用机制

目的 观察环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)在大鼠酒精性肝炎中的表达,探讨COX-2与酒精性肝炎的关系.方法随机将28只雄性SD大鼠分为正常组7只,乙醇组7只,以10～12 g@kg-1@d-1乙醇灌胃复制大鼠酒精性肝炎动物模型,实验组2组(每组7只),以相同的方式复制动物模型后分别给予0.4%和0.8%的特异性COX-2抑制剂塞莱西布(celecoxib)灌胃.测定肝组织中丙二醛(malonaldehyde,MDA)及血清ALT和AST水平,在光镜下观察肝脏的形态学改变,并应用RT-PCR技术检测COX-2 mRNA在酒精性肝炎中的表达,其结果用凝胶分析系统测定相对表达量.结果乙醇组大鼠肝组织中MDA含量较实验组大鼠和正常组大鼠明显增高(P＜0.05);正常组和实验组大鼠血清ALT、AST浓度均明显低于乙醇组(P＜0.05).HE染色光镜下见乙醇组大鼠肝细胞脂肪变性,炎性细胞浸润及细胞坏死.在正常组大鼠肝组织中COX-2 mRNA无表达,乙醇组表达阳性,且显著高于两实验组COX-2 mRNA的表达(P＜0.05).结论高表达的COX-2参与到酒精性肝炎的发生发展过程,应用特异性(COX-2)抑制剂塞莱西布有可能减轻乙醇诱导的肝损害.

大鼠胃损伤适应性作用的观察

目的 建立大鼠无水乙醇胃损伤的适应模型,观察大鼠胃损伤适应性保护作用.方法采用40%、75%乙醇1 ml胃饲,并且在0、2、4 d内予以重复刺激,诱发胃损伤适应模型,观察损伤模型胃黏膜病理形态变化.结果对照组大鼠胃黏膜损伤指数(UI)为47.25±2.05;40%乙醇处理组大鼠胃黏膜UI为25.25±3.71,较对照大鼠显著降低(P＜0.05);75%乙醇处理组大鼠胃黏膜UI为67.40±10.81,较对照大鼠显著增高(P＜0.05).提示在给予40%乙醇3次刺激后,大鼠胃能产生适应性保护作用,减轻了再给予无水乙醇刺激时的胃损伤;而在给予75%乙醇3次刺激后,大鼠胃不能产生适应性保护作用,反而加重了再给予无水乙醇刺激时的胃损伤.结论能够促使胃产生适应性保护作用的损伤刺激有一定的程度范围.

三株霍乱弧菌16s rDNA指纹图谱分析

目的 探讨我国新疆分离O139群霍乱弧菌的基因组特征.方法自行设计引物,利用PCR掺入法用地高辛标记的16srDNA基因探针,分别对二株VCO139霍乱弧菌(新疆分离株XJ93006、国际标准株MO45)及一株El Tor菌株(新疆分离株89079)的基因组DNA的BgⅠ、PvuⅠ酶切产物进行southern杂交.结果杂交结果显示此三株霍乱的杂交图谱均不同.结论我国新疆的O139霍乱既不同于本地的El Tor霍乱,也与国际标准株存在差异.

综合治疗乙型病毒性肝炎并乙肝病毒相关性肾炎30例临床分析

乙型病毒性肝炎合并乙肝病毒相关性肾炎在临床上比较常见,治疗比较棘手,近年来我们用综合方法治疗此病30例,收到了良好的效果,现报告如下.

山梨醇粉口服治疗功能性消化不良88例临床观察

本文研究目的 是为了观察山梨醇粉<商品名普复舒>口服治疗功能性消化不良的临床疗效.在欧州国家早已广泛应用山梨醇粉口服作为慢性肝胆,慢性肠胃病的常用药物,国内较少有报道.我们近年来应用湖北宜昌制药厂生产的山梨醇粉口服治疗功能性消化不良共88例,收到了明显的效果.

肝脏淀粉样变性

自从Rokitansky C与Virchow在十九世纪初先提出淀粉样变性的概念后,人们对淀粉样变的病因及发病机理的认识不断加深.现已知道,淀粉样物质由三种成分组成:非纤维性糖蛋白-血清淀粉P成分(SAP),葡糖聚氨酶(黏多糖)及各种纤维样蛋白,SAP是构成淀粉样沉积的主要成分.淀粉样沉积在光镜下为同源的、无定型物质,在偏振光镜下用刚果红染色时呈绿色双折射现象[1,2].在电镜下可以看到淀粉样物沉积在细胞外,能对抗蛋白溶解酶的作用,这种异常沉积导致了正常组织成分的丢失及功能的障碍[3].

易善复治疗肝功能异常的脂肪肝52例

我们对52例确诊为脂肪肝的患者随机分为2组,分别给于一般治疗和易善复治疗,结果报告如下.

泰胃美治疗慢性腹泻129例疗效观察

慢性腹泻是临床上常见的内科疾病之一,笔者近两年来应用泰胃美治疗慢性腹泻129例,亦与常规治疗组17例对照,临床效果较好,现报告如下.

垂体后叶素加酚妥拉明治疗肝硬化腹水18例疗效初步观察

本文观察垂体后叶素加酚妥拉明治疗肝硬化腹水的疗效,现报告如下.

拉米夫定联合氧化苦参碱治疗慢性乙肝失代偿期肝硬化的初步疗效观察

慢性乙型肝炎失代偿期肝硬化的预后很差.拉米夫定为第二代抗HBV的核苷类药,对HBV-DNA有显著的抑制作用.1年以上的疗程可使慢性乙型肝炎病人的病情得到一定改善.有报道,拉米夫定对HBV相关性失代偿性肝硬化患者有一定的疗效和良好的安全性[1,2].氧化苦参碱可通过其抗病毒、稳定细胞膜,减少细胞外基质的产生起到有效的抗肝纤维化的作用,临床实践显示,慢性乙肝失代偿期肝硬化病人能很好地耐受拉米夫定联合氧化苦参碱的治疗.

Lipo PGE1治疗肝肾综合征的疗效观察

肝肾综合征(hepatorenal syndrome,HRS)是重型肝炎和失代偿肝硬化肝功能衰竭时严重的并发症,预后极差.

益生菌防治自发性细菌性腹膜炎的疗效观察

自发性细菌性腹膜炎(spontaneousbacterialperitionitis,SBP)是肝硬化腹水患者的常见与严重的并发症,这与肝硬化患者免疫功能明显降低,肠道菌群失调,细菌易位等原因有关,目前氟喹诺酮类抗生素预防SBP应用广.本观察旨在评价益生菌对肝硬化腹水患者预防SBP的临床疗效.

重型肝炎合并肝性脑病、甲状腺危象一例

患者,男性,28岁.因间断乏力、尿黄半年,加重1周,神志不清9小时于2003年9月30日22点30分入院.既往史:4月3日因"乏力、纳差、尿黄1月"住院以"病毒性肝炎戊型急性黄疸型"给予"强力宁、促肝、复方茵陈、思美泰等"静滴,期间检查T3、T4升高,诊断"甲亢",给予口服他巴唑.因转院停用他巴唑,此后肝功一直异常,入院前1周来患者自觉乏力、纳差加重,伴有恶心、呕吐,呕吐物为胃内容物,尿如浓茶,9月30日下午16:00解完大便后出现烦躁不安,神志不清,胡言乱语等症状.

胃镜下贲门癌胃癌误诊21例回顾性分析

我科自1998年7月～2003年12月共检出贲门癌,胃癌923例,其中21例贲门癌,胃癌胃镜下误诊,误诊率占2.27%.现将误诊情况分析如下.

2004年中华全科医师杂志内容栏目和继续教育

急性病毒性肝炎的诊疗

一、定义 急性病毒性肝炎(AVH)是一种全身感染但主要侵犯肝脏的疾病.AVH主要由嗜肝病毒引起(甲、乙、丙、丁、戊型肝炎).其他病毒感染偶然情况下可累及肝脏(巨细胞病毒CMV,疱疹病毒,柯萨奇病毒,腺病毒).甲型肝炎和戊型肝炎是自限性疾病,但丙型肝炎及次之的乙型肝炎则主要转变成慢性感染.