胃肠病学和肝病学杂志
Chinese Journal of Gastroenterology and Hepatology 위장병학화간병학잡지
- 主管单位： 郑州大学
- 主办单位： 郑州大学
- 影响因子： 1.02
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1006-5709
- 国内刊号： 41-1221/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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炎性肠病炎症过程中ICAM-1的表达及作用
细胞黏附分子是指由细胞合成并组装于细胞表面或分泌至细胞外基质间的可促进细胞与细胞或细胞与细胞外基质间黏附的一类糖蛋白.其中内皮细胞黏附分子-1(IntercellularAdhesionMolecule-1,ICAM-1)属于免疫球蛋白超家族(immunoglolS'ulinsuperfamily,IGSF)在炎性肠病发病中的作用近年来受到关注.
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IL-1B及IL-1RN基因多态性与幽门螺杆菌相关的胃十二指肠疾病
白细胞介素-1(Interlukin-1,IL-1)有两种类型IL-1α和IL-1β,以IL-1β为主,主要由活化的单核巨噬细胞产生,与IL-1受体(IL-1R)结合后产生生物学作用.IL-1β是一个非常重要的前炎症细胞因子,在炎症免疫损伤机制中起着主要的调节作用,同时具有强大的抑制胃酸分泌作用,在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H·py-lori)感染的胃黏膜损伤和萎缩性胃炎发展及胃癌发生中起重要作用.
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结缔组织生长因子与肝纤维化的研究进展
肝纤维化是大多数慢性肝病共有的组织学改变,因此,能否终止肝纤维化的进展甚或逆转至正常,是治疗慢性肝病的关键.在肝纤维化的发病机制及治疗研究中,细胞因子网络始终是人们研究的热点.结缔组织生长因子(connective tissuegrowth factor CTGF)是一种新发现的细胞因子,1991年由Bradham等从人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养液中分离所得,为富含半胱氨酸的多肽.目前,CTGF在肝纤维化的研究中已成为新的热点.本文就CTGF的结构,生物学特性,主要调节因素及其与肝纤维化的关系作一综述.
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12-脂肪氧化酶与肿瘤
12-脂肪氧化酶(12-Lipoxygenase/12-LOX)是花生四烯酸(arachidonic acid/AA)和其他不饱和脂肪酸(Un-saturated fatty acid)代谢的关键酶,它能介导一分子氧进入底物并在碳十二的位置产生羟基形成具有生物活性的代谢产物:12-羟基廿碳四烯酸(12-Hydroxyeicosatetraenoic acid/12-HETE),从而影响细胞的信号转导,结构和代谢.由于构型不同,12-LOX可分为12RLOX和12S-LOX,其中12S-LOX至少存在三种亚型,即:血小板型、白细胞型和表皮型12S-LOX.众多研究显示,12S-LOX,尤其是血小板型12S-LOX(p12-LOX)及其代谢产物12S-HETE与肿瘤的发生、发展和转移密切相关.
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胶囊内镜在慢性腹泻中的诊断价值
目的分析胶囊镜在慢性腹泻中的诊断价值及进行安全性评估.方法收集2002年10月至2005年1月在上海瑞金医院进行胶囊内镜检查的慢性腹泻患者共24例(4女/20男,年龄39.67±9.41)及无消化道症状体检者80例(21女/59男,年龄46.43±10.26),进行诊断结果的相关统计性分析.结果在慢性腹泻患者中发现:空肠-回肠多发性溃疡5例(20.83%),回肠黏膜糜烂2例(8.33%),空肠增殖性病灶1例(4.17%),小肠血管畸形1例(4.17%);无消化道症状的体检者中发现:回肠息肉2例(2.50%),小肠血管畸形2例(2.50%),小肠黏膜糜烂1例(1.25%),空肠孤立性溃疡1例(1.25%).两组检查后胶囊均能顺利排出.小肠疾病在慢性腹泻患者中的患病率(37.50%)明显高于无消化道症状的体检者(7.50%),两者相较有明显的统计学意义(P＜0.01).结论胶囊内镜对慢性腹泻的诊断有重要的参考的价值,临床安全性好.
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细胞周期蛋白在胃肠癌中的表达及临床意义
目的探讨细胞周期蛋白在胃肠癌中的表达及临床意义.方法用间接免疫荧光双标法在激光扫描共聚焦显微镜下检测33例胃肠癌患者手术标本和内窥镜活检组织标本中cyclin蛋白的表达及其差异.结果在手术切除标本或内镜活检组织标本中,四种cyclin在胃癌和大肠癌中的表达均有一定的阳性表达率,与正常胃肠黏膜相比,具有显著性差异(P＜0.05),而四种cy-clin在胃癌和大肠癌中的表达率差异则无显著性意义(P＞0.05).cyclin D1、cyclin E、cyclin A和cyclin B1在手术前后肿瘤组织中的表达差异均有显著性意义(P＜0.05).结论 cyclin蛋白在胃肠肿瘤的发生、发展中起重要作用.内镜活检组织cyclin的检测对胃肠肿瘤的早期发现有一定意义.
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IL-4和IL-13在溃疡性结肠炎中的表达
目的探讨Th2类细胞因子IL-4和IL-13在溃疡性结肠炎中的作用.方法收集30例经内镜检查证实的UC患者结肠黏膜和血清标本,20例性别、年龄相匹配的同期大肠息肉患者(取其正常组织)作为对照组.用RT-PCR法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL-4及IL-13的mRNA表达及其血清含量.结果轻度UC患者IL-4和IL-13的mRNA表达与对照组比较无统计学意义(P＞0.05),中重度UC患者IL-4和IL-13的肠黏膜表达明显下降(P＜0.05)与对照组比较,二者血清含量未见明显区别(P＞0.05).结论 IL-4和IL-13在UC的发病中起重要作用.
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MMP-7、MMP-13在直肠癌中的表达及临床意义
目的研究直肠癌中MMP-7和MMP-13的表达情况,探讨它们与直肠癌侵袭和转移的关系及临床意义.方法对60例直肠癌、22例癌旁正常组织进行MMP-7和MMP-13免疫组化染色.结果MMP-7在癌组织中表达明显高于癌旁正常组织,二者之间差异显著(P＜0.01);MMP-13在癌旁正常组织中无表达,MMP-13在直肠癌细胞和间质细胞中均有阳性表达,但主要在间质细胞中表达.MMP-7表达与肿瘤分化程度、Dukes分期及淋巴结转移呈正相关(P＜0.05),MMP-13表达与肿瘤分化程度、Dukes分期及淋巴结转移无相关性(P＞0.05).结论直肠癌组织中MMP-7的表达与肿瘤进展有一定关系,可被视为一种反映直肠癌生物侵袭性的有价值的标志物,MMP-13可能参与了间质成分较强的降解反映过程,从而使肿瘤更易侵袭和转移.
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食管鳞状细胞癌中VEGF与TIMP-2、MVD、树突状细胞的关系及对浸润转移的影响
目的探讨与VEGF相关的TIMP-2表达、血管形成、肿瘤免疫异常对食管鳞癌浸润转移的影响.方法运用原位杂和免疫组织化学方法检测46例食管鳞癌组织中VEGF蛋白和mRNA的表达、TIMP-2的表达、CD34标记的微血管密度、S-100标记的肿瘤浸润性树突状细胞的密度.结果食管鳞癌组织中VEGF蛋白阳性表达率为58.7%(27/46),其阳性表达与浸润深度、转移状态有关;TIMP-2表达与分化、浸润深度有关,VEGF与TIMP-2之间没有相关关系;VEGF表达阳性组MVD(50.71±12.16/单位面积)显著高于阴性组(31.74±17.93/单位面积);食管鳞癌中S-100+树突状细胞平均密度与分化程度、浸润深度的有关,VEGF表达与树突状细胞密度之间存在显著的负相关性(r=-0.462).结论VEGF蛋白表达具有促进食管鳞癌浸润转移的作用,免疫组化方法较原位杂交更适合临床作为判断食管鳞癌浸润转移潜能的手段;TIMP-2可抑制食管鳞癌的浸润,其表达与VEGF表达之间无相关关系;MVD值可作为判断食管鳞癌浸润、转移及预后的参考指标;VEGF影响鳞癌组织中树突状细胞的密度,进而可能影响宿主的抗肿瘤免疫能力和肿瘤的浸润转移过程.
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Smad4在大肠癌发生中的作用及意义
目的探讨Smad4基因在大肠癌中的表达及其生物学意义.方法应用免疫组织化学(ABC)法观察60例大肠癌患者的癌组织和10例正常组织中Smad4蛋白的表达.结果大肠癌组织Smad4的阳性表达相对含量(PU)值(28.75±8.56)明显低于正常组织(58.76±10.14),差异存在显著性(P＜0.05),正常大肠黏膜中Smad4蛋白呈高表达:Smad4蛋白的阳性表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小无相关性(P＞0.05),与癌组织的分化程度、淋巴结转移和Ducks分期相关.低分化、有淋巴结转移和DucksC/D期的Smad4蛋白表达显著低于相关组别.结论Smad4基因在大肠癌组织中表达下调,Smad4的表达与大肠癌的恶性生物学行为有关.
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溃疡性结肠炎血液流变学及抗凝治疗的临床研究
目的研究溃疡性结肠炎(UC)血液流变学的变化及抗凝治疗的效果,从而进一步探讨UC的病因及发病机制,寻找更为有效的治疗UC的新途径.方法对61例收住院的UC患者进行血液流变学检测,包括全血黏度、血浆黏度、全血还原黏度、红细胞(RBC)压积、RBC聚集指数、RBC刚性指数、血沉、血沉方程k值及血小板聚集指数(PAgT)等,并与60例健康正常人分析比较.将61例UC随机分为治疗组31例和对照组30例,对照组采用常规疗法,治疗组在常规方法的基础上加用低分子肝素钙0.6ml皮下注射,14天为1疗程.症状缓解后,常规减量维持1～2年,治疗组加用阿司匹林75mg维持.1疗程后比较两组治愈率和总有效率,并随访观察两组半年内复发情况.结果 UC患者血液流变学的几乎各项指标均显著高于健康正常人.采用抗凝治疗的31例UC,其治愈率及总有效率(40.94%和95.78%)与对照组比较(分别为6.67%和66.67%)有显著性差异.治疗组半年内复发率(11.1%)明显低于对照组(42.9%).结论血液的高凝状态是UC重要的发病机制之一,在常规疗法的基础上加用抗凝治疗效果显著,且有可能降低UC的复发率.
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结肠黏膜组织蛋白质组双向凝胶电泳技术的建立与优化
目的为开展人类结肠黏膜组织的蛋白质组研究,建立并优化其蛋白质组分析所需的双向凝胶电泳技术,提高其分辨率及重复性.方法采用电子结肠镜直视下活检钳取结肠黏膜组织,对组织蛋白质的提取方法进行改进以达到考马斯亮蓝法染色所需的浓度,优化双向凝胶电泳的关键因素与环节,如第一向固相pH梯度(IPG)等电聚焦的上样量及电泳参数,第二向垂直平板SDS凝胶浓度等.结果以固相pH梯度-IPG胶条(pH=3～10)进行第一向等电聚焦,以SDS均一胶(12.5%)的垂直电泳为第二向,成功地得到了人类结肠黏膜组织的双向凝胶电泳图谱.平均含333±36个蛋白点,匹配率85.56%.结论优化人类结肠黏膜组织蛋白质组分析所需的双向凝胶电泳技术可以建立高分辨率和良好重复性的双向凝胶电泳图谱.
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内镜结合病理检查在溃疡性结肠炎和克罗恩病鉴别诊断中的价值
目的评价内镜及病理检查在溃疡性结肠炎和克罗恩病鉴别诊断中的价值.方法回顾性分析161例溃疡性结肠炎和89例克罗恩病的临床资料,对其病变分布、内镜结果及病理检查进行了分析.结果克罗恩病好发于末段回肠、右半结肠及上消化道,而溃疡性结肠炎好发于直肠.克罗恩病的病理特征有非干酪样肉芽肿、裂隙样溃疡、淋巴细胞聚集、全层炎;溃疡性结肠炎的病理学特征有弥漫性或灶性黏膜炎症、隐窝脓肿、黏膜糜烂及溃疡.结论内镜结合病理检查在溃疡性结肠炎和克罗恩病鉴别诊断中起到决定性作用,尤其手术标本的病理检查对CD诊断价值较大.
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食管鳞状细胞癌及不典型增生组织中 hMLH1基因蛋白表达的研究
目的探讨在食管鳞状细胞癌及不典型增生组织中hMLH1基因的蛋白表达情况及其与食管鳞状细胞癌发生发展的关系.方法40例食管鳞状细胞癌、相应40例正常组织及26例不典型增生组织,采用免疫组织化学方法,检测了hMLHl蛋白的表达情况.结果在正常组织、不典型增生组织、肿瘤组织中的阳性率分别为90%、57.6%和45%,不典型增生组织及肿瘤组织均低于正常组织(P＜0.05).肿瘤组织中hMLH1蛋白表达阳性者年龄较阴性者大(P＜0.05).结论错配修复缺陷早期参与了食管鳞状细胞癌的发生过程;hMLH1蛋白可能抑制和延缓食管鳞状细胞癌的发生和浸润.
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河南安阳地区p53基因第72密码子多态性与HPV相关食管癌的研究
目的探讨河南安阳地区p53基因第72密码子多态性与人乳头瘤病毒(HPV)相关食管癌的关系.方法收集安阳肿瘤医院食管癌病例110例,用PCR方法检测HPV,PCR-RFLP方法分析p53基因第72密码子多态性,病例对比研究方法分析在食管癌病例中HPV感染与p53基因第72密码子多态性的关系.结果 PCR检测结果表明,河南安阳地区食管癌组织中HPV检出率为59.1%;HPV阳性者中,Arg/Arg基因型的频率是60.0%,HPV阴性者中仅为17.8%,两者有统计学显著性(P＜0.05).结论 p53基因第72密码子多态性可能是安阳地区HPV相关食管癌的易感因素之一,携带p53Arg/Arg基因型的个体更容易发生HPV相关的食管癌.
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羟僖联合顺铂/5-氟尿嘧啶/亚叶酸钙治疗晚期胃癌
目的观察羟僖(HCPT)、顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、亚叶酸钙(CF)(HDLF)治疗晚期胃癌的近期疗效及毒副反应.方法28例晚期胃癌病人接受羟僖7mg/mg/m2,d1～5;CF100mg/d,d1～5;5-FU 500mg/m2,d1-5;DDP 20mg/m2,d1～4.对照组除不用羟僖外,其余治疗同治疗组(DLF).21天为1周期,连用2周期.结果治疗组有效率60.71%,对照组有效率32.14%,两组有显著差别.治疗组骨髓抑制显著高于对照组.结论 HDLF治疗晚期胃癌疗效较高,不良反应可耐受.
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Neuropilin-1在食管鳞癌中的表达及其意义
目的探讨Neuropilin-1(NRP-1)在食管鳞癌中的表达及其生物学和临床意义.方法取42例新鲜原发食管鳞癌和邻近正常食管粘膜标本,所有的标本均经病理诊断确诊.用RT-PCR方法检测每例患者癌组织和相应癌旁正常组织中NRP-1mRNA的表达.癌与癌旁正常组织表达值之间的比较采用配对t检验,癌组织的表达值与临床病理因素之间的关系采用成组t检验,检验结果以P＜0.05为有意义.结果在42例患者中,37例NRP-1mRNA表达强于相应癌旁正常组织,占89.00%,肿瘤直径≥3 cm组、外膜浸润组和淋巴结转移组的NRP-1mRNA表达明显增高.癌组织中NRP-1mRNA的表达与肿瘤分化程度和性别无关.结论在食管鳞癌中NRP-1mRNA的表达明显高于癌旁正常组织,并且与食管鳞癌的发展、浸润和转移有关.
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血小板型12-脂氧合酶mRNA在食管鳞癌中的表达
目的探讨血小板型12-脂氧合酶(P-12-LOX)与食管癌临床病理特征间的关系及其在血管生成中的可能作用.方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测44例食管鳞癌配对组织标本中P-12-LOX mRNA表达情况.以GAPDH作为内参照.结果食管癌组织中P-12-LOX mRNA较癌旁组织显著增高(0.78±0.22 vs 0.43±0.17,P＜0.001).P-12-LOX mRNA与癌细胞外膜浸润和淋巴结转移有关,与患者性别、年龄、肿瘤大小和分化程度无关,P＞0.05.结论P-12-LOX在食管鳞癌中表达升高,可能参与肿瘤侵袭和转移过程.
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胃癌患者周围血碱性成纤维细胞生长因子含量及其临床意义
目的测定胃癌患者周围血碱性成纤维细胞生长因子(basic fibriblast growth factor,bFGF),探讨对胃癌诊断、预后的价值.方法采用定量夹心ELISA法测定胃癌患者周围血bFGF的含量.结果献血员(18例)、非炎性疾病(192例)、炎性疾病(54例)和胃癌组(82例)患者血清bFGF平均含量分别为91.8±15.4、95.0±21.2、122.9±21.4和146.8±29.7pg/ml.胃癌组bFGF平均含量显著高于献血员、非炎性疾病和炎性疾病组(P＜0.05～0.01);献血员组bFGF平均含量与非炎性疾病组比较差别无显著性(P＞0.05),但显著低于炎性疾病组(P＜0.05);非炎性疾病组显著低于炎性疾病组(P＜0.05);胃癌手术前bFGF含量明显高于手术后(P＜0.05).bFGF含量与年龄、性别、胃癌类型无关.结论胃癌患者周围血中bFGF显著升高,对胃癌诊断和预后判断有一定的参考价值.
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应用抑制性消减杂交技术克隆丙型肝炎病毒 E2蛋白反式调节基因
目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建丙型肝炎病毒(HCV)E2蛋白反式调节基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HCV E2蛋白反式调节相关基因.方法以HCV E2表达质粒pcDNA3.1(-)-E2转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照,制备转染后的细胞裂解液,从中提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR)扩增,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果成功构建人HCV E2蛋白反式调节基因差异表达的cDNA消减文库.文库扩增后得到78个阳性克隆,进行菌落PCR分析,均得到100～1 000 bp插入片段.挑取38个含有插入片段的阳性克隆测序分析,获得35个已知基因序列和3个未知基因.通过生物信息学分析获得其全长序列,其功能正在研究中.结论应用SSH技术成功构建了HCV E2反式调节基因差异表达的cDNA消减文库.该文库的建立为进一步阐明HCV E2反式调节的靶基因及致慢性肝脏疾病发生的分子生物学机制提供理论依据.
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糖尿病大鼠血浆和组织中胃泌素、胃动素、胰高糖素的变化及意义
目的探讨糖尿病大鼠血浆和胃组织中胃肠激素的变化.方法选择雄性SD大鼠26只,用四氧嘧啶建立糖尿病模型,4周后取血浆和胃窦组织中测定各鼠胃泌素、胃动素、胰高糖素水平.结果与正常组比,糖尿病大鼠血浆中胃泌素和胃动素水平低下(P＜0.05);胰高糖素水平增高(P＜0.05);胃组织中胃动素水平低下(P＜0.05).结论糖尿病大鼠血浆中胃泌素、胃动素水平低下,胰高糖素水平增高,胃组织中胃动素水平低下.
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丙型肝炎病毒F蛋白反式激活蛋白2基因在酵母细胞中的表达
目的为探讨丙型肝炎病毒(HCV)F蛋白反式激活蛋白2(HCV FTP2)的功能,在真核生物酵母细胞中表达HCV FTP2基因.方法以HepG2细胞来源的mRNA作为模板,经过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增HCV FFP2基因,克隆到pGEM-T载体中,双酶切后回收连接到酵母表达质粒pGBKT7中表达.提取酵母蛋白质,进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot免疫印迹分析.结果成功构建HCV FTP2基因酵母表达载体,Western blot免疫印迹显示HCV FTP2基因在酵母细胞中表达成功.表达产物相对分子质量27kD.结论HCV FTP2在酵母中表达成功.
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新基因NS5ATP4表达产物下调细胞周期素B2基因表达的研究
目的探讨新基因NS5ATP4表达产物对细胞周期素B2(cyclin B2)基因启动子转录的调节作用.方法根据文献确定细胞周期素B2的启动子区域,聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素基因因启动子(B2p),克隆至真核报告基因表达载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-cyclin B2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测报告基因氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性:并与pcDNA3.1(-)-NS5ATP4共转染HepG2细胞系,用ELISA法检测CAT的表达活性.结果成功获得细胞周期素B2启动子的正确克隆.pCAT3-cyclinB2p和pcDNA3.1(-)-NS5ATP4共转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的10倍,pCAT3-cyclin B2p的0.14倍.结论本文克隆的细胞周期素B2启动子有顺式调节下游基因表达的活性,NS5ATP4对细胞周期素B2基因的转录具有下调作用.
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丙型肝炎病毒5'端非编码区的5'端序列对其翻译启动活性的影响
目的分析丙型肝炎病毒(HCV)5'端非编码区(5'NCR)的5'端序列对其翻译启动活性的影响.方法用PCR技术扩增获得全长和5'端17个碱基缺失的HCV 5'NCR片段,定向克隆至表达质粒pSEAP2-Control的SEAP基因上游,分别构建成全长和5'端截短的HCV 5'NCR调控SEAP表达的重组质粒pNCRSEAP和pdNCRSEAP.用脂质体方法将重组质粒转染至肝细胞株QSG7701,并用化学发光法检测SEAP的表达.结果酶切和测序结果表明,重组质粒pNCRSEAP和pdNCRSEAP构建成功.表达的发光强度分别为390482±42856和635265±52285RLU,二者有差异显著性(P＜0.01).结论 HCV 5'NCR的5'端碱基缺失提高了它对SEAP基因的翻译启动活性,为进一步分析HCV IRES的结构提供了实验基础.
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脂质体瘤苗抗小鼠H22腹水型肝癌作用研究
目的观察脂质体瘤苗的抗癌作用,寻找有效的抗肿瘤疫苗.方法制备H22肝癌细胞的脂质体瘤苗,将该瘤苗通过腹腔接种,免疫荷瘤的BalB/c小鼠(LAg组),同时设单用抗原免疫组(Ag组)和D-Hanks组作为对照,比较各组小鼠的生存期,并用MTT法检测外周血和脾淋巴细胞对H22肝癌细胞的体外杀伤作用.结果LAg免疫的BalB/c鼠的平均生存期及脾和外周血淋巴细胞毒活性均高于Ag组及D-Hanks组(P＜0.05),Ag组及D-Hanks组两者之间差异无显著性(P＞0.05).结论单用H22抗原不能诱导有效的抗肝癌免疫反应,用脂质体包裹后,其抗肝癌作用可明显增强,脂质体瘤苗有潜在的临床应用前景.
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应用抑制性消减杂交技术克隆乙型肝炎病毒全S蛋白反式激活基因
目的应用抑制性消减杂交(SSH)技术构建乙型肝炎病毒(HBV)全S蛋白反式激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBV全S蛋白反式激活相关基因.方法以HBV全S表达质粒pcDNA3.1(-)-全S转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,从中提取mRNA并逆转录为cDNA,经RsaI酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析.结果成功构建人HBV全S蛋白反式激活基因差异表达的cD-NA消减文库.文库扩增后得到86个白色克隆,进行菌落PCR分析,均得到100-1000 bp插入片段.挑取35个含有插入片段的阳性克隆测序分析,获得33个已知基因序列,和2个未知基因,通过生物信息学分析获得其全长序列,其中之一命名为全S蛋白反式激活基因1(CSTP1),已在GenBank中注册,注册号:AY553877.未知基因的功能还正在研究中.结论应用SSH技术成功构建了HBV全S反式激活基因差异表达的cDNA消减文库.该文库的建立为进一步阐明HBV全S反式调节的靶基因及致肝病发生的分子生物学机制提供理论依据.
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基因表达谱芯片筛选NS5ATP2剪切体NS5ATP2-512转染细胞差异表达基因
目的应用基因芯片技术检测丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白5A(NS5A)反式激活基因NS5ATP2剪切体512的表达对肝母细胞瘤细胞HepG2基因表达谱的影响,进一步阐明NS5ATP2剪切体512蛋白可能的分子生物学功能.方法设计并合成NS5ATP2基因序列特异性的引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术扩增NS5ATP2蛋白编码基因片段,以常规的分子生物学技术将获得的NS5ATP2编码基因片段克隆到TA载体中进行核苷酸序列的测定,在此过程中发现其剪切体NS5ATP2-512并构建真核表达载体pcDNA3.1(-)-NS5ATP2-512.以脂质体转染肝母细胞瘤细胞系HepG2,提取mRNA,逆转录为cDNA,与转染空白表达载体pcDNA3.1(-)的HepG2细胞进行cDNA芯片分析.结果构建的表达载体经过限制性内切酶分析和DNA序列测定,证实准确无误.提取高质量的mRNA,逆转录为cDNA,进行DNA芯片技术分析.在1 152个基因表达谱的筛选中,发现有14个基因表达水平显著上调,15个基因表达水平显著下调.结论应用基因表达谱芯片技术成功筛选了NS5ATP2剪切体NS5ATP2-512转染细胞后差异表达基因,为进一步阐明NS5ATP2-512蛋白可能的生物学功能提供依据.
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绿色荧光蛋白/PAP-a融合表达载体的构建及其在SMMG-7721细胞中的表达
目的构建绿色荧光蛋白/PAP-a融合表达载体,并检则其在肝癌细胞SMMC-7721细胞中的表达.方法采用PCR方法获得PAP-a基因;将该基因片段克隆入带有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,CFP)报告基因的真核表达载体pEGP-N1中,构建融合表达载体pEGFP-PAPa;通过脂质体介导的方法将该载体转染到SMMC-7721中,Western blot检测PAP-a的瞬时表达,荧光显微镜检测绿色荧光蛋白表达.结果pEGFP-PAPa转染SMMC-7721细胞后,在细胞中检测到PAP-a基因片段,Western blot可以检测到PAP-a在SMMC-7721细胞表达,用荧光显微镜观察到转染细胞中有绿色荧光蛋白表达.结论 pEGFP-PAPa在SMMC-7721细胞中获得了表达,表达的融合蛋白具有PAPa和绿色光蛋白的双重活性,该载体的成功表达是研究PAP-a抗肿瘤或抗病毒活民生的基础.
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双环醇下调细胞周期素B2基因启动子转录活性研究
目的探讨双环醇对细胞周期素(cyclin)B2启动子转录活性的调节作用.方法根据文献报道的结果确定细胞周期素B2的启动子DNA序列区域,以聚合酶链反应(PCR)扩增细胞周期素启动子(B2p),克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-cyclinB2p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性:并与双环醇共刺激的HepG2细胞,用ELISA法检测CAT的表达活性.结果成功获得细胞周期素B2启动子的止确克隆.pCAT3-cyclinB2p和双环醇(106Mol/L)瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的2.4倍,pCAT3-cyclinB2p的0.35倍.结论细胞周期素B2启动子有顺式激活下游基因的活性,双环醇具有对细胞周期素B2基因有下调作用.
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重组幽门螺杆菌过氧化氢酶脂质体疫苗免疫预防研究
目的探讨制备脂质体包裹重组幽门螺杆菌过氧化氢酶(Kat)口服疫苗的方法,并用Helicobacterpylori感染的小鼠模型评价其在预防H·pylori感染中的作用.方法将PET-22(+)/Kat在BL21(DE3)大肠杆菌表达,表达Kat的包涵体经洗涤、变性、复性,采用Q Sepharose Fast Flow阴离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶过滤层析分离纯化Kat重组蛋白,用薄膜分散法制备以卵磷脂和胆固醇为膜组分包裹的Kat重组蛋白口服疫苗,并用透射电镜测定其粒径.BALB/c小鼠分为5组,分别通过灌胃方法给予PBS、空白脂质体、Kat重组蛋白+霍乱毒素(CT)、脂质体包裹Kat重组蛋白、脂质体包裹Kat重组蛋白和CT,每周1次共4次,末次攻击2周再用活H·pylori攻击3次,3周后处死小鼠,行胃组织快速尿素酶试验、H·pylori的定植半定量,取脾组织行淋巴细胞增殖试验.结果以包涵体为主的表达产物占全菌总蛋白的24.4%,经纯化获得纯度为95%的重组蛋白,制备的脂质体粒径为0.7±0.4μm.PBS组和空白脂质体组保护率均为0,而Kat重组蛋白+CT组、脂质体包裹Kat重组蛋白组、脂质体包裹Kat重组蛋白+CT组的保护率分别为73.3%、66.7%和86.7%,且均能使免疫小鼠胃黏膜H·pylori感染数目明显减少,三个疫苗组淋巴细胞增殖试验均为阳性.结论口服脂质体能部分代替免疫佐剂的作用,将其作为H·pylori疫苗的免疫佐剂,具有广泛的应用前景.
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丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A上调硫氧还蛋白还原酶1基因表达的研究
目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5A对硫氧还蛋白还原酶1(TXNRD1)启动子转录的激活作用.方法以我室构建的丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式调节基因的cDNA文库抑制性消减杂交(SSH)筛选结果及基因表达谱芯片结果为基础,利用生物信息学技术确定TXNRD1的启动子区域(TXNRD1p),聚合酶链反应(PCR)扩增TXNRD1p,克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-TXNRD1p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;并与pcDNA3.1(-)-NS5A共转染HepG2细胞系,用ELISA法检测CAT的表达活性.结果pCAT3-TXNRD1p和pcDNA3.1(-)-NS5A瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的9.6倍,pCAT3-TXNRD1p的2.1倍.本实验进一步验证了我室利用SSH技术及基因表达谱技术发现的HCV NS5A蛋白反式激活TXNRD1基因转录作用的结果.结论我室克隆的TXNRD1启动子有顺式激活下游基因的活性;HCV的NS5A蛋白具有对TXNRD1基因启动子的反式激活作用.
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急性黄疸型乙肝恢复期复发并淤胆一例
患者,女,35岁.因"乏力、纳差、厌油9天,眼黄、尿黄3天"于2004年3月16日第1次入院.入院查体:皮肤巩膜轻度黄染,未见慢性病容、肝掌及蜘蛛痣,腹部无压痛、反跳痛,肝下界于右肋缘下1.5cm,质中,有触痛,脾未及.入院时肝功示:ALT 765U/L,AST 725U/L,ALP 181U/L,GGT 69U/L,TB104.4μmol/L,DB 65.4μmol/L,IB 38.8μmol/L;乙肝三对示HBsAb阳性,HBcAb-IgM阳性;抗HAV-IgM、抗HCV、抗HEV-IgM均为阴性;PTA 72%.
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妊娠急性脂肪肝的治疗体会
妊娠急性脂肪肝(AFLP)是发生于妊娠末3个月特有的严重的疾病.以黄疸、凝血障碍、脑病及肝脏小脂肪滴脂肪变性为特征[1].起病急,母婴死亡率高,本病临床上较少见.自1995年1月～2004年1月,我院共收治16例,现就所获治疗体会,总结如下.
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4690例消化性溃疡与年龄关系分析
我院于1990年-2002年,经纤维胃镜检查14 105例中,查出消化性溃疡4 690例,现将溃疡的部位、溃疡面大小与年龄关系的有关情况分析如下.
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克隆氏病合并骨髓增生异常综合征(病例报道一例及相关文献综述)
MDS和克隆氏病的发生率都很低.虽然克隆氏病的患者很多都存在血液系统异常,但是我们很少将其与MDS联系起来.所以尽管近十年来有越来越多的相关报道出现,我们仍很少关注克隆氏病与MDS同时发生的情况.两种疾病并存是偶然的还是有共同的致病因素目前仍不清楚,还需要我们收集更多病例并进行相关研究和总结.
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大同地区消化道真菌感染的流行病学特点
在行消化内镜检查时,经常可见消化道真菌感染,尤其以食管常见.一般的以胃肠道为主诉就诊病人中,发生率低于5%[1].自1956年Amdren报道以来,国内外文献均有报道.本文对我院1995年9月～2002年9月门诊及住院病人行内镜检查31 525例进行统计,对其中346例真菌感染进行分析,以期探讨该病在大同地区流行病学中的某些特点.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 03 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
