肺癌表皮生长因子受体基因突变和扩增与临床病理相关性研究

目的探讨肺癌患者中表皮生长因子受体(EGFR)基因突变和扩增与临床病理的关系。方法应用聚合酶链反应(PCR)-DNA测序和荧光原位杂交(FISH)检测肺癌EGFR基因突变和扩增的情况，并结合临床病理资料进行分析。结果在DNA测序检测的454例肺癌中，总突变率48.2％ (219/454)。女性患者突变率59.6％ (118/198)明显高于男性39.5％ (101/256)，两者差异有统计学意义(P＜0.001)。非吸烟者突变率52.7％( 147/279)高于吸烟者41.1％ (72/175)，两者差异有统计学意义(P=0.017)。腺癌突变率56.8％ (193/340)高于非腺癌者22.8％ (26/114)，两者之间差异有统计学意义(P＜0.05)。腺癌各亚型之间突变率差异有统计学意义(P=0.001)。在FISH检测的134例肺癌中，基因扩增阳性率22.4％ (30/134)，其在年龄、性别、组织学类型和腺癌亚型分型中无统计学意义(P＞0.05)。EGFR基因扩增与基因突变之间具有显著相关性（P=0.0005），但两者一致性较差(κ=0.275)。结论EGFR基因在女性、非吸烟者和腺癌患者中突变率高，且腺癌各亚型之间突变率有明显差异；EGFR基因扩增与年龄、性别、组织学类型和腺癌亚型分型无明显相关。DNA测序与FISH两种检测方法之间具有显著相关性，但两者一致性较差。

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变检测技术及其临床意义。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增DNA直接测序法检测192例NSCLC的EGFR基因第18 ～21号外显子突变情况，并结合临床病理指标分析其意义。结果192例非小细胞肺癌中64例存在EGFR酪氨酸激酶结合域的基因突变(33.3％)，其中第19号外显子缺失突变率为60.9％( 39/64)，第21号外显子替代突变率为39.1％ (25/64)，第18和20号外显子未发现突变。在伴有细支气管肺泡癌分化特征的肺腺癌中EGFR基因突变率为58.5％( 24/41)，显著高于普通腺癌(37.9％，33/87)、鳞癌(7.5％，4/53)、大细胞癌(1/5)和腺鳞癌(2/6)，P＜0.05；女性(51.9％，40/77)显著高于男性(20.9％,24/115)，P＜0.01；不吸烟者(50.0％,57/114)显著高于吸烟者(9.0％，7/78)，P＜0.01。结论PCR扩增DNA直接测序法检测NSCLC的EGFR基因突变技术稳定、可靠，为临床开展NSCLC靶向治疗提供了依据。

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测及其与临床病理特征的相关性

目的探讨中国非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因突变特点及与临床病理特征的相关性。方法采用优化寡核苷酸探针聚合酶链反应(PCR)法检测309例甲醛固定、石蜡包埋NSCLC组织中EGFR基因第18 ～21号外显子突变情况，分析EGFR突变与临床病理特征的关系。结果受检309例NSCLC样本中，EGFR基因第18、19和21号外显子总突变率为34％(105/309)。男性与女性患者的突变率分别为30.4％ (56/128)和39.2％ (49/125)。年龄≤60岁、无吸烟史、腺癌患者的突变率较高(P＜0.05)，分别为40.5％ (87/215)、40.2％ (51/127)、38.8％ (78/201)。而在鳞癌和大细胞未分化癌中，EGFR基因突变检出率分别为22.2％( 16/72)和3/14。检出的突变类型包括第18号外显子点突变(5.7％，6/105)、第19号外显子缺失突变(39.0％，41/105)和第21号外显子点突变(55.2％，58/105)。其中第18号外显子整体突变率低，但在鳞癌和腺鳞癌所占突变比例较高。结论在中国人群NSCLC中，EGFR基因突变多见于女性、年龄≤60岁、无吸烟史和腺癌患者。优化寡核苷酸探针PCR法敏感、便捷，可用于EGFR基因突变检测。

表皮生长因子受体基因突变与非小细胞肺癌临床病理特征及预后的关系

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者表皮生长因子受体(EGFR)基因第19和21号外显子突变情况并探讨其与临床病理特征及预后的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)技术对282例NSCLC患者手术标本的石蜡包埋癌组织EGFR基因第19和21号外显子片段进行扩增并测序，分析EGFR突变与临床病理特征及预后的关系。结果282例NSCLC组织中120例(42.6％)存在EGFR基因突变，包括第19号外显子突变61例，第21号外显子突变66例，其中7例第19和21号外显子同时存在突变。女性EGFR突变率(55.2％，53/96)高于男性的(36.0％，67/186)，年龄51～60岁患者EGFR突变率(51.3％，39/76)高于≤50岁者(30.4％，21/69)和＞60岁者(43.8％，60/137)，非吸烟者的EGFR突变率(54.3％，69/127)高于吸烟者的(32.9％，51/155)，EGFR突变与吸烟呈负相关（P =0.000，rs=-0.216）；腺癌（47.8％，64/134）、细支气管肺泡癌(73.0％，27/37)、腺鳞癌(7/9)中EGFR突变率均明显高于鳞癌(23.6％，17/72)、其他类型(16.7％，5/30)中的突变率，分化程度中高、中、低、未分化的EGFR突变率分别为55.7％ (68/122)、50.8％( 30/59)、22.7％( 17/75)、19.2％ (5/26)，随着分化程度的降低而降低，EGFR突变与肺癌组织分化程度呈正相关(P =0.000，rs=0.296);EGFR基因突变型的患者生存期明显较野生型的长(P =0.027)，EGFR突变与临床TNM分期不相关。结论EGFR基因突变在女性患者、年龄51 ～60岁患者、非吸烟者及腺癌、细支气管肺泡癌、腺鳞癌中多见，EGFR突变与肺癌组织分化程度呈正相关，存在基因突变的患者预后较好，有利于患者靶向治疗的临床筛选。

双环探针特异引物荧光聚合酶链反应法检测非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变

目的探讨双环探针特异引物荧光聚合酶链反应法(BPSP-qPCR)检测非小细胞肺癌( NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的敏感性和稳定性。方法采用BPSP-qPCR法检测NSCLC中EGFR基因第18～21号外显子突变，分析突变与临床病理特征、不同检测样本间的关系。结果265例NSCLC样本中19-del和（或）L858R突变占30.2％( 80/265)。资料完整的184例中，女性、不吸烟者、腺癌有更高的19-del和（或）L858R突变率，分别为39.7％ (31/78)、41.0％ (43/105)、37.8％ (51/135) (P ＜0.05)；T790M合并19-del和（或）L858R占3.3％(6/184)；男性转移灶、女性和不吸烟者胸腔积液样本有较高的19-del和（或）L858R阳性突变率，分别为29.6％( 8/27)、42.9％(9/21)和40.7％(11/27)，而非腺癌转移灶为0(P＞0.05)。结论BPSP-qPCR法检测EGFR基因突变稳定、敏感。EGFR基因敏感突变多见于女性、非吸烟、腺癌，胸腔积液样本和转移灶少量样本能够检出EGFR突变，指导临床治疗。

钙化性纤维性肿瘤的临床病理学研究及其组织学发生的再评价

目的探讨钙化性纤维性肿瘤(CFT)的临床病理学特征及其组织学发生机制。方法对11例CFT的临床表现、组织学形态及免疫组织化学表型进行分析。结果11例CFT中男性5例，女性6例，年龄从25至52岁，平均38岁，位于盆腹腔6例、皮下软组织4例、阴囊内1例。临床上表现为缓慢增大的无痛性肿块，5例伴随其他病症或既往有炎性改变、外伤或手术史，4例病变为偶然发现，肿瘤多为单发，切除后未见复发。影像学显示病变为孤立性或多发性实性软组织肿块，境界清楚无包膜，实质内散在大小不等、数量不一的高密度钙化灶。大体上，肿瘤呈灰黄色，质硬，边清，圆形、卵圆形、分叶状或不规则形，大径为0.5 ～20.0 cm，切面散在浅黄色斑点状钙化灶，切开时具有沙砾感。显微镜下显示肿瘤实质主要由玻璃样变的胶原纤维及厚壁血管构成，其中散在少量梭形细胞、单核炎性细胞、沙砾体及营养不良性钙化。此外，少数肿瘤边缘区局灶性中性粒细胞呈带状浸润，另见少量神经束及脂肪组织内陷。不同病例肿瘤实质外周区局灶性具有类似于孤立性纤维瘤、纤维瘤病、瘢痕疙瘩及炎性肌纤维母细胞瘤样形态学改变。沙砾体及营养不良性钙化分别形成于透明变性的血管及玻璃样变的胶原纤维。肿瘤组织内浸润的单核炎性细胞主要为淋巴浆细胞，局部区域可形成淋巴滤泡样结构。免疫组织化学染色显示所有受检的肿瘤组织内梭形细胞弥漫性表达波形蛋白，少数局灶性表达CD34、第八因子相关抗原及β-caltenin，其他标记为阴性。具有特征性的是，与炎性病变相比，CFT组织中浸润的浆细胞显著表达IgG及IgG4，且IgG4+/IgG+＞50％，IgG1及IgG3表达的细胞较少。结论CFT具有较为特征性的组织病理学表现，但其发病机制尚未明确。由于CFT与IgG4相关的硬化性疾病具有相似的组织学及免疫组织化学表型，因此，推测CFT可能为IgG4相关的硬化性疾病家族谱系中一种新的独立实体。该病变的发展呈良性经过，炎性改变及创伤可能为该病变的重要诱因，手术切除后罕见复发。

血管内NK细胞淋巴瘤的临床病理分析

目的探讨血管内NK细胞淋巴瘤(IVNKL)的临床病理特征及预后特点，以提高对这一罕见疾病的认识。方法采用HE、免疫组织化学染色（EliVision法）和原位杂交技术，结合临床资料对2例IVNKL进行分析，对文献中的7例及该组2例患者进行临床病理学特征分析和预后比较。结果2例患者分别为68岁女性和22岁男性，均表现为躯干和四肢皮疹伴发热，皮肤活检结果符合典型的血管内淋巴瘤，免疫表型证实为NK细胞来源，即CD3、CD56、颗粒酶B和EBV编码的小RNA探针(EBER)阳性。2例患者均于确诊2个月后死亡。汇总文献，9例患者中男4例，女5例，平均年龄45.7岁，中位数47岁，红斑皮疹是常见的临床表现，7例患者病程中出现多系统受累，3例中枢神经系统受累。随访时间2～17个月，9例中6例死亡，中位生存时间为9个月，1年生存率为(35.6±18.6)％。多系统受累患者的死亡率( 6/7)略高于单纯皮疹者(0/2)，但差异无统计学意义(P =0.083)。结论IVNKL是一种罕见疾病，确诊需要依据典型组织学特点，并结合免疫表型分析和EBER原位杂交检测。该病预后较差，需尽早确诊、及时治疗，以避免多系统受累。

非小细胞肺癌中表皮生长因子受体基因突变直接测序分析及其与临床病理特征的相关性

目的回顾性分析非小细胞肺癌(NSCLC)中采用直接测序法检测的表皮生长因子受体(EGFR)基因突变率、突变分布特征及其与临床病理的相关性。方法收集NSCLC共443例，其中包括手术切除样本299例、粗针穿刺活检标本59例、细针穿刺和胸腔积液细胞学样本85例。所有样本均通过石蜡包埋、切片后确定肿瘤细胞含量，显微切割富集肿瘤细胞后采用聚合酶链反应-直接测序法检测EGFR基因酪氨酸激酶编码区第18至21号外显子的突变。结果(1)在443例NSCLC标本中共检出EGFR基因突变193个，发生在189例患者中(42.7％)；EGFR基因第18至21号外显子的突变率分别为2.0％( 4/193)、48.7％ (94/193)、6.7％ (13/193)和42.5％ (82/193)；(2)EGFR基因总突变率与年龄无显著相关性，但在年龄大于中位年龄（57岁）的患者中第21号外显子的突变率(50.9％，54/106)高于年龄小于或等于中位年龄者(32.2％，28/87；P＜0.01)；(3)女性患者中EGFR基因突变率(53.5％,107/200)高于男性患者突变率(33.7％，82/243；P ＜0.01)；(4)腺癌中的突变率(46.5％，161/346)高于鳞癌(13.3％，4/30；P＜0.01)和低分化癌者(24.1％，7/29；P＜0.05)，而与腺鳞癌(7/13)差异无统计学意义(P＞0.05)；(5)在手术切除、粗针穿刺活检以及细针穿刺和胸腔积液细胞学样本中EGFR突变检出率有逐渐下降的趋势，分别为49.5％( 148/299)、35.6％ (21/59)和23.5％ (20/85)，其中细针穿刺和胸腔积液的细胞学样本中的检出率较手术标本中的检出率为低(P＜0.01)。结论直接测序法是检测NSCLC中EGFR基因突变的有效方法，特别对未知突变类型的检出具有优势；NSCLC中EGFR基因突变在女性和腺癌中多见，以第19号外显子的缺失突变和第21号外显子的点突变为主；EGFR基因突变分布特征可能与年龄有一定关系；EGFR基因突变检出率与样本类型密切相关，活检组织及细胞学样本是检测EGFR基因突变的有用材料，但可能会漏检部分患者中EGFR基因的突变。

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的临床病理学意义。方法应用即时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测1444例NSCLC患者肺癌组织中EGFR基因第19号和21号外显子突变状况，分析EGFR基因突变与年龄、性别、吸烟状况、组织学分级及临床分期之间的关系。结果1410例成功分型的NSCLC肿瘤组织中401例存在EGFR突变，突变检出率为27.8％，其中193例第19号外显子发生缺失突变，208例第21号外显子发生替代突变。EGFR突变更常见于腺癌、不吸烟或女性患者[突变率分别为33.5％ (367/1094)]、37.6％( 321/853)及43.2％ (225/521)。细支气管肺泡癌及伴细支气管肺泡癌分化特征的腺癌突变率显著高于普通腺癌[突变率分别为61.3％( 19/31)、48.0％( 12/25)及32.4％ (336/1038)]。随着吸烟暴露水平的增加，EGFR突变率呈下降趋势；女性、不吸烟、腺癌为EGFR基因突变状况的独立影响因素。结论NSCLC患者女性、不吸烟、腺癌患者突变率较高。即时荧光定量PCR技术可快速、敏感、准确地检测EGFR基因突变。

非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测的经验总结分析

肺癌是当今世界上对人类健康与生命危害严重的恶性肿瘤之一。研究表明，表皮生长因子受体(EGFR)在43％～89％的非小细胞肺癌(NSCLC)中表达上调，它在肿瘤的形成以及介导瘤细胞的生物学行为上发挥着重要的作用，是目前NSCLC治疗的重要靶点之一[1]。吉非替尼等治疗肺癌的靶向药物，为EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)，可通过对肿瘤细胞EGFR的特异性结合阻断细胞信号通路，抑制肿瘤细胞增殖并促其凋亡[2]。

第三代测序技术：单分子即时测序

DNA测序技术是分子生物学研究中常用的技术，它的出现极大地推动了生物学的发展。从人类基因组计划（human genome project），到人类基因组单倍型图计划(HapMap)，再到人类癌症基因组及个体基因组计划，第一代和第二代DNA测序技术功不可没。特别是近几年发展起来的第二代DNA测序技术则使得DNA测序进入了高通量、低成本的时代。目前，基于单分子读取技术的第三代测序技术已经出现，该技术测定DNA序列更快，并有望进一步降低测序成本，为人类从基因水平深入理解疾病的发生、发展、诊断和治疗提供新的手段，使个体化医疗成为现实。本文回顾了测序技术发展过程，并对第三代测序技术的特点和优势进行详细论述。

膀胱尿路上皮癌分子标记的临床应用进展

近年来，膀胱尿路上皮（移行细胞）癌(transitional cell carcinoma,TCC)相关分子病理学研究已经取得了巨大进步，学者发现了多个与肿瘤遗传学变化相关的分子标志物，并在肿瘤诊断、分类及预测疗效、预后等方面显示出较好的临床相关性，我们就这些分子标记在膀胱癌临床应用进展作一综述。

SOX11转录因子在不同类型B细胞淋巴瘤中表达的意义

SOX11蛋白是胚胎发育中促进中枢神经系统细胞分化的一种转录因子，可表达于不成熟的神经元和胶质瘤，但在成人正常组织内不表达[1-2]。有学者发现在不同类型的淋巴造血系统肿瘤内有SOX11的表达，并主要表达在套细胞淋巴瘤(MCL)的细胞核上[3]，可能对MCL的诊断和预后有一定辅助价值。我们收集了淋巴母细胞性淋巴瘤和其他几种不同类型的成熟B细胞淋巴瘤，观察SOX11在不同类型淋巴瘤中的表达情况并探讨其意义。

加强基因型分析发展个体化医学

疾病的诊断，从表型(phenotype)分析发展到表型和基因型( genotype)结合分析代表着医学的革命性进步。临床分子病理学，或称分子诊断，已成为当今迅猛兴起的病理亚学科之一。它从核酸水平（DNA和RNA）研究疾病发生和发展规律，揭示疾病时外源性基因在体内的存在和内源性基因的突变及表达异常，是传统形态病理学的有益补充和发展。

中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识

一、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)基因突变检测的临床意义EGFR是一种跨膜受体酪氨酸激酶，该区域的激活即磷酸化对癌细胞增殖、生长的相关信号传递具有重要意义。因此，EGFR作为癌症治疗的分子靶标受到普遍关注，并陆续开发出了吉非替尼（gefitinib）、厄洛替尼(erlotinib)和埃克替尼( icotinib)等EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI)和抗EGFR抗体等[1-4]。

Francis Peyton Rous生平

腮腺癌肉瘤一例

患者男,53岁。无明显诱因右耳腮腺区隆起2个月余，以右腮腺混合瘤于2008年3月26日收入院。专科检查：右耳腮腺区扪及肿物约3.0 cm×2.5 cm大小，本色皮肤、无肿痛，不可推动。B超：右腮腺低回声区1.9 cm×1.4 cm×3.6 cm，回声欠均质并见到斑片状强回声，后方伴声影。X线检查示右腮腺实质性占位病变。术中所见肿物位于腮腺浅叶中央，质硬、包膜不完整，肿物向后深部生长。行全腮腺切除术。

直肠原发低度恶性子宫内膜间质肉瘤一例

患者女，46岁。无明显诱因出现大便带血1个月余，伴持续性腹胀，无腹痛、恶心、呕吐、发热，于2008年8月6日入院。直肠指检于左侧距肛门7 cm处触及包块，退出指套可见少量血迹。结肠气钡双重造影发现直肠前壁局部占位性病变。患者行直肠肿物切除术。术中探查肝、胆、小肠、结直肠及盆腔其他部位未发现异常。腹膜返折下方可触及肿瘤，占管腔周径2/3，未侵及浆膜，肠管与周围组织无粘连，肿瘤完整切除。病理诊断后查妇科B超发现子宫前壁1.5 cm×1.1 cm低回声结节，考虑为子宫肌瘤。

母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤一例

患者女，72岁。因全身多发斑丘疹、皮下结节5个月余于2010年6月入院。患者5个月前无诱因出现背部多发红色斑丘疹，直径1～3cm，突出皮面，伴轻度瘙痒，疹间皮肤正常，右颈背部、左乳及左大腿多处出现皮下结节，直径3 ～8 cm，表面皮肤发紫，活动度欠佳，不伴疼痛。皮疹逐渐增多，双上肢屈侧、双下肢也出现上述类似红色斑丘疹，直径1 ～2 cm。体检：全身浅表淋巴结未及明显肿大，肝脾肋下未及。实验室检查：(1)血常规：血小板计数有所下降(70×109/L)，白细胞分类计数中见大血小板，余未见明显异常。

男性乳腺浸润性微乳头状癌伴神经内分泌分化一例

患者男，46岁。因发现右乳肿块1个月就诊。查体：右乳外上方触及3 cm×3 cm大小包块，界清，质中。B超示右乳外上方实性结节，大小2.6 cm×1.8 cm。于2010年1月10日收入院，手术切除肿物。

乳腺浸润性导管癌合并慢性淋巴细胞白血病/小淋巴细胞淋巴瘤一例

患者女,52岁。因“右乳肿物进行性增大”于2010年9月收入院。体检：双乳对称，乳头无溢液、无内陷、无偏斜，皮肤无橘皮样改变，无红、肿、热、痛；于右乳外下象限距乳头约0.5 cm处可触及椭圆形肿物，活动度差；右腋窝可触及肿大淋巴结；左乳及左腋窝检查无特殊。无发热、乏力、体重减轻，无贫血、血小板减少、肝脾肿大等。双乳彩超：右乳外下象限可探及不均质偏低回声肿物；右腋窝及右锁骨上窝可见肿大淋巴结。细针穿刺细胞学检查见癌细胞。血常规：白细胞5.09×1010/L，淋巴细胞0.89，中性粒细胞0.09，血小板342×109/L。