人晶状体上皮细胞系内肌醇1,4,5-三磷酸受体和兰尼碱受体的表达和作用

目的确定人晶状体上皮细胞(HLEC)系LEC-B3细胞内两种钙池调控系统肌醇1,4,5-三磷酸(IP3) 受体和兰尼碱受体的表达,并鉴定其亚型,初步探讨两系统对HLEC内Ca2+的调控作用.方法传代培养HLEC系LEC-B3细胞,选用第3代融合状态良好的细胞,提取细胞总RNA,反转录获取cDNA,分别用IP3受体的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚型和兰尼碱受体的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ亚型特异引物进行逆转录聚合酶链反应,判定分析mRNA的表达.并在激光扫描共聚焦显微镜下分别采用一定浓度的乙酰胆碱、阿托品、咖啡因、兰尼碱及普鲁卡因作用于细胞外液含Ca2+、Mg2+和不含Ca2+、Mg2+的同代细胞,观察分析Ca2+信号的变化.结果 HLEC系LEC-B3细胞中分别表达IP3受体和兰尼碱受体的Ⅰ和Ⅲ型mRNA,且均Ⅲ型表达强于Ⅰ型(P<0.05).10 μmol/L乙酰胆碱、10 mmol/L咖啡因及50 μmol/L兰尼碱均可使细胞内Ca2+浓度增高,而波动的开始时间、幅度及持续时间因细胞外液成分和药物不同而异;1 μmol/L阿托品可阻断乙酰胆碱的作用,50 μmol/L普鲁卡因可抑制兰尼碱的作用.结论 HLEC系LEC-B3细胞内同时存在IP3受体和兰尼碱受体基因的转录,且存在亚型特异性.两种受体的激动剂和抑制剂均可引起细胞内Ca2+浓度的变化,提示IP3受体和兰尼碱受体系统在HLEC内Ca2+浓度的调控中同时发挥重要作用,其中IP3受体对Ca2+更为敏感.

重庆市角膜捐献人群的现状分析

目的研究重庆市角膜捐献人群的现状.方法 2001年5～12月抽样调查1 400位重庆市市民对角膜捐献的意识和态度、有关角膜捐献知识了解的程度及实际角膜捐献的参与性,并对其进行分析;1999年3月至2001年12月对1 278位身后捐献角膜志愿者的社会学资料进行分析和回访;1999年5月至2001年12月对37位已经捐献眼球者社会学及相关医学资料进行分析.结果(1)问卷调查结果:1 400份调查问卷中,回收问卷1 108份(79.14%),有效问卷1 072份(76.57%).其中506份(47.20%)愿意身后捐献角膜,672份(62.69%)支持捐献角膜,701份(65.39%)不知道重庆市已经建立了眼库,984份(91.79%)不知道如何办理角膜捐献手续,807份(75.28%)赞成尽快立法或制定地方性条例.1 010份自愿角膜捐献者的问卷中,332份(32.55%)表示只捐献角膜;967份愿意身后捐献角膜或器官问卷中,875份(90.49%)不愿意现在即办理捐献手续.(2)1 278位角膜捐献志愿者:男性550人,女性728人.791人(61.89%)年龄≤30岁.学生、教师、医务人员、企事业单位干部及文职人员共937人(73.16%),其中大专以上文化程度824人(64.48%).(3)37例已捐献眼球者:年龄20～88岁,多数因恶性肿瘤及心、脑血管疾病而致死;初中以下文化程度者22人(59%),大专以上者4人(11%);捐献的角膜临床应用率为73%.结论 (1)重庆市已存在相当数量角膜志愿捐献的人群,年龄、文化程度不是角膜捐献意识和行为的决定因素;(2)实际角膜捐献率较低;(3)加快角膜捐献立法的进程.

挫伤性玻璃体积血的手术时机与效果

目的探讨挫伤性玻璃体积血的手术时机与效果.方法对116例(116只眼)挫伤性玻璃体积血患者分别采用药物治疗46例(46只眼)和玻璃体手术治疗70例(70只眼),并对结果进行比较性研究和随诊观察.结果玻璃体手术组患者术后1个月,视力≥0.1者为71.4%;而非手术组患者药物治疗后1个月,视力≥0.1者仅为21.7%,两者差异有显著意义(P＜0.05).非手术组患者治疗后视力＞0.1者10只眼,其中7只眼是于受伤后2周内恢复视力.手术组患者中,仅有27.1%的患眼做单纯玻璃体切除术,70.9%的患眼行玻璃体切除联合其他术式;术后有3只眼发生视网膜脱离,经再手术治愈.非手术组患者治疗过程中,有14只眼发生视网膜脱离,11只眼接受手术治疗,8只眼治愈.结论挫伤性玻璃体积血药物治疗观察的时间为伤后2～3周,若无明显好转应及时选择玻璃体手术治疗.

重组腺病毒介导的gfp-bcl-XL对视网膜变性鼠光感受器细胞保护作用的研究

目的　观察重组腺病毒rAd-gfp-bcl-XL 治疗视网膜变性（retinal degeneration, RD）鼠的疗效。方法　40只RD鼠随机分成A、B组，每组20只，右眼为治疗眼，左眼为对照眼。A、B组治疗眼分别于RD鼠生后10 d及22 d视网膜下腔注射含绿色荧光蛋白基因gfp和抗凋亡基因bcl-XL的重组腺病毒颗粒；术后15、30 d摘除治疗眼和对照眼行冰冻切片、透射电镜下观察、石蜡切片、HE染色并提取视网膜总RNA；行逆转录聚合酶链反应分析bcl-XL基因的mRNA表达水平；免疫组化分析治疗眼和对照眼的Bcl-XL蛋白水平。结果　治疗眼视网膜有较广泛的绿色荧光蛋白表达，说明重组腺病毒成功的将bcl-XL转染至视网膜光感受器细胞，且有bcl-XL表达；术后30 d，A组鼠治疗眼和对照眼bcl-XL的mRNA表达水平及Bcl-XL蛋白含量有明显差异；透射电镜下可见治疗眼的内节段较对照眼完好；HE染色示治疗眼视网膜光感受器细胞层较对照眼厚。而B组鼠治疗眼和对照眼的视网膜光感受器细胞层的厚度无明显差异。结论　注射至早期RD鼠视网膜下腔中的rAd-gfp-bcl-XL能有效转染光感受器细胞并发挥抗凋亡作用，但对晚期RD鼠的疗效不明显。

肝素缓释系统抑制后发性白内障的实验研究

目的探讨肝素缓释系统抑制后发性白内障发生的可行性和有效性.方法将30只(30只眼)超声乳化透明晶状体吸除术后新西兰大白兔随机均分为A组(术后生理盐水滴眼)、B组(术中后房内植入空白缓释系统)及C组(术中后房内植入肝素缓释系统).术后12周对3个组兔眼进行裂隙灯显微镜、组织病理学及电镜检查,并检测血、房水肝素浓度和晶状体后囊膜的湿重.结果(1)术后12周A、B及C组发生晶状体后囊膜混浊的眼数分别为10、10及4只眼,差异有非常显著意义(χ2=14.09,P=0.001).(2)术后12周A、B及C组晶状体后囊膜的平均湿重分别为(158±5)、(160±9)及(20±3) mg,差异有非常显著意义(F=1 168.99,P=0.000).(3)C组房水中的平均肝素浓度为(26±12) mg/L.(4)光镜和电镜下C组兔眼晶状体后囊膜细胞增殖不活跃,未发现眼内毒性反应.(5)术中和术后无眼内出血现象.结论后房内植入肝素缓释系统,可明显提高并长期维持房水中的肝素浓度,有效抑制后发性白内障的发生;该方法毒副作用小,是一种安全、有效的给药方式.

钙蛋白酶抑制剂PD150606对鼠氧化性白内障的预防作用

目的探讨钙蛋白酶抑制剂PD150606对鼠氧化性白内障的预防作用和钙蛋白酶在H2O2诱发白内障鼠的晶状体上皮细胞(LEC)凋亡过程中的作用.方法将健康清洁级SD大鼠的120只离体透明晶状体随机均分为2组,实验组加含2 mmol/L H2O2和0.1 mmol/L PD150606的培养液,对照组加含2 mmol/L H2O2的培养液.于6、12、24 h,分别检测2组鼠晶状体的透明度及相对灰度值;微量Folin酚法检测2组晶状体蛋白质中水溶性蛋白(WSP)所占比例;流式细胞仪术检测2组晶状体中LEC数目;蛋白电泳结合免疫印迹法检测LEC中天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶3的表达.结果加入培养液后24 h内,实验组晶状体混浊程度较对照组明显好转.6、12及24 h,实验组晶状体相对灰度值增大,与对照组比较,差异有显著意义(t＝2.285,4.834,5.737;均P<0.05);12和24 h,实验组 WSP在晶状体蛋白质中所占比例下降程度有所减小,与对照组比较,差异均有非常显著意义(t＝1.398,3.260,3.260;均P=0.009);加入培养液后6、12及24 h,实验组 LEC凋亡数目减少,与对照组比较,差异均有非常显著意义(t＝6.268,5.759,5.397;均P<0.01);6、12及24 h,实验组半胱氨酸蛋白酶-3的表达减弱,与对照组比较,差异有非常显著意义(t＝11.637,5.648,6.369;均P<0.01).结论钙蛋白酶抑制剂PD150606可部分抑制H2O2诱发的离体鼠晶状体混浊、蛋白水解及LEC凋亡,钙蛋白酶的激活在氧化性白内障的发生中有一定作用.钙蛋白酶可能通过水解晶状体蛋白和激活半胱氨酸蛋白酶3诱导LEC凋亡,以诱发白内障.

基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶2组织抑制因子及转化生长因子β1在糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)、金属蛋白酶2组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinase 2,TIMP-2)及转化生长因子β1(transforming growth foctor beta,TGF-β1)在糖尿病性白内障患者的晶状体上皮细胞中的表达及意义.方法应用免疫组化技术检测23例糖尿病性白内障患者和7例正常人的晶状体上皮细胞中MMP-2、TIMP-2及TGF-β1的表达,并进行比较.结果糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞中MMP-2和TGF-β1的阳性表达率与正常人比较,差异均有非常显著意义(χ2＝24.548,16.78;P<0.01),而糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞中TIMP-2的阳性表达率与正常人比较,差异无显著意义(χ2＝0.621,P>0.05).经Spearman等级相关分析,晶状体上皮细胞中,MMP-2和TGF-β1的阳性表达率存在正相关(r=0.516, P<0.01);MMP-2和TGF-β1与TIMP-2阳性表达率间均无相关(r=-0.045,0.042;P>0.05).结论TGF-β1介导的MMP-2和TIMP-2表达失衡在糖尿病性白内障患者晶状体前、后囊膜下纤维化的发生和发展过程中起重要作用.

同源盒基因Pax-6在鼠晶状体上皮细胞中的表达分析

目的观察体外培养的小鼠晶状体上皮细胞(LEC)内同源盒基因Pax-6的表达,探讨维持晶状体上皮细胞特性的基因因素.方法体外培养小鼠原代、传1代、传2代及传3代LEC,利用免疫组织化学法和免疫印迹法,检测细胞中Pax-6基因的蛋白表达情况,利用逆转录聚合酶链反应法检测细胞中Pax-6基因的mRNA表达情况.结果在原代、传1代及传2代培养的LEC中均可检测到Pax-6基因蛋白和 mRNA的阳性表达,传3代培养的LEC中仅检测到Pax-6基因蛋白的微弱表达.阴性对照均未见Pax-6基因的表达.结论体外培养的小鼠LEC中具有Pax-6基因,该基因的正常表达是维持LEC特性的必要条件.

年龄相关性黄斑变性合并脉络膜新生血管患者的自然病程和视力预后

目的了解年龄相关性黄斑变性(AMD)合并脉络膜新生血管患者的自然病程和视力预后.方法对29例(35只眼)未接受激光、放射或手术等治疗的湿性AMD患者,进行全面眼部检查和有计划的定期随诊,包括视力、眼前节检查,直接和间接检眼镜检测,在裂隙灯下用+90 D前置镜检查眼底,眼底照相和荧光素眼底血管造影等.结果随诊5～16年(平均8年),佳矫正视力在0.1以下者,初诊时为10只眼(眼前手动4只眼), 占28.5%; 末诊时为23只眼(眼前手动14只眼),占65.7%.初诊时黄斑出血25只眼,玻璃体积血4只眼,随诊中有23只眼反复出血,多达4次.末诊时仍有7只眼黄斑出血.初诊时7只眼存在黄斑区机化膜,末诊时35只眼均有面积大小不等的机化膜形成.结论经过长期观察,AMD合并脉络膜新生血管患者的自然病程漫长,黄斑区反复出血,视力预后恶劣.

特发性息肉状脉络膜血管病变一例

患者男,60岁.因双眼视物变形、视力下降半年,于2001年10月20日来我院眼科就诊.1987年患者曾被诊断为Ⅲ期矽肺,2001年4月于外院诊断为矽肺并发肺结核,后行抗结核治疗半年.体检未见异常.眼部检查:右眼视力0.9,左眼0.4.双眼前节未见异常.眼底检查:

我国白内障基础研究的现状和对策

随着我国现代科学技术水平的不断发展和提高,医学基础研究正以日新月异的发展势头,逐步与国际接轨,取得了令人瞩目的进步和成果.

正常人眼及戴角膜接触镜眼的结膜表面细胞变化

我们采用结膜印迹细胞学(conjunctival impression cytology,CIC)方法研究正常人及配戴角膜接触镜患者眼的结膜杯状细胞数量、密度,上皮细胞的形态及角化程度与其年龄间的关系.

正常人角膜不同位置角膜知觉的测定分析

人类角膜神经分布密集,大多数神经纤维为感觉神经.这些感觉神经对外界的机械、化学和热刺激所作反应的敏感程度即为角膜知觉.以往采用棉丝检测角膜知觉,近年来发明的CohetBonnet角膜知觉计,可使角膜知觉得以量化测定并分析.为探讨正常人角膜不同位置的角膜知觉分布情况,我们应用CohetBonnet角膜知觉计,检测126位自愿者的角膜中央、鼻侧、颞侧、上方及下方的角膜知觉,现将结果报告如下.

γ-干扰素对培养人结膜上皮细胞及泪腺上皮细胞的影响

γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)是致炎作用很强的细胞因子,在机体各类炎性反应过程中起着重要的作用,它不仅可以诱导多种上皮细胞过量表达细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1,CD54)、主要组织相容性抗原(HLA-DR)等,而且可诱导细胞凋亡[1].

外伤性白内障摘除术中的虹膜瞳孔成形术

复杂的外伤性白内障患者多伴有虹膜前或后粘连、虹膜缺损、根部离断、瞳孔括约肌损伤而致的大瞳孔、瞳孔变形移位,严重者虹膜完全溶解吸收,形成无虹膜症等.此类患者人工晶状体植入术后视力恢复不佳,并可发生单眼复视、眩光及畏光等多种并发症.近年来笔者于人工晶状体植入术中施行虹膜瞳孔成形术治疗此类外伤性白内障,获得满意疗效,现将结果报告如下.

医学文献综述的内涵特性

在常见的信息载体中, 医学文献综述以其信息量丰富而独具特色.了解医学文献综述的内涵和特点,对于获取和传播医学信息具有重要意义.为此,笔者就医学文献综述的概念、分类、特性及来源做一介绍.

严重急性呼吸综合征急性期T淋巴细胞亚群异常改变(摘要)

SARS的胸部X线表现(摘要)

电镜观察从非典型肺炎患者尸检标本中发现衣原体样和冠状病毒样颗粒(摘要)

SARS的早期X线及CT表现(摘要)

荧光聚合酶链反应检测严重急性呼吸综合征冠状病毒的方法建立及临床初步应用(摘要)

严重急性呼吸综合征患者淋巴细胞及其亚群的表型分析(摘要)