腺病毒介导酸性成纤维生长因子对兔角膜内皮细胞感染及促增殖作用的实验研究

目的观察复制缺陷型重组腺病毒载体介导酸性成纤维生长因子(aFGF)对体外培养的兔角膜内皮细胞(RCEC)的感染效率和促增殖作用.方法 293A细胞扩增复制缺陷型重组腺病毒,选用细胞半数感染剂量(TCID50)法测定病毒滴度.体外培养RCEC,用携带报告基因(LacZ)的重组腺病毒(Ad-LacZ)感染RCEC,二甲基甲酰胺(X-gal)染色估计瞬时感染效率,将含aFGF的重组腺病毒(Ad-aFGF)感染RCEC,RT-PCR 、Western blot分别检测aFGF转录及蛋白质表达情况,噻唑盐(MTT)法检测转基因细胞增殖情况.结果病毒滴度为2×108 pfu/ml;重组腺病毒感染RCEC 24 h后即可检测到外源基因表达,当感染倍数(MOI)值等于20时,Ad-LacZ对RCEC的感染效率为100%,感染Ad-aFGF对RCEC增殖有促进作用(F=217.107,P<0.05).结论复制缺陷型重组腺病毒载体介导的外源基因在RCEC中可有效表达,感染Ad-aFGF对RCEC增殖具有促进作用.(中华眼科杂志,2004,40:156-159)

消旋-α-硫辛酸对大鼠糖尿病性白内障抑制作用的研究

目的探讨消旋-α-硫辛酸(LA)对大鼠糖尿病性白内障的抑制作用.方法将7周龄雌性Brown-Norway(BN) 无特定病原体大鼠随机分为正常组(8只)、异常组 (14只)及治疗组(14只).使用链脲霉素(STZ)制作异常组和治疗组糖尿病模型,治疗组大鼠饲料中添加0.3% LA.观察3组大鼠晶状体散乱光强度、血糖浓度及晶状体中谷胱甘肽的水平.结果注射STZ后 2周末,异常组出现晶状体前囊膜下网状混浊,并随时间加重,逐渐扩大至晶状体前皮质;4周末,治疗组晶状体前囊膜下轻微混浊;5周末,治疗组晶状体散乱光强度与异常组比较,差异有非常显著意义(P<0.01).注射STZ后3 d,治疗组血糖浓度与异常组比较,差异无显著意义(P>0.05);注射STZ后80 d,治疗组血糖浓度明显低于异常组(P<0.01).注射STZ后10个月治疗组晶状体中谷胱甘肽的浓度与异常组比较,差异无显著意义(P>0.05).结论口服LA可有效降低STZ所致糖尿病大鼠的血糖浓度,抑制白内障发生.LA在晶状体中的生化特性尚待深入研究.(中华眼科杂志,2004,40:193-196)

超声生物显微镜在晶状体半脱位诊治中的应用

目的探讨超声生物显微镜(UBM)检查在晶状体半脱位临床诊治中的应用价值.方法收集29例(32只眼)因不同原因致晶状体半脱位患者,分别于超声乳化晶状体吸除术前、后行UBM检查.术中根据术前UBM检查的晶状体半脱位范围和程度,选用不同类型囊袋张力环(CTR),并采用不同手术方式完成手术.术后观察CTR和人工晶状体的位置,以及并发症的发生情况. 结果术前UBM检查晶状体半脱位范围≤1/2象限的19只眼,术中植入无钩CTR顺利完成手术;术前UBM检查晶状体半脱位范围＞1/2象限的13只眼,术中植入固定型CTR顺利完成手术.术后UBM检查显示除1只眼CTR贴附周边虹膜,其余术眼CTR均位于晶状体悬韧带水平;术后29只眼人工晶状体正位,3只眼人工晶状体轻度倾斜.结论术前对晶状体半脱位患者行UBM检查,判断晶状体脱位的程度和范围,有助于指导设计手术方案,提高手术疗效.术后行UBM检查,观察眼内植入物与眼内组织的位置关系,有助于准确判断手术疗效,正确、及时处理术后并发症.(中华眼科杂志,2004,40:186-189)

角膜深板层内皮移植术的临床初步研究

目的探讨用微型角膜刀行角膜深板层内皮移植术的适应证、手术原则、临床疗效及并发症的预防及处理.方法用微型角膜刀对6例患者6只患有大疱性角膜病变眼行深板层角膜内皮移植术.其中1例为前段玻璃体切除加后房型人工晶状体缝线固定术联合角膜深板层内皮移植术,1例为临时人工角膜下玻璃体切除加球内异物取出术联合角膜深板层内皮移植术.术后随访6～9个月.结果 5例患者视力明显提高,患者术后平均角膜内皮细胞密度为(2481±212)个 /mm2 ,角膜中央厚度平均为(549±61) μm,散光为(2.04±1.19) D,未发生严重并发症.结论用微型角膜刀行角膜深板层内皮移植术是治疗大疱性角膜病变的可选术式.与传统的穿透性角膜移植相比,该术式有望成为角膜内皮移植的技术平台,但远期疗效尚需继续随访.(中华眼科杂志,2004,40:147 -150)

板层角膜移植时间对角膜碱烧伤后血清特异性抗体的影响

目的通过动物角膜碱烧伤模型,观察烧伤后不同时期和烧伤后不同时间行板层角膜移植手术的新西兰白兔血清特异性抗体水平与组织病理的变化. 方法新西兰白兔20只,制作单侧眼角膜中央部中度碱烧伤模型并完全随机分为5组:烧伤组、早期移植组两组(即3 d移植组、7 d移植组)、中晚期移植组两组(即2 周移植组、5 周移植组).制备正常及碱烧伤角膜蛋白提取液,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测每组兔不同时期血清抗角膜变性蛋白抗体水平,并取不同时期的角膜做光镜、电镜观察. 结果角膜碱烧伤后机体产生特异性抗体,2周时升高明显,5～6周达高峰,之后下降,8 周时再次烧伤对侧眼角膜,抗体生成明显.早期移植组抗体升高不显著,而中晚期移植组抗体变化趋势与烧伤组基本相似.光、电镜结果显示:移植组与烧伤组比较,上皮愈合好,基质纤维排列整齐,炎细胞浸润轻,新生血管少;早期移植组比晚期移植组恢复更好.结论早期板层角膜移植治疗角膜碱烧伤可阻断机体针对碱烧伤后角膜变性蛋白的体液免疫反应过程.(中华眼科杂志,2004,40:160-164)

视神经切开术治疗视网膜中央静脉阻塞的初步报告

目的探讨视神经切开术治疗缺血性视网膜中央静脉阻塞的效果及其并发症.方法选择缺血性视网膜中央静脉阻塞患者8例,病程3～8个月,平均3.6个月.患者均经系统药物治疗3个月效果不佳,其中3例有高血压病史,3例患有严重的黄斑囊样水肿.术前患者均行眼底照相、荧光素眼底血管造影(FFA)及相干光断层扫描(OCT)检查.手术常规做睫状体平坦部巩膜三切口, 应用显微玻璃体视网膜切开刀,以鼻侧视乳头边缘为中心,垂直刺入达宽处为止,刺入深度约2.2 mm,宽度约1.2 mm.术后1～3个月分别行眼底照像、FFA及OCT检查.结果术后随访3～5个月.术后1个月内,所有患者视网膜或黄斑水肿均减轻或消退.术后3个月,患者行眼底照像、FFA及OCT检查结果均显示视网膜出血吸收,视乳头黄斑水肿消退;6例视力较术前提高 (62.5%).术后3～4周,2例发生玻璃体出血,其中1例继发新生血管性青光眼;2例术中穿刺时出血.结论视神经切开术有助于视网膜内出血、渗出及黄斑水肿的消退,部分患者视力可得到改善.(中华眼科杂志,2004,40:170-174)

人视网膜色素上皮细胞吞噬过程中环磷酸腺苷及蛋白激酶C的改变

目的研究人视网膜色素上皮(HRPE)细胞特异性及非特异性吞噬过程中环磷酸腺苷(cAMP)浓度及蛋白激酶C(PKC)活性的变化,探讨cAMP及PKC在HRPE的吞噬功能中所起的作用.方法用1×107 个/ml视杆细胞外节膜盘(ROS)及乳胶微球(LB)于37℃孵育培养的正常HRPE细胞,在孵育的不同时间(5 min至48 h)终止吞噬反应.用双重荧光标记法检测HRPE细胞吞噬动力学.用扫描及透射电镜证明HRPE细胞对LB及ROS的结合与吞噬作用.分别用125I-cAMP放射免疫试剂盒及液闪记数γ-32P放射活性法检测相应时间点的HRPE细胞特异性及非特异性吞噬时的cAMP浓度及PKC活性. 结果 HRPE细胞特异性吞噬过程中,孵育15 min时ROS结合于HRPE细胞表面,此时cAMP浓度开始降低;胞质及胞膜PKC活性的降低早于cAMP,发生在孵育5 min时,但二者均在孵育24 h达到低值.在非特异性吞噬过程中,HRPE细胞结合LB发生在孵育90 min,在孵育的12 h内cAMP浓度无明显变化(P>0.05),12～48 h cAMP浓度降低;胞质及胞膜PKC活性在孵育的5 min至48 h时间内,与对照组比较,差异均无显著意义(P>0.05).结论 cAMP及PKC对HRPE细胞特异性吞噬吞入过程的维持十分重要,但不参与非特异性吞噬的直接调节.并且,HRPE细胞特异性吞噬过程伴随着cAMP浓度及PKC活性的降低. (中华眼科杂志,2004,40:178-182)

血小板活化因子致角膜上皮伤口迟愈合的实验研究

目的利用兔去上皮角膜模型,研究血小板活化因子(PAF)对角膜伤口愈合的作用及其分子生物学机制.方法离体角膜上做正中直径7 mm 圆形去上皮角膜伤口.去上皮角膜分为3组,即对照、PAF及BN (PAF拮抗剂) 组,培养48 h后,行角膜上皮染色观察伤口愈合状况.分别对兔角膜上皮 (RCE) 和角膜基质 (RCK) 细胞进行体外传代培养,RCE和RCK细胞经PAF 和(或) BN处理,培养24 h,提纯RNA.应用RT-PCR及核酸杂交技术分别检测肝细胞生长因子 (HGF)、角质形成生长因子(KGF)及表皮生长因子(EGF)基因在RCK和RCE细胞及HGF受体 (HGF-R) 基因在RCE细胞中的表达强度.分别应用CyQUANT荧光结合和Boyden 小房技术检测PAF对RCE细胞黏附、增殖和迁徙的影响. 结果 PAF (100 nmol/L) 明显抑制角膜上皮伤口愈合,48 h对照、PAF和BN组角膜上皮未愈合面积经电脑图像分析分别为:(6.0±1.5) U、(58.0±7.0) U和(5.0±1.0) U.PAF明显增强RCE细胞黏附作用,对照、PAF和BN组每96孔板贴附细胞数荧光光度平均值分别为:3696±372、7908±671 和3487±324.RT-PCR结果显示:PAF使 HGF mRNA在RCK的表达强度降低4.1倍,同时明显减弱HGF-R在RCE细胞中的表达,核酸杂交实验证实PCR结果.结论 PAF明显增强RCE细胞的黏附作用,明显抑制HGF mRNA在角膜基质细胞和HGF-R基因在角膜上皮细胞中的表达强度,进而抑制去上皮角膜伤口愈合.PAF受体拮抗剂BN明显抑制PAF的上述作用,阻止PAF致角膜伤口的迟愈合.(中华眼科杂志,2004,40:151-155)

联合应用正负柱镜检影法检测混合散光

目的研究联合正、负柱镜检影方法在发现混合散光中临床应用.方法 189例(340只眼)混合散光患者随机分为实验组和对照组, 根据散光度数的大小分为3个区间(<3.00 D、3.00～6.00 D,>6.00 D).其中散光度数<3.00 D的156只眼(试验组76只眼,对照组80只眼);3.00D～6.00 D者132只眼(试验组68只眼,对照组64只眼);>6.00 D者53只眼(试验组29只眼,对照组24只眼).患者均于睫状肌麻痹后,通过正、负柱镜片组合进行检影,并用常规的球镜检影法或柱镜检影法作为对照.根据中和影的形态均匀程度、轴位判断的准确性和难易程度、检影时间和镜片组合的数目作综合评价,将检影结果分为3级,Ⅰ级:中和影均匀,轴位容易判断,检影时间<5 min,镜片组合的数目1或2片;Ⅱ级:中和影欠均匀,轴位判断不困难,检影时间5～10 min,镜片组合的数目2或3片;Ⅲ级:中和影欠均匀,易受到干扰,轴位判断困难,检影时间>10 min,镜片组合的数目>3片. 结果散光度数<3.00 D时,试验组与对照组的检测结果差异无显著意义(χ2=0.094, P=0.759).散光度数为在3.00～6.00 D时,试验组与对照组检测结果的差异有显著意义(χ2=5.546, P=0.019).散光度数>6.00 D时,试验组与对照组结果之间的差异有非常显著意义(χ2=8.509,P=0.004). 结论应用正、负柱镜检影对于度数较高的混合散光是一种有效、便捷和准确的检影方法,是对常规检影法的一个较好补充和发展.(中华眼科杂志,2004,40:175-177)

形觉剥夺时限对豚鼠近视形成的影响

目的研究不同形觉剥夺时限对豚鼠实验性近视度数的影响.方法将20只4周龄豚鼠分为4组,Ⅰ组为对照,不做任何处理.Ⅱ～Ⅳ组单眼遮盖4周,其中Ⅱ组持续遮盖,Ⅲ～Ⅳ组每天定时去除遮盖,时间分别为1、4 h,实验前、后分别用检影镜和A超测眼屈光度数及眼轴长度.结果 4周后,Ⅱ、Ⅲ组遮盖眼均发生轴性近视,近视度数的差异有显著意义(P<0.05).与对照组相比,Ⅱ组遮盖眼形成-5.49 D近视,并伴有眼轴的明显增长, 非遮盖眼呈+0.76 D的相对远视.每天定时去除遮盖者近视度数明显降低,去遮盖1 h可使近视度数降低50%, 4 h者不形成近视.去遮盖组眼轴长度较持续遮盖组短.结论短时间去遮盖可逆转长期遮盖形成的形觉剥夺性近视.(中华眼科杂志,2004,40:183-185)

曲尼司特对青光眼患者体外培养的眼部Tenon囊成纤维细胞增殖和移行的影响

目的探讨曲尼司特(tranilast)对青光眼患者体外培养的眼部Tenon囊成纤维细胞增殖及移行的影响.方法取青光眼患者滤过术中剪下的Tenon囊组织,在体外进行成纤维细胞原代及传代培养.分别采用MTT法、细胞计数法、免疫组化加图像分析法及划线法,研究不同浓度的曲尼司特对体外培养的成纤维细胞增殖及移行的影响及其与蛋白激酶C(PKC)表达的关系.结果当浓度在12.5～100.0 mg/L之间变化时,曲尼司特能明显抑制成纤维细胞的增殖,强度呈剂量依赖性;50.0 mg/L和100.0 mg/L的曲尼司特能明显抑制成纤维细胞的移行,并下调细胞内PKC的表达.结论曲尼司特能抑制成纤维细胞的增殖及移行,这种作用可能与下调细胞内PKC的表达有关.(中华眼科杂志,2004,40:165-169)

毛果芸香碱滴眼液致药物性虹膜囊肿一例

患者男,70岁.因双眼胀痛、呕咖啡色液2 d,于2001年10月15日收入我院.既往无类似发病史,无溃疡病史.眼部检查:右眼视力指数/1尺,左眼指数/眼前.双眼结膜混合性充血、水肿,角膜水肿,前房浅,瞳孔大,虹膜纹理不清,瞳孔缘虹膜部分后粘连.眼压:右眼81.78 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),左眼94.32 mm Hg.全身体格检查:BP 130/75 mm Hg,HR 82次/min,全腹软,无压痛和反跳痛.实验室检查:尿常规(-),粪常规和大便隐血均(-).

晶状体钙化合并玻璃体骨化一例

患者女,67岁.因左眼外伤后失明合并疼痛30余年、疼痛加重2个月,于2001年6月23日来我院就诊.30余年前患者左眼外伤后眼痛伴视力下降至失明,无详细治疗记录.此后眼痛症状反复发作,抗炎治疗可缓解.全身体检:体温为37.5℃,心率为80次/min,呼吸频率为20次/min,血压为140/86 mm Hg(1 mm Hg＝0.133 kPa);神智清楚,痛苦面容;心、肺、腹检查未见异常.

Marchesani综合征同胞兄弟患者二例

例1 患者男(先证者Ⅲ4),13岁.因视物不清10年,发现上腹包块4 d,于2001年5月15日入院.患者自幼视物不清、身材矮小,上小学二年级时患者近视,裸眼视力:左眼0.5、右眼0.4,现已高度近视.患者智力发育正常.4 d前洗澡时其父发现患者右上腹部明显隆起.

内因性真菌性眼内炎一例

患者男,13岁,2001年7月因左眼红、痛、视力下降,于外院诊断为虹膜睫状体炎,给予糖皮质激素、抗生素治疗,10 d后发现前房积脓,B超示:玻璃体混浊.2001年7月下旬转入我院治疗.

提高我国常见眼表疾病的诊断与治疗水平

眼表疾病是概指损伤眼表结构及功能的疾病[1],是常见的眼科疾病.临床上常见眼表疾病主要包括:眼表(角膜和结膜)的感染性炎症(如细菌、病毒、衣原体感染[2])、干眼[3-5]、过敏性角结膜炎[6,7]及眼表面外伤等,均是眼科门诊中常见疾病.各种眼表面、前段及后段手术引起的眼表面损伤也成为常见的眼表疾病.近年来,由于重视眼表疾病的临床和基础研究,特别是新技术和新方法的临床应用,眼科医师普遍提高了对眼表疾病的诊断和治疗水平.然而,目前我国开展眼表疾病的整体研究水平参差不齐、尚待提高,需要普及眼表疾病的概念和知识,提高眼科医师的诊断和治疗水平.

彩色多普勒超声检查评价斜视术后眼血流动力学改变

彩色多普勒超声检查可通过分析动脉血流脉冲多普勒频谱,客观定量反映血管血流动力学信息,且为一种无损伤检测方法.我院自2001年开始采用该方法检查斜视术后患者眼血流动力学的改变,并与同年龄正常人进行比较,以期为临床工作提供参考.

血浆儿茶酚胺与中心性浆液性脉络膜视网膜病变的临床研究

中心性浆液性脉络膜视网膜病变(central serous chorioretinopathy, CSC)是一种好发于男性中青年的眼底黄斑部病变.目前对CSC发病机制的认识尚未统一.笔者于2002年5月至2003年2月,对本院门诊确诊的CSC患者进行血浆儿茶酚胺浓度检测,了解其血浆中儿茶酚胺浓度变化,及其与CSC患者视力改变的关系, 以探讨CSC的可能发病机制.

老年性黄斑变性患者白内障摘除术的疗效分析

老年性黄斑变性(senile macular degeneration,SMD)和老年性白内障均是严重影响老年人视力和生活质量的重要疾病.作为临床常见的老年性疾病,老年性白内障患者可合并发生SMD.对于眼底病变者,白内障摘除手术的效果和必要性目前临床尚无定论.部分文献报道白内障摘除手术可促使SMD发生和发展,患者术后视力可能无改善,甚至进一步下降[1-3];同时,大量研究结果表明,合并轻、中度SMD患者白内障摘除手术后视力可得到提高[1].为探讨合并重度SMD患者白内障摘除手术的疗效,我们观察了35例(38只眼)相关患者的手术治疗情况,现将结果报告如下.

眼球钝挫伤视乳头及视网膜血流的研究

眼球钝挫伤是眼科常见外伤性疾病,可引起眼内多种组织结构损伤,其中视网膜组织常首先受损,发病机制尚不十分清楚.以往研究多侧重眼底形态学改变和血流循环时间的变化,对血流量改变报道甚少[1, 2].笔者应用德国Heidelberg Engineer公司生产的共焦扫描激光多普勒视网膜血流分析仪(heidelberg retina flowmeter, HRF)检测技术,对31例眼球钝挫伤患者进行了视网膜血流灌注的量化观察分析,现将结果报告如下.

圆锥角膜的诊治进展

圆锥角膜(keratoconus)是以角膜变薄前突产生不规则散光为特征的原发性角膜变性疾病,常伴有不同程度的视力损伤(图1).其常独立存在,也可并发于许多其他疾病.本病无炎性反应,不伴细胞浸润和新生血管形成,多在青少年期发病,常双侧性,可先后发生,女性多见,具有一定家族遗传倾向,各种族人群均有发病.国外学者报道[1]本病发病率约为0.5‰,而我国尚缺乏流行病学资料.

中华医学会第四届全国中青年眼科学者学术会议纪要