VITALAB全自动生化分析仪样品、试剂臂故障排除

VITALAB全自动生化分析仪工作一定时间后，样品、试剂臂的光感受器会因上下运动、摩擦、碰撞而松动或移位，致使样品、试剂臂运动障碍或不到位，导致机器报警，工作中断。我科几年来对此故障的检查与排除，摸索了一些经验，现报告如下，供同道们参考。

血氧饱和度测量原理与检修

病人监护中常用的血氧饱和度参数是通过测量人体指尖、耳垂等毛细血管脉动期间对透过光线吸收率的变化计算而得的.测量用的血氧饱和度探头有其独特的结构.它是一个光感受器,内置一个双波长发光二极管和一个光电二极管.发光二极管交替发射波长 660nm的红光和 940nm的近红光.还原血红蛋白( Hb)的吸光度随 SaO2不同而改变,在 660nm附近表现为显著,在 940nm附近则产生与 660nm方向相反的变化.在波长 940nm的红外区域,氧合血红蛋白( HbO2)的吸收系数比 Hb大.

中医辨证治疗视神经萎缩95例

视神经萎缩是严重的视网膜和视神经等疾病的终结局.因视网膜的光感受器、神经节细胞及其轴突广泛损害,以及神经纤维丧失、神经胶质增生,而引起严重的视功能障碍,治疗较为棘手.我科从1998年1月～2003年6月共收治本病95例135只眼.经中医辨证治疗,取得一定的疗效,现总结报告如下.

透壁消融指数在阵发性心房颤动消融术中的应用价值分析

目的 探讨透壁消融指数(LSI)在阵发性心房颤动(PAF)消融术中的应用价值.方法 选择住院治疗的PAF患者96例,随机分为对照组50例和观察组46例(采用光感应压力导管进行消融,对患者LSI设定).比较分析2组临床资料、术后6个月内PAF复发率、并发症发生率及PAF患者消融术成功的因素.结果 观察组与对照组手术时间和并发症发生率无显著差异(P＞0.05);观察组X线透视时间[(23.1±6.8)min vs (36.4±7.2) min]和PAF复发率(10.9％ vs 30.0％)明显低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);肺静脉单圈隔离率明显高于对照组(89.1％ vs 50.0％,P＜0.01);LSI参数设定是PAF患者消融手术成功的独立影响因素(OR=2.792,95％CI:0.835～134.653,P=0.004).结论 LSI参数设定能够提高肺静脉电位隔离率、降低X线透视时间、PAF复发率,是PAF患者消融手术成功的独立影响因素.

脑源性神经营养因子对视网膜保护作用的研究进展

脑源性神经生长因子(BDNF)是神经细胞存活和分化所必需的营养物质,能通过PI3-K和MEK/ERK等途径保护视网膜神经节细胞和光感受器细胞,促进其生存,并与其它细胞因子有叠加作用,本文对此作一综述.

睫状神经营养因子对视网膜色素变性中感光细胞的作用

遗传性视网膜色素变性类疾病是人类的主要致盲眼病之一,目前尚无有效阻止病变进展和恢复视网膜功能的治疗方法.此类疾病的后结果是感光细胞不可逆的凋亡.阻断感光细胞走向凋亡的进程是近年来研究的热点.在大量的体内外实验中发现,很多神经生长因子对遗传性视网膜色素变性类疾病有一定的治疗作用,其中睫状神经营养因子保护感光细胞、延缓感光细胞凋亡的作用颇受关注.本文就近年来睫状神经营养因子对视网膜色素变性疾病中感光细胞的作用研究作一综述.

晶状体上皮源性生长因子对眼细胞的抗损伤作用及其机制

晶状体上皮源性生长因子(LEDGF)是一种新型细胞存活因子,是多种应激相关基因的转录和前mRNA剪接的协同激活子,在细胞受到应激损伤时表达升高,进而促进多种应激相关蛋白的表达,抵抗损伤,提高细胞存活能力.本文就LEDGF的发现、结构、功能域及其对多种眼细胞的抗损伤作用及作用机制做一综述.

视网膜脱离视细胞凋亡及其抗凋亡治疗研究进展

视网膜脱离是主要的致盲眼病之一,其发生机制纷繁复杂.目前研究认为光感受器等视细胞的凋亡在视网膜脱离预后中起重要作用.视网膜脱离视细胞凋亡的机制逐步被阐明,相关的光感受器细胞抗凋亡治疗研究也逐渐成为治疗视网膜脱离的热点.光感受器细胞的抗凋亡治疗结合现代视网膜脱离手术将是未来治疗视网膜脱离的理想模式.

睫状神经营养因子对视网膜保护作用的研究进展

睫状神经营养因子(CNTF)可诱导视网膜神经细胞分化，减少神经细胞凋亡和促进细胞再生。CNTF能促进轴突切断和视网膜缺血后RGCs的存活和轴突生长，减少视网膜色素变性动物模型的光感受器存活，为治疗视网膜缺血性损伤、神经退行性病变等视网膜疾病提供了可能。本文就CNTF及其受体的分子结构、组织分布、基因结构及其表达调控和CNTF对视网膜作用的研究进展作一综述。

光感受器移植治疗视网膜色素变性的近期随访

新生期小牛感光细胞联系和缝隙连接特征超微形态学分析

目的:了解新生期小牛视网膜感光细胞联系和细胞连接特征.方法:以新生期小牛视网膜感光细胞为研究对象,扫描电镜和透射电镜为研究手段,实验共用眼球6个,取视网膜24片.结果:新生期小牛视网膜感光细胞胞体平均直径3～5μm.近外核层外侧端,感光细胞间有束状纤维联系;近外核层内侧端,多个感光细胞通过网状纤维形成多种联系,纤维平均直径:0.3～0.6μm.部分感光细胞通过束状纤维呈"会聚式"联系,束状纤维主干平均直径:0.65～0.75μm,分支平均直径:0.25～0.5μm.感光细胞与中间传导细胞建立缝隙连接,部分具备典型结构,缝隙间隙宽度:3～5nm,但大部分感光细胞与中间传导细胞的细胞连接结构尚不成熟.结论:新生期视网膜感光细胞已具有分化和参与功能构建能力,适宜作为视网膜移植供体选材.

血脂异常小鼠光感受器的组织病理学改变及其机制探讨

目的 观察血脂异常C57BL小鼠光感受器的组织病理学改变并探讨其发生机制.方法 用高脂饲料喂养C57BL小鼠,建立血脂异常模型,获取视网膜.观察其光镜和电镜组织病理学变化并检测血中丙二醛(MDA)含量.结果 血脂异常小鼠视网膜外核层变薄,细胞核肿胀,排列紊乱,光感受器细胞超微结构改变且大量丢失,血清MDA含量增高.结论 血脂异常可以导致光感受器细胞超微结构异常和大量丢失,其发生可能与脂质过氧化损伤有关.

低氧预适应对小鼠视网膜光感受器细胞光损伤的防护作用

目的研究低氧预适应对光损伤后小鼠视网膜光感受器细胞的保护作用,并探讨其可能的基因调控机制. 方法将54只BALB/c小鼠随机分成单纯光照组、低氧预适应组和正常对照组,并将前两组动物在自制光照箱中连续光照3 h,制成光损伤动物模型.应用光镜、核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口标记法观察各组小鼠视网膜组织结构的改变;应用免疫组织化学方法检测各组小鼠视网膜c-fos和caspase-1的表达. 结果单纯光照组小鼠视网膜组织学改变出现的早且明显,光照后视网膜出现不同程度的病理学改变,且损伤主要发生在光感受器细胞层.随着光照后时间的延长,光感受器细胞凋亡数增加,视网膜光损伤逐渐加重,c-fos和caspase-1在该层出现了不同程度的阳性表达;低氧预适应组同单纯光照组相比,各时间段损伤均较轻,视网膜光感受器细胞层明显得到了保护,同单纯光照组比较,caspase-1的阳性表达明显减少,而c-fos无明显变化;正常对照组小鼠视网膜组织结构层次清楚,外核层排列规则,无c-fos 和caspase-1的阳性表达. 结论低氧预适应通过抑制凋亡相关基因的表达而对光感受器细胞有神经保护作用,且caspase-1参与了低氧预适应的保护机制.(中华眼科杂志,2005,41:631-635)

内质网应激参与实验性视网膜脱离后细胞凋亡的研究

目的 研究内质网应激介导凋亡途径的标志物生长停滞及DNA损伤基因153(GADD153)在大鼠实验性视网膜脱离后不同时期的基因与蛋白表达水平并探讨内质网应激与视网膜脱离后细胞凋亡发生的关系.方法 对照实验研究.Wistar大鼠88只(88只眼),采用计算机随机数字表法,分为正常对照组和实验组,实验组包括视网膜脱离后1/2、1、2、4、8、16及32 d组;每组各11只鼠(11只眼),通过在视网膜下注射透明质酸钠的方法,建立视网膜脱离模型.在视网膜脱离后1/2、1、2,4、8、16及32 d分别摘除眼球.应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL),检测视网膜细胞凋亡情况;采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测GADD153 mRNA的表达水平;应用免疫印迹法,检测视网膜组织中GADD153蛋白表达水平;采用免疫荧光和激光共焦显微镜技术,观察GADD153蛋白在视网膜各层细胞的分布.应用SPSS 10.0统计学软件进行数据分析.对各组鼠视网膜凋亡细胞百分比和GADD153 mRNA表达水平的比较,采用Kruskal Wallis 检验;GADD153蛋白表达水平的比较,采用One-Way ANOVA检验,以P＜0.05作为差异有统计学意义.结果 大鼠视网膜脱离后凋亡细胞主要集中在光感受器细胞层,凋亡高峰出现在视网膜脱离后2～4 d,8 d后显著减少,组间视网膜细胞凋亡百分比差异有统计学意义(χ2=22.423,P＜0.05);视网膜脱离后1/2、1、2及4 d,视网膜GADD153 mRNA表达水平显著升高(χ2=27.223,P＜0.05);GADD153蛋白表达水平亦显著升高(F=16.052,P＜0.05),主要表达部位在光感受器细胞层.结论 视网膜脱离后内质网应激标志物GADD153被激活,并在视网膜组织表达水平增高,其表达状态与视网膜细胞的凋亡时间和发生位置相一致;内质网应激介导的凋亡途径参与了视网膜脱离后光感受器细胞凋亡的发生.

挫伤性视网膜病变中光感受器细胞凋亡与氧化损伤的实验研究

目的探讨挫伤性视网膜病变中视网膜损伤的凋亡机制及诱因. 方法以3 J能量自由落体的方式制作兔眼挫伤性视网膜病变模型,通过光、电镜及TUNEL染色法观察视网膜病变及细胞凋亡情况,测定视网膜匀浆中MDA含量与SOD活性的变化,并行统计学分析. 结果以3 J能量挫伤后的视网膜病变中存在着光感受器细胞凋亡现象.随挫伤时间推移,视网膜MDA的含量逐渐升高(P<0.01),SOD活性在挫伤后早期反射性升高(P<0.01),3 d时明显下降(P<0.01),且与凋亡细胞出现的时间一致.结论细胞凋亡是挫伤性视网膜病变的一个重要机制.活性氧自由基是挫伤性视网膜病变中光感受器细胞凋亡的重要诱因.

重组腺病毒介导的gfp-bcl-XL对视网膜变性鼠光感受器细胞保护作用的研究

目的　观察重组腺病毒rAd-gfp-bcl-XL 治疗视网膜变性（retinal degeneration, RD）鼠的疗效。方法　40只RD鼠随机分成A、B组，每组20只，右眼为治疗眼，左眼为对照眼。A、B组治疗眼分别于RD鼠生后10 d及22 d视网膜下腔注射含绿色荧光蛋白基因gfp和抗凋亡基因bcl-XL的重组腺病毒颗粒；术后15、30 d摘除治疗眼和对照眼行冰冻切片、透射电镜下观察、石蜡切片、HE染色并提取视网膜总RNA；行逆转录聚合酶链反应分析bcl-XL基因的mRNA表达水平；免疫组化分析治疗眼和对照眼的Bcl-XL蛋白水平。结果　治疗眼视网膜有较广泛的绿色荧光蛋白表达，说明重组腺病毒成功的将bcl-XL转染至视网膜光感受器细胞，且有bcl-XL表达；术后30 d，A组鼠治疗眼和对照眼bcl-XL的mRNA表达水平及Bcl-XL蛋白含量有明显差异；透射电镜下可见治疗眼的内节段较对照眼完好；HE染色示治疗眼视网膜光感受器细胞层较对照眼厚。而B组鼠治疗眼和对照眼的视网膜光感受器细胞层的厚度无明显差异。结论　注射至早期RD鼠视网膜下腔中的rAd-gfp-bcl-XL能有效转染光感受器细胞并发挥抗凋亡作用，但对晚期RD鼠的疗效不明显。

大鼠视网膜光损伤前、后视觉介导的行为变化

目的通过观察大鼠视细胞光损伤模型的视觉-运动行为,评价光感受器细胞的损伤、死亡和视功能的对应关系,以期建立评估动物视功能的方法.方法 21只SD大鼠分为3组,暗适应24 h后选用(950±50)流明绿色光分别照射3、12、24 h,光照后暗适应24 h,暗适应完成48 h后摘除眼球,冷冻切片分别行HE、rhodopsin免疫荧光染色;以大鼠视觉意识障碍反应、前置刺激反应作为视功能的判断指标,分别于光损伤前、后2 d测定大鼠的视觉-运动行为,对SD大鼠光损伤前、后的平均运动速度作统计学分析.对照组为7只双眼球摘除术后的大鼠.结果视觉意识障碍反应、前置刺激反应结果表明,随着光照时间的延长,动物的视觉意识障碍反应逐渐丧失,前置刺激反应逐渐增强.统计学结果显示,SD大鼠的视觉-运动行为变化是与视功能相关的.随着损伤程度的加重,SD大鼠视觉-运动的平均运动速度出现渐进性下降的变化.结论随着视细胞损伤程度的加重,SD大鼠的视功能呈现渐进性的下降,其视觉-运动的平均运动速度亦出现相应的变化.视觉-运动行为测试可以用于对SD大鼠的视功能进行定量的评估.

表达睫状神经营养因子的人胚肺成纤维细胞视网膜下间隙移植延缓RCS大鼠光感受器变性

目的以遗传性视网膜变性RCS大鼠为模型,探讨视网膜下间隙移植表达睫状神经营养因子(CNTF)的人胚肺(HFL)成纤维细胞治疗视网膜变性的可行性.方法通过脂质体将编码CNTF的表达质粒转入HFL成纤维细胞、MTX及ELISA筛选高水平表达CNTF的细胞克隆.手术显微镜直视下经角膜缘后1 mm 注射5 μl 含1×105个高水平表达CNTF的HFL成纤维细胞至4～5周龄RCS大鼠右眼视网膜下间隙,左眼不手术或注射PBS作为对照.分别于移植术后2、4、6、8、10、12及15周随机取1只鼠摘除眼球作光镜观察,随机取2只鼠摘除眼球作电镜观察.结果稳定转染CNTF的HFL成纤维细胞能高水平表达CNTF (91 046.15 pg/ml),7只经光镜观察的移植眼中的4只,其视网膜外颗粒层明显较对照眼厚,保存的光感受器数量明显较对照眼多(P≤0.002).14只经电镜观察的移植眼中的10只,视网膜外颗粒层光感受器凋亡明显较对照眼少.在光感受器与视网膜色素上皮间堆积的盘膜碎片亦较少.宿主视网膜色素上皮细胞的形态保存较好,并可见吞噬小体.结论经过CNTF基因修饰的HFL成纤维细胞视网膜下间隙移植能够延缓RCS大鼠视网膜光感受器变性.

视锥-视杆同源盒基因对斑马鱼光感受器细胞发育的影响

目的 观察斑马鱼受精卵CRX基因表达下调后,视网膜光感受器细胞外节盘的发育和视蛋白的表达.方法 实验研究.斑马鱼受精卵内显微注射CRX-寡核苷酸,使CRX基因的表达下降.通过眼球的组织学切片、电镜标本和视蛋白RNA探针的原位杂交观察光感受器细胞以及外节盘的发育和视蛋白的表达.结果 视网膜组织学观察,CRX组与对照组、空白组比较,视网膜和光感受器细胞的发育都没有明显差别.电镜观察,对照组和空白组光感受器细胞都有外节盘形成,但是CRX组未发现明显的外节盘结构.对照组和空白组斑马鱼均可在鼻侧视网膜区域观察到视紫红质(rhodopsin,Rho),视锥细胞蓝色视蛋白(SWS1)和紫外线视蛋白(SWS2)3种视蛋白的表达,CRX组3种视蛋白的表达明显减少.结论 CRX基因影响斑马鱼光感受器细胞外节盘的发育和视蛋白的表达.

锂对视网膜色素变性小鼠光感受器细胞凋亡的保护作用

目的 研究锂在视网膜色素变性小鼠模型上对光感受器细胞凋亡的神经保护作用.方法 实验研究.FVB/NJ视网膜色素变性小鼠出生后立刻用含锂的食物喂养,7和14 d时摘除眼球做视网膜冰冻切片,同时取血测血清锂浓度.HE、TUNEL和视杆细胞免疫荧光染色进行视网膜组织形态、光感受器细胞凋亡分析.结果 光镜下可见,对照组外核层可见TUNEL阳性细胞,出生后14 d外核层厚度和细胞层数(3或4层)明显低于7 d时的厚度(9或10层),而锂喂养组出生后14 d外核层的厚度和细胞层数明显高于对照组,与出生7 d时的外核层厚度及细胞层数无明显差异.结论 锂能够保护视网膜色素变性小鼠光感受器细胞免于凋亡.(中华眼科杂志,2008,44:248-252)