Ubiquitin B在宫颈癌细胞凋亡中的作用及机制的初步探讨

目的:研究Ubiquitin B的过度表达对宫颈癌细胞凋亡的影响,并初步探讨其机制.方法:脂质体转染Ubiquitin B至宫颈癌细胞系HeLa细胞后,real-time PCR检测细胞内Ubiquitin B mRNA的表达水平;流式细胞术和DNA Ladder法检测其凋亡;PI法检测细胞周期变化;Western blot法检测凋亡相关蛋白Smad 4和Mcl-1的表达.结果:转染Ubiquitin B后,HeLa细胞中Ubiquitin B mRNA的表达水平在转染24h后明显高于它在对照组细胞中的表达.与对照组相比,转染了Ubiquitin B的HeLa细胞凋亡显著增加.但Ubiquitin B的过表达对HeLa细胞的周期无明显影响.Western blot分析表明,凋亡相关蛋白Smad 4在转染Ubiquitin B 48h时表达增强,而Mcl-1表达明显减弱.结论:UbiquitinB可促进宫颈癌细胞系HeLa细胞凋亡,其机制可能是Ubiquitin B通过增强表达凋亡促进蛋白Smad 4和降解凋亡抑制蛋白Mcl-1而促进了HeLa细胞的凋亡.

血小板反应素-1在卵巢上皮癌组织的表达及与p53肿瘤抑制蛋白和肿瘤血管形成的关系

目的:检测血小板反应素-1(TSP-1)和p53肿瘤抑制蛋白在卵巢上皮癌的表达,并探讨其表达与肿瘤血管形成及患者预后的关系.方法:用免疫组化法检测57例原发性卵巢上皮癌组织和22例正常卵巢组织中TSP-1和p53蛋白的表达,并用CD34抗体免疫染色后对微血管密度(MVD)计数.结合随诊资料,回顾分析上述指标与卵巢上皮癌临床病理特征及3年存活率之间的关系.结果:卵巢上皮癌组织中TSP-1的阳性表达率低于正常卵巢组织(分别为47.4%和72.7%,P=0.042),且多为弱阳性表达;卵巢上皮癌组织中p53的阳性率为61.4%,正常卵巢组织未检测到p53蛋白.TSP-1表达和p53蛋白阳性与卵巢上皮癌的手术病理分期、大网膜转移和癌性腹水相关.卵巢上皮癌组织的MVD高于正常卵巢组织(分别30.3±8.5和20.1±8.1,P=0.014).TSP-1表达与MVD呈负相关(P＜0.001),p53蛋白阳性与MVD呈正相关(P＜0.001).TSP-1表达与患者的3年存活率呈正相关(P=0.001),p53蛋白阳性与3年存活率呈负相关(P=0.002).TSP-1阴性而p53蛋白阳性组患者的3年存活率明显低于TSP-1阳性而p53蛋白阴性组(分别为13.6%和78.6%,P＜0.001).结论:卵巢上皮癌组织TSP-1和p53蛋白的表达与肿瘤血管形成有关,对上述分子的检测有助于临床判断卵巢上皮癌的生物学行为.

生物补片用于阴道后壁修补术的近期效果初探

目的:初步探讨生物补片用于阴道后壁修补手术的安全性和有效性.方法:2006年1月至5月为阴道后壁膨出6例患者施行生物补片阴道后壁修补术.患者平均年龄55.2岁(40～70岁),体重指数平均27.34(22.60～31.25),POP-Q分度Ⅱ度4例,Ⅲ度2例.结果:6例患者总的手术时间平均65 min(30～90min),其中放置补片的平均时间为15min.术中平均出血量60ml(10～100ml).术后患者平均住院4.7天(3～8天),术中及术后未见并发症.随访6例患者平均15.4个月(14.3～17.9个月),随访时行盆腔检查再次POP-Q分度,结果表明,短期内解剖结构得到较为成功的恢复(Bp点较术前减小,P＜0.05);并用盆腔器官脱垂-尿失禁患者性生活调查问卷(PISQ)了解患者术后性生活质量,结果表明术后PISQ评分为86.33±8.82,较术前的75.17±13.97上升,虽差异无统计学意义(P＞0.05),但提示不影响患者术后性生活的质量.结论:生物补片可用在阴道后壁膨出修补手术中,术后短期随访,解剖结构均恢复达到客观治愈,且不影响患者术后的性生活质量,但有待更多样本、设置对照组及更长时间的观察和研究.

雌激素受体亚型α对子宫内膜癌细胞HEC-1B侵袭能力调控的研究

目的:特异性下调子宫内膜癌细胞中的ERα基因,探讨ERα亚型表达在子宫内膜癌侵袭中的作用.方法:将ERα的小干扰RNA(siRNA-small interfering RNA)转染子宫内膜癌细胞HEC-1B,通过RT-PCR和Westem blot证实ERα基因的有效阻断.通过transwell小室法检测下调ERα基因表达前后HEC-1B细胞的侵袭能力;应用RT-PCR检测转染前后细胞MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2 mRNA表达水平的变化;Western blot 及明胶酶谱分别检测细胞分泌TIMP-l、TIMP-2、MMP-2和MMP-9蛋白的水平.结果:(1)将ERα-siRNA转染HEC-1B细胞后,转染效率大于90%,ERα mRNA及蛋白的表达水平均明显下调(分别为72%,67%);(2)下调ERα基因表达后,肿瘤细胞的侵袭能力下降(P＜0.05);在mRNA水平和蛋白水平均可检测到ERα-siRNA组细胞的MMP-2、MMP-9表达下降(P＜0.05),TIMP-1、TIMP-2表达增加(P＜0.05).结论:使用ERα-siRNA能够有效地阻断ERα基因表达;子宫内膜癌细胞中,17β-雌二醇对MMPs/TIMPs具有调节作用,这种作用可通过ERα介导;ERα表达水平影响子宫内膜癌细胞的侵袭能力.

绝经前后妇女外周血内皮祖细胞数量和功能的对比研究

目的:观察绝经前后妇女血清雌二醇的变化对外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)的数量和功能的影响,评价雌二醇水平和外周血内皮祖细胞数量的相关性.方法:选择45～54岁年龄段绝经前后的妇女23例,其中绝经前组11例,绝经后组12例.用放射免疫法测定血清雌二醇浓度.用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板,培养7天后对贴壁细胞进行化学分析.激光共聚焦显微镜鉴定Dil-acLDL和FITc-UEA-I双染色阳性细胞为正在分化的EPCs.用倒置荧光显微镜进行细胞计数,观察内皮祖细胞的黏附、增殖能力.结果:绝经后组外周血EPCs数量较绝经前组明显减少,两组差异有统计学意义(P＜0.001);EPCs数量和雌二醇水平呈正相关(r=0.875,P＜0.001).绝经后妇女EPCs的黏附能力和增殖能力也明显受损.结论:妇女血雌二醇水平与外周血EPCs的数量和功能有一定的内在联系,这可能是其干预心血管病危险因素的机制.

应用功能分类基因芯片筛选卵巢癌淋巴结定向高转移细胞系中差异性表达基因

目的:在裸鼠体内建立以人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞系SKOV3具有淋巴结定向高转移亚克隆第二代SKOV3-pm2、第三代SKOV3-pm3细胞系,应用基因芯片技术比较这3种具有不同淋巴结定向转移能力的细胞亚系中基因表达谱的差异,寻找卵巢癌侵袭转移相关基因.方法:采用Trizol一步法抽提SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm3 3种细胞总RNA;取等量RNA逆转录合成cDNA用Ampolabeling-LPR(linear polymerase reaction,线性聚合酶反应)法标记的cDNA链做探针,混合后与功能分类基因芯片[Oligo Tumor Metastasis Microarray Catalog No.OHS-028(人)]杂交,计算机分析后比较3种细胞中差异性表达基因,并应用RT-PCR技术对其中3个表达差异明显的基因进行验证.结果:共筛选出表达差异性基因60个,其中表达上调基因47个(ratio＞3),有21个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pin3中共同表达上调;表达下调基因13个(ratio＜0.5),有1个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3细胞中共同表达下调.结论:基因表达芯片检测与肿瘤淋巴体外转移模型相结合,为肿瘤转移研究提供了新方法、新思路.

复发性卵巢交界性肿瘤保留生育功能手术的临床疗效观察

目的:了解复发性卵巢交界性肿瘤患者施行保留生育功能手术后的月经、生育功能以及肿瘤复发情况.方法:回顾分析2000至2006年浙江大学附属妇产科医院收治的复发性卵巢交界性肿瘤6例患者施行保留生育功能手术后的月经、生育以及复发情况.结果:(1)6例患者中5例月经正常;(2)3例患者共妊娠4次,其中3次为足月妊娠并分娩活婴,1次流产,自然妊娠率达50%;(3)平均随访时间为32个月(6～72个月),其中1例复发,但未发生与肿瘤相关的死亡.结论:对年轻有强烈生育要求的复发性卵巢交界性肿瘤患者仍可考虑施行保留生育功能手术,术后自然妊娠率高,但需严密随访.

基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子-2在女性盆底功能障碍中的表达及意义

目的:研究女性盆底功能障碍(PFD)患者尿道中段阴道壁组织中MMP-2与TIMP-2表达及其意义.方法:用免疫组化S-P法检测20例正常对照、22例盆腔器官脱垂(POP)、24例压力性尿失禁(SUI)及25例SUI&POP患者尿道中段阴道壁组织中MMP-2与TIMP-2的表达.结果:MMP-2在POP组、SUI组、SUI&POP组的表达均明显高于无POP组、无SUI组、正常对照组(P＜0.01).TIMP-2在POP组、SUI组、SUI&POP组表达均低于无POP组、无SUI组、正常对照组(P＜0.05).MMP-2与POP、SUI严重程度呈正相关(r分别为0.508,0.430,P＜0.01).TIMP-2与POP、SUI严重程度呈负相关(r分别为-0.411,-0.348,P＜0.01).结论:MMP-2和TIMP-2与PFD发生发展密切相关;MMP-2/TIMP-2比例失衡可能是PFD发生发展的重要机制.

卵巢甲状腺肿临床病理学分析

目的:探讨卵巢甲状腺肿的临床及病理组织学特征.方法:观察总结21例卵巢甲状腺肿的临床及病理学特征,并对手术切除标本进行免疫组织化学染色,同时复习相关文献.结果:卵巢甲状腺肿平均发病年龄为45.1岁(25～67岁),以盆腔肿物或卵巢囊性肿物为主要临床表现,组织学表现类似于颈部甲状腺组织本身的病变.其中单纯性甲状腺肿4例,混合性甲状腺肿16例,恶性甲状腺肿1例(部分恶变为甲状腺型乳头状癌).术后无复发转移.文献显示,乳头状癌极少出现转移,绝大多数复发转移是滤泡性癌或滤泡-乳头混合性癌.结论:卵巢甲状腺肿是少见的卵巢单胚层畸胎瘤,恶变率低,预后好.部分病例需注意与卵巢类癌、透明细胞癌、粒层细胞瘤等鉴别.

长方案降调节天数和LH水平对体外受精结局的影响

目的:探讨长方案使用促性腺激素(gonadotropin,Gn)前降调节天数和人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)注射日黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平对体外受精结局的影响.方法:回顾分析2006年1月至12月482例采用促性腺激素释放激素(gonadotropin hormone releasing hormone,GnRH-α)长方案控制性超排卵的资料.结果:按长方案使用Gn前降调节的具体天数分组,发现相互间获卵数、受精率、卵裂率、临床妊娠率等无统计学差异.HCG注射日LH水平高低与受精率、卵裂率、胚胎利用率无显著关系.注射HCG日LH≤1mIU/ml组和1.1～2mIU/ml组获卵数显著高于其它各组(P＜0.05).LH≤1mIU/ml组、1.1～2mIU/ml组和2.1～5mIU/ml组3组的优质胚胎率、胚胎种植率和累计妊娠率显著高于5.1～10mIU/ml组(P＜0.05).结论:使用促性腺激素前降调节天数对体外受精结局没有显著影响.HCG注射日的LH水平≤5mIU/ml能获得好的优质胚胎率、胚胎种植率和妊娠率.

罗格列酮对人卵巢癌SKOV3细胞中PPARγ/和β-catenin表达的影响

目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(pemxisome proliferators activated receptor gamma,PPARγ)的特异性配体罗格列酮对人卵巢癌SKOV3细胞中PPARγ和β-catenin 表达的影响,并探讨其机制.方法:设立对照组和实验组,采用荧光定量RT-PCR技术和免疫细胞化学方法检测干预前后细胞中PPARγ/、β-catenin mRNA和蛋白水平的变化.结果:免疫细胞化学和荧光定量RT-PCR结果显示:SKOV3细胞表达PPARγ/,罗格列酮作用于SKOV3细胞24h后PPARγ mRNA和蛋白表达水平上调,而γ-catenin mRNA和蛋白表达水平下调.结论:罗格列酮通过活化PPARγ,下调β-catenin mRNA和蛋白表达水平,从分子水平上揭示PPARγ可能是基因治疗卵巢癌的理想靶点.

Rab25 siRNA诱导人卵巢癌细胞凋亡及其机制的研究

目的:通过RNA干涉抑制Rab25在人卵巢上皮性癌的过表达,探讨Rab25siRNA对肿瘤细胞凋亡的生物学效应及作用机制.方法:构建针对Rab25的siRNA重组质粒,稳定转染A2780细胞,通过RT-PCR检测Rab25的表达,用Hoechst 33258染色和TUNEL法研究Rab25 siRNA诱导细胞的凋亡;用免疫组化法分析抑制Rab25的表达对凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响.结果:Rab25 siRNA可诱导肿瘤细胞凋亡;蛋白水平检测表明抑制Rab25表达使Bcl-2表达下降,Bax表达增强.结论:Rab25 siRNA可诱导细胞凋亡,Rab25影响卵巢癌细胞生存途径是通过调节Bcl-2/Bax表达含量发挥作用.

妊娠合并宫颈癌对母儿的影响及其诊治原则

恶性肿瘤是育龄期妇女常见的死亡原因之一,其合并妊娠的几率为0.02%～0.1%.随着妇女平均生育年龄推迟,妊娠合并恶性肿瘤的几率呈上升趋势.妊娠期常见的恶性肿瘤主要为宫颈癌、乳腺癌、恶性淋巴瘤和白血病,卵巢癌和子宫内膜癌也有报道.因妊娠期恶性肿瘤关系到母亲和胎儿的身心健康,早期诊断及合理治疗极为重要.现就宫颈癌合并妊娠的研究进展作一综述.

宫颈癌前哨淋巴结的研究进展

前哨淋巴结能准确预测盆腔淋巴结的转移状态,应用生物活性染料法、放射性核素示踪法或两者联合应用对前哨淋巴结进行定位,通过细胞印记法、病理连续切片、免疫组织化学染色及RT-PCR技术检测提高其阳性检出率,特别是宫旁淋巴结,有利于制定宫颈癌患者个体化治疗方案.目前快速准确检出前哨淋巴结有待于进一步发展.

子宫内膜癌腹腔镜手术并发症与预后的临床研究进展

检索有关子宫内膜癌腹腔镜手术并发症和预后临床研究的国内外文献.分析临床研究结果发现,内膜癌腹腔镜手术出现并发症主要与手术操作难度有关,但并发症总的发生率与同期开腹手术无差异;现有资料显示,内膜癌腹腔镜手术的复发率和随访结果与同期开腹手术亦均无明显差异.但内膜癌腹腔镜手术的安全性要经循证医学论证,需要大样本前瞻性随机临床研究的证据.

聚焦超声治疗外阴白色病变的疗效观察

由于外阴白色病变的确切病因目前尚不明确,常规的药物治疗虽有一定的疗效,可以暂时缓解症状,但不能根治,因此复发率高.对外阴白色病变施行有效的治疗,成了妇科医师非常关心的问题.2006年1月至2007年10月我院采用聚焦超声治疗外阴白色病变22例,取得了良好的疗效,现报道如下.

宫腔镜术在宫内节育器取出失败病例中的应用

取出宫内节育器时可出现环断裂,残留,嵌顿,甚至发生子宫穿孔等严重并发症.宫腔镜具有直观,安全等优点,对用常规取环术失败的患者具有很好的诊疗效果.

产褥期 Wernicke脑病5例报告

Wernick脑病又称急性端出血性脑灰质炎[1],起病急、病情重,若不及时诊治预后极差.此病发病率不高,而妊娠产后致Wernicke脑病更是少见,2000～2007年我院共收治产后Wernicke脑病5例,现报告如下.

宫腔镜下子宫内膜电切术治疗功血时内分泌激素的变化

1 资料与方法1.1 病例选择 从2003年8月～2006年2月入院的功血患者中随机选择30例,年龄40～49岁,无生育要求,无严重的内科疾患.术前均经B超和诊刮证实无恶变.患者流血时用刮宫法止血,3天后手术或服甲羟孕酮30～50mg,1次/d,1个月后手术.

卵巢浆液性及粘液性交界性上皮性肿瘤的临床病理分析

卵巢交界性上皮性肿瘤自1973年被WHO列入卵巢肿瘤分类以来,对其病理诊断标准尚有不同见解,导致临床处理困难,特别是近年有关交界性肿瘤病理学上提出了新的亚型以及微浸润和浸润性种植等概念,更促使了人们对此类肿瘤组织学特征及生物学行为本质的探讨.本研究回顾分析了1992至2005年诊治的卵巢交界性上皮肿瘤,旨在探讨其病理组织学特征及诊断标准、组织学分级及价值,以便进一步加深对该肿瘤生物学行为的认识,以减少过度诊断及过度治疗.

液基超薄细胞技术及TBS系统检测宫颈病变5263例临床分析

在癌症中,宫颈癌是目前唯一病因明确和可以做到早期发现、早期治疗和预防的肿瘤疾病,因为绝大多数可能导致癌症的宫颈细胞病变都可以早期发现和治疗.新柏氏TCT检查采用液基薄层技术检测宫颈细胞并对其进行TBS细胞学检查,是目前国际上领先的一种宫颈癌细胞学检查技术.现对来我院妇产科门诊就诊的5 263例患者检查的结果作一分析.

腹腔镜下腹膜代阴道成形术6例报告

先天性无阴道的发病率约为1/4000-1/5000,主要特征是阴道缺如、子宫缺如或始基子宫,而双侧卵巢正常,又称为MRKH综合征(Mayer-Rokitensky-Kuster-Hauser syndrome),治疗以手术为主,阴道成形术术式繁多,主要有羊膜代阴道成形术、乙状结肠代阴道成形术、皮瓣代阴道成形术、Vecchitti's阴道成形术、腹膜代阴道成形术等,其中腹膜代阴道成形术比其他术式覆盖物成功率高,安全易掌握[1].

DDI评分系统预测腹腔镜子宫肌瘤剔除术的结局

生育年龄妇女子宫肌瘤临床发病率为20%～40%[1],在手术病理标本中的检出则高达77%[2].腹腔镜子宫肌瘤剔除术(laproscopic myomectomy,LM)患者创伤小、康复快、腹部无明显疤痕,但腹腔镜下剔除肌瘤缝合瘤腔、止血等技术操作难度较大,若辅以下腹部4～6cm长的小切口,可使手术难度明显下降,此为腹腔镜辅助腹部小切口子宫肌瘤剔除术(Laproscopic assisted myomectomy,LAM).

葡萄胎的研究进展

葡萄胎是一种异常的人类妊娠,以绒毛间质水肿同时缺乏胚胎发育或者异常的胚胎发育为特征.根据肉眼及显微镜下的特点、核型分析及临床表现,可将其分为完全性葡萄胎(complete hydatidiform mole,CHM)及部分性葡萄胎(partial hydatidiform mole,PHM)两类.

滋养细胞肿瘤病例讨论-耐药滋养细胞肿瘤

1 病例简介患者,24岁,未婚有性生活史,G2P0.1999年早孕人工流产,2000年行人工流产术,清宫2次.因"绒癌"外院治疗近2年,β-HCG仍未正常,要求第20次化疗,于2004年9月28日收住我院.

恶性滋养细胞肿瘤面临的临床问题

妊娠滋养细胞肿瘤(gestational trophoblastic neoplasia,GTN)又称妊娠滋养细胞疾病(gestational trophoblastic disease,GTD),是指胚胎的滋养细胞发生恶性变而形成的肿瘤.滋养细胞肿瘤包括:葡萄胎,侵蚀性葡萄胎,绒毛膜癌及中间型滋养细胞肿瘤.由于其独特的组织学来源及生物学行为,使其成为早可以治愈的实体肿瘤.本文将重点讨论恶性滋养细胞肿瘤所面临的临床问题.

《现代妇产科进展》稿约