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共轭亚油酸对肥胖大鼠PPARγ基因表达及血清瘦素水平的影响
目的研究不同剂量共轭亚油酸(CLA)对饮食诱导肥胖大鼠PPARγ基因、瘦素、血糖、血脂的影响.方法选用雄性Wistar大鼠,随机分为对照组、高脂组、高脂+CLA组(每100g饲料含CLA分别为0.75g、1.50g、3.00g),于第12周末处死动物,计算脂/体比,测定大鼠血糖、血脂及瘦素水平,并应用RT-PCR的方法检测大鼠白色脂肪组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达水平.结果CLA可降低肥胖大鼠血糖、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及瘦素水平,增加脂肪组织PPARγ mRNA的表达水平.结论CLA可降低肥胖大鼠血糖、血脂,并可通过激活PPARγ下调瘦素水平,有改善肥胖大鼠的瘦素抵抗作用.
关键词： 瘦素 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 血糖 血脂 -
肥胖和肥胖抵抗大鼠脂肪组织PPARγ和aP2基因表达的研究
目的 观察高脂饮食诱导的肥胖及肥胖抵抗大鼠脂肪组织中PPARγ和aP2 mRNA表达水平的变化.方法 31只健康wistar雄性大鼠,随机选取7只作为对照组喂饲基础饲料,24只作为高脂组喂饲高脂饲料.第8周末按体重增量,从高脂组选出5只大鼠作为肥胖组,5只作为肥胖抵抗组,检测各组大鼠血清甘油三酯和总胆固醇,附睾周围脂肪组织中PPART和aP2 mRNA表达.结果 肥胖组大鼠血清甘油三酯水平显著高于对照组(P<0.05);总胆固醇水平均显著高于对照组和肥胖抵抗组(P<0.05,P<0.01);肥胖组PPARγ和aP2 mRNA表达量高于对照组和肥胖抵抗组(P<0.05).结论 高脂饮食诱导产生的肥胖及肥胖抵抗大鼠在脂肪组织PPARγ和aP2 mRNA表达上存在差异,肥胖大鼠脂肪合成能力增强.
关键词： 肥胖 肥胖抵抗 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 脂肪酸结合蛋白 -
紫薯花青素减轻高脂饲料联合四氯化碳诱导大鼠脂肪性肝炎
目的 探讨紫薯花青素通过核因子κB(NF-κB)通路减轻高脂饲料联合四氯化碳诱导大鼠脂肪性肝炎机制.方法 将70只雄性大鼠随机分为对照组(10只)和高脂饲料组(60只),对照组喂饲普通饲料,高脂组喂饲高脂饲料同时每周2次腹腔注射四氯化碳-橄榄油制剂(50:50)2 mL/kg,对照组注射等量橄榄油,共10周,每周称体重并检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)浓度.从造模成功的58只大鼠中随机选取50只再分为模型组,紫薯花青素低、中、高剂量组(60、120、240 mg/kg)和阳性药物组(水飞蓟素150 mg/kg),每组10只,每天1次等体积(20 mL)灌胃给药,对照组和模型组灌胃等量生理盐水,8周后,检测大鼠血清ALT、AST、TC、TG、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)浓度和血清促炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-11β)和抗炎症因子白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素13(IL-13)浓度;实时定量荧光聚合酶链式反应(PCR)检测大鼠肝脏内TNF-α、IL-1β、IL-4、IL-13、过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR-γ)和高迁移率族蛋白B1 (HMGB-1)的mRNA表达;Westernblotting检测肝组织核因子κB抑制蛋白(IκB)磷酸化程度及PPAR-γ和HMGB-1蛋白表达.结果 与对照组比较,造模后大鼠体重增加(P＜0.05),血清AST、ALT、TG、TC和LDL浓度均显著升高(P＜0.05),HDL浓度明显下降(P＜0.05);与对照组相比,模型组大鼠TNF-α、IL-1 β和HMGB-1的表达显著升高(P＜0.05),IL-4、IL-13和PPAR-γ的表达显著降低(P＜0.05),磷酸化IκB(p-IκB)和NF-κB表达量明显增高(P＜0.05);与模型组比较,高剂量紫薯花青素组NF-κB的表达水平明显降低,IκB磷酸化程度下降(P＜0.05),肝组织内TNF-α、IL-1β和HMGB-1 mRNA表达量显著降低(P＜0.05),IL-4、IL-13和PPAR-γ的mRNA表达显著升高(P＜0.05).紫薯花青素低、中、高剂量组及阳性药物组上述指标均有所改善,高剂量组作用优于低、中剂量组,与阳性药物组效果接近.结论 紫薯花青素可通过NF-κB通路起到减轻高脂饲料联合四氯化碳诱导大鼠脂肪性肝炎的作用.
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瘦素抵抗肥胖大鼠脂肪组织SOCS-3、PPARγ及ACO mRNA水平的探讨
目的 观察高脂饮食诱导的肥胖瘦素抵抗大鼠细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS-3)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及乙酰辅酶A氧化酶(ACO)mRNA表达水平的变化.方法 30只Wistar雄性大鼠,6只为对照组喂饲基础饲料,24只为高脂组喂饲高脂饲料,第8周末按体重增量从高脂组中筛选出8只大鼠作为肥胖组,测定对照组和肥胖纽大鼠血清瘦素,附睾脂肪组织中SOCS-3,PPARγ以及ACO mRNA表达.结果 肥胖组大鼠体重以及血清瘦素水平均显著高于对照组(P<0.05);肥胖组脂肪组织SOCS-3、PPARγ mRNA水平显著高于对照组(P<0.05),而ACO mRNA则显著低于对照组(P<0.05).结论 高脂饮食诱导的肥胖大鼠存在瘦素信号转导通路的抑制,脂肪酸氧化能力降低,脂肪合成能力增强.
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共轭亚油酸对胰岛素抵抗大鼠ap2基因表达的影响
目的通过研究共轭亚油酸(CLA)对饮食诱导胰岛素抵抗大鼠脂肪酸连接蛋白(ap2)基因表达的影响,探讨CLA抗糖尿病作用的机制.方法选用雄性Wistar大鼠,随机分为对照组、高脂组、高脂+CLA组(每100g饲料含CLA分别为0.75g、1.50g、3.00g),每组动物10只,观察CLA对胰岛素抵抗大鼠胰岛素、血糖水平的影响,并应用RT-PCR的方法检测ap2、过氧化物酶体增殖物活性受体γ(PPARγ)的表达水平.结果高脂组大鼠血清游离脂肪酸(FFA)、胰岛素和糖血水平显著高于基础组,CLA可降低胰岛素抵抗大鼠血清FFA、血糖、胰岛素水平,并可增加其脂肪组织ap2、PPARγ mRNA的表达水平.结论CLA可通过激活PPARγ上调脂肪酸连接蛋白基因的表达,改善肥胖大鼠的胰岛素抵抗.
关键词： 脂肪酸连接蛋白 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 胰岛素抵抗 -
PPAR γ、COX-2、NF-κB与MODS关系的研究进展
目的 探讨MODS时机体内PPARγ,COX-2,NF-κB的变化及意义.严重创伤,感染,缺血,再灌注损伤可以诱导全身炎症反应综合征(SIRS),它是多脏器官功能障碍综合征(MODS)主要的病理生理过程.过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPARγ)参与了MODS的发生和发展,是MODS的诊断、判断疾病进展的一个重要指标.核转录因子κB(NF-κB)是一种多效性的核转录调控蛋白,参与转录多种炎症介质,在调节炎症,免疫反应中起着重要的作用.环氧化酶2(COX-2)是前列腺素(PG)合成过程中一个重要的限速酶,可将花生四烯酸代谢成各种前列腺素产物,维持机体的各种病理生理过程.当细胞受到刺激时快速合成、表达,它诱导炎症的过程.鉴于此,本文旨在研究PPARγ,COX-2,NF-κB和MODS之间的关系,并探讨在MODS救治过程中对临床工作的指导意义.
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肥胖大鼠抵抗素的基因表达及共轭亚油酸对其影响的研究
目的研究饮食诱导肥胖大鼠胰岛素抵抗形成过程中脂肪组织抵抗素基因的表达水平和共轭亚油酸(CLA)对其的影响,探讨抵抗素的作用及其与过氧化物酶体增殖物活性受体γ(PPARγ)之间的关系.方法选用雄性Wistar大鼠,分为对照组、高脂组、高脂+CLA组(每100 g饲料含CLA分别为0.75 g、1.50 g、3.00 g),每组10只大鼠,观察CLA对肥胖大鼠胰岛素和血糖水平的影响,并应用逆转录聚合酶链反应检测抵抗素和PPARγ的表达水平.结果高脂组大鼠血清胰岛素和血糖水平分别为(11.11±2.73) mIU/L和(5.09±0.66) mmol/L,CLA可降低肥胖大鼠的血清胰岛素和血糖水平,低、中、高剂量组胰岛素水平分别为(6.99±1.77) mIU/L,(7.36±1.48) mIU/L,(7.85±1.60) mIU/L,血糖水平分别为(4.28±0.72) mmol/L、(4.18±0.55) mmol/L、(4.06±0.63) mmol/L,且高脂组大鼠脂肪组织抵抗素、PPARγ mRNA的表达较基础组增强,CLA 可增加肥胖大鼠脂肪组织抵抗素、PPARγ mRNA的表达水平.结论肥胖大鼠脂肪组织抵抗素mRNA表达较基础组增加,CLA可通过激活PPARγ上调抵抗素基因的表达,从而改善胰岛素抵抗.
关键词： 抵抗素 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 亚油酸类 -
共轭亚油酸对肥胖大鼠脂联素基因表达的影响
目的研究共轭亚油酸对饮食诱导肥胖大鼠脂联素基因表达的影响.方法选用雄性Wistar大鼠,随机分为对照组、高脂组、高脂+共轭亚油酸组(每100g饲料含共轭亚油酸分别为0.75 g、1.50 g、3.00 g),每组动物10只,观察共轭亚油酸对肥胖大鼠胰岛素、血糖水平的影响,并应用RT-PCR的方法检测脂联素、过氧化物酶体增殖物活性受体γ(PPARγ)的表达水平.结果高脂组大鼠血清胰岛素和血糖水平分别为(11.11±2.73) μIU/ml,(5.09±0.66) mmol/L,0.75%、1.50%、3.00%剂量组胰岛素水平分别为(6.99±1.77) μIU/ml,(7.36±1.48) μIU/ml,(7.85±1.60)μIU/ml ,血糖水平分别为(4.28±0.72 )mmol/L,(4.18±0.55) mmol/L,(4.06±0.63) mmol/L,且共轭亚油酸可增加肥胖大鼠脂肪组织脂联素、PPARγ mRNA的表达水平.结论共轭亚油酸可通过激活PPARγ上调脂联素基因的表达,改善肥胖大鼠的胰岛素抵抗.
关键词： 脂联素 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 胰岛素抵抗 -
阿魏酸钠与人参皂苷Rg1协同神经保护作用及其机制
目的 观察阿魏酸钠和人参皂苷Rg1协同神经保护作用并探讨其作用机制.方法 复制大鼠脑缺血再灌注损伤模型,观察阿魏酸钠、人参皂苷Rg1及联合用药对梗死灶体积、凝集素标记阳性细胞、过氧化物酶体增殖物激活受体γ mRNA表达、SOD活性、MDA含量的影响.结果 TTC染色显示空白对照组未见脑梗死灶,模型对照组、阿魏酸钠组、人参皂苷Rg1组、联合用药组脑梗死体积百分比分别为44.2％、25.0％、20.4％、6.2％;空白对照组、模型对照组、阿魏酸钠组、人参皂苷Rg1组及联合用药组凝集素阳性细胞个数分别为11.4、44.6、27.8、23.0、13.4个/500μm2; PPAR-γmRNA表达分别为1883、1022、1473、1537、1843; MDA含量分别为1.52、3.50、2.62、2.38、1.66 mmol/mg; SOD活性分别为71.54、73.14、81.72、82.22、91.10 U/mg.与模型对照组相比,阿魏酸钠组、人参皂苷Rg1组、联合用药组均可明显减少脑梗死灶体积(P＜0.01),抑制小胶质细胞激活(P＜0.01),增加过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA表达(P＜0.01)、降低MDA含量(P＜0.01)、增加SOD活性(P＜0.05,P＜0.01),且联合用药组效果优于阿魏酸钠、人参皂苷Rg1单独用药组(P＜0.05,P＜0.01).结论 阿魏酸钠与人参皂苷Rg1具有协同神经保护作用,对过氧化物酶体增殖物激活受体γ的协同激活可能是其机制之一.
关键词： 阿魏酸钠 人参皂苷Rg1 脑缺血再灌注 过氧化物酶体增殖物激活受体γ -
当归芍药散对动脉粥样硬化小鼠的干预作用及DNA甲基转移酶1和PPAR-γ表达的影响
目的 研究当归芍药散对载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠主动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)斑块的干预作用及DNA甲基转移酶1(DNMT1)和PPAR-γ表达的影响.方法 将30只8周龄雄性ApoE-/-小鼠西方类型膳食喂养9周,随机分为模型组、立普妥组(阳性对照组)和当归芍药散组(n=10),药物干预9周后,检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、血清DNA甲基化水平及DNMTs水平.行苏木素-伊红染色(hematoxylin and eosin staining,HE),采用IPP图像分析软件测量小鼠主动脉As斑块面积.免疫组化法检测各组小鼠主动脉As斑块内DNA甲基化转移酶1(DNMTl)和过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPAR γ)的表达.结果 与模型组相比,当归芍药散组和立普妥组小鼠血清TC、TG水平明显降低(P＜0.05),当归芍药散组小鼠血清HDL-C水平明显升高(P＜0.05).与模型组相比,当归芍药散组小鼠主动脉As斑块面积显著降低(P＜0.01),当归芍药散组小鼠主动脉斑块内DNMT1表达显著降低(P＜0.05),PPAR γ表达显著升高(P＜0.05).结论 当归芍药散可改善As小鼠的血脂水平,减少As斑块面积,具有明确的抗As作用,其机制可能与抑制As小鼠血清甲基化水平和DNMTs水平,促进As小鼠主动脉斑块内PPARγ表达和抑制斑块内DNMT1表达有关.
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潜阳解毒通络饮通过PPAR-γ途径抑制炎症因子表达从而对自发性高血压大鼠炎症机制干预的研究
目的 探讨潜阳解毒通络饮治疗原发性高血压大鼠的作用机制.方法 选择健康雄性12周龄原发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)71只,随机分为潜阳组、解毒组、通络组、全方组、缬沙坦组、吡格列酮组、SHR空白对照组,魏-凯二氏大鼠(Wistar-Kyoto rats,WKY)大鼠10只作为正常血压对照组.给药2个月后处死取腹主动脉血和心脏左心室.用ELISA试剂盒测血清中超敏C反应蛋白(high-sensitivity c-reactive protein,hs-CRP)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor -a,TNF-a)、白介素1β(interleukin-lβ,IL-1β)的浓度.聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators activated receptors,PPAR-γ)、果蝇受体4(toll-like receptor 4,TLR4)及TNF-a的mRNA在大鼠心肌细胞中的表达.结果 潜阳解毒通络饮能够有效抑制SHR血清中IL-1β、TNF-α及hs-CRP炎症因子的表达,有统计学意义(P＜0.05).在SHR心肌组织mRNA的表达上,TNF-a、TLR4及PPAR-γ的mRNA表达与其他治疗组和对照组相比有统计学意义(P＜0.05).结论 证实了潜阳解毒通络饮从"风痰瘀络"病机的角度治疗原发性高血压大鼠有效性,其作用机制可能与作用于PPAR-γ途径、改善炎症因子表达有关.
关键词： 高血压病 果蝇受体4 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 潜阳解毒通络饮 炎症因子 -
针刺减少噻唑烷二酮类降糖药所致体质量增加的中枢摄食相关机制探讨
噻唑烷二酮类降糖药(TZDs)导致2型糖尿病患者体质量增加甚至肥胖的不良反应限制了其临床应用和推广.针刺已经成为一种较为有效的治疗肥胖的手段,本文从中枢神经系统摄食相关靶基点出发,认为针刺可能通过改变血脑屏障的通透性从而影响TZDs的入脑量或影响下丘脑摄食相关的过氧化物酶体增殖物激活受体γ、瘦素及神经肽Y的活性及表达,抑制摄食,进而减少TZDs所致体质量增加.
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狼疮方含药血清对人近端肾小管上皮细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ表达及CD40、RANTES的影响
目的:观察狼疮方含药血清对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及干扰素(INFγ)和肿瘤坏死因子(TNFα)诱导的白细胞分化抗原40(CD40)、受激活调节的正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)表达的影响,探讨该复方体外抗炎效应及其可能机制.方法:制备狼疮方含药大鼠血清;HK-2细胞株体外培养,分组如下:(1)培养基对照组;(2)正常鼠血清对照组;(3)狼疮方含药血清组;(4)IFNγ+TNFα刺激组;(3)刺激+10%狼疮方血清组;(4)刺激+10%正常鼠血清对照组.采用免疫印迹(Westem-blot)检测PPARγ蛋白表达,半定量逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测CD40 mRNA、RANTES mRNA表达水平.结果:(1)正常HK-2细胞基础量表达PPARγ;10%狼疮方含药血清作用下,PPARγ蛋白表达呈现时间依赖性先增高后降低的趋势.(2)正常HK-2细胞基础水平表达CD40、RANTES.IFNγ+TNFα刺激后,CD40和RANTES表达显著升高;10%狼疮方含药血清可显著抑制IFNT+TNFα诱导的CD40和RANTES表达;正常鼠对照血清对CD40和RANTES表达无明显影响.结论:狼疮方含药血清可能通过激活PPARγ途径抑制人近端肾小管上皮细胞CD40和RANTES表达,从而发挥抗炎效应.
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天麻钩藤饮含药血清对人脐静脉内皮细胞保护作用的研究
目的:观察天麻钩藤饮对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)致人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用.方法:制备大鼠天麻钩藤饮含药血清.采用酶消化法体外培养HUVECs,利用Human von Willebrand factor免疫细胞化学法鉴定,随机分为3组:对照组,AngⅡ组,AngⅡ+天麻钩藤饮组.倒置显微镜下观察细胞形态、密度,酶联免疫法测定细胞上清TNF-α含量,RTPCR法测定细胞PPAR-γmRNA的表达.结果:与对照组比较,AngⅡ(10-6 mol/L)可引起内皮细胞密度降低,细胞分泌TNF-α增加,PPAR-γmRNA表达水平降低.天麻钩藤饮含药血清可抑制AngⅡ导致的细胞损伤,减少TNF-α的分泌,升高PPAR-γmRNA的表达.结论:天麻钩藤饮可对抗AngⅡ所致的HUVECs损伤,保护血管内皮细胞功能.
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平肺口服液对Lewis肺癌小鼠PPAR-γ蛋白和脂联素表达的上调作用
目的:探讨平肺口服液对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织生长、血清脂联素、瘤组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)和Ki-67蛋白表达的影响及抗癌机制.方法:24只Lewis肺癌荷瘤C57小鼠按体质量随机分为正常对照组、模型组、顺铂组和顺铂+平肺组共4组.给药结束后次日取材,测量肿瘤组织重量,采用双抗体夹心ABC-ELISA法测血清脂联素,用免疫组化法染色检测PPAR-γ和Ki-67蛋白表达.结果:顺铂+平肺组瘤组织重量明显低于模型组(P＜0.01),瘤组织PPAR-γ阳性表达分别高于顺铂组及模型组(P＜0.01),其血清脂联素水平也高于其他实验组(P＜0.01),且瘤组织Ki-67的表达较模型组相比亦明显减少(P＜0.01).结论:平肺口服液可以通过上调Lewis肺癌小鼠肿瘤组织PPAR-γ和血清脂联素的表达起到抑制肿瘤组织生长的作用.
关键词： 平肺口服液 肺癌 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 脂联素 -
隔药饼灸对动脉粥样硬化兔主动脉内皮细胞PPARγ蛋白及斑块中MMP-9mRNA表达的影响
目的:观察隔药饼灸对动脉粥样硬化(AS)兔主动脉内皮细胞中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR γ)蛋白及斑块中基质金属蛋白酶-9 mRNA(MMP-9 mRNA)表达的变化,探讨隔药饼灸对兔AS的形成及斑块稳定性的影响.方法:将50只新西兰大耳白兔,通过高脂饲料喂养及免疫损伤法建立兔AS模型,随机分为空白组、模型组、直接灸组、隔药饼灸组和阿托伐他汀组,每组10只,治疗16周后用免疫组化法检测AS兔主动脉内皮细胞中PPARγ的蛋白表达；原位杂交法检测斑块中MMP-9 mRNA的表达.结果:隔药饼灸组、直接灸组和阿托伐他汀组PPARγ的蛋白表达和MMP-9 mRNA的表达均明显低于模型组(P＜0.01,P＜0.05)；隔药饼灸组和阿托伐他汀组动脉粥样硬化斑块中MMP-9 mRNA的表达明显低于直接灸组(P＜0.05,P＜0.01),隔药饼灸组和阿托伐他汀组比较差异无统计学意义.结论:隔药饼灸可通过激活AS兔主动脉内皮细胞PPAR γ的蛋白表达和抑制斑块中MMP-9 mRNA的表达,起到干预AS形成和稳定AS斑块的作用.
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人参三七川芎提取物激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ延缓血管内皮细胞衰老的研究
目的:探讨血管内皮细胞衰老过程中过氧化物酶体增殖物激活受体γ (PPARγ)的表达变化和益气活血中药人参三七川芎提取物的干预作用.方法:分离人脐静脉内皮细胞(HUVEC),传代培养至第4代,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ,10-6mol/L,48h)诱导其衰老;分为空白对照组、AngⅡ组、中药提取物组和替米沙坦(telmisartan)组;观察不同时间点β-半乳糖苷酶染色、NO含量、PPARγ mRNA及蛋白表达.结果:AngⅡ组较空白对照组p-半乳糖苷酶阳性染色细胞数增加(P＜0.05),NO含量明显下降(P＜0.05).与AngⅡ组比较,中药提取物组和替米沙坦组β-半乳糖苷酶阳性染色细胞数下降(P＜0.05),NO含量增加(P＜0.05).AngⅡ呈时间依赖性上调PPAR γ mRNA表达,但蛋白表达呈现早升后降趋势;中药提取物和替米沙坦两组PPAR γ表达均明显上调(P＜0.05),中药早期作用更为显著(P＜0.05).结论:益气活血中药能够延缓血管内皮细胞衰老,其机制可能与诱导PPAR γ表达有关.
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葛根芩连汤激活PPARγ上调脂联素和GLUT4表达改善脂肪胰岛素抵抗
该实验研究复方葛根芩连汤体内外改善脂肪胰岛素抵抗(IR)的药效及相关分子机制.采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,葛根芩连汤给药干预3个月,检测糖尿病大鼠空腹血糖、胰岛素和糖化血清蛋白,计算胰岛素抵抗指数.提取大鼠脂肪组织总RNA,qPCR检测糖尿病大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂联素(ADPN)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)、乙酰辅酶A羧化酶α基因(ACACA)和乙酰辅酶A羧化酶β(ACACB)基因mRNA表达水平.1μmol·L-1地塞米松诱导建立稳定IR-3T3-L1脂肪细胞模型,CCK-8法检测葛根芩连汤含药血清对细胞活力的影响,采用5％,10％,15％葛根芩连汤含药血清干预24 h检测细胞培养液葡萄糖含量、游离脂肪酸(NE-FA)含量和外泌脂联素含量,测定细胞内甘油三酯(TG)含量.荧光定量qPCR和Western blot分别检测IR-3T3-L1细胞PPARγ,ADPN和GLUT4mRNA和蛋白质表达水平.结果显示葛根芩连汤给药3个月可明显降低糖尿病大鼠的空腹血糖、胰岛素和糖化血清蛋白(P＜0.01),下调胰岛素抵抗指数(P＜0.05),具有较好的降糖效果.葛根芩连汤可显著升高糖尿病大鼠脂肪组织PPARγ,ADPN,GLUT4,GLUT2,ACACA和ACACB基因mRNA表达水平.5％,10％,15％葛根芩连汤含药血清均可显著性上调IR-3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗量(P＜0.0l);降低IR-3T3-L1细胞TG含量(P＜0.01);一定程度下调NEFA含量但并不显著.此外,葛根芩连汤含药血清剂量依赖上调外泌ADPN,15％含药血清上调ADPN非常显著(P＜0.01);各剂量含药血清显著上GLUT4表达(P＜0.01).该研究显示葛根芩连汤激活PPARγ上调ADPN和GLUT4调节糖代谢改善脂肪IR.
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颐年降压饮含药血清对自发性高血压大鼠内皮细胞增殖及PPAR-γ mRNA表达的影响
目的 观察颐年降压饮含药血清对体外原代培养的自发性高血压大鼠(spontaneously hyperten-sive rats,SHR)内皮细胞增殖及PPAR-γmRNA表达的影响.方法 取SHR主动脉内皮细胞进行原代培养,取3代后内皮细胞用于实验,SD大鼠40只随机分为正常血清对照组和颐年降压饮高、中、低剂量组,给与高脂饮食喂养,分别灌服生理盐水和高、中、低剂量颐年降压饮(分别含生药5.2 g/mL、2.6 g/mL、1.3 g/mL),给药20天麻醉后开始收集血清,经灭活后作用各组内皮细胞.MTT法检测不同浓度血清作用各组2、4、8、16、24、48 h细胞活性;RT-PCR法检测作用4、8、16、24 h内皮细胞PPAR-γmRNA表达情况.结果 MTT检测OD值发现,4、8 h颐年降压饮高、中、低剂量组OD值均高于正常血清对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而颐年降压饮3剂量组间差异无统计学意义(P>0.05);16 h颐年降压饮中剂量组OD值上升低于其他组,差异有统计学意义(P<0.05);24 h各组OD值均下降,但颐年降压饮高、中剂量组下降比低剂量、正常血清对照组明显,差异有统计学意义(P<0.05);48 h各组OD值继续下降,颐年降压饮高剂量组比正常血清对照组下降更明显(P<0.05).RT-PCR检测不同血清作用内皮细胞4 h时,各组PPAR-γmRNA表达差异无统计学意义(P>0.05);8 h时颐年降压饮高剂量组PPARγmRNA表达明显低于其他各组(P<0.05);16 h颐年降压饮各剂量组PPAR-γmRNA表达比正常血清对照组高(P<0.05),其中颐年降压饮高剂量组PPARymRNA表达高,与其他组比较,差异有统计学意义(P<0.01);24 h各组PPAR-γmRNA表达有所下降,但颐年降压饮低剂量组PPAR-γmRNA表达仍高于正常血清对照组(P<0.05).结论 颐年降压饮对内皮细胞增殖呈双向调节作用,或许与调节PPAR-γmRNA表达有关.颐年降压饮所具有的上调及维持PPAR-γmRNA表达作用,可能是该方药具有保护血管内皮功能,降低血压的机制之一.
关键词： 颐年降压饮 自发性高血压 内皮细胞增殖 过氧化物酶体增殖物激活受体γ -
姜黄素对TGF-β2刺激下小鼠肺成纤维细胞PPAR-γ/PDGF-β信号通路的影响
目的 探讨姜黄素对转化生长因子(TGF-β2)刺激下小鼠肺成纤维细胞过氧化物酶体增殖物活化受体-γ(PPAR-γ)/血小板衍生生长因子β(PDGF-β)信号通路的影响.方法 体外培养小鼠肺成纤维细胞(C57B L/6),采用细胞生长计数板检测空白组、姜黄素组(姜黄素5、25、50μmol/L)、TGF-β2组(10 ng/mL)及TGF-β2加姜黄素组(TGF-β2 10 ng/mL及姜黄素5、25、50 μmol/L)细胞数;逆转录PCR检测空白组、TGF-β2组(10 ng/mL)及TGF-β2加姜黄素组(TGF-β2 10 ng/mL及姜黄素5、25、50 μmol/L)PPAR-γ、PDGFR-β及FGFR1 mRNA转录水平;Western blot法及ELISA法检测空白组、TGF-12组(10 ng/mL)及TGF-β2加姜黄素50 μmol/L组(TGF-β2 10 ng/mL及姜黄素50 μmol/L)PPAR-γ蛋白表达及胶原蛋白-1水平.结果 与空白组比较,姜黄素组50 μmol/L时在48、72 h时对细胞增殖抑制明显;与TGF-β2组比较,TGF-β2加姜黄素组50 μ山mol/L时同样在48 h、72 h时对细胞增殖抑制明显.与空白组比较,TGF-β2组PPAR-γ、PDGF-β mRNA表达及PPAR-γ蛋白表达升高,胶原蛋白-1表达增加(P＜0.05).与TGF-β2组比较,TGF-β2加姜黄素组25、50 μmol/L时PPAR-γm RNA表达水平明显升高,且高于TGF-β2加姜黄素组5 μmol/L时(P＜0.05),而TGF-β2加姜黄素组50 μmol/L时PPAR-γ mRNA表达水平高于TGF-β2加姜黄素组25 μm ol/L时(P＜0.05).TGF-β2加姜黄素组各浓度PDGF-β mRNA表达低于TGF-β2组(P＜0.05),且TGF-β2加姜黄素组50 μmol/L时PDGF-β mRNA表达低于TGF-β2加姜黄素组5、25 μmol/L时(P＜0.05).TGF-β2组及TGF-β2加姜黄素组各浓度FGFR1 mRNA表达水平比较,差异无统计学意义(P＞0.05).与TGF-β2组比较,TGF-β2加姜黄素50 μmol/L组PPAR-γ蛋白表达升高,胶原蛋白-1表达降低(P＜0.05,P＜0.01).结论 姜黄素不仅抑制TGF-β2诱导的小鼠肺成纤维细胞增殖,而且还抑制胶原合成,其可能与使PPAR-γ表达上调及PDGF-β表达下调相关.因此,姜黄素可能是通过PPAR-γ/PDGF-β信号通路阻止肺纤维化的发生发展.
