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胰岛素和睾酮对Ishikawa细胞葡萄糖转运蛋白4表达的影响
目的 探讨胰岛素(INS)和睾酮(T)对多囊卵巢综合征(PCOS)子宫内膜腺上皮细胞生长的影响和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的调节机制.方法 体外培养Ishikawa细胞,予不同浓度INS(90、60、30、3、0.3 U/L)或T(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mmol/ml)刺激Ishikawa细胞48 h,MTT法检测INS、T对Ishikawa细胞生长的作用;免疫细胞化学检测GLUT4蛋白在Ishikawa细胞定位表达;分别以30 U/L INS和10-5mmol/ml T刺激Ishikawa细胞24和48 h,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定INS和T对Ishikawa细胞GLUT4 mRNA表达的影响.结果 (1)不同浓度的INS均可促进Ishikawa细胞的生长,随着INS浓度的增加,INS促进Ishikawa细胞生长作用越强,INS浓度自0.3～30 U/L时,Ishikawa细胞生长依次加强,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01).INS浓度达60、90 U/L时,细胞生长状况与INS浓度为30 U/L相似.不同浓度的T均可抑制Ishikawa细胞的生长,随着T浓度的增加,T抑制Ishikawa细胞生长作用越明显.T浓度自10-7、10-6、10-5mmol/ml,Ishikawa细胞生长依次减弱,与对照组相比均有显著性差异(P<0.01,P<0.05),T浓度达10-4、10-3mmol/ml时,细胞生长抑制状况与T浓度10-5mg/ml相似.(2)GLUT4蛋白,定位表达于Ishikawa细胞的细胞浆内.(3)Ishikawa细胞中GLUT4 mRNA表达,在INS组和T组均较对照组减弱(P<0.01,P<0.05),INS组比T组减弱更明显(P<0.05),且INS和T作用24和48 h GLUT4 mRNA表达无显著性差异(P>0.05).结论 不同浓度INS和T均可影响Ishikawa细胞生长,并降低GLUT4 mRNA的表达,推测PCOS高胰岛素、高雄激素血症的病理生理特性有可能影响子宫内膜的代谢过程,与子宫内膜的病变相关.
关键词： Ishikawa细胞 葡萄糖转运蛋白4 多囊卵巢综合征 胰岛素 睾酮 -
混合稀土“常乐”染毒对糖尿病大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4影响的实验研究
目的 探讨混合稀土“常乐”染毒对糖尿病大鼠脂肪组织中过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白水平的影响.方法 将40只健康清洁级Wistar雄性大鼠随机分为3组,分别为对照组(10只)、糖尿病组(18只)和混合稀土“常乐”组(12只).糖尿病组和混合稀土“常乐”组腹腔注射50 mg/kg链脲佐菌素制备糖尿病模型;混合稀土“常乐”组采用灌胃方式染毒0.2 mg/kg常乐,对照组及糖尿病组均每日给予等剂量的生理盐水,1次/d,连续染毒1个月,然后处死取脂肪组织.采用流式细胞仪检测大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4基因表达的阳性百分率;采用ELISA法检测大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4蛋白的水平;采用苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠脂肪组织的病理改变;采用免疫组织化学方法检测大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4蛋白的阳性强度.结果 与对照组比较,糖尿病模型组大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4基因阳性百分率、蛋白水平及蛋白的阳性表达强度均显著降低,差异有统计学意义(P＜0.01);混合稀土“常乐”组大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4基因阳性百分率、蛋白水平及蛋白的阳性表达强度均略降低,但差异无统计学意义(P＞0.05);与糖尿病组比较,混合稀土“常乐”组大鼠脂肪组织中PPAR-γ和GLUT4基因阳性百分率、蛋白水平及蛋白的阳性表达强度均明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 混合稀土“常乐”可上调糖尿病大鼠脂肪组织PPAR-γ和GLUT4的表达水平,从而对糖尿病大鼠机体有一定的保护作用.
关键词： 常乐 糖尿病 脂肪组织 过氧化物酶体增殖物激活受体-γ 葡萄糖转运蛋白4 -
白藜芦醇对大鼠非酒精性脂肪肝的作用及机制研究
目的 观察白藜芦醇对高脂膳食诱导的大鼠非酒精性脂肪肝的作用并探讨相关的分子机制.方法 63只6周龄雄性SD大鼠随机分为高脂组和普通饲料组,8周后通过体重和肝脏病理切片建立非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型.再将NAFLD组大鼠随机分为模型组和白藜芦醇干预组(250 mg/kg.bw).干预结束后,称取大鼠体重、体脂和肝脏重量,分离血清测定相关指标,病理切片观察肝脏的脂肪蓄积,实时定量PCR检测肝脏腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)/沉默静息因子(Sirt1)通路基因的表达.结果 白藜芦醇干预结束后,干预组大鼠的体重、体脂比、肝重、肝脏系数和肝脏脂肪蓄积量与模型组相比显著降低(P＜0.05);天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的含量和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)与模型组相比也显著降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量显著增加(P＜0.05);与模型组相比,干预组AMPKα1、AMPKα2、Sirt1和葡萄糖转运蛋白4 (GLUT4)的mRNA表达显著增加,固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c) mRNA表达显著降低.结论 白藜芦醇可能通过促进AMPKα、Sirt1和GLUT4的表达改善胰岛素敏感性,抑制SREBP-1c的表达降低脂质沉积改善高脂膳食诱导的非酒精性脂肪肝.
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低剂量硝酸镧对糖尿病大鼠肝脏PPAR-γ和GLUT4表达的影响
目的 探讨口服低剂量硝酸镧对糖尿病大鼠肝脏PPAR-γ和GLUT4表达的影响.方法 以Wistar雄性大鼠为研究对象,将实验动物分为3组即对照组(10只)、糖尿病模型组(18只)和硝酸镧给药组(12只),3组大鼠分别每日给予生理盐水、生理盐水、硝酸镧(0.2 mg/kg)灌胃1个月,然后处死取血清和肝脏.采用ELISA法检测大鼠血清中PPAR-γ和GLUT4的蛋白含量;采用免疫组织化学方法检测大鼠肝脏PPAR-γ和GLUT4的阳性表达强度;采用苏木素-伊红(HE)染色检测肝脏组织的病理改变.结果 与对照组比较,硝酸镧给药组和糖尿病模型组,两组大鼠血清中PPAR-γ和GLUT4的蛋白含量及肝脏组织中PPAR-γ和GLUT4的蛋白阳性表达均降低差异有统计学意义(P＜0.01);与硝酸镧给药组比较,糖尿病模型组更为显著(P＜0.001).结论 口服低剂量硝酸镧(0.2 mg/kg)可通过上调大鼠血清及肝脏PPAR-γ蛋白和GLUT4蛋白,从而对肝组织有一定的保护作用.
关键词： 硝酸镧 糖尿病 肝脏 过氧化物酶体增殖物激活受体-γ 葡萄糖转运蛋白4 -
乙醇对大鼠骨骼肌胰岛素信号传递分子表达的影响
目的探讨乙醇对大鼠骨骼肌葡萄糖摄取能力和胰岛素受体(IR)、胰岛素受体底物1(IRS1)和胰岛素受体底物2(IRS2)及葡萄糖转运体4(glut4)表达的影响.方法雄性Wistar大鼠20只,随机分为对照组和饮酒组,每组10只.饮酒组每天乙醇灌胃1次,乙醇量为5g/(kg·d);对照组每天蒸馏水灌胃1次,蒸馏水量5g/(kg·d).喂养时间5个月.测大鼠空腹血糖和胰岛素、口服糖耐量2h血糖;体外胰岛素刺激实验检测骨骼肌糖摄取能力;用RT-PCR和Westernblot法测定IR、IRS1和IRS2mRNA和蛋白表达水平,Real-timePCR测定glut4mRNA水平.结果与对照组相比:(1)饮酒组大鼠空腹血糖、空腹血胰岛素和口服糖耐量2h血糖未见差异;(2)饮酒组大鼠骨骼肌细胞基础和胰岛素刺激后糖摄取能力显著下降(P＜0.05);(3)饮酒组大鼠骨骼肌glut4mRNA水平显著下降(饮酒组:△CT=5.37±0.24,对照组:△CT=4.86±0.31,P＜0.01);(4)饮酒组大鼠骨骼肌IR、IRS1和IRS2mRNA及蛋白水平明显增加(P＜0.05).结论长期摄入乙醇可以通过下调glut4表达而损害大鼠骨骼肌胰岛素敏感性,而胰岛素受体及其底物1、2表达呈代偿性上调.
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振腹推拿对T2DM大鼠骨骼肌AMPK/Glut4信号链的影响
目的 观察振腹推拿对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)大鼠腓肠肌及腹直肌组织AMPK及Glut4基因转录及蛋白表达的影响,探讨其改善T2DM糖代谢的作用机制.方法 24只Wistar大鼠随机取出6只为空白组,其余高脂高糖饮食联合低剂量(35 mg/kg)链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM模型,成模大鼠随机分为模型组、西药对照组及西药推拿组.空白对照组及模型组每日灌胃蒸馏水,西药对照组每日以250 mg/kg标准进行二甲双胍灌胃一次,西药推拿组在相同给药标准基础上每日加用振腹推拿治疗一次.分别在干预第0、2、4、8周测定大鼠FBG水平,干预8周后,测定腓肠肌与腹直肌AMPK以、Glut4基因转录与蛋白表达.结果 与空白组比较,模型组FBG值在第0、2、6、8周时均显著上升,干预8周后,腹直肌AMPKα及Glut4基因转录及蛋白表达均显著下降,腓肠肌AMPKα2基因转录及蛋白表达均显著下降,腓肠肌Glut4蛋白表达显著下降.与模型组比较,西药组及西药推拿组FBG值在第2、6、8周时均显著下降,西药组腹直肌AMPKα2基因转录显著上升,Glut4基因转录及蛋白表达显著上升,西药推拿组腹直肌AMPKα2及Glut4基因转录及蛋白表达均显著上升,腓肠肌AMPKα2基因转录及蛋白表达均显著上升.结论 在二甲双胍常规治疗基础上,联合振腹推拿可进一步改善T2DM大鼠的FBG水平,其对糖代谢的改善机制与调控骨骼肌AMPK/Glut4信号链有关.
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四逆汤加减对老年2型糖尿病患者糖代谢、脂代谢和葡萄糖转运蛋白4的影响
目的:探讨四逆汤加减对老年2型糖尿病患者糖代谢、脂代谢和葡萄糖转运蛋白4的影响.方法:选取2016年1—12月简阳市中医医院内分泌科收治的2型糖尿病合并脂代谢异常的老年患者88例,按照随机数字表法分为对照组和观察组,每组44例,对照组使用二甲双胍、瑞格列奈及阿托伐他汀联合用药治疗,观察组在对照组的基础上根据中医辨证论治给予四逆汤加减口服治疗,观察2组患者的临床疗效,并对其治疗前后的总胆固醇(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、血清葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)水平进行检测分析.结果:治疗后2组的FPG、HbA1c、TG、LDL-C水平均明显降低(P<0.05),观察组优于对照组(P<0.05).观察组治疗后的GLUT4水平明显升高,且明显优于对照组(P<0.05),且在治疗后,观察组的治疗总有效率95.45％,对照组的治疗总有效率为79.55％,观察组明显优于对照组(P<0.05).结论:在对老年2型糖尿病合并脂代谢异常的患者进行治疗时,根据中医辨证论治结合四逆汤加减口服,可以更加有效促进患者GLUT4水平的提高,控制的糖代谢及脂代谢水平.
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半夏泻心汤对糖尿病大鼠糖原合成及GLUT4表达的影响
目的:探讨半夏泻心汤(BD)对糖尿病大鼠血糖、肝脏及骨骼肌组织糖原含量的影响并探讨其机制.方法:SD大鼠建立糖尿病模型,将糖尿病大鼠分为模型组、二甲双胍组(0.3 g·kg-1)、半夏泻心汤高、中、低剂量组(1.7,0.85,0.425 g·kg-1),另设正常对照组,ig 1周后测定各组大鼠空腹血糖、血清胰岛素,测糖原含量及葡萄糖转运蛋白(GLUT4)的表达.结果:在连续给药1周后,半夏泻心汤高、中、低剂量各组及模型组空腹血糖分别为(14.16 ±0.94),(18.1±1.12),(19.34±1.09),(21.79±1.08)mmol·L-1,前3组与模型组比,血糖明显下降(P＜0.01)；胰岛素水平变化差异无统计学意义；半夏泻心汤高、中、低剂量各组肝脏糖原含量分别为(15.94±0.82),(11.52±0.56),(10.48±0.45)mg·g-1与模型组(9.05±0.44)mg·g-1比显著提高(P＜0.01)；肝脏GLUT4表达分别为(47.01±2.21),(43.1±3.15),(42.45±3.06)μg·L-1与模型组(39.72±1.55)μg·L-1比明显升高(P ＜0.01,P＜0.05).结论:半夏泻心汤能提高GLUT4的表达,增强组织对葡萄糖的转运合成,改善糖尿病大鼠糖代谢功能,从而降低血糖.
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交泰丸不同配比组方降糖作用及相关机制探讨
目的:研究交泰丸中黄连、肉桂不同配伍比例(10∶1,10∶3,10∶6)对db/db小鼠的降糖作用及其相关机制.方法:12周龄db/db糖尿病小鼠随机分为黄连-肉桂10∶1组,10∶3组,10∶6组(相当于生药8.4,10,12.3 g·kg-1),阳性药物组(二甲双胍,0.25 g·kg-1),模型组,同月龄db/m小鼠作为正常.正常组和模型组以生理盐水灌胃,阳性药物组以二甲双胍混悬液灌胃,不同配伍比例交泰丸以相应中药水煎剂灌胃,每天1次.5周后,观察小鼠饮水量、进食量、体重的变化,检测空腹血糖(FBG),并进行腹腔注射葡萄糖耐量实验(IPGTT)和胰岛素耐量实验(IPITT);胰岛素免疫组化染色以及电子显微镜观察胰岛β细胞形态及超微结构的变化;蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析肝脏、腹部脂肪与肌肉组织中的AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)与磷酸化AMPK(p-AMPK)的表达,以及脂肪和肌肉组织中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的变化.结果:与正常组比较,模型小鼠体重、饮水量、进食量增加(P＜0.01),FBG显著升高(P＜0.01),糖耐量与胰岛素耐量各时间点血糖显著升高(P＜0.01),胰岛Jβ细胞数量及细胞内分泌颗粒数量减少,肝脏、脂肪和肌肉组织中p-AMPK表达降低(P＜0.05),脂肪和肌肉组织中GLUT4表达降低(P＜0.01,P＜0.05);与模型组比较,交泰丸3个不同配比组FBG均明显降低(P＜0.05),IPGTT和IPITT明显改善,胰岛β细胞数量和分泌颗粒较模型组明显增多,其中以黄连-肉桂10∶1组方的作用为明显;交泰丸10∶1组能明显增加肝脏、脂肪和肌肉中的p-AMPK水平(P＜0.05),增加脂肪和肌肉组织中GLUT4的表达(P＜0.01,P＜0.05).结论:黄连-肉桂10∶1,10∶3,10∶6不同配比的交泰丸对db/db小鼠均具有一定降血糖作用,但以10∶1比例效果好,其作用机制与激活AMPK,增加GLUT4的表达有关.
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五子降糖方对T2DM模型大鼠骨骼肌GLUT4蛋白表达的影响
目的:观察五子降糖方对2型糖尿病模型大鼠血糖及骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的影响,初步探讨其改善糖代谢的分子机制.方法:采用高脂饮食喂养6周联合ip小剂量链脲佐菌素(STZ)的方法建立2型糖尿病大鼠模型,随机分为模型组、二甲双胍(0.1 g·kg-1)组、五子降糖方低、中、高剂量组(3.5,7.0,14.0 g·kg-1),另设正常组,各组大鼠分别ig相应的药物,容量为7.5 mL·kg-1.模型组及正常组ig纯净水;二甲双胍组ig盐酸二甲双胍混悬液;五子降糖方低、中、高剂量组ig五子降糖方混悬液,干预6周.分别在ig前、ig后2周、4周、6周测空腹血糖及餐后2h血糖.ig后6周处死大鼠,取其左后肢大腿股直肌组织,检测GLUT4蛋白的表达.结果:与正常组比较,模型组T2DM大鼠空腹和餐后2h血糖升高,骨骼肌GLUT4蛋白表达水平降低,差异均具有统计学意义(P＜0.05);五子降糖方能够降低T2DM大鼠空腹血糖及餐后2h血糖水平,提高T2DM大鼠骨骼肌GLUT4蛋白表达水平,差异均具有统计学意义(P＜0.05).结论:五子降糖方可降低T2DM模型大鼠空腹及餐后2h血糖,作用机制可能与提高骨骼肌GLUT4蛋白表达水平有关.
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菩人丹超微粉对T2DM大血管损伤大鼠骨骼肌IRS-1,GLUT-4,PI-3K,NF-κB蛋白表达的影响
目的:观察菩人丹超微粉(Puren dan superfine powder,PRD)对2型糖尿病(T2DM)大鼠骨骼肌组织胰岛素受体底物1(IRS-1)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响,探讨PRD调控糖尿病糖脂代谢紊乱,保护大血管内皮损伤的分子机制.方法:采用灌胃脂肪乳结合1次性尾静脉快速注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,30 mg· kg-1)法复制T2DM模型.低、中、高剂量PRD(0.885,1.770,3.540 g·kg-1)每日ig给药1次,连续给药4周,罗格列酮(0.36×10-3 g·kg-1)为阳性对照药.Western blot法测定各组大鼠骨骼肌组织中IRS-1,PI3K,GLUT-4,NF-κB蛋白的表达,并用Quantity One图像分析确定杂交带的吸光度积分值.结果:T2DM大血管病变大鼠骨骼肌组织IRS-1,PI3K,GLUT4蛋白表达与正常对照组比较明显降低(P＜0.01),NF-κB蛋白表达显著升高.各组药物治疗后,低、中、高剂量PRD均能显著提高T2DM大鼠骨骼肌组织PI3K的表达,PRD中、高剂量组大鼠骨骼肌IRS-1,GLUT4的蛋白质表达水平明显升高(P＜0.01),NF-κB蛋白质表达水平显著降低(P＜0.05),阳性对照药罗格列酮也有相应作用.结论:PRD通过促进IRS-1,GLUT4和PI3K蛋白表达,抑制NF-κB蛋白表达,恢复胰岛素信号转导通路,抑制糖尿病状态下的炎症因子表达,从而有效改善胰岛素抵抗,降低血糖、血脂,保护大血管内皮损伤.
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基于气机理论研究针刺对糖尿病大鼠胰岛素受体结合率及葡萄糖转运蛋白4表达的影响
目的:运用气机理论选穴,研究针刺对糖尿病大鼠胰岛素受体结合率及葡萄糖转运蛋白4(GULT4)表达的影响.方法:雄性清洁级SD大鼠70只,随机抽取20只为正常组,其余单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)复制糖尿病大鼠模型,造模成功共44只,随机分为两组:模型组与针刺组,各22只.针刺组针刺双侧天枢、双侧足三里、百会、双侧涌泉,15min/次,1次/d,治疗6d休息1d,疗程6周.治疗6周后,ELISA法检测大鼠血清胰岛素;Kilp法制备肝脏及腓肠肌细胞膜,Nishimura方法测定胰岛素结合率;RT-PCR检测大鼠骨骼肌组织GU LT4基因表达.结果:与正常组比较,模型组FPG、2hPG、FINS、IRI均升高,胰岛素结合率、腓肠肌GLUT4蛋白及GLUT4 mRNA的表达水平明显降低(P＜0.05);治疗后,针刺组与模型组比较,FPG、2hPG、FINS、IRI均明显降低,胰岛素结合率、GLUT4蛋白及GLUT4 mRNA的表达水平显著升高(P＜0.05).结论:针刺天枢、足三里、百会、涌泉,可以降低糖尿病大鼠的血糖及胰岛素水平,提高胰岛素受体结合率,在分子水平上影响GLUT4的表达.也为进一步研究“升阳(气)抑阳(热)”治法,为开拓气机理论在糖尿病的防治应用提供实验数据支持.
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益气活血通腑法对类2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4表达的影响
目的:研究益气活血通腑中药(加味桃核承气汤)对类2型糖尿病大鼠的作用及骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA表达的影响.方法:采用低剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射加高热量饲料喂养导致大鼠类2型糖尿病模型,灌胃给药4周,检测糖耐量、空腹血清胰岛素及骨骼肌GLUT4 mRNA表达量的变化.结果:造模后大鼠注射葡萄糖后30、60、120min血糖显著升高,血清空腹胰岛素水平无明显变化,骨骼肌GLUT4 mRNA表达量显著降低.给药4周后,各药对空腹血清胰岛素水平和注糖后30、60 min血糖无明显影响,但中药低剂量、二甲双胍、罗格列酮可使注糖后120min血糖下降;罗格列酮尚可降低空腹血糖.二甲双胍可使骨骼肌GLUT4 mRNA表达量明显升高,中药高剂量可防止GLUT4 mRNA表达量的降低,但罗格列酮对GLUT4 mRNA表达量的降低无影响.结论:低剂量STZ腹腔注射加高热量饲料喂养可导致大鼠类2型糖尿病胰岛素抵抗样改变,益气活血通腑中药可改善此模型的糖耐量异常,其作用与增强其骨骼肌GLUT4基因表达,促进骨骼肌对葡萄糖的摄取和利用有关.
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匙羹藤提取物干预KKAy小鼠脂肪组织胰岛素抵抗的实验研究
目的:探讨匙羹藤(GS)改善KKAy小鼠脂肪组织胰岛素抵抗(IR)的作用机制.方法:KKAy小鼠分为模型组(DM)和GS组,C57BL/6J小鼠为正常组(NC),给药8周后测定血清胰岛素(Fins)、胰岛素敏感指数(ISI)、过氧化物酶增殖体受体-γ(PPAR-γ)、PI3 κ-p85、Cb1衔接蛋白(CAP)、葡萄糖转运蛋白4(GluT-4) mRNA水平.结果:与DM比较,FPG、Fins降低,ISI升高,PPAR-γmRNA、PI3κ-p85mRNA、CAPmRNA、GluT-4 mRNA表达量升高.结论:GS可上调脂肪组织PPAR-γ、PI3 κ-p85、CAP、GluT-4mRNA的表达量,改善IR.
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化浊颗粒对2型糖尿病大鼠磷脂酰肌醇3激酶和葡萄糖转运蛋白4基因表达的影响
目的：观察化浊颗粒对2型糖尿病(T2DM)大鼠磷脂酰肌醇3激酶(PI-3K)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)在骨骼肌组织中表达的影响,探讨其对PI-3K及GLUT4信号通路激活的作用。方法采用高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立T2DM大鼠模型,随机分为化浊颗粒组、罗格列酮组、模型组。各给药组给予相应药物灌胃,模型组与空白组予生理盐水灌胃,观察大鼠一般状态、体质量及摄食量。干预10周后,予10%水合氯醛麻醉大鼠,检测大鼠空腹血糖(FBG)、葡萄糖耐量试验餐后2 h血糖(2 h PG)、空腹胰岛素(FINS)水平；RT-PCR检测各组大鼠骨骼肌组织PI-3K和GLUT4 mRNA表达的水平。结果与模型组比较,化浊颗粒组与罗格列酮组大鼠FBG、2 h PG及FINS水平降低(P＜0.05),PI-3K及GLUT4 mRNA表达水平升高(P＜0.05)。结论化浊颗粒具有提高胰岛素敏感性的作用,与激活骨骼肌组织胰岛素信号传导通路中PI-3K和GLUT4 mRNA的表达有关。
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葛根芩连汤激活PPARγ上调脂联素和GLUT4表达改善脂肪胰岛素抵抗
该实验研究复方葛根芩连汤体内外改善脂肪胰岛素抵抗(IR)的药效及相关分子机制.采用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,葛根芩连汤给药干预3个月,检测糖尿病大鼠空腹血糖、胰岛素和糖化血清蛋白,计算胰岛素抵抗指数.提取大鼠脂肪组织总RNA,qPCR检测糖尿病大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂联素(ADPN)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)、葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)、乙酰辅酶A羧化酶α基因(ACACA)和乙酰辅酶A羧化酶β(ACACB)基因mRNA表达水平.1μmol·L-1地塞米松诱导建立稳定IR-3T3-L1脂肪细胞模型,CCK-8法检测葛根芩连汤含药血清对细胞活力的影响,采用5％,10％,15％葛根芩连汤含药血清干预24 h检测细胞培养液葡萄糖含量、游离脂肪酸(NE-FA)含量和外泌脂联素含量,测定细胞内甘油三酯(TG)含量.荧光定量qPCR和Western blot分别检测IR-3T3-L1细胞PPARγ,ADPN和GLUT4mRNA和蛋白质表达水平.结果显示葛根芩连汤给药3个月可明显降低糖尿病大鼠的空腹血糖、胰岛素和糖化血清蛋白(P＜0.01),下调胰岛素抵抗指数(P＜0.05),具有较好的降糖效果.葛根芩连汤可显著升高糖尿病大鼠脂肪组织PPARγ,ADPN,GLUT4,GLUT2,ACACA和ACACB基因mRNA表达水平.5％,10％,15％葛根芩连汤含药血清均可显著性上调IR-3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗量(P＜0.0l);降低IR-3T3-L1细胞TG含量(P＜0.01);一定程度下调NEFA含量但并不显著.此外,葛根芩连汤含药血清剂量依赖上调外泌ADPN,15％含药血清上调ADPN非常显著(P＜0.01);各剂量含药血清显著上GLUT4表达(P＜0.01).该研究显示葛根芩连汤激活PPARγ上调ADPN和GLUT4调节糖代谢改善脂肪IR.
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运动诱导甘丙肽分泌对2型糖尿病大鼠胰岛素敏感性的影响
目的:探讨运动后甘丙肽(GAL)分泌增加对2型糖尿病大鼠大鼠胰岛素敏感性的影响.方法:糖尿病大鼠随机分4组:安静对照组、运动对照组、安静用药组、运动用药组.安静对照组及运动对照组均腹腔注射生理盐水,安静用药组及运动用药组腹腔注射GAL.快速血糖仪测空腹血糖以计算胰岛素抵抗指数,Western Blot法检测骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)含量.结果:运动对照组与安静对照组以及运动用药组与安静用约组相比较.正糖钳的葡萄糖输注速率显著性增加(P<0.05);安静用药组及运动用药组实验后比实验前血清胰岛素均显著增加(P<0.05),安静用药组实验后比实验前胰岛素敏感指数有非常显著下降(P<0.01);运动对照组比安静对照组骨骼肌GLUT4蛋白含量非常显著性提高(P<0.01),运动用药组比安静用药组GLUT4蛋白含量显著性提高(P<0.05).结论:运动诱导GAL浓度增加,可能主要依靠增加GLUT4膜转运量或提高GLUT4活性来提高胰岛素敏感性.
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氯氮平和利培酮对大鼠脂肪细胞GLUT4的影响
目的:比较氯氮平和利培酮对大鼠血糖(FPG)、血浆胰岛素(FINS)、胰岛素敏感指数(ISI)以及脂肪细胞上葡萄糖转运蛋白( GLUT)4表达的影响,探寻非典型性抗精神病药物影响糖代谢的机制.方法:18只雄性SD大鼠随机均分成氯氮平组(20mg · kg-1·d-1)、利培酮组(2 mg·kg-1·d-1)和空白对照组,每组6只在第1、14、28天分别检测FPG、FINS,计算ISI,在第28天处死大鼠分离获得脂肪细胞内外膜,用Western - blot法测量大鼠脂肪细胞内外膜上GLUT4的含量.结果:基线时各组大鼠的FPG、FINS、lSI水平无明显差异(P＞0.05).14天后,氯氮平组大鼠的FPG水平高于空白对照组(P＜0.05)；氯氮平组大鼠的ISI水平低于空白对照组,差异有显著性(P＜0.05).28天时,氯氮平组的FPG、FINS均高于空白对照组,差异有显著性(P＜0.05)；ISI水平低于对照组且差异有显著性(P＜0.05)；利培酮d组与空白对照组相比差异无显著性.各组大鼠脂肪细胞内外膜上的葡萄糖转运蛋白的量均较空白对照组下降,但差异无显著性.结论:氯氮平影响外周组织细胞对葡萄糖的吸收和利用,降低外周组织GLUT4的表达.利培酮对糖代谢的影响没有氯氮平明显,两者机制可能不同.
关键词： 非典型性抗精神病药物 胰岛素抵抗 葡萄糖转运蛋白4 氯氮平 利培酮 -
厄贝沙坦对糖尿病鼠心肌组织葡萄糖转运蛋白4干预研究
目的探讨厄贝沙坦对糖尿病鼠心肌组织中葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的作用及其意义.方法 8周龄体重为250～300 g雄性Wistar大鼠27只,腹腔注射STZ(50 mg/kg)制成糖尿病鼠模型,饲养11周;观察A组(正常对照组)、B组(糖尿病对照组)、C组(厄贝沙坦用药组:血糖稳定1周后厄贝沙坦50 mg/kg·d 灌胃)造模前、造模后48小时及造模后11周心肌组织GLUT4 (免疫组化法测定)及血糖变化(普通生化法测定).结果 (1)GLUT4的变化:B组术后48 h GLUT4无明显改变,但术后11周时GLUT4水平明显下降[(208.89±10.96 vs 143.56±16.99) 组化灰度值;P<0.01];C组术后48 h GLUT4未见明显变化.(2)血糖的变化:A组,不同时间血糖无明显变化,B组,术后48 h及术后11周,血糖升高[(16.89±2.46,18.45±2.60 vs 3.80±1.09)mmol/L,P均小于0.01].C组,术后48 h血糖升高,术后11周时血糖较48 h有所下降但未达统计学意义[(18.32±4.06 vs 15.84±2.60)mmol/L,P＞0.05).结论糖尿病时心肌组织GLUT4水平下降可能参与糖尿病心肌病的形成;厄贝沙坦具有上调糖尿病心肌组织GLUT4的作用,提示ARB在糖尿病患者中早期应用还能改善病人糖的摄取、代谢.
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阿托伐他汀对自发性高血压大鼠肥厚心肌中过氧化物酶体增殖物激活受体γ及葡萄糖转运蛋白4表达的影响
目的 观察阿托伐他汀对自发性高血压大鼠(SHR)心肌中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)及葡萄糖转运蛋白4 (GLUT4)表达的影响,探讨阿托伐他汀改善SHR左心室肥厚的可能机制.方法 16只SHR随机分为高血压模型组(n=8)与阿托伐他汀组(n=8),8只Wistar-Kyoto(WKY)大鼠作为正常血压对照(WKY组),阿托伐他汀组按阿托伐他汀50 mg/(kg·d)标准予以灌胃,WKY组与高血压模型组均予以等容量蒸馏水灌胃.每隔2周测1次血压.10周末处死,测血脂,计算左心室质量指数(LVMI=左心室质量/体质量).HE染色观察心肌组织形态,免疫组化法及RT-PCR法检测大鼠心肌组织PPARγ、GLUT4的表达.结果 高血压模型组LVMI高于WKY组[(3.77±0.47)比(2.85±0.18)mg/g,P＜0.05],高血压模型组心肌组织中PPARγ、GLUT4的表达水平低于WKY组(PPARγ:1.15±0.02比1.23±0.03；GLUT4:1.07±0.08比1.21±0.06,均P＜0.05)；经阿托伐他汀干预后,阿托伐他汀组高血压大鼠LVMI低于高血压模型组[(3.26±0.29)比(3.77±0.47)mg/g,P＜0.05],阿托伐他汀组PPARγ、GLUT4高于高血压模型组(PPARγ:1.19±0.04比1.15±0.02,GLUT4:1.13±0.03比1.07±0.08,均P＜0.05)；阿托伐他汀干预前后,SHR血压、血脂水平差异无统计学意义(均P＞0.05).结论 阿托伐他汀具有调脂作用以外的抑制高血压左心室肥厚的作用,其机制可能与上调肥厚心肌组织中PPARγ、GLUT4的表达有关.
关键词： 阿托伐他汀 过氧化物酶体增殖物激活受体γ 葡萄糖转运蛋白4 心肌肥厚
