解剖科学进展杂志
Progress of Anatomical Sciences 해부과학진전
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中国解剖学会
- 影响因子: 0.45
- 审稿时间: 3-6个月
- 国际刊号: 1006-2947
- 国内刊号: 21-1347/Q
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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人血管生成素-1的克隆和毕氏酵母表达载体pPIC9K/Ang-1的构建
目的克隆Ang-1基因,分析其结构特征,构建pPIC9K/Ang-1毕氏酵母表达载体,为进一步研究Ang-1防治糖尿病视网膜病变的血管渗漏奠定物质基础.方法提取人胎盘组织总RNA,RT-PCR扩增出Ang-1基因片段,并将其克隆到PGEM-T Easy 载体中进行序列分析,再亚克隆到毕氏酵母表达载体pPIC9K中.结果从胎盘组织总RNA中,RT-PCR扩增出1.5kb的cDNA片段,成功构建了PGEM-T/Ang-1载体,Blast序列分析与GenBank中AY121504一致.两者成熟区cDNA的核苷酸和氨基酸同源性分别大于99%和98%,成功构建pPIC9K/Ang-1毕氏酵母表达载体.结论从人的胎盘中克隆Ang-1基因无突变,成功构建pPIC9K/Ang-1毕氏酵母表达载体,满足表达蛋白质的需要.
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新生小鼠眼睑体外培养的形态学研究
目的通过体外器官型培养法,研究小鼠眼睑体外生长发育的特点.方法实验用自然开睑前不同年龄的新生C57BL/6J小鼠,切取彼此融合的上、下眼睑,在琼脂小岛上做器官型培养,动态观察眼睑的外形变化和组织切片H-E染色观察.结果新生小鼠上、下眼睑经过15天的培养均未发生分离,睑裂沟处的细胞凋亡过程未表现出在体情况下的有序性.结论眼睑的分离和细胞的凋亡依赖于整体的神经体液调节,而眼睑局部的细胞无法独立有序地完成整个分离过程.
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胎膜早破NF-κB在胎膜的表达和母血中IL-15的含量
目的探讨胎膜早破时NF-κB在胎膜的表达和母血中IL-15的水平.方法免疫组化方法检测30例胎膜早破(PROM)和30例非PROM孕妇胎膜中NF-κB P65亚单位的表达,ELISA法检测两组孕妇血清IL-15含量.结果PROM组胎膜NF-κB P65亚单位阳性细胞数和IL-15在母血中含量高于非PROM孕妇(P<0.001).PROM组胎膜NF-κB P65亚单位阳性细胞数和母血中IL-15含量随着破膜时间延长明显升高(P<0.05).PROM绒毛膜羊膜炎组胎膜中NF-κBP65亚单位阳性细胞数和母血中IL-15含量高于非绒毛膜羊膜炎组(P<0.001).结论PROM中胎膜NF-κB活性升高和孕妇血清中IL-15含量升高,PROM伴绒毛膜羊膜炎时二者亦升高.
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丝裂素激活蛋白激酶在良性前列腺增生中的表达及临床意义
目的对比研究丝裂素激活蛋白激酶(MAPKs)在增生与正常前列腺组织中的表达,探讨良性前列腺增生发病的分子生物学机制.方法采用Western Blot及免疫组织化学方法,检测增生及正常前列腺组织中ERK、JNK和p38MAPK的表达情况.结果与正常前列腺组织相比,增生组织ERK的平均灰度值(white~black,0~255)和阳性细胞百分率明显升高,JNK和p38MAPK的检测结果则与之相反.ERK染色主要位于细胞核和细胞质内,在增生组织上皮细胞及基质细胞的染色阳性率均高于正常前列腺组织.结论 ERK在良性前列腺增生组织中过表达,从而导致细胞增生指数增加,JNK和p38MAPK低表达导致凋亡减少,促进疾病的发生和发展.
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降钙素基因相关肽对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马Fas mRNA表达的调节作用
目的研究外源性降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马Fas mRNA表达的影响,探讨降钙素基因相关肽对缺血再灌注脑神经组织的作用.方法用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,应用原位杂交和显微图象分析方法检测局灶性脑缺血再灌注大鼠海马Fas mRNA的表达. 结果假手术组大鼠海马未见Fas mRNA阳性表达;缺血再灌注组(缺血再灌注不同时间段6 h,12 h,24 h,48 h,72 h)海马Fas mRNA明显过表达;注射CGRP后海马区Fas mRNA阳性表达细胞平均光密度值明显低于缺血再灌注组(P<0.01). 结论经颈动脉注入外源性CGRP下调缺血神经元Fas mRNA的表达, 可能是外源性CGRP对缺血神经元保护作用的机制之一.
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脱细胞异体神经基质移植物对脊髓前角运动神经元的保护作用
目的探讨脱细胞神经基质移植物异体移植对脊髓前角运动神经元的保护作用.方法 Wistar大鼠30只,10只用化学提取法制备坐骨神经脱细胞基质移植物;另20只分为实验组(坐骨神经缺损移植物桥接组)和对照组(坐骨神经缺损组),每组10只.动物饲养3到4个月后取移植物、脊髓腰6-骶1节段和术侧腓肠肌,做HE、尼氏和AchE结合镀银染色以及电镜标本,进行组织学和超微结构观察,并对脊髓前角细胞的数量做统计学分析.结果实验组动物移植术后3到4个月术侧下肢行走时,后蹬动作有力,足趾能分开,步态趋于正常;针刺足底有逃避动作.对照组动物术侧下肢的运动和感觉功能未见恢复.实验组动物的移植物内见有大量再生的神经纤维,髓鞘结构清晰,腓肠肌内见有再生的神经纤维束和运动终板.实验组移植侧和对照组缺损侧脊髓腰6到骶1节段前角外侧群细胞的数量比正常侧减少,尤以对照组为甚.实验组移植侧前角细胞比正常侧的前角细胞数减少而移植侧前角细胞数比对照组缺损侧明显减少(P<0.01).结论脱细胞异体神经基质移植物桥接周围神经缺损对运动神经元胞体的存活具有良好的保护作用.
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广西壮族与汉族人群IL-1β基因5号外显子+3953C/T多态性的研究
目的观察白细胞介素-1β(IL-1β)基因5号外显子+3953C/T多态性在中国广西壮、汉两民族中的分布.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测155名壮族人和195名汉族人的白细胞介素-1β基因5号外显子+3953C/T多态性,计算其基因型和等位基因频率,并结合文献与高加索人、非洲白人进行了不同种族间的分析比较.结果 在壮族人中CC、CT基因型分别为94.8%、5.2%;在汉族人中CC、CT基因型分别为93.3%、6.7%.两组IL-1β基因型的分布频率差异无显著性(P>0.05).二者与高加索人、非洲白人比较,发现IL-1β基因型分布及等位基因频率有显著差异(P<0.01).结论 IL-1β基因5号外显子+3953C/T多态性在广西壮、汉两族分布无差异,但与高加索人、非洲白人分布有差异.
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Aβ海马注射的AD大鼠模型海马MAPK表达变化
目的探讨丝裂酶原激活蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)在阿尔茨海默病(Alzheimer's diease,AD)发病中的变化及其可能机制.方法 将β-淀粉样肽(beta-amyloid peptide,Aβ)1~40 1μl(10 μg/μl)在立体定位仪下注入大鼠海马建立大鼠AD模型,2周后测长时程增强(long term potentiation,LTP)、免疫组化SABC法检测MAPK的蛋白表达.结果 AD模型组Aβ注射2周后,模型组刺激前后fEPSP斜率变化及高频刺激增加的幅值与对照组相比显著下降(P<0.01);模型组海马CA1区、CA2区磷酸化的MAPK蛋白的表达显著低于正常对照组(P<0.05或P<0.01).结论 Aβ可能通过抑制MAPK信号通路,导致大鼠海马LTP降低,参与AD学习记忆障碍和痴呆形成.
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新型胆碱酯酶抑制剂(NAI)对AD大鼠海马结构和红细胞膜AChE的抑制作用
目的探讨新型胆碱酯酶抑制剂(NAI)对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马结构神经元胞浆和血液红细胞膜的抑制作用,为AD病的临床治疗提供新的基础研究资料.方法选用48只Wistar雄性大鼠,随机分为4组(n=12):NAI组、石衫碱甲(Hup)组、AD组、空白(Blank)组.将前3组大鼠切断穹窿-海马伞制作AD动物模型.2周后静脉给予NAI和Hup,采用分光光度计对各组大鼠海马结构神经元胞浆和红细胞膜分别进行AChE酶活性测定.结果 AD海马结构神经元胞浆和红细胞膜的AChE活性均较Blank组明显增高(P<0.01);NAI组上述两个部位的AChE活性较AD组显著降低(P<0.01),Hup组与AD组比较其活性也降低(P<0.05).并且NAI组上述两个部位的AChE活性均较Hup组降低(P<0.05).结论 NAI和Hup对AD大鼠海马结构神经元胞浆和血液红细胞膜AChE均具有较强的抑制作用,NAI抑制作用强于Hup.
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体外培养小鼠骨髓树突状细胞的扩增、鉴定及形态学观察
目的建立体外培养和扩增树突状细胞(dendritic cell-DC)的方法,并进行形态学观察. 方法在无菌条件下提取BALB/c小鼠骨髓细胞,分离单个核细胞,以小鼠重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素(IL-4)协同诱导下培养,免疫组织化学染色、光镜和电镜下观察树突状细胞的形态. 结果体外培养2周后小鼠树突状细胞可达70%~80%,光镜下可见典型的树突状细胞形态,S-100蛋白染色均呈阳性.电镜下,培养的细胞具有典型树突状细胞的形态特征,细胞功能活跃. 结论体外大量培养和扩增小鼠骨髓树突状细胞,具有典型的树突状细胞的形态,为研究树突状细胞的功能和表型以及抗肿瘤作用提供体外实验材料.
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狗肾脏感觉神经来源
目的探讨狗肾脏感觉神经来源.方法应用辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪技术,将CB-HRP注入一侧狗肾脏内,动物存活2~3 d,TMB法成色反应,光镜下观察.结果狗肾脏感觉神经来源于双侧背根节T5~L3节段,主要集中在T10~L2节段,占背根节内标记细胞总数90.56%,符合既集中(T10~L2)又分散(T5~L3)的分布特点,无左右侧差异;背根节内标记细胞以卵圆形、圆形的细胞为主,少见细胞突起,细胞分布弥散,多分布于节的边缘部位.在4例注射侧迷走神经结状节内也见有少量标记细胞,体积大,突起不明显.结论狗肾脏感觉神经来源于双侧背根节T5~L3段和同侧迷走神经结状节细胞.
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体外培养不同代次人皮肤成纤维细胞超微结构的研究
目的观察正常人皮肤成纤维细胞体外培养过程中超微结构的改变.方法将下2人二倍体成纤维细胞进行连续传代培养,以不同代次的细胞为实验对象,通过倒置相差普微镜与透射电镜对各代细胞进行观察.结果 45代以内的细胞生长较迅速,45代后的细胞生长逐渐缓慢,65代细胞几乎无增殖趋势.40代以内细胞的超微结构基本正常,41~65代细胞出现核膜内折,细胞核/浆比例减小,细胞表面突起和微绒毛减少.结论 40代以内成纤维细胞适合做组织工程的种子细胞.
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加压素在自发性高血压大鼠与正常大鼠下丘脑视上核、室旁核神经元内表达
目的观察加压素(AVP)在自发性高血压大鼠(SHR)与正常大鼠下丘脑视上核(SON)、室旁核(PVN)内的分布.方法应用光镜和免疫细胞化学技术.结果 SHR的AVP阳性细胞内分泌颗粒密集呈棕黄色,正常大鼠组则染色较浅.SHR大鼠SON内AVP阳性神经元百分数(69.30±18.10%)明显多于正常大鼠(59.53±16.97%,P<0.05),而两组大鼠PVN内AVP的表达无明显差异.结论 AVP在下丘脑的血压调节活动中起着重要的介导作用,中枢AVP含量的异常增加可能与高血压的发病有关.
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PCNA和c-erbB-2在喉良恶上皮的表达及其临床病理意义
目的探讨PCNA和c-erbB-2在喉良恶性上皮中的表达程度及其与病理分级和预后的关系.方法应用免疫组织化学方法探讨10例单纯性增生、30例异型增生及40例喉鳞状细胞癌的PCNA、c-erbB-2表达.结果单纯性增生PCNA指数为7.0%,轻、中、重度异型增生PCNA指数分别为13.2%、19.4%、26.6%.高、中、低分化鳞癌PCNA指数分别为32.7%、55.4%、78.3%.单纯性增生、异型增生和鳞癌间PCNA指数存在显著的统计学差异(P<0.01).但高分化鳞癌与重度异型增生间PCNA指数无统计学差异. c-erbB-2在单纯性增生及异型增生中均无表达,在鳞癌中有表达,但在高、中、低分化鳞癌间无显著差异.对40例喉鳞癌随访5年,有16例死亡,其中13例PCNA指数>78%,即PCNA指数越高,分化越差,预后越差.结论 PCNA具有较好的客观性评价异型增生的程度和鳞癌分化程度,与患者预后密切相关.c-erbB-2不能作为异型增生和癌的分级的指标.
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17-β雌二醇对卵巢去势大鼠延髓神经元超微结构的影响
目的观察雌激素对卵巢去势大鼠延髓神经元超微结构的影响.方法 30只雌性成年SD大鼠随机分为去卵巢组(A组)、雌二醇组(B组)和假手术对照组(C组),A组和B组动物卵巢切除后10天超分别皮下注射生理盐水0.1 ml/d、17-β雌二醇20 μg/kg/d.C组动物,只切开腹膜,不切除卵巢,手术后10天起分别皮下注射生理盐水0.1 ml/d.各组动物连续用药6周后,观察结果.结果 血清雌二醇的浓度A组明显低于C组(P<0.01),B组明显高于A组(P<0.01),而B组和C组之间比较无差异.A组动物延髓孤束核神经元和神经胶质细胞超微结构有明显的损伤表现,细胞核形状不规则,核周间隙局部明显增宽,胞浆内有空泡,线粒体肿胀,嵴断裂;神经纤维有脱髓鞘,髓鞘板层分离,有空泡,线粒体肿胀.B组动物,在应用雌激素替代治疗后,延髓神经元的损伤表现明显减轻.C组神经元形态结构正常.结论 雌激素对去势大鼠延髓神经元有明显地保护作用.
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大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养及缓激肽的作用靶细胞探讨
目的建立稳定的原代大鼠脑微血管内皮细胞培养方法,并在体外探讨不同剂量缓激肽的作用靶细胞,进一步阐释缓激肽开放血脑和血肿瘤屏障的机理.方法运用免疫荧光测定原代培养的脑血管内皮细胞、星形胶质细胞及C6胶质瘤细胞在不同剂量缓激肽作用前后的细胞内钙离子变化,根据给药前后的荧光改变来确定不同剂量缓激肽的作用靶点细胞.结果小剂量缓激肽(终浓度:1μmol/L)可以引起C6胶质瘤细胞内的钙离子水平升高,而只有大剂量(终浓度:10μmol/L~1mmol/L)缓激肽才能触发星形胶质细胞内的钙离子水平升高,脑微血管内皮细胞对大、小剂量缓激肽均无任何反应.结论缓激肽的直接作用靶点是胶质细胞及C6胶质瘤细胞,缓激肽调节脑血管内皮细胞通透性的作用可能需要某些细胞间信使的参与.
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神经垂体分泌物释放入脑脊液主要途径结构基础的电镜研究
目的探讨神经垂体分泌物直接释放入脑脊液途径的结构基础.方法透射电镜和扫描电镜观察大鼠神经垂体.结果神经垂体无髓神经纤维终止于毛细血管或垂体细胞周围,垂体细胞突起与神经纤维膨体及终末之间形成细胞间池.有孔型毛细血管内皮外有基膜与血管周隙分隔,血管周隙内可见到完整的膜包分泌颗粒(100~300 nm).神经垂体表面的囊上皮孔(2~5 μm)附近经常可见分泌颗粒.结论细胞间池-血管周隙-囊上皮孔,构成了神经垂体分泌物释放入脑脊液主渠道的结构基础.
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干细胞与周围神经损伤修复
目前周围神经缺损的修复仍是临床的一大难题.周围神经系统具有再生的潜能,但在自体神经移植中受到取材长度的限制,近年来许多学者将体外培养扩增的大量雪旺细胞种植到神经导管中,以引导周围神经再生,然而在适当条件下难以维持大量的雪旺细胞,雪旺细胞传代后形态和功能逐渐改变.体外培养的干细胞,尤其是中枢来源的干细胞,具有低免疫原性,可以分化为雪旺细胞,移植至受损部位后可促进神经再生.本文综述了干细胞在修复周围神经损伤中的应用及其在再生过程中所发挥的作用.
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真核细胞的铜转运及稳态调节
铜是各种生物都必需的一种微量元素.在长期进化过程中真核生物形成了一套完整的铜转运和稳态调节系统,从酵母到灵长类的各种生物都具有高度同源性的调控组件.包括铜离子的摄取、细胞内转运、将配至靶蛋白、以至终排出细胞的各个过程都相互衔接,受到这个调控体系的精密调节.
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消化道蠕动的起搏器与Cajal间质细胞
消化道蠕动是消化道平滑肌群的节律性收缩活动.越来越多的研究证据表明,这种活动是由一类叫做(pacemaker)起搏器的特殊细胞引起的.这些细胞可能就是分布在消化道平滑肌层间的(interstitial cells of Cajal)ICC.它们因分布的部位不同而形态各异.但它们都含有丰富的线粒体,呈c-Kit免疫染色阳性,并伸出很多突起形成网络.他们相互之间及与周围的平滑肌细胞之间以缝隙结合相连接.这篇综述主要介绍此类细胞的形态结构及分布特点.
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端粒、端粒酶与衰老及年龄的关系
衰老是一种多因素的复合调控过程,表现为染色体端粒长度的改变、DNA损伤、DNA的甲基化和细胞的氧化损害等,并已形成了许多学说,而端粒学说成为衰老研究的热点.本文综述了与衰老紧密相关的因素--端粒、端粒酶的结构及其与衰老和年龄关系的研究进展,阐明对端粒-端粒酶的作用将会在抗衰老方面有着十分重要的理论价值及实际意义.此外,利用端粒长度变化与年龄的相关性评估人的年龄将在法医学界显示其巨大的应用前景.
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糖尿病性神经病变的机理
糖尿病性神经病变是糖尿病的常见慢性并发症之一,可引起神经系统结构和功能的改变.糖尿病性神经病变的机理复杂而又不甚明了.近年来发现糖尿病性神经病变与血管、代谢、神经营养因子、自身免疫、炎症反应、氧自由基、损伤和遗传等因素相关.本文就近年来糖尿病性神经病变机理的研究及进展作一综述.
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Wnt信号通路与神经发生
Wnt通路是细胞增殖分化的关键调控环节,在胚胎发育和肿瘤发生中起着重要作用.Wnt途径参与了基因表达调节、细胞迁移粘附、细胞极化等过程,同时还与其它信号通路存在交叉协同.Wnt/β-catenin通路在进化过程中高度保守,此通路的主要分子构成及相关调控机制已得到基本阐明.对神经系统而言,已有足够证据显示此通路参与了对神经前体细胞增殖,分化以及决定细胞命运的调控.近年更有研究显示,Wnt/β-catenin途径对神经系统的发育包括皮层模式建立,突触形成等也是至关重要的.
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内侧隔核与学习记忆
基底前脑胆碱能系统一直被认为与动物的学习记忆能力密切相关.内侧隔核是基底前脑系统的一个重要核团,与周围结构的纤维联系比较复杂.它通过隔海马通路影响动物的学习与空间记忆能力.本文主要是对内侧隔核的解剖关系、内侧隔核与海马和学习记忆的关系以及影响内侧隔核胆碱能神经元功能变化的因素等方面进行综述.
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一氧化氮合酶与主动脉瘤
一氧化氮合酶(NOS)通过催化L-Arg生成NO参与动脉瘤的变化.本文通过一氧化氮合酶在调节基质金属蛋白酶(MMPs)活性、调节平滑肌细胞凋亡以及动脉壁的氧化损伤中的作用对其与主动脉瘤形成的关系作一综述,若针对一氧化氮合酶在主动脉瘤形成中的关键环节进行干预,有可能为主动脉瘤的治疗提供新的途径.
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室管膜和室管膜上超微结构
脑脊液是中枢神经系统的一种特殊内环境,又是全身体液系统的一部分.结合大量的动物实验和临床观察,有学者提出了由这种物质和信息交流所构成的一种特殊的信息交流网络-"脑-脑脊液神经体液回路".本文对"脑-脑脊液神经体液回路"的主要结构基础-室管膜和室管膜上超微结构的形态学特点及功能进行综述.
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人体解剖学的教学资源库建设
人体解剖学是研究人体形态结构和功能的学科,是医学生的必修课,与"生理学"、"病理学"和"药理学"并列合称"三理一剖",构成基础医学的不可动摇的支架和基石.随着科学技术的发展与进步,招生规模的扩大,生物教学资源的馈乏日见突出,建立和完善人体解剖学资源库是一个缓解矛盾的好方法.
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建构主义在解剖小课中的应用--自主五环教学模式
建构主义早由著名的瑞士心理学家皮亚杰(J.Piaget)提出.建构主义学习理论认为,知识不是通过教师传授得到的,而是学生在一定的情景下,借助他人(包括教师和同学)的帮助,利用必要的学习资料,通过意义建构的方式而获得.在建构主义学习理论的指导下,笔者结合解剖小课教学实践,提出"目标导航、活化思维、自主讨论、问题探究、达标导练",这一自主五环教学模式.
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护理本科专业解剖学教学内容的改革
护理本科专业是适应我国医学教育改革而诞生的新专业,学制一般为五年,但层次不同,包括高护本科、专升本、中外合资等.护理学专业的解剖学教学的课程结构、教学内容、学时数、教学方法等,各医学院校之间存在很大差别.特别是在教学内容上存在着不论什么专业,什么层次,教学内容区别不大,更没有主次之分的问题,我们认为不同层次,不同专业的解剖学教学内容、教学时数都不应该相同.
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疏松结缔组织铺片显示肥大细胞的一种新方法
疏松结缔组织铺片显示肥大细胞一直是组织学技术的难点之一.近年来我们通过反复探索实践,终于成功摸索出"肥大细胞硫堇-甲苯胺蓝染色法",结果十分理想.现报告如下.1 材料取小白鼠一只,断头放血,打开腹腔取出肠系膜,将其均匀地平铺在载玻片上,稍干燥后入甲醛-酒精(F-A)液固定24 h.F-A液配方:甲醛(37~40%)10 ml,无水乙醇80 ml,蒸馏水10 ml.
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前臂外侧皮神经替代桡神经浅支一例
前臂外侧皮神经替代桡神经浅支早有报道,据<中国人体质调查(第一集)>的216例中有6例,较为少见,且替代类型较多.为进一步积累资料,并为临床提供解剖学基础,现报道如下.
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男性盆腔动脉,泌尿生殖系整体管道铸型法
1 材料男性新鲜尸体.填充剂:①低浓度填充剂:过氯已烯15 g,乙酸乙酯100 ml,邻苯二甲酸二丁酯5 ml,油画染料适量.②高浓度填充剂:过氯已烯25 g,丙酮100 ml,邻苯二甲酸二丁酯5 ml,油画染料适量.牙托材料:自凝牙托水100 ml,自凝牙托粉100 g,邻苯二甲酸二丁酯20 ml,油画染料适量.预制标本腐蚀盒.
年 | 期数 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 |
2013 | 01 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 |
2009 | 01 02 03 04 |
2008 | 01 02 03 04 |
2007 | 01 02 03 04 |
2006 | 01 02 03 04 |
2005 | 01 02 03 04 |
2004 | 01 02 03 04 z1 |
2003 | 01 02 03 04 |
2002 | 01 02 03 04 |
2001 | 01 02 03 04 |
2000 | 01 02 03 04 |