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超声造影在狗输精管显像中的作用
目的 利用声诺维超声造影观察正常雄狗输精管和附睾管的通畅性,探讨超声造影在输精管和附睾管通畅性检查中的作用. 方法 解剖分离8只雄狗16条输精管,利用一次性留置针进行输精管穿刺.缓慢推注声诺维造影剂行超声造影,观察输精管及附睾管的显影情况. 结果 超声造影可见自插管处输精管逐渐显影,输精管呈均匀高增强,管径较均匀;附睾尾随后显影,呈较均匀的高增强;附睾体和附睾头部未能显影. 结论 超声造影可以清晰显示输精管、附睾管的通畅情况及走行情况,为其临床应用提供了一定的实验基础及参考.
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建立用清醒犬进行心血管安全性评价的遥测系统
目的许多药物能引起心电图中的QT延长.在新药心血管系统副作用检测方面,已经公认用清醒的动物进行的生理检测优于麻醉状态下的传统检测方法.
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GEM 21S?生长因子增强基质促进犬牙周组织再生的实验研究
目的 评价GEM 21S?对犬牙周组织再生的效应.方法 3只比格犬的双侧上、下颌第一前磨牙远中面和第一磨牙近中面手术制备箱状临界尺寸的三壁骨内缺损.缺损处植入GEM 21S?,常规翻瓣手术组为对照.术后4周取材做CBCT、组织学观察和评价.结果 GEM 21S?组有明显新附着形成.结论 GEM 21S?具有促进牙周新附着形成的潜力.
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实验性脑积水脑磷酸化合物含量变化
目的探讨实验性狗脑积水高能磷酸化合物及AMP含量变化.方法成年健康杂种狗随机分为诱导后3天、8天、4个月和对照组4组.经穿刺枕大池,注入白陶土(kaolin)悬混液诱导、建立经CT证实的狗脑积水模型.经高效液相色谱(HPLC)检测右侧顶叶1cm3离体脑组织高能磷酸化合物及AMP含量.结果同对照组比,脑积水脑组织AMP、ADP、ATP及磷酸肌酸(PCR)等的含量均下降,但不呈现一致性变化趋势.脑积水诱导后脑PCR的变化比ATP敏感,先于ATP下降,3天达显著差异(P＜0.05).诱导8天PCR几乎耗竭,ATP和ADP下降也严重(P＜0.01).4个月组经代偿ADP与PCR恢复良好,ATP与AMP部分恢复,但均低于对照组.结论脑积水早期脑处于能量状态极度困难时期,存在急性进行性缺血;脑积水慢性期脑仍持续存在轻度灌注和产能低下.
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狗主动脉弓无载荷状态与零应力状态的实验研究
目的 通过测量计算狗主动脉弓无载荷状态和零应力状态的几何参数,研究狗主动脉弓无载荷状态和零应力状态的几何形态和残余应变分布.方法 实验解剖取出3只狗的胸主动脉弓试样,结合计算机图像测量技术,用统计学方法得到狗主动脉弓的几何形态,用弧长分析法研究狗主动脉弓残余应变.结果 拟合得到无载荷状态和零应力状态下的主动脉内、外边界,获取了血管的弧长、厚度、张开角等信息,得到主动脉弓几何特征和残余应变的分布规律.结论 主动脉弓部血管是内外边界为椭圆状的均匀厚壁筒;主动脉张开角不沿主动脉环向坐标变化,动脉壁内的残余应变是均匀的.
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细胞因子对淋巴管内皮祖细胞的趋化和动员作用
目的 研究血管内皮生长因子C(VEGF-C)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对CD34+/CD133+/VEGFR-3+淋巴管内皮祖细胞(LEPCs)的趋化和动员作用.方法 用Percoll非连续密度梯度离心法分离狗外周血单个核细胞,再用流式细胞术分选VEGFR-3+ LEPCs,激光扫描共焦显微镜下观察细胞特征性标志物CD34和CD133的表达.通过跨膜迁移实验观察VEGF-C、SDF-1、MCP-1和G-CSF对LEPCs的趋化作用,并用扫描电镜观察迁移细胞的形态特征.在大鼠皮下分别注射VEGF-C、SDF-1、MCP-1和C-CSF,用流式细胞术检测外周血单个核细胞中LEPCs数目,同时用全自动血样分析仪计数白细胞.结果 与对照组相比,VEGF-C、SDF-1、MCP-1和G-CSF组跨膜迁移细胞的百分率增大,用VEGFR-3和CXCR-4阻断抗体处理后VEGF-C和SDF-1的趋化迁移作用明显降低.注射VEGF-C、SDF-1、MCP-1和G-CSF后,大鼠外周血中LEPCs的数量明显增多.未见白细胞显著增多.结论 VEGF-C、SDF-1、MCP-1和G-CSF对LEPCs有趋化迁移和动员作用,VEGF-C/VEGFR-3和SDF-1/CXCR-4信号途径在LEPCs趋化迁移方面起着重要调控作用.
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CD44介导的透明质酸对单核细胞黏附和迁移的作用
目的研究透明质酸(HA)在单核细胞中的分布,HA受体CD44和细胞问黏附分子-1(ICAM-1)在单核细胞中的表达以及HA及其受体对单核细胞黏附和迁移的影响.方法用Percoll非连续密度梯度离心法分离狗外周血单核细胞,然后用免疫荧光染色法标记单核细胞的HA、CD44和ICAM-1.通过用透明质酸酶(HAase)消化细胞表面的HA、在培养皿底面和细胞培养池膜上涂布HA和在培养液中添加HA,观察细胞表面的HA、底物HA和游离HA对细胞黏附和迁移的影响.以抗体阻断剂抑制CD44或ICAM-1,研究HA受体的介导作用.结果单核细胞表面和细胞内存在HA,并表达CD44和ICAM-1.消化细胞表面HA后,黏附和迁移的单核细胞数减少.在培养皿底面和细胞培养池膜上铺HA,黏附和迁移的细胞数增加.培养液中加入HA,黏附和迁移的细胞数减少.阻断CD44后,HA底物上黏附和迁移的细胞数减少,而阻断ICAM-1后黏附和迁移的单核细胞数无明显变化.结论单核细胞内外分布有HA.单核细胞表面的HA和底物HA促进细胞的黏附和迁移,但游离HA阻碍单核细胞的黏附和迁移.CD44介导HA对单核细胞黏附和迁移的作用.
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人工组织神经移植物修复狗缺损坐骨神经后腓肠肌的形态观察
目的了解复合型医用可降解材料制成的人工组织神经移植物辅加神经再生素修复狗坐骨神经缺损后,腓肠肌的形态变化.方法将人工组织神经移植物连接在狗的坐骨神经缺损30 mm处.以自体神经桥接和神经缺损的狗为对照组Ⅰ和Ⅱ.术后6个月时取腓肠肌进行称重、特殊染色和组织化学染色,显微镜下了解腓肠肌的形态变化并进行图像定量分析,同时了解肌纤维的超微结构变化.结果术后6个月,实验组腓肠肌的萎缩形态指标变化均轻于对照组Ⅱ,而与对照组Ⅰ相似. 结论经人工组织神经移植物修复缺损的坐骨神经后,使腓肠肌又重新获得神经支配,肌肉萎缩明显减轻.
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免疫球蛋白超家族黏附分子在淋巴管和不同血管内皮细胞的表达
目的比较免疫球蛋白超家族黏附分子在淋巴管、大血管和微血管内皮细胞的表达特点,探讨免疫球蛋白超家族黏附分子在淋巴管内皮细胞表达的意义.方法从狗的胸导管、颈总动脉、颈内静脉、肺微血管分离内皮细胞,利用免疫荧光标记法检测PECAM-1、ICAM-1、ICAM-3、VCAM-1和CD44在各种内皮细胞的表达,在荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜下观察,并用图像分析仪分析表达强度.结果动脉、静脉和肺微血管内皮细胞表达PECAM-1、ICAM-1、ICAM-3、VCAM-1和CD44.其中,ICAM-1和ICAM-3的表达较弱.VCAM-1在动脉和肺微血管内皮细胞的表达比静脉强.淋巴管内皮细胞表达PECAM-1、ICAM-1、ICAM-3和CD44,未观察到VCAM-1的表达.ICAM-3和CD44的表达比血管内皮细胞强.结论与动脉、静脉和微血管内皮细胞比较,淋巴管内皮细胞不表达VCAM-1,而ICAM-3和CD44表达较强,这有助于解释淋巴细胞和肿瘤细胞与淋巴管内皮的黏附以及淋巴管新生的机制.
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成人、成年狗鼻腔嗅黏膜成鞘细胞的纯化、培养与鉴定
目的研究成人和成年狗嗅黏膜成鞘细胞(OECs)的分离与培养的方法,为探索在人体和大型动物模型的自体嗅黏膜OECs移植修复脊髓损伤奠定基础.方法采用差速贴壁方法分别从成人和成年比格狗的嗅黏膜分离出OECs,分别培养25 d,在第6 d、10 d和25 d进行形态学观察,后进行OECs特异标记物NGFRp75的免疫细胞化学染色,鉴定成鞘细胞.结果原代培养的成人和成年狗嗅黏膜OECs在培养10 d后明显增多,25 d的OECs成熟,具有很长的突起,其形态多为双极和三极,NGFRp75的免疫组织化学染色呈阳性.本实验条件下,狗嗅黏膜OECs的生长状态比成人的好.而未进行差速贴壁的培养细胞则几乎均呈成纤维样细胞.结论差速贴壁的方法可以分离出较为纯化的成人、成年狗鼻腔嗅黏膜OECs.
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血管内皮生长因子-C促进淋巴管内皮细胞的增殖、迁移和F-肌动蛋白重组
目的研究血管内皮生长因子-C(VEGF-C)对于淋巴管内皮细胞增殖和迁移的作用,探讨VEGF-C促进淋巴管新生的机制. 方法从狗的胸导管分离和培养淋巴管内皮细胞.标记内皮细胞的VEGFR-3和F-肌动蛋白,在荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜下观察.用VEGF-C刺激后,计数增殖细胞和迁移细胞,测量细胞迁移距离,并与bFGF和VEGF的作用进行比较. 结果淋巴管内皮细胞表达VEGFR-3,静脉内皮细胞为阴性.bFGF和VEGF-C促进淋巴管内皮细胞的增殖,VEGF-C的作用比bFGF强.与对照组相比,bFGF、VEGF和VEGF-C组引起迁移细胞的数目增多和迁移距离增大,VEGF-C的作用强.在VEGF-C组的迁移细胞,F-肌动蛋白和应力纤维明显增多. 结论淋巴管内皮细胞特异性表达VEGFR-3,VEGF-C促进淋巴管内皮细胞的增殖和迁移,引起F-肌动蛋白的重组和应力纤维形成.
关键词： 血管内皮生长因子-C 血管内皮生长因子受体-3 淋巴管内皮细胞 F-肌动蛋白 狗 -
自体腹膜管道替代血管在冠状动脉搭桥手术中的实验应用
目的 采用实验犬的腹膜片制作腹膜管道替代冠状动脉搭桥手术中的传统移植血管,希望为冠状动脉搭桥提供一种理想的血管替代物.方法 随机选用杂种成年犬10头,雌雄不限,麻醉后气管插管行机控呼吸.所有犬经旁正中切口达腹直肌鞘后层取腹膜片,制成腹膜管道在非体外循环下行主动脉与右冠状动脉主干搭桥.采用电磁血流量计测量搭桥前后腹膜管道的血流通畅度.术毕记录实验犬的早期存活比例,饲养至实验结束处死动物,光镜下观察HE染色腹膜管道的病理变化.结果 实验犬的早期死亡比例为10%(1/10),腹膜管道的血流通畅,冠状动脉搭桥手术前后实验犬右冠状动脉的血流量分别为(126±13)、(117±14)ml/min,差异无统计学意义(P>0.05).腹膜管道的组织学形态改变良好,光镜下,未见腹膜管道瘤样扩张,无明显纤维疤痕形成,腹膜管道弹力纤维结构完好,无断裂,腹膜管道与血管吻合口附近有血管内皮细胞衍生.结论 在非体外循环下采用腹膜管道替代传统的移植血管行冠状动脉搭桥创伤小,实验犬存活比例高,冠状动脉血供效果令人满意,有希望成为理想的血管移植替代物.
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一种改良经皮气管扩张器的动物实验研究
目的 论证新型经皮气管扩张器的可行性及安全性.方法 使用传统和新型经皮气管扩张器对35例杂交犬在纤支镜监视下行经皮气管扩张造口(传统扩张器10例,新型扩张器25例),置入一次性气管套管,观察扩张、造口、置管等全过程.结果 25例新型经皮气管扩张器均成功置入一次性气管套管,手术时间(3.0±0.7)min[传统(3.7±0.8) min,P＜0.05],出血(2.0±0.6)ml[传统(3.2±0.5)ml,P＜0.05],未出现气胸、大出血等严重并发症.结论 新型经皮扩张器能顺利实施经皮气管切开,手术快速安全.
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狂犬病高发地区犬只感染情况调查分析
目的 分析自然状况下犬只感染狂犬病毒状况及其与人间狂犬病的关系.方法 2005年10月到2006年12月间,在狂犬病疫情严重的贵州、广西和湖南3省区的狂犬病高、中、低发病地区分别选择1-2个市作为标本采样点,用直接免疫荧光法和RT-PCR两种方法 检测标本.结果 在3省区的15个市共收集犬脑标本2887份,检测阳性标本66份,感染率为2.3%,不同地区犬感染率与当地人狂犬病发病率不呈线性相关.结论 犬只感染狂犬病毒普遍存在,这是我国狂犬病高发区疫情严重的一个重要因素.
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经皮微波消融犬邻近膈肌肝组织
目的 探讨经皮微波消融犬邻近膈肌肝组织的合适微波消融条件.方法 取健康成年犬9只,在超声引导下行经皮微波消融邻近膈肌的肝组织.将测温针置于肝脏边缘消融区表面邻近膈肌处,根据测温针测量的温度将实验动物平均分为三组,A组:50～60℃;B组:61～70℃;C组71～90℃.持续消融240 s,通过组织病理学检查评价肝消融区相邻膈肌损伤情况.结果 A组犬膈肌轻度损伤,B组及C组犬膈肌严重损伤,C组出现凝固性坏死.结论 经皮微波消融犬邻近膈肌的肝组织,消融区表面温度50～60℃、持续消融240 s时膈肌轻度损伤,可为临床安全消融邻近膈肌肝肿瘤提供参考依据.
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同体非血管化游离骨移植中骨形成的实验研究
目的 观察非血管化游离骨块在不同离体时间点植入体内后成骨情况.方法 拔除狗前磨牙.口腔黏膜完全愈合后,截除狗长度3.0 cm的尢牙下颌骨段,取不带血管和软组织的全层髂骨,分别在离体40min、120min内植入下颌骨缺损区.术后4、8周取出植骨块,观察移植骨块内细胞活力和新骨形成情况.结果 移植骨同期恢复了下颌骨节段性缺损的连续性.离体40min的游离骨块植入体内后4周和8周时仍为活骨块,可见到大量成活的骨细胞,并有数量不等的岛状软骨形成.离体120min的游离骨块植入体内后4周和8周时为死骨块,其中未见骨细胞成活,部分骨块中见到破骨细胞.结论 非血管化游离髂骨块在较短的离体时间内同体移植可以修复狗长度3.0 cm的下颌骨节段性缺损,在修复过程中可见岛状的软骨形成.新骨形成与游离骨块的离体时间有关.
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中风星蒌通腑胶囊对犬缺血心肌的保护作用
目的:探讨中风星萎通腑胶囊对缺血心肌的保护作用.方法:采用犬左冠状动脉前降支第一分支下方2mm处结扎法制备心肌缺血模型,观察中风星蒌通腑胶囊是否具有保护缺血心肌的功能.结果:中风星蒌通腑胶囊具有提高超氧化物岐化酶(SOD)活性,减少过氧化物丙二醛(MDA)生成.结论:中风星蒌通腑胶囊具有保护缺血心肌,改善心脏功能等作用.
关键词： 活血祛瘀剂/治疗应用 心肌缺血/中药疗法 狗 动物 -
乙酰胆碱对快速起搏犬肺静脉-左心房传导时间的影响
目的:观察快速起搏犬左心耳后肺静脉-左心房传导时间的变化,以及静脉注射乙酰胆碱对这种变化产生的影响.方法:20条成年杂种犬随机平均分为两组.给药组静脉注射乙酰胆碱5 mg/kg,对照组静脉注射生理盐水.两组首先测量基础状态下的左心房-肺静脉传导时间,接着以400次/min的频率快速刺激左心耳20 min,刺激中止后5 min 时再次测量肺静脉-左心房传导时间.结果:与快速起搏前相比,对照组肺静脉-左心房传导时间明显缩短,差异具有显著性(P＜0.05).乙酰胆碱组肺静脉-左心房传导时间没有明显缩短,差异无显著性(P》0.05).结论:快速起搏犬左心耳可以导致肺静脉-左心房传导时间明显缩短,应用迷走神经兴奋药乙酰胆碱能够逆转这种变化.这对起源于肺静脉的阵发性心房颤动的防治具有重要的意义.
关键词： 乙酰胆碱/药理学 心房颤动/病理生理学 肺静脉/病理生理学/药物作用 狗 动物 -
异搏定对快速起搏犬肺静脉有效不应期的影响
目的:观察阻断钙离子通道对快速起搏犬肺静脉对肺静脉有效不应期及有效不应期频率适应性的影响.方法:20条成年杂种犬随机平均分为两组.给药组静脉注射维拉帕米,对照组静脉注射生理盐水.两组首先测量起搏周长(PCL)分别为400 ms时肺静脉有效不应期接着以每分钟400次的频率刺激左心房20 min,分别在刺激中止后即刻、5 min、10 min时再次测量PV-ERP.结果:刺激终止后即刻及5 min时异搏定组与对照组比较有效不应期明显延长,差异有显著性(P＜0.05).10 min时差异无显著性(P＞0.05).结论:钙离子通道阻断剂异搏定可以减轻肺静脉电重构的程度.
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犬肝纤维化模型MR弥散张量成像及其与CT灌注参数、VEGF表达的相关性
目的 利用DTI测定犬肝纤维化模型的ADC值、FA值,评估肝纤维化程度,分析其与CT灌注参数及VEGF表达水平的相关性.方法 健康中华田园犬15只,随机分成实验组(n=10)和对照组(n=5).实验组犬经腹腔注射50％CCl4油溶液,辅以高脂饮食,建立犬肝纤维化模型.对2组犬每隔4周行MR DTI、CT灌注成像及肝穿活检.根据病理分期分组,分析各组MR DTI参数ADC值、FA值,并与CT灌注参数及VEGF表达水平进行对照.结果 成功获得各期肝纤维化模型；随肝纤维化进展,ADC值逐渐降低(P＜0.05),FA值总体呈上升趋势(P＞0.05)；ADC值与PVP、TLP呈正相关；VEGF表达水平随肝纤维化进展而明显增高(P＜0.05).结论 对犬行腹腔注射CCl4油溶液辅以高脂饮食可成功模拟人类从肝细胞变性-肝纤维化-肝硬化的全过程；MR DTI能反映肝纤维化各期的血流动力学变化趋势；VEGF可能在慢性肝病所致肝纤维化过程中起重要作用.
