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Ang-1、Ang-2、MVD与复发性流产的相关性研究
目的:通过观察复发性流产(RSA)患者绒毛、蜕膜组织中血管生成素-1(Ang-1)、血管生成素-2(Ang-2)的表达及微血管密度(MVD),探讨Ang-1、Ang-2与血管生成及RSA的关系.方法:选择2013年5～11月在山西大医院妇产科门诊行流产清宫术的RSA患者30例(RSA组),既往有正常胎儿分娩史、自愿行人工流产的正常早孕妇女30例(正常组).在人工流产的同时留取绒毛及蜕膜组织,经免疫组化SP法检测Ang-1、Ang-2、CD34在两组绒毛及蜕膜组织中的表达水平,计数抗-CD34单抗标染的MVD,分析它们与RSA的关系.结果:①RSA组绒毛组织中Ang-1、Ang-2的表达及Ang-1/Ang-2比值均高于正常组(P＜0.05);蜕膜组织中Ang-1、Ang-2的表达均低于正常组(P＜0.05).两组蜕膜中Ang-1/Ang-2比值差异无统计学意义(P＞0.05);②RSA组中,绒毛Ang-1、Ang-2表达均高于蜕膜,Ang-1/Ang-2比值低于蜕膜(P＜0.05);正常组中,绒毛中Ang-1表达低于蜕膜(P＜0.001),Ang-2在绒毛、蜕膜组织中表达无统计学差异,绒毛Ang-1/Ang-2比值低于蜕膜(P＜0.05).③RSA组绒毛组织及蜕膜组织中MVD值低于正常组(P＜0.05).结论:Ang-1、Ang-2的过度表达可能是导致血管生成缺陷及自然流产的原因之一,Ang-1过度表达对血管生成缺陷的影响可能更大.
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不同方式中期引产胎盘粘连与胎盘血管生成素1、2表达的关系
目的 观察孕中期引产过程中胎盘粘连与胎盘血管生成素1(Ang-1)和血管生成素2(Ang-2)表达的关系,探讨米非司酮与胎盘局部Ang-1和Ang-2表达的相关性. 方法 选择2015年1月至2016年12月在本院接受引产的174例孕妇作为研究对象,采用随机数字表法分为2组.对照组87例采用羊膜腔注射乳酸依沙吖啶引产,研究组采用米非司酮联合羊膜腔注射乳酸依沙吖啶引产.观察两组宫缩出现时间、宫缩后胎儿胎盘娩出时间、首次用药至胎儿娩出时间、引产成功率、胎盘粘连发生率、Ang-1、Ang-2和Ang-1/Ang-2表达水平. 结果 研究组宫缩出现时间[(27.75±6.14)h]、宫缩后至胎儿胎盘娩出时间[(8.03±3.12)h]、首次用药至胎儿娩出时间[(35.69±5.27)h]、胎盘粘连发生率(10.34％)、Ang-1[(9.31±1.32)]、Ang-1/Ang-2[(1.02±0.24)]水平均显著低于对照组[依次为(36.85±8.23)h、(9.95 ±4.14)h、(48.27±7.19)h、33.33％、(12.37±1.44)、(1.58±0.37)],Ang-2[(9.11 ±0.92)]水平显著高于对照组[(7.52±0.83)],两组差异均有统计学意义.两组引产成功率差异无统计学意义.对照组和研究组胎盘粘连孕妇Ang-1、Ang-1/Ang-2水平显著高于非胎盘粘连孕妇,Ang-2水平显著低于非胎盘粘连孕妇,差异均有统计学意义. 结论 胎盘局部Ang-1和Ang-2表达异常是与孕中期引产中胎盘粘连显著相关,米非司酮联合乳酸依沙吖啶可改变胎盘局部Ang-1和Ang-2表达,促进胎盘血管退化,减少胎盘粘连发生率,值得临床推广应用.
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丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠血管新生及对Ang-1蛋白表达的影响
目的:研究丹龙醒脑方对脑缺血再灌注大鼠血管新生及血管生成素-1(Ang-1)的影响.方法:用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞缺血再灌注(MCAO)模型,2h后开放血流再灌注.大鼠造模成功后被分为6组(丹龙醒脑方14.76,7.38,3.69 g·kg-1剂量组,尼莫地平10.8 mg·kg-1组,模型组,假手术组),ig7d后处死大鼠取脑,用免疫组化法测定缺血海马区的内皮细胞数和微血管密度(MVD)及Ang-1的蛋白表达.结果:与假手术组比较,模型组大鼠内皮细胞计数及MVD,Ang-1蛋白表达均明显增强(P＜0.05);与模型组相比,丹龙醒脑方组内皮细胞数、MVD及Ang-1蛋白表达均有明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论:丹龙醒脑方能够促进脑缺血再灌注大鼠缺血脑组织血管新生,对缺血脑组织具有保护作用,其作用机制可能与上调Ang-1蛋白表达有关.
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和血生络方对大鼠脑缺血再灌注损伤后血管内皮生长因子和血管生成素的影响
目的:研究和血生络方对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其对血管新生的作用.方法:将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、和血生络方组,后两组制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO/IR)模型,和血生络方组给予和血生络方灌胃,各组分别于1d、3d、7d、14d、21d时免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-1(Ang-1)的表达.结果:模型组各时间点VEGF的表达较正常组增加(P<0.05),在7d达到高峰,和血生络方组比模型组增加更明显,差异有显著性(P<0.05～0.01).模型组各时间点Ang-1的表达较正常组增加(P<0.05),14d达到高峰,和血生络方组比模型组增加更明显,差异有显著性(P<0.05～0.01).结论:和血生络方可能通过增强VEGF、Ang-1的表达来促进大鼠脑缺血再灌注后的血管新生.
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通心络超微粉对急性脑梗死大鼠脑微血管的影响
目的：观察通心络超微粉对急性脑梗死大鼠脑微血管的影响,探讨其脑保护的作用机制。方法制作大鼠左侧大脑半球永久性大脑中动脉栓塞模型,随机分为假手术组、模型组、通心络组和丁苯酞组,每组再分为1、3d2个亚组。假手术组和模型组给予生理盐水灌胃,通心络组给予通心络超微粉灌胃,丁苯酞组给予丁苯酞灌胃。采用2,3,5-氯化三苯四唑染色检测大鼠脑组织梗死体积百分比,HE染色观察大鼠脑微血管的一般形态,免疫组化染色测定各组脑组织中血管生成素-1(ANG-1)、内皮抑素(ES)表达水平。结果与模型组比较,通心络组和丁苯酞组的脑梗死体积百分比均减小,脑梗死灶面积明显减小,水肿程度减轻；与模型组比较,通心络组和丁苯酞组1、3 d测定ANG-1表达均升高(P＜0.05),且通心络3 d组明显优于其余各组(P＜0.001)；与模型组比较,通心络1 d组ES表达有升高趋势,丁苯酞1 d组明显升高(P＜0.05),丁苯酞3 d组有降低趋势,通心络3 d组明显降低(P＜0.05)。结论通心络超微粉能够减轻脑微血管的损伤程度,通过调节ANG-1和ES的表达,促进后期微血管的新生,起到脑保护作用。
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血管生成素-1基因表达对人胃癌细胞增殖与凋亡的影响
目的 探讨血管生成素-1基因(Angl)表达对人胃癌细胞增殖与凋亡的影响,为肿瘤靶向治疗策略的设计和选择提供理论依据. 方法 以感染复数为20的对照病毒Ad-GFP和重组病毒Ad-Angl感染胃癌细胞,比色法(MTT法)分析Angl对胃癌细胞增殖的影响,流式细胞仪分析血浆饥饿时对其凋亡的影响. 结果 Ad-Angl组与对照组或Ad-GFP组相比,吸光度(A)值显著增加(P＜0.05),说明转染Angl基因能促进MGC-803细胞的增殖.Ad-Angl组与对照组或Ad-GFP组相比,凋亡率显著下降(P＜0.05),说明转染Angl基因能抑制血浆饥饿条件下的细胞凋亡. 结论 胃癌的发生发展是个复杂的过程,Angl基因转染后能显著促进体外培养的胃癌细胞增殖,并可抵抗血浆饥饿所诱导的细胞凋亡.
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血管生成素2在评估急性呼吸窘迫综合征中的临床价值
目的 探讨血清中血管生成素-1、2及白介素-8在评估ARDS中的临床价值.方法 筛选2012年1月至2013年7月湖南省人民医院急诊重症监护病房(EICU)的危重病患者283例,根据其病情是否发展为ARDS,分为非ARDS组(251例)和ARDS组(32例),并随访60 d,根据是否死亡,将非ARDS组和ARDS组再分为死亡组及存活组,采用ELISA测定其入院时Ang-1、2及IL-8的血清质量浓度,并对各组之间差异是否有统计学意义进行统计学及ROC曲线分析.结果 ARDS组患者EICU住院天数、机械通气时间、APACHEⅡ评分、血清血管生成素-2及IL-8水平显著高于非ARDS组患者,而Ang-1血清浓度显著低于非ARDS组患者.ARDS死亡组患者Ang-2、IL-8血清质量浓度显著高于非ARDS存活组及非ARDS死亡组,且ARDS死亡组患者血清Ang-2质量浓度显著高于ARDS存活组,其他各组之间比较差异无统计学意义.ROC曲线分析显示Ang-2具有好的诊断效率,其诊断ARDS及预测ARDS死亡事件的曲线下面积分别为0.907和0.899,其灵敏度和特异性分别为0.969和0.725,0.907和0.882.结论 Ang-2是临床ARDS早期诊断及预后评估非常有价值的指标.
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地塞米松对大鼠光气急性肺损伤血管生成素-1、2的影响
目的 探讨地塞米松对大鼠光气急性肺损伤(ALI)血管生成素-1、2(Ang-1,2)表达的影响.方法 采用大鼠光气吸入性肺损伤动物模型.36只SD大鼠随机(随机数字法)分为3组:正常对照组(吸入与光气染毒组同等流量的空气)、光气染毒组(吸入8.33 mg/L纯度为100％的光气5min)、地塞米松处理组(尾静脉注入2.5 mg/kg地塞米松1h后,吸入同等剂量的光气).染毒2h后收集支气管肺泡灌洗液(BALF)测定中性粒细胞细胞数、蛋白含量和肺湿/干质量比(W/D).采用双抗体夹心酶标免疫分析法(ELISA法)测定各组血清和BALF中Ang-1,2水平.RT-PCR法对肺脏组织中Ang-1,2和Tie-2mRNA的水平进行半定量研究.Western blot技术检测肺脏组织中Ang-1,2和Tie-2蛋白含量.结果 与正常对照组比较,光气染毒组肺W/D、BALF中中性粒细胞数和蛋白含量明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组的肺W/D、BALF中中性粒细胞数和蛋白含量明显降低,差异具有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组比较,光气染毒组血清、BALF及肺组织中Ang-1和Tie-2表达明显下降,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组Ang-1和Tie-2表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组比较,光气染毒组血清、BALF及肺组织中Ang-2表达明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01);与光气染毒组比较,地塞米松处理组Ang-2表达明显下降,差异具有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).结论 地塞米松可能通过抑制Ang-2表达并促进Ang-1和Tie-2表达来有效地保护大鼠光气吸入性急性肺损伤.
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血管生成素-1在光气急性肺损伤中的作用
目的 观察大鼠光气染毒后Ang-1,NF-κB水平变化,探讨Ang-1在光气所致大鼠急性肺损伤中的作用机制.方法 (1)大鼠随机(随机数字法)分为光气组和空气组.(2)大鼠分为光气组、PDTC组和空气组.(3)大鼠气体和药物处理后常规饲养到预定时刻取肺汁算湿/干质量比值,BALF白细胞数、总蛋白和血清Ang-1水平.测动脉血气,检测肺组织Ang-1和NF-κB水平.结果 (1)光气染毒后48 h内血清Ang-1随着时间延长有降低趋势.(2)干预实验中,①光气组肺损伤指标与空气组比较均增高(P＜0.05)；②光气组血清Ang-1、动脉血氧分压与空气组比较均降低(P＜0.05)；③光气组肺损伤程度与干预组比较均增高(P＜0.05)；④光气组血清Ang-1、动脉血氧分压与PDTC组比较均降低(P＜0.05).⑤肺蛋白印迹与免疫组化结果一致,结果显示:空气组Ang-1表达正常；光气组Ang-1表达明显减少；PDTC组与光气组相比Ang-1表达增高,与空气组相比表达减少.空气组NF-κB表达正常；光气组NF-κB表达明增高；PDTC组与光气组相比NF-κB表达降低,与空气组相比表达增高.结论 (1)光气染毒后48 h内随着时间延长,血清Ang-1水平降低.(2) Ang-1通过NF-κB信号传导通路,减轻炎症因子介导的炎症反应,减轻肺脏内皮通透性,减轻急性肺脏损伤.
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补阳还五汤预处理对脑缺血再灌注损伤沙鼠VEGF和Ang-1表达的影响
目的 探讨补阳还五汤预处理对局灶性脑缺血再灌注沙鼠脑组织血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-1(Ang-1)表达的干预作用.方法 45只雄性长爪沙鼠随机分为假手术组、脑缺血模型组、补阳还五汤预处理组,每组15只.采用线栓法制作脑缺血再灌注损伤模型.2,3,5一氧化三苯基四氮唑(TTC)染色法显示脑梗死区域,免疫组化法检测脑组织VEGF和Ang-1的表达.结果 TTC染色显示模型组及补阳还五汤预处理组均出现白色梗死灶,位于颞顶叶皮质和纹状体,补阳还五汤组脑梗死体积较模型组明显减小(P<0.05);免疫组化结果显示,补阳还五汤预处理组VEGF和Ang-1表达较模型组均显著上升(P<0.01).结论 补阳还五汤预处理可通过上调脑缺血后VEGF和Ang-1的表达,促进缺血区脑组织的血管新生.
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当归多糖对大鼠缺血性脑损伤后血管生成素表达的影响
目的:观察大鼠短暂缺血性脑损伤后,当归多糖对血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)和血管生成素-2(an-giopoietin-2,Ang-2)表达的影响.方法:采用Wistar雄性大鼠60只,体重180±15g,随机分为当归多糖治疗组(治疗组)25只,缺血对照组(对照组)25只,假手术组10只,制作右大脑中动脉血供阻断(MCAO)模型,缺血2h后,恢复灌注.通过免疫组织化学方法观察血管生成素-1和-2在缺血损伤再灌注后6h,12h,1d,3d,7d的变化.结果:3组Ang-1均持续中等强度表达,组间差异无显著性意义(P＞0.05);Ang-2在治疗组和对照组中均有表达,除6h亚组外,治疗组其他亚组梗死灶周围Ang-2蛋白表达水平比对照组相应时间点明显增强,差异有显著性意义(P＜0.05),假手术组Ang-2蛋白表达极弱.结论:大鼠短暂缺血性脑损伤后,当归多糖能显著促进Ang-2的表达.
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二十二碳六烯酸预处理增强血管生成素-1对氧糖剥夺条件下大鼠脑微血管内皮细胞的保护作用
目的 评价二十二碳六烯酸(DHA)预处理是否增强血管生成素-1(Ang-1)对氧糖剥夺(OGD)条件下大鼠脑微血管内皮细胞(BMVECs)的保护作用.方法 大鼠BMVECs传代培养,第3～4代用于实验.采用随机数字表法分为7组:正常对照组、正常对照+ Ang-1组、OGD组、OGD+ Ang-1组、OGD+DHA组、OGD+ DHA+ Ang-1组、OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组.在正常对照组和正常对照+ Ang-1组加入含血清、5 mmol/L葡萄糖和1.25 mmol/L丙酮酸盐的DMEM培养液;在各OGD组用无糖、无血清的DMEM液置换原培养液.在OGD+ DHA、OGD+ DHA+ Ang-1和OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组加入40 μmol/L DHA,同时在OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组再加入5 μmol/L GW9662[过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)的抑制剂],以上3组在5％ CO2和95％空气条件下预处理培养1h.预处理完成后,在正常对照+Ang-1组、OGD+ Ang-1组、OGD+DHA+ Ang-1组和OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组加入浓度为250 ng/ml的Ang-1.除正常对照组和正常对照+ Ang-1组在5％ CO2和95％空气条件下培养外,其余各组均在94％ N2∶5％ CO2∶1％ O2低氧条件下培养,培养时间均为24h.采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测Bax、Bcl-2、半胱天冬酶-3(caspase-3)、血管生成素受体-1 (Tie-1)、Tie-2、磷酸化的Tie-2 (pTie-2)、磷酸化的蛋白激酶B (pAkt)和紧密连接蛋白-1(ZO-1)的表达水平.结果 与正常对照组比较,OGD、OGD+ Ang-1、OGD+ DHA、OGD+ DHA+ Ang-1和OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组细胞凋亡显著增加(P=0.000、0.000、0.000、0.004、0.000);Bax、caspase-3、Tie-1表达显著增加(Bax:0.62 ±0.03、0.38±0.03、0.45 ±0.03、0.26 ±0.02、0.33 ±0.02比0.16 ±0.01;caspase-3:0.76±0.05、0.42±0.04、0.52±0.02、0.32±0.02、0.40±0.02比0.15 ±0.01;Tie-1:0.51 ±0.03、0.25±0.01、0.33±0.02、0.16±0.01、0.22±0.02比0.12±0.01;P均=0.000);Bcl-2、Bcl-2/Bax、Tie-2、pTie-2表达均显著降低[Bcl-2:0.09±0.01、0.20±0.01、0.16±0.02、0.31 ±0.01、0.22±0.01比0.34 ±0.01;Bcl-2/Bax:(14.93±1.86)％、(68.03±5.56)％、(36.93±2.22)％、(119.1±13.3)％、(64.23±6.07)％比(208.33 ±7.37)％;Tie-2:0.07±0.01、0.16±0.02、0.11 ±0.01、0.21±0.01、0.18±0.01比0.26±0.01;pTie-2:0.05±0.01、0.15±0.01、0.07±0.01、0.22±0.02、0.16±0.01比0.27±0.01;P均=0.000],OGD、OGD+ Ang-1、OGD+ DHA和OGD+ DHA+GW9662+ Ang-1组的pAkt、ZO-1表达亦显著降低(pAkt:0.13 ±0.01、0.26 ±0.01、0.14 ±0.01、0.28±0.02比0.39 ±0.02;ZO-1:0.08 ±0.01、0.18 ±0.01、0.10 ±0.01、0.19 ±0.01比0.23±0.02;P均=0.000).与OGD组比较,OGD+ Ang-1和OGD+ DHA+ Ang-1组细胞凋亡显著降低(P均=0.000).与正常对照+Ang-1组比较,OGD+ Ang-1和OGD+ DHA+ Ang-1组pTie-2、pAkt、ZO-1表达显著降低(pTie-2:0.15 ±0.01、0.22 ±0.02比0.52±0.02;pAkt:0.26±0.01、0.37±0.04比0.67±0.05;ZO-1:0.18±0.01、0.24±0.02比0.39 ±0.05;P均=0.000).与OGD+Ang-1组比较,OGD+ DHA+ Ang-1组细胞凋亡显著降低(P=0.000),Bax、caspase-3、Tie-1表达显著降低(P均=0.000),Bcl-2、Bcl-2/Bax、Tie-2、pTie-2、pAkt、ZO-1表达显著增加(P均=0.000);OGD+ DHA+ GW9662+ Ang-1组上述指标差异无统计学意义(P=0.202、0.770、0.382、0.448、0.233、0.736、0.143、0.526、0.495、0.670).结论 DHA预处理可提高Ang-1对OGD环境下大鼠BMVECs的保护作用,其机制可能与激活PPAR-γ、降低Tie-1表达,从而增强对Tie-2的激活作用相关.
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SonoVue微泡介导转染Ang-1基因治疗急性心肌梗死
目的 探讨SonoVue微泡介导转染血管生成素-1(Ang-1)基因治疗急性心肌梗死的可行性.方法 27只中国家兔结扎冠状动脉左回旋支制成急性心肌梗死模型后随机分为4组:第1组(n=7,注射微泡+Ang-1+超声照射组)、第2组(n=7,单纯注射微泡+超声照射组)、第3组(n=7,单纯注射Ang-1+超声照射组)、第4组(n=6,空白对照组),于基因转染前后分别行常规超声心动图检查及心肌声学造影,并于处死后取心肌组织行RT-PCR检测Ang-1 mRNA表达.结果 第1组基因转染后2周常规超声心动图示左室射血分数(LVEF)显著提高(P<0.01),心功能改善,心肌声学造影可见术后充盈缺损处出现片状造影剂回声,RT-PCR可检测出Ang-1 mRNA表达,余各组则无明显心功能改善及造影剂充填,RT-PCR亦无法检测出Ang-1表达.结论 超声微泡可介导Ang-1基因成功转染至缺血心肌,改善缺血心肌微循环及心功能,对急性心肌梗死具有治疗作用.
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血管生成素-1对人胃癌细胞Bcl-2和Bax表达的影响
目的:探讨人血管生成素-1(angiopoietin-1,Angl)对体外培养的人胃癌细胞MGC-803所产生的凋亡抑制作用的可能机制.方法:以适当感染复数(MOI=20)的重组腺病毒Ad-Angl和对照病毒Ad-GFP感染人胃癌细胞,对照组用无血清培养基培养,并分别通过RT-PCR、Western blot方法检测Bcl-2及Bax mRNA和蛋白的表达.结果:Bcl-2 mRNA和蛋白的表达量在AdAngl组中明显高于Ad-GFP组及对照组(0.609±0.01 VS 0.462±0.02,0.609±0.01 VS 0.475±0.02,均P＜0.05),Ad-GFP组与对照组相比无显著性差异;而Ad-Angl组的Bax mRNA和蛋白的表达量则低于Ad-GFP组及对照组(0.313±0.04 VS 0.413±0.02,0.313±0.04 VS 0.407±0.03,均P＜0.05),后两组相比无显著性差异;Bcl-2/Bax比值在Ad-Angl组中也明显增高.结论:Angl基因转染体外培养的人胃癌细胞后,不论是在转录水平还是在翻译水平均上调了细胞Bcl-2的表达,同时使Bax表达下调,Bcl-2/Bax比值增大,此途径可能为Angl抑制血浆饥饿所诱导的肿瘤细胞凋亡的机制之一.
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芪术颗粒对肝纤维化模型大鼠Ang-1、Ang-2/Tie-2的影响
目的: 观察芪术颗粒对肝纤维化模型大鼠肝组织Ang-1、Ang-2/Tie-2的影响.方法: 应用CCl4复制大鼠肝纤维化模型, 同时给予芪术颗粒灌胃预防, 并设立空白对照组、模型对照组、鳖甲软肝片对照组, 分别于造模4 wk后取大鼠肝组织, 实时荧光定量PCR方法检测Ang-1、Ang-2/Tie-2 mRNA的表达量.结果: 芪术颗粒组Ang-1 mRNA表达量明显低于模型组(0.32±0.11 vs 0.66±0.80, P<0.01),而Ang-2 mRNA 的表达量明显高于模型组(0.27±0.34 vs 0.09±0.01, P<0.05).芪术颗粒组和鳖甲软肝片组比较, 二者对Ang-1、Ang-2及Tie-2 mRNA表达的影响无显著差异.结论: 芪术颗粒通过调控Ang-1、Ang-2/Tie-2mRNA的表达, 阻断肝窦毛细血管化的形成以减少肝纤维化的产生.
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血管内皮生长因子165及血管生成素-1减小大鼠心肌梗死面积的研究
目的在体条件下探讨血管内皮生长因子165(VEGF165)和血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang 1)对心脏缺血损伤的保护作用及其机制.方法构建编码人VEGF165和Ang-全长基因的复制缺陷型腺病毒载体Ad-VEGF165和Ad-Ang1.结扎SD大鼠冠状动脉前降支,在缺血区周围心肌内注射Ad-VEGF165和(或)Ad-Ang1,术后72h检测心脏组织中三磷酸肌醇激酶活性和抗凋亡因子Bcl-2表达水平;术后1周收取心脏,分析结扎区内梗死心肌的面积变化.结果 Ang-1和VEGF165单用组及两者联用组心肌梗死面积显著减小.其中,Ang-1单用组和两者联用组效果要好于VEGF165单用组.VEGF165和(或)Ang-1转染后,心肌内三磷酸肌醇激酶活性和Bcl-2表达水平均显著增高.结论VEGF165和(或)Ang-1可激活心脏中三磷酸肌醇激酶并促进Bcl-2表达,减小心肌梗死面积,有明确的心脏保护作用.
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活化态肝星状细胞促进肝癌血管新生的机制
目的：探讨活化态肝星状细胞（aHSC）促进肝癌血管新生的机制。方法 aHSC分别连续培养1、3、5、7 d后收集细胞，实时荧光定量PCR检测aHSC血管生成素-1（Ang-1）mRNA相对表达量。免疫荧光染色法观察aHSC的Ang-1蛋白表达情况。Transwell小室观察aHSC对肝血管内皮细胞（HVEC）增殖的影响。小管形成实验观察aHSC对HVEC成管作用的影响。实验数据比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果 aHSC培养1、3、5、7 d，其Ang-1 mRNA的相对表达量分别为1.000±0.024、1.920±0.080、6.230±0.320、7.820±0.380，随培养时间的延长逐渐增加（LSD-t=7.32，13.68，8.34；P<0.05）。免疫荧光染色结果显示，Ang-1与平滑肌肌动蛋白抗体（aSMA）共同表达于aHSC。Transwell小室间接共培养结果显示，aHSC促进HVEC的增殖，加入Ang-1抗体后，aHSC促进HVEC增殖的能力减弱。小管形成实验结果显示，在aHSC条件培养基的作用下，HVEC可以聚合并逐渐形成管状结构，而加入Ang-1抗体后，微血管形成明显减少。结论 aHSC可能通过分泌Ang-1促进肝癌中HVEC的增殖及血管生成。
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Ang-1和Ang-2在子宫内膜异位症及子宫腺肌病中的表达
目的 探讨血管生成素-1(Angiopoietin-1,Ang-1)和血管生成素-2(Angiopoietin-2,Ang-2)在子宫内膜异位症及子宫腺肌病发生、发展中的作用.方法 采用免疫组织化学SP法检测Ang-1和Ang-2在30例子宫内膜异位症患者(内异症组)和30例子宫腺肌病患者(腺肌病组)在位内膜及26例正常子宫内膜(对照组)中的表达.结果 Ang-1和Ang-2在子宫内膜血管内皮细胞、腺上皮细胞和间质细胞中表达,定位于细胞质.Ang-1在内异症在位内膜的表达明显高于对照组(P<0.05);Ang-2在内异症和腺肌病在位内膜高表达,与对照组相比,差异有显著性(P<0.05).结论 Ang-1和Ang-2的高表达可能在子宫内膜异位症及子宫腺肌病的发生发展中起重要作用.
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高氧对新生大鼠肺血管发育及肺组织血管生成素1表达的影响
目的 观察持续吸入85％氧气对新生大鼠肺血管发育和肺组织血管生成素1(Ang-1)表达的影响,探讨高氧肺损伤新生大鼠的肺血管发育情况及可能的发生机制.方法 将96只新生SD大鼠在生后6h内,随机分为高氧组和空气组,高氧组将大鼠置于自制密闭氧箱,FiO2=0.85.在实验3、7、14d每组各随机取16只处死,采集标本.采用HE染色进行肺组织形态学分析,放射状肺泡计数评价肺泡化程度,肺动脉钡剂造影及肺动脉密度检测评价肺血管的发育,免疫组织化学法检测肺组织Ang-1的表达,荧光定量PCR和Western blot技术检测肺组织Ang-1的mRNA和蛋白表达水平.结果 (1)新生大鼠高氧暴露14 d,肺组织的病理表现与早产儿支气管肺发育不良(BPD)的病理表现相似.(2)高氧组7 d RAC值显著低于空气组[(10.55±0.13):(11.74 ±0.19),P＜0.05],在14d时差异更显著[(12.47±0.05):( 15.03±0.16),P＜0.01].(3)肺动脉钡剂造影显示,高氧组14 d大鼠肺动脉主干变细,肺小动脉显影减少,肺动脉密度显著低于空气组[(3.55±0.09):(6.03±0.16),P＜0.05].(4)免疫组化染色显示,高氧组7d和14 d,肺组织Ang-1的表达均显著低于同时间点空气组[ (4.27±0.34):(3.10 ±0.29),P＜0.05,(5.65±0.49)∶(3.21±0.28),P＜0.01].(5)荧光定量PCR及Western blot结果显示,高氧组7d和14 d,Ang-1的mRNA水平显著低于空气组[(0.85±0.14)∶(0.44±0.21),P＜0.05,(0.87±0.24)∶(0.24±0.05),P＜0.01],Ang-1的蛋白水平也显著低于空气组[(0.88±0.31)∶(0.41 ±0.12),P＜0.05,(0.90 ±0.29):(0.21 ±0.06),P＜0.01].结论 持续吸入高浓度氧导致新生大鼠的肺血管发育障碍,Ang-1的表达下调可能参与了早产儿BPD血管发育受阻的发生机制.
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血管生成素-1促进骨髓基质干细胞结合聚乳酸乙醇酸羟基磷灰石支架治疗兔桡骨缺损的实验研究
目的 探讨血管生成素(Ang)-1促进骨髓基质干细胞(BMSCs)结合聚乳酸乙醇酸羟基磷灰石(PLGA/HA)支架治疗兔桡骨缺损的效果.方法 选取健康3月龄新西兰大白兔48只,随机分为Ang-1基因转染BMSCs-PLGA/HA复合多孔支架组(A组)、无Ang-1基因转染组(B组)、单纯支架组(C组)和空白对照组(D组),每组12只.分别于支架植入兔体内1、4和8周取材,采用Micro CT检测缺损部位新生骨量,免疫组化法比较血管断面数目,记录比较碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原(Col I)、骨钙素(OC)和骨桥素(OPN)阳性表达.结果 各组实验兔骨矿物质含量(BMC)均随时间延长而增加,且各时间点A组高于B组,C组次之,D组小,差异均有统计学意义(均P＜0.05).各组实验兔血管断面数目和ALP、Col I、OC及OPN阳性率均随时间延长而增多,且各时间点A组高于B组,C组次之,D组少,差异均有统计学意义(均P ＜0.05).结论 Ang-1可促进BMSCs结合PLGA/HA支架修复兔桡骨缺损,促进新生骨形成和血管新生.
关键词： 血管生成素-1 骨髓基质干细胞 聚乳酸乙醇酸羟基磷灰石支架 桡骨骨缺损
