第二军医大学学报杂志
Academic Journal of Second Military Medical University 제이군의대학학보
- 主管单位： 第二军医大学
- 主办单位： 第二军医大学
- 影响因子： 0.74
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0258-879X
- 国内刊号： 31-1001/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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Bcl-2短发夹状RNA增强甲氨喋呤对人淋巴瘤裸鼠移植瘤生长的抑制作用
目的:观察Bcl-2短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)与甲氨喋呤(methotrexate,MTX)联用后对人淋巴瘤裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法:45只裸鼠注射Raji细胞悬液制备裸鼠人淋巴瘤模型,将聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)与Bcl-2 shRNA载体质粒(本实验室制备)的混合物及MTX直接注入肿瘤内,观察Bcl-2 shRNA及联合MTX对肿瘤生长的影响.在用药21 d后无痛处死动物,分离皮下肿瘤,称重,计算抑瘤率;H-E染色观察肿瘤组织的病理形态;以RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA在肿瘤内的表达情况.结果:Bcl-2 shRNA与MTX联用组移植瘤的生长慢,与单用Bcl-2 shRNA和MTX相比差异有统计学意义(P<0.05).处理结束后剥离瘤块,Bcl-2 shRNA组瘤质量与阴性shRNA组、空质粒组相比差异均有统计学意义(P<0.05).Bcl-2 shRNA与MTX联用对裸鼠移植瘤生长的抑制率高,高于Bcl-2 shRNA和MTX的单用组(P<0.05).H-E染色可见使用Bcl-2 shRNA组及MTX组出现明显的凋亡和组织坏死.瘤组织的单细胞悬液经RT-PCR检测显示Bcl-2 mRNA表达在Bcl-2 shRNA组均显著下降(P<0.05),而对照组则无明显变化.结论:Bcl-2 shRNA可增强MTX对人淋巴瘤裸鼠移植瘤生长的抑制作用.
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骨癌痛模型大鼠脊髓背根神经节P2X3受体的表达变化
目的:观察骨癌痛模型大鼠脊髓背根神经节中P2X3受体及其mRNA的表达变化,初步探讨其可能的意义.方法:60只雌性Wistar大鼠随机分为3组(每组n=20):空白对照(C)组;骨癌痛模型(CP)组,左胫骨内接种含2×105个Walker-256大鼠乳腺癌细胞的悬液10 μl;假手术(S)组,左侧胫骨骨髓腔内注入等体积的生理盐水.在接种后第4、7、10、14、17、21天进行疼痛行为学测试,在第14、21天各组分别选10只大鼠,取背根神经节,5只行免疫组化染色,另5只抽提RNA行实时PCR,检测背根神经节中P2X3受体及其mRNA的表达.结果:CP组大鼠在胫骨内接种肿瘤后第10天开始出现痛觉过敏,第14～21天为明显.CP组接种肿瘤后第14、21天患侧背根神经节神经元中P2X3受体免疫阳性细胞率明显增高(P<0.05),mRNA表达水平显著增高(P<0.05).结论:骨癌痛模型大鼠存在痛觉敏化,可能与P2X3受体表达增高有关.
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乙型肝炎病毒基因型与慢性乙型病毒性肝炎及原发性肝细胞癌病理特点之间的关系
目的:调查乙型肝炎病毒(HBV)不同基因型在慢性乙型病毒性肝炎(CHB)和原发性肝细胞癌(HCC)患者中的分布;分析感染不同基因型HBV导致CHB和HCC的临床实验室结果以及肝脏病理特点之间的差异.方法:随机挑选89例CHB和86例HCC患者,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)结合双色荧光标记的TaqMan MGB探针来鉴定HBV基因型.临床实验室检查结果和病理资料摘抄自患者病案.运用统计软件SPSS10.0对结果进行统计学分析,以P<0.05为差异具有统计学意义.结果:本地区,CHB患者以感染HBV B基因型为主,占78.65%,可见B、C混合型,占3.37%;HCC患者以感染C基因型为主,占70.93%;本研究中未见B、C以外其他基因型.B、C基因型在两组患者中的分布有统计学差异(P<0.001).感染不同基因型HBV的CHB患者间临床实验室和肝脏病理检查指标未显示出明显差异.在HCC患者中,感染C基因型患者较B基因型e抗原阳性率高(P<0.05);感染HBV B基因型和大肝癌发生明显相关(P<0.05);HBV基因型和肿瘤TNM分期、转移和浸润之间均未显示出相关性.结论:本地区CHB患者以感染HBV B基因型为主,C基因型和e抗原阳性是HCC发生的危险因素.针对感染C基因型HBV的患者,积极抗病毒治疗,促进e抗原血清学转换有可能降低HCC的发生率.感染HBV B基因型和大肝癌发生具有相关性,这一结论尚需进一步扩大研究验证.
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70岁以上2型糖尿病合并冠心病患者临床指标和冠状动脉造影分析
目的:探讨2型糖尿病(T2DM)与70岁以上冠心病(CHD)患者的临床特点及冠状动脉病变程度的关系.方法:回顾性分析本院2006年4月至2008年7月经冠状动脉造影证实的155例70岁以上T2DM合并CHD者(DM-CHD)患者的临床资料,作为病例组,以同期155例性别匹配的70岁以上不合并T2DM的CHD患者为对照组,对两组患者进行年龄、性别、血压、血脂、凝血、射血分数等临床指标和冠状动脉造影结果的分析比较.结果:DM-CHD组合并高血压的发病率明显高于NDM-CHD组(P<0.05),其空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、纤维蛋白原(FIB)水平明显高于对照组(P<0.01),而高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)低于NDM-CHD组(P<0.05);DM-CHD组左室射血分数(EF)显著低于NDM-CHD组(P<0.01).155例DM-CHD患者,有35例初诊的DM患者(22%),若不行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)而仅依靠FBG,则有14例DM患者漏诊(40%).DM-CHD组以弥漫病变为主(P<0.01),冠脉狭窄指数及闭塞的血管数显著高于NDM组(P<0.01).结论:CHD患者DM漏诊率较高;DM-CHD较之NDM-CHD患者存在更多的CHD危险因素,冠状动脉病变的范围和狭窄程度更严重.
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PPP4R1基因与肿瘤相关性的生物信息学预测及在胃癌组织中的初步验证
目的:应用生物信息学分析方法预测基因PPP4R1与胃癌发生和转移的关系,并采用RT-PCR进行验证.方法:利用基因功能模块原理,通过IntNetDB找到基因PPP4R1的伙伴基因,应用CFinder工具找其社团基因,Chilibot在线工具分析社团基因与肿瘤的关系,继而推测PPP4R1与胃癌的联系.采用RT-PCR法检测18对分别来自同一患者的转移和原位肿瘤组织、12对分别来自同一患者的原位肿瘤和癌旁正常组织PPP4R1基因表达,对上述生物信息学分析的结果进行验证.结果:生物学分析结果表明,PPP4R1的社团基因有CTDSP2、PPP2R5E、CTDP1、CTDSP1、FLJ22405、MTMR4、PPP1CA、PPP1CB、PPP1CC、PPP2R2A、PPP2R5A、PPP2R5C、PPP3CC,其中与癌相关的基因有9个,与癌及转移相关的基因有2个.PCR验证结果表明:18例原位胃癌组织中有15例基因PPP4R1表达高于其对应的转移组织(P<0.01);12例正常组织有9例高于其对应的癌组织(P<0.01).结论:基因PPP4R1可能与胃癌的发生和转移相关;生物信息学可能成为研究基因功能快速而有效的新方法.
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5-杂氮-2'-脱氧胞苷对前列腺癌PC3细胞系生长以及抑癌基因GSTP1、RASSF1A转录的影响
目的:观察DNA去甲基化药物5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-CdR)对前列腺癌细胞株PC3抑癌基因GSTP1和RASSF1A 转录改变以及细胞增殖活性的影响.方法:用不同浓度5-aza-CdR(2、5、10 μmol/L)处理前列腺癌细胞株PC3,利用甲基化特异性PCR(MSP)法检测用药前PC3细胞株GSTP1、RASSF1A启动子甲基化状态;采用实时荧光定量RT-PCR法检测用药过程中GSTP1和RASSF1A mRNA转录改变;用MTT法和流式细胞术检测用药前后PC3肿瘤细胞增殖活性改变.结果: GSTP1、RASSF1A启动子区域出现甲基化现象.与对照组相比,药物组培养24 h后 GSTP1和RASSF1A mRNA表达未发生明显改变;培养48 h后5、10 μmol/L药物组GSTP1和RASSF1A mRNA表达出现上调;72 h后各浓度药物组均检测出两基因mRNA表达升高(P<0.05).药物组培养24和48 h未出现明显的细胞增殖抑制现象和细胞周期改变;培养72 h后,药物组细胞增殖抑制显著(P<0.05),细胞周期改变明显(P<0.05),阻滞于G0/G1期.结论:GSTP1和RASSF1A基因在PC3前列腺癌细胞系中的失表达可能与其启动子CpG岛高甲基化有关;5-aza-CdR能在一定程度上抑制PC3细胞增殖,干扰细胞周期,提高GSTP1和RASSF1A的转录水平.
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Ghrelin对豚鼠胃平滑肌收缩的影响及机制
目的:探讨并比较Ghrelin及其拟似剂生长激素释放肽-6(GHRP-6)对豚鼠胃平滑肌舒缩活动的影响及机制.方法:采用电场刺激豚鼠胃底和胃窦部肌间神经方法,观察Ghrelin和GHRP-6对胃平滑肌舒缩活动的影响,并通过观察一氧化氮合酶(NOS)抑制剂Nω-硝基-L-精氨酸(L-NNA)、一氧化氮前体L-精氨酸(L-AA)对Ghrelin和GHRP-6调控胃平滑肌运动的影响以阐明其机制.结果:不同频率(1～16 Hz)电刺激胃底部肌间神经,平滑肌条呈现开电刺激(on-response)的舒张波和随后出现的断电刺激(off-response)收缩波,其中产生的开电刺激舒张效应可被L-NNA消除,而断电刺激诱导的收缩效应可被阿托品和胍乙啶(NANC)阻断.在胃底部,Ghrelin和GHRP-6可使开电刺激诱导的平滑肌舒张活动减弱,断电刺激诱导的肌条收缩活动增强,且Ghrelin作用明显强于GHRP-6.L-NNA可显著增强Ghrelin和GHRP-6的促平滑肌收缩效应,但L-AA可显著减弱该作用.在胃窦部,电场刺激肌间神经,舒张波消失,仅出现断电刺激的收缩波.Ghrelin和GHRP-6均可使该收缩作用增强.结论:Ghrelin和GHRP-6均可通过肌间神经丛促进胃底部、胃窦部平滑肌收缩,该效应可能与一氧化氮通路有关.
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肾透明细胞癌CD133的表达及其体外对α-干扰素和5-氟尿嘧啶处理效果的影响
目的:观察肾透明细胞癌中是否存在类似肿瘤干细胞(TSC)特性的细胞,并探讨这部分细胞对干扰素及化学治疗肾透明细胞癌疗效的影响.方法:选用高转移性肾透明细胞癌细胞株RCC05-TXJ、低转移性肾透明细胞癌细胞株RCC05-ZYJ、临床原位肿瘤样本培养的低代数非转移性肾透明细胞癌细胞(来自男、女性患者各1例).采用流式细胞术及免疫组化法检测上述4种细胞干细胞标志物CD133的表达情况;采用α-干扰素、5-FU分别处理4种细胞,用MTT法检测药物处理前后细胞存活率.结果:流式细胞术检测结果发现转移性的RCC05-TXJ及RCC05-ZYJ细胞有CD133表达,男、女性原位癌细胞CD133几乎不表达;免疫组化结果显示RCC05-TXJ及RCC05-ZYJ在细胞膜上局部表达CD133,男、女性肾透明细胞癌细胞几乎不表达CD133;化疗药和干扰素干预组RCC05-TXJ、RCC05-ZYJ均出现撤药后24 h细胞存活率明显反弹现象,而男、女性原位癌细胞在撤药后细胞存活率持续降低.结论:肾透明细胞癌中存在少数CD133阳性具TSC特性的细胞,这些细胞可能是影响干扰素及化疗效果的原因之一;针对这部分细胞的治疗有望成为今后临床药物治疗的新方向.
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前列腺癌PSA特异性树突状细胞瘤苗的构建及其体外免疫活性的观察
目的:构建前列腺癌PSA特异性树突状细胞(PSA-DC)瘤苗,并观察其体外免疫活性,为后续研究奠定基础.方法:分离骨髓前体细胞,大量制备骨髓DCs(bone marrow derived DC,BMDC);分别以PSA、癌细胞裂解产物(lysate,Lys)、无关蛋白卵清蛋白(Ova)冲击DC制备PSA-DC、Lys-DC、Ova-DC瘤苗.ELISA法检测PSA-DC瘤苗培养上清中细胞因子(IL-12 p70和IL-1β)水平的变化;观察PSA-DC瘤苗刺激抗原特异性T细胞增殖活性和诱导抗原特异性CTL杀伤活性,并与Lys-DC、Ova-DC瘤苗及未加入抗原冲击的DC(Non-DC)组作比较.结果:成功获得成熟DC,纯度可以达到>95%.ELISA法检测结果表明,PSA-DC、Lys-DC和Ova-DC组培养上清中IL-12 p70和IL-1β水平均较Non-DC组明显升高(P<0.05).混合淋巴细胞培养(MLR)显示:PSA-DC、Lys-DC组DCs刺激CD4+T细胞增殖的能力明显优于Ova-DC、Non-DC组(P<0.01);PSA-DC、Lys-DC组培养上清中IL-2、IFN-γ水平明显高于后两者(P<0.01),而IL-10和IL-4水平下调(P<0.05).PSA-DC、Lys-DC组可产生针对PSA和肿瘤裂解物的DTH反应,而对无关抗原无效(P<0.05).与OVA-DC、Non-DC组相比,Lys-DC、PSA-DC组体外诱导的CTL细胞对LNCaP细胞的杀伤活性较强 (P<0.05),且具有抗原特异性.结论:利用PSA蛋白冲击DC可成功制备PSA特异性DC瘤苗,该瘤苗体外具有较强的免疫活性,能有效杀伤LNCaP细胞.
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我国脑卒中患者临床神经功能缺损评分标准信度、效度及敏感度的评价
目的:对我国脑卒中患者临床神经功能缺损评分标准(CSS)的信度、效度和敏感度进行研究,评价其临床应用价值.方法:根据纳入标准,选取我院神经内科的126例脑卒中患者,分别用CSS和美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)对其进行评分,并对CSS进行信度、效度、敏感度评价.信度用相关系数r和Cronbach's α系数来评价.结构效度采用聚类因子分析方法考核;效标效度以NIHSS量表为效标,应用相关系数分析.各维度敏感度通过标准化效应(SES)来评估.结果:共收回有效问卷123份.CSS有良好的信度,各维度的重测信度和评定者间信度均在0.911～1.000;内部一致性信度的Cronbach's α系数均在0.8以上.CSS有较好的结构效度;分析CSS与NIHSS间相关系数为0.86,效标效度良好.预后预测CSS准确率为92.4%,稍低于NIHSS的预测准确率94.1%;Logistic回归显示CSS的“凝视功能”和“面瘫”项目未能归入预测方程;除面瘫项目SES为0.38外,其他均大于0.5,大多数维度均显示出了良好的敏感性.结论:经初步测试,CSS在脑卒中患者中具有较好的信度、效度、敏感度,但预测预后不及NIHSS,修订时可作相应调整.
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促肾上腺皮质激素释放激素对原代培养海马神经元谷氨酸诱发电流的调节作用
目的:研究促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)对原代培养海马神经元谷氨酸诱发电流(IGLU)的调节作用,并初步探讨其可能机制.方法:应用免疫荧光细胞化学方法观察原代培养的大鼠海马神经元CRH两型受体的表达;通过全细胞膜片钳技术研究CRH对海马神经元IGLU的调节作用及其可能涉及的胞内信号通路.结果:CRH作用2 min明显抑制海马神经元IGLU,且呈剂量依赖性;细胞外给予CRH受体广谱拮抗剂α-helical CRH或CRHR1特异性拮抗剂antalarmin能完全阻断CRH对IGLU的抑制作用,CRHR2特异性拮抗剂astressin-2B对此没有明显作用;细胞内给予蛋白激酶C(protein kinase C, PKC)的抑制剂G6976可阻断CRH对IGLU的抑制作用.结论:多肽类激素CRH可抑制原代培养的海马神经元IGLU,这种作用由CRHR1介导,并可能涉及PKC信号通路.
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性别差异对脓毒症大鼠血小板活化的影响
目的:探讨性别差异对脓毒症大鼠血小板活化的影响.方法:40只健康SD大鼠(雌雄各半)随机分为4组(n=10):雄性假手术组、雌性假手术组、雌性脓毒症组、雄性脓毒症组.后两组盲肠结扎穿孔(CLP)法制作脓毒症动物模型,假手术组不行盲肠结扎穿孔.术后24 h留取大鼠血液标本,行血小板计数检测,采用ELISA方法检测β血小板球蛋白(β-TG)表达情况,采用放射免疫测定法检测大鼠血清雌二醇(E2)含量.结果:脓毒症雌、雄性大鼠血小板计数均下降,但雌性大鼠明显高于雄性(P<0.01).脓毒症雌、雄性大鼠血清β-TG表达均升高,但是雌性大鼠表达量明显低于雄性大鼠(P<0.01).雌、雄性脓毒症大鼠全血血小板计数与相应性别大鼠 E2水平显著正相关,血清β-TG水平与相应性别大鼠 E2水平显著负相关(P<0.05).结论:脓毒症的血小板活化存在性别差异,内源性雌激素可能介导了对雌性脓毒症大鼠血小板的保护作用.
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可显影硫酸钡海藻酸钠微球介入治疗兔VX2肝肿瘤
目的:研究硫酸钡海藻酸钠微球对兔VX2肝肿瘤的介入治疗作用.方法:新西兰兔24只,随机分为3组:正常对照组(A组,n=5)、肿瘤对照组(B组,n=10)和介入治疗组(C组,n=9).介入治疗模拟人肝动脉插管方法.A、B、C组于介入术后7 d行肝功能检查,B组、C组各5只动物于介入术后2周观察肿瘤质量、体积,并行病理学检查,包括常规H-E染色、CD34及VEGF免疫组化检测;B组5只、C组4只动物观察生存期.结果:介入治疗后7 d,丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平B、C组均高于A组(P<0.01),但C组ALT、AST数值低于B组(P<0.01).C组肿瘤质量(2.434±0.992) g,B组(4.696±1.246) g,差异具有统计学意义(P<0.01).C组肿瘤体积(2.126±0.929) cm3,B组(3.962±1.101) cm 3,差异具有统计学意义(P<0.01).病理学检查结果显示C组癌细胞大片坏死,CD34染色大片坏死区无微血管,残存的癌组织内新生血管明显减少,VEGF表达仅见残存的癌细胞胞质呈弱阳性表达;而B组癌巢大,癌细胞丰富,CD34染色可见丰富的新生血管,癌细胞胞质可见丰富的VEGF表达.C组生存期明显延长.结论:硫酸钡海藻酸钠微球介入治疗兔VX2肝肿瘤安全可行;能明显抑制肿瘤生长,且对正常肝组织损伤小,能延长实验兔生存时间.
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普卢利沙星片治疗呼吸和泌尿系统急性细菌性感染的多中心随机对照研究
目的:评价普卢利沙星片治疗呼吸系统和泌尿系统急性细菌性感染的安全性和有效性.方法:采用多中心、随机、双盲双模拟、阳性药平行对照方法.试验组用普卢利沙星片和左氧氟沙星模拟片各2片,2次/d,疗程7～14 d;对照组用左氧氟沙星片和普卢利沙星模拟片各2片,2次/d,疗程7～14 d.结果:本研究共入组265例,可进行疗效评价260例,试验组(普卢利沙星)131例,对照组(左氧氟沙星)129例.试验组和对照组的总有效率分别为89.47%和90.91%,细菌清除率分别为94.06%(95/101)和95.96%(95/99),两组比较差异均无统计学意义(P<0.05).试验组和对照组不良反应发生率分别为5.26%(7/133)和3.79%(5/132),主要表现为轻中度的恶心、腹泻、头痛、皮疹、ALT升高、BUN升高、Cr升高等,两组比较差异无统计学意义(P<0.05).结论:普卢利沙星片治疗呼吸系统和泌尿系统急性细菌感染,临床疗效明显,安全性较好.
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眼附属器淋巴瘤中CD44V6的表达及意义
目的:探讨CD44V6在眼附属器淋巴瘤中的表达及意义.方法:采用免疫组化S-P法检测63例眼附属器淋巴瘤中CD44V6的表达情况.其中弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)22例,首次诊断为DLBCL 12例,原发性黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤复发演变为DLBCL 10例;MALT淋巴瘤41例,26例为初发病例,15例为复发病例;另选10例眼附属器淋巴组织反应性增生病例作对照.结果:CD44V6阳性者细胞膜呈棕色.CD44V6在DLBCL的表达率和阳性程度均比MALT淋巴瘤高,差异有统计学意义(P<0.05);CD44V6在淋巴瘤中的表达率和阳性程度比淋巴组织反应性增生高,差异有统计学意义(P<0.05),但在DLBCL和MALT淋巴瘤各自组内的表达率和阳性程度均无有统计学差异(P>0.05).CD44V6表达与患者的年龄、性别均无关.结论:在眼附属器淋巴组织异常增生疾病中,CD44V6的表达随病变程度加重而增强,提示其在眼附属器MALT淋巴瘤的发生和发展中起重要作用.
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可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)及其突变体的表达纯化及生物活性观察
目的:表达纯化可卡因-苯丙胺调节转录肽(CART)及其突变体,观察其对大鼠进食行为的影响.方法:PCR扩增CART活性片段CART55-102 cDNA,构建表达CART55-102原核表达载体,并对其68位和94位半胱氨酸残基突变,构建表达CART55-102(Cys68Ser)和CART55-102(Cys94Ser)原核表达菌株,经IPTG诱导表达后,亲和层析纯化3种小肽;行为学技术检测原核表达小肽对大鼠进食行为的影响.结果:获得的重组CART55-102及其突变体的纯度在95%以上,产物得率约75%;CART55-102可显著抑制饥饿大鼠的进食行为,而68和94位突变体对饥饿大鼠的进食行为无明显影响.结论:原核表达系统可以成功制备高纯度CART活性小肽和突变体,68位和94位突变导致CART抑制进食的作用消失.
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帕金森病患者脑脊液疾病特异蛋白的初步筛选及鉴定
目的:通过比较帕金森病与特发性震颤、头痛患者脑脊液蛋白质谱,筛选和鉴定与帕金森病密切相关的疾病特异性蛋白(disease-specific proteins, DSPs),寻找帕金森病的生物学标志物.方法:以固相pH梯度等电聚焦(IPG-IEF)为第一向,垂直平板十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)为第二向进行脑脊液蛋白质分离;用图像分析软件PDQuest8.0 分析电泳图谱,寻找有意义的差异蛋白点;运用MALDI-TOF-MS质谱鉴定,并对其中差异显著蛋白采用酶联免疫吸附实验(ELISA)进行鉴定.结果:帕金森病与特发性震颤患者及头痛对照组患者脑脊液蛋白质谱的比较,发现3个有意义的差异蛋白质点,其中载脂蛋白E (apolipoprotein E,Apo E)差异显著.ELISA鉴定结果表明,与特发性震颤[(3.59±1.07) mg/L]、头痛患者[(3.67±0.71) mg/L]相比,PD组患者脑脊液Apo E水平[(2.47±1.27) mg/L]明显下调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:帕金森病患者与特发性震颤患者、头痛对照组患者脑脊液蛋白表达存在差异,这些差异蛋白可能是帕金森病的DSPs,并有可能成为帕金森病诊断的分子标志物.
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氟尿嘧啶纳米粒表面修饰人工晶状体的制备及体外性质
目的:以氟尿嘧啶纳米粒(5-Fu-NP)对聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)人工晶状体进行表面修饰,并测定其体外性质.方法:将壳聚糖、聚丙烯酸与氟尿嘧啶通过滴入分散法制备5-Fu-CS-NP.利用载能离子束技术对PMMA人工晶状体进行5-Fu-NP表面修饰.考察人工晶状体表面纳米粒粒径、含药量以及体外释药特性.结果:表面修饰人工晶状体氟离子束剂量为5×1013 ～5×1015ions/cm2,表面分布有大小不等的5-Fu-NP球形颗粒,多数小颗粒粒径在100 nm以下,少数大颗粒粒径主要集中在100～400 nm,含药量为19.55～35.94 μg/枚.5-Fu-NP表面修饰人工晶状体能在4 d内持续释放药物.结论:5-Fu-NP表面修饰人工晶状体缓释作用较好,有望成为可预防后发性白内障的新型人工晶状体.
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可溶性HVEM-Ig融合蛋白的真核表达、鉴定、纯化及生物学活性检测
目的:构建含鼠疱疹病毒侵入介质(herpesvirus entry mediator,HVEM)胞外区和IgG2a Fc段重组表达质粒,真核表达HVEM-Ig融合蛋白,鉴定、纯化,并检测其生物学活性.方法:通过RT-PCR从BALB/c小鼠脾细胞总RNA中扩增HVEM胞外区片段,WT-1杂交瘤细胞总RNA中扩增鼠IgG2a Fc片段,克隆入真核分泌型表达载体pSecTag2A,转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),表达产物用rProtein A凝胶进行亲和层析纯化,获得目的蛋白,并进行SDS-PAGE和Western印迹分析.在单向混合淋巴细胞反应中加入不同浓度的HVEM-Ig融合蛋白作为处理组,同时以加入IgG蛋白的作为阴性对照和未处理的混合淋巴细胞作为空白对照,分别采用[3H]-TdR掺入法和ELISA法观察淋巴细胞增殖程度和细胞因子分泌情况.结果:成功构建重组质粒pSecTag2A-HVEM-Ig,表达及纯化HVEM-Ig融合蛋白,并对蛋白的理化性质进行了鉴定.[3H]-TdR掺入法和ELISA法结果显示:与对照组相比,该融合蛋白呈剂量依赖性抑制淋巴细胞增殖和IFN-γ、TNF-α、IL-2等细胞因子的分泌(P<0.05或P<0.01).结论:成功构建了HVEM-Ig融合蛋白真核表达体系,融合蛋白具有预期的抑制淋巴细胞活性及细胞因子分泌的功能,为后续研究该分子在自身免疫和移植免疫反应中的机制奠定了基础.
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栀子对兔膝骨关节炎模型关节软骨病理改变及IL-1 β表达的影响
目的:观察栀子浸膏对兔膝骨关节炎模型中关节软骨病理改变及关节液、血清中IL-1β表达的影响.方法:24只大白兔随机分为给药组、模型组和对照组(n=8).给药组、模型组行Hulth法复制骨关节炎模型,术后第5周,给药组以栀子浸膏600 mg/kg灌胃,模型组与对照组给予等量生理盐水灌胃,给药3周后处死动物,分别对软骨肉眼下行Pelletier评分及光镜下行Mankin评分,取股骨内侧髁关节软骨组织块行电镜、H-E染色观察软骨细胞形态及检测关节液与血清中IL-1β的含量.结果:栀子浸膏能延缓骨关节炎关节软骨病理损伤,给药组关节液与血清中IL-1β的含量明显低于模型组(P<0.05或P<0.01).结论:栀子浸膏可能通过降低骨关节炎模型关节液与血清炎症因子IL-1β的表达发挥保护关节软骨的作用,从而延缓骨关节炎病程的进展.
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创伤后应激障碍脑结构影像学改变研究进展
通过综述创伤后应激障碍(PTSD)脑结构影像变化的相关研究及其新进展,阐明了PTSD患者相关脑区体积、灰质、白质密度的减小,主要表现为海马、胼胝体与前扣带回等区域脑结构影像的变化,其中,PTSD患者胼胝体的变化具有特异性;指出了白质与灰质结构影像分析是目前该研究领域中前沿性和战略性的两个研究方向;同时提出了PTSD与脑结构影像变化的因果关系研究是今后该领域亟待研究解决的课题.
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肝细胞癌克隆起源研究进展
多结节和复发性肝细胞癌可分为肝内转移和多中心发生两种,其克隆起源方式与临床诊治密切相关,根据其克隆起源方式设计合理的治疗方案是肝脏外科亟待解决的新问题.本文就近来国内外关于肝癌多中心发生的临床病理学特点、分子诊断及临床意义作一综述.
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细胞黏附分子CD99与肿瘤关系的研究进展
CD99分子是细胞黏附分子的一种,参与细胞黏附、凋亡过程及肿瘤细胞的迁移、浸润、侵袭,在肿瘤的发生发展过程中起重要的作用.与正常组织相比,某些肿瘤中CD99出现异常表达,这对于肿瘤的鉴别诊断、转移潜能判断、治疗和预后估计等方面有潜在的应用价值.
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射频导管消融治疗左室流出道起源特发性室性心律失常的经验总结
起源于右室流出道(RVOT)的室性心律失常较常见,导管射频消融治疗安全有效.临床亦可见起源于左室流出道(LVOT)的室性心律失常,由于起源部位的解剖特殊性,其导管射频消融的经验仍需总结积累.2005年9月至2008年5月我们对3例起源于左室流出道的特发性室性心律失常患者进行了射频消融治疗,取得一些经验,现总结报道如下.
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慢病毒介导基于microRNA系统的HBs RNAi技术抑制HBV复制
目的:构建HBs基因RNAi慢病毒载体,观察其对HBV复制和抗原表达的作用.方法:针对已经筛选确定的HBs基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经MluⅠ和ClaⅠ酶切后的pGCLM-GFP载体连接产生慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.用pGCLM-GFP、pHelper1.0和pHelper2.0质粒共转染包装细胞293T,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.培养HepG2.2.15细胞系,用慢病毒(MOI=1和MOI=10)对肝癌细胞进行感染,感染后细胞培养上清进行ELISA、Western印迹、HBV DNA定量分析.结果:PCR和测序结果证实,成功构建HBs shRNA的慢病毒载体.包装慢病毒后浓缩病毒悬液的滴度为5×108～2×109 TU /ml.慢病毒HBs RNAi后,对HBV复制和抗原表达的抑制作用显著.感染4 d后,抑制效应开始出现,一直持续到第9天,抑制效应达到高峰(P<0.05).相对于阴性对照,HBs shRNA作用后细胞上清中HBsAg分泌量下降70%以上(P<0.05),而Western印迹和real-time PCR结果进一步证实了上述结果,在蛋白水平和mRNA水平都得到了进一步验证.经HBV DNA定量,发现慢病毒RNAi后DNA水平也显著下降(P<0.05).结论:成功构建HBs基因RNAi慢病毒载体,以HBs基因为靶点的慢病毒介导的基于microRNA系统的RNAi技术能有效抑制HBV的复制和抗原表达.
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宫颈癌中Foxq1与NF-κB p65的表达及临床病理意义
目的:通过基因芯片技术筛查与宫颈癌发生密切相关的转录因子,并在蛋白水平进行验证;初步探讨其在宫颈癌发生中的临床病理意义.方法:对新鲜宫颈癌、癌旁组织及正常宫颈组织各2例进行人表达谱芯片(Illumine Human-6 gene chip, 含48 000个基因信息)检测,采用实时定量 RT-PCR方法验证芯片结果,筛选出调控差异基因主要转录因子.并进一步对44例宫颈癌、22例宫颈内上皮瘤变及17例正常宫颈石蜡组织进行免疫组化检测,验证基因芯片筛选的主要转录因子表达情况,分析转录因子和宫颈癌临床病理学关系.结果: 癌组织、癌旁组织与正常宫颈组织间比较共同上调基因67个,下调基因28个,RT-PCR验证了基因芯片结果.其中,NF-κB p65在癌旁组织和正常组织中低表达,在宫颈癌组织中高表达(P<0.05),NF-κB p65与宫颈癌组织分级呈正相关(P<0.05),与临床分期无关(P>0.05);Foxq1在癌旁和正常组织中高表达,在宫颈癌组织中阴性表达(P<0.05),Foxq1表达与宫颈癌组织分级、临床分期均无关(P>0.05).Foxq1与NF-κB p65表达无关(P>0.05).结论:核因子NF-κB p65与Foxq1为宫颈癌发生相关转录因子,可能分别在宫颈癌的发生中起作用.
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寻常型天疱疮患者外周血T细胞受体β链可变区CDR3基因克隆谱型分析
目的:探讨寻常型天疱疮(PV)患者外周血T细胞受体(TCR)互补决定区(CDR3)基因谱型变化,了解克隆扩增的T细胞与自身免疫性疾病的相互关系.方法:采用免疫扫描谱型分析技术,分析6例正常人外周血单个核细胞TCR β链可变区(BV) CDR3谱型分布特征以及6例PV患者CDR3谱型变化情况.结果:6例正常人TCR BV CDR3谱型均符合正态分布,6例PV患者TCR BV CDR3谱型均出现多态性降低,BV亚家族单/寡克隆增生.结论:PV患者外周血TCR可变区β链CDR3谱型异常可能与PV发病有关.
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结直肠癌及其淋巴结转移灶内AnnexinⅠ和Annexin Ⅱ的表达及意义
结直肠癌的病死率位列癌症死亡的第4位,其发生、发展和转移的机制及临床病理分级备受关注.有学者认为膜联蛋白(Annexin)Ⅰ、Ⅱ与肿瘤的发生、发展和转移有关,可以作为提示预后的标志分子,但也有人持相反观点.本实验旨在研究AnnexinⅠ和AnnexinⅡ的表达情况与结直肠癌的病理分级和转移的关系.
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介入栓塞治疗Cobb综合征1例报告
1临床资料患者,男性,26岁,因"双上肢麻木、乏力1年,加重2个月"于2007年7月26日入住第二军医大学长征医院神经外科.患者于2006年7月无明显诱因出现双上肢麻木、乏力,以左侧上肢明显.
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空肠绦虫病伴穿孔1例报告
1临床资料患者男性,42岁,藏族,农牧民.因右上腹部疼痛10 h,门诊以"胃穿孔"于2007年4月18日收住入院.患者自诉在院外自行服胃药未见好转.否认"肝炎、结核"等传染病史及久居他地及疫源、疫水接触史,无药物及食物过敏史.
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胸腹部霰弹枪伤1例报告
1临床资料患者,男,40岁,因"左胸腹、左背部和左上臂枪弹伤后1 d"于2008年1月2日入院.患者在当地山上打猎时被朋友误伤,所用枪支为自制霰弹枪,子弹来自左后方约1.5 m处,子弹材质为合金,左腹胸、左背部和左上肢被霰弹重伤,伴有呼吸困难、胸闷气促、腹痛腹胀、头晕、左上臂活动受限.
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外阴侵袭性血管黏液瘤2例报告
侵袭性血管黏液瘤(aggressive angiomyxoma,AAM)是一种罕见的软组织良性肿瘤,其临床特点是具有侵袭性与复发性.女性外阴部位AAM的报道更是少见,迄今世界报道少于200例,平均每年约有6～10例病例报道,国内报道仅10余例.现结合我院2例病例及文献检索,对女性外阴部AAM的临床特点及病理特点进行分析总结.
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深静脉导管在小儿困难导尿中的应用
目的:评估深静脉导管在小儿困难导尿中的应用价值.方法:2007年8月至2008年6月,对7例常规留置导尿失败的男性患儿采用一次性深静脉导管行耻骨上膀胱穿刺造瘘予急诊导尿,随访2～11个月,观察疗效及并发症发生情况.结果:7例患儿均一次置管成功,手术时间2～5 min,平均(3.2±0.4)min,尿液引流效果好,无并发症发生.结论:采用深静脉导管行耻骨上膀胱穿刺造瘘是处理小儿困难导尿的安全而有效的方法,值得推广使用.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
