甲磺酸多沙唑嗪片治疗轻中度原发性高血压的临床试验

目的:探讨甲磺酸多沙唑嗪片对轻、中度原发性高血压的疗效和副作用. 方法:对80例患者进行随机、双盲和前瞻性研究.40例患者随机分到口服多沙唑嗪(多沙唑嗪组)或特拉唑嗪(对照组),均服药8周.另40例口服多沙唑嗪(开放组),其中10例口服多沙唑嗪6个月. 结果: 试验组和对照组用药后血压均明显下降,在第4周下降到大值并稳定到试验结束.心率均略加快,但无统计学意义.试验组和对照组降压总有效率分别为95.0%和73.7%.开放组总有效率为90.0%.各组肝肾功能和心电图检查结果均无明显异常改变.试验组头晕、心悸、嗜睡等不良反应发生率为30.0%,与对照组无差异. 结论:甲磺酸多沙唑嗪片降压作用稳定,患者依从性较好.

神经细胞粘附分子在人脑星形细胞瘤中的表达

目的:研究神经细胞粘附分子(NCAM)在人脑星形细胞瘤发生发展中的作用.方法:用原位杂交和免疫组织化学方法检测40例人脑星形细胞瘤组织中的NCAM mRNA及其蛋白(CD56)的表达.结果:星形细胞瘤1,2级中NCAM mRNA及其蛋白的表达显著高于星形细胞瘤3,4级,核酸与蛋白水平的检测结论一致.结论:NCAM mRNA及其蛋白的表达与星形细胞瘤的恶性程度有关, NCAM的高表达可能与星形细胞瘤的侵袭转移有关,并有可能成为星形细胞瘤恶性程度、侵袭能力的判别指标,为术后继续治疗提供依据.

中药复方植物胰岛素对糖尿病大鼠肾血管重建的影响

目的:观察中药复方植物胰岛素(CPI)对糖尿病大鼠肾血管重建的影响,并探讨糖尿病时肾血管重建的方式和机制.方法:以链脲佐菌素(STZ)诱导SD大鼠建立糖尿病动物模型,应用形态学、计算机图像分析等方法,观察糖尿病大鼠肾内小动脉和肾小球毛细血管基底膜的几何形态,以及CPI和氨基胍对其的影响. 结果:肾内小动脉表现为壁厚、壁面积增大,壁腔比(壁厚内径比、壁面积内径比)增大;肾毛细血管基底膜增厚.CPI和氨基胍均可有效地抑制糖尿病肾内小动脉和肾毛细血管的重建,两者效果无明显差异(P>0.05).结论:肾内小动脉病变是导致糖尿病肾病的原因之一;CPI能有效地抑制肾血管的重建.

左旋卡尼汀与红细胞生成素治疗肾性贫血的中期疗效观察

目的:观察血液透析患者补充左旋卡尼汀(L-carnitine)是否能加强重组人红细胞生成素(rhEPO)的作用.方法:将96例患者随机分为3组进行治疗.A组:透析后静脉注入左旋卡尼汀1.0 g;B组:每周用rhEPO 50～150 IU/kg,透析后皮下注射1～2次;C组:透析后静脉注入左旋卡尼汀1.0 g,并且每周合用rhEPO 50～150 IU/kg.治疗前及治疗后2,4,6个月分别测定患者白蛋白、血红蛋白、红细胞体积分数.结果:补充左旋卡尼汀的患者白蛋白明显高于单用rhEPO 者(P<0.01);2,4个月后, C组血红蛋白、红细胞体积分数明显高于A,B组(P<0.01);C组rhEPO的用量明显比B组少(P<0.01).结论:左旋卡尼汀能改善血透患者的营养状况和血红细胞检测指标,其作用在4个月时达高峰,并可明显减少患者使用rhEPO的量.

气管内应用IL-18重组腺病毒对实验性肺转移癌的治疗作用

目的:研究气管内应用白细胞介素18(IL-18)重组腺病毒(AdIL-18)对实验性肺转移癌的治疗作用.方法:(1)小鼠气管内滴入AdIL-18后,以RT-PCR法检测小鼠肺组织中IL-18 mRNA表达,ELISA法测定局部及外周血IL-18及其相关因子的水平.(2)C57BL/6小鼠尾静脉注射Lewis肺癌3LL细胞以建立肺转移癌模型,观察气管内应用AdIL-18对实验性肺转移癌的治疗作用,包括肺转移结节数、动物存活期、存活率变化等,并比较自然杀伤(NK)细胞和细胞毒T淋巴细胞(CTL)活性.结果:(1)气管内应用AdIL-18后6 h,小鼠肺内即可检测到IL-18 mRNA 表达;72 h后肺灌洗液中可测到IL-18,且高于外周血水平,而对照组肺灌洗液及外周血中均未检测到.(2)气管内滴入AdIL-18对实验性肺转移癌有治疗作用,可使肺转移结节减少、动物的存活期延长及存活率升高,同时对NK细胞、CTL活性有增强作用.结论:气管内应用IL-18重组腺病毒后可有效表达,并对实验性肺转移癌有治疗作用.

以电解可脱性弹簧圈急诊栓塞破裂动脉瘤

目的:总结27例以电解可脱性弹簧圈(GDC)急诊栓塞破裂动脉瘤的体会.方法:自发性蛛网膜下腔出血患者27例.女17例,男10例,年龄40～85岁.25例在急性SAH发病12 h内行GDC动脉瘤栓塞.动脉瘤的大小为3～22 mm.6例动脉瘤颈较宽的患者行瘤颈成形术.术后常规给予低分子肝素7 d.7名患者GDC栓塞后鞘内给予t-PA.结果:动脉瘤栓塞后随访3个月到1年,无1例发生再出血.恢复良好17例,中等5例,2例恢复差,3例死亡.有6例发生血管痉挛.结论:用GDC急诊栓塞为治疗破裂动脉瘤开拓了新途径.

动态增强磁共振成像诊断肝占位的价值

目的:研究动态增强磁共振成像(MRI)在肝占位检出和定性诊断中的价值.方法:176例患者有223个肝占位(198个病理证实,25个随访复查证实),两名医生在不了解后诊断的条件下,回顾分析全部病例的平扫及动态增强MRI检查资料,统计检出率和定性诊断肯定率.结果:在132个肝占位>3 cm组,平扫和动态增强MRI的检出率均高达97.7%以上;平扫联合动态增强MRI的定性诊断肯定率(95.5%),较单纯平扫(90.9%)有所提高,但无统计学差异.在91个肝占位≤3 cm组,动态增强MRI的检出率(动脉期+门脉期,98.9%)和平扫MRI(T1WI+ T2WI,92.3%)相比差异显著(P<0.05);动脉期的检出率(96.7%)明显高于门脉期(85.7%),两期相比差异非常显著(P<0.01);平扫联合动态增强的定性诊断肯定率(91.2%)较单纯平扫(75.8%)有明显提高(P<0.01).结论:动态增强MRI是提高肝占位检出和定性诊断的有效方法.

米帕林对硬膜外移植自体髓核大鼠疼痛相关行为的影响

目的:探讨与椎间盘突出相关的腰腿痛的发病机制.方法:通过硬膜外置管的方法给硬膜外移植自体髓核的大鼠注射生理盐水及磷脂酶A2抑制剂米帕林,并对其疼痛相关行为进行了观察.结果:大鼠硬膜外移植自体髓核后能产生明显的疼痛相关行为,注射生理盐水后疼痛相关行为无明显改善,在注射米帕林后,大鼠的疼痛相关行为明显改善,与髓核移植组相比较,在术后的3～9 d有显著性差别.结论:磷脂酶A2在腰椎间盘相关性腰腿痛的发病机制中起重要的作用,研制有效的磷脂酶A2抑制剂能提高腰腿痛的治疗水平.

二维彩色多普勒超声对糖尿病患者颈、股动脉损伤的检测

目的:探讨二维彩色多普勒(2D-CDUS)超声检测评价糖尿病患者颈、股动脉损伤的价值.方法:40例糖尿病患者按年龄分为3组,用二维图像结合脉冲多普勒(PW-Doppler)血流频谱检测患者颈、股动脉.按U-B 6级分类对动脉损伤情况进行分级研究.结果:糖尿病组较对照组动脉损伤发生率高、程度重(P<0.05, P<0.01).糖尿病组中40岁以上年龄组较40岁以下组的Ⅳ级动脉损伤发生率高(P<0.05).结论:40岁左右患者动脉损伤有加重趋势.U-B的Ⅳ级可作为糖尿病患者动脉损伤严重程度的判定指标.2D-CDUS检测动脉损伤对临床早期诊断此类患者动脉损伤和跟踪观察损伤变化具有重要意义.

慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞分泌细胞因子的检测及其意义

目的:探讨白细胞介素10和干扰素γ在病毒性肝炎的诊断、治疗和预后判断等方面的意义.方法:采用植物血凝素(PHA)刺激89例慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)分泌IL-10和IFN-γ,采用ELISA法检测其水平.结果:随着患者病情的加重,IL-10和IFN-γ水平均降低,且与肝脏损伤程度有密切关系.结论:IL-10和IFN-γ参与了肝炎的病理过程.当两者产生水平低于正常水平近一半时,预示肝脏受损较重,病情较重,预后较差.

米利酮对风湿性心脏病患者围术期心肌酶谱和丙二醛的影响

目的:观察米利酮对风湿性心脏病(风心病)患者瓣膜置换术围术期心肌酶谱和膜脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的影响.方法:20例心功能Ⅱ～Ⅳ级瓣膜置换术患者,随机分为A和B组(每组10例).入室后,A组10 min内予以负荷剂量米利酮30 μg/kg,继以0.5 μg/(kg.min) 静脉输注;B组以相同速度推注生理盐水.分别于麻醉诱导前 (T1)、诱导后30 min(T2)、主动脉阻断后30 min(T3)、主动脉开放后10 min(T4)、主动脉开放后30 min(T5)、体外循环后30 min(T6)、体外循环后8 h(T7)、术后24 h(T8 )和术后72 h(T9)从肺动脉采取混合静脉血,用全自动生化仪测定肌酸激酶(CK)、肌酸激酶-同功酶(CK-MB);用硫代巴比妥酸法测定MDA.结果:两组T4～T9的CK,CK-MB值显著升高;A组T3～T9的CK值显著低于同时间点的B组(P<0.05),但两组间各时间点的CK-MB均无显著差异.B组T6～T8 各时间点的MDA值明显升高,A组仅在T7升高;但两组相比均无显著差异.结论:米利酮可明显降低血中的CK水平,但对CK-MB及MDA无显著影响.

杀莠素A对兔软骨细胞增殖和产生NO的影响

目的:研究杀莠素A对IL-1抑制软骨细胞增殖和诱导NO产生的作用.方法:IL-1单独或与杀莠素A共育于软骨细胞,用结晶紫染色法测定软骨细胞增殖,Griess法测定NO的产生.结果:IL-1抑制软骨细胞增殖,杀莠素A剂量依赖地逆转IL-1的作用.杀莠素A还能剂量依赖地抑制IL-1诱导软骨细胞产生NO.结论: 杀莠素A逆转IL-1抑制软骨细胞增殖的作用可能是通过NO介导的.

战术药材储备的系统动力学研究

目的:探讨战术药材储备系统模型的动力学性质和行为.方法:应用系统动力学方法构建战术药材储备模型,借助于计算机编程,模拟有关参数变化时的系统行为.结果:初始储备量的大小对系统的平均库存量和平均缺货量无明显影响;目标储备量、到货速率和发货速率对平均库存量和平均缺货量有显著影响.结论:在有效控制到货速率的情况下,降低战术药材储备量对系统的保障效能无不利影响.

基于pMTR1质粒的转基因小鼠突变研究模型的建立

目的:建立在基因组中整合有pMTR1质粒的C57BL/6转基因小鼠家系,为体内基因突变研究提供有效的动物模型.方法:利用分子克隆技术构建pMTR1质粒.将其线性化后,用显微注射法注射入572只C57BL/6小鼠受精卵,再将它们分别移入45只受体母鼠的输卵管中,共产仔44只,存活35只,采用PCR,PCR-Southern和基因组Southern杂交三级筛选法鉴定子代小鼠.以4只经基因组Southern杂交证实在基因组DNA中整合有多拷贝结构完整的pMTR1质粒的小鼠作Founder小鼠,进行转基因小鼠的建系工作.对每个Founder小鼠已有的F1代及F2代转基因小鼠的基因组DNA进行pMTR1质粒回收实验.结果:从转基因小鼠基因组中可以回收出结构、功能完整的pMTR1质粒. 结论:(1)建立了在基因组DNA中整合有pMTR1质粒的C57BL/6转基因小鼠家系;(2)该转基因小鼠能用作哺乳动物体内突变研究模型.

人肝脏再生增强因子cDNA的克隆、表达及纯化

目的:克隆人肝脏再生增强因子(hALR) cDNA,构建重组表达载体并对其诱导表达、纯化.方法:提取胎儿肝组织总RNA,利用RT-PCR技术扩增出hALRcDNA,克隆于载体pGEM-T,酶切鉴定后亚克隆至表达载体pGEX-4T-3,测序证实序列正确并转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达融合蛋白GST-hALR,表达产物通过谷胱甘肽 Sepharose 4B亲和层析纯化后进行Thrombin酶切.结果和结论:构建成融合蛋白GST-hALR的重组表达质粒,hALR在大肠杆菌高效表达,重组蛋白主要以可溶形式存在于胞质中,融合蛋白的分离纯化简单易行.

手术后胰腺炎发病机制的探讨

目的:探讨手术后胰腺炎的病理变化及其发生机制.方法:对11例手术后胰腺炎死亡病例进行尸检分析, 以肉眼和光学显微镜观察器官、组织的病理改变,并联系临床资料进行回顾性研究.结果:所有病例的胰腺组织均有程度不等的炎症反应和较为严重的坏死,同时伴有心肌损害,肺水肿、出血,肝细胞变性坏死,肾功能不全,脑组织水肿、出血,神经细胞变性等.结论:手术后胰腺炎是临床较为常见的一种严重并发症,胰腺有不同程度的炎症反应和较为严重的坏死.推测其发生机制与手术对胰腺的直接损伤、胰液分泌亢进和胰管阻塞以及手术引起的血供障碍有关.

微型钛板内固定治疗颌骨骨折

我科自1996年起应用微型钛板骨折内固定器对28例颌骨骨折患者施行内固定治疗,手术效果满意,报告如下.

三叉神经脱髓鞘病变中T细胞检测的意义

三叉神经脱髓鞘病变过程中的T细胞增多,其病理特点为血管周围的单核细胞浸润和节段性髓鞘脱失,此型脱髓鞘病变均是一种细胞免疫介导的疾病.参与细胞免疫应答的T细胞成分有两大群,即CD4+和CD8+.它们可直接介导发生损害,并且诱导B细胞产生病变原性自身抗体而攻击靶器官.研究T细胞及其亚群对三叉神经的作用,对探讨脱髓鞘病变的发生机制及探索有效的防治方法具有指导意义.

手术室连续夜班方式的探讨

手术室夜班护士的工作量大、压力大,提高夜班护士工作质量不容忽视.现行的夜班排班制度具有一定的缺陷,医护矛盾比较突出,护理质量有待提高.自1998年12月至1999年12月我们采用连续夜班的排班方式,有效地提高了护理质量,并逐渐被临床护士所接受.

体外循环围手术期中性粒细胞CD18的变化

近年来,越来越多的证据表明中性粒细胞(PMN)参与体外循环(CPB)组织器官损伤.PMN膜表达的粘附分子介导PMN与内皮细胞(EC)的粘附,是PMN致组织损伤的早期关键步骤.本研究观察CPB围手术期循环血中PMN CD18水平的变化,探讨PMN 引起组织器官损伤的机制.

手术患者接送车的改进和应用

临床上对手术室使用的患者接送车要求是必须有效地避免交叉感染,安全可靠,省时省力.目前国内一般采用铺置浸有消毒液的地毯的方法对接触污染区域的车轮进行消毒,避免交叉感染.另一方面,在将患者由接送车移向手术床时,一般用多人抬抱等方式,难免增加患者痛苦,也增加医护人员工作强度.因此,横移对接车的研制十分紧迫.通过几年的研究和临床试用,横移对接车已获得初步成功,现报告如下.

硝苯地平诱发室性早搏三例报告

80年代以来,钙通道阻滞剂已普遍用于治疗高血压.随着应用面的扩展,短效钙拮抗剂硝苯地平诱发不良反应的报道逐渐增多,以致对其在心血管疾患中的治疗作用引起争议.临床实践中,曾遇到3例老年心血管病患者服用硝苯地平后诱发室性早搏,抗心律失常治疗无效,停药后自行消失.现结合有关文献介绍如下.

以发热、皮疹为首发症状的急性戊型肝炎一例报告

1 临床资料患者男性,48岁.1999年2月12日无明确诱因出现发热,体温38℃,伴有全身乏力,无鼻塞、流涕、咳嗽,自行服用泰诺、克感敏效果不佳,体温不退,持续5 d.2月17日双上肢、双股内侧及胸腹皮肤出现点状红斑,不高出皮面,有轻度瘙痒,在外院就诊,给予维生素C、葡萄糖酸钙等治疗无效,遂于18日凌晨来我院急诊.我院查血常规WBC 13.2×109/L,LYM 0.588,N 0.32,拟发热原因待查(传染性单核细胞增多症?)收入我科.

司帕沙星治疗感染性疾病的多中心临床研究

目的:比较司帕沙星片剂和氧氟沙星片剂治疗呼吸系统、泌尿系统和消化系统感染的疗效和安全性.方法：在上海市7所医院进行多中心、随机、对照研究.司帕沙星组(试验组)110例,200 mg,1次/d；氧氟沙星组(对照组)110例,200 mg,2～3次/d.均口服,疗程均为7～14 d.结果：试验组和对照组的治疗有效率分别为91.8%和82.7%,痊愈率分别为63.3%和56.4%,细菌清除率分别为94.3%和88.7%,均无统计学差异(P>0.05).分别比较试验组和对照组呼吸、泌尿和消化系统治疗的有效率和痊愈率,均无显著性差异(P>0.05).两组不良反应发生率分别为2.7%和1.8%,无统计学差异(P>0.05).结论：司帕沙星片剂治疗临床感染性疾病的疗效和不良反应与氧氟沙星片剂相似,但用药1次/d,应用方便,值得推广.

人外周血细胞线粒体DNA中存在特大片段缺失突变

目的:了解线粒体DNA大片段缺失突变及其意义.方法:采用6种方法提取人外周血细胞DNA, 其中1种方法先分离线粒体,再抽提线粒体DNA.以得到的人外周血细胞DNA为模板进行PCR扩增,其产物经琼脂糖凝胶回收后与pGEM-T载体连接、转化、测序.结果:6种方法抽提DNA进行PCR扩增后,产物电泳行为相同,发现人血细胞线粒体DNA存在13 162 bp特大片段缺失突变.结论:此缺失是首次发现的,经测序证明为人线粒体DNA大片段的缺失.

厚片法测定大鼠胃壁粘液凝胶层的厚度

人及多种动物胃粘膜表面结合粘液凝胶层(AML)是粘液屏障的形态基础.其厚度的实验室测定方法主要有冰冻切片、超声测定、微电极法及裂隙灯辅助测定等,这些方法或因需特殊设备、或因操作烦琐、或因欠准确,使胃壁结合粘液凝胶层厚度的测定应用受到限制.现介绍一种在国外研究基础上改良的、简便易行的胃壁AML厚度测定方法.

微波技术在超微结构病理诊断标本制备中的应用

电镜作为某些疾病的病理检查的一种工具,已为广大医务工作者所熟知.但电镜样品常规制备的方法周期较长,影响及时诊断.近几年来,我们将微波照射作为常规技术应用于电镜标本制备.结果表明,该方法不仅缩短了样品制备时间,同时,还可以满足电镜诊断要求.现已成为本室制备超微结构病理诊断标本的常规技术,介绍如下.

皮鼓"反取皮"法在皮肤缺损修复中的应用

各种原因所致的皮肤坏死和缺损,使皮肤与筋膜间产生广泛撕脱和潜行剥离,破坏了支配皮肤的血供,若处理不当会造成皮肤全部坏死、感染、败血症、肢体残废,甚至死亡.我科自1995年以来,采用皮鼓"反取皮"法治疗,获得良好的效果,现报告如下.

视网膜表面膜的电镜标本制备方法

病变视网膜表面的一层膜在眼底病诊断中有重要意义,但其不仅组织薄,而且非常软,手术取下来的表面膜组织易卷缩在一起,须飘浮在液体表面才能展开.视网膜表面膜如用常规电镜标本制样方法显示不出其细胞层次.为了能很好地观察表面膜组织中各种细胞形态及它们相互之间的关系,我们摸索出了一种简单、方便、易行的方法,现报告如下.

高频喷射通气对通气导管摆动的影响

经鼻气管内插入细塑料导管行高频喷射通气是目前喉显微手术全麻的主要通气方式之一,但高频喷射通气可引起细塑料导管在气管内摆动[1～4].为了评估摆动在气管内产生的影响,本实验在体外研究了不同驱动压下高频喷射通气对各种通气导管摆动的影响.

全国首批医学编辑硕士研究生在第二军医大学出版社顺利通过学位论文答辩

长海医院颅内动脉瘤栓塞治疗达国际先进水平

东方肝胆外科医院大胆探索解剖第三肝门的新手术方法

长海医院不开刀成功修补特大心房缺损

人重组GDNF及其生物活性研究

人GDNF基因在昆虫细胞中的高效表达

几丁糖庆大霉素药物释放系统的研究

39例严重肝损伤的院内救治

骶神经根电刺激排尿中完全性后根去传入的替代方法

完全性房室间隔缺损合并法乐四联症的手术矫正

壳聚糖化疗药物缓释药粒局部治疗骨巨细胞瘤的实验研究

核酸疫苗及其在疾病免疫防治中的应用

自从发现质粒载体携带的基因能在小鼠肌细胞中表达,核酸免疫技术已愈来愈受到人们重视,并被看作是继传统疫苗及基因工程亚单位疫苗之后的第三代疫苗.仅在短短的几年时间内,有关的实验报道已涉及包括细菌、病毒、寄生虫等感染性疾病以及肿瘤等预防和治疗的研究.本文就核酸疫苗的免疫机制、优越性、安全性,以及目前的研究进展状况作一综述.

猪囊尾蚴抗原DNA疫苗诱导的免疫保护效应

目的:观察猪囊尾蚴保护性抗原cC1 DNA疫苗诱导的小鼠免疫应答,及对仔猪的免疫保护作用. 方法:将全长cC1 cDNA插入真核表达质粒载体pcDNA3,构建了重组质粒p3-cC1,肌注小鼠,ELISA检测小鼠血清抗cC1抗体IgG及IgG2a水平,并进行仔猪的免疫保护实验. 结果:免疫小鼠第3周出现特异性IgG应答,第8周IgG水平达到高;小鼠血清的IgG2a检测显示,第2周IgG2a 应答即为阳性,且长时间保持较高应答水平.用该疫苗免疫仔猪使其获得了73%的保护率. 结论:猪囊尾蚴保护性抗原cC1 DNA疫苗能有效诱导仔猪的免疫保护效应.

乙肝核心抗原DNA疫苗的构建及其免疫原性分析

目的:构建HBV核心抗原DNA疫苗,并探讨其在实验动物体内的表达及其免疫原性 .方法:采用PCR法从HBV全基因DNA中获得核心抗原DNA片段,并将其重组到pcDNA3载体.以此为候选疫苗分别免疫小鼠和树□,并检测其抗HBc IgG.结果:构建了乙肝核心抗原候选核酸疫苗pcDNA3-HBc.免疫接种该疫苗后第2周抗HBc IgG水平开始升高,小鼠至第9周,树□至第7周升至峰值.结论:构建的pcDNA3-HBc DNA疫苗在小鼠及树□体内获表达并诱导了体液免疫反应.

猪囊尾蚴副肌球蛋白核酸疫苗的免疫保护性研究

目的:研究猪囊尾蚴副肌球蛋白(AgB)核酸疫苗诱发的免疫应答.方法:将pcDNA3-AgB核酸疫苗肌注4～6周龄的昆明种小鼠,从2周后开始用ELISA方法检测小鼠体内IgG和IgG2a的水平.另外将该核酸疫苗注射C57BL/6小鼠,体外培养小鼠脾细胞,用刀豆蛋白A(ConA)和特异性抗原刺激,ELISA试剂盒检测细胞因子IL-2和IL-4的水平,并观察脾淋巴细胞增殖反应.另外,将该核酸疫苗肌注瘦型仔猪,进行攻击实验,计算相对保护率.结果:注射疫苗后的第3周起,IgG即为阳性,持续升高至第8周;从第2周起,小鼠血清IgG2a为阳性,第4周达到高峰.细胞因子检测表明,IL-2水平远远高于空载体对照组,而IL-4含量却与空载体对照组无显著差异;实验组刺激指数明显高于空载体对照组.副肌球蛋白核酸疫苗对仔猪的相对保护率为80%.结论:猪囊尾蚴副肌球蛋白核酸疫苗在小鼠动物实验中引发了以Th1型免疫应答占优势的全面免疫应答.pcDNA3-AgB核酸疫苗对仔猪具有较好的免疫保护性.

新城疫病毒HN基因真核表达质粒的构建及其抗肿瘤作用的初步研究

目的:构建新城疫病毒(NDV)血凝素神经氨酸酶(HN)基因真核表达质粒,并初步探索其在抗肿瘤治疗中的机制及应用价值. 方法:用RT-PCR从NDV中克隆HN cDNA,并构建HN的真核表达载体,转染COS-7细胞表达.注射至小鼠B16黑素瘤模型,检测其抗肿瘤作用. 结果:成功地克隆了NDV HN cDNA,所构建的pcDNA3-HN有良好的表达,动物实验显示,pcDNA3-HN有增强荷瘤小鼠CTL,NK杀伤活性的作用. 结论:NDV HN的真核表达质粒具有增强荷瘤小鼠抗肿瘤CTL,NK 细胞反应的作用.

钩端螺旋体DNA疫苗pcD-flaB的构建及其免疫机制的初步研究

目的:观察钩端螺旋体DNA疫苗的保护效果,并探讨该疫苗的免疫机制.方法:应用定向克隆的方法构建DNA疫苗pcD-flaB,肌肉途径免疫豚鼠,观察豚鼠攻击感染钩体后的保护率,以ELISA法检测特异性抗体IgG水平,并观察疫苗对豚鼠腹腔巨噬细胞分泌的TNF活性的影响.结果:该疫苗对同型钩体的保护率为100%,特异性抗体水平在疫苗注射第6周达到高峰, TNF的活性明显增高.结论:DNA疫苗pcD-flaB对同型钩体感染有较强的保护作用;能够有效地诱导机体的体液免疫应答,并增强巨噬细胞所产生的TNF的活性.

Fas调节白血病细胞HL-60内Stat3的表达和磷酸化

目的:观察Fas对HL-60细胞的异常增殖是否有调节作用.方法:用基因重组技术将Fas 的细胞外区跨膜区与IL-6信号传导子gp130细胞内区构成嵌合型受体(Fas/130),同时,将Fas死亡区域(FasDD)替换Fas/130中130细胞内区无结构域部分(Fas/130f),分别在HL-60中表达后,用抗Fas抗体激活这些嵌合型受体,随后用免疫组化和蛋白质印迹法分析受体细胞内区形成同源性三聚体(130cyt-130cyt-130cyt 及FasDD-FasDD-FasDD)后细胞内Stat3的表达及磷酸化. 结果:转染pED Fas/130后用抗Fas抗体作用6～8 h,HL-60细胞Stat3表达下降(P<0.05),而Fas/130f组的Stat3的表达下降更明显(P<0.01);两实验组中Fas/130f 组在特异性抗体诱导10 min时,Stat3 Tyr705磷酸化较Fas/130组明显降低(P<0.01).结论:Fas 死亡域抑制白血病HL-60细胞内Stat3的表达,并同时抑制Stat3 Tyr705磷酸化.

白血病抑制因子受体中gp130细胞内区诱导白血病细胞Meg-01内c-myc的表达

目的:观察人白血病细胞系Meg-01白血病抑制因子(LIF)受体α亚基(gp190)和另一亚基gp130细胞内区与c-myc的关系,以探明白血病细胞过度增殖和晚期分化异常的机制.方法:用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体受体(190/130, 130/190),并分别在Meg-01表达,其与野生型受体竞争性结合LIF,用免疫组化和蛋白质印迹法分析受体细胞内区形成同源性二聚体(190cyt-190cyt,130cyt-130cyt)后的细胞状况和细胞内c-myc的表达. 结果: 转染pED 190/130后用LIF作用 6 h,Meg-01细胞c-myc表达量增加,细胞增殖明显;而另一嵌合体受体对Meg-01细胞c-myc的表达无影响.结论:LIF受体中gp130亚基的细胞内区参与白血病Meg-01细胞内增殖信号的传递.

白血病抑制因子受体与白血病细胞HL-60内有丝分裂原活化蛋白激酶的关系

目的:探讨人白血病细胞系HL-60白血病抑制因子(LIF)受体α亚基(gp190)和另一亚基(gp130)的细胞内区与有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)的关系,了解LIF受体在调节白血病细胞增殖和分化中的意义.方法: 用基因重组技术将两基因细胞内区互换以构成两嵌合体受体(190/130, 130/190)并分别在HL-60表达,其与野生型受体竞争性结合LIF,用免疫组化和蛋白质印迹法分析受体细胞内区形成同源性二聚体(190cyt-190cyt,130cyt-130cyt)后的HL-60细胞内MAPK p42/p44的Thr202/Tyr204磷酸化状况.结果:转染pED190/130后用LIF作用10 min后,HL-60细胞MAPK p42/p44 的Thr202/Tyr204磷酸化增加,细胞增殖明显;而另一嵌合体受体与α亚基形成190cyt-190cyt时 HL-60细胞MAPK的磷酸化降低. 结论: LIFR中gp130亚基的细胞内区参与了MAPK的激活及白血病细胞HL-60增殖信号的传递.