骨骼肌兴奋-收缩偶联超微结构瞬时变化研究

目的:从毫秒级功能变化水平实时观察骨骼肌在潜伏期内的细胞超微结构形态变化.方法:采用双向红外线探测器-计算机控制的电刺激与超低温快速冷冻固定同步技术,对电刺激后的蟾蜍腓肠肌组织作快速冷冻固定,采用透射电镜对该肌在电刺激后0.8,5.6,8.4ms及静息期的超微结构变化进行对比研究.结果:骨骼肌组织处于静息期时,其肌膜与肌纤维的间隙较宽,受电刺激后0.8ms开始至8.4ms,肌膜与肌细胞间的间隙大大变窄.并发现骨骼肌组织在电刺激后0.8,5.6及8.4ms时肌浆网前端的膜产生两个圆孔,而当骨骼肌处于静息期时肌浆网膜并无此形态结构.结论:当骨骼肌兴奋-收缩偶联发生时,肌膜在产生去极化的同时产生位移,并与肌纤维的间距发生改变;骨骼肌收缩时肌浆网膜出现小孔.

吸入一氧化氮和静滴前列腺素E1对急性肺动脉高压的治疗效应

目的:探讨吸入一氧化氮(NO)和静滴前列腺素E1(PGE1)对急性肺动脉高压的治疗作用.方法:通过静脉持续滴注血栓素类似物U46619复制犬急性肺动脉高压实验模型,观察静滴小剂量PGE1 10ng/(min.kg),大剂量PGE1 50ng/(min.kg)和吸入体积分数为4.0×10-5 NO及合并PGE1 10ng/(min.kg)对急性肺动脉高压的血流动力学影响.结果:小剂量PGE1使肺动脉平均压(MPAP)下降(17±8)%,体动脉平均压(MSAP)下降(19±10)%,心排量(CO)明显改善[(1.21±0.25)L/min vs (1.83±0.27)L/min, P<0.01];大剂量PGE1使MPAP下降(29±7)%,MSAP下降(41±11)%,CO呈明显下降趋势[(1.21±0.25) L/min vs(1.04±0.38)L/min,P<0.05];吸入NO 4.0×10-5以后,MPAP下降(23±6)%,而 MSAP无明显变化,CO上升不明显[(1.34±0.17)L/min vs (1.43±0.24)L/min,P<0.05];吸入NO 4.0×10-5合并小剂量PGE1后,MPAP下降(31±7)%,MSAP下降(14±9)%,CO明显改善[(1.34±0.17)L/min vs(2.01±0.34)L/min,P<0.01].结论:吸入NO合并小剂量的PGE1不仅能明显降低肺动脉压,而且可适当扩张体循环血管,改善心功能,有利于各组织的血液灌注,是一种较为理想的治疗方案.

阿霉素诱导肺癌细胞凋亡的实验研究

目的:建立培养肺癌细胞凋亡模型.方法:人肺癌细胞A549在含20μmol/L阿霉素培养液中培养4h,换用普通培养液培养,在不同时间点收集漂浮细胞,检测漂浮细胞计数,锥虫蓝排斥实验,吖啶橙染色,电镜观察,DNA电泳,流式细胞仪分析.结果:处理的A549细胞形态学表现为锥虫蓝拒染,细胞皱缩变形,细胞膜完整,部分呈泡状突起,细胞核染色质浓聚、边集或碎裂,凋亡小体形成.细胞DNA电泳见梯状电泳带,流式细胞仪检测发现凋亡峰出现,符合凋亡细胞特征.凋亡细胞主要存在于漂浮细胞中,多出现于改用普通培养液培养10～12h.结论:阿霉素可以诱导A549肺癌细胞发生凋亡.

喉癌组织中P16蛋白表达的检测及临床相关性研究

目的:探讨喉鳞状细胞癌中P16蛋白表达的情况及临床相关性.方法:用免疫组化的方法检测42例喉鳞癌组织中P16蛋白的表达情况.结果:P16蛋白表达的阳性率为47.62%(20/42).其中声门上型组为40.00%(4/10),声门型组为57.89%(11/19),声门下型组为38.46%(5/13);细胞分化Ⅰ级组为75.00%(12/16),Ⅱ～Ⅲ级组为30.77%(8/26);伴有颈淋巴结转移组为20.00%(3/15),无颈淋巴结转移组为62.96%(17/27);临床Ⅰ期组为40.00%(8/20),Ⅱ～Ⅳ期组为54.54%(12/22).结论:提示P16蛋白的表达与癌细胞的分化程度及肿瘤的转移情况有关,与临床分型及分期无关.

卡托普利对培养大鼠窦房结细胞缺血损伤保护的形态学研究

目的: 研究培养的大鼠窦房结(SAN)细胞缺血损伤的形态学变化及卡托普利对缺血损伤的保护作用.方法: 用新生4d SD大鼠150只.(1)细胞培养和制备缺血损伤模型;(2)活细胞观察;(3)HE染色;(4)透射电镜实验.结果: 缺血60min时培养细胞的活力及结构开始受损伤,90min时损伤表现明显,120min时表现为严重损伤.而卡托普利处理组,细胞受损伤程度明显减轻.结论: 随着缺血时间的延长,培养SAN细胞缺血性损伤渐加重,而卡托普利对该细胞有明显的保护作用.

子宫内膜异位症患者红细胞免疫功能与NK细胞活性的相关性

目的: 探讨红细胞免疫功能及自然杀伤(NK)细胞活性在子宫内膜异位症(内异症)发病中的作用,以及两者之间的相关性.方法:采用红细胞C3b受体花环试验(RC3bR)及红细胞免疫复合物花环试验(RIcR)测定44例内异症患者(内异症组)红细胞免疫功能变化,采用4-甲基偶氮唑盐(MTT)法检测患者外周血NK细胞活性,并与正常妇女(对照组)进行比较.结果:内异症组RC3bR及NK细胞活性低于对照组(P<0.05),其值随内异症病情加重有逐渐下降趋势;内异症组Ⅲ,Ⅳ期患者RIcR较对照组明显升高(P<0.05).44例内异症患者RC3bR值与NK细胞活性的降低程度呈直线正相关(r=0.6659,P<0.01).结论:内异症患者红细胞免疫功能及NK细胞活性的降低可能与该病的发生与发展有关.

移植NT-4基因修饰细胞对大鼠前角运动神经元损伤的保护作用

目的:观察神经营养素4(NT-4)基因修饰细胞对成年大鼠脊髓前角运动神经元损伤的保护作用.方法:应用逆转录病毒介导的体外NT-4基因转移方法,制备高表达NT-4的基因修饰细胞.离断大鼠左侧坐骨神经作为外周神经损伤模型,右侧作为对照,在离断处移植NT-4基因修饰细胞.观察大鼠脊髓前角运动神经元尼氏染色和胆碱酯酶染色的变化.结果:在移植NT-4基因修饰细胞组和对照组间,尼氏和胆碱酯酶染色有显著性差异.结论:移植NT-4基因修饰细胞对外周神经损伤所造成的运动神经元的退变有显著的改善作用.

烧伤小鼠供体皮肤特异性延长成活研究

目的:以烧伤小鼠为模型研究供体皮肤特异性延长成活的可行性.方法:C57BL/6小鼠造成20%TBSAⅢ度烧伤创面,48h后切痂,移植BALB/c或C3H/He小鼠皮肤,经60Co射线全身照射9Gy,立即注射无T淋巴细胞的C57BL/6小鼠和BALB/c小鼠的骨髓细胞.组Ⅰ为烧伤的C57BL/6小鼠移植BALB/c小鼠皮肤;组Ⅱ在组Ⅰ基础上行放射处理;组Ⅲ在组Ⅱ基础上行混合骨髓移植;组Ⅳ类似组Ⅲ,但移植的皮肤为C3H/He;组Ⅴ为C57BL/6小鼠同系皮肤移植对照组.结果:除组Ⅱ小鼠由于骨髓耗竭而全部死亡外,其他各组间动物死亡率无差异,未见移植物抗宿主病表现.异体皮平均成活时间组Ⅰ为(8.4±1.5)d;组Ⅱ(17.5±3.7)d;组Ⅳ(32.5±8.1)d;组Ⅲ为(78.2±5.6)d,与组Ⅰ、组Ⅱ和组Ⅳ比较P<0.05;组Ⅴ90d.结论:C57BL/6小鼠对BALB/c小鼠皮肤显示了特异性移植耐受,而排斥MHC不相关的C3H/He的小鼠皮肤.本研究也为进一步的临床基础研究奠定了基础.

钾通道激动剂对抗原诱发哮喘豚鼠气道阻力及气道炎症的作用

目的:探讨钾通道激动剂在哮喘防治中的作用.方法:测定哮喘动物模型气道阻力、肺泡灌洗液细胞计数及病理检查,观察钾通道激动剂BRL 55834对气道阻力及气道炎性细胞浸润的影响,并与对照剂二甲亚砜(DMSO)、氨茶碱、BRL 38227及维拉帕米比较.结果:预先静注BRL 55834可抑制卵蛋白诱发致敏豚鼠气道痉挛,减轻气道炎性细胞浸润,对血压无明显影响;BRL 38227及氨茶碱均能抑制炎性细胞浸润,氨茶碱还能抑制卵蛋白诱发的气道痉挛,但BRL 38227可降低豚鼠血压;维拉帕米对卵蛋白诱发的气道痉挛及炎性细胞浸润均无抑制作用.结论:钾通道激动剂BRL 55834具有气道相对选择性,抑制抗原所致气道阻力升高及气道炎性细胞浸润,且对心血管系统无明显影响,具有临床应用前景.

血液AFP mRNA在复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌中的诊断意义

目的:探讨血液AFP mRNA在复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌中的表达及意义.方法:应用巢式RT-PCR检测40例复发性肝癌及伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌血液AFP mRNA.结果:21例伴有肝外远处器官转移的原发性肝癌血液AFP mRNA均表达阳性(100%),19例复发性肝癌患者中有7例血液AFP mRNA表达阳性(36.8%),两组比较差异有显著性意义(P<0.01).结论:血液AFP mRNA有希望成为判断肝癌复发或预测肝癌远处器官转移的客观性指标之一.

BQ610对猫急性缺血性心律失常的拮抗作用

目的:观察内皮素A受体拮抗剂BQ610对猫急性心肌缺血性心律失常的影响,以探讨内皮素在急性缺血性心律失常发生中的作用.方法:结扎猫左冠状动脉前降支(LAD)起始段,造成急性心肌缺血,观察30 min缺血期内心律失常发生情况及LAD内注射BQ610对心律失常的影响.结果:BQ610呈剂量依赖性拮抗LAD结扎引起的猫急性缺血性心律失常.结论:内源性内皮素可能通过内皮素A受体参与致急性缺血性心律失常.

融合表达β趋化因子受体5NH2端膜外第一襻及其特异抗体F(ab')2的制备

目的:研究β趋化因子受体5(CCR5)NH2 端膜外第一襻结构域的功能及其特异抗体F(ab')2的制备.方法:计算机分析趋化因子超基因家族,定位超基因家族中同源顺序低的结构域NH2端膜外结构域,PCR扩增出该结构域114个核苷酸序列.构建融合表达载体pGEX-IN/NR5,经测序鉴定正确后,在E. coli中表达,经纯化后免疫新西兰兔.蛋白A亲和层析和胰蛋白酶消化IgG,经Sepharose-12 柱层析制备F(ab')2.结果:经还原和非还原聚丙烯酰胺凝胶电泳和FAX分析证明得到抗CCR5 NH2端的特异性抗体.结论:本方法为一简捷快速的特定功能结构域抗体F(ab')2制备方法,对研究该基因在体内的表达及生物学功能提供了重要的实验材料,同时也对超基因家族中亚家族特异抗体研制提供了一种研究思路和方法.

病种医疗需求强度测量方法研究

目的:借鉴病例组合指数的思路及疾病严重程度测量方法,提出医疗需求强度概念,并建立按病种的医疗需求强度测量方法,考查疾病对卫生资源的需求程度.方法:对3所医院1996年度全部住院病例进行分析,测量医疗服务供给能力与医疗服务需求强度.结果:目前按分级医院评审划分的医院等级规模与其对应的医疗服务供给能力以及需求强度不相符,存在资源配置上的结构性浪费.结论:应按医疗服务供给能力与需求强度等级制定卫生资源的结构配置标准,以及相应的效率考核标准,以实现医疗需求强度与医院等级、资源量及效率相统一的合理运行机制.

高血压和衰老对冠状动脉重构的影响

目的:研究高血压和老化对冠状动脉结构和功能的影响.方法:以4,16,26,40,55周龄的自发性高血压大鼠(SHR)和同种系正常血压的京都种大鼠(WKY)为动物模型,离体灌注测定冠状动脉大流量(MCF),光镜下测量冠状动脉外径(OD)、内径(LD)、冠状动脉壁横截面积(CSA)及横截面积和内径比(CSA/LD).结果:高血压可致冠状动脉LD显著下降,CSA和CSA/LD显著增大;老化对LD及OD<100μm冠状动脉的CSA和CSA/LD无显著影响,但可致OD>100μm冠状动脉的CSA和CSA/LD显著增大;高血压和老化可致MCF显著下降,MCF与OD>100μm冠状动脉的CSA/LD呈显著直线负相关.结论:高血压和老化伴随有冠状动脉结构和功能的改变,OD>100μm冠状动脉结构改变可能是冠状动脉功能改变的主要原因.

伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗性株感染的免疫差异

中药脱痂膏对烧伤创面的作用

目的:探讨外用中药脱痂膏对深度烧伤创面的脱痂机制.方法:取经脱痂膏和Ag-SD霜换药的深Ⅱ度烧伤创面组织标本及渗液,用抗CD68单抗标记深度烧伤创面组织中的巨噬细胞,并计数创面渗液细菌,比较两组间的差异.结果:使用脱痂膏的创面组织含有较多的CD68+细胞(巨噬细胞),而创面渗液细菌数量与Ag-SD组无明显区别.结论:脱痂膏通过招引巨噬细胞至创面局部,吞噬和分解坏死组织,从而达到脱痂的目的.

复方萘替芬喷雾剂及冷霜的研制与应用

目的:观察烧伤创面抗真菌感染及防治浅部真菌病外用新药复方萘替芬(S1123)的体外抑菌效果和临床疗效.方法:(1) 体外检测萘替芬、酮康唑和S1123的低抑菌浓度, 比较3种药物的抗真菌效果; (2) 将S1123和对照药品应用于烧伤创面,在治疗前后取创面痂皮进行真菌培养,观察真菌转阴率;(3) 观察S1123冷霜治疗某舰艇部队浅部真菌病患者1927例的效果.结果:S1123对丝状真菌和酵母菌具有广谱、高效的抑菌作用,对常见的致病真菌--曲霉和念珠菌,其小抑菌浓度分别为0.156,0.625μg/ml.临床使用双盲法观察3d真菌感染转阴率达77.71%,与对照组比较相差非常显著.对浅部真菌病治疗的有效率为95.6%.结论:S1123是一种疗效很好的外用抗真菌新药.

纤维蛋白原降解产物对大鼠主动脉血管细胞的作用及蛋白激酶C抑制剂的影响

目的:研究蛋白激酶C(PKC)抑制剂对纤维蛋白原降解产物(FFDP)引起的大鼠主动脉血管内皮细胞(RAEC)损伤的保护作用和平滑肌细胞(RASMC)增殖的抑制作用.方法:RAEC损伤以乳酸脱氢酶释放测定,RASMC增殖以结晶紫染色法测定.结果:FFDP能促进RAEC释放乳酸脱氢酶,诱导RASMC增殖;PKC抑制剂槲皮素、Ro 31-8220剂量依赖性地抑制FFDP对RAEC的损伤,并抑制FFDP诱导的RASMC增殖.结论:PKC抑制剂对FFDP引起的RAEC有保护作用,对RASMC增殖有抑制作用.

Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病基因诊断与基因突变情况的调查

目的:(1) 建立Ⅰ型常染色体显性遗传多囊肾病(ADPKDⅠ)的基因诊断方法;(2) 寻找具有普遍意义的突变方式,以优化基因诊断.方法:(1) 采用Southern杂交和 PCR 方法, 调查ADPKDⅠ基因3'端单拷贝区突变情况;(2) PCR扩增分析微卫星SM7.结果:将AH4与16例患者的基因组DNA进行Southern杂交后, 均显示有正常的15 kb的杂交片段.对27例患者ADPKD Ⅰ基因3'端AH4和JH14两探针间的5.72kb 基因组DNA行PCR扩增后,未发现5.5kb基因组DNA缺失.109名正常人SM7 PCR扩增显示,其多态信息含量(PIC)值为0.76,3个家系的SM7 等位片段与疾病基因连锁关系明确.结论:在汉族中:(1) ADPKDⅠ基因3'端单拷贝区无常见性大片段基因组DNA缺失类突变;(2) SM7所含PIC 较高,用其可在70%～80%的ADPKDⅠ家系中作出基因诊断.

感染约氏疟原虫的中华按蚊基因差异表达分析

全世界按蚊有500余种,不同蚊种的传疟效能差异很大.阐明蚊媒传疟效能差异的调控机制,探索控制疟疾传播的新策略,是当前疟疾防治研究的新课题.本研究试图通过基因表达系列分析[1],从感染疟原虫的蚊媒体内分离特异表达的cDNA片段,并进一步论证其与感染的相关性.

超分割内放射治疗脑深部恶性肿瘤的临床观察

我院自1995年8月至1997年2月采用后装超分割内放射治疗方法对37例脑深部恶性肿瘤进行治疗,取得了较好疗效.现将有关临床资料总结分析报告如下.

动物药獐、麂的骨和肌肉的无机元素分析

獐、麂为鹿科动物,其骨、肌肉均可入药.据中药大辞典记载:獐肉"补益五脏",其骨"益精髓,悦颜色",主治产后虚乏,五劳七伤,虚损不足,脏腑冷热不调.麂骨有"补气、暖胃、耐饥,化湿祛风"之功效.现代医学研究发现,獐、麂具有增强机体免疫力、抗衰老、促进溃疡愈合等多种功能.随着医学的发展,人们对动物药的研究越来越广泛和深入,尤其对动物药活性成分的分析已进入一个新的阶段.近20年来,作为各类药物的活性成分之一的微量元素,其研究也不断引起人们的重视,对动物的骨、肌肉的微量元素分析及其药理、药效的讨论也屡见不鲜,但至今尚未见对獐、麂之骨、肌肉无机元素分析方面的报道.我们采用原子吸收光谱测定了獐和麂的骨、肌肉中5种无机元素含量,为动物药成分研究积累了资料,并对其无机元素含量与其作用关系进行初步探讨.

B超对胎儿先天畸形诊断价值的分析

先天畸形儿的出生不仅给家庭带来巨大的精神压力和痛苦,亦给社会造成极大的负担,而不准确的预测结果又会给孕妇造成严重的心理负担,导致一些不恰当的医疗干预.因此,早期和准确地检出畸形儿十分重要和必要.本研究回顾分析1991年至1997年9月间曾在我院行产前检查和(或)分娩的孕产妇及其新生儿的情况,分析B超对胎儿先天畸形的诊断价值、特点和注意事项.

糖尿病并发肺部感染临床分析

糖尿病患病率正在逐年上升,可并发多种并发症,而肺部感染是主要的并发症之一,并常常威胁患者生命.本研究回顾性总结了我院近年来40例糖尿病并发肺部感染的流行病学、细菌耐药率情况.

新生儿颅脑急症的临床表现与CT分析

随着社会的进步及医学技术的发展,急救已越来越为人们所重视.与成人急救相比,新生儿颅脑急症的救治显得尤为重要,因为它不仅是新生儿早期死亡或后期致残的重要原因,而且救治效果的好坏在一定程度上影响未来人口的素质.同时新生儿颅脑急症的救治困难较大.因新生儿不仅不能自述症状,且临床表现往往不典型.本文通过对56例经CT检查的新生儿颅脑急症的资料进行分析,旨在提高认识,并引起重视.

Alport综合征二例报告

1 临床资料病例1,男,8岁.反复眼睑水肿、蛋白尿半年,于1996年5月20日入院.患儿入院前半年出现双眼睑水肿,尿蛋白(+～),红细胞6～8个/HP,外院诊断为肾病综合征,经强的松治疗无效转入我院.家族史:3个舅舅均在未成年前死于尿毒症,1个舅舅耳聋,其母及大姨妈有蛋白尿及镜下血尿,父母非近亲结婚,其家系图谱如下:

蹄铁肾合并IgA肾病一例报告

1 临床资料患者男性,16岁.因血尿5d入院.5d前无明显诱因出现肉眼无痛性血尿,深茶色;无尿频、尿急、尿痛、排尿不畅;无腰痛、水肿、少尿;无发热、咽痛、咳嗽;休息后血尿无缓解.

肉毒杆菌毒素局部注射治疗贲门失弛缓症24例分析

1998年3月至1999年2月我们对24例贲门失弛缓症患者进行食管下括约肌(LES)内注射肉毒杆菌毒素(BT,兰州生物制品研究所生产,批号060801)治疗,取得满意疗效.

反相HPLC法测定血啉甲醚原料药及注射液的含量

血啉甲醚(hermimether,HMME)是我室独家研制成功的一种光动力抗癌新药.与混合卟啉制剂不同,HMME是一种单体卟啉,其化学名为:3(8)-(1-甲氧基乙基)-8(3)-(1-羟乙基) 次卟啉Ⅸ.研究结果表明[1,2],该药对体外培养人癌细胞具有较强的光灭活作用,对小鼠实体瘤有可靠的光动力学疗效.临床应用研究表明,HMME对人消化道肿瘤有确切的光动力学疗效,具有在体内清除速度快、毒性小等特点.因此,可望发展成为一种新一代肿瘤光动力学治疗药.关于HMME的含量测定方法尚未见文献报道.本文报道用反相HPLC法测定HMME原料药及注射液的方法.

Northern印迹法的改进

Alwine发明的Northern印迹法被广泛用于检测mRNA的大小和丰度, 但由于其降解酶RNase广泛存在,且理化性质稳定, 故在实际操作中,尤其是从组织中提取总RNA进行Northern印迹,对那些设备不是很完善的实验室来说,得到一个比较理想的杂交结果比较困难.本研究对Northern印迹的几个主要环节:RNA的提取、转移及RNA转移至尼龙膜后的杂交方法进行了改进,使之更加经济、简便.

自身抗原60kd-Ro/SSA序列分析及抗原性预测

抗自身抗原Ro/SSA的自身抗体出现于系统性红斑狼疮(SLE)、干燥综合征(SS)等自身免疫病患者血清中,可能参与疾病的发病机制.我们已克隆获得60kd-Ro/SSA的基因,并在体外培养中得到表达[1].我们应用蛋白质数据库与序列分析软件程序包, 分析了SLE中自身抗原60kd-Ro/SSA蛋白质分子性质和结构特点,以寻找其特征性结构位点,为进一步的结构、功能研究打下基础.

镍钛合金颅骨盖板及固定钉的临床应用

颅骨缺损修补是神经外科的常见问题.迄今为止,临床上用的颅骨修补非生物材料有多种,诸如硫化硅橡胶板、硅橡胶涤纶丝网板、硅橡胶不锈钢丝板、有机玻璃、骨水泥、钛板、钛条及钛网等.每种材料均有各自的优缺点,并有一定的手术并发症,目前临床上尚无十分理想的修补材料.1995年4月至1996年11月,我院和江苏省人民医院等5所医院采用江苏省江阴金属制品研究所研制的镍钛(NiTi)形状记忆合金颅骨盖板及固定钉修补颅骨缺损,临床试用39例,随访效果满意,现报告如下.

学报将增加统计学审稿程序

不同剂型5-氟尿嘧啶对靶动脉壁影响的实验研究