海绵窦显微解剖及其临床意义

目的:为海绵窦手术提供解剖学参数.方法:在手术显微镜下对15例成人尸体头部标本进行与海绵窦有关的神经及海绵窦三角的解剖学测量.结果:每侧测量了10个与海绵窦三角和动眼、滑车神经有关的数据,发现通过Hakuba三角和Parkinson三角几乎能暴露海绵窦内所有结构.结论:熟悉有关颅神经和海绵窦三角的解剖,有利于海绵窦病变手术的顺利进行.

三种木瓜的乙醚提取部位的气相色谱-质谱分析

目的:分析与比较3种木瓜的乙醚提取部位的化学成分与相对含量.方法:采用气相色谱-质谱(GC-MS)分析与鉴定其化学成分.结果:从3种木瓜的乙醚提取部位中首次分离与鉴定出61个化合物,其中皱皮木瓜(Chaenomeles lagenaria) 40个化合物,宣木瓜(C.lagenaria 产自安徽宣州) 34个化合物,光皮木瓜(C.sinensis) 23个化合物.有10个化合物在3种木瓜中都含有,但相对含量差别大.它们是乙酸、苯甲醛、正葵酸、14-甲基十五烷酸甲酯、丙三醇、苯甲酸、6,9-十八碳二烯酸甲酯、角鲨烷、硬脂酸和二十烷基油酸酯.结论:木瓜的品种和产地不同对其所含化学成分类型与相对含量有明显影响,本实验数据对中药木瓜的质量评价有参考价值.

四种抗运动病药物的比较研究

目的:筛选药效好、副作用小的抗运动病药物.方法:通过文献资料分析,选取脑益嗪和多潘立酮、异丙嗪和麻黄素、茶苯海明与苯丙胺和生姜联合用药,以及盐酸苯环壬脂等4组药物,以乳糖为安慰剂,用Coriolis加速度耐力评价药效,用副作用症状、体征发生率评价副作用表现,用神经行为评价系统测试副作用对工作能力的影响.结果:脑益嗪和多潘立酮联合用药的加速度耐力与异丙嗪和麻黄素联合用药相比无显著差异(P>0.05),但显著高于其他各组(P<0.05).异丙嗪和麻黄素联合用药的副作用(嗜睡、头昏、疲乏、口干和心悸)发生率高于其他各组(P<0.01或P<0.05).神经行为测试各指标的组间均无显著差异(P>0.05).结论:脑益嗪和多潘立酮联合用药的药效好,未发现副作用表现及对工作能力的影响.

肺癌患者伴下呼吸道感染时细菌学与临床研究

目的:探索肺癌伴下呼吸道感染时病原学及其意义.方法:研究1985～1998年间肺癌伴下呼吸道感染患者细菌学特征和临床特征.结果:(1)2 928例肺癌患者伴发感染1 211例(41.36%),大细胞肺癌(51.71%)和小细胞肺癌(48.81%)感染发生率高于腺癌(38.93%)和鳞癌感染(35.27%)(P<0.01);早期肺癌感染发生率(Ⅰ期8.38%, Ⅱ期18.30%)明显低于晚期肺癌(Ⅲ期44.72%, Ⅳ期49.92%)(P<0.01).(2)分离细菌880株,革兰阴性细菌占70.91%,绿脓杆菌、不动杆菌、肺炎杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌居前5位.(3)药敏试验提示,绿脓杆菌、不动杆菌、黄杆菌、D群非肠球菌等出现高比例、多重耐药.革兰阴性菌对头孢噻甲羧肟、依米配能、氨基糖甙类、喹喏酮类较为敏感.革兰阳性菌则对万古霉素高度敏感.结论:肺癌伴下呼吸道感染与肺癌的组织类型、临床分期密切相关,病原以革兰阴性杆菌为主,且存在多重耐药;治疗时应根据药敏试验结果选择药物,同时加强综合治疗.

不典型肝脓肿的MRI诊断

目的:分析不典型肝脓肿的MRI表现及病理机制,探讨增强MRI的诊断价值.方法:32个不典型肝脓肿经手术病理及临床治疗后证实,回顾性分析平扫和增强MRI的表现,并与手术病理对照.结果:不典型肝脓肿有3种类型:5个(15.62%)为直径小于2.2 cm的房腔型脓肿,增强后才能显示其脓腔及腔壁;19个(59.38%)为纤维肉芽性脓肿,增强后呈明显的延迟强化,间以细小液化或凝固坏死区;8个(25.0%)为实质性团块状的脓肿,其中6个伴有完整包膜,增强后包膜强化.平扫MRI对 18个(56.25%)不典型脓肿定性困难,联合增强扫描正确诊断28个(87.50%).结论:肝脓肿病理演变在个体间的差异导致MRI表现的不典型,应用增强MRI能提高定性诊断能力.

胃经沿线小腿骨间膜的血管及钙的分布

目的:探讨穴位的物质基础及穴位血管与钙的分布.方法:(1) 在成人小腿骨间膜的墨汁灌注标本上,观测其胃经(胫侧缘)沿线的3,4,5及7寸(中医使用的同身寸,以下全同)处血管的分布特点;(2) 用质子激发X线发射(PIXE)技术,对胃经沿线的小腿骨间膜组织进行扫描,测得钙的相对含量.结果:(1) 胃经沿线3,4,5,7寸处的血管密度(Aa%)显著高于各寸之间的血管密度(P< 0.01);(2) 各定标点的钙峰值平均为其间基数值的6.73倍.结论:(1) 胃经沿线骨间膜血管呈节段性密集分布,穴位区血管密集;(2) 穴位区钙富集,其密集分布也呈节段性.

周边部视网膜格子样变性的预防性光凝治疗

目的:观察对周边部视网膜格子样变性进行预防性激光光凝治疗的疗效.方法:用氩蓝绿激光对67眼周边部视网膜格子样变性进行全环绕式视网膜光凝术.结果:术后21眼随访6个月、46眼随访12个月,无一眼发生孔源性视网膜脱离.结论:对伴有干性裂孔、玻璃体牵引、一眼已有视网膜脱离、无晶状体或人工晶状体眼的周边部视网膜格子样变性进行预防性激光光凝治疗是必需、安全和有效的.

加速超分割放射治疗食管癌的临床研究

目的:探讨加速超分割放射治疗食管癌的疗效及放射反应和并发症.方法: 80例胸段食管癌患者随机分为常规分割放疗组(常规组)和加速超分割放疗组(加速超分割组).常规组 40例,每天照射1次,每次2 Gy,每周5次,总剂量70 Gy.加速超分割组40例,其前2/3疗程放射方法同常规组,剂量40 Gy,后1/3疗程每天照射2次,每次1.5 Gy,2次间隔时间6 h以上,总剂量70 Gy.所有患者采用10 mV X线照射.结果:加速超分割组的3年实际生存率和原发肿瘤控制率明显高于常规组,分别为42.5%比20.0%和52.5%比25.0%.两组的放射反应和并发症无显著差异,所有患者按计划完成了治疗.结论:加速超分割放疗食管癌较常规分割放疗明显提高了局控率和生存率,放射反应和并发症无明显增加,患者能够耐受该治疗方法.

海水浸泡腹部开放性损伤对大鼠体液代谢的影响

目的:了解腹部开放性损伤的大鼠经海水浸泡不同时间后机体体液代谢的变化.方法:观察雄性Wistar大鼠腹部开放性损伤条件下,经海水浸泡不同时间后大鼠血浆的水、电解质、酸碱平衡,晶体渗透浓度,红细胞体积分数及血红蛋白含量等的变化,并设单纯腹部开放性损伤组及生理盐水浸泡组作为对照.结果:与单纯腹部开放性损伤组及生理盐水浸泡组相比,高渗海水进入腹腔后1 h,大鼠血浆Na+, K+, Cl-浓度即显著升高,HCO3-浓度显著下降,阴离子间隙明显扩大,血浆晶体渗透浓度、红细胞体积分数及血红蛋白含量也明显增加;且随浸泡时间的延长,大鼠体内高钠、高钾、高氯血症,血液浓缩及酸中毒程度愈加严重,在浸泡后2～3 h达峰值.结论:海水浸泡腹部开放性损伤与单纯腹部开放性损伤的病理生理学变化有明显不同,经海水浸泡的时间愈长,上述变化愈严重,对机体的危害性愈大.

食管癌的侵犯深度及分化程度与区域淋巴结转移的关系

目的:探讨食管癌的侵犯深度及细胞分化程度与区域淋巴结转移的关系.方法:回顾性分析1996年5月至1999年5月在我院行手术治疗的470 例食管癌患者临床及病理资料,比较肿瘤不同侵犯深度、细胞分化程度之间区域淋巴结转移情况的差异.结果:随着肿瘤侵犯深度的加深及细胞分化程度的降低,区域淋巴结的转移度呈显著上升趋势(χ2检验,P<0.01).一旦肿瘤侵犯超过深肌层,区域淋巴结的转移度显著增加,与侵及浅肌层相比,T2期肿瘤侵及深肌层者淋巴结转移度增加10 倍,T3期增加17倍,T4期增加23 倍;与高分化食管癌相比,中分化癌淋巴结转移度增加3倍,中低分化癌增加4.5倍,低分化癌增加6倍.结论:食管癌患者肿瘤的侵犯深度及细胞分化程度是预计区域淋巴结转移状态的重要因素,在食管癌的临床分期、治疗方法的选择及预后判断方面起重要作用.

抗肿瘤剂氯化两面针碱在碱溶液中的反应

目的:通过两面针碱在碱溶液中的反应实验,对文献报道的氯化两面针碱可能存在C(6)=N(5)双键结构高反应活性的抗癌机制提出质疑.方法:在无氧条件下, 抗癌生物碱氯化两面针碱与不含某些特定氨基酸的氢氧化钠水溶液反应.结果和结论:在该反应条件下生成等量的5, 6-二氢两面针碱和氧化两面针碱.该结果和相关的理论分析基本否定了有关文献提出的氯化两面针碱可能的抗癌机制,并认为其机制尚待深入研究.

ACEI对血压正常的早期糖尿病肾病治疗作用的Meta分析

目的:对血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)能否延缓血压正常的早期糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)患者的病情进展进行系统评价.方法:检索MEDLINE及中国生物医学文献数据库中收录的1990年1月至1999年4月间,有关ACEI对伴微量白蛋白尿的早期DN治疗作用的随机对照临床试验方面的文献.按照入选标准,终有10项随机对照临床试验纳入本研究.用RevMan3.1软件对10项随机对照临床试验的结果进行合并.结果:尿微量白蛋白排泄率、收缩压、舒张压、平均动脉压的合并效应分别为-77.502 mg/24 h[-100.748,-54.256],-5.002 mmHg[-9.630,-0.685](1 mmHg=0.133 kPa),-2.949 mmHg[-4.005,-1.892],-4.284 mmHg[-5.444,-3.123],P值均小于0.05.以发展至临床蛋白尿为终点,合并的优势比OR(odds ratio)值为0.27[0.18,0.40].亚组分析表明,以上结果的合并效应在Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病患者中无明显差异,直线相关分析未发现尿微量白蛋白排泄率与收缩压、舒张压及平均动脉压的治疗效应之间有显著相关性.结论:对血压正常的早期DN患者,ACEI可降低尿微量白蛋白的排泄率,延缓由DN早期向临床蛋白尿期的进展,且此作用可能并不依赖于其降压效应.

大鼠头端延髓腹外侧区NMDA受体在动脉压力感受器反射中的作用

目的:研究大鼠头端延髓腹外侧区(RVLM)谷氨酸NMDA受体在介导动脉压力感受器反射(ABR)中的作用.方法:在氨基甲酸乙酯麻醉的大鼠RVLM双侧各微注射0.1μl的50 mmol/L氯胺酮,观察动脉血压、心率以及ABR的变化.结果:双侧RVLM内微注射氯胺酮后动脉血压和心率明显下降(P<0.05),同时能部分或完全阻断ABR (P<0.05).结论:谷氨酸NMDA受体在维持交感心血管活动的紧张性兴奋和介导ABR中具有十分重要的作用.

MIF基因修饰的FBL3红白血病细胞的生物学性质

目的:研究巨噬细胞游走抑制因子(MIF)基因修饰的FBL3红白血病细胞的生物学性质变化,为探讨其体内诱导抗肿瘤免疫反应的作用奠定基础.方法:以腺病毒介导,将MIF基因导入小鼠FBL3红白血病细胞,观察其体外生物学性质变化.将MIF基因修饰的FBL3细胞(MIF-FBL3)接种小鼠体内,观察其致瘤性和局部病理学变化,同时检测细胞因子mRNA表达.结果:腺病毒能有效地将MIF基因导入FBL3细胞,MIF的分泌可持续10 d.MIF-FBL3细胞形态、增殖能力及表面MHC-Ⅰ,MHC-Ⅱ,B7-1,B7-2,ICAM-1等分子的表达与野生型FBL3细胞相比无明显变化,但在小鼠体内的致瘤性降低,小鼠存活期延长,肿瘤局部可检测出mTNF-α mRNA和mLtn mRNA的表达,并有明显的单核和淋巴细胞浸润.结论:MIF-FBL3细胞体外生物学性质无明显改变,但可能通过分泌MIF在体内激活抗肿瘤免疫功能.

去窦弓神经大鼠主动脉重建及机制探讨

目的:观察去窦弓神经(SAD)大鼠主动脉重建及发生发展过程,初步探讨体液因素在其中的作用.方法:计算机图像分析测定主动脉形态;离体血管制备观察主动脉功能;放免法测定AngⅡ浓度.结果和结论:(1)主动脉结构重建在SAD后 4～16周时随时间延长而加重.从几何形态学和中膜显微结构改变来看,主动脉结构重建主要属血管肥厚型,且与平滑肌生长和胶原积聚有关.(2)主动脉对NE的收缩反应在SAD后 8～32周时进行性增强,对ACh的舒张反应在SAD后 8～32周时减弱.SAD后 32周时主动脉去内皮后对NE的收缩反应增强作用消失.提示血管功能改变与内皮和(或)内皮与平滑肌的相互作用改变有关.(3)SAD后 10周时,血浆AngⅡ浓度无明显改变,而主动脉AngⅡ浓度升高.提示组织RAS激活可能参与SAD引起的主动脉重建.

羟喜树碱对人胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的:研究羟喜树碱(HCPT)体外抑制人胰腺癌细胞株SW-1990增殖并诱导其凋亡的作用.方法:体外培养的胰腺癌细胞经不同质量浓度(1.562 5, 3.125, 6.25, 12.5, 25,50, 100 μg/ml)的HCPT处理20～24 h后,用MTT法测定细胞增殖情况,再分别以AnnexinⅤ早期凋亡检测试剂盒、电子显微镜、流式细胞术和TUNEL标记以及bcl-2免疫细胞化学标记检测细胞凋亡情况.结果:(1)3.125～100 μg/ml HCPT作用24 h后,肿瘤细胞的增殖抑制率均非常显著高于对照组(P<0.01).(2) 50 μg/ml HCPT作用20 h后,经流式细胞术及TUNEL标记检测,肿瘤细胞的凋亡率分别为13.2%和15.3%;100 μg/ml HCPT作用20 h后,两种方法检测的细胞凋亡率分别为26.1%和28.4%. (3) 电镜及AnnexinⅤ标记荧光检测观察表明,50 μg/ml HCPT作用下,肿瘤细胞主要呈早期凋亡表现,凋亡率为18.4%.(4) 50 μg/ml HCPT作用24 h后,肿瘤细胞bcl-2表达较对照组明显减弱.结论:HCPT在体外可抑制SW-1990细胞的增殖,部分作用机制是诱导细胞凋亡;提示HCPT可作为细胞凋亡诱导剂用于胰腺癌的治疗.

硫酸葡聚糖预处理方案在脐血移植中应用的初步研究

目的:进一步了解脐血造血细胞回巢潜能及硫酸葡聚糖(DS)的动员作用机制.方法:重症联合免疫缺陷小鼠经亚致死剂量γ射线照射或DS预处理后,进行经冻存后的人脐血移植,利用人粒-单系祖细胞培养及流式细胞术,检测植入小鼠骨髓、脾脏等器官中的人源性细胞.结果:与未预处理组相比,DS或照射预处理组移植受体鼠内人源CD45+,CD34+及CD19+细胞植入水平明显提高;DS预处理组植入水平虽较照射预处理组差,但毒性较低,小鼠存活率高达100%.结论:DS是一种安全、有效的预处理方案;DS对造血干细胞既有动员作用又有促进龛位腾出以供移植干细胞回巢的作用.

不同产地丹参中3种丹参酮含量变异

目的:考察不同产地丹参种内3种丹参酮含量变异.方法:采用超声提取结合HPLC法对全国8个主产地的丹参脂溶性部分中丹参酮ⅡA、隐丹参酮及丹参酮Ⅰ进行了含量测定.结果:3种丹参酮含量范围分别为:丹参酮ⅡA 0.10%～0.40%、隐丹参酮0.04%～0.46%、丹参酮Ⅰ0.03%～0.15%,且隐丹参酮及丹参酮Ⅰ在药材中的含量并不完全与丹参酮ⅡA的含量呈正相关.结论:丹参酮ⅡA、隐丹参酮及丹参酮Ⅰ含量分别以四川中江、辽宁凌源和山东平邑所产的丹参高,以上海崇明所产的丹参上述3项指标低.

普伐他汀对高脂血症及血浆D-二聚体影响的临床观察

有关他汀类(HMG-CoA 还原酶掏剂)药物对高脂血症的疗效及其在冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)一、二级预防中的作用已有许多实验及临床研究[1,2].

半导体激光治疗牙本质过敏的疗效

牙本质过敏是多咱牙体疾病所共有的一种症状,为牙科临床中的常见病、多发病,平均每7位牙病患者中就用1位是牙本质过敏.

中药防治根治性子宫切除术后尿潴留

根治性子宫切除术后尿潴留是常见的手术并发症之一,属于神经源性膀胱尿道功能障碍,表现为术后两周不能自主排尿或排尿后残余尿超过100 ml[1].术后尿潴留给患者带来很大痛苦及治疗上的麻烦,留置尿管时间过长,增加了泌尿道感染机会,并延长了住院时间.我们采用中药口服预防或治疗根治性子宫切除术后患者尿潴留,取得一定效果,现报告如下.

经皮穿刺肾活检177例临床分析

1 对象和方法1.1 临床资料 5年间共穿刺177例次,男95例、女82例;年龄12～77岁,平均34.47岁.临床诊断主要为:肾病综合征64例(36.16%);隐匿性肾小球疾病20例(11.30%);狼疮性肾炎15例(8.47%);慢性肾炎14例(7.91%);急性肾炎综合征10例(5.65%);其他(血尿待查、慢性肾功能不全、蛋白尿、肾移植术后少尿及急进性肾炎等)54例(30.51%).

足底原发性恶性黑素瘤的临床病理分析

原发于足底的恶性黑素瘤临床上少见[1],而有关足底的恶性黑素瘤的研究国内报道甚少.我们对13例足底原发性恶性黑素瘤进行了光镜、免疫组织化学的观察,现报道如下.

假性黑色棘皮病一例报告

1 临床资料 患者女,12岁,因进行性肥胖6年,颈部、会阴部、腋下色素加深3年,于1997年7月6日入院.患者6年前体质量开始增加,每年增长5 kg.3年前颈部、腋下、大腿内侧、会阴部出现色素沉着,且逐渐加深.发病以来,无溢乳、多毛、口干、多饮、多尿、多食等症状.

以肾脏损害为主要表现的多发性内分泌腺瘤病一例报告

1 临床资料 患者,女性,70岁,因烦渴、多饮、多尿、夜尿增多6年入院.入院时每日需喝水3～4 L,每日尿量2 500～3 000 ml,夜尿4～5次,量约1 200～1 500 ml.

骨组织嗜酸性肉芽肿二例报告

1 临床资料例1,男,44岁,因拔牙后创口不愈合入院.检查( )/(-) |( 78)/(-)缺如,相应颊沟处分别可见两处0.5 cm×0.5 cm圆形洞口,深约2 cm及3 cm,患者因疼痛不合作,未探明两洞是否与上颌窦相通或两洞间是否相通.(2)/(7) |松动Ⅲ度,叩痛(+),双侧颌下及颏下区未触及淋巴结肿大,张口正常,颞颌关节运动自如.X线显示:左侧上颌骨密度减低,有较淡软组织肿块阴影.术前颊沟处洞口内组织活检报告:颌骨组织嗜酸性肉芽肿.治疗经过:局麻下行肉芽肿刮治术去除0.5 cm×0.8 cm的牙槽骨、牙龈组织及颊粘膜,拔除松动的(2)/(7) |,刮除肉芽组织,冲洗后严密缝合创面.术后病理诊断为上颌骨嗜酸性肉芽肿.术后随访5年,骨质愈合,预后良好.

胰管支架置入术治疗胰腺分裂症一例报告

1 临床资料 患者男性,40岁,1998年3月因进油腻食物出现右上腹胀痛,向腰背部放射,外院查血淀粉酶为1 460 U/L,诊断急性胰腺炎,治疗后症状改善出院.之后,相继发作6次,1999年9月收入本院.体检:慢性病容,右上腹压痛,余正常.

t-PA治疗人工晶体植入术后晶体前膜疗效的分析

随着现代白内障囊外摘除联合人工晶体植入手术技巧及设备的提高,其适应证越来越广.一些外伤性、并发性、代谢性白内障等往往因术后炎症反应较重而在瞳孔区的人工晶体前形成纤维蛋白性机化膜[1],从而影响视力,甚至发生继发性青光眼.我院于1998年1月至1999年7月应用组织型纤溶酶原激活剂(tissue plasminogen activator, t-PA)进行前房注射治疗23例(25只眼)人工晶体植入术后渗出膜,获得满意疗效.现报告如下.

外耳道多毛与冠心病

自1973年Frank首次报道耳垂皱折与早期冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)有明显的相关性以来,人们一直试图寻找出冠心病的易患因素及体表特征,以期早期发现冠心病的易患人群.在临床工作中,我们注意到不少心肌梗死的男性患者在外耳道有较多黑色毛发,外耳道黑色毛发的存在与冠心病是否有关,文献中尚未见报道.本研究检测1998年3月至1998年11月间在我院住院的男性患者中外耳道多毛的出现率,并分析其与冠心病两者之间的关联,为进一步深入研究提供依据.

自体脂肪声带内注射术治疗单侧声带麻痹

声带内注射自体脂肪治疗单侧声带麻痹,改善发音及防止误吸,方法有效可靠,已在临床上应用[1],但其远期效果国外报道不一,而国内尚未见临床报道.我们总结了2年来20例患者的治疗结果,现报道如下.

毛细管区带电泳法测定三磷酸腺苷制剂含量

三磷酸腺苷(ATP)为辅酶类药物,是机体能量的重要来源,临床上用于肌萎缩、脑溢血后遗症等多种疾病的治疗.ATP制剂在生产和贮存过程中易带进或产生二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP),因而目前卫生部部颁及地方标准中多采用纸层析或纸电泳分离ATP后分光光度法测定.该法繁琐费时,且只能测定ATP含量.近年有用HPLC法测定的报道[1],但其仅对ATP进行了定量分析.Shao等[2]曾用毛细管电泳法(CE)分析生物体内ATP,ADP,AMP等核苷酸.本实验采用毛细管区带电泳法(CZE),以对氨基苯磺酸钠为内标(IS),同时分析ATP制剂中ATP,ADP,AMP含量,方法简便,结果准确.

无创性心电学组合检查对心肌梗死患者的预告价值

作者对179例心肌梗死患者,进行了无创性心电学组检查及平均21个月的随访.以心肌梗死患者恢复期是否出现心律失常与对照组进行比较, 旨在探讨无创性心电学组检查对心肌梗死患者的预告价值.

人体外周血TGF-β1的检测及其在慢性肝病中的诊断价值

转化生长因子β1(transforming growth facthor β1, TGF-β1)是一种由两条多肽链组成的具有多种生物学活性的多功能生长因子,相对分子质量为2.5万.体内多种细胞如淋巴细胞、血小板、巨噬细胞等均可合成与分泌TGF-β1,其中以血小板内含量多[1].TGF-β1与多种疾病如肝纤维化、肿瘤等有关.在TGF-β1与肝纤维化的相关性研究中,国内外研究大多着重于TGF-β1的生物学作用以及体内肝脏局部组织器官TGF-β1 mRNA的表达[2],而对血清、血浆中TGF-β1检测及其在肝纤维化诊断中的价值、标本不同存放条件对检测结果的影响等研究较少.我们应用ELISA法测定了正常人新鲜血清、血浆中的TGF-β1含量和血清不同存放条件对测定结果的影响,以及慢性肝病患者血清TGF-β1水平,结果报告如下.

重视肝纤维化血清学诊断的研究

肝过度纤维化(肝硬化)是由多种原因引起肝脏慢性损伤后,肝内细胞外基质(extracellular matrix,ECM)成分异常沉积,进而导致肝功能受损的一个综合征.肝纤维化是个生理病理过程,肝硬化则是过度纤维化的一个不良结局.在国人中,至少有10%的人有HBV感染,其中有相当部分的人将按:急性肝炎→慢性肝炎→肝硬化的三步曲发展.

<眼科显微手术学>简介

<神经肽的基础与临床>即将出版

地塞米松对人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性的影响

目的:探讨地塞米松对人α1(Ⅰ)原胶原基因调控序列的作用.方法:用组织块法原代培养人皮肤成纤维细胞并进行传代培养作为本研究的模型细胞.(1)采用BrdU掺入的ELISA法,测定经不同浓度地塞米松处理24 h后成纤维细胞的增殖情况.(2)构建含长短不一的人α1(Ⅰ)原胶原基因5′侧翼序列与氯霉素乙酰基转移酶(CAT) 报告基因的3种重组质粒;以脂质体法转染人皮肤成纤维细胞;ELISA法测定不同浓度地塞米松作用24 h后,转染了3种重组质粒的成纤维细胞的CAT表达量.结果:(1)在加入2%FCS或10%FCS的培养条件下,1×10-9 ～1×10-4 mol/L地塞米松处理24 h后,各浓度组成纤维细胞增殖值之间以及与对照组之间差异均无显著性(P>0.05).(2)3种重组体转染成纤维细胞,并经地塞米松处理24 h后,转染细胞的CAT相对表达量测定:地塞米松组与对照组之间、地塞米松较高浓度组(1×10-5 mol/L)与较低浓度组(1×10-6 mol/L)之间,差异均有显著性(P<0.05). 结论:地塞米松在1×10-9～ 1×10-4 mol/L浓度范围内,对所研究的模型细胞--人皮肤成纤维细胞增殖无明显作用.地塞米松对胶原基因启动序列具有负性调控作用,且存在剂量依赖关系.

小鼠α2(Ⅰ)胶原基因DNA结合蛋白研究

目的:初步分析小鼠α2(Ⅰ)胶原基因上游5′-UTR近端800 bp(-780～+54 bp)序列的DNA结合蛋白.方法:PCR扩增小鼠α2(Ⅰ)胶原基因-258～+54 bp,-519～-248 bp,-741～-501 bp片段,Dig-dUTP末端标记PCR产物,与经SDS-PAGE并转印至膜上的胶原产生细胞的核抽提物进行DNA-蛋白质结合反应,以抗Dig抗体检测结合反应信号.结果:Ⅰ型胶原基因上游5′-UTR近端800 bp序列中存在至少3个不同的核转录因子结合位点,相识别(consensus)的核蛋白因子相对分子质量分别为12万,5万,2万. TGF-β1可增强细胞中相对分子质量为12万的核蛋白因子的表达.结论:小鼠α2(Ⅰ)胶原基因上游-780～+54 bp这800 bp片段中存在与不同的核蛋白因子结合的序列,可能与Sp-1有关.TGF-β1通过增强相对分子质量为12万核蛋白的表达而促进该蛋白与靶调控序列的结合.

人α1(Ⅰ)胶原基因启动子活性研究

目的:探索器官纤维化形成中调控Ⅰ型胶原基因高水平转录的启动片段. 方法:从人α1(Ⅰ)胶原基因转录起始点上游-2.5 kb～+42 bp的片段中,取长度不等的片段作为启动子与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的质粒组成6个重组体,脂质体法转染上述重组体至正常人原代培养皮肤成纤维细胞, CAT-ELISA测定细胞CAT表达水平以比较各重组体的启动子活性. 结果: -2 483～+42 bp, -268～+42 bp序列具有强启动CAT表达活性,而 -105～+42 bp片段启动CAT活性低.结论:人α1(Ⅰ)胶原基因-2 483～+42 bp, -268～+42 bp 片段有高启动活性,是进一步研究纤维化相关DNA结合蛋白的重要调控靶序列.

改良EMSA法分析人α1(Ⅰ)胶原基因序列特异性DNA结合蛋白

目的:分析人α1(Ⅰ)胶原基因5′侧翼区具有较高启动调控活性序列的DNA结合蛋白.方法:以原代培养人瘢痕皮肤成纤维细胞为胶原产生细胞,采用限制性内切酶消化、DNA混合片段末端标记和增强化学发光的改良电泳迁移率改变实验 (EMSA)分析人α1(Ⅰ)胶原基因5′侧翼区-268～+42 bp序列DNA结合蛋白.结果:在胶原产生细胞--人瘢痕成纤维细胞中存在α1(Ⅰ)胶原基因-268～+42 bp序列的DNA结合蛋白,其结合活性具有特异性,并能被Sp-1,NF-1,NF-κB识别序列所竞争.结论:改良EMSA法可用于分析较长序列的DNA结合蛋白,人α1(Ⅰ)胶原基因-268～+42 bp序列中存在转录因子Sp-1,NF-1,NF-κB结合序列,这些转录因子结合位点可能与人α1(Ⅰ)胶原基因-268～+42 bp序列的高启动活性有关.

TNF-α拮抗胰岛素样生长因子-1对人α1(Ⅰ)胶原启动子的激活

目的:探讨TNF-α对胰岛素样生长因子-1 (IGF-1)激活人α1(Ⅰ)胶原启动子的作用.方法:构建含不同长短α1(Ⅰ)胶原启动子序列与氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的重组体pCOLH1 0.27,pCOLH1 2.5;用脂质体法瞬时转染至NIH3T3细胞和人皮肤成纤维细胞中,加入IGF-1或(和)TNF-α,测定CAT活性.结果:100 ng/ml IGF-1可使转染至NIH3T3细胞的pCOLH1 0.27和pCOLH1 2.5表达的CAT活性分别增高至对照的(5.4±0.25)倍与(5.8±0.3)倍, 使转染至人皮肤成纤维细胞的这两个重组体表达的活性分别增高至对照的(4.5±0.22)倍与(4.9±0.2)倍.而TNF-α能抑制IGF-1诱导的pCOLH1 2.5活性.结论:TNF-α在转录启动水平抑制IGF-1对人α1(Ⅰ)胶原基因表达的促进作用.

核心蛋白聚糖对肝细胞和肝星形细胞体外增殖的影响

目的: 探讨核心蛋白聚糖(decorin)在肝纤维化形成机制中的作用.方法:在正常人肝细胞株L-02及大鼠肝星形细胞株HSC-T6体外培养体系中,分别加入不同质量浓度(0.01,5,10 μg/ml)decorin共培养不同时间后,进行细胞计数以及3H-TdR和3H-Leu掺入量测定. 结果:实验组经0.01 μg/ml decorin作用4 d或6 d后,HSC-T6和L-02 细胞增殖数量以及3H-TdR和3H-Leu掺入量均显著高于对照组(P<0.01, P<0.05).而5,10 μg/ml decorin 作用4 d或6 d后,HSC-T6和 L-02细胞增殖数量以及3H-TdR掺入量均显著低于对照组(P<0.01, P<0.05).结论:decorin 对细胞体外增殖有双重调节作用;它可能通过抑制细胞增殖而阻止肝纤维化的发生.

苦参碱抑制血小板衍生生长因子诱导的小鼠皮肤成纤维细胞增殖

目的:探讨苦参碱对血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的小鼠成纤维细胞增殖的影响.方法:取新生ICR小鼠皮肤细胞培养成纤维细胞.用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和细胞计数法分析细胞增殖情况.结果:50～250 μg/ml的苦参碱能剂量依赖地降低血清刺激的细胞增殖,撤除苦参碱后抑制作用能完全逆转.苦参碱(100～500 μg/ml)亦能剂量依赖地抑制PDGF-BB诱导的细胞增殖.结论:苦参碱显示了很强的抗小鼠皮肤成纤维细胞增殖的作用,可能通过抑制PDGF-BB诱导增殖作用来介导的.提示苦参碱可能对皮肤纤维化疾病有潜在的预防和治疗作用.

DNA 芯片--逆向点杂交技术

自1995年斯坦福大学的Schena M 和Brown PO 等[1] 发表第1篇基因表达阵列芯片以来,国内外兴起了一股微点阵(microarrays)技术--DNA芯片大浪潮.DNA芯片技术的开发与应用已在世纪末为研究AIDS、癌症过程、某些疾病诊断、基因治疗、新食品开发、新药研制及生命科学开辟了一条全新的璀璨大道.虽然,目前就预言芯片技术对于生命科学所造成的冲击可能为时尚早.但是,可以展望在不久的将来,DNA芯片技术可以取代DNA自动化测序,广泛应用于新药研制和代替PCR技术对疾病做出诊断.从这个意义上说,微点阵技术完全可以与单克隆抗体(McAb)技术、PCR技术、重组DNA技术相媲美,从而成为21世纪生命科学研究的主要手段.

荟萃分析简介

据统计,全世界每年约有200多万篇医学论文发表在2万多种生物医学杂志上.有时,同样的研究所得结果却迥然不同,使得临床医生和决策者很难做出判断.因此,1971年美国的两位学者Light和Smith提出,应当在全世界收集对某一病种各种疗法的小样本、单个临床研究试验结果,对其进行系统评价和统计分析,将尽可能真实的科学结论及时提供给社会,以促进推广真正有效的治疗手段,摒除尚无依据的无效的甚至有害的方法.