Ⅰ型细胞间粘附分子mRNA表达与肝癌侵袭转移的关系

目的:研究Ⅰ型细胞间粘附分子(ICAM-1)mRNA的表达与肝癌侵袭转移的关系.方法:采用原位分子杂交及Northern blot方法检测34例肝癌组织中ICAM-1 mRNA 的表达.结果:34例肝癌中24例包膜不完整、门静脉癌栓或形成转移灶,10例肝癌包膜完整,34例肝癌中21例肝癌细胞ICAM-1 mRNA表达阳性.伴门静脉癌栓或形成转移的肝癌18例中,16例ICAM-1 mRNA表达(++)～(+++);6例包膜不完整的肝癌3例表达阳性,而10例包膜完整的肝癌仅有2例表达阳性.门静脉癌栓及肝内转移灶ICAM-1 mRNA表达强阳性.结论:肝癌细胞ICAM-1 mRNA的表达与肝癌的侵袭转移相关.

BHRF1反义寡核苷酸对BHRF1-CNE2细胞生存能力的影响

目的:探讨BHRF1反义寡核苷酸对表达BHRF1的鼻咽癌细胞株CNE2生存能力的影响.方法:检测反义阻断BHRF1表达后BHRF1-CNE2细胞在喜树碱作用下增殖能力和凋亡指数的变化.结果:在喜树碱作用下,应用BHRF1反义寡核苷酸组的癌细胞较对照组的增殖率下降,凋亡率增高.结论:反义阻断BHRF1的表达可降低CNE2细胞的生存能力,这在鼻咽癌的治疗中可能具有一定的价值.

人脐血程序移植重症联合免疫缺陷小鼠的实验研究

目的:探讨提高脐血移植的新方法.方法:以经亚致死剂量γ线照射后的重症联合免疫缺陷小鼠为动物模型,进行人冻存脐血的程序移植,利用人粒-单系祖细胞培养及流式细胞仪检测植入小鼠骨髓等组织中的人源性细胞.结果:与一次移植相比,程序移植相同细胞数时,植入率显著提高:程序移植干细胞数量降低至20%,其造血及免疫功能恢复到相近水平.结论:脐血程序移植提高了干细胞的植入率,为临床成人脐血移植提供了一条新思路.

心脏空搏下心内直视手术

目的:探索心脏空搏下心内直视手术的方法.方法:47例心脏病患者在不使用心脏停搏液于心脏跳动下手术.建立体外循环后,将上、下腔静脉回心血流引入氧合器,使心脏处于空搏状态,维持窦性心律,灌注流量为60～120 ml.kg-1.min-1.平均鼻咽温度维持在34℃.结果:全组病例全部康复,未出现低心排、肾衰、心律失常及空气栓塞等并发症.结论:空搏下心内直视手术是一种可选择的手术方法.

知母总多糖的抗炎作用

目的:考察知母总多糖(TPA)的抗炎作用,并初步探讨其作用机制.方法:应用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高、角叉菜胶致大鼠足趾肿胀及大鼠棉球性肉芽肿增生动物模型进行整体药效试验.结果:TPA能显著抑制上述各种动物模型的炎症反应,但不能显著抑制摘除双侧肾上腺大鼠角叉菜胶性足趾肿胀;TPA能显著提高大鼠血浆中皮质酮浓度,而使血浆中ACTH浓度显著降低;TPA还能显著降低炎症组织中PGE含量.结论:TPA对急慢性炎症均有明显的抑制作用,促进肾上腺分泌较高水平的糖皮质激素及抑制炎症组织PGE的合成或释放是其发挥抗炎作用的重要途径.

HSS介导依托泊甙对人肝细胞癌裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:了解肝细胞生长刺激物质(HSS)介导依托泊甙(VP-16)对肝癌裸鼠移植瘤的抑制作用.方法:建立人肝细胞癌裸鼠移植瘤模型,对荷瘤小鼠腹腔内注射不同剂量VP-16及HSS治疗 2周;治疗结束后,于不同时间处死动物,进行病理学检查,并计算肿瘤生长抑制率.结果:与对照组相比,中、大剂量VP-16(0.75,1.5 μg/g)联合HSS(1 μg/g)组肿瘤生长明显受抑,抑瘤率分别为71%和69%(P<0.01),但中、小剂量组之间差异无显著性(P>0.05);而小剂量联合(VP-16 0.38 μg/g)组及单用HSS(1 μg/g)组较对照组无明显差异(P>0.05),抑瘤率分别为23%和5%.单用大剂量VP-16副作用明显.中、大剂量VP-16联合HSS均可显著延长小鼠存活期.结论:HSS介导大、中剂量VP-16具有明显抑瘤效应,以中剂量为佳.

小鼠α2(Ⅰ)型原胶原基因启动子活性研究

目的:明确纤维化形成中调控Ⅰ型胶原基因高水平转录的启动子片段,逐段研究小鼠α2(Ⅰ)原胶原基因2 kb的启动子序列.方法:从小鼠α2(Ⅰ)原胶原基因转录起始点上游-2 kb～+54 bp的片段中,取长度不等的片段作为启动子,与含氯霉素乙酰基转移酶(CAT)报告基因的质粒组成6个重组体,脂质体转染法转染上述重组体至胶原产生细胞(NIH3T3)和非胶原产生细胞(COS7), CAT-ELISA测定细胞CAT表达水平以比较各重组体的启动子活性.结果:-780～+54 bp序列具有高启动CAT表达活性且有不完全细胞特异性,缺失近转录起始点500 bp, 即-2～-0.5 kb片段的启动子活性低.结论:近转录起始点500 bp的序列为小鼠α2(Ⅰ)原胶原基因启动激活所必需,-780～+54 bp片段有高启动活性,并有望以此序列发现纤维化相关的特异DNA结合蛋白.

血管内皮细胞生长因子在哺乳动物细胞的表达

目的:本实验试图构建具有生物学活性的VEGF真核表达载体,为VEGF基因治疗提供载体.方法:将已获得的hVEGF165 cDNA克隆到GST融合表达载体,构建原核表达质粒,转染大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达,Western blot鉴定表达产物.在此基础上构建真核表达载体pcDNA3/hVEGF165,脂质体介导转染CHO-K1细胞,G-418筛选,Northern blot,Western blot分别检测其在细胞内的转录和表达情况,3H-TdR掺入法检测表达蛋白的活性.结果:实验组的Northern blot和Western blot出现特异性条带,而对照组在相应部位未出现条带.实验组的大鼠心肌血管内皮细胞3H-TdR掺入率明显高于对照组(P<0.001).结论:本实验所构建的VEGF真核表达质粒能够在真核细胞内获得表达,其表达产物具有血管内皮细胞增殖刺激活性.

褪黑素减弱小鼠对吗啡的精神和身体依赖性

目的:观察褪黑素(melatonin,MT)对吗啡依赖小鼠精神依赖性和身体依赖性的抑制作用.方法:用小鼠条件性位置偏爱(conditioned place preferece,CPP)模型及吗啡身体依赖进行观察.结果:单纯MT组小鼠在偏爱侧(黑箱)的停留时间给药前后差异无显著性.与吗啡同时ip MT 10 mg/kg 5 d,显示出抑制吗啡精神依赖性反应的作用(P<0.01).单次ip给药,MT 10和 20 mg/kg,或连续与吗啡一同给予MT 10和20 mg/kg,可剂量依赖地减少小鼠的跳跃次数(P<0.05).结论:在一定的剂量范围内,MT具有抗小鼠对吗啡精神依赖和身体依赖的作用,且本身未显示精神依赖性反应.

二倍体的不同品系与四倍体板蓝根中多糖的含量测定

目的:测定二倍体的不同品系与四倍体板蓝根中多糖的含量,为综合利用板蓝根资源提供科学依据.方法:采用苯酚-浓硫酸反应后分光光度法测定多糖含量.结果和结论:各板蓝根样品中均有一定量多糖,但二倍体的不同品系板蓝根之间差异较大,变化幅度为9.38%～22.09%.

肾移植超急性排斥反应的病理学机制及其临床对策

目的:探讨移植肾超急性排斥(HAR)的病理学机制及其临床对策.方法:回顾性分析64例HAR患者.将切除的移植肾标本行形态学及荧光抗体染色观察;并对HAR的临床表现、治疗结果及再次手术情况等进行了总结.结果:(1)HAR的病理学改变:早期肾间质小血管及肾小球毛细血管内大量红细胞淤滞为主要改变,可发现淤滞的红细胞呈串珠状贴附在血管壁上;(2)临床治疗结果:21例术中立即切除移植肾,42例分别于术后第1～20天切肾,仅1例经对症处理后,移植肾逐渐萎缩未予摘除.15例HAR患者经严格配型、血浆置换及抗淋巴细胞免疫球蛋白(ATG)治疗,在短期内行再次移植,10例获得成功.11例HAR患者,6个月～2年后再行二次移植,仅4例获得成功.结论:(1)据病理学机制推测:红细胞可能参加超急性排斥反应;(2)HAR发生的影响因素:反复输血,多次妊娠,再次移植,服用过人参、西洋参、中药及各种营养剂;(3)HAR的临床分型:可分为Ⅰ型(即刻HAR),Ⅱ型(延迟HAR),Ⅲ型(亚HAR);(4)发生HAR后以近期内(1～17 d)再次移植的效果优于传统的6个月～2年后;(5)对策:强调对高敏人群做PRA配型或随机淋巴细胞毒性试验.HAR后再次移植以短期内成功率高.

粟米草毛状根的研究

目的:建立粟米草(Mollugo pentaphylla L.)的毛状根培养系统并研究毛状根的生长特性.方法:分别用发根农杆菌R1601,ATCC 15834和A4感染粟米草无菌苗的子叶,获得毛状根,并筛选优质株系;用高压纸电泳法对毛状根进行甘露碱检测;测定其生长曲线;比较不同基本培养液、不同pH值对毛状根生长的影响.结果:高压纸电泳结果显示,所获毛状根中均含有甘露碱,表明毛状根中确已转入发根农杆菌的T-DNA;1/2 MS0培养液 pH 5.4～5.8适合粟米草毛状根的生长.结论:快速生长的粟米草毛状根在药用活性成分的生产上将具有较大潜力.

光皮木瓜化学成分的研究(Ⅱ)

目的:研究光皮木瓜[Chaenomeles sinensis (Thouin.) Koehne]果实中的化学成分,为进一步开发利用木瓜资源提供理论依据.方法:采用溶剂法和层析法分离、纯化光皮木瓜的化学成分,并通过理化性质与波谱数据,鉴定所得化合物的分子结构.结果和结论:从光皮木瓜果实的乙醇提取物中分离得到7个单体化合物,分别鉴定为棕榈酸(Ⅴ)、乌索酸-3-O-山嵛酸酯(Ⅵ)、乌索酸(Ⅶ)、3-乙酰乌索酸(Ⅷ)、3-乙酰坡模醇酸(Ⅸ)、胡萝卜苷(Ⅹ)和桦木酸(Ⅺ).所有化合物均是首次从该植物中分离得到,其中化合物Ⅵ为一新化合物.

盐酸氨溴索缓释胶囊的药代动力学和生物等效性研究

目的:研究单剂量口服(po)自制盐酸氨溴索(Amb)缓释胶囊的药代动力学和生物利用度.方法:采用RP-HPLC法测定8名健康志愿者单剂量po 75 mg自制(A)和进口(B)Amb缓释胶囊后的血药浓度,计算药代动力学参数与相对生物利用度,并以配对t检验进行统计分析.结果:单剂量po A与B的tmax,t1/2,cmax,AUC0～t分别为(5.00±1.07),(4.62±1.19) h;(4.06±0.61),(4.21±0.93) h;(153.62±29.20),(148.36±17.91) ng/ml;(1 410.36±336.06),(1 294.36±225.07) h.ng/ml.结论:两种制剂的体内吸收和峰浓度以及经对数转换都无显著性差异(P<0.05),具有生物等效性,自制胶囊的相对生物利用度为(108.27±15.57)%.

FGF对关节软骨细胞基质及其TGFβ1表达的作用

目的:观察成纤维细胞生长因子(FGF)对培养兔关节软骨细胞基质及转化生长因子β1(TGFβ1)表达的影响.方法:培养1月龄新西兰兔关节软骨细胞,在每次换液时加入FGF 100 ng/ml,铺满后收集细胞,作关节软骨细胞TGFβ1检测及电镜免疫组织化学观察.采用氯胺T法和Antonopoulos法,作细胞基质的胶原和蛋白多糖含量测定.结果:FGF能明显促进胶原和蛋白多糖的合成,并且与剂量、时间呈正相关(P＜0.01).光镜下实验组细胞明显呈棕色,电镜下细胞膜表面有明显的胶金颗粒粘附.结论:FGF能促进关节软骨细胞TGFβ1的表达及基质合成,推迟了关节软骨细胞的成熟,维持细胞的软骨表现型,这些作用有利于关节软骨损伤后的修复,可能具有一定的临床意义.

肿瘤转移抑制基因nm23-H1 mRNA在人卵巢癌中的表达

目的:通过检测人卵巢癌标本中肿瘤转移抑制基因nm23-H1 mRNA的表达,了解其临床意义及其与预后的关系. 方法:应用原位杂交技术检测43例人卵巢癌标本中nm23-H1 mRNA的表达水平. 结果:nm23-H1 mRNA表达水平与卵巢癌的病理组织学类型无关(P>0.05);与患者术时有淋巴结或大网膜转移呈负相关(P<0.05);且转移灶的阳性表达率低于原发灶(P<0.05). 结论:nm23-H1基因在人卵巢癌的扩散和转移过程中可能发挥着抑制作用,它在卵巢癌组织中的表达水平具有重要的临床意义.

三种碳纤维增强复合材料的体外力学性能

目的:研究碳纤维增强(CFR)的聚酯(PE)、聚砜(PSF)和聚醚醚酮(PEEK)等复合材料在模拟生理环境中的力学性能变化.方法:将试样分别浸泡于37℃,65℃和95℃林格液中,并在0～256 d的时间段内分别测量材料的抗压强度和弹性模量,干燥试样作为对照.计算材料强度和模量降低的百分比.结果:在给定时间和温度的条件下,CFR/PEEK在林格液环境中的抗压强度和弹性模量均无明显改变.而CFR/PE和CFR/PSF则随浸泡时间的延长,抗压强度和弹性模量明显降低.其降低值与时间和温度均相关.结论:CFR/PEEK在模拟生理环境中具有良好的生物力学稳定性,而CFR/PE和CFR/PSF在应用于体内时则必须考虑材料力学性能的改变.

lacⅠ靶基因突变子的一种正向选择系统的建立

目的:建立一种能正向选择lacⅠ靶基因突变子的选择系统.方法:比较了分别携带有lacⅠ-/lacZα型质粒和lacⅠ+/lacZα型质粒的DH10B菌在LB完全培养基、以葡萄糖为碳源的M9基本培养基和以乳糖为碳源的M9/L基本培养基内的生长情况.结果:组成型DH10B菌在M9/L固体培养基中只需培养23 h便可观察到生长,而诱导型DH10B菌则需培养88 h才可观察到生长,但在LB和M9培养基内两者的生长速度却相同;当将少量的组成型DH10B菌与大量的诱导型DH10B菌混合接种于M9/L固体培养基上培养时, M9/L固体培养基能从约2.7×106的lacⅠ+型DH10B菌中将少量的lacⅠ- 型DH10B菌筛选出来.结论:本研究建立了一种在特定时间内只选择生长携带有lacⅠ-/lacZα型质粒的DH10B菌落,从而达到正向选择lacⅠ靶基因突变子的正向选择系统.

稳态层流下的内皮细胞形态特征变化

目的:探讨稳态层流下的内皮细胞特征变化规律和血流切应力改变对血管内膜结构的影响.方法:采用胶原酶消化法分离培养小牛肺动脉内皮细胞(PAEC),模拟体内流动环境,建立平行平板流动腔模型.利用细胞定量图像分析系统和FITC-若丹明-次毒蕈环肽标记法,观察内皮细胞在稳态层流下形态与排列变化.结果:内皮细胞在1.0×10-5,2.5×10-5 kPa剪切18 h后,细胞趋于切应力作用方向排列,与静息态的细胞相比,长短轴比值变化显著[(1.20±0.10) vs (1.12±0.08),(1.38±0.15) vs (1.12±0.08),P<0.01)],细胞面积无显著变化;在2.5×10-5 kPa剪切作用6 h后,细胞面积和长短轴比值无显著变化,而细胞内骨架沿切应力方向重组;在2.5×10-5 kPa剪切作用后的PAEC再次处于静息培养24 h后,细胞向静息态细胞转变.结论:血流动力学特性中切应力是引起血管内皮细胞形态发生变化的主要原因,细胞形态的改变是细胞胞质内骨架蛋白分子重组的表现;同时,切应力引起内皮细胞的应变是可逆的,当切应力撤除后,细胞亦趋于低切应力下的形态特征.

反义寡脱氧核苷酸对脯氨酰4-羟化酶mRNA表达的抑制作用

目的:观察反义寡脱氧核苷酸(ODN)对脯氨酰4-羟化酶(P4H)两种亚基mRNA表达的影响.方法:采用定量RT-PCR技术检测培养的人皮肤成纤维细胞中P4H mRNA的相对含量.结果:不同浓度(0.1,0.2,0.5,1.0 μmol/L)反义ODN处理组,人皮肤成纤维细胞中P4H mRNA表达水平均显著低于对照组及错配ODN处理组;其中0.1,0.2 μmol/L反义ODN作用20 h时,抑制效应达到大,50～70 h后,逐渐恢复到对照组水平.正义ODN与错配ODN对P4H mRNA表达则无明显抑制作用.结论:反义ODN对P4H两种亚基的mRNA表达均有显著和特异的抑制作用.

裸鼠脑内接种U-251MG细胞建立脑胶质瘤的模型

目的:建立裸鼠脑内人胶质瘤模型.方法:应用自制的脑内注射细胞装置,将人的U-251MG细胞接种于9只裸鼠脑中.分别于接种后10,20,30,40和77 d处死动物并行病理解剖、GFAP免疫组化及电镜检查.结果:我们建立的模型,肿瘤在脑内生长稳定,其特性同于人脑胶质瘤.结论:接种后20 d左右是利用该模型进行实验的佳时机.

冷冻保存神经后自体和异体移植的实验研究

目的:探讨冷冻保存神经自体和异体移植对神经再生的影响.方法:40只SD大鼠用反复冷冻、复温的神经和未经任何处理的坐骨神经移植体,进行自体和异体移植.A组为冷冻神经移植于自体原位中;B组为冷冻神经移植于异体中;C组为未冷冻神经移植于异体中;D组为未冷冻神经移植于自体原位中.术后6,12周光镜、电镜下行组织学观察,检测各项电生理指标.结果:A组可见到较多的再生轴突通过移植体;B组可以看到炎性细胞侵润,但仍可见再生轴突通过移植体;C组可见到大量炎性细胞侵润,有极少量再生轴突通过移植体;D组可见到大量再生轴突通过移植体.电生理指标和伸趾长肌恢复率A,D两组明显好于B,C两组.结论:神经冷冻处理可以降低抗原性,本实验为同种异体神经移植提供理论依据.

糖皮质激素受体基因片段的克隆和目标载体的构建

目的:构建针对糖皮质激素受体(GR)基因第2外显子的目标载体,为获得糖皮质激素受体基因缺陷型胚胎干细胞准备条件.方法:通过限制性酶切对DNA片段进行了结构分析,克隆相应DNA片段进行DNA序列测定,利用pTK-Neo质粒框架和同源片段构建载体.结果:详细分析了GR基因第2外显子及其侧翼的基因组DNA片段结构,克隆了同源片段,构建了目标载体.结论:这一载体的构建将为进一步建立GR基因剔除小鼠奠定基础,而且有助于深入研究GR基因的表达调控.

早期补液对烧伤大鼠心脏心肌细胞及血管内皮细胞的影响

目的:研究烧伤后大鼠心脏心肌细胞、血管内皮细胞(EC)的变化及早期补液对它们的影响.方法:应用了常规电镜技术及过氧化氢细胞化学方法.结果:烧伤后0.5 h血管EC肿胀,烧伤后4 h血管EC可向血管腔伸出较长突起,血管腔外有明显渗出,心肌细胞线粒体明显肿胀.过氧化氢细胞化学反应为血管EC血管腔面有较多致密沉积物.烧伤后8 h心肌细胞及血管EC损伤进一步加重.补液组烧伤后1,4,8 h,心肌细胞及血管EC损伤明显减轻,过氧化氢细胞化学反应电子致密沉积物也较少.烧伤后8 h细胞损伤开始恢复,血管EC出现大量吞饮泡,血管外液体重吸收.结论:烧伤后心肌细胞及血管EC发生损伤,早期补液对损伤有明显减轻作用.

小鼠神经细胞cdc2类蛋白激酶调节亚基p35Nck5a基因的克隆和鉴定

目的:获取小鼠神经细胞cdc2类激酶(Nclk)调节亚基p35Nck5a基因组DNA,用于构建基因重复性打靶载体.方法:用噬斑原位杂交法从λPS基因文库中克隆小鼠p35Nck5a基因;用限制性内切酶酶切图谱分析和序列测定进行基因组结构分析.结果:获得较完整的p35Nck5a基因组DNA酶切图谱;该基因由一个外显子组成,长924 bp,编码307个氨基酸的蛋白质,内含子长208 bp,位于5′端侧翼序列中.测定的序列(-1 080至+924 bp和+3 721至+4 222 bp)与已报道的序列基本一致,仅在-135和-295位各插入一个碱基G.结论:得到的 p35Nck5a基因组DNA片段长约11 kb, 其5′端侧翼序列含有一些已知的调控序列,3′端含有poly A的信号序列,满足了构建基因重复性打靶载体的要求.

耐氨苄西林流感嗜血杆菌产β-内酰胺酶机制研究

目的:探讨耐氨苄西林的流感嗜血杆菌产生β-内酰胺酶的机制.方法:对临床分离的112株流感嗜血杆菌耐药菌用纸片法作β-内酰胺酶测定,用PCR法检测产酶流感嗜血杆菌中的β-内酰胺酶基因的存在.结果:纸片法测得产酶菌株32株,产酶率28.6%(32/112);32株产酶菌中PCR法测β-内酰胺酶基因阳性菌株29株,阳性率为90.6%(29/32),其中质粒DNA模板组阳性为25株,基因组DNA模板组阳性为4例.结论:(1)流感嗜血杆菌耐氨苄西林主要由质粒介导产生β-内酰胺酶所造成.(2)PCR法是研究流感嗜血杆菌是否携带β-内酰胺酶基因及该基因所在位置的简便而有效的方法.

一氧化氮合酶抑制剂和一氧化氮供体对沙土鼠缺血性脑损伤的影响

目的:研究一氧化氮(NO)在缺血性脑损伤中的作用.方法:夹闭沙土鼠双侧颈总动脉20 min制备前脑缺血性脑损伤模型,分生化组和病理组.每组又分:(1) 假手术组;(2) 缺血对照组;(3) 硝基-L-精氨酸(LNNA)组,分3种剂量(3,20,50 mg/kg ip);(4) L-精氨酸(L-Arg)组,300 mg/kg ip.第1,2组仅ip等量生理盐水.结果:缺血性损伤后脑含水量增加,一氧化氮合酶(NOS)活性明显升高,LNNA剂量依赖性抑制NOS活性,小剂量能明显减轻脑水肿.小、中剂量LNNA能减轻缺血性损伤后海马CA1区和CA2区锥体细胞缺失,小剂量作用明显,大剂量加重细胞缺失.结论:脑缺血后NOS活性明显增加,加重缺血性脑损伤.通过LNNA适当降低脑组织NOS活性能明显减轻脑水肿和海马区细胞坏死,对脑损伤有保护作用.

自身抗原Ro/SSA抗原优势决定簇分析

目的:探讨自身抗原Ro/SSA(Mr=60 000)的抗原决定簇,为自身免疫性疾病机制的研究提供依据.方法:根据计算机软件进行的蛋白质序列结构分析,采用PCR法克隆自身抗原Ro/SSA(Mr=60 000)多肽片段的cDNA,定向插入表达载体PGEX-2T,并且导入大肠杆菌中表达重组融合蛋白,用GST亲和层析柱进行纯化,经免疫印迹法与患者阳性血清进行反应.结果:Ro/SSA(Mr=60 000)的抗原优势决定簇主要存在于100～190位和191～300位,不同患者、不同病程抗原优势决定簇有所不同.结论:抗原驱动机制在自身免疫性疾病的发病中起重要作用.

氧化苦参碱对乙型肝炎病毒转基因小鼠乙肝抗原表达的影响

目的:研究氧化苦参碱抗乙型肝炎病毒的作用,并初步探讨其作用机制.方法:以乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠ICR-TgN(HBV adr 1.2)SMMU为动物模型,运用ELISA和免疫组化的方法检测小鼠肝脏内乙肝抗原含量.结果:分别予氧化苦参碱100, 200, 300 mg/kg腹腔注射,1次/d,30 d后,乙型肝炎病毒转基因小鼠肝脏内HBsAg 和HBcAg的含量较空白对照组(予等体积生理盐水腹腔注射)均有明显的下降,且对两者作用一致;进一步的研究表明氧化苦参碱200 mg/kg作用10 d,20 d时小鼠肝脏内HBsAg 和HBcAg的含量较治疗前有明显的下降.结论:氧化苦参碱能降低乙型肝炎病毒转基因小鼠肝脏内HBsAg 和HBcAg的含量,有抗乙型肝炎病毒作用.

子宫内膜异位症患者腹腔液体外对NK细胞活性的影响

目的:探讨子宫内膜异位症(EM)患者的腹腔液(PF)对自然杀伤(NK)细胞的作用.方法:以Hela细胞作为靶细胞,采用LDH释放法测定与EM患者PF共同孵育后正常人血NK细胞活性的变化.结果:在作用2 h时,非EM患者和EM患者PF对正常人外周血NK细胞活性的抑制率分别为(37.1±18.9)%和(65.2±21.8)%,两者相差非常显著(P<0.01).抑制率与EM临床分期呈显著正相关(r=0.602 3, P<0.05).延长PF与淋巴细胞的作用时间,则PF对NK细胞活性的抑制率也随之升高.结论:EM患者的PF对NK细胞活性具有明显的抑制作用.

随机多肽噬菌体展示载体pCANTAB5X的构建

目的:构建适用于外源性随机多肽的噬菌体展示载体.方法:在引物中加入XbaⅠ识别序列,将用该引物扩增的PCR产物克隆到pGEM-T中,再将该片段插入pCANTAB5E中构建成噬菌体展示载体pCANTAB5X.结果:限制酶切点XbaⅠ和HGV C片段被引入到新构建的噬菌粒载体pCANTAB5X中.结论:构建的新的噬菌体展示载体pCANTAB5X能有效展示外源性随机多肽.

胶束电动毛细管色谱法测定兔血浆中氟比洛芬的浓度

目的:建立胶束电动毛细管色谱法测定兔血浆中氟比洛芬的浓度.方法:兔血浆经甲醇除蛋白质后,加入0.1 ml分离用缓冲液溶解后进样测定.电泳条件为:75 μm×100 cm空心石英毛细管柱,缓冲液为20 mmol/L 硼砂(含25 mmol/L 十二烷基硫酸钠).结果:本法以酮基布洛芬为内标,在1～24 μg/ml内呈良好的线性关系和重现性,2.4,7.2和12.0 μg的加样回收率分别为95.36%,93.55%和95.22%,低检测浓度为0.2 μg/ml.结论:本法准确、简便,可用于药代动力学研究.

急性脑梗死电刺激小脑对肢体运动功能恢复的疗效

随着现代医学的发展,脑梗死的诊断与抢救水平有了明显的提高,据近年调查统计,我国的脑血管意外年患病率为719/10万,病死率为116/10万,大约有75% 的存活者留有不同程度的偏瘫[1].人们需要的不仅仅是挽救生命,而是实现终目标--回归社会.早期有效地康复干预,能使患者得到好的恢复.本研究探讨了早期在药物治疗的基础上采用电刺激小脑顶核(FN)对脑梗死患者急性期肢体运动功能的影响.

电熔断可脱弹簧圈栓塞治疗颅内动脉瘤的并发症

以电熔断可脱弹簧圈(guglielmi detachable coil,GDC)栓塞颅内动脉瘤是一种安全有效的治疗方法,目前已在发达国家广泛应用.自GDC进入中国以来,国内也已开展了这项工作,但未见有关并发症的报道.自1996年5月以来作者参加了97例(103个)颅内动脉瘤的GDC栓塞治疗,发生并发症10例次,发生率为9.7%,现将有关资料总结如下.

糖尿病与感染的临床分析

糖尿病容易并发感染,且常造成严重后果.自胰岛素、抗生素临床应用以来,情况虽有明显改观,但感染仍为目前糖尿病需要解决的重要问题.本文对我科近5年收治的520例糖尿病的各种感染进行临床分析,兹报告如下.

化疗加放疗治疗晚期非小细胞肺癌

我科于1993年1月至1996年10月间应用化疗加放疗的方法治疗不能手术的Ⅲ期非小细胞肺癌60例,与同期单纯化疗的60例患者作对照,取得较好的疗效,报告如下.

尿毒症心肌病肾移植前后超声心动图及心肌酶谱的改变

临床上严重的尿毒症心肌病往往是造成透析患者死亡及其肾移植围手术期的大风险,因此随着肾移植工作的不断开展,有必要对尿毒症心肌病进行深入的研究与探讨.作者从我院1997年间142例次肾移植患者中选择24例尿毒症心肌病患者作为研究对象,对肾移植前后电脑超声心动图及心肌酶谱作了分析,以便为临床防治尿毒症心肌病提供参考依据,现报告如下.

依布硒及其类似物对大鼠血小板花生四烯酸代谢的影响

花生四烯酸(AA)是一组含有4个烯键的二十碳不饱和脂肪酸的总称,它的代谢产物中有很多成分具有强烈的生物学活性.其中,TXA2是目前发现的强的缩血管物质和强的血小板聚集剂之一.LTB4是一种重要的炎症介质,在10-10～10-9 mol/L浓度就有明显的药理作用.在沙土鼠与大鼠缺血后再灌注的实验已观察到脑实质中的LTD4含量增多,同时脂氧酶的另一代谢产物12-羟基-(5,8,10,14)-二十碳四烯酸(12-HETE)的含量也有增加.用基因打靶方法敲除12-脂氧酶基因小鼠的血小板对ADP的敏感性增强[1,2].

腹主动脉瘤腔内隔绝术手术室护士的配合体会

腹主动脉瘤(AAA)发病率有逐年增加趋势,人造血管内置术是传统治疗AAA唯一手段,但该手术创伤大,术前评估对患者重要脏器功能要求高,术后并发症多,死亡率高.在腔内血管外科技术发展的基础上,我院自1996年率先在国内开展腔内隔绝术(EVG)治疗AAA患者13例,取得了较好的临床效果.现将EVG手术室护士配合要点介绍如下.

深低温保存对猪二尖瓣蛋白聚糖含量的影响

同种瓣膜基质中的蛋白聚糖对维持瓣膜正常的生理结构起到重要作用.本实验通过测定深低温保存猪二尖瓣组织中蛋白聚糖含量,了解低温保存对蛋白聚糖含量的影响.

铜绿假单胞菌在下呼吸道感染中的分离、药敏及意义

铜绿假单胞菌为重要的条件致病菌,普通条件下不致病.但随着人群老龄化、抗生素广泛使用、器官移植、免疫抑制[1]、化疗等因素的存在,铜绿假单胞菌在感染中的作用越发重要,可引起呼吸病房、烧伤病房、ICU等病区感染的爆发流行[2].

抗胸腺淋巴细胞球蛋白对尸肾移植排斥反应的预防及治疗作用

排斥反应是导致移植肾丧失功能的主要原因之一.抗胸腺淋巴细胞球蛋白(ATG)是一种多克隆抗体制剂,具有明显的抗排斥的作用.本文对我肾移植中心109例次应用ATG预防及治疗排斥反应的效果、并发症以及长期随访情况,作进一步的总结和分析,以探讨ATG在尸肾移植中的预防及治疗的价值与前景.

经肱动脉造影术后并发上臂肌间隙综合征一例报告

1 临床资料 患者男,42岁,因髂总动脉硬化闭塞症于1998年3月在我院行腹主-双髂总动脉分叉型人造血管转流术,术后一直服用西洛他唑(培达片)及肠溶阿司匹林.1999年6月30日因左下肢剧烈疼痛伴行走困难以急性动脉栓塞急诊入院,予东菱克栓酶5 BU+低分子右旋糖酐500 ml静滴溶栓,低分子肝素钠(法安明) 5 000 U皮下注射抗凝,西洛他唑100 mg口服2次/d及前列地尔(脂溶微球PGE1)40 μg+生理盐水20 ml静推扩血管,1周后症状稍缓解.

血HBV抗原阴性的HBV相关性肾炎一例报告

1 临床资料 患者,男,48岁.因蛋白尿伴水肿10个月于1998年6月20日入院.1997年8月患者因咳嗽、发热、水肿,查尿蛋白(+++),给予青霉素后症状好转,但水肿不退.1997年9月曾短期使用雷公藤、泼尼松,以后一直服用中药,尿蛋白波动于(++～+++).

磁共振与内镜下逆行胰胆管造影诊断胰胆疾病的对比研究

磁共振胰胆管造影(MRCP)是一种新颖的、无创伤性的检查胰胆疾病的影像学检查手段,主要应用于阻塞性黄疸和胰胆结石的患者,早期研究显示在胰胆管扩张方面具有高准确性.为了进一步探讨MRCP在胰胆管疾病诊断中的临床价值,我院自1998年6月至1999年3月对110例疑为胰胆疾病的患者作了MRCP与逆行胰胆管造影(ERCP)对照比较,现报告如下.

介绍一种观察组织内小血管的电镜制样方法

电镜观察血管标本,一般比较容易做的是游离血管,如主动脉、肾动脉或毛细血管,前者可直接取材,后者数量众多.如果要观察组织内一定直径的小血管,则比较麻烦,因为要找到一定直径的小血管不容易,用常规方法进行,工作量很大.我们摸索了一种方法,现介绍如下.

新型Amplatzer未闭动脉导管封堵器的临床应用

1996年Amplatzer发明了一种蘑菇型的新型封堵器,同年应用于临床[1].初步结果表明其具有既往各种封堵材料的优点和避免了其他封堵器的缺点,是一种理想的封堵材料.1998年5月开始我院在上海地区首先应用Amplatzer封堵器成功治疗了7例先天性心脏病动脉导管未闭(PDA)患者,报告如下.

全反式维甲酸缓释微球的差热分析鉴定

全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA) 用于治疗急性早幼粒细胞白血病及皮肤病.由于该药不稳定,半衰期短且副作用较大,如引起高脂血症[1]、高颅压综合征[2]、高白细胞综合征[3]、维甲酸综合征[4]等.因此,我们将其做成缓释制剂,以减少副作用,延长作用时间,提高生物利用度.为判断维甲酸在载体中的分散情况,我们应用差热分析法(DTA)对其进行研究,获得了简便、快速的鉴定效果.

瘢痕成纤维细胞收缩功能研究

瘢痕增生并继发挛缩畸形的发生、发展机制至今尚不清楚,临床上也无确切可靠的治疗方法.本实验利用胶原胶结缔组织收缩模型,观察体外培养的瘢痕及正常皮肤成纤维细胞促胶原胶收缩情况,了解瘢痕成纤维细胞收缩能力,探讨瘢痕挛缩的发生、发展机制.

定量RT-PCR法检测脯氨酰4-羟化酶mRNA的表达

脯氨酰4-羟化酶(P4H)是胶原合成过程中的关键酶,在肝纤维化时肝组织中P4H的表达明显升高,抑制P4H活性对于纤维化病变具有很大的治疗价值[1,2].若通过抑制P4H基因的表达来达到抑制P4H活性、减少胶原合成,有可能成为抗纤维化治疗的一种有效途径.为了检测靶细胞或靶组织中P4H的两种亚基的基因表达水平及观察某些药物对其表达的影响,我们建立了检测P4H mRNA的定量RT-PCR方法.

胞嘧啶脱氨酶基因对胃癌细胞的杀伤作用

术前肝动脉化疗栓塞对肝细胞癌术后无瘤生存的影响

原发性肝癌经无水酒精瘤内注射治疗后血液AFP mRNA变化的研究

TNM分期对评价肝细胞癌切除术预后的价值

肝癌术后复发原因的探讨

顺行灌注冷晶体停搏液及温血停搏液对心肌的保护作用

T淋巴细胞在异种鼠肝移植免疫排斥反应中的作用

流式细胞术检测狼疮患者白细胞分化抗原40配体

胃肠道肿瘤患者血清可溶性细胞间粘附分子1和可溶性内皮细胞-白细胞粘附分子1含量的临床意义

人树突状细胞cDNA质粒文库的构建及其大规模随机测序体系的建立