银杏叶提取物对鱼藤酮和1-甲基-4-苯基吡啶离子诱导PC12细胞损伤的保护作用

目的:观察银杏叶提取物(extract of Ginkgo biloba leaves,EGB)对PC12细胞损伤的保护作用.方法:采用细胞培养的方法,建立PC12细胞的鱼藤酮和1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)损伤的模型.用倒置显微镜观察细胞形态,MTT法测定细胞存活率,ELISA法检测胞外多巴胺(DA)水平.结果:同毒物组比较,EGB在0.35、0.70、1.40 mg/ml浓度下能减轻MPP+引起的PC12细胞损伤,在1.40 mg/ml浓度下能减轻鱼藤酮引起的损伤,明显提高细胞的存活率, 增高胞外DA水平:2 mmol/L MPP+和10 μmol/L鱼藤酮作用下胞外DA分别为(6.875±0.201)和(5.321±0.167) ng/ml,而1.40 mg/ml EGB分别与2 mmol/L MPP+或10 μmol/L鱼藤酮共同作用,DA升高至(7.595±0.139) ng/ml(P<0.05)和(6.917±0.201) ng/ml(P<0.01).结论:EGB对鱼藤酮和MPP+体外诱导PC12 细胞的损伤具有明显的保护作用.

新型金雀异黄素衍生物5-羟基-4'-硝基-7-取代酰氧基异黄酮的合成及抗肿瘤活性研究

目的:对金雀异黄素进行结构改造,设计合成7-取代酰氧基-5-羟基-4'-硝基金雀异黄素衍生物,并进行抗肿瘤活性测试.方法:以氯苄为起始原料,经取代、硝化、Friedel-Crafts反应和环合,再与各种酰氯反应得到8个目标化合物.结果:合成的目标化合物经元素分析和1HNMR确证其结构;其中化合物5B(5-羟基-4'-硝-7-丙酰氧基异黄酮)体内外对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435均具有较强的抑制活性,IC50为0.017 mmol/L.结论: 金雀异黄素的4'引入硝基,同时7位丙酰化产物具有良好的抗肿瘤活性.

三种影像学检查方法对诊断尿毒症继发性甲状旁腺腺体增大的意义

目的:了解高频彩超、CT、99mTc-甲氧基异丁基异晴(MIBI)双时相平面显像核医学对尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进(SHPT)患者甲状旁腺检查的敏感性和特异性.方法:35例尿毒症患者均行甲状旁腺高频彩超、CT、99mTc-MIBI核医学检查,增大甲状旁腺行病理检查,计算各自及几种方法联合检查的敏感性、特异性,比较两两之间差异.结果:高频彩超、CT、99mTc-MIBI核医学检查对增大甲状旁腺检查的敏感性和特异性依次为73%(40/55),93%(40/43);75%(41/55),93%(41/44);89%(49/55),98%(49/50);高频彩超联合CT、高频彩超联合99mTc-MIBI、CT联合99mTc-MIBI、高频彩超联合CT及99mTc-MIBI检查的敏感性和特异性依次为84%,90%;93%,93%;95%,93%;100%,90%.99mTc-MIBI核医学检查对尿毒症患者SHPT甲状旁腺检测的敏感性高于CT和高频彩超,三种检查方法的特异性无明显差异.结论:高频彩超与99mTc-MIBI核医学检查联合应用具有简单且敏感性高的优点,可作为首选辅助检查.

自制奥昔布宁渗透泵控释片的体内外相关性研究

目的:研究自制奥昔布宁渗透泵控释片在体内外的相关性.方法:以HPLC法(Irregular-H C18柱,4.6 mm×150 mm,流动相为甲醇∶水∶1 mol/L醋酸铵＝85∶13∶2,流速为1.0 ml/min,检测波长220 nm)测定奥昔布宁渗透泵控释片体外释放浓度(释放介质:200 ml 蒸馏水,37℃,转速:100 r/min,分别在2、4、8、12、16、24 h各取样1 ml),用LC-MS法测定渗透泵控释片在Beagle犬体内的血药浓度(8条犬禁食过夜后口服自制奥昔布宁渗透泵片10 mg,于给药前及给药后2.5、5.0、8.0、12.0、16.0、24.0、27.0、30.0、36.0、48.0 h在犬一侧后肢静脉取血1 ml分离血浆待测),用Wanger-Nelson法计算体内吸收百分数,并与相应时间体外累积溶出度线性回归,进行体内外相关性考察.结果:药物恒速释放达24 h,累积释放率达90%以上.体内药动学特征符合单室一级吸收模型,血药浓度在48 h内表现平稳.以体内吸收百分率(Y)与体外释放百分率(X)进行线性回归,方程如下:Y=0.978 2X+12.501 9,r＝0.937 3 (P<0.01).结论:自制奥昔布宁渗透泵控释片体外释放百分率和体内吸收百分率呈显著相关.

阿佐塞米片治疗心源性水肿的疗效和安全性

目的:观察阿佐塞米片治疗心源性水肿的疗效和安全性.方法:各种病因所致慢性心力衰竭伴外周水肿患者32例,随机分成阿佐塞米组和呋塞米组,各16例,两组间年龄、性别、水肿程度、体质量、心功能等各项基础资料比较无显著性差异; 两组分别服用阿佐塞米片1片(30 mg)或呋塞米片1片(20 mg),每日1次,第4天起如体质量减轻少于1 kg且水肿程度未改善,则剂量加倍,总疗程14 d.试验按随机对照双盲原则进行.结果:与治疗前比较,阿佐塞米组治疗后24 h尿量明显增加,伴随体质量显著下降[(3.3±3.6) kg],与呋塞米组相似;水肿程度及心功能等级明显改善,消肿总有效率为75%(呋塞米组为100%,P>0.05),纠正心功能不全总有效率为43.8%(呋塞米组为87.5%,P<0.05).两组不良反应发生率均为12.5%.结论:阿佐塞米片治疗心源性水肿疗效明确,表现为体质量降低、水肿及心功能不全改善,不良反应少、耐受性好.

腺苷对噪声暴露豚鼠耳蜗谷氨酸和复合动作电位的影响

目的:研究腺苷在急性噪声性声损伤中对耳蜗谷氨酸和复合动作电位的影响.方法:豚鼠暴露于白噪声118 dB SPL(sound pressure level,声压水平) 30 min,同时耳蜗灌流单纯或含不同浓度(0.1、1或5 mmol/L)腺苷的人工外淋巴液,高效液相色谱检测分析噪声暴露前、后外淋巴中谷氨酸浓度,测试噪声暴露前后听神经复合动作电位的阈值.结果:噪声暴露后耳蜗外淋巴液中谷氨酸含量显著升高, 给予1 mmol/L 和5 mmol/L腺苷可以抑制谷氨酸浓度的升高.噪声暴露后复合动作电位阈值增大, 同时给予腺苷灌流组阈移减小.结论:腺苷可使噪声暴露后耳蜗外淋巴中谷氨酸浓度明显降低, 复合动作电位阈移值减小,提示腺苷对急性声损伤耳蜗有保护作用.

新生大鼠大脑皮质神经干细胞的分离培养与胆碱能神经元的鉴定

目的:体外分离和培养新生大鼠大脑皮质神经干细胞并进行鉴定,为用于脑梗死动物模型梗死区移植细胞作准备.方法:分离新生大鼠皮质神经干细胞,进行体外培养,使用免疫细胞荧光染色技术对细胞的特性进行鉴定,并对细胞的胆碱能特征进行鉴定.结果:获得了Nestin阳性的神经干细胞,其分化后可获得MAP-2、GFAP和 CNPase阳性的神经元、星形胶质细胞和寡突胶质细胞;通过胆碱能鉴定发现大脑皮质干细胞可分化为胆碱能神经元. 结论:体外分离和培养的大脑皮质神经干细胞具有增殖分化的能力,并可以分化为胆碱能神经元,有望应用于皮质损伤后认知障碍及运动障碍的细胞移植治疗.

IL-6下调血管内皮细胞组织因子抑制物表达

目的:观察IL-6对脐静脉内皮细胞(HUVECs)表达组织因子途径抑制物(TFPI)的影响.方法:应用胰酶消化HUVECs并进行传代培养,用生长良好的第2、3代细胞进行试验.同时应用CCK-8测定不同浓度的IL-6(0.125～2.0 ng/ml,实验组)刺激后细胞活性变化,对照组给予培养液;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞内TFPI mRNA水平.结果:与对照组相比,IL-6(0.125～0.5 ng/ml)对细胞活性没有显著影响(P>0.05);IL-6增加到1 ng/ml后,作用12 h后细胞活力开始下降.IL-6(0.5 ng/ml)作用6～24 h显著下调细胞TFPI mRNA表达(P<0.05),6 h时抑制效果强(TFPI mRNA/GAPDH mRNA均值仅为0.191),以后抑制效应渐减弱,48 h达到正常水平(TFPI mRNA/GAPDH mRNA均值为0.399).结论:提示IL-6(0.5 ng/ml)对HUVECs的活性不造成直接的影响,同时IL-6(0.5 ng/ml)在6～24 h内可抑制HUVECs的TFPI mRNA表达而诱发凝血系统失衡,这可能与急性炎性反应时相的血液凝固和血栓形成有关.

动脉粥样硬化大鼠主动脉IL-1β、TNFα、IL-10及IL-10R的表达及银杏叶提取物的作用

目的:研究动脉粥样硬化(AS)大鼠主动脉IL-1β、TNFα、IL-10及IL-10R的表达及观察银杏叶提取物(EGB)对它们的作用.方法:建立AS大鼠模型,动物分成3组,即对照组、AS组和EGB组,每组6只.EGB组每天灌胃给予EGB 100 mg/kg,对照组、AS组每日给予同体积水.8周后,采用ELISA、RT-PCR方法检测IL-1β、TNFα、IL-10及IL-10R水平及mRNA表达.结果:AS大鼠主动脉IL-1β、TNFα、IL-10、IL-10R水平及mRNA表达均显著高于对照组(P＜0.01),EGB组主动脉IL-1β、TNFα水平及mRNA表达均低于AS组,IL-10、IL-10R水平及mRNA表达均高于AS组(P＜0.01).结论:EGB对致炎细胞因子IL-1β、TNFα表达的显著抑制作用,对抗炎细胞因子IL-10及IL-10R表达的显著上调作用可能是其抗AS的机制之一.

双取代吡啶及碘代氨基甲酸炔丙酯类的合成和防霉抗菌活性

目的:合成双取代吡啶及碘代氨基甲酸炔丙酯类,考察其体外防霉抗菌活性.方法:共设计合成了7个全新化合物,其中以S置换N,设计合成了3-(2-氮氧吡啶硫代羰基氧)-1-丙炔化合物.选用常见的8种工业霉菌(黑曲霉、变色曲霉、桔青霉、绿色木霉、黄曲霉、宛氏拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉)和5种细菌(巨大芽孢杆菌、荧光极毛杆菌、大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌)进行了体外防霉抗菌测试.结果:初步试验表明,上述化合物均有不同程度的防霉抗菌活性.化合物3-(2-氮氧吡啶硫代羰基氧)-1-丙炔(3e)低抑制浓度(MIC)在(2～30)×10-6g/ml之间.结论:化合物3e有继续研究开发价值.

盐酸哌甲酯的经皮渗透特性研究

目的:考察盐酸哌甲酯的体外经皮渗透特性. 方法:采用Franz扩散池,裸鼠离体皮肤作为透皮模型,HPLC法测定药物透皮浓度.计算药物在不同浓度(10～100 mg·ml-1)条件下经皮渗透稳态流量、渗透系数以及透皮时滞,并考察几种促透剂(氮酮、N-甲基-2-吡咯烷酮、丙二醇、油酸)对哌甲酯透皮行为的影响.结果:盐酸哌甲酯的经皮渗透稳态流量随浓度增加显著增强(P<0.01),浓度大于50 mg·ml-1时其渗透系数有所增加(P<0.05).8%氮酮和5%丙二醇对药物促透作用明显(P<0.01). 结论:药物浓度、不同促透剂及其浓度对盐酸哌甲酯的经皮渗透有一定的影响.

华中五味子酮对阿尔茨海默病样大鼠海马内IL-1β及iNOS表达的影响

目的:观察华中五味子酮(schisandrone)对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)样大鼠海马内白细胞介素1β(interleukin-1 beta,IL-1β)及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)mRNA水平的影响,探讨华中五味子酮对AD可能的防治作用.方法:30只雄性SD大鼠, 8～12周龄,体质量250～300 g,随机分为3组:空白对照组、AD模型组和华中五味子酮干预组(n=10).采用侧脑室立体定向注射β-淀粉样蛋白(amyloid-beta protein)Aβ25-35(溶于无菌生理盐水,浓度10 mmol/L)的方法,建立AD的动物模型,并用华中五味子酮(溶于玉米油,浓度1 mmol/L)灌胃进行药物干预,通过半定量RT-PCR的方法观察华中五味子酮对AD样大鼠海马区IL-1β及iNOS mRNA水平的影响.结果:用华中五味子酮干预,AD样大鼠海马内IL-1β及iNOS mRNA水平(0.333 7±0.122 3和0.266 6±0.088 5)较AD样大鼠(0.969 3±0.153 9和0.666 0±0.121 1)有显著降低(P<0.001).结论:华中五味子酮能够抑制Aβ诱导的氧化应激和炎性反应,在AD发病中可能具有保护作用.

大豆异黄酮对60Co-γ线照射小鼠肝组织过氧化状态的影响

目的:观察大豆异黄酮对60Co-γ射线引起小鼠肝组织过氧化损伤的影响.方法:实验根据体质量将80只雌性昆明小鼠随机均分为5组,即正常对照、阳性对照(单纯辐照组)及低、中、高剂量大豆异黄酮实验组(50、100、400 mg/kg).辐照前正常对照、阳性对照组及实验组每天分别以溶剂0.5%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)和不同剂量大豆异黄酮连续灌胃14 d,灌胃至第7天,除正常对照组外,其余各组小鼠均接受4.56 Gy60Co-γ全身性照射1次,照射后继续灌胃2 d及7 d后杀鼠取肝组织作生化分析.结果:照射后第2天100、400 mg/kg大豆异黄酮组及照射后第7天3个浓度大豆异黄酮组显著提高肝细胞质过氧化氢酶的活性(P<0.05);照射后第7天100 mg/kg大豆异黄酮组的肝组织谷胱甘肽过氧化物酶活性有显著提高(P<0.05);照射后第2天50 mg/kg大豆异黄酮使肝组织总超氧化物歧化酶活性显著下降(P<0.05),其余各组间无显著差异;照射后第7天100 mg/kg大豆异黄酮使肝组织丙二醛含量下降,与对照组有显著差异(P<0.05),照射后第2天各照射组肝组织丙二醛含量有一过性升高,但第7天实验组已降至正常水平.结论:大豆异黄酮可提高受照小鼠肝组织的抗氧化能力,但不呈量效关系.

反相离子对高效液相色谱法测定黄柏及其颗粒剂中小檗碱及巴马汀的含量

目的:探讨应用反相离子对高效液相色谱法测定黄柏药材(Phellodendron chinense Schneid.)及其颗粒剂中小檗碱及巴马汀的含量.方法:采用反相离子对高效液相色谱法并进行方法学考察,色谱条件:Lichrospher C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相为乙腈∶25 mmol/L磷酸二氢钠∶25 mmol/L十二烷基硫酸钠(2∶1∶1);流速1.0 ml/min;检测波长345 nm;柱温25℃.黄柏药材及其颗粒剂以盐酸甲醇溶液(1∶100)提取.结果:小檗碱和巴马汀色谱峰的理论塔板数分别为14 906和14 847,分离度分别为2.33和2.86,拖尾因子分别为1.09和1.06,符合定量分析的要求.回归方程分别为Y=698 278X-3 846, r=1.000和Y=536 632X-7 738, r=0.999 9,线性范围分别在40～500 ng和20～250 ng之间.方法学考察结果表明,小檗碱和巴马汀低、中、高3个进样量的日内精密度和日间精密度的RSD均小于2.5%和1.5%,48 h内稳定性试验的RSD分别为0.66%和0.70%,重现性试验的RSD分别为0.11%和0.12%(n=5),低检测限分别为2.0 ng和1.0 ng,加样回收率结果分别为100.4%,RSD＝0.12%(n=3)和99.80%,RSD＝0.22%(n=3).测定3批黄柏药材和5批黄柏颗粒剂中小檗碱及巴马汀的含量.结论:该方法简便可行,结果可靠,能够用于黄柏药材及其颗粒剂中小檗碱及巴马汀含量测定的研究.

立体定向手术治疗帕金森病的临床研究

目的:总结微电极导向立体定向技术行脑内核团毁损和脑深部电刺激(DBS)治疗帕金森病的临床经验.方法:1999～2004年期间采用微电极导向立体定向毁损手术治疗帕金森病510例和DBS治疗帕金森病62例,其中脑核团毁损术组中行单侧苍白球腹后部毁损术(PVP)385例,丘脑腹中间核(Vim)毁损术91例,行同期同侧PVP和Vim毁损术12例,进行同期双侧PVP 8例,分期双侧PVP 10例,分期双侧PVP+Vim术4例.DBS组中,刺激靶点为丘脑底核(STN)61例和Vim 1例,其中单侧31例,双侧31例.结果:脑核团毁损组于术后进行UPDRS运动评分,在"关"状态下症状改善率为47.3%;在"开"状态下症状改善率为23.4%.开-关症状和异动症均消失.220例平均随访11.6个月,其中显效130例(59.9%),改善75例(34%),无效15例(6.8%).DBS组术后UPDRS运动评分,在"关"状态下改善率为45.2%,在"开"状态下改善率为25.7%,平均随访11.8个月,其中40例于1个月内调整参数后再无调整,12例术后需再次调整参数.结论:根据患者的症状合理选择不同的脑核团毁损靶点,可明显控制患者症状.DBS手术并发症少,术后可调节参数,已成为治疗帕金森病的重要手术方法.

CD10标记乳腺肌上皮细胞中的敏感性和特异性研究

目的:探讨CD10免疫标记乳腺肌上皮细胞的能力.方法:收集乳腺良、恶性病变的石蜡包埋标本76例(纤维腺瘤、腺病、导管内乳头状瘤、良性叶状肿瘤、导管内癌、囊内乳头状癌、浸润性导管癌和浸润性小叶癌),采用免疫组化检测CD10在上述病变中的表达.结果:在41例乳腺良性病变中,CD10阳性的肌上皮细胞连续地环绕于增生的小导管的周围,敏感性可达100%(41/41).但在囊性扩张的小导管周围,CD10阳性细胞不连续,甚至不见阳性细胞.所有乳腺上皮细胞均为阴性,CD10在区别肌上皮细胞和上皮细胞时特异性为100%(41/41).导管原位癌的癌细胞巢外周的阳性细胞由完整到不完整、到完全缺失不等.在浸润性癌中,癌巢周围不见阳性细胞.除少许的癌细胞和肌成纤维细胞表达CD10外,其余的癌细胞、肌成纤维细胞、血管平滑肌细胞和上皮细胞都不表达CD10.结论:CD10标记肌上皮细胞具有较高的敏感性和特异性,可以作为肌上皮细胞的又一有效的标记物.

丘脑底核脑深部电刺激治疗帕金森病的功能显像实验研究

目的:通过PET、SPECT功能显像研究探讨丘脑底核(subthalamic nucleus,STN) 脑深部电刺激(deep brain stimulation,DBS)对猴偏侧帕金森病(Parkinson disease, PD)模型纹状体区代谢的影响.方法:采用右侧颈内动脉注入1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)建立猴偏侧PD模型,行右侧STN脑深部电极植入术,给予慢性高频电刺激.在刺激前及刺激后1、3个月分别行SPECT、PET功能显像测定.结果:PD模型猴在慢性高频电刺激下对侧肢体僵硬明显缓解,活动增多,步态稳定.SPECT检查显示注药侧纹状体区的多巴胺转运体(DAT)特异摄取率在给予有效刺激后较术前增高,多巴胺D2受体(D2R)的特异摄取率逐渐下降至接近正常侧水平.PET检查提示在电极植入术前右侧基底节区放射性摄取浓度较左侧偏低,给予慢性高频电刺激1个月后复查提示右侧放射性摄取浓度稍高于左侧,但双侧均较低, 3个月时复查右侧放射性摄取浓度明显高于左侧.结论:STN DBS可有效改善偏侧猴PD模型症状,通过刺激后纹状体区DAT升高,D2R逐渐下降,同时糖代谢提高.结果提示给予STN有效慢性高频电刺激可能提高了纹状体区的代谢活性.

α-黑素细胞刺激素处理的树突状细胞对小鼠心脏移植物存活时间的影响

目的:观察α-黑素细胞刺激素(α-MSH)处理的小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)预防同种异基因小鼠心脏移植排斥反应的效果.方法:在供者BALB/c小鼠DC培养的过程中加入α-MSH,用流式细胞仪分析DC的表型变化,用ELISA方法检测培养上清中IL-12的分泌水平.在同种异基因心脏移植前,分别将α-MSH处理后7 d的 DC(α-MSH-DC)和正常培养7 d的 DC(Day7-DC)输至受者C57BL/6小鼠体内,并另设输入PBS的小鼠为对照组,通过颈部Cuff法小鼠异位心脏移植模型,观察心脏移植物存活时间,并用ELISA方法测定受者血清细胞因子水平的变化.结果:α-MSH-DC表面分子的表达明显低于Day7-DC.α-MSH-DC培养上清中分泌IL-12 [(95.2±6.3) pg/ml]的水平也明显低于Day7-DC[(197.1±10.2) pg/ml].与PBS组[(7.17±0.26) d]相比,Day7-DC组[(6.25±0.61) d]的心脏移植物存活时间缩短;而α-MSH-DC组[(15.08±1.32) d]的心脏移植物存活时间明显延长.与Day7-DC和PBS组相比,α-MSH-DC组移植后血清IL-2和IFN-γ细胞因子水平明显降低.结论:α-MSH可以抑制体外培养的DC表面分子的表达和IL-12的分泌;α-MSH处理的DC在体内能延长同种异基因心脏移植物的存活时间.

大鼠急性脊髓损伤后不同复苏液体治疗的比较

目的:研究大鼠急性高位脊髓损伤后,不同复苏液体治疗对左心室功能及伤段脊髓血脊屏障和含水量的影响.方法:将 C7脊髓损伤15 min后的大鼠随机分为4组(n=8):不补液的对照组、7.5%高渗盐水治疗组(HS组)、6%羟乙基淀粉组(HES组)和平衡液组(BS组).补液各组于4 min内均予4 ml/kg的相应液体,继以10 ml·kg-1·h-1持续输注,观察记录5、15、30 min时血流动力学的变化.30 min时注射0.5%伊文思蓝(EB)1 ml,2 h后取伤段脊髓,测含水量和EB含量.结果:C7损伤后,各组的心率(HR)在不同时点无明显区别.平均动脉压(MAP)、左室收缩压(LVSP)、左室内压力变化大速率(±dp/dtmax)比较显示,补液5 min时,HS组显著高于对照组(P<0.05);15、30 min时HS组和HES组的都显著高于对照组(P<0.05);而BS组在不同时点都与对照组无显著差异.HS和HES组的脊髓组织含水量与EB含量均低于对照组,BS组含水量高于对照组(P<0.05).结论:高位脊髓损伤后早期以高渗盐水和6%羟乙基淀粉复苏,可以改善左心功能,一定程度上都可减轻伤段脊髓的水肿.平衡液对心功能没有改善作用,却可加重脊髓的水肿.

血小板衍生生长因子-BB对血管内皮细胞、平滑肌细胞及成纤维细胞胶原蛋白合成的影响

目的:观察血小板衍生生长因子-BB对培养的人血管内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞胶原蛋白合成的影响.方法:采用培养的人血管内皮细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞,应用3H-脯氨酸掺入方法,观察血小板衍生生长因子-BB对3种细胞胶原蛋白合成的影响.结果:血小板衍生生长因子-BB可促进处于静止状态的成纤维细胞和平滑肌细胞胶原蛋白合成,并呈现出明显的浓度依赖关系,成纤维细胞和平滑肌细胞胶原蛋白合成分别在30 ng/ml和40 ng/ml时达到高峰,血小板衍生生长因子-BB对血管内皮细胞胶原蛋白合成总量无明显促进作用.在30 ng/ml的血小板衍生生长因子-BB作用下,成纤维细胞和平滑肌细胞分别在36 h和48 h时胶原蛋白合成达到高峰.结论:血小板衍生生长因子-BB可明显促进培养的人血管平滑肌细胞和成纤维细胞的胶原蛋白的合成,对血管内皮细胞胶原蛋白合成总量无明显促进作用.

心肌细胞连接蛋白与心房颤动的关系

缝隙连接(gap junction,GJ)是含有多种细胞间通道的特殊膜结构,由连接蛋白(connexin,Cx)所构成,Cx40含量和分布的改变,可导致心房肌细胞电耦联传导速度改变,增加折返性心律失常,从而产生心房颤动(atrial fibrillation).本文对连接蛋白与心房颤动之间关系的研究进展作一综述.

超声漏诊肾血管平滑肌脂肪瘤并出血破裂一例报告

1 临床资料患者女,49岁.左腰部因无明显诱因反复发作性绞痛,并食欲减退5 d.体格检查:体温36.9℃,脉搏78次/min,呼吸18次/min,血压140/90 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa).

改良Cuff技术建立豚鼠至大鼠异位心脏移植模型

豚鼠至大鼠异位心脏移植是常用的研究非协调性异种心脏移植排斥机制的实验动物模型[1].本研究采用Cuff技术[2]及改良Cuff技术分别建立豚鼠至大鼠颈部异位心脏移植模型并进行比较,寻求更理想的小动物心脏移植模型.现将手术方法、改进及体会介绍如下.

上段食管癌的外科治疗(附76例报告)

上段食管癌包括颈段及主动脉弓平面以上的胸段食管癌,由于解剖位置及重建难度的关系,往往采用姑息性放射治疗,但近、远期效果都不理想.我们自1991年10月至2004年5月手术治疗上段食管癌共76例,现总结如下.

鲨鱼肝刺激物的促肝细胞增殖和抗小鼠急性肝损伤作用

肝刺激物(hepatic stimulator substance,HSS)是从初断乳大鼠肝和部分肝切除后的再生肝中发现的一种肝脏刺激因子,它存在于新生肝和再生肝的肝细胞胞液中,能刺激肝细胞有丝分裂,促进肝细胞再生和肝细胞DNA的合成.与其他肝细胞因子不同,HSS的作用只有组织特异性,而没有种属特异性,目前已从猪、狗、兔等多种动物的乳肝组织及人胎肝组织提取出HSS.大量研究证明,从哺乳动物提取的HSS对CCl4、D-(+)-氨基半乳糖、硫代乙酰胺(TAA)、乙醇造成的大鼠急性肝损伤有明显的保护作用[1,2].研究表明鲨鱼组织提取物有可能用于提高和改善人类机体免疫状况[3].本文探讨了其对小鼠急性肝损伤的影响.

超声对左冠状动脉起源于肺动脉的诊断价值(附二例报告)

1 临床资料病例1,患儿男,13岁,自幼发现心脏杂音.体检:胸骨左缘2～3肋间闻及3～4/6级粗糙吹风样杂音.超声检查:左心略大.右冠状动脉内径0.8 cm,多普勒显示花色血流(图1A),并沿室间隔走向左室侧及心尖部,左室侧壁心肌内可见许多星点状血流.

非胃手术后功能性胃排空障碍的诊断和治疗

目的:探讨非胃手术后功能性胃排空障碍(FGDE)的病因、发病机制、诊断和治疗方法.方法:对1998年1月至2004年4月间收治的6例非胃手术后功能性胃排空障碍患者(年龄34～64岁)的临床资料进行回顾性分析.结果:非胃手术后功能性胃排空障碍多发生于腹部手术后的3～14 d,表现为上腹胀、呕吐、胃引流量增多.6例患者均经非手术治疗(胃肠减压、全胃肠外营养或同时给予肠内营养,碘水造影检查和胃镜检查,给予胃复安、吗叮啉及红霉素等药物)后16～27 d恢复胃动力.胃造影和胃镜检查不仅是检查手段,而且对胃蠕动的恢复有促进作用.完全胃肠外营养(TPN)和肠内营养(EN)可以促进胃动力的恢复.结论:腹部非胃手术后功能性胃排空障碍的病因是多因素的,胃造影、胃镜的机械刺激作用以及充分的营养供给对胃功能障碍的恢复有促进作用.采取非手术治疗可治愈功能性胃排空障碍,应尽量避免手术治疗.

心房颤动外科手术的发展与评价

随着电生理学对房颤机制的深入研究和新型标测技术消融能源的发展,房颤的外科治疗不断取得新的突破.由Cox迷宫手术的复杂术式逐渐向左迷宫、放射迷宫衍变.减少创伤提高治愈率,成为房颤外科治疗不断追求的新目标.本文概述了房颤外科治疗的各种术式设计原理和房颤根治术新消融技术的应用及其疗效评价.

了解现代心理战效果,重视防御性心理战研究与应用

本文分析了战时常出现的心理问题及外军心理战效果,建议应充分重视防御战争本身或心理战产生的心理杀伤力,并简要回顾了我军已有的相关研究基础.

6-O-取代阿昔洛韦衍生物的合成及其抗病毒活性

目的:通过对阿昔洛韦分子中碱基的结构修饰,设计并合成6-O-取代阿昔洛韦衍生物,并初步测定它们的抗病毒活性.方法:以阿昔洛韦为先导化合物,合成一系列6-O-取代阿昔洛韦衍生物,并以阿昔洛韦为阳性对照对猴肾细胞Vero进行体外抗HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ病毒活性测定.结果:合成了6-O-取代阿昔洛韦衍生物10个,结构均经过元素分析或MS确认.部分目标化合物具有一定的体外抗HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ病毒活性(MIC分别为25、50 ng·L-1),但较阿昔洛韦(MIC为2 ng·L-1)作用弱.结论:所合成的目标化合物虽然可能在体内更易于吸收,但体外初步抗病毒活性实验结果表明作用较弱.

PC12-Mint2基因工程细胞株的构建

目的:构建稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株.方法:用PCR方法将Mint2基因亚克隆至真核表达载体pcDNA3.1A,构建真核表达质粒pcDNA3.1A-Mint2;采用脂质体Lipofectamine2000介导,将重组载体转染入PC12细胞,G418筛选抗性克隆,有血清培养并传代具有G418抗性的细胞,数代培养后获得工程细胞株;分别提取野生型PC12细胞和PC12-Mint2工程细胞的mRNA及细胞裂解液,RT-PCR方法检测Mint2基因是否整合入PC12细胞基因组,并用Western印迹法检测外源基因Mint2在PC12-Mint2工程细胞中是否正常表达.结果:扩增出的基因片段大小为2 253 bp;pcDNA3.1A-Mint2重组质粒酶切结果表明Mint2基因正确地插入到pcDNA3.1A载体中,测序结果正确;将pcDNA3.1A-Mint2转染PC12细胞,经G418筛选获得PC12-Mint2工程细胞株;RT-PCR结果表明Mint2基因已整合入PC12细胞,Western印迹结果显示在120 000处有特异条带,大小与Mint2蛋白理论计算值一致,表明在PC12-Mint2基因工程细胞中确实有Mint2蛋白表达.结论:本试验成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1-Mint2,并获得了稳定表达Mint2蛋白的PC12-Mint2基因工程细胞株,为进一步研究Mint2生物学功能及其作用机制奠定了基础.

HPLC-ELSD法测定刺蒺藜中甾体皂苷TTS-12含量

目的:对刺蒺藜全草中的替告皂苷元3-O-β-D-吡喃木糖(1→2)-[β-D-吡喃木糖(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖(1→2)]-β-D-吡喃半乳糖苷(TTS-12)进行含量测定.方法:对刺蒺藜全草70%乙醇提取物经前处理后采用HPLC-ELSD法测定TTS-12含量.测定条件为C18柱(5 mm×250 mm,5 μm),甲醇∶水=90∶10(V/V)为流动相,流速1 ml·min-1;漂移管温度:40℃;气体(N2)压力:2×105 Pa,进样量20 μl.结果:线性范围为0.103 3～1.033 mg·ml-1,回归方程:lnc=0.669 0 lnA-3.058 1(r=0.999 9),精密度、稳定性和重现性试验的RSD分别为0.15%(n=6)、0.24%(n=9)、1.43%(n=6),加样回收率为95.07%,RSD为3.02%.刺蒺藜全草中TTS-12的平均含量为0.068 94%(质量百分数).结论:该法为蒺藜中甾体皂苷TTS-12的含量测定提供了简便、快速的方法.

格辟龙的合成方法改进

目的:改进新型抗恐慌症药物格辟龙的合成方法.方法:以氰基乙酸乙酯为起始原料,先制得关键中间体4,4-二甲基-2,6-哌啶二酮,再通过一系列反应终合成格辟龙.结果和结论:改进的合成路线在常规条件下易于控制,终产物收率(86%)及产品纯度(>98.5%)均符合要求,适用于工业化生产.

基因芯片技术分析同种异基因大鼠心脏移植急性排斥反应的相关基因

目的:运用基因芯片技术分析同种异基因大鼠心脏移植后急性排斥反应的基因表达谱. 方法:建立大鼠颈部心脏移植模型,以同种同基因和异基因移植动物作为对照,术后5 d移植心脏中抽提总RNA,纯化后的mRNA进行逆转录制备杂交探针,应用含有4 096个靶基因的表达谱芯片对两组移植心脏组织进行差异表达谱分析.结果:在同种异基因心脏移植术后差异表达基因共有210条(下调96条,上调114条);其中已知基因有33条(下调13条,上调20条);未知基因177条(下调83条,上调94条),其中有15条已知基因(上调2条,下调13条)尚未见报道.结论:运用基因芯片技术研究同种异基因心脏移植术后急性排斥相关基因,可为进一步研究其发病机制和治疗提供新思路.

红花化学成分研究(Ⅱ)

目的:研究红花的化学成分.方法:采用溶剂法和柱层析法分离纯化红花中的化学成分,并通过理化性质和光谱数据鉴定所得化合物的分子结构.结果:从红花乙醇提取物中共分得7个单体化合物,经鉴定分别为芹黄素(Ⅰ)、6-羟基山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ)、香豆酸(Ⅲ)、对羟基苯甲酰香豆酸酐(Ⅳ)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)、cartormin(Ⅵ)和羟基黄色素A(Ⅶ).结论:化合物Ⅳ为红花中首次分离得到.

自制笔式射频电极心房内外膜射频消融的实验研究

目的:探讨自制笔式射频电极对心房内膜或外膜射频消融适宜的工作参数.方法:选用离体猪心6只,应用自制笔式射频电极以不同的功率和放电时间在心房内膜或外膜行线形消融.结果:病理检查证实射频消融处心房肌透壁性损伤,心肌细胞核固缩、胞质凝固.损伤的宽度与功率、放电时间呈正相关,能够产生心房肌透壁性损伤,而不出现爆燃和碳化的功率和放电时间分别为30～50 W和20～45 s.结论:自制笔式射频电极可用于心房颤动患者心脏外科手术时直视下消融心房内膜或外膜及房颤治疗,以功率30～50 W、每次放电时间20～45 s为宜.

Solid dispersions of silymarin were prepared by the fusion method with the intention of improving the dissolution properties of silymarin. Polyethylene glycol 6000 (PEG 6000) was used as the inert hydrophilic matrix. The dissolution studies of the solid dispersions were performed in vitro. And the results obtained showed that the dissolution rate of silymarin was considerably improved when formulated in solid dispersions with PEG 6000 as compared to original drug, and the increased dissolution rate might be favorable for further oral absorption.

The Beige and Chediak-Higashi (BEACH) domain is highly conserved in a large family of eukaryotic proteins, and is crucial for their functions in vesicle trafficking, membrane dynamics and receptor signaling. From a fetal brain cDNA library, we isolated a cDNA of 3858 bp encoding a novel human BEACH protein, which was named as human neurobeachin-like 1 (NBEAL1) gene. The cDNA had an open reading frame (ORF) of 3006 bp encoding a putative 1001 amino acid protein. The NBEAL1 gene was located on human chromosome 2q33-2q34 and consisted of 25 exons spanning about 73 kb of the human genome. PSORT analysis indicated that the NBEAL1 protein contained a vacuolar-targeting motif ILPK, which suggested the protein might be located in the cell lysosome. The expression pattern was examined by reverse transcription/polymerase chain reaction (RT-PCR), which showed that the transcripts were highly expressed in the human brain, kidney, prostate, and testis while lowly in the ovary, small intestine, colon and peripheral blood leukocyte. In addition, the RT-PCR result of and Northern blot showed that the novel gene was highly expressed in the biopsies of different grade glioma, especially in that of lower grade ones, which suggested it might be correlative with the glioma.

Gene-viral therapy, which uses replication-selective transgene-expressing viruses to manage tumors, can exploit the virtues of gene therapy and virotherapy and overcome the limitations of conventional gene therapy. Using a human telomerase reverse transcriptase-targeted replicative adenovirus as an antiangiogenic gene transfer vector to target new angiogenesis and making use of its unrestrained proliferation are completely new concepts in tumor management. CNHK300-mE is a selective replication transgene-expressing adenovirus constructed to carry mouse endostatin gene therapeutically. Infection with CNHK300-mE was associated with selective replication of the adenovirus and production of mouse endostatin in telomerase-positive cancer cells. Endostatin secreted from a human gastric cell line, SGC-7901, infected with CNHK300-mE was significantly higher than that infected with nonreplicative adenovirus Ad-mE in vitro (800±94.7 ng/ml versus 132.9±9.9 ng/ml) and in vivo (610±42 ng/ml versus 126 +/- 13 ng/ml). Embryonic chorioallantoic membrane assay showed that the mouse endostatin secreted by CNHK300-mE inhibited angiogenesis efficiently and also induced distortion of pre-existing vasculature. CNHK300-mE exhibited a superior suppression of xenografts in nude mice compared with CNHK300 and Ad-mE. In summary, we provided a more efficient gene-viral therapy strategy by combining oncolysis with antiangiogenesis.

1. Biventricular hypertrophy has been described in a high blood pressure variability (BPV) model of sinoaortic-denervated (SAD) rats without systemic hypertension. To explore the possible involvement of the lung in SAD-induced right ventricular hypertrophy (RVH), we examined lung morphology, in addition to systemic haemodynamics and ventricle morphology, in Wistar-Kyoto rats 32 weeks after SAD. 2. In Wistar-Kyoto rats 32 weeks after SAD, there existed a substantial elevation in BPV, with no change in the average level of arterial pressure. Biventricular hypertrophy following SAD was characterized by a greater hypertrophy in right than left ventricles; both absolute and normalized right ventricular weights were significantly increased by 22 and 27%, respectively, and only normalized left ventricular weight was significantly increased by 12%. No infarcts were found in any ventricles examined. 3. In the lung, the most prominent change following SAD was pulmonary vasculopathy, including wall thickening, perivascular fibrosis and cell infiltration. In pulmonary arteries with an internal diameter of 70-130 microm, the external diameter, wall thickness and wall thickness to internal diameter ratio were increased in SAD compared with control rats. 4. There was no correlation between right and left ventricular weights. In contrast with BPV-correlated left ventricular weight, right ventricular weight was correlated with the wall thickness of the pulmonary artery, but not with BPV. 5. These findings suggest that greater RVH following SAD is associated with pulmonary vasculopathy, but is not secondary to the left ventricular problems or high BPV.

PURPOSE. To investigate the sensitivity, specificity, and spatial distribution of the product of p28 gene (p28(GANK) protein) in human hepatocellular carcinoma (HCC) and nonhepatocellular carcinomas in relation to immunostaining with Cytokeratin 18 (CK18), alpha-fetoprotein (AFP), and Hepatocyte paraffin 1 (HepPar1). METHOD. In this retrospective study, formalin-fixed paraffin-embedded tissues from 24 HCCs, five intrahepatic cholangiocarcinomas (ICC), five combined hepatocellular cholangiocarcinomas (C-HCC-CC) and mine metastatic hepatic carcinomas (MHC) were immunostained for p28(GANK) as well as CK18, AFP and HepPar1. Only cases with more intensified staining in carcinoma contrast to the adjacent liver tissues were accepted as positive. RESULT. In HCC, p28(GANK) was expressed restrictively in hepatocytes of both para-lesion and carcinoma liver tissues, while absent in the bile duct epithelial cells, Kupffer cells, and other interstitial cells. The positive staining of p28(GANK) was noted in 16 (66.7%) specimens of HCC and three (60.0%) specimens of C-HCC-CC, and no specific lesion staining was found in all tested specimens of ICC and MHC. Sensitivity and specificity for hepatocyte-originated carcinoma were, respectively, 65.5% and 100% for p28(GANK), 79.3% and 85.2% for CK18, 20.7% and 100% for AFP, 79.3% and 92.0% for HepPar1. CONCLUSION. The hepatocytic staining for p28(GANK) is clearly useful in differentiating hepatocyte-originated carcinoma from non-HCC. p28(GANK) may be used as an ancillary marker for the diagnosis of HCC.

Cell-mediated immune responses are crucial in the protection against tuberculosis. In this study, we constructed epitope DNA vaccines (p3-M-38) encoding cytotoxic T lymphocyte (CTL) epitopes of MPT64 and 38 kDa proteins of Mycobacterium tuberculosis. In order to observe the influence of spacer sequence (Ala-Ala-Tyr) or ubiquitin (UbGR) on the efficacy of the two CTL epitopes, we also constructed DNA vaccines, p3-M-S(spacer)-38, p3-Ub (UbGR)-M-S-38 and p3-Ub-M-38. The immune responses elicited by the four DNA vaccines were tested in C57BL/6 (H-2b) mice. The cytotoxicity of T cells was detected by LDH-release method and by enzyme-linked immunospot assay for epitope-specific cells secreting interferon-gamma. The results showed that DNA immunization with p3-M-38 vaccine could induce epitope-specific CD8+ CTL response and that the spacer sequence (AAY) only enhanced M epitope presentation. The protein-targeting sequence (UbGR) enhanced the immunogenicity of the two epitopes. The finding that defined spacer sequences at C-terminus and protein-targeting degradation modulated the immune response of epitope string DNA vaccines will be of importance for the further development of multi-epitope DNA vaccines against tuberculosis.

我校肝胆外科的发展和体会

正当辞旧迎新之时,学校2004年度学术年会隆重开幕了.这是全校科技工作者的一次重大盛会,也是新一届党委体现"科教并举"治校理念的一个重要举措.作为一名学校的老科技工作者,我受邀作年会报告,倍感欣慰和鼓舞,衷心地祝愿大会取得圆满成功.

风心病慢性房颤心房连接蛋白表达与AERP的相关性研究

目的:通过检测风心病慢性房颤患者左、右心房缝隙连接蛋白Cx40和Cx43表达及相应部位的心房有效不应期(AERP)研究两者之间的相关性,探讨Cx40和Cx43对慢性房颤左、右心房电生理特性的影响. 方法:29例风心病伴或不伴慢性房颤的患者,共分2组:窦性心律组(SR组,n=13),慢性房颤组(CAF组,n=16),另取6例非风心病作为正常对照组.在行二尖瓣置换术时,采用心外膜标测技术测定左、右心房的AERP,并在相应部位切取心房组织,通过Western印迹法检测左、右心房肌Cx40和Cx43的表达,同时对两者行相关性分析. 结果:CAF组患者左、右心房Cx40的表达和AERP较SR组有明显下降(P<0.05),而Cx43无明显变化;左心房后壁Cx40的相对表达量与AERP呈明显正相关(r＝0.762,P<0.01),而Cx43与AERP无明显相关.SR组中,Cx40和Cx43均与AERP无明显相关.结论:在风心病慢性房颤心房中,Cx40表达下调参与慢性房颤的心房重构,并影响心房的电生理特性,提示Cx40的表达对风心病慢性房颤的发生和维持具有重要的作用.

慢性房颤伴二尖瓣病的迷宫手术24例八年随访

目的:评价改良迷宫术同期进行瓣膜手术的电生理效果及对心脏功能的远期影响.方法:24例慢性房颤伴有二尖瓣疾病施行改良迷宫和二尖瓣手术的患者进行12导联心电图、心内电生理、动态心电图和超声心动图检查,平均随访(92.7±11.9)个月.结果:(1)术后3个月90%恢复窦性心律,术后1年以上100%恢复窦性心律.(2)除1例Ⅰ度房室传导阻滞外,窦房结及房室结功能检查均正常.(3)除高位右房外心房各部位有效不应期均显著延长,在心房各部位猝发和程控刺激均不能诱发房扑和房颤.(4)电生理检查有正常的心房激动和房室同步顺序.(5)动态心电图显示有良好的心率变时性反应和运动耐力.(6)随访期中再住院率为4%.(7)超声心动图显示随访期左房长径较术后明显减小[(5.52±1.22) cm vs (6.77±1.36) cm, P＜0.01];随访期左房容积明显小于术后[(91.97±52.64) cm3 vs (155.35±88.86) cm3 , P＜0.001];随访期右房长径明显小于术后[(4.72±0.85) cm vs (5.77±1.18) cm,P＜0.05].(8)左心室收缩功能正常,平均EF值为(56.00±19.75)%,平均FS值为(32.86±9.53)%.结论:在改良迷宫同时进行瓣膜手术均能安全有效的消除房颤维持窦律减小心房容积,恢复正常的房室同步传导和左心功能.

钙激活蛋白酶Ⅰ在风湿性心脏病心房颤动中的作用

目的:阐明风湿性心脏病中钙激活蛋白酶Ⅰ(Calpain Ⅰ)与心房颤动(AF)关系及Calpain Ⅰ在风湿性心脏病不同类型心房颤动时的变化特点.方法:选择心脏手术患者55例,共分为4组,A组(n=12):非风湿性心脏病窦性心律组;B组 (n=13):风湿性心脏病窦性心律组;C组 (n=14):风湿性心脏病阵发性AF组;D组 (n=16):风湿性心脏病持续性AF组.在患者右房侧壁组织蛋白提取液不加钙离子或加钙离子(10-3mol/L)的条件下,采用比色法,对非选择性蛋白酶抑制剂E-64、Calpain Ⅰ抑制剂、Calpain Ⅱ抑制剂、溶酶体抑制剂Lactocystin作用于心房肌组织后的蛋白裂解活性进行检测比较.结果:A组、B组在相同试验条件下蛋白裂解活性未见明显差异;不给予蛋白酶抑制剂时, C组、D组的蛋白裂解活性明显高于B组 (P<0.01);给予蛋白酶抑制剂,Calpain Ⅰ抑制剂可抑制4组患者心肌组织蛋白裂解活性,而CalpainⅡ抑制剂则不能充分抑制4组患者心肌组织蛋白裂解活性.结论:风心病心房颤动患者心肌组织蛋白裂解活性是升高的,其活性升高与Calpain Ⅰ的作用有密切关系.

风湿性心脏病慢性心房颤动f波振幅的电生理研究

目的:对风湿性心脏病(风心病)慢性心房颤动(房颤)的房波电振幅特点进行研究,以探讨其在房颤产生和持续中的意义.方法:选择44例风心病慢性房颤患者在术前作16导左、右房同步心外膜标测图并进行分析,同时与10例室上速(对照组)心内电生理检查结果进行比较.结果:风心病慢性房颤患者A波,左房后壁中、下部f波振幅明显低于对照组A波,左房后壁上、中、下部位f波振幅明显低于右房(P＜0.05). 14例房颤电复律后心房各部位的A波幅明显大于术前f波振幅(P＜0.01),左心耳f波振幅显著大于左房后壁上、中、下部,左房后壁上部f波振幅显著大于左房后壁中部.风心病慢性房颤患者f波振幅与心房内径和容积无相关.结论: 左房后壁中、下部f波振幅低,在左房心耳、左房上和左房中、下部之间存在明显电位差,提示左房中、下部是易产生各向异性传导的部位,推测为AF起源,在明显电位差的部位易形成折返环.