乙型肝炎病毒(adr亚型)转基因小鼠的研究

目的:制备含有2.0拷贝乙型肝炎病毒(HBV,adr亚型)基因组的转基因小鼠,为HBV相关医学问题的研究准备实验动物模型.方法:应用受精卵原核显微注射的方法,产生HBV转基因小鼠.用PCR,Southern-blotting杂交、放射免疫、免疫组织化学以及亚显微结构分析等方法,研究外源基因在转基因小鼠体内的整合、表达以及复制.应用常规病理切片及血清生物化学方法分析转基因小鼠的病理学改变.结果:得到了4只整合有HBV基因组的建立者小鼠,并证明HBV基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传,在肝、肾组织内可特异性表达、复制,并在肝细胞内发现了Dane颗粒.转基因小鼠的肝、肾组织未见明显的病理学改变.结论:获得了HBV的转基因小鼠,其病毒基因可以表达,并有病毒颗粒形成.该小鼠对于HBV的各个基因产物是免疫耐受的,其基本生物学特性与人类的HBV携带者特征相似.

来氟米特水溶液化学稳定性的研究

目的:研究广泛pH范围内来氟米特的化学稳定性.方法:建立来氟米特的HPLC测定方法,测定不同温度下不同pH值时来氟米特分解的速度常数,得到不同pH值时的分解活化能及不同温度下的稳定pH值.结果:常温(20～40℃)下来氟米特稳定的pH范围是2.85～4.56,活化能数值恰在此范围内出现极大值.稳定的pH范围随温度升高而向低pH值方向移动,当温度大于60℃时,稳定pH值为1.80以下.结论:适当调整溶液的pH值可以显著改善来氟米特的化学稳定性,为其制剂学研究提供了部分依据.

那法瑞林对人乳腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用

目的:观察促性腺激素释放激素(LHRH)高效类似物那法瑞林对人乳腺癌BCaP-37细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用并探讨其作用机制.方法:那法瑞林用药分为移植瘤接种后次日给药组及接种后2周给药组,每组各设3个剂量,均连续皮下给药4周.使用他莫昔芬和另一LHRH激动剂D-Trp6 LHRH作为阳性对照.用药结束后,分别测定移植瘤、双侧卵巢、子宫质量和血清雌二醇(E2)含量;进行病理检查(包括电镜);测定移植瘤细胞DNA指数(DI);观察瘤细胞增殖周期比例的变化.结果:(1)在以上不同的两用药组中,那法瑞林剂量在500和1000μg/kg时,可以显著抑制移植瘤的生长,移植瘤的DI值明显下降,通过电镜观察到瘤组织内存在凋亡的瘤细胞.同时,动物的卵巢质量和血清E2含量显著下降.(2)他莫昔芬30mg/kg对移植瘤生长无显著影响,与D-Trp6 LHRH 抑制移植瘤生长的作用相比亦无显著差别.结论:那法瑞林长期皮下给药对BCaP-37移植瘤生长有显著的抑制作用.

葛根素对培养人主动脉内皮细胞脂质过氧化的保护作用

目的:观察葛根素对培养人主动脉内皮细胞脂质过氧化的保护作用.方法:建立人主动脉内皮细胞体外培养模型,在培养液中加入0.1×10-4和1.0×10-4mol/L联胺,致内皮细胞脂质过氧化损害,即刻或30min后加入葛根素0.3mg/孔,测定噻唑蓝摄取率、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和凝血烷(TXA2)含量.结果:两种浓度的联胺使LDH,MDA和TXA2含量增加,使噻唑蓝摄取率下降,加入葛根素后可使上述结果逆转.结论:葛根素对脂质过氧化致内皮细胞的损害具保护作用.

法莫替丁散剂和片剂的药代动力学及其生物等效性评价

目的:比较法莫替丁(famotidine,Fam)散剂和片剂的生物利用度和药代动力学.方法:10例健康志愿者分别单剂口服Fam散剂或片剂40mg,用反相高效液相色谱法测定血药和尿药浓度.结果:Fam散剂和片剂体内过程均符合开放性一室模型;散剂的相对生物利用度为103%.Fam散剂和片剂的tmax'cmax't1/2k和AUC分别为(1.91±0.44),(2.54±0.40)h;(99.4±37.6),(87.0±29.5)ng/ml;(3.21±0.67),(2.49±0.56)h;(627±100),(607±177)h.ng/ml.结论:两种剂型的体内吸收和峰浓度无显著性差异(P>0.05),具有生物等效性;达峰时间具有明显的差异(P<0.05).

动脉成形术对血管表皮生长因子受体表达影响的免疫组化研究

目的:观察动脉成形术对血管平滑肌细胞(SMC)表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,探讨EGFR与再狭窄的关系.方法:于兔右颈总动脉成形术前及术后24,48,72h,7d和14d,取实验动脉段用免疫组化LSAB法检测EGFR的表达.结果:正常颈总动脉中膜未见EGFR阳性表达;动脉成形术后24h,中膜部分SMC显示EGFR阳性表达;48和72h中膜EGFR阳性表达均进一步增加;7和14d动脉中膜EGFR阳性表达的SMC均较72h显著减少,但新生内膜中增殖的SMC均显示大量EGFR阳性表达.阳性染色以胞膜处明显.结论:动脉成形术使血管SMC EGFR表达显著增加,再狭窄形成过程中SMC增殖与EGFR有关.

抗CD3-抗胶质瘤双特异性抗体对人脑胶质瘤生长的影响

目的:研究抗CD3-抗胶质瘤双特异性抗体(双抗)对裸鼠体内人脑胶质瘤生长的影响.方法:动物分为6组,实验组系双抗治疗组,其余为不同的对照组,采用人脑胶质瘤裸鼠模型NHG-1,分别观察各组中肿瘤的出现、生长及宿主的生存情况.结果:在实验组中,肿瘤出现的平均潜伏期、肿瘤细胞生长周期时间以及动物的生存期均比各对照组延长(P<0.05或P<0.01);肿瘤增殖曲线显示,经几周缓慢生长后,各对照组先后进入快速生长期,而经双抗治疗的实验组,肿瘤始终处于缓慢生长状态.结论:抗CD3-抗胶质瘤双特异性抗体可以延缓人脑胶质瘤在动物体内的生长速度,具有临床应用潜力.

维拉帕米脉冲控释片的设计和制备

目的:针对高血压、心绞痛常在凌晨发作的特点,研制夜间服药、凌晨释放的维拉帕米(VR)脉冲控释片.方法:全面考察影响药物释放滞后时间的因素.选用3种强崩解剂的不同用量,考察片芯崩解剂对时滞的影响.通过均匀设计实验考察外层包衣的组成和片剂的硬度,多元回归筛选优处方,并考察不同溶出条件对控释效果的影响.结果:片芯所用的3种崩解剂以羧甲基淀粉钠的崩解性能较好,用量设计在25%左右.外层包衣处方中PEG 6000增加,氢化蓖麻油(HCO)、乙烯-醋酸乙烯共聚物(EVA)用量减少,硬度减小,释放滞后时间减少.由此确定释放滞后时间为3和5h的两个基本处方.结论:VR压制包衣片在体外溶出实验中能实现脉冲释药,并能通过调节辅料用量实现不同控释效果.

90Y-抗人成骨肉瘤单抗对人成骨肉瘤裸鼠移植模型的治疗观察

目的:观察90Y标记的抗人成骨肉瘤单克隆抗体(OSMcAb)对人成骨肉瘤裸鼠移植模型的放射免疫治疗作用.方法:采用EDTA淋洗法从90Y发生器上制备游离90Y,并用DTPA环酐法将90Y标记OSMcAb.标记单抗进行体外靶细胞结合实验以验证标记后单抗蛋白活性保持程度,应用自制的人成骨肉瘤细胞系HOS-8603接种裸鼠建立人成骨肉瘤的裸鼠移植模型,使用90Y-OSMcAb,对此模型进行导向治疗观察.结果:(1)EDTA淋洗法制备90Y纯度高,其相对含量可达99.997%;(2)单克隆抗体的90Y标记率达90%以上,抗体蛋白活性保持82.3%;(3)治疗结果表明治疗组肿瘤明显小于对照组,原肿瘤的指数生长规律遭到破坏,治疗组生存期明显长于对照组;(4)组织学切片显示治疗组肿瘤有广泛坏死,PcNA免疫组化显示治疗组肿瘤细胞增殖受到明显抑制.结论:经单抗特异导向的90Y在体内有很好的杀肿瘤效应,使用核素标记该单抗对骨肉瘤进行放射免疫实验治疗是成功的.

病理性氧供依赖与器官组织能量代谢间的关系

目的:分析病理性氧供依赖与器官组织能量代谢间的关系,探讨该关系对器官组织氧合评价的意义.方法:以大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)方法制作脓毒性休克模型,随机分成CLP前及CLP后2,4,5,6,7,8h组,测定氧动力学等指标后,立即处死动物并取肝、心、肾组织标本,用生物发光法测定磷酸肌酸(PC)和三磷酸腺苷(ATP)含量.结果:全身氧供给(DO2)与氧消耗(VO2)呈双相变化关系,DO2进行性降低并在CLP后6h降至临界DO2值(cDO2),以后呈病理性氧供依赖关系.CLP后5h,肝组织PC含量明显降低(P＜0.05),6h时肝ATP含量及肾PC、ATP含量均明显降低;心肌PC、ATP分别在CLP后6,7h始显著下降(P＜0.01).结论:病理性氧供依赖关系的出现反映了心、肝、肾组织能量代谢障碍存在,但在其出现前,肾、肝组织已开始出现这种异常,故应尽早预防器官生物能量衰竭发生.

尿毒症患者血液透析致残余肾功能减退相关因素分析

目的:分析血透致残余肾功能(RRF)减退的相关因素.方法:采用醋酸纤维素膜透析器(1.1及1.7m2)行碳酸氢盐透析,并每月测定1次24 h尿量、肌酸酐水平、透析间期体质量增长量、透析清除率及透析中反应,共观察6～12个月.结果:原发于肾小球疾病者RRF较肾小管间质疾病者下降快;长期透析超滤超过4.0kg/次者较小于4.0kg/次者RRF下降快;透析6个月RRF减退幅度超过5ml/min者透析并发症发生率与低于5ml/min者相比差异不显著;采用大面积(1.7m2)透析器治疗6个月后RRF下降幅度较采用中等面积透析器(1.1m2)大.结论:大量超滤引起肾有效血流量降低,致肾缺血再灌注损伤,是造成血透初期残余肾功能丢失的主要因素;追求高效透析致渗透性利尿作用减弱,也是加速RRF减退的原因;肾小球疾病,尤其病变处于活动阶段,参与了RRF的丧失.

烫伤大鼠中枢氨基酸递质和心血管功能改变的关系

目的:观察烫伤早期大鼠下丘脑氨基酸递质含量及γ-氨基丁酸(GABA)受体的变化,及其对心血管指标的影响.方法:制备大鼠30%总体表面积Ⅲ度烫伤模型,采用脑组织游离氨基酸自动分析法测定烫伤大鼠下丘脑氨基酸递质相对含量,运用神经元突触膜放射配体结合法测定GABA受体功能,侧脑室内注射印防己毒素和海人酸,运用四导生理仪记录血压和心肌力学指标.结果:烫伤早期大鼠下丘脑GABA含量明显增加,谷氨酸减少,其他氨基酸递质含量无明显变化;GABA受体大结合容量明显增加,平衡解离常数无明显改变.烫伤大鼠中枢GABA作用的阻断可明显回升其血压、左心室收缩压、左心室内压大变化速率,谷氨酸的激活也有一定的作用.结论:大鼠烫伤早期中枢GABA及谷氨酸递质改变可能是其对心血管功能减退的影响因素之一.

普鲁泊福对犬急性缺血再灌注心肌代谢和超微结构的影响

目的:研究不同剂量的普鲁泊福对犬急性缺血再灌注损伤心肌代谢和超微结构的影响.方法:杂种犬18只(11～14kg),随机分3组:生理盐水对照组(NS组)用课?ml/(kg.h),高剂量普鲁泊福组(HP组)用量为11.2mg/(kg.h),低剂量普鲁泊福组(LP组)用量为5.6mg/(kg.h).开胸阻断左冠状动脉前降支(LAD)90min后再灌注200min;于注药前、注药60min、阻断LAD血流90min以及再灌注60,120和180min时,抽心大静脉血测乳酸脱氢酶(LDH)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力;于再灌注200min时取再灌注区心肌组织做电镜观察.结果:再灌注后各时间点NS组LDH含量明显高于HP组和LP组(P<0.05),SOD活力明显低于HP组和LP组(P<0.05).NS组心肌超微结构再灌注损伤明显重于HP组和LP组.结论:普鲁泊福具有一定抗氧化能力和保护线粒体作用,可减轻犬急性心肌缺血再灌注损伤.

聚甲基丙烯酸羟乙酯-Ⅲ型胶原烧伤贴膜的研制(Ⅰ)

目的:研究胶原蛋白的性质及聚甲基丙烯酸羟乙酯[poly(HEMA)]-Ⅲ型胶原烧伤贴膜的制备方法.方法:从小牛皮中提取Ⅲ型胶原蛋白,与poly(HEMA)、乙二醇混合,用过硫酸铵和偏亚硫酸钠引发交联反应,制成烧伤用贴膜;在膜中加入药物吲哚美辛,并做体外溶出实验.结果:poly(HEMA)-Ⅲ型胶原贴膜具有良好的弹性、柔软性、吸湿性和粘附性;吲哚美辛的体外累积释放百分量-时间曲线表明,其多孔的海绵状结构是良好的药物释放系统.结论:poly(HEMA)-Ⅲ型胶原的复合物是制备烧伤用创面敷料的良好材料.

组蛋白脱乙酰化酶HDAC1 cDNA的克隆及其酵母表达质粒的构建

目的:获得HDAC1的cDNA及构建酵母双杂合系统中的靶基因.方法:利用RT-PCR方法,从人Jurkat细胞中扩增出一约1.45kb的DNA片段,作全自动测序,重组入pLexA载体,构建成pLexA-HDAC1,并用醋酸锂法转化酵母菌EGY48,在选择性培养基上观察pLexA-HDAC1在EGY48中的表达情况.结果:获得的1.45kb的DNA编码的氨基酸序列与文献报道的HDAC1一致,转化的酵母菌在选择性培养基SD/Gal/Raf/-Ura/-His/上培养3d后,长出约1mm大小的白色菌落.结论:获得了HDAC1的cDNA,pLexA-HDAC1对EGY48没有毒性作用,也没有自身激活LacZ功能,可作为酵母双杂合系统中的靶基因.

氧化苦参碱及甘草甜素对小鼠肝细胞凋亡的影响

目的:探讨氧化苦参碱(OM)及甘草甜素(GL)对撤除苯巴比妥钠(PB)诱导的小鼠肝细胞凋亡的影响.方法:选用昆明种小鼠,测定肝/体质量比、肝组织DNA含量,观察组织学改变及原位凋亡细胞TUNEL标记等指标,观察腹腔内注射OM 150mg/kg及GL 50mg/kg,3次/d,于36h后,对撤除PB后引起的小鼠肝细胞凋亡的影响.结果:阳性对照组肝/体质量比及肝DNA含量分别回落16.3%及32.4%;GL组分别回落16.1%及28.9%;OM组无明显回落.组织学检查及凋亡细胞TUNEL标记显示:阳性对照组及GL组小鼠肝细胞出现典型凋亡改变,TUNEL标记阳性;阴性对照组及OM组小鼠肝细胞未见明显凋亡改变.结论:OM可阻断撤除PB诱导的小鼠肝细胞凋亡,GL对其无影响.

大鼠肺再灌注损伤早期外周血中性粒细胞膜CD18的变化

目的:观察大鼠肺再灌注损伤早期外周血中性粒细胞(PMNS)膜CD18的变化.方法:SD大鼠20只,随机分为正常对照组、缺血组、再灌注30min组及再灌注60min组,测定各组左肺湿/干质量(mW/mD)比及肺动脉压,取颈动脉血观察PMNS CD18水平的变化,计数PMNS.结果:再灌注30min组与60 min组左肺mW/mD比及肺动脉压均较对照组明显增高(P<0.01);再灌注30min组PMNS膜CD18水平较对照组明显升高(P<0.01);再灌注60min组较再灌注30min组又进一步增高(P<0.01);再灌注60min组外周血PMNS计数较对照组减少(P<0.05).结论:大鼠肺再灌注损伤早期外周血PMNS膜CD18水平增高,PMNS计数减少.

水飞蓟宾对高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的影响

目的:探讨水飞蓟宾对高脂饮食大鼠胰岛素敏感性的影响.方法:利用高脂饮食(HF)胰岛素耐受(IR)大鼠模型,观察水飞蓟宾对IR的治疗作用,与胰岛素增敏剂CS-045进行对照研究.用等热量HF饲养正常大鼠4周,分别以水飞蓟宾和CS-045灌胃治疗3周,测定动物体质量、血压、血糖、胰岛素、血脂、组织糖原、三酰甘油(TG)及胰岛素敏感性(K值).结果:HF饲养4周时,大鼠胰岛素、血脂明显升高,肝脏和肌肉TG含量升高,糖原含量下降,胰岛素敏感性下降(K值为5.63±0.72),与正常对照组(7.77±0.35)比较,差异有显著性意义(P<0.01),7周时K值进一步下降.水飞蓟宾和CS-045治疗3周后,胰岛素敏感性改善,K值为5.09±0.39 vs 6.22±0.56(P<0.01),组织糖原含量明显增加(P<0.01).结论:水飞蓟宾能改善HF大鼠的胰岛素敏感性,其机制可能与水飞蓟宾促进糖原合成有关.

钡糊法与钡液法排粪造影效果比较

目的:评价钡糊法排粪造影(DTB)与钡液法排粪造影(DBS)对功能性出口梗阻的诊断价值.方法:25例便秘者均于检查当日进行钡液法与钡糊法排粪造影自身对比.结果:直肠平均内径钡糊法比钡液法大1.16cm;直肠平均容积钡糊法为钡液法的2.2倍;发现异常的24例钡糊法均显示钡剂梗阻或嵌塞,钡液法仅2例有少量滞留;排粪(空)时间钡糊法平均每例9s,钡液法为2.5s;显示出口梗阻原因的能力钡糊法较优者14例,钡液法较优者6例.结论:对功能性出口梗阻的排粪造影检查以钡糊法为好,先灌入少量高浓度钡液能提高造影质量.

慢性肾功能衰竭继发性甲旁亢对T淋巴细胞亚群的影响

慢性肾功能衰竭 (CRF)患者的免疫功能降低,致使感染及肿瘤的发病率升高.这种免疫功能降低的原因至今未明.为探讨CRF患者继发性甲状旁腺功能亢进(甲旁亢)与免疫功能降低的关系,我们对CRF患者甲状旁腺素(PTH)与T淋巴细胞亚群水平进行了相关性分析,并观察1,25-(OH)2D3对两者的干预作用.

康尔血对慢性乙型肝炎患者机体细胞免疫功能的影响

急性乙型病毒性肝炎转变为慢性乙型病毒性肝炎的机制复杂,但机体抗病毒免疫力低下而导致乙型肝炎病毒持续在体内复制是其重要原因之一[1,2].康尔血是由从冬虫夏草及菌丝、刺五加、丹参等药物中提取的有效成分制成的生化制剂.本文报道了康尔血对慢性乙型病毒性肝炎患者机体细胞免疫功能的影响.

脉搏图监测妊娠期心血管功能的适应性改变

正常妊娠时,母体为了维持妊娠和胎儿生长的需要,产生了一系列的血液循环适应性变化,这些改变明显地表现在血流动力学方面,如脉搏、心率、血压等.我科选用CF-Ⅱ型心血管功能检诊仪,通过对31例不同孕周孕妇监测血流动力学变化,以期为围生保健提供定量依据.

几种中成药中有机氯类农药的残留分析

有机氯类农药六六六(六氯环己烷,BHC)和滴滴涕(二氯二苯三氯乙烷,DDT)是以往使用较多和使用时间较长的农药,它造成的全球性环境污染及对人类健康的危害已引起世界各国有关部门的高度重视.虽然我国早已禁止生产和使用此类农药,但由于BHC的主要异构体α-BHC,β-BHC,γ-BHC,δ-BHC以及DDT的异构体P,P'-DDT;P,P'-DDD;P,P'-DDE;O,P'-DDT都较稳定,不易分解,且耐热、耐酸,故在自然界可长期积蓄和残留,所以农药残留问题越来越引起人们的重视.对传统中药,尚无农药残留量的标准,这方面的报道也较少.为此,本研究参照现行的有机氯农药残留量的检测方法[1],选取了几种较常用的治疗感冒的中成药,进行了有机氯农药残留分析,现报告如下.

疣状癌一例报告

1 临床资料患者,男,27岁,已婚,因冠状沟疣赘生物4个月,加重1个月就诊.患者4个月前发现在冠状沟背侧有两个米粒大小赘生物,表面粗糙呈菜花状,无明显自觉症状,未予重视,2个月后赘生物逐渐增大至黄豆大小,并在其周围出现多个小丘疹,来我院就诊.否认有冶游史.实验室检查:尿道分泌物沙眼衣原体、解脲支原体检测阴性,分泌物涂片见少量白细胞及杂菌,未见双球菌,淋球菌培养阴性.

以截瘫为首发症状的急性髓细胞性白血病二例报告

1 临床资料例1,男,36岁.因双下肢疼痛、麻木、无力、活动障碍伴二便失禁2周,疑诊"腰椎骨质增生",于1998年4月5日收入骨科.MRI示:T2～L5椎体骨质信号异常,T1W呈不规则、不均匀低信号,T2W呈不均匀稍高信号,于椎旁、椎管内、椎间孔内形成不规则肿物,压迫、包裹神经根,致硬膜囊明显狭窄变形.

神经激肽A与哮喘的关系

近年研究发现,人类肺内自主神经系统除了受肾上腺素能神经和胆碱能神经的控制外,还受非肾上腺素非胆碱能(NANC)神经系统及其神经肽的调节.NANC神经系统又分为抑制性神经系统(NANCi)及兴奋性神经系统(NANCe).神经激肽A(NKA)是NANCe的递质,研究证明NKA具有强烈而迅速收缩气道平滑肌的作用.本研究采用特异性放射免疫分析法,监测了支气管哮喘(哮喘)患者发作期、稳定期及(慢支)患者血中的NKA水平的变化,并探讨这些神经肽与哮喘发病的关系.

慢性肾功能不全患者心功能检测

慢性肾功能不全患者并发的心肌损害经常是导致患者死亡的主要原因之一.我们测定了50例慢性肾功能不全患者心功能,以探讨尿毒症心肌病病理基础.

肾活体组织丙型肝炎抗原荧光染色

近年来的研究发现,丙型肝炎病毒(HCV)感染除引起肝脏损害外,还可引起肾小球病变,长期的慢性HCV血症可伴有肾脏进行性损害[1].因此,HCV感染与肾小球疾病的关系已引起人们重视.我们通过对11例慢性肾小球疾病患者的肾活检标本进行HCV抗原荧光染色,发现1例阳性,现报告如下.

用差热分析法研究板蓝根不同栽培居群间的变异

板蓝根(Radix Isatidis)是十字花科植物菘蓝Isatis indigotica Fort的根,在我国广为栽培.对于板蓝根不同栽培居群间形态上的变异已在我们对其性状与显微特征的考察中得到了证实,而影响药材品质的根本因素是化学上的.为了进一步证实这种变异也能反映在理化特征上,我们运用差热分析法(differential thermal analysis,DTA)对采自不同栽培居群的12份板蓝根药材进行考察,现将结果报告如下.

第二军医大学出版社简介

镉中毒诱发的自由基对红细胞损伤及带3蛋白表达的影响

兔内毒素休克模型中秋水仙碱对血清肿瘤坏死因子活性的影响

软骨源抑制因子抑制角膜新生血管的实验研究

靶基因xylE质粒载体转基因小鼠的建立

肝脏肿瘤切除术中肝后下腔静脉损伤的处理

表达疟原虫裂殖子表面蛋白1减毒鼠伤寒杆菌的稳定性