烧伤创面渗液预处理的单核-巨噬细胞对成纤维细胞增殖的影响

目的:观察深Ⅱ度烧伤创面巨噬细胞对成纤维细胞增殖的作用.方法:用创面渗液刺激自血液分离的单核-巨噬细胞,取其培养上清液刺激成纤维细胞,MTT法检测成纤维细胞的增殖率.用等比例稀释的渗液作对照,以排除渗液本身所含物质调节成纤维细胞增殖的作用.结果:用创面渗液处理单核-巨噬细胞后,其培养液均能促进成纤维细胞增殖,但晚期创面渗液的作用强度较低.结论:烧伤创面渗液中含有激活单核-巨噬细胞的物质,使血单核-巨噬细胞活化,产生调节成纤维细胞增殖的生长因子;用烧伤创面渗液激活的单核-巨噬细胞可作为创面巨噬细胞的替代品.

外源性透明质酸应用于伤口愈合中的组织学观察

目的:探讨外源性透明质酸(Hyaluronic acid,HA)在伤口愈合中可能的作用机制以及对瘢痕形成的影响.方法:大鼠45只,随机分成A、B、C(2%、1%HA、PBS)3组,观察愈合过程中创面平均愈合时间和残留面积的大小、大体形态和组织学的改变.结果:(1)A、B、C 3组的平均愈合时间为15.2,H.2和13.4 d.A、B两组残留面积与C组比较有显著性差异,3组间比较也有显著性差异(P＜0.01).(2)组织学上,A、B两组成纤维细胞增生明显,胶原纤维较为纤细、排列整齐,直径较纤细.C组则显示出明显的炎性细胞浸润,新生血管数目增多.(3)HA的生物学作用与其浓度有关.结论:在伤口愈合过程中,外源性HA可通过细胞的调控作用有效地发挥其生物学作用,减少瘢痕形成.

大鼠烧伤后肺中性粒细胞浸润及肺损伤

目的:研究大鼠烧伤后肺中性粒细胞(PMN)浸润及肺损伤的时间过程.方法:大鼠背部皮肤浸入沸水10 s,致15%TBSAⅢ度烧伤.伤后不同时间点杀死大鼠,测定肺净含水量、肺微血管通透性的变化、肺间质及肺泡PMN的浸润.结果:烧伤后4～8 h,肺PMN浸润及肺损伤明显;烧伤后12～16 h,肺巨噬细胞数量增加,肺损伤及肺PMN浸润逐渐减轻;烧伤后20～24 h,肺炎症反应基本消退.结论:大鼠皮肤烧伤可以导致远隔部位肺PMN浸润和损伤.PMN在炎症反应介导的肺组织损伤中具有重要作用.

用DDRT-PCR分析烧伤创面愈合相关基因的表达

目的:比较烫伤后第5天创面组织与正常皮肤组织间基因表达的差异.方法:用差异显示逆转录PCR技术(DDRT-PCR)分析基因表达差异,将所有差异表达基因割胶回收并再扩增,用点杂交和Northern杂交进一步证实基因表达差异,克隆并测序部分差异表达片段,然后将DNA序列与Genbank作同源性比较.结果:在显示出的约12 000条DNA条带中获取差异表达基因片段289个.用点杂交对其中126个片段进一步分析,用Northern杂交证实了3个创面愈合中高表达基因片段,经序列测定和同源性分析证实,其中一个为纤溶酶原激活因子抑制因子2A,其余2个为新基因片段.结论:纤溶酶原激活因子抑制因子2A在创面愈合过程中有重要作用.

Objective: To establish two stably KGF-transfected, immortalized cell lines. Methods: HaCaT-keratinocytes and KMST-6-fibroblasts were transfected by liposome mediated gene transfer. Transfection effectivity, gene integration and configuration of the transgenic protein were investigated by ELISA, DANN-PCR and β-Gal-staining. Results: Most effective GF producing clones were tested by a colorimetric XTT-test. Conclusion: This is a significant acceleration of cell proliferation and mitosis of human keratinocytes in an Air Liquid Interface (ALI) test system.

烧伤血清对大鼠腹腔巨噬细胞内游离钙浓度及其产生NO的影响

目的:观察烧伤血清对分离的大鼠腹腔巨噬细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)和产生NO的影响.方法:收集腹腔巨噬细胞,用Fura-2/AM作为细胞内游离钙离子指示剂测定[Ca2+]i,用烧伤血清刺激体外的腹腔巨噬细胞即刻进行[Ca2+]i的测定;用同浓度的烧伤血清刺激培养的腹腔巨噬细胞,测定上清NO稳定的代谢产物[NO2+NO3-]的浓度.结果:烧伤血清能显著地促进巨噬细胞[Ca2+]i的增高,以烧伤后6 h血清的作用为明显,可达正常对照组的9倍,维拉帕米可部分抑制其作用.烧伤血清对腹腔巨噬细胞NO的产生有明显的抑制作用,也以6 h烧伤血清为明显.结论:烧伤血清能显著地升高腹腔巨噬细胞[Ca2+]i,而NO的产生被明显地抑制.细胞内钙超载和NO产生减少可能是烧伤后早期巨噬细胞免疫功能损伤主要因素之一.

内皮素对心脏功能和细胞能量代谢影响的实验研究

目的:观察内皮素1(ET-1)对心脏功能、心肌血流、细胞能量代谢和对底物摄取的影响,以探讨烧伤后循环血液中ET水平增高的病理作用.方法:采用多核磁共振波谱等技术,观察离体灌流的工作大鼠心脏冠脉流量、心输出量、左心室内压、心率、心肌细胞能量代谢和对底物的利用等指标对ET-1的剂量依赖性反应.结果:ET-1使冠脉流量进行性下降,心输出量和心肌收缩力呈双相变化,心肌细胞内磷酸化势能降低,对外源性乳酸利用障碍.结论:病理水平的ET-1对离体灌流的工作大鼠心脏具有直接正性肌力作用和间接的负性肌力作用,并影响细胞的能量代谢过程;对循环血液中ET-1水平较高的患者应用醋酸钠比乳酸钠可能更易于心肌细胞的摄取和利用.

烫伤血清对大鼠库普弗细胞胞浆游离钙浓度的影响

目的:观察烫伤血清对大鼠分离培养的库普弗细胞(KC)胞浆内游离钙([Ca2+]i)浓度的影响.方法:胶原酶灌注消化、梯度离心分离KC,在KC悬液中加入烫伤血清,Fura-2/AM荧光染色法测定[Ca2+]i.结果:分离培养的KC静息状态下[Ca2+],为(109.29±4.17)nmol/L,烫伤血清可以使[Ca2+]i显著升高,以烫伤后6 h的血清作用明显;[Ca2+]i的浓度随血清浓度的升高而升高;烫伤血清作用1 min KC[Ca 2+]i已明显升高,2 min达高峰,20 min时仍明显高于假烫组.结论:烫伤血清能明显升高KC[Ca2+]i,作用快速而持久,且呈浓度依赖性.

经大面积深度烧伤患者的治疗经验

目的:总结大面积深度烧伤患者的救治经验.方法:回顾分析38年中4个不同时期收治的73例烧伤总面积超过90%、Ⅲ度烧伤面积超过70%患者的临床特点、治愈率和主要死亡原因.结果:所有患者中治愈21例(28.8%),死亡52例(71.2%).不同时期治愈率依次显著升高.主要死亡原因由休克(48.0%)、脓毒症(32.0%)转变为脓毒症(40.7%)、多器官功能障碍综合征(29.6%).结论:综合复苏方案、大面积Ⅲ度烧伤创面覆盖及全身支持治疗的改进是提高治愈率的关键因素.

α1酸性糖蛋白对中性多形核粒细胞吞噬和杀菌功能的影响

目的:探讨急性期反应质α1酸性糖蛋白(AGP)对中性多形核粒细胞(PMNs)吞噬和杀菌功能的影响.方法:大鼠静脉注射AGP,以大鼠游移型和非游移型PMNs在吞噬过程中的化学发光为检测指标,并将经AGP调理后的PMNs与酵母聚糖混和进行体外实验检测.结果:AGP组PMNs的化学发光值大大强于对照组,AGP对PMNs氧化发光的增强作用随剂量的增加而增加,但用AGP调理的酵母聚糖组,其PMNs化学发光值明显低于用正常大鼠血清调理的酵母聚糖组.结论:应用AGP可以明显增加游移型和非游移型PMN的吞噬和杀菌活性,其机制是直接作用于PMNs而非对被吞噬物的调理.

TGF-β1、TNF和维拉帕米对烧伤小鼠CD14表达的影响

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)、肿瘤坏死因子(TNF)和维拉帕米对严重烧伤小鼠早期腹腔巨噬细胞(Mψ)CD14表达的影响.方法:BALB/c小鼠被随机地分成烧伤组和假烫组,将收集到的腹腔巨噬细胞分别加入不同浓度TGF-β1(0.02,0.20,2.00μg/ml)、TNF(0.1,1.0,10.0 μg/ml)和维拉帕米(10,100,1 000 pm01/ml)培养.用细胞原位杂交方法,观察TGF-β1、TNF和维拉帕米对小鼠MψCD14 mRNA表达的影响.结果:(1)烧伤后腹腔MψCD14 mRNA的表达明显增加.(2)0.02,0.20 μg/ml TGF-β1可使烧伤小鼠MψCD14 mRNA表达增加,2 μg/ml则可使烧伤小鼠MψCD14 mRNA表达减少.TNF、维拉帕米各浓度对烧伤小鼠MψCD14 mRNA表达均无明显影响.结论:TGF-β1能通过改变MψCD14 mRNA的表达,调节其功能状态.TNF、维拉帕米对烧伤小鼠MψCD14 mRNA表达无明显影响.

Objective: To make attempts to use cell constructs from subconfluent keratinocyte cultures, which contain a much glue (TissucollR) and directly applied onto full thickness wounds in athymic mice or combined with allogenic split thickness overgrafts and compared with cultured sheet grafts. This keratinocyte fibrin glue suspension (KFGS) has also been used in burns up to 88% burned TBSA as well as in chronic wounds. Keratinocytes were also seeded onto various biomaterials (BiobraneR, HYAFF LaserskinR, IntegraTM, TissuFascieR) as carriers. Results: Human suspended keratinocytes were effective to reorganize to skin in vivo both in nude mice and in patients and superior if compared to sheet grafts. 3～ 5 d after seeding onto various biomaterials, cell reached subconfluence and were ready for grafting. These cell-membrane constructs were always tured on microspheres in spinner cultures could increase the cell yield, and the subconfluently covered microspheres were directly grafted onto" the wound. Conclusion: These experiments demonstrated that keratinocytes can grow on a variety of carrier materials in vitro and these cell constructs were able to spontaneously reform a multilayer neoepithelium in vivo. The current screening looks for the ideal carrier for keratinocytes that also would serve as a temporary wound cover and induce dermis formation by tissue conduction which further may be enhanced by gene therapy.

烧伤血清促进大鼠库普弗细胞分泌肿瘤坏死因子α

目的:探讨烫伤血清对库普弗细胞(KC)分泌肿瘤坏死因子α(TNF-α)作用及机制.方法:胶原酶肝脏灌注消化、梯度离心分离培养KC,用烫伤血清刺激并加入甘氨酸和尼莫地平,用双抗体夹心酶联免疫法测定培养上清中TNF-α的含量.结果:加入20%烫伤血清后的KC培养上清内TNF-α含量明显增加,高峰在2 h;加入甘氨酸(1 mmol/L)和尼莫地平(1μmol/L)后,培养上清内TNF-α含量明显下降,在2 h仅为烫伤血清组的35.1%和27.6%.结论:烫伤血清可以刺激体外培养的KC分泌TNF-α,其作用是经细胞内钙依赖的途径实现的,抑制细胞内钙升高可以抑制KC的TNF-α释放.

外源性透明质酸应用于伤口愈合中的生化分析

目的:探讨外源性透明质酸(HA)抑制瘢痕形成的作用及其可能机制.方法:健康SD大鼠45只,复制背部创伤模型,随机分成2%HA治疗组(A组)、1%HA治疗组(B组)、PBS对照组(C组),观察创面大体形态,平均愈合时间和残留面积的大小;并测定愈合部位组织蛋白、羟脯氨酸(Hyp)、Ⅲ型前胶原(PC Ⅲ)的含量.结果:(1)3组的平均愈合时间为(15.2士2.0),(14.2士1.6)和(13.4±1.4)d,A、B两组与C组比较有显著性差异(P＜0.05).A、B两组的残留面积与C组比较有显著性差异,3组间比较也有显著性差异(P＜0.05).(2)Hyp和PC Ⅲ含量的测定:A、B两组Hyp含量的均值低于C组(P＜0.01),而PC Ⅲ的含量却高于C组(P＜0.01).结论:(1)HA通过对细胞的调控作用,可有效地抑制胶原的合成,提高Ⅲ型胶原含量,使创伤愈合过程中瘢痕形成减少.(2)HA在创面愈合中抑制瘢痕形成的生物学作用与其浓度成正比关系.

objective: To find a new way to cover full-thickness wounds. Methods: Biobrane(r), an adherent, flexible temporary wound dressing was incubated with cultured human keratinocytes. The cells adhered quickly forming "membrane-celgrafts" (MCG). Some of the grafts were frozen and after thawing viability was verified with a XTT colorimetric assay.MCGs, fresh and cryopreserved, were transplanted on full thickness wounds created on athymic nude mice. Conventional cultured epidermal grafts (CEG) and wounds without cell grafts served as control. Results: MCGs resulted in a differentiated epithelium of human phenotype and immunohistochemistry, immunofluorescence and electronmicroscopy were performed.Compared with CEG-grafted sites a reduced wound contraction was noticed and complete remodelling of the basement membrane zone was found. Conclusion: The efficiency of the easy, uncomplicated production, cryopreservation and use as well as the short culture period could lead to a new approach in the treatment of burn and chronic wounds.

烧伤后PMN粘附对肺微血管内皮细胞单层通透性的影响

目的:观察烧伤后中性粒细胞(PMN)对肺微血管内皮细胞单层通透性的影响,分析PMN粘附及其粘附分子CD11b/CD18在该影响中的介导作用.方法:建立培养肺微血管内皮细胞(PMEC)单层通透性测定的方法,根据处理内皮细胞单层的不同成分,将实验分为7组,用含FITC-清蛋白的灌流液灌流后,测定液体滤过系数(Kf)和渗透压反射系数(δ).结果:烧伤后PMN能使反映小分子物质通透性的Kf值明显增加,使δ显著下降.用单抗封闭PMN膜上CD11b/CD18能使δ值的变化得到纠正;用孔径0.2μm的滤膜阻断PMN与内皮细胞单层的粘附则使Kf值和δ值均接近正常水平.结论:白细胞与内皮细胞的粘附是介质类物质发生作用的前提条件,这些物质主要影响肺血管对小分子物质的通透性.粘附分子CD11b/CD18本身可能具有生物学信号调控的作用,并介导着对肺血管内皮细胞大分子物质通透性的影响.

应用自旋标记-顺磁共振技术观察烧伤早期心肌细胞膜蛋白变化

目的:研究严重烧伤大鼠早期心肌细胞膜蛋白结构和运动的变化.方法:用3-甲基马来酰亚胺氮氧自由基(3MP)标记膜蛋白巯基,利用自旋标记-顺磁共振技术,观察膜蛋白旋转相关时间(τc)及强固定化与弱固定化组分谱线高度比值(hs/hw)的变化.结果:伤后2和6 h膜蛋白hs/hw显著增大,伤后1～12 h膜蛋白旋转相关时间τc显著增大.结论:严重烧伤后早期即出现心肌细胞膜蛋白结构和功能的变化,表现为膜蛋白构象改变,膜蛋白运动受限.这些变化可以直接影响细胞膜蛋白的功能,从而导致心肌细胞功能的变化.

烧伤患者血浆IL-8、VCAM-1的变化与呼吸功能障碍的关系

目的:探讨烧伤后血浆白细胞介素8(IL-8)、血管细胞粘附分子1(VCAM-1)变化与烧伤严重程度及呼吸功能障碍的关系.方法:对18例TBSA为35%～97%的烧伤患者,分别于伤后12 h,1,2,4,7 d取血,分离血浆,采用ELISA法测定1L8和VACM-1的水平.结果:TBSA＜50%组伤后血浆IL-8水平持续升高,于伤后第4天达峰值.TBSA＞50%组各时相点水平明显高于TBSA＜50%组,两组相比差异显著(P＜0.05).出现肺功能障碍组IL-8水平明显高于无肺功能障碍组.TBSA＞50%组和肺功能障碍组VCAM-1水平明显高于正常对照组、TBSA＜50%组及无肺功能障碍组(P＜0.05).结论:热损伤后IL-8与VCAM-1能影响全身免疫反应,并与肺功能障碍的发生、发展有关.烧伤面积大小、呼吸功能障碍的发生与上述两成分的水平呈正相关.

烧伤患者血浆IL-10水平的变化

目的:探讨严重烧伤患者血浆白细胞介素(IL-10)水平变化及其和烧伤后全身感染的关系.方法:收集19例严重烧伤患者血浆,利用ELISA法测定血浆中IL-10水平.结果:烧伤后患者血浆IL-10水平急剧升高,且升高幅度与烧伤程度有关.非脓毒症患者血浆IL-10水平在伤后7 d降至正常,而脓毒症组患者急剧升高.3例死于脓毒症患者血浆IL-10持续在高水平状态.结论:烧伤能诱导机体产生IL-10;过高的IL-10可能与烧伤后感染有关.

转染hEGF基因的表皮细胞G418长期筛选后的表达

目的:探讨外源性基因在转染表皮细胞后稳定表达情况.方法:选用构建的pBK-Signal-EGF质粒,在脂质体LipofectAMINE的介导下,转染培养成60%～70%连片的人表皮细胞,然后用G418长时间筛选出稳定表达的细胞克隆.大量培养传代后,通过ELISA试剂盒检测培养上清中表皮细胞生长因子(EGF)外源性基因稳定表达水平.结果:(1)构建的人表皮细胞生长因子(hEGF)质粒可成功转染到人表皮细胞中;(2)转基因表达在传4代后仍可存在;(3)hEGF表达水平6周内可在培养基中测出.结论:外源性hEGF基因可以在表皮细胞中稳定表达.

Objective: To describe the expression and immunogenic efficacy of differently produced recombinant vaccines candidates against Pseudomonas aeruginosa infections. Methods: The hybrid protein OprF (aa 190-342)-Opr I (aa 21-83) was modified N-terminally, either with a minimal histidine tag or with a homologous sequence of OprF. Both recombinant proteins were purified by nickel chelate affinity chromatography under native and denaturing conditions. Results :This produced three suitable candidates for a vaccination trial: protein His-F- I , which was purified in its native as well as in its refolded form,and the native purified N-terminally extended protein ex-F- I . In mice, significantly higher antibody titers and survival rates after challenge with P. aeruginosa were observed, following immunization with protein His-F- I purified under native conditions. Conclusion: A hybrid OprF-Opr I molecule was cloned and a purification method which yields a protective vaccine against P. aeruginosa infections was established.

烧伤创面渗液IL-12的变化

目的:观察烧伤创面渗液中白细胞介素12(IL-12)与创面愈合的关系.方法:在换药时采用海绵吸取创面渗液,用免疫酶联方法定量检测其中IL-12的含量.结果:在伤后初期的创面渗液中,IL-12含量为(95.33士39.77)Pg/ml,与正常血清的IL-12含量(81.33士55.02)Pg/ml比较接近.烧伤2～6 d组和7～11 d组IL-12含量明显升高,分别为(228.34±101.43)与(264.87士127.42)Pg/ml.12 d以后进一步增高,12～16,17～21,＞21 d组分别为(1 431.05±1 206.35),(1 640.58士1 178.78),(1 915.75士1 329.62)Pg/ml,一直维持在较高的水平.结论:在不同时期创面渗液中IL-12含量有所不同,中晚期创面渗液中的含量显著高于早期创面及正常血清中的含量,提示IL-12与烧伤创面细胞免疫能力及细菌污染程度有关.

硫苷脂、烫伤血清对大鼠中性粒细胞产生超氧阴离子的影响

目的:研究L选择素配体硫苷脂、烫伤血清对大鼠中性粒细胞产生超氧阴离子(O2)的影响.方法:用淋巴细胞分离液分离正常大鼠中性粒细胞,分别用硫苷脂、正常血清、烫伤后6 h血清、烫伤血清加硫苷脂刺激中性粒细胞,用细胞色素C法测定细胞培养液中O2浓度,用荧光探针Fura-2/AM测定胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i).结果:正常血清刺激后,大鼠中性粒细胞产生的O2未增加,硫苷脂、烫伤血清刺激后,O2产生明显增加,烫伤血清刺激后再用硫苷脂刺激,O2产生不再增加.硫苷脂和烫伤血清刺激也能使[Ca2+]i增加.结论:硫苷脂、烫伤血清通过调节钙通道来刺激中性粒细胞,使O2产生增加.

严重烧伤小鼠早期腹腔巨噬细胞CD14的动态变化

目的:探讨烧伤后早期腹腔巨噬细胞(Mψ)CD14分子的动态变化.方法:采用BALB/c小鼠20%TBSA Ⅲ度烧伤模型,分离和培养小鼠腹腔巨噬细胞,用免疫组织化学方法,观察了烧伤复苏组和延迟复苏组伤后12 h内不同时间CD14的变化.结果:烧伤复苏组和延迟复苏组在伤后1 h腹腔MψCD14表达就明显增加,复苏组、延迟复苏组阳性强度分别在伤后2,8 h达到峰值,这种改变在伤后12 h内呈持续状态.从伤后8 h起,延迟复苏组小鼠上述改变均较立即复苏组明显.结论:在伤后过度炎症反应的发生发展中起重要作用的Mψ的激活及其反应性的增高,可能与烧伤引起CD14的上调,从而使其增敏有关.

rhGH、IGF-1对烧伤小鼠CD14 mRNA转录的影响

目的:探讨rhGH、IGF-1对严重烧伤小鼠早期腹腔巨噬细胞(Mα)CD14 mRNA转录的影响.方法:在体实验:20只小鼠被随机地分成A、B组(烧伤前连续5 d分别给予rhGH和生理盐水)和C、D组(假烫前连续5 d分别给予rhGH和生理盐水).离体实验:10只小鼠被分成E、F组(烧伤和假烫组),Mψ加入rhGH(0,1.6,8,40 ng/ml)和IGF-1(0,0.2,1,5μg/m1)培养.用细胞原位杂交方法,观察了全身应用rhGH及体外培养加入rhGH、IGF-1对小鼠巨噬细胞CD14 mRNA转录的影响.结果:在体实验:(1)预先肌注rhGH,可使假烫组小鼠腹腔MψCD14mRNA的转录明显增加.(2)烧伤后腹腔MψCD14mR-NA的转录也明显增加,预先应用rhGH的小鼠烧伤后不会出现MψCD14 mRNA的过度转录.(3)体外培养实验:rhGH(40ng/ml)可使烧伤小鼠Mψ CD14 mRNA转录增加,其他浓度无显著改变,IGF-1各浓度均增加CD14 mRNA的转录.结论:rhGH、IGF-1可能通过增加MψCD14基因表达使Mψ易于被激活,从而有利于免疫功能的增强.rhGH的这一作用可能通过IGF-1来实现.烧伤后应用0.2 mg/(kg@d)剂量的rhGH不会引起Mψ的过度激活.

烧伤及延迟复苏对大鼠肝、肺、肾组织PLA2活性的影响

目的:观察烧伤及烧伤后延迟复苏对大鼠肝、肺、肾组织磷脂酶A2(PLA2)活性的影响.方法:SD大鼠给予30%TBSA Ⅲ度烫伤,按不复苏、早期复苏、延迟复苏分组处理,杀鼠取肝、肺、肾制成组织匀浆,测定PLA2活性.结果:烫伤后肝、肺、肾组织PLA2活性均显著升高,高峰在4～8 h;早期复苏组PLA2活性较不复苏组明显降低,但仍高于对照组;延迟复苏组PLA2活性在肝、肾组织明显高于不复苏组,在肺组织也有升高,但无显著差别.结论:大鼠烧伤后肝、肺、肾组织PLA2活性显著升高,及时有效的液体复苏治疗可以降低PLA2活性,延迟复苏则可以增强PLA2的活性,从而加重组织损伤.

急性期反应物提高皮肤成纤维细胞对绿脓杆菌内毒素的耐受性

目的:探讨急性期反应物α1酸性糖蛋白(AGP)和α1抗胰酶蛋白(AT)对人皮肤成纤维细胞(HDFs)的保护作用.方法:用培养的人皮肤成纤维细胞作为观察对象,分为不同浓度绿脓杆菌脂多糖(LPS)处理组,每个脂多糖处理组再分为不同浓度AGP或AT处理的亚组,用半自动细胞溶解测试法计算残存细胞,并计算绿脓杆菌LPS的30%细胞致死量(LDs0).结果:在存在LPS的环境中,HDFs存活数量减少,其存活数与LPS剂量呈负相关;AGP和AT均能提高HDFs的存活率.结论:绿脓杆菌LPS对HDFs有直接的毒性效应(抑制其增殖,甚至致死),急性期反应物AGP和AT能提高HDFs对绿脓杆菌LPS的耐受性.

严重烧伤患者救治中呼吸机的使用

目的:探讨呼吸机使用在救治严重烧伤患者中的重要性,分析烧伤临床使用呼吸机的时机和预警指标.方法:回顾性地调查了我科近4年来收治的所有烧伤患者中年龄16～65岁、烧伤总面积＞50%的69例病例,比较前、后2年呼吸机使用状况与救治效果的关系,并从不同呼吸道管理病例临床特点中推测使用呼吸机的预警指标.结果:近2年呼吸机使用率明显增高,开始使用呼吸机的时间明显提前,使用时间明显延长,病例存活率显著提高.使用呼吸机的病例中,死亡组患者Ⅲ度烧伤面积、吸入性损伤程度明显高于存活组,辅助呼吸前PaO2低值明显低于存活组,呼吸机成功救治了80%不伴有吸入性损伤的严重烧伤患者.气管切开并使用呼吸机病例的年龄高、总/Ⅲ度烧伤面积大、吸入性损伤比例高、程度重.使用呼吸机可发生皮下气肿、气道狭窄和血管破裂大出血等并发症.结论:呼吸机在严重烧伤患者救治中发挥着日益重要的作用,吸入性损伤和Ⅲ度烧伤面积是预测呼吸机使用的关键因素,早用早停可大程度发挥呼吸机救治作用,并减少并发症.

烧伤大鼠延迟性复苏对心肌组织Na+,K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性的影响

目的:研究烧伤休克延迟复苏对心肌组织Na+,K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性及含水量的影响.方法:雄性SD大鼠造成30%体表面积的Ⅲ度烧伤,分为烧伤不复苏(B)组、早期复苏(BE)组和延迟复苏(BD)组,伤后8 h取左心室肌组织,测定含水量,并匀浆后用比色法测定Na+,K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性.结果:B组心肌组织Na+,K+ATPase和Ca2+-ATPase活性均明显低于正常对照(C)组(P＜0.01);BD组2种酶活性均非常显著低于BE组(P＜0.01),并明显低于B组(P＜0.05);B组心肌组织含水量非常明显低于BE组和BD组,BD组比BE组有增高趋势,但无显著差异.结论:烧伤休克延迟复苏严重损害心肌组织Na+,K+-ATPase和Ca2+-ATPase活性,引起心肌的缺血再灌注损伤.

维拉帕米、牛磺酸抑制烧伤休克延迟复苏大鼠心肌组织的PLA2活性

目的:研究烧伤休克延迟复苏对心肌组织磷脂酶A2(PLA2)活性的影响以及维拉帕米、牛磺酸的抑制作用.方法:雄性SD大鼠造成30%体表面积的Ⅲ度烧伤,分为烧伤不复苏(B)组、早期复苏(BE)组、延迟复苏(BD)组、延迟复苏+维拉帕米(BDV)组和延迟复苏+牛磺酸(BDT)组,伤后8 h取左心室肌组织匀浆后用盐酸滴定法测定PLA2活性.结果:B组心肌组织PLA2活性非常明显高于正常对照(C)组(P＜0.01);BD组酶活性显著高于BE组和B组(P＜0.05);BDV、BDT组酶活性显著低于BD组(P＜0.05).结论:烧伤休克延迟复苏可进一步激活心肌组织PLA2活性,维拉帕米、牛磺酸抑制PLA2活性可能是拮抗心肌缺血再灌注损伤的机制之一.

烧伤血清对大鼠心肌细胞L型钙通道电流的激活作用

目的:观察烧伤血清(BS)对成年大鼠分离的心肌细胞膜钙通道电流的影响,探讨烧伤引起心肌细胞钙稳态变化的机制.方法:伤后2,6 h分离30%TBSA(Ⅲ度)烧伤的SD大鼠血清;逆行循环灌流、胶原酶消化分离心肌细胞;膜片钳技术全细胞记录模式测定细胞膜钙通道电流.结果:2 h BS使峰值L型钙电流(ICa-L)比对照组增加50%～80%;而6 h BS使峰值Ica-L增加1.5～2.5倍;峰值电压-电流曲线显示烧伤血清明显增加各个去极化钳制电压下的Ica,并使得大激活电压提前;细胞外液灌洗可去除烧伤血清对钙电流的作用.结论:烧伤血清能显著升高心肌细胞膜上钙通道电流,L型钙通道开放是烧伤后心肌细胞钙超载的机制之一.?

严重烧伤后血浆IL-12浓度的变化

目的:研究严重烧伤后血浆IL-12浓度的变化及其意义.方法:ELISA法检测18例严重烧伤患者伤后2周内的血浆IL-12浓度.结果:在40%≤TBSA≤60%组IL-12血浆浓度低值显著高于TBSA＞60%组;首次切痂后血浆IL-12血浆浓度要高于手术前.结论:烧伤程度越重,对IL-12产生的抑制作用越强.

烧伤后PMN粘附对肺微血管内皮细胞[Ca2+]i的影响

严重烧伤后早期肺组织微血管内中性粒细胞的粘附贴壁能使肺血管通透性增加[1],而这种改变则依赖于内皮细胞胞内钙离子浓度([Ca2+]i)的增加[2].本实验观察烧伤血清及烧伤后中性粒细胞(PMN)对肺微血管内皮细胞(PMEC)[Ca2+]i的影响,并探讨PMN粘附及其粘附分子CD11b/CD18在该影响中的介导作用.

严重烧伤对小鼠CD14 mRNA表达的影响

单核、巨噬细胞(Mψ)被激活产生肿瘤坏死因子(TNF)等重要炎性介质的基本途径是脂多糖(LPS)/脂多糖结合蛋白(LBP)复合物与单核细胞、Mψ表面的CD14结合,继而引发细胞内一系列反应[1].

烧伤科及胸外科葡萄球菌耐药性及质粒图谱的对比分析

葡萄球菌是引起医院内感染常见的病原菌之一,由于该类细菌分布广泛、传播快、对多种抗生素耐药,容易产生暴发流行,成为治疗工作中十分棘手的问题.为了调查葡萄球菌在不同医院科室之间的感染和流行情况,我们对烧伤科和胸外科部分细菌标本中分离的葡萄球菌进行了耐药性及质粒DNA图谱的分析.

严重烧伤大鼠血浆及部分神经核团精氨酸加压素含量的变化

精氨酸加压素(AVP)对中度(可逆性)烫伤休克大鼠的心功能有明显的抑制作用,给予AVP受体拮抗剂能改善休克状态,提高存活率[1].本实验应用放射免疫分析法观察烫伤休克大鼠血浆及部分神经核团AVP含量的变化规律.

人深Ⅱ度烧伤创面中巨噬细胞数量的变化特点

动物模型研究证实巨噬细胞对烧伤创面愈合具有重要的作用,由于临床深Ⅱ度烧伤创面愈合过程受多种因素的干扰,且又是临床治疗的难点,因此巨噬细胞在其中的作用如何,值得进一步观察.烧伤创面中巨噬细胞的数量变化自然关系到它所发挥的作用,本文旨在观察人深Ⅱ度烧伤创面中巨噬细胞数量的变化特点.

小儿烧伤664例流行病学分析

临床上小儿烧伤较为常见.随着社会的发展,小儿烧伤的特征有了新的变化.本研究对664例小儿烧伤的致伤原因、病情特征等作了统计调查,旨在了解小儿烧伤的流行病学特征,防止小儿烧伤的发生.

严重烧伤大鼠血浆及部分神经核团β内啡肽含量的变化

以往研究表明β内啡肽(β-EP)对中度(可逆性)烫伤休克大鼠的心血管功能有明显的抑制作用,阻断过量的β-EP能改善休克状态,提高存活率[1].本实验应用放射免疫分析法,观察烫伤大鼠血浆及部分神经核团的β-EP含量变化,以初步探讨β-EP在重度烫伤休克中的作用.

烧伤创面渗液sTNFR I,sTNFRⅡ的变化

烧伤创面愈合过程中,通过一定程度的炎症反应,能清除坏死组织,分泌生长因子,有利于创面愈合.炎症反应的过度与不足均会影响创面愈合的进展.TNF对炎症反应的启动、调节等作用不容忽视.TNF作用需通过其受体的介导,而可溶性TNF受体(sTNFR)能中和TNF,进而起到调节炎症反应的作用.本实验通过检测人烧伤创面渗液不同时期中的sTNFR I,sTNFR Ⅱ,以期观察它们与创面愈合的关系.

烧伤患者切削痂术前应用立止血的临床疗效观察

深度烧伤创面的切削痂手术是烧伤患者治疗的重要手段之一.术中及术后创面的出血与渗血是这类手术的常见并发症.目前术中所采用的常规止血手段还有一定的局限性.立止血(Reptilase)是蛇毒中提取的酶类止血药,具有类凝血酶及类凝血激酶的作用,全身或局部给药能够有效地治疗上消化道出血.而对于烧伤切削痂创面的止血效果上无确切的报道.本研究对比研究了38例患者70次手术的情况,探讨立止血对烧伤切削痂手术创面的止血效果.

23例烧伤患者应用rhGH后糖代谢的变化

近年研究表明,rhGH能有效地阻止由创伤、烧伤等应激引起的高分解代谢,促进蛋白合成,加速创面愈合,提高机体免疫力,缩短住院时间.随着rhGH在烧伤等领域的应用,人们已对rhGH应用后蛋白代谢的变化进行了较全面深入的研究,但应用rhGH后机体糖代谢的研究甚少.本文分析烧伤患者应用rhGH后血糖、尿糖等的改变,探讨rhGH引起高血糖的可能原因及其处理原则.

烧伤手术室的建设和展开

烧伤手术室因专业的特点,在建设上有其特点和要求,本文总结了我科烧伤手术室的建设情况及几点体会.1一般资料我科烧伤手术室于1991年12月正式组建,有1名麻醉师、3名手术室护师及1名卫生员.手术房间4间,可同时展开4台手术,配有消毒物品间、物品准备间、男女更衣室、清洗间及办公区等.

SDD及多粘菌素B对烧伤小鼠细胞CD14 mRNA转录的影响

脓毒症、多器官功能障碍综合征(MODS)已成为烧伤患者主要的死因,其发生发展中起重要作用的是巨噬细胞(Mψ)等免疫活性细胞被LPS为主的激活物激活[1].从肠道革兰阴性杆菌环节以及随后的血中内毒素环节分别应用选择性肠道去污染(SDD)和多粘菌素,观察烧伤小鼠其腹腔MψCD14的表达有何变化,尚未见报道.本实验通过原位杂交分析的方法观察CD14 mRNA表达的变化,探讨用药后Mψ的功能状态,为临床治疗提供理论依据.

严重烧伤后血浆sTNFR浓度的变化

肿瘤坏死因子(TNF)在全身炎症反应综合征(SIRS)的发生发展过程起重要作用[1],它是通过与靶细胞膜受体(TNFR)结合来发挥生物学功能的,而TNFRs胞外部分裂解后成为可溶性肿瘤坏死因子受体(sTNFR),分为sTNFR I和sTNFR I.sTNFR能与TNFR竞争结合TNF,影响TNF发挥功能.

成功救治100%TBSA烧伤伴多器官功能障碍一例报告

1临床资料患者,男,31岁.因跌入约90℃热水池中烧伤,伤后6 h送至我院.诊断:(1)烧伤(热水)100%TBSA,深Ⅱ度19%,Ⅲ度81%;(2)烧伤休克.入院后立即给与抗休克治疗,行气管切开,呼吸机支持.

应用皮肤外扩张器治疗颈部瘢痕一例护理报告

1临床资料患者,男,21岁.颈部乙醇火焰烧伤治愈后9个月入院.患者烧伤创面愈合后逐渐出现颈前部瘢痕增生,至入院时已达15.0 cm×3.0 cm×0.5 cm,颈部活动受阻.入院后行颈前区正常皮肤外扩张牵引,牵引重锤0.5kg,2次/d,30 min/次,并在患者耐受的情况下,重锤渐增至4 kg,1 h/次.25 d后行瘢痕切除和正常皮肤缝合术,术后7 d拆线,伤口愈合良好,治愈出院.

老年烧伤患者神经反射性猝死二例报告

1临床资料例1,男,82岁.因双下肢电热器烧伤3%TBSA,l度1.5%,Ⅲ度1.5%,伴混合性痴呆、多发性脑梗死于1996年2月17日入院.心电图检查:窦性心律不齐,肢导低电压,偶发房早.伤后第6天,在全麻下行左小腿创面切痂植皮术.

静脉留置针在大面积烧伤患者手术中的应用

手术治疗是救治烧伤患者的重要手段之一,手术过程中快速输血输液和麻醉用药是保证手术正常进行的必要措施.大面积烧伤患者因皮肤的大面积受损,可供输液的静脉数量少、条件差,因而建立有效可靠的静脉通道是手术能否顺利进行的关键.本研究采用静脉留置针穿刺置管,对其在435例大面积烧伤手术输液中的效果和作用进行了观察.

烧伤患者疼痛的护理

烧伤创面由于表皮组织结构受损,致使痛觉神经末梢在外界环境和烧伤创面产生物质的刺激下持续疼痛.疼痛是影响烧伤患者治疗情绪以及树立今后生活信心的重要因素.合理、有效的护理,能够明显地减轻疼痛的负面影响,帮助患者以积极向上精神状态来对待整个治疗康复过程.

严重烧伤后早期直肠粘膜表面pH的改变及其检测意义

随着烧伤休克研究的深入,组织灌流和细胞氧合已成为休克监测的热点.胃肠道灌流的临床监测中,张力测定和直接微电极法检测胃肠道粘膜内pH值方法烦琐,且有破坏组织等缺点[1].文献报道实验动物直肠粘膜表面的pH与胃肠粘膜内pH有相同的变化趋势[2].本研究应用pH计直接检测严重烧伤患者直肠粘膜表面pH,并探讨了严重烧伤患者直肠粘膜表面pH值的临床意义.

Integra人工皮在烧伤创面的应用

创面覆盖是治疗严重大面积烧伤患者的重要环节.临床常用的覆盖物大多属于暂时性创面覆盖物,需更换移植自体皮封闭创面.Integra人工皮是一种较为理想的创面覆盖物,能恢复皮肤屏障功能,重建皮肤结构,达到永久性覆盖创面的目的,国外已试用于临床[1],但是国内未见使用Integra的报道.我们应用Integra人工皮覆盖烧伤创面,取得了满意效果.

烧伤皮肤组织制片法的改良

近年来免疫组织化学、原位核酸分子杂交等新技术被广泛地应用于病理学的研究和临床病理诊断,但这些新技术、新方法的应用,都必须建立在高质量的组织制片基础上,否则影响到实验结果.皮肤组织已被公认是难制片的组织之一,而烧伤后的皮肤组织制片则更为困难[1].为提高烧伤皮肤组织制片质量,我们进行了方法学的改进.

中国新生儿足底面积测量的初探

新生儿足底小而平坦,足趾伸展充分,临摹足印测量足底面积,可为烧伤临床诊断、治疗和科研提供客观依据.我院产房1995年1月至1996年12月共有3 350例足月分娩的正常新生儿,作者测量了2 500例图像完整清晰的足印面积,结果报告如下.

烧伤休克延迟复苏大鼠内脏产生NO的变化

目的:探讨烧伤延迟复苏脏器组织一氧化氮(NO)的变化与延迟复苏后多器官功能障碍发生的关系.方法:选用SD大鼠制备烧伤和烧伤休克延迟复苏模型,定时取心、肝、肾组织测定NO稳定代谢产物[NO2-+NO3-]的水平及含水量.结果:烧伤后各器官组织中NO产生明显增加,而延迟复苏组各器官NO产生均较烧伤组显著地降低,组织含水量较烧伤组明显增高.结论:烧伤休克延迟复苏存在广泛的内脏组织再灌注损伤,NO的降低可能是延迟复苏器官组织产生过度的炎症反应和并发多器官功能障碍的原因.

严重烧伤后非热力因素所致大鼠肝细胞DNA损伤

目的:研究严重烧伤后非热力损伤因子能否造成远隔部位的肝脏细胞DNA损伤.方法:将18只SD大鼠随机分为正常对照组、烧伤对照组和烧伤延迟复苏组,制作成35%TBSAⅢ度的烧伤模型.各组动物根据设置的时间点麻醉并剖腹取肝.分离单个肝细胞和抽提DNA后,用单细胞凝胶电泳和气相色谱质谱联用方法检测DNA损伤并分析损伤类型.结果:单细胞凝胶电泳显示烧伤对照组与正常对照组的尾部差值(T-C值)为23μm,烧伤延迟复苏组的T-C值为35μm.气质联用检测在烧伤对照组和烧伤延迟复苏组均检测出氧化硷基6-氨基、9羟基嘌呤.结论:严重烧伤后和烧伤延迟复苏条件下非热力损伤因素可以造成肝脏细胞的DNA损伤.

烧伤创面渗液sVCAM-1的变化

目的:检测烧伤创面渗液中可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM 1)的含量,观察其与创面愈合的关系.方法:在换药时采用海绵吸取创面渗液,用免疫酶联方法定量检测.结果:sVCAM-1含量在不同时期创面渗液中有所不同.中晚期创面渗液中的含量显著高于早期创面.结论:sVCAM-1与烧伤创面愈合过程中炎症反应的调控有关.

小鼠烧伤后腹腔巨噬细胞核因子κB的活化

目的:观察小鼠烧伤后腹腔巨噬细胞核因子κB(NF-κB)活化情况.方法:小鼠烫伤后6 h,取腹腔巨噬细胞,用免疫组化方法观察NF-κB的活化情况,用格林试剂测定上清中一氧化氮(NO)含量.结果:烧伤后腹腔巨噬细胞NF-κB从细胞质移位到细胞核,而正常组腹腔巨噬细胞NF-κB移位不明显.体外培养巨噬细胞上清中NO含量烧伤组明显高于正常组.结论:烧伤后腹腔巨噬细胞NF-κB活化,产生N()增加.

精氨酸对烧伤创面愈合影响的实验研究

目的:探讨精氨酸对严重烧伤大鼠创面愈合的影响及可能机制.方法:Wistar大鼠随机分为A、B和C 3组,均制成30%TBSA Ⅱ度烫伤模型.A组伤后用生理盐水灌胃,B组用谷氨酰胺灌胃,C组用精氨酸灌胃.均分别于伤前1 d及伤后1,5,10,14和20 d各取大鼠8只,断头取外周血,用流式细胞分析仪检测T细胞亚群并计算Th/Ts比值;用透明标准方格纸测定创面愈合率;从创面中心取组织块测定羟脯氨酸(OHP)含量.结果:A、B组伤后外周血Th/Ts比值逐渐下降,伤后10 d降至低,精氨酸对烧伤后该比值的下降有明显的改善作用;3组动物于伤后5 d创面愈合率无显著差异;伤后10 d C组愈合率较A、B组均明显增加;A、B组创面OHP含量在伤后5 d达峰值,继之逐渐恢复至伤前水平.C组也于伤后5 d达峰值,之后各时相点的OHP水平均较A、B组明显增高.结论:精氨酸通过改善烧伤后T细胞介导的免疫功能,能明显促进烧伤后的创面愈合.严重烧伤后补充精氨酸是行之有效的治疗手段.