首页 > 文献资料
-
杭州市淋病奈瑟菌血清学分型研究
淋病奈瑟菌的血清型与其耐药性、血清抗性、营养分型、对免疫球蛋白A1蛋白酶的表达以及引起的淋病奈瑟菌感染类型均有密切关系.但淋病奈瑟菌的抗原结构非常复杂,与细菌表层结构有关的外膜蛋白、脂多糖和菌毛都可以作为血清学分类的基础.
-
灵杆菌LPS的生物学活性研究
目的测定以TCA法及PW法两种工艺提取的灵杆菌LPS的生物学活性作用,评价其临床应用价值.方法采用抑制S180腹水瘤实验,升高WBC实验及局部Shwartzman实验等方法,测定其活性与毒性反应.结果两种工艺提取的灵杆菌LPS对S180细胞抑制率分别为65.6%与67.7%;对正常小鼠及环磷酰胺造成的WBC减少模型小鼠均有较强的生白作用;TCA法提取物局部无Shwartzman反应.结论灵杆菌LPS可通过诱导生物体内巨噬细胞等效应靶细胞产生与分泌多种活性因子,介导生物活性反应,具有较高的生物学活性与较低的毒性.
-
灵杆菌LPS的提取纯化与理化性质的初步研究
目的 从灵杆菌菌体中提取纯化脂多糖(lip polysaccharide LPS)类物质，应用于临床疾病治疗。方法 采用酚水法(phenol—water PW)工艺，并测定提取物中核酸、多糖与蛋白含量。结果 酚水法提取物多糖含量为83.31％，蛋白含量为1.11％。结论 酚水法工艺可以有效提取灵杆菌LPS，提取物中糖类物质含量较高。
-
抑制星形胶质细胞Cx43可保护LPS诱导的多巴胺神经元损伤
目的 探讨星形胶质细胞缝隙连接蛋白Cx43在脂多糖(LPS)诱导的多巴胺神经元退变中的作用.方法 体外培养SD大鼠原代中脑神经元-胶质细胞和原代混合胶质细胞,随机分为对照组、LPS(10 ng/ml)组、Cx43抑制剂43Gap27(200 μg/ml)组、LPS+43Gap27组、半通道阻滞剂18β-GA(10μmol/L)组和LPS+ 18β-GA组.通过免疫组化检测络氨酸羟化酶(TH)阳性细胞的数目与形态;检测细胞外液中腺嘌呤核苷三磷酸(ATP)、谷氨酸浓度表征胶质细胞的半通道功能,检测一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量以及活性氧簇(ROS)表征神经免疫反应的强度.RT-qPCR、Western blot与免疫荧光检测星形胶质细胞Cx43的mRNA和蛋白表达.结果 LPS处理导致多巴胺神经元渐进性死亡;在此过程中,细胞外液中的ATP与谷氨酸水平升高,差异有统计学意义(P＜0.05),此升高与胶质细胞半通道活性紧密联系;同时发现星形胶质细胞上的Cx43在LPS诱导的神经免疫中表达下降,且变化有统计学意义(P＜0.05);而预处理Cx43抑制剂43 Gap27或者半通道阻滞剂18β-GA后,LPS引发的胶质细胞外的ATP和谷氨酸释放明显减少,该变化有统计学意义(P＜0.05);同时,LPS引发的多巴胺神经元的损伤也几乎被完全抑制,多巴胺神经元数目从对照组的49％上升为114％与117％,该变化有统计学意义(P＜0.05);同时LPS引起的免疫反应也部分被抑制,细胞上清中的TNF-α含量降低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 星形胶质细胞缝隙连接蛋白Cx43在LPS引发的多巴胺神经元退变中扮演重要角色,其半通道的开放可能是促进神经免疫反应、诱发神经毒性的重要原因,表明Cx43可能是帕金森病(PD)的一个潜在病理靶点.
-
脂多糖通过调节iNOS表达影响人卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药性的研究
目的 观察脂多糖诱导的SKOV3/DDP细胞内分泌型一氧化氮合酶(iNOS)表达变化对人卵巢癌SKOV3/DDP细胞株顺铂耐药性的影响,并初步探讨机制.方法 体外培养SKOV3/DDP细胞,分为对照组、顺铂组、脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)组和联合用药组共4组,对照组给予常规不加血清培养基,顺铂组给予10 μg/ml顺铂,LPS组给予浓度为1 μg/ml的LPS,联合用药组给予10 μg/ml顺铂和1μg/ml LPS,均作用24 h.MTT法检测各组细胞活力;蛋白免疫印迹法观察各组iNOS表达;流式细胞术检测各组细胞凋亡情况;间接免疫荧光法观察各组细胞激活型Caspase-3表达.结果 联合用药组细胞活力明显低于顺铂组(P＜0.05);顺铂组与对照组iNOS表达差异无统计学意义(P＞0.05),LPS组和联合用药组iNOS表达水平明显高于对照组(P＜0.05),且联合用药组高于LPS组(P＜0.05);流式细胞术结果显示联合用药组细胞凋亡率明显高于顺铂组(P＜0.05),且通过间接免疫荧光法显示联合用药组细胞激活型Caspase-3表达高于顺铂组(P＜0.05).结论 LPS能够降低人卵巢癌SKOV3/DDP细胞顺铂耐药性,这可能与其提高SKOV3/DDP细胞内iNOS表达水平有关.
关键词： 脂多糖 顺铂耐药性 iNOS SKOV3/DDP细胞 -
细菌脂多糖对氯丙嗪肝毒性作用的影响
目的确定吩噻嗪类抗精神病药氯丙嗪(CPZ)的肝毒性的特征与表现,并通过低剂量脂多糖(LPS)诱导炎症对此种肝毒物肝毒性的影响来研究短期炎症与椅锔味拘灾涞墓叵?以枯否氏细胞(KC)特异性抑制剂氯化钆(GdCl3)为工具药,研究肝脏炎症介质在CPZ的肝毒性以及在LPS对药物肝毒性的调节效应中所发挥的作用,探讨其施加影响所发生机制、过程、环节及途径.
-
白藜芦醇对脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎性因子生成的调控
目的 探讨白藜芦醇(Res)对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化及炎性细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-lβ(IL-1β)、白介素-6(IL-6)]基因表达的调节.方法 分别用1mg/LLPS或25mmol/L Res+1mg/L LPS处理体外培养的小鼠巨噬细胞,采用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测细胞中NF-κB活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA和蛋白的表达.结果 LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量在刺激后6～12 h明显高于正常对照组(P<0.001),而Res+LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著低于LPS组(P<0.005).结论 LPS可诱导巨噬细胞NF-κB活化,导致 TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达增强,而Res能抑制NF-κB活化而调节TNF-α、IL-1β、IL-6基因的表达.
-
脂多糖对感染卡介苗巨噬细胞表达细胞因子影响的研究
目的探讨脂多糖(LPS)对感染卡介苗巨噬细胞表达细胞因子的影响.方法用ELISA方法比较单独巨噬细胞组,巨噬细胞+卡介苗+LPS组,巨噬细胞+卡介苗组以及巨噬细胞+LPS组细胞因子表达的差异.结果单纯巨噬细胞组产生较少量的IL-12,TNF-α,LPS能刺激巨噬细胞组特别是感染卡介苗巨噬细胞组产生大量的IL-12,TNF-α.与单纯巨噬细胞组相比,LPS也不能有效地刺激巨噬细胞产生更多的IL-1,IL-2,IL-18和IFN-γ.结论 LPS能诱导巨噬细胞(包括卡介苗感染巨噬细胞)产生更多的TNF-α和IL-12,而有利于宿主的免疫应答.提示LPS及其同系物有潜力作为抗结核药物和疫苗或其佐剂.
-
结核分枝杆菌脂多糖的提取及其检测血清结核抗体的研究
目的 提取结核分枝杆菌(MTB)脂多糖抗原,检测结核血清参考品,评价其在血清学诊断中的价值.方法 将MTB菌体冰浴超声破碎,用酚/氯仿、氯仿/甲醇抽提除去蛋白和脂质,再用DNase I酶和RNase 酶作用除去DNA和RNA,得到初步纯化的脂多糖即LPS-1, LPS-1在去污剂Triton-X114作用后,分成含有阿拉伯甘露糖(AM)的水相即LPS-2和含有脂阿拉伯甘露糖(LAM)和脂甘露糖(LM)的有机相即LPS-3,以三种多糖作为抗原,通过ELISA方法检测结核阳性和阴性血清参考品.结果 LPS-1对结核血清参考品检测的敏感性为71.7%,特异性为96%,LPS-3的敏感性为43.9%(18/41),而特异性达到100%.结论 脂多糖抗原检测血清结核抗体显示出较强的特异性,可望成为结核病血清学的诊断组合抗原之一.
-
脂多糖对感染卡介苗巨噬细胞表达细胞因子影响的研究
目的:探讨脂多糖(LPS)对感染卡介苗巨噬细胞表达细胞因子的影响.方法:用ELISA方法比较单独巨噬细胞组,巨噬细胞+LPS+卡介苗组,卡介苗+巨噬细胞组以及LPS+巨噬细胞组细胞因子表达的差异.
-
用多糖间接血凝试验检测肠出血性大肠杆菌O157抗体的初步研究
目的:探讨多糖间接血凝(IHA)检测感染肠出血性大肠杆菌(EHEL)O157:H7患者血清中抗O157抗体的价值.方法:用酚-水法提取O157:H7脂多糖和醋酸水解法制备多糖抗原,致敏绵羊红细胞后以IHA检测各种肠道致病菌抗血清及健康人和非腹泻患者血清的抗体反应.结果:制备的多糖抗原糖含量为33%,不含核酸,蛋白质＜0.3%,具有鲎试剂凝集活性.以O157多糖IHA检测O157单克隆抗体呈高效价凝集(1:1280),H7多克隆抗体呈低效价凝集(1:8);其它各种肠道致病菌抗血清的凝集效价均小于1:2;从30名健康人和30名非腹泻患儿的血清中未查出O157抗体;204名非腹泻成人患者中,有1人的凝集效价为1:8,其余的均小于1:2.吸收抑制试验表明凝集反应为特异性.结论:以多糖IHA检测抗O157抗体可试用于人群O157:H7感染的抗O157抗体流行率调查及肾溶血性尿毒综合征的免疫诊断.
关键词： 肠出血性大肠杆菌O157:H7 脂多糖 多糖抗原 间接血凝 -
氯胺酮通过星形胶质细胞Tet3介导抗炎机制研究
目的 探讨氯胺酮通过人脑星形胶质母细胞瘤细胞(U87)Tet3介导抗炎新机制.方法 2017年6-8月,U87细胞用脂多糖(LPS)和(或)氯胺酮刺激,Trizol法提取总RNA,检测Tet3 mRNA表达的变化.将细胞分为5组:对照组(0组),不同浓度LPS组(1μg/mL,10μg/mL,分别标记为L1,L10组),氯胺酮组(K组),氯胺酮加脂多糖组(L1+K组).结果 观察几组细胞的Tet3 mRNA表达变化.L1组与0组比较Tet3 mRNA的表达显著减少(0.5964±0.05816),K组与0组比较Tet3 mRNA的表达无明显变化(0.9636±0.08087),而L1+K组与L1组相比较Tet3 mRNA的表达明显增加(0.9363±0.1045).结论 1μg/mL LPS可以诱导星形胶质细胞Tet3 mRNA表达的下调,而1 mmol/L氯胺酮可以抑制LPS引起的Tet3 mRNA的下调.
-
化合物TML对脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎性反应的保护作用
目的：观察化合物 TML 对脂多糖诱导的 RAW264.7细胞炎性反应的保护作用。方法：采用 LPS 诱导的RAW264.7细胞株建立细胞炎性反应模型；采用Griess试剂法测定NO释放量；用MTT法测定细胞存活率。结果：化合物TML可明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞NO释放，当其剂量达到50μmol/L时，细胞NO的释放量低。化合物TML对细胞存活率无明显影响。结论：化合物TML对脂多糖诱导的RAW264.7细胞炎性反应有一定的保护作用。
关键词： 化合物TML 脂多糖 RAW264.7细胞 一氧化氮 -
孕期脂多糖刺激对子代大鼠肾脏发育及肾功能的影响
目的 探讨孕期脂多糖(LPS)对子代成年大鼠肾功能的影响.方法 SD孕鼠12只随机分为两组.对照组6只,每只腹腔注射无菌生理盐水0.5 ml;LPS组6只,腹腔注射LPS,剂量 0.79 mg/kg;分别在孕期第8、10、12 天的上午8∶00 ～ 9∶00进行腹腔注射;子鼠出生后,观察7 ～ 25周龄子鼠血压的变化、7周龄子鼠肾小球的数量以及7、16、25周龄子鼠肌酐清除率、尿蛋白的改变.结果 与对照组相比,LPS组子鼠肾小球数量明显减少,7周龄LPS组为(20 466.67±2 353.48)个、对照组为(29 516.67±2 967.33)个、肾小球滤过率明显降低,7、16、25周龄LPS组和对照组分别为(0.35±0.05)、(0.56±0.05);(1.10±0.23)、(2.37±0.18);(1.04±0.17)、(2.20±0.17) ml/min;尿蛋白明显高于对照组,7、16、25周龄LPS组和对照组分别为(7.12±1.02)、(4.63±0.40);(13.95±2.30)、(11.34±1.70);(18.25±2.10)、(13.35±2.33)mg/24 h.结论 孕期LPS刺激引起子代大鼠肾脏发育异常及肾功能降低.
-
裸燕麦β-葡聚糖调节血脂及改善肠源性内毒素血症作用的实验研究
目的 探究裸燕麦β-葡聚糖调节血脂过程中对肠道菌群的影响.方法 用高脂饲料喂养金黄地鼠建立血脂异常模型,造模后将血脂异常鼠随机分为2组并分别以普通饲料、裸燕麦β-葡聚糖干预饲料饲养建立模型组(M)、干预组(OM),另设正常组(N)、预防组(OMN),以上各组动物每组12只,实验期90 d.在干预初期、中期及末期检测各组血脂4项,同时进行粪便肠杆菌和双歧杆菌平板培养,末期测血清脂多糖(LPS)和炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6).结果 干预初期,OMN组的血清总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)与低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平比N组低(P＜0.05),OM组与M组血脂水平一致,干预末期,OM组血清TC、TG、LDL-C水平分别达到3.64 mmol/L、2.52 mmol/L、0.69 mmol/L,相比造模时均显著下降(P＜0.01),其中TC与LDL-C水平显著低于M组(P＜0.01),此外,OM组肠杆菌与双歧杆菌比值在干预45 d后即显著下降(P＜0.01),并在90 d时显著低于M组(P＜0.01),同时,干预结束时OM组血清LPS水平为13.67 μg/L,显著低于M组(P＜0.01),OM组血清炎症因子IL-6为44.80 ng/L、TNF-α为376.95 ng/L,显著低于M组(P＜0.01).结论 对血脂异常的个体,裸燕麦β-葡聚糖在有效调节血脂的同时可改善肠道肠杆菌与双歧杆菌比例并纠正菌群紊乱带来的肠源性内毒素血症,降低机体炎症水平.
-
热处理的Ⅰ型嗜肺军团菌细胞抗原作酶联免疫吸附试验检测抗体的应用
菌细胞为抗原的酶联免疫吸附试验(BCA-ELISA),不用提取抗原,可测定直接作用于宿主体内的菌细胞表面裸露抗原决定簇(蛋白质、脂多糖)激起的抗体,能更确切地反映机体的免疫状态,其敏感性较肥达氏等细菌凝集试验测得的这种抗体滴度高10～100倍,已用于检测许多细菌表面(或菌毛)抗原的抗体[1-4].
-
载脂蛋白与脓毒症的关系
脓毒症是一种严重感染引起的全身炎症反应,具有高发病率和高病死率的特点,是现代危重病学面临的十分复杂的问题.载脂蛋白(apolipoprotein,APO)是结合脂蛋白质,其主要功能是修饰并影响与脂蛋白代谢有关的酶的活性,同时作为脂蛋白受体配体,参与脂蛋白代谢.近年许多研究发现,多种载脂蛋白,如apoA-I,apoC-I能够结合脂多糖(lipopolysaccharide,LPS),减弱炎症反应,起到保护机体的作用.在此,对APO在脓毒症中的作用予以综述,并阐述其未来研究方向.
-
霍乱弧菌噬菌体VP4受体成分的分析
侵袭细菌的噬菌体可以被该菌株的细胞壁提取物所抑制,既细菌的提取物与噬菌体颗粒混合培育后,如果噬菌体与有受体活性的细菌提取物发生不可逆作用,就不能再感染细菌.本项研究选育鞭毛发育良好的霍乱弧菌菌株,利用有鞭毛的细菌在含有0.1%石炭酸琼脂培养基上培养可以失去鞭毛的特性,选育鞭毛发育不良的菌株.提取上述两种菌株的脂多糖和外膜蛋白,并分别与噬菌体VP4钝化作用.通过噬斑计数测定,比较钝化作用的差异,分析VP4的受体成分.
-
肠出血性大肠埃希菌O157:H7引起的溶血性尿毒综合征患者血清抗体调查
目的对1999年某地出现的一批先有腹泻病症状后继发急性肾功能衰竭(肾衰)的患者进行血清学调查和诊断.方法使用基因克隆表达纯化的肠出血性大肠埃希菌(EHEC)-溶血素(Hly)和EHEC O157脂多糖(LPS)为抗原,对采集自42例肾衰患者的血清标本进行蛋白印记试验.结果 EHEC-Hly的检测发现,IgG抗体阳性21份,阳性率50.0%; IgM抗体阳性16份,阳性率38.1%;在11份标本中同时检测到IgG和IgM抗体,阳性率26.2%;检测到IgG或IgM抗体阳性的标本26份,阳性率61.9%.EHEC O157 LPS的检测发现,24份标本分别检测到IgG和IgM抗体,阳性率各为57.1%;在29份标本中检测到IgG或IgM抗体,阳性率69.0%;在20份标本中检测到IgG和IgM抗体,阳性率47.6%.在42份血清标本中同时检测到EHEC-Hly和O157 LPS的特异性抗体的标本22份,阳性率52.4%;检测到EHEC-Hly或O157 LPS的特异性抗体的标本34份,阳性率81.0%.结论结合细菌学和血清学诊断结果、临床症状和流行病学分析,可以认为这些患者感染了EHEC O157:H7.在分离不到病原菌的情况下,检测患者血清标本的EHEC-Hly和/或EHEC O157 LPS的特异性抗体,不失为一种可以考虑的诊断方法.
关键词： 大肠杆菌O157:H7 溶血性尿毒综合征 溶血素 脂多糖 -
毛细管区带电泳激光诱导荧光测定内毒素
内毒素为脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)由脂质(类脂A)、核心寡聚糖和O-特异性多糖组成,是革兰阴性菌细胞壁外膜的重要成分之一,在细菌感染的发病机制中起重要作用[1,2].为了对LPS的制备流程进行即时监控,我们建立了毛细管区带电泳-激光诱导荧光(CZE–LIF)测定脆弱类杆菌提取液中LPS含量的新方法.本法LPS浓度在0.015～0.200 mg/L(内具有良好的线性关系(r=0.996),平均回收率为96.15%～99.01%,日内及日间变动系数(CV)均<5%,低检测限为0.005 mg/L.与鲎试剂法、ELISA法或凝胶电运法相比[2-4],本法不受热源干扰,方法简便、快速且定量可靠,能对LPS的制备流程进行即时监控,是目前国内外新的LPS检测方法.
