第二军医大学学报杂志
Academic Journal of Second Military Medical University 제이군의대학학보
- 主管单位： 第二军医大学
- 主办单位： 第二军医大学
- 影响因子： 0.74
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0258-879X
- 国内刊号： 31-1001/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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SNT1与RET之间相互作用的酵母双杂交研究
目的:研究sucl-binding neurotrophic target(SNT1)与RET之间的相互作用,寻找RET受体下游的结合蛋白,以深入认识RET下游信号转导机制.方法:将RET胞内域与LexA蛋白融合作为DNA结合蛋白,分别将SNT1、SNT1PTB及SNT1△PTB与B42AD蛋白融合作为激活域蛋白,共转化酵母菌后,通过β-半乳糖苷酶活性检测以及氨基酸营养缺陷生长实验分析它们之间的相互作用.结果:SNT1及SNT1PTB与RET之间在酵母中存在结合,而SNT1△PTB不与RET结合.结论:证实RET与SNT1之间具有相互作用,SNT1的PTB结构域在介导此相互作用的过程中非常重要.
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实时三维超声心动图评价心肌梗死合并室壁瘤患者左心室容积及射血分数
目的:探讨实时三维超声心动图(RT-3DE)定量评价心肌梗死合并室壁瘤患者左心室容积及射血分数的可行性及准确性.方法:应用RT-3DE、常规超声心动图双平面Simpson's法和M型超声心动图Teichholz法测量23例心肌梗死合并室壁瘤患者左心室舒张末期容积(LVEDV)、收缩末期容积(LVESV)、每搏量(SV)及射血分数(EF),以左心室造影为参考标准.结果:RT-3DE测量所得LVEDV、LVESV、SV、EF与左心室造影结果具有良好的相关性,r分别为0.92、0.90、0.88、0.91(P均＜0.001),LVEDV、LVESV、SV、EF测值均较左心室造影略小,但两者无显著性差异.二维超声心动图的双平面Simpson's法与左心室造影具有良好的相关性,r分别为0.85、0.87、0.86、0.91(P均＜0.001),LVEDV、LVESV、SV、EF测值均较左心室造影小,双平面Simpson's法与左心室造影测得的LVEDV、LVESV之间有显著差异(P＜0.05),但两者的SV、EF之间无差异;M型超声心动图Teichholz法与左心室造影结果具有一定的相关性,r分别为0.73、0.71、0.70、0.65(P均＜0.05),LvEDV、LVESV、SV、EF测值均较左心室造影大(P＜0.05或P＜0.01).结论:RT-3DE较常规超声心动图能更准确地评价心肌梗死伴室壁瘤患者左心室容积及EF.
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普鲁泊福、瑞芬太尼全凭静脉麻醉用于颈椎手术的效果评估
目的:评价普鲁泊福和瑞芬太尼全凭静脉麻醉在颈椎手术中的应用效果.方法:择期颈椎手术患者100例随机分为4组:地氟烷/瑞芬太尼(DR)组:地氟烷1～2 MAC+瑞芬太尼0.15～0.40μg·kg-1·min-1;地氟烷/芬太尼(DF)组:地氟烷1～2 MAC+芬太尼0.05 mg间断静推;普鲁泊福/瑞芬太尼(PR)组:普鲁泊福50～100μg·kg-1·min-1+瑞芬太尼0.15～0.40 μg·kg-1·min-1;普鲁泊福/芬太尼(PF)组:普鲁泊福50～100 μg·kg-1·min-1+芬太尼0.05 mg间断静推.记录术中不良心血管事件发生率、血管活性药物使用情况、拔管时间、指令性活动恢复时间.术后90 min、24 h由专人应用简化的状态-特质焦虑问卷(state-trait anxietyinventory,STAI)和视觉模拟评分法(visual analogue scale,VAS)分别评估患者的精神状态和疼痛程度,并记录恶心呕吐的发生率.结果:应用瑞芬太尼的两组(DR组和PR组)不良心血管事件、拔管时间、指令性活动恢复时间明显早于应用芬太尼的两组(DF组和PF组)(P＜0.05);术后90 min,全凭静脉麻醉的两组(PR组和PF组)STAI评分显著低于吸入麻醉的两组(DR组和DF组)(P＜0.05),但24 h后差异不显著;术后90 min、24 h,全凭静脉麻醉的两组恶心呕吐率显著低于吸入麻醉的两组(P＜0.05),且VAS评分较低,但无显著性差异.结论:普鲁泊福和瑞芬太尼全凭静脉麻醉用于颈椎手术具有血流动力学稳定、苏醒快速完全、术后精神状态好、恶心呕吐率低等优点,可广泛用于临床.
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维生素E琥珀酸酯对人大肠癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用
目的:检测维生素E琥珀酸酯(VES)对人大肠癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用并分析此种作用的可能机制.方法:VES分别以5、10和20 mg/L浓度作用于人大肠癌细胞株LS174T,12、24以及48 h后应用MTT法检测VES对大肠癌细胞的生长抑制作用.应用流式细胞仪分析不同浓度VES处理48 h后大肠癌细胞的细胞周期并计算凋亡率;以Western蛋白印迹法和流式细胞术检测VES处理后肿瘤细胞Fas蛋白水平和细胞表面Fas表达的变化.结果:VES能够显著抑制人大肠癌细胞的增殖并表现为剂量和时间依赖关系.以5、10和20 mg/L VES作用48 h后,肿瘤细胞的凋亡率由0.9%分别升高至15.9%、46.7%和64.5%.Fas中和性抗体能够明显阻断VES介导的凋亡.VES处理后,细胞Fas蛋白水平升高.流式细胞仪检测细胞表面Fas平均荧光强度由5.43升高至9.88、13.21和18.0.结论:VES能够诱导人大肠癌细胞的生长抑制和凋亡.调控凋亡诱导分子Fas的表达是主要机制之一.其作用主要与肿瘤细胞表面Fas分子表达的上调有关.
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M蛋白致敏树突状细胞诱导的抗骨髓瘤细胞效应
目的:探讨M蛋白致敏树突状细胞(DC)诱导激活的自体T细胞对骨髓瘤细胞特异性免疫杀伤效应.方法:取多发性骨髓瘤(MM)患者外周血单核细胞经GM-CSF、IL-4和TNF-α体外联合诱导生成DC,用DEAE-纤维素提取法自MM患者血清中分离、纯化M蛋白.以M蛋白冲击致敏DC(同时设未致敏的DC为对照),流式细胞术分析DC免疫表型,并与自体T淋巴细胞进行混合淋巴细胞反应.51Cr释放法测定T细胞对不同靶细胞(患者骨髓瘤细胞、U266细胞)的杀伤活性.结果:经M蛋白致敏的DC激发自体T细胞增殖的能力明显强于未致敏的DC(P＜0.05);同时负载M蛋白DC激活的T细胞杀伤活性也明显强于对照组(P＜0.01),而两组T细胞对U266细胞均无明显杀伤活性.结论:M蛋白致敏DC能有效诱导自体T细胞对骨髓瘤细胞的特异性杀伤作用.
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携带p53基因增殖性腺病毒影响肝癌细胞对化疗药物的敏感性
目的:研究携带p53基因增殖性腺病毒CNHK600-p53载体能否增加肝癌细胞株对化疗药物的敏感性.方法:构建携带p53基因增殖性腺病毒CNHK600-p53载体,采用四甲基偶氮唑盐法(methylthiazolyl tetrazolium assay,MTT),观察并比较单用化疗药物[5-氟尿嘧啶(fluorouracil,5-Fu)、丝裂霉素(mitomycin,MMC)和表柔比星(epirubicin,EPI)]、单用CNHK600-p53和CNHK600-p53联合上述化疗药物对肝癌细胞株BEL-7404的杀伤效应.结果:肝癌细胞株BEL-7404在5-Fu浓度为100μg/ml时细胞抑制率为(47±3)%,MMC浓度为1μg/ml时细胞抑制率为(20±4)%,EPI浓度为2.5 μg/ml时细胞抑制率为(73±2)%,联合CNHK600-p53(MOI=10)后上述浓度的化疗药物细胞抑制率分别增高为(59±4)%、(44±4)%和(86±2)%(率的U检验,P＜0.01).结论:携带p53基因的CNHK600-p53能提高肝癌细胞株BEL-7404对化疗药物的敏感性,CNHK600-p53联合化疗药物治疗可望开辟克服肝癌耐药的新途径.
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常规胃镜检查时肉眼观察和胃黏膜组织病理学改变的相关性研究
目的:分析胃镜检查时胃黏膜肉眼观察和组织学检查结果之间的相关性,以评估胃镜检查时胃黏膜活检的必要性.方法:收集我院2005年1～12月因上消化道症状在内镜中心接受胃镜检查的门诊患者.选择连贯的病例入组,每组患者包括反流性食管炎、非萎缩性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡,同组患者在年龄、性别和病史等方面相互匹配,共320例.胃黏膜肉眼评估由2位有经验的内镜检查医师共同进行,评估的指标包括渗出、充血、糜烂、光滑程度和胃内胆汁反流等;活检组织学检查由同一位病理医师执行,报告的指标包括活动性炎症、慢性炎症、萎缩、肠化生和不典型增生等;幽门螺杆菌(HP)的诊断基于活检标本的快速尿素酶试验、组织改良银染色和组织学检查结果,其中2项以上阳性作为判定标准.结果:HP感染、糜烂、渗出和黏膜粗糙对于活动性炎,HP感染和黏膜糜烂对于慢性炎症,黏膜粗糙对于肠化生,HP感染和黏膜粗糙对于萎缩,陈旧出血点、HP感染、黏膜粗糙和胆汁反流对于不典型增生有一定预测价值.肉眼诊断萎缩性胃炎的正确率仅为71.9%.假阳性率为28.2%;肉眼诊断非萎缩性胃炎的正确率仅为75.62%,漏诊率为34.38%.结论:肉眼观察结果对胃黏膜组织病理学检查结果有一定的提示作用,但预测价值较低,缺乏足够的相关性.内镜下肉眼观察不能代替黏膜组织学检查.
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三种止血方法在股动脉穿刺部位止血中有效性和安全性的比较
目的:评价冠状动脉造影(CAG)和经皮冠状动脉介入治疗(PCI)后人工压迫止血法和两种动脉穿刺闭合器(Angi-oseal和Perclose)在股动脉径路止血中的安全性和有效性及其影响因素.方法:366例经股动脉行选择性冠状动脉造影或介入治疗的患者,分为人工压迫止血组128例、Angioseal组128例和Perclose组110例,观察3种止血方法的有效性、安全性,并分析其影响因素.结果:止血成功率各组间无明显差异;即刻止血率Angioseal组明显高于Perclose组(P＜0.01).下肢制动时间和止血时间Angioseal组和Perclose组均明显短于人工压迫组(P＜0.01).血管迷走神经反射和严重并发症仅发生在人工压迫组;局部并发症Angioseal组和人工压迫组均明显低于Perclose组(P＜0.01).影响因素:术后使用肝素者血肿发生率高(OR=4.382,P＜0.05);男性、PCI及术后使用氯吡格雷者渗血发生率高(P＜0.05或P＜0.01);年龄大及PCI者成功率低;术后使用低分子肝素和肝素者止血时间延长.结论:Angioseal、Perclose与人工压迫止血法均可有效用于心导管术后股动脉穿刺部位的止血.与Perclose相比,Angioseal止血时间更短、即刻止血率更高且局部并发症更少.
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肝素-ELISA法检测血清中期因子及其对肝癌诊断的初步应用
目的:建立中期因子(midkine,MK)的测定方法,初步探讨血清MK浓度测定对肝癌的诊断价值.方法:根据MK可结合肝素的特点,应用肝素-抗体双夹心原理,建立肝素-ELISA,并检测20例健康献血者、20例良性肝占位性病变患者、20例肝硬化患者以及104例肝细胞癌(HCC)患者血清MK的质量浓度.结果:肝素-ELISA检测MK的小值为15 ng/L,可测范围为15～1 000 ng/L,＜500 ng/L时呈线性关系(r=0.97).测定结果表明,正常献血者、良性肝占位性病变患者和肝硬化患者血清MK浓度分别为(56±11)、(74±19)和(89±43)ng/L,而HCC患者血清MK浓度为(199±87)ng/L,与前3组之间有显著差异(P＜0.05).HCC患者血清MK阳性率达83.7%,与其他3组之间具有显著性差异(P＜0.001).结论:应用肝素-ELISA测定血清MK的质量浓度对肝癌具有诊断价值.
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人类肿瘤相关蛋白hyrdC的原核表达、抗体制备及其在胃癌中的初步检测
目的:制备原核表达的hyrdC纯化蛋白及相应单克隆抗体,并以该抗体初步检测胃癌中hyrdC蛋白的表达.方法:用RT-PCR方法获取人hyrdC基因序列,插入原核表达载体pET32a构建重组质粒,纯化得到TRX-hyrdC融合蛋白,将其作为抗原免疫BALB/c小鼠,按常规方法制备抗hyrdC单克隆抗体,以ELISA、Western印迹法筛选及鉴定;采用免疫组织化学法(SP法)比较胃癌组织及瘤旁正常组织中hyrdC抗体水平的差异.结果:测序结果显示克隆的hyrdC ORF与GenBank中登录的序列一致.所获TRX-hyrdC融合蛋白相对分子质量与理论计算值相符,获得2株分泌抗hyrdC单克隆抗体的细胞株;Western印迹法显示该抗体能特异性地结合人hyrdC蛋白;SP法测定显示,hyrdC蛋白在胃癌组织中表达明显高于正常胃组织(P＜0.001).结论:成功制备了抗hyrdC单克隆抗体;SP法测定胃癌组织与瘤旁正常组织中hyrdC抗体水平有显著差异.
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经皮冠状动脉介入术对急性心肌梗死患者合并二尖瓣反流的影响
目的:通过6个月以上随访观察,探讨经皮冠状动脉介入术(PCI)对急性心肌梗死(AMI)合并二尖瓣反流(MR)的影响.方法:213例AMI患者按治疗方法不同分为常规药物组(126例,服用常规药物)和PCI组(87例,PCI+常规药物),所有患者在住院期间及随访时行超声心动图检查,检测MR程度、左室舒张末期内径(LVEDd)、左室收缩末期内径(LVEDs)、左室舒张末期容量(LVEDV)、左室收缩末期容量(LVESV)、左室射血分数(LVEF),将所得结果进行对比分析.结果:AMI患者住院期间MR的发生率为28.6%,下壁心梗MR发生率明显高于其他部位(34.5%vs 22.3%,P＜0.01).平均随访8.8个月后MR的总发生率为35.4%,PCI组MR发生率较住院期间无显著变化(26.4%vs 27.6%,P＞0.05),而常规药物组MR发生率较心梗急性期有明显增加(43.7%vs30.2%,P＜0.01),且明显高于PCI组(P＜0.01).PCI组LVEDd、LVEDV、LVESV低于常规药物组(P＜0.05),而LVEF高于常规药物组(P＜0.05).结论:急性下壁心肌梗死患者较其他部位心梗患者易出现MR;随着心肌梗死时间延长,MR发生率有增加趋势.PCI通过改善血流及左室重构,可降低或至少不增加MR的发生.
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基于HIV-1 N,N'-二芳香酰肼类似物的合成
目的:合成N,N'-二芳香酰肼类似物.方法:基于HIV-1整合酶结构进行设计,考虑电子效应和空间效应,以不同取代的芳香羧酸等为起始原料,经酰氯化、酯化、肼解等反应方法,进行化学合成.结果:设计、合成了19个二芳香酰肼类衍生物,除LFA3外,其他18个化合物为首次报道.结论:系列新化合物的合成为进一步药物筛选和构效关系研究提供了基础.
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AO经皮微创稳定系统LISS钢板治疗胫腓骨复杂性骨折
目的:探讨AO经皮微创稳定系统LISS钢板治疗胫骨近端复杂骨折的方法和临床效果.方法:21例胫骨近端复杂骨折的患者采用AO经皮微创稳定系统LISS钢板治疗.其中男16例,女5例,年龄45～72岁.致伤原因为交通事故伤17例,建筑施工伤4例.其中7例为Ⅱ度开放伤,14例闭合伤.3例多发伤,6例多发骨折.¨例胫骨多节段骨折,骨折分型按AO分型C型17例,SchatzkerⅥ型4例.结果:本组21例伤口全部一期愈合,全部病例随访3～19个月,平均11个月,手术时间45～160 min,平均80 min,术中无输血,出血100～300 ml.术后患者无发热.未出现小腿筋膜间隙综合征.X线片示骨痂出现时间4周,无短缩以及旋转畸形,仅1例稍向前成角小于5..外观无明显畸形,膝踝关节功能正常.结论:经皮微创稳定系统LISS钢板创伤小,并发症少,骨愈合率高,是治疗胫骨近端复杂骨折的有效方法.
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腹腔镜粘连松解术治疗术后反复发作性粘连性肠梗阻
目的:探讨腹腔镜粘连松解术治疗术后反复发作性粘连性肠梗阻的可行性.方法:33例行腹腔镜粘连松解术患者,均有腹部手术史,术后反复发作性腹胀腹痛、恶心呕吐伴肛门停止排气排便,其中6例有2次手术史,6例曾行开腹粘连松解术.结果:33例患者中30例顺利完成手术,3例中转开腹.腹腔镜手术时间25～90 min,平均(45±10)min,平均出血量约(15±7)ml,1例术中发生肠管损伤,予以腹腔镜下修补.平均术后住院(4.5±0.5)d,术后无并发症.经长期临床随访,31例患者生活质量佳,均未再出现类似术前症状,也无切口疝等其他并发症,2例患者偶有轻微梗阻症状发作.结论:腹腔镜粘连松解术对轻中度粘连引起的肠梗阻具有较好疗效,具有创伤小、腹腔暴露机会少、腹腔干扰轻等优点,能较大限度减少术后腹腔内再粘连.
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重组TRX-BNP融合蛋白的构建和表达
目的:构建人B型钠尿肽(BNP)表达质粒,用pET原核表达系统制备重组抗原TRX-BNP融合蛋白.方法:根据GenBank中检索到的人BNP成熟蛋白序列编码,设计合成编码BNP-32蛋白的DNA,并分别在5'端和3'端设计EcoR I和HindⅢ酶切位点,经聚合酶链反应(PCR)、构建重组质粒pET32a.BNP,并在BL21(DE3)经IPTG诱导表达,Ni-NTA亲和层析制备TRX-BNP.通过DNA测序、融合蛋白的相对分子质量分析及Western印迹来鉴定TRX-BNP质粒及表达的BNP抗原的正确性.结果:DNA测序结果表明,所获得的BNP基因编码序列符合序列设计的要求,正确插入设计位点,重组质粒pET32a.BNP构建成功.IPTG诱导后SDS-PAGE电泳显示有特异性蛋白TRX-BNP表达,蛋白相对分子质量21 400,Ni-NTA亲和纯化,在UVP凝胶成像分析系统上作定量分析,BNP蛋白纯度达到95%.Western印迹结果证实TRX-BNP蛋白特异性表达.结论:成功制备TRX-BNP融合蛋白.
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通络散结酊对大鼠炎症痛及骨癌痛模型镇痛的疗效观察
目的:观察通络散结酊(主要组成为天南星、半夏、山慈菇及威灵仙)对大鼠炎症痛模型、骨癌痛模型的镇痛作用.方法:通过Wistar大鼠右踝部注射完全弗氏佐剂(CFA)0.1 ml建立炎症痛模型,造模24 h后应用通络散结酊及扶他林乳剂7d,动态观察大鼠体质量和进食水量、右踝周径及屈/伸踝关节疼痛试验评分的变化.通过Wistar大鼠右胫骨髓腔内注射Walker-256肿瘤细胞3×104建立骨癌痛模型,造模12 d后应用通络散结酊及扶他林乳剂14 d,动态观察大鼠体质量和进食水量、及丙酮刺激缩足反应时间的变化.结果:炎症痛大鼠造模后第2天即出现明显的右踝关节肿胀,屈/伸踝关节疼痛试验评分及右踝周径较空白组明显增加(P＜0.05);与模型组相比,通络散结酊和扶他林乳剂外用均可明显减小大鼠屈/伸关节疼痛试验评分及踝周径(P＜0.05),两种药物作用效果无显著差异.骨癌痛大鼠造模第12天出现缩足反应时间较空白组明显缩短(P＜0.05),通络散结酊和扶他林乳剂外用7 d内均可明显延长骨癌痛大鼠缩足反应时间,较模型组有显著差异(P＜0.05),用药14 d后,通络散结酊仍有很好的效果,而扶他林乳剂效果低于用药7 d时(P＜0.05).结论:通络散结酊对炎症痛及骨癌痛均有镇痛作用,且在扶他林乳剂效果不佳的骨癌痛晚期仍有镇痛作用.
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活性氧对低氧诱导因子的调节
需氧生物的生存离不开氧的供应.如果在物质氧化产生能量过程中,氧未被完全还原成水,可导致氧自由基的产生,氧自由基也可转变成一些非自由基氧活性物质.由于功能上的相似性,这些物质被统称为活性氧(ROS).ROS增多可造成蛋白质、DNA和脂质损伤.许多证据表明,氧分压改变、激素、细胞因子和化学物质等均可引起的ROS增加,作为细胞信号分子,ROS可参与细胞功能的调节.低氧诱导因子(HIF)是各种低氧诱导基因调节的关键转录因子,它的活性复合体是由2个亚单位组成的异构体.近研究发现,无论是缺氧或非缺氧情况,ROS均参与HIF活性的调节.本文主要就ROS的产生及其对HIF活性调节方面的文献进行综述.
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线粒体一氧化氮合酶及其生物学作用
近来,越来越多的证据表明存在线粒体一氧化氮合酶(mitochondrial nitric oxide synthase,mtNOS),它与线粒体内膜的基质面结合,通过钙敏感性途径产生一氧化氮(nitric oxide,NO).生理状态下,mtNOS催化产生的NO通过与细胞色素C氧化酶可逆性竞争来调节线粒体的氧耗和跨膜电位.NO与线粒体呼吸链产生的超氧阴离子反应,生成过氧亚硝酸,后者不可逆性调节线粒体内的敏感靶点,诱导氧化和(或)硝化应激.此外,也发现NO参与了细胞的程序化死亡.本文主要综述了目前关于mtNOS在线粒体功能调节中作用的认识.
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妊娠合并肝豆状核变性一例报告
1 临床资料患者女,27岁,因孕39+1周于2005年10月15日入院.患者于18岁时无明显诱因出现构语困难,双手发抖,动作笨拙,吞咽困难,至上海华山医院就诊,经血铜蓝蛋白(CP)测定确诊患有肝豆状核变性(hepatolenticular degeneration,HLD),给予口服青霉胺,4片,1次/d治疗,其后病情稳定.
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肺上皮样血管内皮瘤并多处转移一例报告
1 病例资料患者男,47岁,因"反复中上腹胀6个月,右侧胸痛4个月"于2005年2月2日入院.入院体检:右侧胸廓饱满;右侧腋前线第5肋以下压痛,右胸第4肋以下实音;纵隔第2至3肋间向左右两侧增宽,右肺呼吸音减弱,右肺底呼吸音消失,无干湿性啰音.
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同期外科矫正和直视下封堵器置入治疗多发性室间隔缺损合并房间隔缺损一例报告
1临床资料患儿,女,12岁,因自幼发现心脏杂音,活动后胸闷、气急入院.查体:胸骨左缘第4肋间闻及Ⅳ/6级收缩期喷射样杂音,较粗糙;胸骨左缘2、3肋间闻及Ⅲ/6级收缩期喷射样杂音,P2显著亢进.
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皮肤组织黑素细胞与胶原和弹力纤维的组合染色法研究
目的:寻找能显示皮肤组织黑素细胞与胶原纤维和弹力纤维的染色法.方法:选用Masson Fontana silver nitrate-Ponceau S-Picric acid-Victoria blue(Masson Fontana硝酸银、丽春红S、苦味酸和维多利亚蓝,简称MFSN-P-PA-VB)对实验动物皮肤组织进行组合染色.结果:皮肤黑素细胞颗粒呈黑色;胶原纤维呈红色,出血的红细胞呈黄色;弹力纤维呈绿色.结论:本组合染色方法克服了原法染色单一、对比效果较差的弱点.能够较好的显示皮肤组织中含有黑素细胞颗粒、胶原纤维及出血部位的红细胞和弹力纤维组织成分.
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海水吸入致大鼠急性肺损伤模型的建立
目的:建立海水吸入肺损伤动物模型.方法:24只大鼠随机分为对照组9只和模型组15只.模型组大鼠屏气9～10 s后吸入海水,4 ml/kg,分2次进行;对照组大鼠不吸入海水.于海水吸入前、海水吸入后10、30、60、120、240 min观察动脉血气和呼吸频率的变化,并记录动物的生存时间.4 h后处死动物,观察肺系数、支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白(TP)含量和白细胞计数以及肺组织形态学的变化.结果:与对照组相比,模型组大鼠吸入海水后呼吸频率显著增加,动脉血氧分压(PaO2)显著降低(P＜0.05),之后虽逐渐回升,但一直维持在较低的水平;肺系数和TP含量均显著升高(P＜0.05);白细胞计数显著增加(P＜0.05);肺组织形态学显示明显的肺水肿、肺泡萎陷和炎细胞浸润情况.结论:成功建立海水吸入肺损伤的动物模型.
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实时荧光定量PCR检测肾移植患者术后BK病毒感染
目的:建立肾移植术后患者尿液和外周血BK病毒(BKV)感染负荷的实时荧光定量PCR检测方法,并初步探讨其临床应用价值.方法:构建含有BKV VP1蛋白保守区核苷酸序列片段的质粒作为外参照品,采用TaqMan荧光探针检测技术,建立定量检测BKV DNA方法;并对112例肾移植术后患者,40例正常体检者的尿液和外周血标本BKV含量进行检测.结果:本研究建立的BKV实时荧光定量PCR检测方法灵敏度、特异度及重复性较好,定量PCR方法低检测下限为8×102copy/ml,测量批内差异为0.54%～3.78%,批间差异为0.62%～4.58%.112例肾移植术后患者尿液和外周血BKV DNA的检测阳性率分别为27.7%和11.6%,BKV DNA阳性者尿液和外周血BKV中位数水平分别为8.2×104copy/ml和2.4×103copy/ml.40例正常人BKV尿液和外周血阳性率为2.5%和0%;与正常体检者相比,肾移植术后患者尿液及外周血BKVDNA阳性率及水平明显升高(P＜0.01).尿液BKV阳性率较外周血明显升高(P=0.02),但尿液和外周血中BKV含量无明显相关性.结论:实时荧光定量PCR检测肾移植患者术后BKV感染方法简便、可靠、准确,为进一步研究BKV感染与肾移植术后移植物丢失的关系奠定了基础.
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腰椎L4～L5活动节段有限元模型的建立与验证
目的:采用一种新型计算机辅助设计(CAD)方法精确建立腰椎L4～L5节段三维非线性有限元模型并进行充分验证.方法:采用改良的"非种子区域分割方法"提取腰椎CT图像数据中目标区域得到二值图像,用Marching Cubes方法由二值数据生成初始表面模型.采用反映腰椎生理曲度的"佳切割平面"从初始表面模型获得非平行的切割轮廓线并建立"分段线性子空间",后者经仿射变换到"规则子空间"快速重构腰椎曲面,后逆变换恢复腰椎原三维空间形状特征.将表面模型所有结点的坐标数据和三角面片信息导入ANSYS进行网格划分精确建立L4～L5节段三维非线性有限元模型,并进行加载验证.结果:所构建的L4～L5活动节段有限元模型包括94 794个Solid单元,1 196个Link单元,1 170个Shell单元,768个Target单元,464个Contact单元;同时包含了几何非线性、材料非线性与接触非线性3种非线性类型.不同载荷条件下L4～L5节段有限元模型的移位/旋转角度、椎间盘内压等预测结果与文献中相同载荷条件的试验生物力学结果相符合.结论:基于先进算法建立的腰椎L4～L5节段表面模型实现了二值图像提取、腰椎曲面重构的全数字化过程,具有极佳的仿真效果.
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过氧化物酶体增殖物激活受体γ对TNFα诱导的肾脏内髓集合管上皮细胞损伤的保护作用
目的:观察过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ高表达对小鼠肾脏内髓集合管上皮细胞(IMCD)炎性刺激的反应.方法:实验分为4组:IMCD空白对照组,IMCD+TNFα刺激组,转染PPARγ野生型质粒的转染空白组(PPARγ-IMCD组)和PPARγ-IMCD+TNFα刺激组.TNFα刺激:采用TNFα 50 ng/ml作用24 h;质粒转染:将小鼠野生型PPARγ1质粒转染于IMCD细胞使PPARγ高表达.ELISA方法检测细胞上清液MCP-1、TGFβ1分泌量.结果:转染PPARγ野生型质粒的IMCD细胞PPARγ mRNA和蛋白高表达.1MCD空白对照组和PPARγ-IMCD转染空白组相比,细胞上清液MCP-1和TGFβ1含量无显著性差异;IMCD+TNFα刺激组培养上清液中MCP-1和TGF-β1表达明显增加(与IMCD空白对照组相比,P＜0.005),PPARγ-IMCD+TNFα刺激组培养上清液中MCP-1和TGFβ1的分泌与IMCD+TNFα刺激组相比显著减少(P＜0.05和P＜0.005).结论:IMCD细胞转染PPARγ野生型质粒使得PPARγ高表达后具有抗炎和抗纤维化作用.
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RNA干扰对比观察HIF1α和HIF2α在人肾癌细胞中的作用及机制
目的:运用RNA干扰(RNAi)方法对比观察HIF1α和HIF2α在人肾癌细胞的作用并探讨相关机制.方法:分别将化学合成的HIF-1α和HIF-2α小片段寡核苷酸脂质体瞬时转染人肾癌细胞(A498),人正常肾小管上皮细胞(HK-2)和A498分别加入培养基和脂质体作为对照组.用RT-PCR或免疫印迹等观察RNAi 24 h后一些基因如VEGF、ET-1、bcl-2和Ki67的改变,并用流式细胞仪和荧光显微镜观察细胞的凋亡情况.结果:与HK-2相比,A498高表达HIF-1α和HIF-2α,RNAi后两基因基本被沉寂.HIF-1α干扰后ET-1、bcl-2和Ki67均下调,伴随凋亡或坏死细胞增多,而HIF2α干扰后,仅VEGF下调较为明显.结论:HIF-1α和HIF-2α均有一定程度调节血管生成基因的作用,但HIF-1α尚具备一定的调节肿瘤细胞增殖功能,可能通过调节凋亡抑制基因实现.提示HIF-1α和HIF-2α可能存在不同的转录调控功能和基因结合位点.
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亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞表达p38丝裂原活化蛋白激酶和过氧化物酶体增殖物激活受体γ的影响
目的:观察亚硒酸钠对大鼠肾小球系膜细胞系HBZY-1表达p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)的影响,从而研究p38MAPK和PPARγ在糖尿病肾病形成中的作用及硒在防治糖尿病肾病中的作用机制.方法:在以下3种条件下培养细胞系:(1)分别以一定浓度高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和AGEs刺激细胞系HBZY-1一定时间;(2)先给予p38MAPK特异性抑制剂SB203580或亚硒酸钠预处理细胞后,再分别以高葡萄糖、高胰岛素、过氧化氢和糖基化终产物4种因素孵育细胞系HBZY-1;(3)以不加任何刺激培养细胞系作为对照.RT-PCR法观察各种情况下细胞系HBZY-1 PPARγ mRNA的表达,Western印迹法观察磷酸化p38MAPK的表达.结果:4种刺激因素均可作为独立因素激活p38MAPK,使其磷酸化表达量增加,PPARγ表达量显著减少;SB203580能显著增加细胞系HBZY-1 PPARγ表达;亚硒酸钠能明显抑制细胞系HBZY-1p38MAPK磷酸化表达,而显著增加细胞系HBZY-1 PPARγ表达(P＜0.01).结论:在大鼠肾小球系膜细胞,p38MAPK对PPARγ具有拮抗作用,亚硒酸钠明显增加细胞系HBZY-1 PPARγ表达,并具有类似PPARγ激动剂的作用.
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人肾组织磷酸化蛋白质组二维凝胶电泳的建立与优化
目的:利用二维凝胶电泳法分离人肾组织磷酸化蛋白质组.方法:利用金属磷酸盐亲和层析树脂富集人肾组织磷酸化蛋白.样品浓缩除盐后,进行一维等电聚焦分离和二维SDS电泳分离提取人肾组织磷酸化蛋白.结果:成功提取了人肾组织磷酸化蛋白,并得到了磷酸化蛋白的双向凝胶电泳图谱.结论:磷酸化蛋白富集技术与二维凝胶电泳技术的结合是研究磷酸化蛋白质组的有效方法,为进一步研究人肾组织磷酸化蛋白奠定基础.
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ZNF262在常染色体显性多囊肾病患者肾组织中的表达及意义
目的:检测锌指蛋白262(ZNF262)在正常肾组织及不同发病阶段多囊肾组织中的表达,并以增殖细胞核抗原(PCNA)为对照,初步探讨ZNF262在常染色体显性多囊肾病(autosomal dominant polycystic kidney disease,ADPKD)中的作用.方法:根据肾小球滤过率(GFR)大小对ADPKD(n=8)进行分期,观察其影像学、常规病理检查结果,采用半定量RTPCR方法检测人正常肾组织(n=8)、早期多囊肾组织(n=4)、晚期多囊肾组织(n=4)中ZNF262和PCNA的表达,并对上述组织中ZNF262和PCNA的表达进行相关性分析.结果:与正常肾组织相比,ZNF262和PCNA在早期、晚期多囊肾组织中的表达均显著增多(P＜0.01),且晚期多囊肾组织表达高于早期多囊肾组织(P＜0.05).ZNF262和PCNA在早期、晚期多囊肾及正常肾组织中的表达存在显著的相关性(r1=0.842 6,r2=0.902 1,r3=0.883 5,均P＜0.05).结论:与正常组织相比,ZNF262不仅在ADPKD高表达,并且随着病程进展表达逐步增高,这与PCNA的表达具有显著的相关性.提示ZNF262可以作为检测ADPKD的指标,并有助于临床进展分期的判别.
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塞来昔布通过阻断丝裂原活化蛋白激酶信号途径抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖
目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(CXB)能否通过阻断丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径抑制多囊肾囊肿衬里上皮细胞增殖.方法:原代培养多囊肾囊肿衬里上皮细胞,以不同浓度CXB(0、2.5 ×10-6、5×10-6、1×10-5、2×10-5、3×10-5、4×10-5、5×10-5mol/L)处理细胞,采用BrdU法检测细胞增殖状态.ELISA法检测各组血管内皮生长因子(VEGF)的含量.荧光定量PCR技术检测增殖细胞核抗原(PCNA)、磷酸化MAPK的mRNA含量,Western印迹法检测PCNA、MAPK和磷酸化MAPK的表达.结果:CXB对囊肿衬里上皮细胞的增殖具有明显抑制作用,呈时间和剂量依赖性,其中2×10-5mol/L CXB作用24 h的抑制作用强,抑制率为(63.9±1.2)%;CXB可减少囊肿衬里上皮细胞VEGF的分泌,而且抑制作用具有时间、浓度依赖性.CXB剂量依赖性减低PCNA和磷酸化MAPK的mRNA和蛋白表达.结论:CXB明显抑制囊肿衬里上皮细胞增殖,抑制细胞产生VEGF;其作用与干扰MAPK磷酸化,部分阻断MAPK信号转导通路有关.
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生理条件下骨髓细胞参与肾小管上皮细胞的更新
目的:观察生理情况下骨髓细胞能否分化成肾小管上皮细胞.方法:绿色荧光蛋白(GFP)标记的C57BL/6转基因小鼠提供骨髓,同种无荧光标记的C57BL/6小鼠分为3组,每组各15只.正常对照组未做任何处理;全身照射组经致死剂量γ射线全身均匀照射后不接受骨髓移植,1周内处死;骨髓移植组照射后接受骨髓移植,分别于移植后56 d、84 d分2批处死小鼠.取3组小鼠血液行血常规、血肌酐、尿素氮检测,同时取其肾脏标本行H-E染色.流式细胞仪检测骨髓移植组骨髓细胞中GFP阳性细胞比例,免疫组织化学法观察GFP阳性细胞在其肾脏内的分布及数量.结果:与正常对照组相比,放射组和骨髓移植组的血尿素氮和肌酐无明显变化.肾脏病理检查示全身致死剂量γ射线照射未造成小鼠肾脏组织结构和生理功能的明显改变,但血常规提示其三系减少,与其他2组相比有统计学差异(P＜0.05).荧光显微镜和激光共聚焦显微镜发现骨髓移植后56、84 d的受体鼠肾小管中有少量GFP阳性细胞存在,流式细胞仪检测发现其骨髓中GFP阳性细胞的比例分别为(78.75±5.99)%和(79.58±4.60)%,免疫组化定量结果显示GFP阳性细胞所占肾小管上皮细胞的比例分别为(4.17±1.66)%和(3.88±1.35)%,两亚组间比较无明显差别.结论:在无肾小管损伤的生理情况下,骨髓细胞也可以参与肾小管上皮细胞的更新.
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从文献计量看近10年糖尿病研究的发展
糖尿病在世界范围内的高发趋势引起了各界的广泛重视,对糖尿病研究的投入力度不断加大,近10年来世界上糖尿病研究的文献产出持续增长.本文通过对1995～2004年ISI Web of Science数据库等的一定数量文献的统计分析,揭示了糖尿病研究领域不同国家、机构、个人及期刊等的发文量、被引用率及研究侧重点等,从文献计量学的角度反映了近年来糖尿病研究的发展状况.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
