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中国生物制品学

中国生物制品学杂志

Chinese Journal of Biologicals 중국생물제품학잡지

统计源期刊
  • 主管单位: 中华人民共和国卫生部
  • 主办单位: 中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
  • 影响因子: 0.41
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1004-5503
  • 国内刊号: 22-1197/Q
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 12-128
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1988
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中国生物制品学杂志编辑部
  • 出版地区: 吉林
  • 主编: 封多佳
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • 人GnRH及其转运肽基因合成及鉴定

    作者:金元昌;刘利;苏晓艳;李景鹏;李会东;向育君;周建红

    目的人工合成人GnRH及转运肽(TRS)基因.方法根据已发表的人GnRH基因mRNA序列以及转运肽(9个左旋精氨酸)基因核苷酸序列,设计一对核苷酸,再用含7 mol/L尿素的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化,然后以这对核苷酸3′末端短互补序列退火、补齐,合成长达90 bp的目的序列GnRH/TRS.将其亚克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pYC1.酶切鉴定筛选出阳性克隆pYC1,并测序.结果 GnRH/TRS序列由90个核苷酸组成,扩增产物与原设计序列同源性达100%.结论已成功合成人GnRH/TRS基因,为进一步研究和应用奠定基础.

  • 中国狂犬病毒疫苗株CTN-1-V三个代次的GP基因序列分析

    作者:明平刚;孙文;徐葛林;吴杰;杨晓明;严家新

    目的分析三个代次CTN-1-V病毒株糖蛋白(GP)基因部分序列,并与代表性街毒株进行比较.方法利用RT-PCR反应,从感染了CTN-1-V病毒的小鼠脑内获得GP cDNA的部分片段,并进行序列测定.结果三个代次的CTN-1-V病毒株GP cDNA序列的690个核苷酸与代表性狂犬病毒GP核苷酸相应序列同源性为83.2%~96.8%,氨基酸序列同源性为90.0%~97.4%.CTN-1-V株三代之间的核苷酸序列几乎相同.结论 CTN-1-V株在传代过程中GP基因结构基本稳定,与中国流行的代表性街毒株的同源性高于aG株和PV株.

  • CpG ODN2006对乙型肝炎疫苗免疫BALB/c小鼠抗体产生的影响

    作者:郑源强;石艳春;杨贵贞

    目的探讨合成含CpG基序的寡脱氧核苷酸(CpG ODN2006)对乙型肝炎疫苗增强小鼠特异性抗体产生的效应.方法采用BALB/c小鼠,经后腿胫骨前肌注免疫2次,ELISA法检测血清中抗-HBs IgG效价.结果疫苗+CpG组较疫苗组和空白对照组的抗-HBs IgG效价明显增高,且维持时间长.结论 CpG ODN2006对小鼠抗-HBs IgG的产生具有明显的增强作用.

  • LHRH-PE40的免疫原性及其抗体对细胞毒作用的影响

    作者:吴广谋;张国利;岳玉环;何畅;孟锐奇;李俊植;朱平

    目的观察连续静脉注射重组毒素LHRH-PE40所引起的家兔抗LHRH-PE40抗体产生的规律以及该抗体对细胞毒作用的影响.方法将家兔分为3组,第1组隔日连续静脉注射LHRH-PE40,第2组用弗氏佐剂乳化的LHRH-PE40皮下注射为阳性对照组,第3组静脉注射人血白蛋白为阴性对照组.用ELISA检测血清中的抗体水平,XTT检测LHRH-PE40与血清中和后对Hela细胞的细胞毒作用.结果抗LHRH-PE40抗体水平随静脉注射时间的延长而升高,8 d可以检测到抗LHRH-PE40抗体,在24 d基本达到高水平.血清中和后LHRH-PE40对Hela细胞的半数抑制量较阴性血清提高1~2倍,而阳性血清较阴性血清提高14倍.结论连续静脉注射LHRH-PE40产生较低水平的抗体,这种抗体未造成LHRH-PE40对Hela细胞半数抑制量产生严重影响,这为临床连续使用LHRH-PE40提供了依据.

  • 人乳头瘤病毒16型晚期蛋白真核表达质粒的构建

    作者:刘大维;刘景晔;王鹏富;姜春来;于湘晖;孔维

    目的克隆宫颈癌病理组织中人乳头瘤病毒16型(HPV16)晚期蛋白(L1)的基因,并构建真核表达质粒,为制备预防性疫苗奠定基础.方法采用PCR法从宫颈癌病理标本中扩增出HPV16 L1基因,与pMD18-T载体连接,测序并构建真核表达质粒(pVAX1-L1),瞬时转染Cos-7细胞,利用免疫组化技术检测表达产物.通过小鼠淋巴细胞转化试验检测免疫原性.结果所得L1基因的序列与GenBank中序列比较存在若干变异,并由此引起相应的氨基酸发生变化.pVAX1-L1瞬时转染Cos-7细胞,经免疫组化技术检测到棕黄色免疫复合物的形成,说明有表达产物L1蛋白产生.淋巴细胞转化试验结果显示,试验组与对照组差异有显著意义.结论宫颈癌病理组织中HPV16 L1基因序列存在一定程度的变异,所得L1基因表达产物具有生物学活性.

  • 抗肿瘤重组鸡痘病毒体外抑制骨肉瘤细胞S180的效应

    作者:张治宇;金宁一;李霄;张新;金毅;杨英欣;李力卓

    目的探讨Apoptin、HN和IL-18融合基因的重组鸡痘病毒(vFV3)对骨肉瘤细胞S180的抑制效应.方法 以vFV3感染人骨肉瘤细胞S180,应用MTT法检测细胞活性,流式细胞仪分析vFV3感染致S180细胞周期变化,并用Rhodamine123染色结合FCM检测线粒体跨膜电位,从细胞生物学角度探讨vFV3致S180肿瘤细胞凋亡的途径.结果 vFV3感染可有效抑制S180肿瘤细胞,杀伤率达46.8%.感染使S180肿瘤细胞线粒体膜电位下降,导致S180肿瘤细胞凋亡.结论 vFV3可诱导S180肿瘤细胞凋亡,并主要通过线粒体途径诱导凋亡.

  • 弓形虫P30蛋白抗原表位的克隆表达及纯化鉴定

    作者:李越希;陶开华;张锦海;潘明洁

    目的构建表达P30蛋白抗原表位的重组质粒及工程菌,获得纯化的P30蛋白抗原表位,用于检测弓形虫特异性抗体.方法采用PCR技术,设计一对引物(P30P3、P30P4),从弓形虫基因组DNA中扩增出编码P30蛋白抗原表位的基因片段,与载体pET28a(+)连接,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后进行SDS-PAGE分析.用离子交换纯化表达的P30抗原表位,用ELISA鉴定其抗原性.结果表达的P30蛋白抗原表位以包涵体形式存在,纯化的P30蛋白抗原表位片段有较好的抗原性,可用于检测弓形虫抗体.结论已成功构建了高表达P30蛋白的工程菌,为研制弓形虫抗体检测试剂或疫苗奠定了基础.

  • 小鼠IFN-γ真核表达质粒的构建及表达

    作者:揣侠;张永红;金玉怀;房文亮;谢立新;王永祥

    目的构建重组小鼠干扰素γ(mIFN-γ)真核表达系统,并检测其在cos-7细胞中的表达.方法用RT-PCR方法,从ConA活化的小鼠脾细胞中扩增出mIFN-γ cDNA,将其克隆至pGEM-T载体上,测序正确后,再定向连接到真核表达载体pcDNA3中,经DEAE-Dextran转染至cos-7细胞,检测其在细胞内外的表达.结果 RT-PCR扩增的mIFN-γ cDNA与GenBank中mIFN-γ序列一致.构建的真核重组表达质粒pcDNA3/mIFN-γ转染cos-7细胞后,可检测到mIFN-γ的转录和表达.结论已成功构建了mIFN-γ真核表达系统,为抗病毒基因疫苗的研究奠定了基础.

  • PEP-1-SOD1融合蛋白的表达及纯化

    作者:丁鹏;王家宁;杨波;黄永章;骆丽娜

    目的构建原核表达载体pET15b-PEP-1-SOD1,并进行PEP-1-SOD1融合蛋白表达和纯化.方法以pBluescript Ⅱ SK-SOD1质粒为模板,PCR扩增SOD1 cDNA.经酶切后,分别构建原核表达载体pET15b-SOD1和pET15b-PEP-1-SOD1,经测序证实构建成功后,分别转化E.coli BL21(DE3),表达SOD1和PEP-1-SOD1融合蛋白,并进行鉴定.结果 SDS-PAGE和Western blot分析表明,分别在相对分子质量22 000和26 000处出现SOD1和PEP-1-SOD1目标表达条带,目的蛋白占菌体总蛋白的30%,两种表达蛋白以天然的、可溶性的形式存在.结论已成功地制备出SOD1和PEP-1-SOD1融合蛋白.

  • HBV PreS2-MBP融合蛋白质粒构建及在大肠杆菌中的表达

    作者:邵丽军;刘照惠;金立杰;李利;李猛;谷丽娟;赵晓林;杨屹

    目的在大肠杆菌pMAL-P2x系统中表达HBV PreS2-MBP融合蛋白,并对其进行鉴定和纯化.方法利用DNA重组技术,将全长的HBV PreS2蛋白基因克隆至原核表达载体pMAL-P2x中,转化大肠杆菌DH5α,IPTG诱导表达.表达产物经SDS-PAGE和Western blot检测,并经阴离子交换层析、Amylose Resin亲和层析纯化.结果成功构建了重组载体pMAL-P2x/S2,诱导蛋白为MBP标记的可溶性的PreS2-MBP融合蛋白,具有良好的抗原性,可经Amylose Resin亲和层析纯化.结论 pMAL-P2x系统可成功表达PreS2-MBP融合蛋白.

  • 抗肝癌hdsFv-hEDN重组免疫毒素的表达及生物学活性

    作者:付勇;苏雪梅;刘彦仿;杨守京;赵君;邹赛英

    目的制备对人肝癌细胞具有特异性杀伤活性的抗肝癌重组免疫毒素.方法利用大肠杆菌系统表达抗肝癌hdsFv-hEDN基因重组免疫毒素.表达产物经Ni-NTA亲和层析纯化后,进行特异性杀伤活性检测.结果抗肝癌hdsFvhEDN重组免疫毒素以可溶性形式表达于大肠杆菌培养上清中,并获得有效纯化.ELISA法检测证实其具有与相应抗原特异性结合的活性.细胞毒试验表明对肝癌细胞具有杀伤作用,而对正常肝细胞无损伤.结论已成功地制备了具有特异性结合和杀伤活性的抗肝癌hdsFv-hEDN基因重组免疫毒素,为其进一步应用奠定基础.

  • 北京分离株Gassericin T基因的克隆、表达及活性检测

    作者:李向红;赵建增;崔云龙;闫述翠;万阜昌

    目的克隆格氏菌素T基因,在原核细胞中表达,并检测其抑菌活性.方法通过PCR技术,从3株L.gasseri北京分离株中特异性扩增格氏菌素T的成熟肽DNA编码片段(V1-1/gatA和V44-1/gatA),经TA克隆和序列测定后,进行同源比较分析.双酶切后的目的片段与表达载体pGEX-6P-1连接,得到高效融合表达质粒pGEX-gatA/V1-1和pGEX-gatA/V44-1,转化大肠杆菌BL21(DE3)PlysS,IPTG诱导表达,并检测表达产物的抑菌活性.结果目的蛋白以包涵体形式表达,表达量约29%.重组格氏菌素对于金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺氏菌和伤寒沙门氏菌具有明显的抑制生长作用.结论 所获得的重组格氏乳杆菌素具有明显的抑菌活性,有望成为新型抗菌素.

  • 乳腺生物反应器特异调控序列的构建

    作者:蒋小玲;张红梅;徐六妹;王火生;乐晓华;李丽雄;周伯平

    目的构建可以指导外源基因在动物乳腺组织特异表达的调控序列--牛α-S1酪蛋白基因调控序列.方法 提取新生小牛肝组织的DNA,应用PCR分段扩增牛α-S1酪蛋白基因调控序列,经琼脂糖凝胶电泳鉴定后测序,再将各基因片段连接成完整的序列.并将外源基因ALB亚克隆入该调控序列内,转染C127细胞,经免疫组化法检测其表达情况.结果 乳腺生物反应器特异调控序列--牛α-S1酪蛋白基因调控序列,包括其1.8kb上游序列、第一外显子、第一内含子、包含翻译起始位点的第二外显子和部分第二内含子,及其后一个内含子的大部分、后一个不翻译的外显子(含多聚A信号)及侧翼区全长5.8kb.位于该调控序列内的ALB高效表达.结论成功构建乳腺生物反应器特异调控序列--牛α-S1酪蛋白基因调控序列,此调控序列对外源基因的表达有正调控作用.

  • Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白基因的克隆和原核表达

    作者:岳丽琴;沈叙庄;张华捷;王咏红;俞桑洁;杨永弘

    目的重组表达Ⅱ型B族链球菌表面免疫相关蛋白(Surface immunogenic protein,SIP)基因,为进一步免疫学研究提供目标蛋白.方法用PCR的方法从GBSⅡ型标准株的基因组DNA中扩增出SIP基因,用T/A克隆法将其插入pMD18-T载体,构建原核表达载体pET32a-SIP,用BI21(DE3)/pET系统表达Trix-SIP融合蛋白,SDS-PAGE和质谱分析鉴定表达产物,并对表达蛋白进行初步纯化.结果 PCR扩增产物经测序,证实与GenBank中I a/c型GBS的SIP的基因序列同源性为99%.SDS-PAGE显示,经IPTG诱导后BL21(DE3)/pET32a-SIP总蛋白中出现一条相对分子质量为66 000的新蛋白带.质谱分析和蛋白质库的比较证实其为B族链球菌表面免疫相关蛋白(SIP)的可能性分数为74.结论已成功表达并初步纯化SIP,为SIP在细菌致病中的作用研究以及相关疫苗的制备奠定了基础.

  • 实时荧光定量PCR方法检测人、鼠正常组织及脑癌组织中CD109 蛋白的表达

    作者:张静敏;金宁一;连海;李宵;孙迎春;安汝国;高桥雅英

    目的分析CD109基因在正常组织及脑癌组织中的分布.方法采用实时荧光定量PCR方法,分析CD109在人、鼠正常组织及脑癌中的表达,以18S rRNA作为内标.结果 CD109蛋白的mRNA丰度在睾丸组织中高,在其它组织中较低,在12份脑癌标本中,检测到9份CD109表达上调.结论 CD109基因在多数正常组织中表达很少,有可能是治疗恶性肿瘤的一个潜在的分子靶点.

  • 鸡贫血病毒VP3基因与人IL-18基因的共表达对人肝癌细胞BEL-7402的作用

    作者:连海;金宁一;李霄;陈立刚;张静敏;管国芳;孙丽丽;李雪梅;郑洪玲

    目的利用凋亡素和IL-18基因的抗肿瘤优势,设计构建共表达凋亡素和hIL-18基因的真核重组子,检测其在体外对人肝癌细胞BEL-7402的作用效果,旨在探索新的肿瘤基因治疗方法.方法将凋亡素VP3基因与hIL-18基因一同克隆到真核表达载体pVAX1上,构建重组质粒pVVP3IL-18,经脂质体介导,转染人肝癌细胞BEL-7402,AO/EB染色,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法和流式细胞仪分别分析凋亡细胞的形态学变化、DNA断裂情况和不同细胞周期的DNA含量变化,透射电镜分析凋亡细胞超微结构变化.结果随着转染时间的延长,重组质粒pVVP3IL-18所表达的目的蛋白对BEL-7402细胞的杀伤作用逐渐增强,作用48 h,形态学观察表明BEL-7402细胞发生明显的凋亡,凋亡率可达(56.5±11.9)%,并且大部分细胞为TUNEL阳性着色,流式细胞术分析可见明显的亚二倍体凋亡峰,透射电镜观察可见细胞核固缩、染色质聚集等典型的凋亡超微结构变化.结论联合应用凋亡素与hIL-18基因,在体外对人肝癌细胞BEL-7402具有明显的凋亡诱导作用.

  • 八肽胆囊收缩素对大鼠滑膜细胞株RSC-364 TNF受体基因表达的影响

    作者:金玉怀;赵占胜;丛斌;徐锦荣;姚玉霞;李淑瑾;凌亦凌

    目的探讨CCK-8对RSC-364细胞株TNF受体基因表达的影响.方法采用RT-PCR法检测不同浓度的八肽胆囊收缩素(CCK-8)对在TNF-α诱导下的大鼠滑膜细胞BSC-364 TNF受体(Tumor necrosisfactor receptor,TNFR)mRNA表达的影响.结果 CCK-8在10-6mol/L和10-7mol/L浓度时可抑制TNF-α诱导的TNFR2 mRNA在RSC-364细胞的表达,且表现了一定的剂量和时间依赖性,CCK受体拮抗剂丙谷胺则可抑制此作用.结论 CCK-8可抑制TNF-α诱导的大鼠滑膜细胞RSC-364株TNFR2基因的表达.

  • 不同周龄BALB/c小鼠制备单抗的产量比较

    作者:焦艳;高克谨;朱庆宣;陈洁;郭晓云;廖燕端;林朝琨

    单克隆抗体的制备多采用动物体内诱生法.由于绝大多数杂交瘤细胞是由BALB/c小鼠的骨髓瘤细胞与同一品系的免疫小鼠脾细胞融合产生的,选取适周龄的BALB/c小鼠对于大量制备单抗至关重要.因此,作者对不同周龄BALB/c小鼠制备单抗的产量进行了比较.

  • 中华稻蝗超氧化物歧化酶的提纯

    作者:周艳利;李建科

    超氧化物歧化酶(SOD)是生物体内的一种清除超氧离子的重要酶类.人类的多种疾病与SOD的活性变化有关.本文以中华稻蝗为原料,经丙酮沉淀和硫酸铵盐析提纯SOD,取得了较好的效果,现简述如下.

  • Pichia酵母表达重组人可溶性TRAIL的纯化与生物活性

    作者:李茹冰;傅泳航;李继东;佟明华;杨联萍;孔祥平

    目的分离纯化Pichia酵母表达的重组人可溶性TRAIL,并检测其生物活性.方法以Pichia酵母分泌型表达TRAIL,采用硫酸铵沉淀和柱层析纯化可溶性TRAIL蛋白.以SDS-PAGE、ESI-MS和Western blot法鉴定其纯度及特异性.以细胞透射电镜、DNA Ladder和MTT法检测其诱导肿瘤细胞凋亡活性.结果目的蛋白以可溶形式存在,蛋白相对分子质量22 000,纯化后纯度95%.Western blot证实为TRAIL蛋白.电镜、DNA Ladder和MTT均证实其具有诱导肿瘤细胞凋亡活性.结论 Pichia酵母表达rhsTRAIL可用柱层析法纯化,并具有诱导肿瘤细胞凋亡的生物活性.

  • 金黄地鼠耳螨病皮肤病理组织学观察

    作者:赵亚力;王丹;周捷;赵晓青;赵婧;薄文学

    目的观察地鼠繁殖群发生的耳螨病皮肤病理学改变.方法应用两种死螨检查方法制备耳及会阴部皮肤寄生螨载玻片,光镜观察,并进行寄生虫形态学鉴定.同时对6只临床发病地鼠进行大体剖检,选取双耳、阴囊、肛门周围皮肤,常规病理制片,HE染色,光镜观察皮肤病理改变.结果寄生虫形态学观察证实为耳螨(背肛螨、疥痂螨).大体剖检内脏器官未见异常,主要病变部位是皮肤.双耳(耳翼、耳甲)、阴囊、肛门周围皮肤有病变处,表皮上有炎性渗出物及痂皮,表皮增生、增厚,可见不完全角化,上皮增生可达6-8层甚至更多,角质层增生更明显.在角质层表面以及角质层或表皮的隧道内,均发现大量螨虫及螨卵的各种断面.在耳螨寄生部位可引起急性或慢性炎症,有的动物伴有继发性细菌感染,少数动物可见表皮坏死,形成溃疡.真皮出现充血、水肿及炎性细胞浸润.结论地鼠耳螨病皮肤病理改变具有典型特征,可结合寄生虫形态学鉴定进行病理诊断.

    关键词: 地鼠 螨病 病理学
  • 生物反应器细胞培养制备人用狂犬病疫苗

    作者:查力;高军;侯剑英;白珠穆;袁德明;杨俊伟;李旭;李庆岸;陈焕玉;孙非非;赵红梅;周德水

    目的应用生物反应器培养细胞和病毒,大规模生产人用狂犬病疫苗.方法以巴斯德PV2061为毒种,以143代以内Vero细胞为培养基质,应用生物反应器,每升投放25g微载体,灌流式细胞培养,连续收获病毒液,经浓缩、灭活、纯化,制成Vero细胞狂犬病疫苗.结果细胞培养密度达1.2×107~1.5×107个/ml,病毒感染后可连续收获18~22 d,病毒高滴度8.5 LogLD50/ml,平均滴度7.6 LogLD50/ml.经柱层析纯化,杂蛋白去除率达99.95%以上,总蛋白含量≤80μg/g,DNA含量≤10 pg/0.5ml,GP含量3.5~4.5 IU/0.5ml,效力≥4.5 IU/0.5ml.结论应用生物反应器细胞培养,可以大规模生产优质Vero细胞人用狂犬病疫苗.

  • 两种细胞培养流感病毒的滴度比较

    作者:戚凤春;汪春义;张雪梅;王亚军;李晓波;贾媛;赵大鹏;盛军

    目的探讨甲1(A1)型流感病毒在Vero细胞和MDCK细胞培养的可行性,确定佳培养条件.方法将流感病毒接种于Vero细胞和MDCK细胞,在含有不同浓度胎牛血清或胰酶维持液中培养,于不同时间收获病毒液,检测血凝素滴度(HA).结果胎牛血清对病毒的繁殖有明显抑制作用.加入适量胰酶(约5μg/ml)可提高病毒产量.佳收获病毒时间为72~96 h.在MDCK细胞上的病毒HA滴度高于Vero细胞.结论两种组织细胞培养流感病毒结果相近,Vero细胞和MDCK细胞均可用于培养流感病毒.

  • 麻疹乙脑二联减毒活疫苗安全性及免疫原性研究

    作者:姚亚夫;张卓光;周本立;曾立学;刘瑛;王洪彬;廖轶;卢德芬

    目的研究麻疹乙脑二联减毒活疫苗的安全性及免疫原性.方法采用麻疹沪191毒株和乙型脑炎SA14-14-2毒株分别制备的病毒原液,进行配比和干扰试验,制备成二联疫苗,冻干后免疫小白鼠和猴子,观察安全性和免疫原性,然后进行人体观察.结果麻疹病毒原液与乙脑病毒原液的佳混合比例(体积比)为1:2.注射小白鼠后安全性良好,且产生较好的乙脑免疫应答.注射猴子后无异常反应,神经组织病理学变化轻微,麻疹和乙脑中和抗体效价与各自的单价苗差异无显著意义.人体临床观察一般情况良好,无局部及全身反应.结论所研制的麻疹乙脑二联减毒活疫苗安全性及免疫原性良好,可推广使用.

  • 冻干Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗的稳定性

    作者:王辉;张月兰;张颖;张晋;钟书声;罗书荣

    目的了解冻干Vero细胞乙型脑炎纯化疫苗的稳定性.方法将冻干Vero细胞乙脑纯化疫苗分别放置在4℃、25℃、37℃和40℃下,按规定时间取样.用ELISA双抗体夹心法和小鼠效力试验检测其抗原单位和效力水平.结果在4℃下72周效力损失4.2%,25℃下24周效力损失4.5%,37℃下12周效力损失9.1%,40℃下4周效力损失15.2%.疫苗溶解后室温放置24h,效力无明显改变.结论冻干Vero细胞乙脑纯化疫苗在室温下稳定性良好.

  • b型流感嗜血杆菌结合物纯化过程不同部分的生化及免疫学特性

    作者:杜琳;谭小梅;宣俊文;蒋奕;刘月萍;谢贵林

    目的分析Hib结合物纯化过程不同部分的生化及免疫学特性.方法制备的Hib结合物经Sepharose CL-4B层析柱纯化,从中选5个不同位点取样,检测其生化特性及免疫原性.结果 1、2和3部分多糖蛋白质比例在0.4左右,高分子结合物含量均在80%以上,经高压液相分析,这3部分的相对分子质量均在1 400 000以上,免疫小鼠后均能产生较好的免疫应答.第4部分高分子结合物含量在70%左右,相对分子质量约在670 000,免疫小鼠后也能产生较好的免疫应答.第5部分高分子结合物含量为23.7%,相对分子质量在50 000左右,基本是以游离状态存在的多糖和载体蛋白,免疫小鼠后仅能产生很低的免疫应答.结论 1、2和3部分是Hib结合物纯化中需收集的部分,第4部分虽也以结合状态存在,但相对分子质量相对较低,第5部分主要是游离的多糖和蛋白质.

  • 康赛宁对体外培养的人肝癌细胞的影响及与乙肝疫苗联合免疫对小鼠的免疫增强作用

    作者:陈克金;刘建;喻刚;全家妩

    目的研究A群溶血性链球菌制剂(康赛宁)对体外培养的人肝癌细胞系Hep3B和HepG22.2.15的影响及与乙肝疫苗联合免疫对小鼠的免疫增强作用.方法用不同浓度的康赛宁作用于人肝癌细胞Hep3B和HepG22.2.15,观察细胞形态学,MTT比色法检测细胞活性,EIA法检测培养上清HBsAg、HBeAg含量,吖啶橙直接染色检测细胞凋亡,Southern blot分析细胞DNA片段.给NIH小鼠腹腔注射康赛宁和乙肝疫苗,检测血清中HBs抗体、转氨酶水平.给普通小鼠腹腔注射康赛宁和乙肝疫苗,观察注射前后的体重变化.结果康赛宁可抑制HBsAg及HBeAg的分泌,使染色体DNA发生有规律的断裂,促使细胞发生凋亡.与乙肝疫苗联合免疫,可提高小鼠血清中HBs抗体水平.无论单用或合用康赛宁,对小鼠均无明显毒副作用.结论康赛宁对体外培养的人肝癌细胞系有影响,与乙肝疫苗联合免疫对小鼠有免疫增强作用.

  • 干扰素α2a联合美能治疗慢性丙型肝炎临床及病理观察

    作者:王明;孙海英

    目的观察干扰素α2a联合美能治疗慢性丙型肝炎的疗效.方法 52名临床确诊为慢性丙型肝炎的患者接受干扰素α2a与美能的联合治疗,以同期49名慢性丙型肝炎患者单独接受干扰素α2a治疗为对照组,治疗前后观察肝功能、肝纤维化指标、HCV RNA及肝穿活检结果.结果总胆红素、ALT、AST、HA、LN、IVC的改善程度治疗组明显优于对照组(P<0.05),病毒清除率治疗组为53.8%,对照组为38.8%(P<0.05),肝穿活检结果改善情况治疗组与对照组差异有非常显著意义(P<0.01).结论干扰素α2a联合美能对慢性丙型肝炎的临床及病理学指标均有明显改善,优于单独使用干扰素.

  • 免疫化疗对肾癌根治术后的远期疗效观察

    作者:王家强;王焱民;李义;孙文涛;谢英林

    目的探讨免疫化疗在肾癌根治术后的远期疗效.方法将50名经手术和病理证实为肾透明细胞癌的患者随机分成2组,化疗组25名,肾癌根治术后应用白细胞介素-2、干扰素和5-氟尿嘧啶治疗;对照组25名,行单纯肾癌根治术.比较2组术后生存率.结果观察1年,2组间生存率差异无显著意义(P>0.05),而3年及5年化疗组生存率分别为92.0%和84.0%,明显高于对照组(分别为68.0%和48.0%),差异均有显著意义(P<0.05).化疗组患者未发生严重副反应,药物治疗耐受性良好.结论肾癌术后免疫化疗可提高生存率.

    关键词: 肾肿瘤 免疫疗法
  • 重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)免疫效果的观察

    作者:孙俊业;徐冬冬;李德娟;王立成;陶航;陈胤忠;金立杰

    目的进一步观察重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)的免疫效果.方法选择江苏省响水县某中心小学学生及教师,经筛查HBsAg、anti-HBs和anti-HBc均为阴性的98名作为观察对象,使用10μg重组乙肝疫苗(CHO细胞),按0、1、6个月3针免疫程序进行免疫效果观察.结果全程免疫后1个月,85名学生中,抗-HBs阳性83名,阳转率为97.65%,GMT为172.50 mIU/ml,高可达498.12 mlU/ml.男性、女性的抗-HBs阳转率分别为97.50%和97.78%,GMT分别为170.11和148.42mIU/ml.结论 10μg重组乙型肝炎疫苗(CHO细胞)应用于小学生,免疫效果良好.

  • HIV抗体国家参考品(胶体金类试剂)的建立及其应用

    作者:李秀华;宋爱京;尹红章;王佑春

    目的建立HIV抗体国家参考品(胶体金类试剂)并对其应用效果进行分析.方法通过对阳性和阴性样品的筛选,确定候选参考品的组成,经标定,确定参考品的质量标准,并以此为标准对试剂的质量进行检测和评估.结果参考品由20份阳性、20份阴性、3份低检测限和1份精密性样品组成.质量标准为20份阳性样品,应均为阳性,20份阴性样品中应至少18份为阴性,低检测限样品应至少1份为阳性,且稀释用血浆应为阴性,精密度样品检测10次,其颜色反应一致.共检测进口注册、国内注册以及常规检定样品189批,其中进口注册样品合格率为81.8%,国内注册样品合格率为80.8%,常规检定样品合格率为96.2%.结论该参考品可反映试剂的质量水平,对保证试剂的质量具有重要作用.

  • 天花的威胁及其控制

    作者:安焕宇;过琴媛

    1.天花的危害及威胁天花是由天花病毒引起的急性病毒性传染病,是对人类具危害的疾病之一,在过去的几个世纪使千百万人丧生.在疫苗前时代,天花已成为婴幼儿的主要杀手.天花的感染者30%死亡,65%~80%的生存者留有深深的疤痕,且大部分集中在脸部.失明是天花的另一个后遗症.在18世纪的欧洲,三分之一的失明病例是由天花引起的.

  • 世界卫生组织无细胞百日咳疫苗质量控制与规程修订研讨会纪要

    作者:张庶民

    2006年3月15~17日,笔者受国家食品药品监督管理局和中国药品生物制品检定所委派,应WHO邀请,参加了在英国NIBSC举行的无细胞百日咳疫苗质量控制与规程修订研讨会.本次会议主要为修订WHO 1998年制定的<单价、联合无细胞百日咳疫苗的生产和质量控制技术指导原则>(TRSNo.878)作前期准备,并进行实验室研究方面的相关安排.

中国生物制品学分期目录
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