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中国生物制品学

中国生物制品学杂志

Chinese Journal of Biologicals 중국생물제품학잡지

统计源期刊
  • 主管单位: 中华人民共和国卫生部
  • 主办单位: 中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
  • 影响因子: 0.41
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 1004-5503
  • 国内刊号: 22-1197/Q
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: 12-128
  • 曾用名:
  • 创刊时间: 1988
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中国生物制品学杂志编辑部
  • 出版地区: 吉林
  • 主编: 封多佳
  • 类 别: 基础医学
期刊荣誉:
  • 狂犬病病毒CVS-11株全基因序列测定及分析

    作者:王玲;曹守春;杜加亮;董关木;唐青;唐建蓉;石磊泰;李加;吴小红

    目的 对狂犬病病毒标准攻击毒株CVS-11株进行全基因序列测定,并就主要抗原位点与我国现用狂犬病疫苗生产毒株进行比较,评价CVS-11株作为抗狂犬病病毒中和抗体检测毒株的适用性.方法 将CVS-11全基因组RNA分成8段进行RT-PCR扩增,分别将产物克隆入pGEM-T Easy载体中,测定全序列;用DNAStar软件包中的相应软件对基因全序列进行分析,并与5株生产用狂犬病病毒(CTN-1、aG、FluryLEP、PM和PV)进行基因比对分析和主要抗原位点比较.结果 CVS-11株基因组全长11 927 bp,其结构基因排列与已知其他狂犬病病毒相同,但G和M基因的非编码区偏长.CVS-11株与我国现用疫苗株的序列同源性在84.3%~99.5%之间.以相对保守的N基因作进化树分析,CVS-11株与PM株同源性高,与CTN-1和aG株的亲缘关系较其他疫苗株远.各毒株G蛋白抗原位点存在一定的氨基酸差异.结论 CVS-11株与我国现用疫苗株具有较高的同源性;CVS-11株与不同疫苗株G蛋白抗原位点的差异可能对不同疫苗免疫效果评价产生不同程度的影响.

  • 氟对二维和三维培养的成纤维细胞胰岛素样生长因子-1表达的影响

    作者:魏海峰;井玲;魏雁虹;刘辉;齐玲;赵志涛;张秀云;李才

    目的 观察不同浓度氟化物在不同时间段对二维(2D)和三维(3D)培养的成纤维细胞胰岛素样生成因子-1(IGF-1)表达的影响,并探讨其在氟化物刺激成纤维细胞成骨功能方面的作用.方法 在2D和3D培养系统中,将成纤维细胞L929分为对照组(F-浓度为0 mg/L)和6个染氟组(F榷度分别为0.000 1、0.001、0.1、1、10和20 mg/L),在不同染氟时间段(2D培养2、4、24、48和72 h,3D培养4、24、48、72和96 h),采用EIJSA法检测细胞培养上清中IGF-1蛋白的含量;免疫组化法(IHC)检测染氟成纤维细胞中IGF-1的表达;RT-PCR法检测染氟成纤维细胞IGF-1基因mRNA的转录水平.结果 染氟可明显刺激成纤维细胞培养上清中IGF-1蛋白的表达;各染氟组成纤维细胞胞浆IGF-1的阳性着色较对照组均明显增强;氟作用48 h,除F浓度为20 mg/L组外,其余各染氟组成纤维细胞IGF-1基因mRNA的转录水平较对照组均有不同程度的增强,但差异均无统计学意义.结论 在2D和3D两种培养条件下,氟化物均叮明显刺激成纤维细胞IGF-1的表达,提示在氟化物诱导成纤维细胞成骨功能增强的过程中,IGF-1可能发挥着重要作用.

  • 中国狂犬病病毒遗传多样性分析

    作者:孟胜利;徐葛林;程满荣;舒祥;雷勇良;朱风才;周敦金;王定明;明贺田;吴杰;严家新;杨晓明

    目的 分析中国狂犬病病毒(RV)的遗传多样性,为我国狂犬病的预防提供理论依据.方法 采用RT-PCR技术扩增26株RV N基因,并进行测序,与GenBank登录的序列进行比对,构建进化树,分析RV的基因分型和分组情况以及时间和空间的动态进化.结果 中国RV分为2个大的进化分支(8组),分支Ⅰ包括1~4组,分支Ⅱ包括5~8组,组内核苷酸同源性≥93.2%,氨基酸同源性≥94.3%;组间核苷酸差异性≥8.0%,氨基酸差异性≥1.7%;运用贝叶斯中的马尔科夫链的蒙特卡洛方法,估计中国RV N基因核苷酸的平均碱基替代率为1.408 9×10-4取代/位点·年,共同祖先出现在公元968年.结论 中国狂犬病病毒株均属于基因1型狂犬病病毒,存在跨地域、跨宿主传播;我国分支Ⅰ狂犬病病毒株与泰国、越南、菲律宾、印度尼西亚、马来西亚等东南亚国家分离的狂犬病病毒株起源相同;分支Ⅱ的毒株在全球分布.

  • 扩展青霉碱性脂肪酶结构基因的克隆与原核表达

    作者:卜秀娟;孟宪梅;柳增善;代平

    目的 克隆并原核表达扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)结构基因.方法 提取扩展青霉总RNA,经RT-PCR扩增PEL结构基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达质粒pET-28a-PEL,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白的表达形式及表达量,包涵体蛋白经变性、复性后,采用NaOH滴定法测定其酶活性.结果 经RT-PCR扩增获得约780 bp的PEL结构基因;所构建的重组表达质粒pET-28a-PEL经酶切及PCR鉴定正确;目的蛋白的相对分子质量约为28 000,以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的10%;发酵液及复性的包涵体蛋白酶活性可达12.44 U/ml.结论 已成功克隆并原核表达了PEL结构基因,为获得碱性脂肪酶高产基因工程菌株奠定了基础.

  • 丙型肝炎病毒分片段抗体检测及优势抗原表位分析

    作者:谢忠平;杨蓉;龙润乡;李华;白惠株;廖云;蒋蕊鞠;王燕;洪超

    目的 检测丙型肝炎病毒(HCV)分片段抗体,并分析HCV优势抗原表位,为HCV抗原、抗体检测及疫苗研究提供依据.方法 收集经ELISA法检测抗HCV阳性血清样品90份,使用总抗体检测试剂及抗HCV分片段试剂进行检测,并用荧光定量PCR对抗体弱阳性及阴性样品进行复核,分析不同片段出现的阳性率,从而分析HCV的优势抗原表位.结果 90份抗HCV阳性的样品经总抗体检测试剂检测,其中阳性78份(86.67%);90份抗HCV阳性的样品中,分片段试剂检测1个片段以上阳性样品59份(65.56%);其中C、NS3、NS4及NS5片段抗体阳性分别为56份(94.92%)、57份(96.6l%)、42份(71.19%)及47份(79.66%),NS3及C片段抗体是HCV的优势抗体.结论 HCV-C及NS3表位是HCV的优势抗原表位;HCV分片段抗体与总抗体检测试剂之间阳性检出率存在一定差异.

  • 热休克蛋白27在PSI诱导PC12细胞帕金森病模型早期的表达变化

    作者:刘韬;金英花;张瑜;常明;王丹萍;胡林森

    目的 观察热休克蛋白27(Hsp27)在蛋白酶体抑制剂PSI诱导PC12细胞帕金森病(PD)模型早期的表达变化,为深入研究PD的发病机制提供理论依据.方法 在PC12细胞中加入终浓度为10μmol/L的PSI,建立PD细胞模型,通过吖啶橙(AO)和溴化乙啶(EB)及HE染色进行鉴定;PSI作用3 h后提取蛋白,应用荧光差异凝胶电泳(DIGE)系统获得差异蛋白点,运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF Pro MS)鉴定差异蛋白.结果 PSI作用PCI2细胞24 h后,细胞内嗜酸性类Lewy小体形成,并发生细胞凋亡.PSI作用3 h后.有6个蛋白点表达量显著变化,其中4个蛋白点表达量增加,2个蛋白点表达量降低.蛋白点1经质谱鉴定为Hsp27,表达量增加了1.74倍.结论 在泛素-蛋白酶体系统(UPS)功能障碍引起PD细胞模型的早期病理变化过程中,可能通过诱导Hsp27表达量明显增加,从而抑制蛋白酶体抑制剂所引起的细胞毒性.

  • Ctr1基因mRNA转录水平与细胞内铜离子浓度的相关性

    作者:付世新;王瑶;罗春海;张丽;齐长学

    目的 分析铜特异性转运蛋白(Ctr1)基因mRNA转录水平与细胞内铜离子浓度的相关性.方法 从猪传代肾细胞PK15中扩增Ctr1基因,克隆并测序;采用半定量RT-PCR法检测不同浓度铜离子(0、7.8、15.6、31.2和62.5 p,mol/L)对PK15细胞中Ctr1基因mRNA转录水平的影响,以β-actin为内参;采用原子吸收光谱分析法检测细胞内铜离子的浓度.结果 所扩增的Ctrl基因与GenBank公布的序列同源性达到98%;PK15细胞Ctr-1基因mRNA的转录水平在铜添加量在7.8~62.5 μmol/L范围内呈双相反应,各试验组Ctrl基因转录水平均低于0 μmol/L;而细胞内铜离子浓度均高于0 μmol/L,以Ⅳ组含量高,且与其他各组差异有统计学意义.结论 Ctrl基因mRNA的转录水平与细胞内铜离子浓度呈负相关.

  • 人CD52基因的克隆及稳定转染细胞系的建立

    作者:刘友;屈浩;石琳;刘红芹;黄丽华;张宇光;朱卫彬

    目的 克隆人CD52基因,构建真核表达载体,并在CHO细胞中稳定表达.方法 提取人Hut-78细胞总RNA,采用RT-PCR法扩增CD52基因,定向克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)/CD52,通过脂质体法转染CHO细胞,建立稳定转染的细胞系CHO-CD52.采用RT-PCR、免疫荧光组化技术及流式细胞术检测目的基因和蛋白的表达.结果 RT-PCR扩增得到186 bp的DNA片段.重组表达质粒pcDNA3.1(+)/CD52经PCR、双酶切及测序证明构建正确.CHO-CD52细胞经RT-PCR分析,可见186 bp的目的基因条带;经免疫荧光检测,可见绿色荧光分布;经流式细胞术分析,阳性细胞百分率及荧光平均值分别为98.18和:193.56,.结论 已成功克隆了人CD52基因,并建立了稳定转染的CHO细胞系,为CD52单克隆抗体的制备及抗体药物的开发奠定了基础.

  • B族链球菌C5a肽酶表位的预测、分段表达及其免疫原性

    作者:岳丽琴;周育森;张庶民;杨永弘;沈叙庄

    目的 应用牛物信息学方法预测B族链球菌C5a肽酶蛋白(sCPB)的表位,分段表达其中4个功能活性区域,并分析其免疫原性.方法 用预测程序ProPred和ANTIGENIC预测SCPB的表位;分别构建C5a肽酶4个目的片段的重组表达质粒.经酶切测序正确后,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析目的蛋白的表达形式及表达量;并经镍柱亲和层析纯化,纯化的重组蛋白进行蛋白质谱分析和Western blot分析后,皮下免疫小鼠.ELISA检测小鼠血清抗体水平.结果 经预测,SCPB含1个既可结合MHC又具有B细胞表位特征的肽段.构建的4个重组表达质粒经酶切及测序鉴定正确,目的蛋白主要以可溶性形式表达,表达量约占菌体总蛋白的30%~70%.纯化的重组蛋白纯度可达90%,质谱分析表明与SCPB的相似性很高;Western blot分析表明.可与兔抗全长SCPB多克隆抗体反应.重组F1、FE、Fn蛋白免疫小鼠血清抗体滴度较高,三者差异无统计学意义;F2a蛋白抗体滴度低,与F1、FE和Fn蛋白差异有统计学意义.结论 已成功构建并高效表达了SCPB的4功能活性区域;Fn是重要的免疫优势表位功能区;本文为B族链球菌毒力机制的研究及亚单位蛋白疫苗的研制奠定了基础.

  • 干细胞分化为胰岛细胞的研究进展

    作者:王廷杰

    糖尿病是以高血糖为代谢特征的严重影响人类健康的疾病.目前,糖尿病较理想的治疗方法是胰腺移植,但受供体缺乏和免疫排斥两方面的限制而不能普遍应用.干细胞由于具有自我更新和多分化潜能,其作为糖尿病细胞替代治疗的种子资源,已成为目前研究的热点.本文对近年来干细胞分化为胰岛细胞的研究进展作一综述.

  • 人产肠毒素大肠杆菌基因工程疫苗的研究进展

    作者:王荣荣;马永平

    产肠毒素大肠杆菌(ETEC)是引起腹泻的主要致病菌之一,在世界范围内,每年可导致数亿人发生腹泻,尤其是发展中国家的婴幼儿和儿童.目前,世界各国通过构建新型的ETEC基因工程疫苗预防ETEC引起的腹泻.将ETEC的肠毒索基因和菌毛蛋白基因转化至无毒的受体菌中,构建出基因工程疫苗,免疫人体后可有效预防ETEC引起的腹泻.本文就ETEC的致病机理及国内外ETEC基因工程疫苗的新研究进展作一综述.

  • siRNA化学修饰及靶向转运策略的研究进展

    作者:杨兵;陈维贤;张莉萍

    siRNA的化学修饰及靶向转运策略已广泛应用于肿瘤、病毒感染性疾病及代谢性疾病的临床治疗研究,并取得一定的进展.本文主要对siRNA的化学修饰、细胞穿透性多肽、靶向性配体及纳米颗粒等方面的研究进展作一综述.

  • miRNA调控病毒与宿主细胞相互作用的研究进展

    作者:张传军;连海

    病毒是专性细胞内寄生物,其复制很大程度上依赖于宿主细胞.病毒与宿主细胞的相互作用对二者均具有重要意义.微小RNA(miRNA)是在多细胞真核生物中新近发现的一类重要的基因表达转录后调控分子,其作为关键的效应分子,在复杂的病毒与宿主相互作用网络中发挥重要作用.病毒和宿主细胞均可编码miRNA.病毒编码的miRNA能够直接改变宿主环境,包括免疫系统分子构成;而细胞编码的miRNA能够直接影响病毒的复制周期.本文主要对miRNA调控病毒与宿主细胞相互作用的新进展作一综述.

  • 胶体金免疫层析法快速检测水样品中的镉离子

    作者:向军俭;陈耀强;唐勇;徐霞玲;杨红宇;刘斌;刘小峰

    目的 研制检测水样品中镉离子残留的胶体金免疫层析快速检测试纸条.方法 采用免疫竞争法,将抗Cd2+-EDTA单克隆抗体-胶体金复合物包被于胶体金结合垫上,并将人工合成的Cd-iEDTA-BSA检测抗原包被在硝酸纤维素薄膜表面,作为检测线(T线),3~5 min后,根据颜色直观显示检测结果.对试纸条进行灵敏度、特异性和稳定性验证,并检测添标水样.结果 制备的试纸条对镉离子的低检测限为100 mg/ml;除了与Hg2+-EDTA有交叉反应外,与Fe3+、pb2+、Cu2+等类似物无交叉反应;试纸条在常温下放置8周稳定性良好;检测添标水样的结果与ICP-AES的检测结果一致.结论 胶体金免疫层析法操作便捷,稳定可靠,可作为水样中重金属镉离子残留现场检测和监控的有效手段.

  • 混合补料诱导高拷贝重组毕赤酵母高效表达X-HBsAg

    作者:王龙刚;王宇凯;何成;楼觉人;杨忠东

    目的 对高拷贝重组毕赤酵母表达x.HBsAg的诱导策略进行优化.方法 在摇瓶中分别诱导l、4、8拷贝数的重组毕赤酵母,ELISA检测X-HBsAg的表达量;在15 L发酵罐中对8拷贝的重组毕赤酵母进行诱导表达,分别考察甘油浓度对菌体比生长速率的影响、过渡阶段混合补料对菌体生长及细胞相对活性的影响、诱导阶段比生长速率对目的蛋白表达的影响以及诱导阶段混合补料对目的蛋白表达的影响.结果 8拷贝的重组毕赤酵母在摇瓶中诱导表达的X-HBsAg量明显高于1和4拷贝重组子.优化的发酵诱导策略为:初始补加甘油阶段控制甘油浓度在15 g/L;过渡阶段采用甲醇与甘油混合补料,控制甘油浓度在限制性浓度以下;诱导阶段采用甲醇与甘油混合诱导X-HBsAg表达,诱导初始阶段控制比生长速率在0.015/h以上,中后期在0.002/h左右;发酵92 h,X-HBsAg的表达量比单纯甲醇诱导提高约67%.结论 混合补料诱导较单纯甲醇诱导策略更有利于高拷贝重组毕赤酵母表达X-HBsAg.

  • 高转化效率甲基化酶缺陷大肠杆菌感受态细胞制备条件的优化

    作者:司苏晋;刘田福;雷小春;薛亮亮;张引红

    目的 优化高转化效率甲基化酶缺陷的大肠杆菌DM1感受态细胞的制备条件.方法 采用不同生长状态、转化冰浴时间、热激时间及转化后复苏时间的大肠杆菌DM1制备感受态细胞.分析转化效率.结果 A600值为0.39和0.69的菌液制备感受态细胞,转化冰浴时间为30 min,42℃热激处理90 s,大肠杆菌DM1的转化效率高;转化后复苏时间对细菌转化效率的影响不明显.结论 已优化了高转化效率甲基化酶缺陷的大肠杆菌DM1感受态细胞的制备条件,可满足大部分在质粒中进行的常规克隆的需要.

  • 高效液相色谱法测定人血白蛋白制品中乙酰色氨酸的含量

    作者:尉小平;王坚;范乐俊

    目的 应用高效液相色谱法测定人血白蛋白制品中乙酰色氨酸的含量.方法 参照<中国药典>三部(2005版)附录ⅢD,采用凝胶色谱柱,以紫外吸收检测器在280 nm波长处检测,按照<中国药典>三部(2005版)附录ⅢB中的公式计算人血白蛋白制品中乙酰色氨酸的含量.分析线性关系,计算加标回收率,并验证该方法的重复性.结果 乙酰色氨酸含量在0.16~0.64 mmol/L的范嗣内与峰面积有良好的线性关系,相关系数为0.999 92;3个浓度梯度(0.16、0.32和0.48 mmol/L)乙酰色氨酸的加标同收率分别为100.4%、103.9%和102.8%;连续5次检测人血白蛋白制品中乙酰色氨酸的含量,变异系数为0.46%.结论 应用高效液相色谱法测定人血白蛋白制品中乙酰色氨酸的含量,结果准确可靠.

  • 悬浮Vero细胞快速扩增轮状病毒

    作者:张标;易山;张光明;谢天宏;李鸿钧;孙茂盛

    目的 探讨在悬浮Vero细胞中快速扩增轮状病毒(RV)的方法.方法 Vero细胞经消化后,直接接种KMG1 b7株RV.采用微量滴定法、PAGE和RT-PCR等方法比较悬浮扩增、静置培养及微载体发酵培养RV的感染性滴度、基因组核酸带型和型特异VP7基因序列;采用电镜观察和Western blot鉴定悬浮扩增RV的形态及结构蛋白的抗原性.结果 悬浮细胞扩增的RV接种24 h后病毒感染性滴度达峰值,为6.00 lgCCID50/ml;而静置培养和微载体发酵培养分别在接种后(96±24)h和(48±6)h达峰值,分别为(6.00±0.25)lgCCID50/ml和(6.50±0.25)lgCCID50/ml.悬浮扩增的RV基因组呈典型的4-2-3-2 G1血清型带型,G1型特异基因VP7序列未发生突变.悬浮扩增的RV形态和结构蛋白的抗原性未发生改变.结论 在悬浮Vero,细胞中扩增RV可以缩短病毒制备周期,提高病毒收获量,有利于RV疫苗的研制或生产.

  • CDAP活化多糖制备5型肺炎链球菌荚膜多糖-破伤风类毒素结合疫苗

    作者:黄镇;陈玉秋;李薇;向左云;吴凯;陶佳明;范荣坤;何建东;方祖群

    目的 用1-氰基-4-二甲氨基.吡啶四氟硼酸(CDAP)代替溴化氰(CNBr)活化5型肺炎链球菌荚膜多糖,制备5型肺炎链球菌荚膜多糖-破伤风类毒索(TT)结合疫苗.方法 将5型肺炎链球菌荚膜多糖溶液加CDAP活化,经ADH和缩合剂EDAC与破伤风类毒素进行偶联,经凝胶过滤柱层析纯化,得到5型肺炎链球荫多糖-TT结合物,并对其生化指标、血清学特异性、安全性及免疫原性进行检测.结果 多糖-TT结合物的游离多糖含量与多糖的衍化率成反比;血清学特异性良好;经动物实验证明其安全性合格;具有良好的免疫原性,且游离多糖含量越低,免疫原性越强.结论 用CDAP活化工艺制备的5型肺炎链球菌荚膜多糖-TT结合物适宜制备疫苗.

  • 不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6的纯化及其免疫原性

    作者:陈敬;王建华

    目的 纯化不可分型流感嗜血杆菌(NTHi)外膜蛋白P6,并检测其免疫原性.方法 常规培养NTHi,根据外膜蛋白P6的特性纯化P6蛋白.Lowry法测定纯化P6蛋白的含量;SDS-PAGE检测纯化P6蛋白的相对分子质量及纯度;IEF-PAGE分析纯化P6蛋白的等电点;琼脂糖双向免疫扩散试验鉴定纯化P6蛋白;以纯化的P6蛋白免疫NIH小鼠,ELISA法检测小鼠血清中IgG抗体水平,并进行小鼠保护性试验.结果 纯化的P6蛋白含量为208μg/ml;相对分子质量为16 600,纯度为100%;等电点为5.49;琼脂糖双向免疫扩散试验证实所提取的蛋白为P6蛋白;ELISA检测显示,P6蛋白具有良好的免疫原性,免疫小鼠后能够诱导产生针对P6蛋白的抗体,其抗体水平呈剂量依赖关系,佳免疫剂量为10μg/只,佳免疫针次为3针;对20 LD50 NTHi SSI p/1225株攻击的小鼠保护率为80%.结论 已纯化了不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6,其具有良好的免疫原性和保护效果.

  • 猪圆环病毒病和繁殖与呼吸综合征二联灭活疫苗的安全性及免疫保护力

    作者:金扩世;韩松;鲁会军;李洋;杨尧;李昌;李霄;田明尧;金宁一

    目的 观察猪圆环病毒病(PCVD)和猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)二联灭活疫苗的安全性及免疫保护力.方法 分别用超剂量疫苗免疫妊娠母猪和3~4周龄断奶仔猪,以观察疫苗的安全性及对妊娠母猪产仔的影响;并用3批疫苗分别免疫3~4周龄断奶仔猪,检测血清中ELJSA和中和抗体效价;免疫后28 d,分别用PRRSV CC株和PCV2 NM株攻毒,观察临床反应,并进行病理组织学检查,计算疫苗保护率.结果 超剂量疫苗免疫对妊娠母猪和断奶仔猪均安全,无任何不良临床反应.免疫断奶仔猪后7 d可检测到血清抗体,PCV2及PRRSV攻毒后的保护率均不低于80%.结论 PCVD和PRRS二联灭活疫苗安全、有效,可用于PCVD和PRRS的预防.

  • 免疫毒素EGFR mab-RTA的制备及鉴定

    作者:申苏建;吴金明;金思思;黄智铭;吴建胜

    目的 制备由抗表皮生长因子受体(EGFR)单克隆抗体(mab)与蓖麻毒蛋白A链(RTA)偶联而成的免疫毒素(IT),并进行鉴定.方法 以 N-琥珀酰胺-3-(2-吡啶二硫)丙酸酯(SPDP)为偶联剂,制备免疫毒素EGFR mab-RTA,SDS-PAGE分析其纯度及成分,DAB显色法检测其对人肝癌HepG2细胞的结合能力.结果 SDS-PAGE分析显示免疫毒素成功构建,偶联物中EGFR mab与RTA的偶联比为1:1.16,免疫毒素基本保留了EGFR mab对HepG2细胞的结合能力.结论 利用SPDP可实现EGFR mab与RTA的成功偶联.

  • 重组人骨形态发生蛋白-7工程菌的高密度发酵

    作者:陈保立;葛鲁娜;王世立;张翠;韩金祥

    目的 建立重组入骨形态发生蛋白-7(dIBMP.7)工程菌的高密度发酵工艺.方法 采用摇瓶及发酵罐培养T程菌B121/pBV221-rhBMP-17,观察不同培养基、乙酸浓度、pH值、诱导时间等对工程菌菌体生长及目的蛋白表达的影响.在优化的发酵条件下培养工程菌,当菌体A鲫值达100时,42~C升温诱导,并对表达产物进行纯化.结果 发酵培养基与LB培养基培养的_T程菌目的蛋白的表达量无明显差异;乙酸可明显抑制菌体生长及目的蛋白表达;适于菌体生长和目的蛋白表达的pH值分别为6.8和7.6;佳诱导时同为3 h.以优化的发酵条件培养的工程菌诱导3 h后,目的蛋白的表达量可达菌体总蛋白的34.9%,终菌体A600值可达139.5;经纯化的目的蛋白纯度可达95%以上.结论 已初步建立了rhBMP-7工程菌的高密度发酵工艺.

  • 重组HIV-1DNA疫苗工程菌中试发酵工艺的优化

    作者:宋英今;金宁一;李霄;田明摇;张立树;李昌

    目的 优化重组HIV-1 DNA疫苗工程菌的中试发酵工艺.方法 优化质粒转化条件,制备工程菌Jm109/pVAX1-MEGp24种子液,连续传30代,检测其遗传稳定性;优化培养基成分、补料基质、补料方式和培养时间,确定佳发酵参数;并应用佳发酵参数,于50 L发酵罐进行3批中试规模的发酵,考察在发酵培养过程中质粒的稳定性和超螺旋质粒的比例.结果 工程菌在连续传代30次后,质粒拷贝数基本保持稳定;佳发酵参数为:采用以甘油为碳源的培养基,以梯度恒速流加方式补料,培养时间13 h;通过3批稳定发酵.终可获得湿菌67.0~68.6 g/L,质粒含量可达1.62~1.73 mg/g菌,超螺旋质粒的比例达93%以上.结论 已建立了稳定的重组HIV-1 DNA疫苗工程菌中试发酵工艺,为进一步规模化生产奠定了基础.

  • 重组人角质细胞生长因子异构体抗实验性肝纤维化的作用

    作者:姚高琼;周远大

    目的 观察重组人角质细胞生长因子(rhKGF)异构体(K102)对实验性肝纤维化的预防和治疗作用.方法 取90只 Wistar大鼠,随机分为K102大剂量组(2.0 mg/kg),K102小剂量组(0.5 mg/kg)和模型对照组,用50%CCL4与精制花生油按1:1(v/v)比例混合,灌服大鼠,每周2次,同时K102大、小剂量组皮下注射相应剂量的K102,模型对照组皮下注射等量溶媒,分别连续用药6周和8周.另取36只大鼠,随机分为3组,复制肝纤维化模型后,再给予相应药物6周,同时设正常大鼠对照组(12只).实验结束后处死各组动物,并采集血液和肝脏组织,检测肝功、肝组织羟脯氨酸含量,并进行肝脏病理和胶原特殊染色观察.结果 K102能明显改善大鼠的肝功,降低肝组织羟脯氨酸含量,与模型对照组比较,差异有统计学意义.肝脏病理观察显示,K102治疗组较模型对照组病变轻微;胶原特殊染色显示,K102治疗组中仅见少量胶原纤维.结论 K102对实验性肝纤维化有一定的预防和治疗作用,为临床研究提供了依据.

  • IL-1β-31、IL-10-819和TNF-α-1031基因多态性与幽门螺杆菌感染相关性胃溃疡及胃癌易感性的关系

    作者:苏善平;杨致邦;田一玲;向瑜;吴敏;马小京

    目的 分析人群中IL-1β-31、IL-10-819和TNF-α-1031基因多态性与幽门螺杆菌(H.pylori)感染相关性胃溃疡及胃癌易感性之间的关系,为临床诊断及预防该病提供新的思路和方法.方法 选取H.pylori阳性的51例胃溃疡患者、43例胃癌患者和100例健康对照者,采用PCR-限制性长度片段多态法和多重引物特异PCR法,检测其IL-1β-31、IL-10-819和TNF-α-1031位点,分析其多态性.结果 在胃溃疡组中TNF-α-1031各基因型的频率分布与健康对照组比较,差异有统计学意义.在胃癌组中TNF-α-1031各基因型的频率分布与健康对照组比较,差异有统计学意义;Logistic回归分析表明,与携带TNF-α-1031T/T者相比,携带TNF-α-103lC/C者发生胃溃疡的危险性为OR=5.84(95%CI:1.00~33.84),发生胃癌的危险性为OR=6.95(95%CI:1.19~40.63).在疾病组和健康对照组中,IL-10-819和IL-1β-31各基因型频率的分布差异无统计学意义.结论 TNF-α-1031基因多态性与胃溃疡、胃癌的易感性相关.

  • 丙型肝炎抗体确证试剂检测结果的分析

    作者:谷金莲;祁自柏;刘艳;于洋;刘越悦;国泰;梁争论

    目的 分析丙型肝炎抗体确证试剂的检测结果.方法 用两种国外抗HCV确证试剂(RIBA和MP)分别对89份抗HCV EIA试剂(Ortho)检测为高值阴性或弱阳性样品进行检测,按试剂说明判定结果.并对两种确证试剂对4种丙肝分片段抗体的检出率进行比较.结果 两种确证试剂RIBA和MP与Ortho试剂的总符合率分别为43.8%和47.2%,均出现了较多的不确定样品.两种试剂对丙肝NS3抗体和NS5抗体的检出率基本一致,MP试剂对丙肝核心抗体和NS4抗体的检出率显著高于RIBA试剂.结论 对于不确定样品,好结合临床症状及病人追踪检测进一步确诊.

    关键词: 丙型肝炎 抗体 确证
  • 上海市社区妇女对子宫颈人乳头瘤病毒及其疫苗的认知水平调查

    作者:赵戴君;龚向真;胡争光;丁玉;洪情芽;亓德云;张敏;蒋松云;徐爱娣

    近20年来,大量研究已证明,高危型人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)持续感染是宫颈癌及宫颈上皮内瘤变的主要病因[1].目前学术界已公认,通过注射疫苗、筛查和早诊早治,宫颈癌将有望成为人类第1个可预防的癌症.

中国生物制品学分期目录
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