中国生物制品学杂志
Chinese Journal of Biologicals 중국생물제품학잡지
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 影响因子： 0.41
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1004-5503
- 国内刊号： 22-1197/Q
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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肾综合征出血热原代地鼠肾细胞灭活疫苗纯化方法的研究
目的建立简便、适合大规模肾综合征出血热灭活疫苗的纯化方法.方法采用超滤浓缩、醋酸锌沉淀和柱层析(亲和层析、离子交换层析和凝胶过滤层析)等方法,对出血热原代地鼠肾细胞灭活疫苗进行提纯对比试验.结果用超滤浓缩和Sepharose 4FF凝胶柱层析或用醋酸锌沉淀和凝胶柱层析,纯化的疫苗均可达到质量标准,而用cellufine sulfate gel亲和层析和离子交换层析均不理想.结论建立了经济、适合大规模肾综合征出血热灭活疫苗的纯化方法.
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系列鼠抗CD分子单克隆抗体轻、重链可变区基因的克隆和序列分析
目的获取系列鼠抗人CD分子单抗的轻链及重链可变区基因并进行克隆和测序.方法采用RT-PCR技术,从WuT3、WuT4、WuTac、WuLCA、WuT9杂交瘤细胞总RNA中分别扩增出轻链和重链可变区基因,进行克隆并作核苷酸序列分析.结果以上几种抗体的轻重链可变区的PCR产物大小均为400bp左右,成功构建了pMD18-T-VL和pMD18-T-VH克隆载体,经限制性酶切分析,其大小与预期结果相符,并按ABI PRISM BigDye系统测序.结论经与Kabat、Blast抗体基因同源数据库比较,所获基因片段均为抗体基因.
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戊型肝炎病毒感染的恒河猴急性期粪便中病毒的分离与鉴定
目的研究准确、快捷、敏感的戊型肝炎病毒的分离及鉴定方法.方法采用蔗糖密度梯度离心法从感染戊型肝炎病毒的恒河猴急性期粪便中分离病毒,采用免疫电镜吸附法和ELISA相结合方法进行鉴定.结果检出率高,重复性好.结论为戊肝病毒组织培养及进一步研究奠定基础.
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在大肠杆菌K99(中国QH株)菌毛形成亚单位基因(fanC)的克隆和测序中发现IS1插入序列
目的构建大肠杆菌K99菌毛表达载体.方法通过逐级亚克隆的方法克隆K99菌毛形成亚单位基因(fanC),并进行序列测定和fanC亚单位的抗原决定簇模拟,以确定突变部位.结果克隆了包括K99菌毛形成亚单位基因(fanC)和部分fanD基因在内的一段基因,该基因与国外报道相比明显偏大.序列测定表明: 在fanC尾部多出24bp,在fanC与fanD的结合部有一800bp左右的新基因.经与基因库中大肠杆菌基因作同源性比较发现,该新基因为768bp的插入序列IS1.其他基因为K99自身fanC与fanD片段之间的过渡基因.IS1的插入未改变fanD基因的阅读框架,只是使fanC片段末端增加了8个氨基酸.fanC亚单位的抗原决定簇模拟结果显示,K99 fanC片段具有一个非常突出的亲水区域,根据经验它应是抗原决定簇所在的部位.结论首次发现大肠杆菌K99基因中含有插入序列IS1.
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发酵温度对重组工程菌生长密度和干扰素表达的影响
目的观察发酵温度对重组人干扰素α2a(IFNα2a)工程菌PBV888/DH5α生长密度和表达的影响.方法采用NBS-40L发酵罐,在发酵过程中调整培养温度,检测工程菌的生长密度和IFN表达量.结果经35℃培养至对数期,降温至30℃继续培养2～3h后升温至42℃进行诱导培养,连续实验3批次,平均生长密度A值为35.0,菌体湿重47g/L,IFN表达量为28×106IU/ml.结论确立了工程菌生长和IFN表达的适培养温度.
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甲型和乙型肝炎疫苗计划免疫管理模式及实施效果
目的为了有效控制甲型和乙型肝炎病毒的感染和发病,提高下一代人群免疫力.方法根据甲型肝炎和乙型肝炎的流行病学及免疫学特征,结合我市人群免疫状况,制订了一套切实可行的甲型和乙型肝炎疫苗计划免疫管理模式,对接种对象、免疫程序、接种剂量与方法、运转方式、疫苗供应、统计与报表等内容进行了科学、系统地要求,并通过全市计划免疫网络组织实施.结果通过管理模式的实施,疫苗接种建卡(簿)率达到99.52%,建证率达到98.34%;甲型肝炎疫苗接种率达到96.25%,乙型肝炎疫苗三针全程接种率达到98.30%.实施前后对比,甲型肝炎发病率从289.68/十万下降到21.35/十万,下降了92.63%;乙型肝炎发病率从200.37/十万下降到70.94/十万,下降了64.60%;血清中抗-HAV阳性率由33.80%上升到91.57%,抗-HBs阳性率由42.72%上升到88.76%;从1998-2000年,我市幼儿园、学校等儿童聚集单位未出现甲型和乙型肝炎的暴发疫情.结论收到了明显的社会效益,也进一步促进和扩大了我市计划免疫与疾病控制工作.
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预防O139霍乱B亚单位/全菌体口服疫苗的研究
目的研制预防O139霍乱的B亚单位/全菌体口服疫苗.方法应用重组霍乱毒素B亚单位及福尔马林灭活的O139霍乱弧菌全菌体,构建成B亚单位/全菌体疫苗,并进行安全性及免疫原性检测.结果经连续3天大剂量灌喂小鼠后,未见体重下降、发病或死亡现象.全部小鼠均健康活存.以腹腔或口服免疫小鼠后,均能产生外周血或肠道局部高滴度的特异抗体.免疫小鼠对O139活菌攻击有良好的保护作用.结论 B亚单位/全菌体口服疫苗在小鼠试验中安全性及免疫原性良好.
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牛神经生长因子的研制
目的寻找新的制备神经生长因子的材料和方法.方法利用牛精液为原料,进行两次阳离子交换层析.结果获得了纯的牛神经生长因子,相对分子质量为30000,比活性为400000BU/mg,FPLC检测结果为一个峰,电泳检测纯度大于95%.结论可以从牛精液中制备神经生长因子.
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疫苗动力学模型的拟合方法
在疫苗动力学研究中,常需用数年随访观察的实测数据拟合出一个适模型,以概括全部实测数据的信息,并预测在随访时间外的抗体水平及其变化趋势.本文所介绍的是如何根据实测数据,用小二乘法拟合出适的疫苗动力学模型.
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四株狂犬病街毒的免疫学特性
目的研究国内分离的4株狂犬病街毒的免疫学特性.方法采用免疫力试验及中和试验进行抗原性及免疫原性检测.结果 4株街毒抗原性存在一定差异,应用aG株疫苗免疫小鼠能保护4株街毒的攻击.结论 aG疫苗与4株街毒具有良好的交叉免疫性.
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在无血清培养基中代谢副产物对杂交瘤细胞生长代谢的影响:Ⅱ.氨的作用
目的在无血清培养基中,研究氨对杂交瘤细胞生长代谢的影响.方法在培养基中添加不同浓度的氨,考察细胞生长和代谢及单抗生成的变化.结果添加0.8mmol/L的氨时就对细胞生长和代谢有影响,当氨浓度达4mmol/L时,对细胞的生长代谢有明显的抑制,当培养基中氨浓度高于6mmol/L时,细胞生长停止,代谢受到严重影响.氨的添加降低了培养上清中的单抗浓度,但提高了单抗的比生产速率.结论氨对细胞生长和代谢有较大的影响,对单抗浓度的影响主要由细胞密度降低造成,单抗的比生产速率增加.
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大肠杆菌L-天冬酰胺酶的分离纯化及其特性
目的建立简单有效的L-天冬酰胺酶分离纯化工艺,研究L-天冬酰胺酶的特性.方法采用冷丙酮破壁处理,经稀碱液抽提、离子交换层析和亲和层析进行纯化.通过温度试验、pH试验、SDS-PAGE图谱、紫外吸收光谱等研究酶的特性.结果建立了简单高效的纯化工艺,可使L-天冬酰胺酶的纯度达94.4%,比活为520u/mg蛋白,总收率为65.7%.L-天冬酰胺酶的相对分子质量分别为143900和166700,均为有抗癌活性的EC-2组分,在270nm有大吸收.适作用温度为40～50℃,适作用pH为8.0～9.0,在40℃以下能保持稳定.结论建立了大肠杆菌L-天冬酰胺酶的分离纯化工艺,并研究了L-天冬酰胺酶的酶学特性.
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幽门螺杆菌热休克蛋白60基因的克隆及序列分析
目的获取人幽门螺杆菌热休克蛋白60基因(Hsp60),并将它克隆到质粒pET-22b(+)中进行核苷酸序列分析.方法利用PCR技术扩增Hsp60,并将其定向插入pET-22b(+)载体中,通过DNA序列分析仪进行核苷酸分析.结果 DNA序列分析表明,所克隆的Hsp60基因序列与GeneBank公布的一致.结论获得了序列正确的Hsp60基因,为其重组表达及相关研究奠定了基础.
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应用ELISA竞争法检测疫苗制品中残余的牛血清白蛋白
目的应用ELISA竞争(cELISA)法检测残余牛血清白蛋白(BSA).方法以BSA免疫家兔,获得高滴度的抗BSA血清;以BSA包被酶标板作为固相抗原,以梯度稀释的BSA为游离抗原,二者竞争结合抗体,以游离抗原浓度对数作为横坐标,相应吸收值为纵坐标作标准曲线,由对应样品的吸收值,可以求得样品中BSA含量.结果当检测200、50、20和5ng/ml样品时,其试验内变异系数分别为4.5%、7.8%、5.8%和14%,试验间变异系数分别为3.4%、8.8%、3.3%和30%.本试验还证明人血清白蛋白与牛血清白蛋白的交叉反应较低.结论 cELISA可初步用于疫苗中残余BSA含量的检测.
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重组人干扰素γ的分子结构及其生物活性
目的了解重组人干扰素γ的分子结构及其生物活性.方法采用细胞病变抑制法,以日本干扰素γ参考品为标准,计算国际单位.以4种不同方法检测相对分子质量.结果比活性≥3.0×107 IU/mg蛋白,相对分子质量低于理论值16900.氨基酸分析结果只有129个氨基酸,少于应有数目.N端氨基酸序列分析结果,15～19个氨基酸与理论序列相符.结论重组人干扰素γ C末端氨基酸有缺失,但不影响其生物活性.
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聚乙二醇修饰牛血红蛋白制备红细胞代用品的初步研究
目的探讨mPEG选择性修饰异源血红蛋白,制备红细胞代用品的可能性.方法使用mPEG修饰牛血红蛋白,分析其对牛血红蛋白理化性质的影响.结果平均偶联程度达到30%,导致牛血红蛋白的电泳迁移率,吸收光谱、粘度和胶体渗透压改变.结论尽管还有很多问题需要解决,mPEG修饰牛血红蛋白制备红细胞代用品具有深入研究的价值.
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应用U937细胞泡沫化模型检测人血高密度脂蛋白生物学功能
目的准确检测人血高密度脂蛋白(HDL)的生物学功能.方法采用U937细胞泡沫化模型,检测HDL逆向转运细胞内胆固醇(Ch)的生理功能.用Brad Ford方法检测蛋白质(Pro)含量,Ch试剂盒检测细胞内Ch含量,并比较不同剂量HDL转移出细胞内Ch的量.结果在一定的HDL浓度范围内相关性好(r≥0.98),重复性高(CV=6.1%),回收率为91.8%～110.5%.结论该方法能更直观地反映HDL转运胆固醇的功能.且具有使用人源细胞、操作简便和易于推广应用的特点.
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应用毕赤酵母表达中国株HIV-1核心蛋白Gag
目的构建含HIV-1Gag全长基因的重组酵母表达质粒pPICGAG,并在毕赤酵母中进行表达.方法用Not I和XhoI将含HIV-1 Gag全长基因的质粒pKSGAG双酶切后,克隆到酵母表达载体pPIC9中,构建了重组表达质粒pPICGAG.pPICGAG用SacI线性化后,电转化毕赤酵母GS115,PCR鉴定阳性酵母转化子,并分别将PCR阳性的酵母转化子在BMGY和BMMY培养基中进行诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE电泳分析.结果酵母转化子的整合率为72.7%.SDS-PAGE结果显示表达蛋白的相对分子质量为55000左右,与预计计算的值相同.Western blot结果显示表达蛋白能与单克隆抗体发生特异性反应.结论在毕赤酵母中成功地表达了HIV-1核心蛋白Gag,且表达的蛋白具有良好的反应原性和特异性.
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开发天然药物 促进人类健康
一、实现天然药物产业现代化迫在眉睫1.天然药物产业的现状2001年12月11日,中国正式加入世界贸易组织(WTO),这是中国经济发展中的重大转折点.但我们必须清楚地认识到,加入WTO后,我国的医药产业将面临严峻的考验.目前,国内的化学药品多以仿制为主,90年代末,我国西药品种有97.4%是仿制.在生物工程制药方面,已批准上市及正在研制的药物中,只有rhu IFNα1b、r-sk、r-bFGF和rhu- EGF是我国自己从基因的结构与功能做起,拥有自主知识产权的国家一类新药,其余均为仿制而来[1].也就是说,我国医药产业严重地存在着侵犯知识产权的问题,随时可能遭受起诉.而按照国际知识产权保护惯例,仿制国外一个专利药品,外方要索取4-10亿美元的巨额赔偿.而且,我国生物医药企业一直存在着规模小、重复多、资金散的不良现实状态.同时,国内基因工程产品与国外同类产品相比也没有价格优势.这一切都决定着,入世后,我国化学制药及生物制药行业将面临重重困难,甚至遭受重大打击.
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应用实时荧光定量PCR检测机采献血者HCV
<中国输血技术操作规程>规定,献血者必须进行酶联免疫(ELA)方法HBsAg、抗-HCV、抗-HIV检测.而抗-HCV检测的窗口期为70天,就目前的检测方法不可避免地要出现漏检.采用PCR方法检测病毒核酸,可将窗口期缩短到13天.常用PCR方法操作复杂,且不能进行定量检测.我们采用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测,省去了电泳照相分析等一系列过程,同时采用先进的分析软件进行分析,提高了检测结果的准确性.
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接种麻疹疫苗引发重症多形性红斑1例
1.发病与诊治史某,男,23月龄,莱芜市城区某村人.1998年12月23日下午17时,于左上臂三角肌皮下接种麻疹疫苗0.2ml.当晚22时,口周皮肤出现米粒大小红色斑丘疹,略有水肿,自觉瘙痒,经常搔抓.村卫生室给予柴胡、扑尔敏、氟轻松等药物治疗效果不佳,皮疹逐渐增大、增多.遂于12月27日就诊于驻泰安某部医院.
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蛋白质亚单位疫苗的前沿设计
疫苗的产生对人类健康的保障起着重大作用.从历史的角度而言,疫苗应用先于对免疫系统本身认识,并帮助人们对该系统进行深入的了解.随着科学的发展,特别是医学生物学、分子生物学以及用上述方法对人类较相近动物-小鼠的动物模型研究和人类本身存在免疫疾病的研究,使人们对免疫学与疫苗学有了较多的认识.现今人们把疫苗主要分为3大类别,即活疫苗、灭活疫苗和亚单位疫苗.尽管减毒活疫苗仍将继续发挥作用,一些灭活疫苗也仍然在使用,但同亚单位疫苗相比,无论是减毒活疫苗还是灭活疫苗,由于许多非必要成分的存在,往往给接种者带来许多副反应,而且人们一直对一些活疫苗株有返祖危险性存在着忧虑,因此人们转向寻找成分比较简单的亚单位疫苗.亚单位疫苗包括结构与组成较为明确,并可以引起免疫保护的一类蛋白质、脂多糖和荚膜多糖类等微生物组份.本文将根据现今人们对蛋白质结构的认识,并利用电子计算机系统重点讨论蛋白质亚单位疫苗的设计.为讨论方便,先略述一下背景知识.
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3R理论的形成、发展及在生命科学研究中的应用
一、3R理论的形成及发展3R是Reduction(减少)、Replacement(替代)和Refinement(优化)的简称. Reduction是指在科学研究中,使用较少量的动物获取同样多的试验数据或使用一定数量的动物能获得更多试验数据的方法. Relacement是指使用其他方法而不用动物所进行的试验或其他研究课题,达到某一试验目的.或者说是使用没有知觉的试验材料代替以往使用神志清醒的活的脊椎动物进行试验的一种科学方法.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
