中国生物制品学杂志
Chinese Journal of Biologicals 중국생물제품학잡지
- 主管单位： 中华人民共和国卫生部
- 主办单位： 中华预防医学会,长春生物制品研究所有限责任公司
- 影响因子： 0.41
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1004-5503
- 国内刊号： 22-1197/Q
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
旋毛虫两个发育时期丝氨酸蛋白酶的结构及功能的比较与分析
目的 比较并分析旋毛虫成虫期及新生幼虫期丝氨酸蛋白酶基因和蛋白的结构及功能.方法 应用NCBI、EMBL、MEGA、ExPasy 、TMHMM、SignalP、PROSITE、Coils、SYFPEITHI等多种在线生物信息学网站和软件,对旋毛虫成虫期和新生幼虫期丝氨酸蛋白酶基因(Zh68和T668)的同源性、系统发育进化状况进行分析,并预测相应蛋白(SP1和SP2)的基本理化性质、跨膜区、motif、结构域、亚细胞定位、二级及三级结构、细胞抗原表位等.结果 Zh68和T668为旋毛虫特有基因,但核苷酸同源性仅为48％,SP1和SP2的氨基酸同源性为27.5％.SP1和SP2均为不稳定的亲水性蛋白,N-末端均有一个信号肽的分泌蛋白;二级及三级结构类似,并预测出两者佳B及T细胞抗原表位,但SP2有一个跨膜螺旋结构,为膜蛋白.结论 旋毛虫成虫期的SP1是非跨膜蛋白,可能参与虫体在肠道寄生及发育、繁殖;新生幼虫期的SP2是跨膜蛋白,可能参与虫体的入侵及迁移.
-
细胞外调节蛋白激酶1/2磷酸化对嗜心性柯奇病毒B3型感染心肌细胞H9C2能力的影响
目的 探讨细胞外调节蛋白激酶1、2 (extracellular regulated protein kinases 1、2,ERK1、2)磷酸化对嗜心性柯萨奇病毒B3型(coxsackie virus B3,CVB3)感染心肌细胞H9C2能力的影响.方法 通过检测CVB3对心肌细胞H9C2的半数感染量(TCID50)确定病毒的作用浓度,用该浓度CVB3分别作用心肌细胞H9C2 0、20、40和60 min,检测细胞中ERK1/2的磷酸化情况.将ERK1、2的磷酸化激动剂Ceramide C6作用于H9C2细胞,同时加入CVB3,检测TCID50.结果 确定CVB3对H9C2细胞的TCID50为10-7.1,该浓度CVB3作用心肌细胞H9C2 40和60 min时,细胞中磷酸化ERK1、2表达量低,明显低于0min (P＜0.01).加入激动剂Ceramide C6后,CVB3感染心肌细胞H9C2的TCID50为10-6.47.结论 ERK1、2磷酸化可抑制CVB3感染心肌细胞H9C2的能力,本实验为病毒性心肌炎发病机制的研究奠定了基础.
-
大鼠骨髓间充质干细胞向成骨与成脂分化过程中相关基因的表达变化
目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向成骨与成脂分化过程中相关基因表达的变化.方法 采用全贴壁法分离培养大鼠BMSCs,并观察其形态学特征的变化,MTr法检测其生长状况,并绘制生长曲线.分别采用成骨和成脂诱导剂对第4代BMSCs进行诱导分化,应用碱性磷酸酶试剂盒、茜素红和油红O染色液检测其ALP活性、成骨和成脂分化能力;RT-QPCR检测诱导0、7、14和21 d的成骨分化相关基因Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、碱性磷酸酶(ALP)及成脂分化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxidase proliferator activated receptor gamma,PPARy)和脂肪酸结合蛋白(FABP4)的表达变化.结果 全骨髓贴壁法能成功分离培养BMSCs,传代细胞生长增殖迅速,以长梭形细胞生长为主,细胞生长曲线呈S形.第4代BMSCs分别经成骨和成脂诱导剂诱导后,ALP、茜素红和油红O染色均呈阳性;诱导7、14和21 d后,Runx2、OCN、ALP、PPARγ和FABP4基因mRNA的表达量均显著高于Od (P＜ 0.05);成骨分化过程中,Runx2和ALP在第7天时表达量高,之后呈下降趋势,OCN的表达量呈稳定上升趋势;成脂分化过程中,PPARγ在第7天时表达量高,FABP4始终高表达.结论 BMSCs具有易于体外分离培养、扩增和经诱导后具有多向分化潜能等特点,成骨和成脂分化相关基因的表达量随诱导时间延长而变化,呈明显的时序性表达差异,提示分别在成骨与成脂分化过程中起重要调控作用,为BMSCs在骨、细胞和基因等工程中的机制研究提供了实验依据.
-
脂多糖对奶牛乳腺成纤维细胞增殖速率、胞内Toll样受体及其信号通路相关基因mRNA表达水平的影响
目的 探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对奶牛乳腺成纤维细胞(bovine mammary fibroblast,BMFB)增殖速率、胞内Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)及其信号通路相关基因rnRNA表达水平的影响.方法 原代培养BMFB,用LPS(终浓度10 μg/mL)刺激BMFB不同时间后,经CCK-8法检测BMFB的增殖速率,实时荧光定量PCR法检测BMFB胞内TLR及其信号通路相关分子mRNA的表达水平.结果 LPS刺激BMFB 0、1、3h后,BMFB增殖速率差异无统计学意义(P＞0.05),LPS刺激BMFB 6 h开始,试验组BMFB的增殖速率明显快于对照组(P＜0.05).与对照组比较,LPS刺激BMFB 12 h后,TLR2、TLR4、信号转导通路激活核转录因子κB(nuclear factor of kappa B,NF-κB)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha-α,TNF-α)和白细胞介素-1受体相关激酶1(interleukin-1 receptor associated kinase 1,IRAKl)基因mRNA表达水平显著升高(P＜0.05),髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)基因mRNA的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 BMFB可能通过TLR2和TLR4识别LPS,并与NF-κB信号通路级联诱导炎性细胞因子和趋化因子的释放,参与奶牛乳腺先天性免疫应答.
-
冻干甲型肝炎减毒活疫苗原液制备中两种抽提方法效果的比较
目的 比较冻干甲型肝炎减毒活疫苗原液制备中两种抽提方法的效果,为生产工艺的优化提供参考.方法 取超声后甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)收获物,分别以抽提方法A和B进行抽提纯化,并对制备的疫苗原液进行无菌检查、支原体检查及蛋白含量、病毒滴度检测.以优化的抽提方法连续制备3批试验疫苗原液及成品,并参考《中国药典》三部(2010版)及企业内控监测指标相关要求进行全面检定.结果 与抽提方法A相比,抽提方法B制备的原液蛋白含量明显降低,且差异有统计学意义(P＜0.001),而病毒滴度差异无统计学意义(P＞0.05).以抽提方法B连续制备的3批原液、成品的各项检测指标均符合相关要求.结论 以抽提方法B进行疫苗生产,提高了原液的纯度及疫苗质量.
-
安琪酵母浸出物FM902中内毒素含量检测方法的建立
目的 建立安琪酵母浸出物FM902中内毒素含量检测方法.方法 采用干热程序有效性试验、灵敏度复核试验、FM902凝胶法干扰试验和FM902凝胶半定量试验检测FM902中的内毒素含量.结果 FM902浸出物中所含内毒素为5 EU/mg,符合《中国药典》三部(2015版)的限量标准.结论 成功建立了酵母浸出物FM902中内毒素含量检测方法,该方法操作简便,重复性好,可作为酵母浸出物中内毒素含量的评估方法.
-
人肺炎支原体的分离培养及鉴定
目的 分离培养人肺炎支原体(Mycopla pneumoniae,MP)菌株,并进行鉴定.方法 通过配制添加抗生素的培养基或采用滤膜过滤等几种预处理方法去除大部分真菌和细菌,再对富集培养时间进行摸索,从住院儿童咽拭子及痰样本中分离培养人MP菌株,通过PCR、基因分型、培养特性、生化特性及血清学特性几方面对分离菌株进行鉴定.结果 通过依次添加抗生素、滤膜过滤等几种预处理方法传代能去除大部分真菌和细菌,对咽拭子接种6～8h、痰样本接种18 ～ 24 h后进行传代,终从978株儿童咽拭子及痰样本中分离到42株人MP菌株,所分离菌株从PCR特性、培养特性、生化特性及血清学特性几方面均鉴定为MP,其中39株为P1-Ⅰ型,3株为P1-Ⅱ型.结论 建立了从临床标本中分离培养MP菌株的方法,并成功分离到42株MP菌株,对MP的研究和诊断及MP疫苗研发具有重要的应用价值.
-
金黄色葡萄球菌噬菌体扩增方法的建立
目的 建立金黄色葡萄球菌噬菌体扩增方法.方法 通过比较培养体系中宿主菌浓度、噬菌体效价、培养时间及氯化钙对金黄色葡萄球菌噬菌体扩增的影响,确定佳噬菌体扩增条件.结果 经优化后,扩增培养体系中金黄色葡萄球菌宿主菌浓度为1×107个/mL,噬菌体效价为1×103 PFU/mL,扩增培养6～8h,噬菌体效价达较高水平,氯化钙对噬菌体扩增无影响.结论 建立了金黄色葡萄球菌噬菌体扩增方法,为金黄色葡萄球菌噬菌体治疗制剂的研制奠定了基础.
-
重组全人源抗表皮生长因子受体单克隆抗体生物学活性检测方法的Potency验证
目的 对已建立的重组全人源抗表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)单克隆抗体生物学活性检测方法进行Potency验证.方法 共4个验证批次,每个批次包括1个对照组和3个考察组,对照组抗体浓度设定为100％,8个浓度梯度,考察组抗体浓度为对照组的60％、70％、80％、100％、120％、130％和140％.用已建立的生物学活性检测方法测定对照组和各考察组的抗体活性,得到的结果用PLA 3.0软件进行分析,判断回归、线性、平行性、等效性是否合格,并得到实测效能.准确度以回收率表示.并以标称效能为横坐标,实测效能为纵坐标作线性回归,验证其线性和范围.结果 各考察组的回归、线性、平行性、等效性均合格;各考察组的回收率均值在80％ ～125％范围内;标称效能与实测效能作线性回归,γ轴截距为-1.7165,斜率为0.9846,相关系数为0.8679,均符合标准.结论 该方法用于评价目标活性的样品浓度区间在上述考察范围内(即60％ ～ 140％)时,可以真实地反映抗EGFR单抗的生物学活性.
-
Sabin株脊髓灰质炎病毒经透析处理后病毒回收效果评价
目的 采用透析法对Sabin株3个型别的脊髓灰质炎病毒收获液进行透析后的病毒回收效果评价.方法 高病毒滴度时,对Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒收获液分别进行透析,比较每个型别病毒收获液透析前后的病毒感染性滴度回收率,及透析后的甲醛清除率;低病毒滴度时,选取101、100、10-1 CCID50/mL 3个滴度的Sabin株Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒液,分别进行透析,将相同型别及滴度的透析前后样品接种至Hep-2细胞上进行3次传代,比较透析前后细胞病变比率及病毒滴度.结果 高病毒滴度时,各型别病毒收获液透析后与透析前相比,样品体积和感染性滴度均未发生较大变化(P＞0.05),透析后甲醛清除率达99％以上.10 1 CCID50/mL低病毒滴度时,各型别病毒3次传代均能100％引起细胞病变;100 CCID50/mL低病毒滴度时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型病毒第1次传代引起细胞病变比率分别为66％、33％和33％,第2、3次传代均能100％引起细胞病变;10-1CCID50/mL低病毒滴度时,3个型别病毒3次传代均不能引起细胞病变.所有细胞病变后检测病毒滴度均在6.0 IgCCID50/mL以上.结论 Sabin株3个型别的病毒收获液经透析后,活病毒的回收率较高,基本无损失,透析法可作为该病毒的纯化方法.
-
纳米抗体应用于肿瘤治疗的研究现状
纳米抗体(nanobodies,Nbs)具有较小的相对分子质量,其独特的分子结构使其适用于疾病诊断治疗等诸多领域,由于其缺少Fc段,不能引发普通单抗药物在肿瘤治疗中重要的细胞毒作用,在肿瘤治疗领域的前景一度不被看好,但随着药物研究的不断深入及更合理的设计,Nbs在该领域的应用正在不断扩展.目前研发中的Nbs是以直接拮抗作用、与效应分子相连、与药物递送系统相连等多种形式参与肿瘤治疗,并可联合应用于靶向性放射核素疗法及光动力疗法中.本文就Nbs的成药特性、Nbs在肿瘤治疗中的应用及目前处于临床试验阶段Nbs药物的研究现状作一综述.
-
表皮生长因子受体在肿瘤发生、发展中的研究进展
表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一种具有酪氨酸激酶活性的膜表面蛋白,普遍表达于人体的表皮细胞和基质细胞,并在人类多种肿瘤细胞中高表达.EGFR在一系列恶性肿瘤的发生发展中起重要作用,对促进肿瘤细胞生长、细胞增殖、血管生成、肿瘤细胞侵袭、转移及细胞凋亡均有一定的调节作用.EGFR的表达水平可作为判断多种肿瘤预后的指标.本文主要对EGFR在肿瘤发生和发展中的研究进展作一综述.
-
1型单纯疱疹病毒疫苗的研究进展
1型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)感染可导致口唇疱疹、生殖器疱疹、脑炎等症状,并可长期潜伏于神经系统.目前尚无干预手段能有效预防疱疹病毒原发感染以及控制疱疹病毒潜伏感染和复发性感染.疫苗依然被认为是控制病毒感染的理想方式.本文就HSV-1疫苗的研究进展作一综述.
-
肠道病毒68型的研究进展
肠道病毒68型(enterovirus D68,EV-D68)于1962年首次分离自患有肺炎和支气管炎的住院儿童.EV-D68属于病毒科,肠道病毒属,肠道病毒D组.自被发现后有关EV-D68的报道甚少,至2005年后才开始大规模的暴发.北美于2014年暴发了有史以来大规模的一次EV-D68流行.EV-D68感染儿童可引起咳嗽、喘息和血氧不足等急性呼吸道疾病.近暴发的急性驰缓性麻痹也被怀疑与EV-D68感染相关.本文对EV-D68的生物学特征、流行病学、致病机制和临床特征等研究进展作一综述.
-
肺炎链球菌表面蛋白A的研究进展
肺炎链球菌(Streptococcus pneumonia,Sp)是儿童社区获得性感染的主要病原菌.目前使用较多的7价结合疫苗及23价肺炎链球菌多糖疫苗在长期使用后会出现血清型替换,这可能会使接种疫苗的受益程度下降.寻找新的候选疫苗是有效预防Sp疾病的重要途径,蛋白质疫苗因此备受关注.本文就近年来研究较多的下一代Sp疫苗的重要的候选蛋白质抗原,肺炎链球菌表面蛋白A(pneumococcal surface protein A,PspA)的研究进展作一简要综述.
-
甲肝病毒YN5D株在人二倍体细胞系W2上的适应性
目的 研究甲肝病毒YN5D株在人二倍体细胞Walvax-2(W2)上的传代适应性,并确定其在W2细胞上培养的适条件.方法 将甲肝病毒YN5株P23代采用混合吸附的方式接种于T225细胞培养瓶,连续传至30代,检测各代次YN5D株病毒的抗原滴度及感染性滴度;将甲肝病毒YN5D株P29代以不同的MOI接种W2细胞,以佳MOI接种细胞,确定佳收毒时间;建立甲肝病毒YN5D株三级种子库,并进行检定.结果 甲肝病毒YN5株连续传至30代,抗原滴度及感染性滴度均保持在10 240 EU/mL和7.00 lgCCID50、mL以上;当接毒比例为0.5 MOI时,抗原滴度及感染性滴度均达到高;当培养至24～28 d时,抗原滴度及感染性滴度均达到高,分别为2 560 EU、mL和7.24 lgCCID50/mL.三级毒种库各项检定结果均符合《中国药典》三部(2015版)要求.结论 确定了甲肝病毒YN5D株在人二倍体细胞系W2上的传代适应性,并优化了细胞工厂的培养条件,为人二倍体甲肝疫苗临床申报样品的制备工艺奠定了基础.
-
A群C群脑膜炎球菌多糖-白喉毒素无毒突变蛋白CRM197结合疫苗的稳定性
目的 分析以白喉毒素无毒突变蛋白CRM197为载体的A群C群脑膜炎球菌结合疫苗原液及成品在不同储存条件下主要质量指标的变化,为该疫苗保存条件及有效期的制定提供依据.方法 将A群、C群结合物原液分别在2～8℃放置3、6、8个月,20～25℃放置4、6周后,进行主要质量指标的检测;结合疫苗成品于2～8℃放置3、6、12、18、24个月,20～25℃放置3、6个月,35 ～ 37℃放置3、4周后,进行主要质量指标的检测.结果 C群结合物原液2～8℃保存8个月,20～25℃放置6周后,A群结合物原液2～8℃放置8个月,20 ～ 25℃放置3周后,各项质量指标均符合要求;成品于2～8℃放置24个月,20～25℃放置6个月,35～37℃放置4周后,各项质量指标均符合要求.结论 以CRM197为载体的A群C群脑膜炎球菌结合疫苗原液及成品均具有良好的质量稳定性.
-
尘螨制品抗原活性检定用血清国家标准品的建立
目的 建立尘螨制品抗原活性检定用血清国家标准品.方法 根据过敏患者临床症状和血清学检测筛选并确认尘螨过敏患者,收集符合入选标准的患者血清并混合,采用ImmunoCAP实验检测该混合血清中针对屋尘螨和粉尘螨特异性IgE抗体含量,经协作标定终确定混合血清的特异性IgE数值.将血清标准品和企业内参血清分别与该企业样品混合并孵育过夜,经ImmunoCAP实验检测屋尘螨和粉尘螨变应原制剂活性.结果 该血清国家标准品中,针对屋尘螨的特异性IgE含量为247.4 KUA/L,针对粉尘螨的特异性IgE含量为243.4 KUA/L.血清国家标准品与企业内参血清在检测结果上具有较高的一致率.结论 建立了我国第1批尘螨制品抗原活性检定用血清国家标准品,已被国家药品标准物质委员会批准正式使用,批号为290002-201601.
-
重组人源化抗程序性死亡受体-1单克隆抗体关键质控方法的建立
目的 建立重组人源化抗程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)单克隆抗体关键质量指标的质控方法.方法 经胰蛋白酶切后采用反相高效液相色谱(reversed phase high performance liquid chromatography,RP-HPLC)肽图法对3批重组人源化抗PD-1单克隆抗体进行鉴别,同时采用还原、非还原型十二烷基磺酸钠毛细管凝胶电泳(capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfonate,CE-SDS)法、分子排阻高效液相色谱(size exclusion high performance liquid chromatography,SEC-HPLC)法、毛细管等电聚焦电泳(capillary isoelectric focusing,cIEF)法、阳离子交换高效液相色谱(cation exchange high performance liquid chromatography,CEX-HPLC)法及混合淋巴细胞反应与竞争ELISA相结合的方法分别检测3批重组人源化抗PD-1单克隆抗体的纯度、单体和聚体含量、等电点、不同电荷异构体的含量及生物学活性.结果 3批重组人源化抗PD-1单克隆抗体(批号为batch1、batch2、batch3)的肽图图谱与参考品一致;还原型CE-SDS的纯度分别为97.8％、98.1％和97.9％,非还原型CE-SDS纯度分别为95.7％、95.4％和95.5％;单体含量分别为99.3％、99.1％和99.4％,聚体含量为0.5％、0.6％和0.4％;主峰等电点均为7.4;酸性区含量分别为21.8％、21.4％和21.6％,主峰含量分别为58.4％、58.6％和58.7％,碱性区含量分别为19.8％、20.O％和19.7％;相对生物学活性分别为112％、98％和102％.结论 本实验建立的重组人源化抗PD-1单克隆抗体关键质量指标的质控方法可用于该制品的常规质量控制.
-
A、C群流脑多糖结合疫苗与A群流脑多糖疫苗序贯加强免疫效果观察
目的 观察A、C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗(MCV-AC)和A群流脑多糖疫苗(MPV-A)序贯加强免疫效果.方法 对118名2岁内已完成2剂次MPV-A或MCV-AC基础免疫接种的儿童,3～4岁时进行1剂次MCV-AC加强免疫.采集免疫前后血清标本,分别测定A、C群杀菌抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT),计算阳转率.根据既往流脑疫苗基础免疫接种史,分两个观察组(MCV-AC和MPV-A)进行分析.结果 加强免疫前,MCV-AC和MPV-A组A群抗体阳性率(18.75％和14.28％)和GMT(2.09和1.79)差异均无统计学意义(P＞0.05);两组间C群抗体阳性率(均为0)差异无统计学意义(P＞0.05),GMT(1.30和1.00)差异有统计学意义(P＜0.05).加强免疫后,MCV-AC和MPV-A组A群抗体阳性率(97.91％和100.00％)和GMT(241.63和227.32)差异均无统计学意义(P＞0.05),同组间加强免疫前后抗体阳性率和GMT差异均有统计学意义(P＜0.05);两组间C群抗体阳性率(89.58％和92.85％)差异无统计学意义(P＞0.05),GMT(106.09和105.00)差异有统计学意义(P＜0.05),同组间加强免疫前后抗体阳性率和GMT差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 A、C群流脑结合疫苗有必要进行加强免疫,其加强免疫效果不受基础免疫疫苗种类的影响,均能产生有效的免疫应答.
-
不同时间间隔水痘疫苗应急接种有效性分析
目的 分析首发水痘病例发病后不同时间间隔水痘疫苗应急接种的有效性,确定有效开展疫苗应急接种的时间.方法 2013年6月至2015年12月,将符合《上海市水痘疫苗应急接种实施方案》的上海市范围内幼托机构、小学、初中、高中、中等职业技术学校等集体机构中水痘疫苗接种的学生作为观察对象,在首发水痘病例发病后,不同时间间隔(O～3d、4～7 d、8～ 14d、15 ～ 21 d和22 d及以上)应急接种水痘疫苗,观察首发水痘病例发病后,不同时间间隔疫苗应急接种后水痘的继发情况.结果 首发水痘病例发病后,间隔O～3d开展应急接种组水痘续发率低于间隔4～7 d组,同时也低于间隔8～ 14和15 ～ 21 d组(P均＜0.003);间隔4～7d组低于间隔8～14和15 ～ 21 d组(P均＜0.003);间隔8～14d组高于15 ～ 21 d和22 d及以上组(P均＜0.003).首例水痘病例发病后间隔O～3d开展应急接种组水痘罹患率低于间隔4～7d、8～ 14d、15～21d和22 d及以上组(P均＜0.003);间隔4～7d组低于8～ 14d、15～ 21 d和22 d及以上组(P均＜0.003);间隔15 ～ 21 d组高于22 d及以上组(P＜0.003).结论 在出现水痘疫情暴发后,好在首例水痘病例发生后7d内开展疫苗的应急接种,以有效降低水痘的续发率和罹患率.
-
IFNγ释放试验在抗酸杆菌阳性肺疾病患者中的应用及其相关药敏分析
目的 分析IFNy释放试验(interferon gamma release assays,IGRAs)在诊断抗酸杆菌阳性肺疾病患者中的作用及其药敏试验结果,为诊疗抗酸杆菌阳性肺疾病患者提供依据.方法 对2015年1月至2016年12月在重庆医科大学附属第二医院、重庆市人民医院就诊的325例痰抗酸杆菌阳性肺疾病患者的痰样本、胸腔积液、组织活检或肺泡灌洗液等样本,进行分枝杆菌菌种鉴定、IGRAs试验、药敏试验.结果 325例痰抗酸杆菌阳性患者中,结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)308例(94.8％),非结核分枝杆菌(non-tuberculosis mycobacteria,NTM)17例(5.2％);IGRAs对诊断MTB肺疾病患者灵敏度为85.1％,在抗酸杆菌阳性条件下,对诊断NTM肺疾病患者灵敏度为88.2％;MTB对一线结核药耐药率高于二线结核药(P＜0.05),大部分NTM对一线结核药具有高耐药.结论 抗酸杆菌阳性肺疾病患者应进行菌种鉴定及药敏试验,以便精准地治疗MTB和NTM肺疾病患者.
-
人细胞角蛋白20的原核表达及其单克隆抗体的制备
目的 原核表达人细胞角蛋白20(cytokeratin 20,CK20),并制备其单克隆抗体.方法 利用CK20蛋白的cDNA扩增CK20的外显子基因,插入原核表达载体pET28a中,构建重组表达质粒pET28a-ck 20,转化大肠埃希菌BL21中,IPTG诱导表达.表达的重组蛋白经亲和层析柱纯化后,免疫BALB、c小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,通过间接ELISA法对杂交瘤细胞进行筛选,小鼠体内诱生腹水法批量制备单抗,并进行亚型、Western blot及免疫组化鉴定.结果 重组表达质粒pET28a-ck20经双酶切及测序证明构建正确,纯化的重组CK20蛋白纯度在90％以上.制备的CK20单抗重链类型为IgG2b,轻链类型为Kappa链;能够很好地与CK20蛋白抗原产生结合反应,在1∶200稀释后能够较好地对结肠腺癌组织进行染色,且效果优于进口产品.结论 利用重组表达的人CK20蛋白制备的单抗可用于检测相关组织中该蛋白的表达,为CK20的临床诊断及研究提供了有效的工具.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
