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自贡市非结核分枝杆菌临床分离株的菌种鉴定结果分析
目的 对自贡市35株疑似非结核分枝杆菌(NTM)临床分离株进行菌种鉴定.方法 从自贡市各区(县)及市结核病防治获得的临床分枝杆菌分离株,通过罗氏培养基(L-J)、对硝基苯甲酸(PNB)和噻吩-2-羧酸肼(TCH)鉴别培养基初步鉴定为NTM,再经多位点PCR方法确定为NTM后,对rpoB、hsp64及its基因进行测序及分析鉴定.结果 35株疑似NTM临床分离株,通过初步鉴别,多位点PCR,rpoB、hsp64及its基因测序及分析鉴别出32株NTM,分别为脓肿分枝杆菌(M.abscessus)11株、胞内分枝杆菌(M.intracellulare)7株、堪萨斯分枝杆菌(M.kansasii)5株、鸟分枝杆菌(M.avium)3株、脓毒分枝杆菌(M.septicum1株、马赛分枝杆菌(M.masseillense)1株、戈登分枝杆菌(M.gordonae)2株、副瘰疬分枝杆菌(M.parascrofulaceum)1株和Mycobacterium peregrinum 1株.结论 抗酸染色阳性、PNB/TCH鉴定为NTM的临床分离株中包含不同种类的NTM,自贡市NTM肺病的病原种类较多,以快生长脓肿分枝杆菌为主,其次为慢生长不产色菌的胞内分枝杆菌和缓慢生长光产色菌的堪萨斯分枝杆菌.实验室应开展进一步菌种鉴定,以指导临床正确诊断和合理治疗.
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河南省尉氏县结核病的病原学调查及结核分枝杆菌耐药性分析
目的 调查河南省结核病的分枝杆菌菌种类型、分布特征及耐药状况.方法 对研究现场所有疑似结核病患者进行痰涂片和痰菌培养;用鉴别培养基和双重聚合酶链反应(PCR)方法对分离的菌株进行菌种鉴定,用比例法进行药物敏感性检测.结果 共收集患者2661份痰标本,应用痰涂片、痰培养和双重PCR三种方法联合应用进行病原学分析,发现涂片阳性者179份(占6.5%);培养阳性菌株245份,阳性率为9.2%,其中225株为结核分枝杆菌,占91.8%,结核分枝杆菌复合群6株,占2.4%,13株为非结核分枝杆菌(NTM),占5.3%,1株为结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌混合感染,占0.4%.药敏检测显示结核分枝杆菌总体耐药率为24.0%(54/225),4种药物的耐药率链霉素16.9%(38/225),异烟肼16.0%(36/225),利福平9.8%(22/225),乙胺丁醇8.4%(19/225).耐单药菌株20株,占8.9%,耐2种药以上的多药耐药为15.1%(34/225),其中,同时耐异烟肼和利福平及2种以上抗生素菌株即耐多药株(MDR-TB)菌株19株,占8.4%(19/225)%.男、女性结核病患者耐药率差异无统计学意义(x2=2.8214,P＞0.05),耐药与年龄的相关性差异有统计学意义(x2=8.3868,P＜0.05),复治病例耐药率与初治病例耐药率差异有统计学意义(x2=13.7193,P＜0.05);复治病例MDR-TB耐药率与初治病例MDR-TB耐药率差异有统计学意义(x211.1361,P＜0.05).结论 河南省尉氏县的结核病病原菌包括结核分枝杆菌、结核分枝杆菌复合群及非结核分枝杆菌,耐药情况较为严重,尤其对复治病例、较年轻病例应引起重视.
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中国首例脓毒分枝杆菌感染肺病报告
目的 分析脓毒分枝杆菌感染肺病的临床和细菌学特征,探讨其鉴别诊断方法.方法 分析脓毒分枝杆菌感染肺病患者的临床表现极其相关实验室检查结果.对其临床分离株采用L-J,TCH/PNB鉴别培养基和多位点PCR初步鉴别,rpoB/hsp65基因PCR-测序鉴定出菌种.结果 该患者痰涂片和培养检测为阳性.L-J,TCH/PNB鉴别培养基和多位点PCR鉴别为非结核分枝杆菌.rpoB/hsp65基因PCR-测序,经BLAST比对,与脓毒分枝杆菌(ATCC 700731)同源性均为99％.药物敏感性检测证实本病例分离到的菌株对大多数药物(包括四种一线抗结核药物)耐药,而对阿米卡星、环丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、卡那霉素和新诺明等药物敏感.结论 在中国首次鉴定、确诊脓毒分枝杆菌感染肺病.
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甘肃省53株非结核分枝杆菌对9种常用抗结核药物的敏感性分析
目的 初步了解2012-2014年甘肃省临床分离的非结核分枝杆菌(NTM)对常用抗结核药物的耐药情况.方法 收集临床分枝杆菌分离株,用PNB/TCH生长试验和基于16S rRNA基因的序列分析法鉴定NTM.采用传统固体罗氏培养基绝对浓度法对NTM进行9种常用抗结核药物链霉素(SM)、利福平(RFP)、丙硫异烟胺(TH1321)、异烟肼(INH)、对氨基水杨酸钠(PAS)、左氧氟沙星(LVFX)、乙胺丁醇(EMB)、卡那霉素(KAN)和吡嗪酰胺(PZA)的敏感性测试.结果 共收集到分枝杆菌1 081株,经鉴定53株为NTM,分离率为4.90％.其中胞内分枝杆菌多,为36株;其次是堪萨斯分枝杆菌,为8株;其他依次是鸟分枝杆菌4株、戈登分枝杆菌2株、脓肿分枝杆菌2株和偶然分枝杆菌1株.药敏结果显示,耐药率从高到低依次为RFP(73.58％)、TH1321(69.81％)、INH(67.92％)、SM(62.26％)、PAS(60.38％)、PZA(47.17％)、EMB(28.30％)、LVFX(26.41％)、KAN(15.09％),其中耐药株49株,耐药率为92.45％,NTM对9种抗结核药物的耐药程度有差异.结论 NTM对抗结核药物敏感性差,应参照NTM药敏结果选择合理的药物,提高治愈率,减少耐药发生.
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老年结核病治疗特点与对策
众所周知.老年人是结核病高发人群.美国的一份研究报告显示.全球老年人口正在以前所未有的速度增长,到2040年,全球65岁以上的老年人将超过13亿,占届时全球人口的14%.
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宁波地区非结核分枝杆菌病原谱的分析
目的 了解宁波市非结核分枝杆菌病源谱,掌握宁波市优势非结核分枝杆菌菌群.方法 采用胶体金法对713株分枝杆菌临床分离株进行非结核分枝杆菌初步鉴定,然后对其采用hsp65基因测序法作进一步菌种鉴定.结果 713株分枝杆菌经胶体金法初步鉴定有100株为非结核分枝杆菌.进一步菌种鉴定,有5株为结核分枝杆菌复合群,2株鼻疽诺卡菌,其余93株为非结核分枝杆菌,其中胞内分枝杆菌49株(52.7％),堪萨斯分枝杆菌15株(16.1％),戈登分枝杆菌8株(8.6％),鸟分枝杆菌、脓肿分枝杆菌和马赛分枝杆菌各4株,中间分枝杆菌2株,偶然分枝杆菌、土分枝杆菌、外来分枝杆菌、耻垢分枝杆菌株,M.seoulense、M.thermoresistibile和M.monacense各1株.结论 宁波地区优势非结核分枝杆菌群以胞内分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌为主.
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快速生长分枝杆菌肺病94例临床分析
目的 探讨快速生长分枝杆菌肺病的临床特点、药物敏感性试验(简称"药敏试验")情况、治疗及其转归.方法 回顾性分析94例广州市胸科医院2008年1月至2014年6月确诊为快速生长分枝杆菌肺病的临床资料.结果 本组患者中,73.4％(69/94)存在基础肺部疾病,其中60.6％(57/94)为肺结核,41.5％(39/94)为支气管扩张.胸部CT检查显示病灶多侵犯双侧,占75.5％(71/94).支气管扩张型72例,薄壁空洞40例.共分离出276株菌株,63.4％(175/276)为龟-脓肿分枝杆菌复合群.药敏试验显示阿米卡星、克拉霉素的敏感度高,分别为87.7％(242/276),80.1％(221/276).98.9％(93/94)患者治疗后症状缓解.参照药敏试验结果,52.1％(49/94)患者采用3～4种敏感药物经规律治疗6个月后痰菌转阴,但仍有47.9％(45/94)患者的痰菌持续阳性.结论 快速生长分枝杆菌肺病临床症状缺乏特异性,胸部CT检查可见病灶多侵犯双侧,薄壁空洞为主,多侵犯上叶,伴双肺散在支气管扩张,阿米卡星、克拉霉素的药物敏感度高,早期完善菌种鉴定及药敏试验有助于制订该病的诊疗计划.
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传统培养法与PCR-荧光探针法鉴定分枝杆菌的对比研究
目的 比较传统培养法和PCR-荧光探针法在分枝杆菌的鉴定中有无差异.方法 对1552株分枝杆菌临床分离株同时用传统培养法对硝基苯甲酸(PNB)、噻吩二羧酸肼(TCH)培养基生长试验及PCR-荧光探针法进行鉴定,结果有差别的菌株用16SrRNA基因测序的方法进行确认.结果 两种方法非结核分枝杆菌的符合率为75.4％(46/61),结核分枝杆菌复合群的符合率为99.0％(1491/1506),总体符合率为99.0％(1537/1552).两种方法检测结果不同的15株样本经16SrRNA基因测序进行鉴定,PCR-探针法与16SrRNA结果一致的有14株,另外1株经传代分离纯化后测序结果为结核分枝杆菌和戈登分枝杆菌的混合菌.非结核分枝杆菌对PNB培养基的敏感度为21.7％(13/60),有0.1％(1/1492)的结核分枝杆菌复合群对PNB表现耐受性.对PNB敏感的13株非结核分枝杆菌中,有76.9％(10/13)为堪萨斯分枝杆菌.结论 部分非结核分枝杆菌使用PNB-TCH生长试验进行鉴定时会出现误判,而PCR-荧光探针法鉴定结核分枝杆菌复合群和非结核分枝杆菌的准确性较高.
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300株抗酸分枝杆菌菌种初步鉴定
资料与方法： 1.资料来源：300株抗酸分枝杆菌源于阳泉市1993年～1998年1 200例结核病患者的痰中，其中男性204例(68%)，女性96例(32%)，平均年龄40岁。2.标本菌株：由北京市结核病研究所生物室提供，结核分枝杆菌(H37Rv)、牛分枝杆菌及非结核分枝菌株12株，本院检验科细菌室传代培养做对照。3.方法：(1)分别观察在28℃、37℃及45℃环境中罗氏(L-J)和丙酮酸钠培养基上细菌生长速度、菌落形态及色素，以判定菌种；(2)挑取菌落涂片抗酸染色，证实为抗酸杆菌；(3)鉴别培养：将L-J培养基上生长3周的菌落以10-3mg湿重接种于TCH培养基上，以10-2mg湿重接种于PNB培养基上，置于37℃环境中进行培养；(4)生物化学反应：包括硝酸还原、耐热触酶、吐温80水解、尿素酶、芳香硫酸酯酶及烟酸等试验。4.判定：(1)PNB培养阴性者，做硝酸还原试验，若出现阳性或强阳性，同时TCH和L-J培养基菌落生长呈阳性，判定为结核分枝杆菌。(2)PNB培养阴性，硝酸还原试验阴性，TCH培养阴性，只有L-J培养阳性者判定为牛分枝杆菌。(3)三种培养基上菌落生长均呈阳性者判定为非结核分枝杆菌。
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结核分枝杆菌胶体金法快速鉴别试剂盒的临床应用观察
目前,传统的分枝杆菌菌种鉴定方法需在改良罗氏L-J培养基、硝基苯甲酸PNB和2-噻吩羧酸肼(TCH)鉴别培养基上初步鉴定结核分枝杆菌(MTb)和非结核分枝杆菌(MOTT)后,再观察细菌菌落形态、生长速度、生长温度和色素,并进行一系列生化试验,操作繁琐、费时,影响因素多;
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快速生长型分枝杆菌菌群对克拉霉素耐药机制的研究新进展
近年来,随着分子生物学技术的不断发展,非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)在世界范围内的报道越来越多,其数目迄今已有150种以上,且有不断增加的趋势[1].NTM主要存在于自然环境中,人可从环境中感染NTM而患病,水和土壤是重要的传播途径,迄今尚未证实NTM可以通过人进行传播,但可通过动物传染给人.
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非结核分枝杆菌的分布和生长影响因素及其传播途径研究
目前文献报道证实的非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria,NTM)及其亚群有170多种.人类接触的环境中NTM无处不在,包括自然界的水环境、城市供水系统、饮用水系统、灰尘和土壤等.环境中的NTM对于人类和动物是重要的条件致病菌.为提高对NTM的认识,作者综述了NTM在环境中的分布和影响因素,以及减少NTM暴露量的方法等.
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分枝杆菌L型及其检测方法研究进展
在药物诱导、免疫因子作用及自身生活周期中,结核和非结核分枝杆菌容易因细胞壁部分或全部丢失,形成细胞壁缺陷菌(Cell wall-deficient bacteria,CWDB )[1],即分枝杆菌L型(mycobacterial L-forms).
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脓肿分枝杆菌复合群的研究进展
脓肿分枝杆菌复合群(Mycobacterium abscessus complex,MABC)是可引起人体致病的重要非结核分枝杆菌(non-tuberculous Mycobacteria,NTM),它由脓肿分枝杆菌、马赛分枝杆菌和Mycobacterium bolletii 3个菌种组成.多靶位基因测序为MABC准确可靠的菌种鉴定方法.克拉霉素是MABC感染所致疾病治疗的基石,近年来,MABC研究较大的进展就是红霉素核糖体甲基化酶(41)[erythromycin ribosome methytransferase,erm(41)]基因的发现,erm(41)与克拉霉素诱导耐药相关.脓肿分枝杆菌和M.bolletii均携带完整的erm(41)基因,而马赛分枝杆菌erm(41)基因有2个片段缺失.脓肿分枝杆菌28位碱基具有多态性,T28序列型可诱导耐药,C28序列型不诱导耐药.为检测脓肿分枝杆菌是否对克拉霉素诱导耐药,建议培养时间由3d延长至14d.另外,已有证据表明MABC可能在人与人之间传染,有必要研究MABC的基因分型技术.
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母牛分枝杆菌菌苗用于结核病防治的研究现状
母牛分枝杆菌菌苗(M.vaccae)是Benicke1964年从母牛乳腺中分离出的无毒非结核分枝杆菌,属Runyon Ⅳ群速生菌,但富含与结核分枝杆菌相似的抗原[1].近20年来国外Stanford等学者对该菌进行长期系列研究以及近年来国内学者的研究,均表明具有良好的免疫治疗和免疫预防作用,是迄今较好的结核病免疫调节剂[2].世界卫生组织20世纪90年代结核病研究与发展规划中,提出结核病化疗法与免疫疗法相结合,母牛分枝杆菌菌苗是唯一被推荐的免疫治疗制剂.我国研制的母牛分枝杆菌制剂即"微卡"在结核病防治工作中也发挥了一定作用.
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对《结核病诊断细菌学检验规程》的一点看法
中国防痨协会在1995年制定并于2006年再版修订但至今仍作为实验室常规操作标准的《结核病诊断细菌学检验规程》(简称"规程")[1],体现了实验室的细菌学检查对结核病诊断和流行病学预防的重要性.在规程中,国际公认的55种分枝杆菌中有致病性的36种分枝杆菌的生物化学要点被罗列了出来,其中把对硝基苯甲酸(PNB)作为区别Mtb与非结核分枝杆菌(NTM)的惟一实验标准,为实验室进行分枝杆菌分型鉴定制定了一套较为完善的鉴定程序.但在实验室的日常常规工作中笔者却发现规程存有值得商榷之处.
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耐高温的结核分枝杆菌二株
分枝杆菌菌型鉴定在结核病流行病学调研和临床用药指导方面起到了至关重要的作用[1],因由Mtb或非结核分枝杆菌(non-tuberculosis Mycobacteria,NTM)引致的肺部疾病,其临床症状和X线影像表现没有任何的区别,但临床治疗有很大的差异甚至完全不同[2],因此结核分枝杆菌复合群(MTC)与NTM正确的区分尤为重要.故中国防痨协会基础专业委员会在1995年制定并于2006年再版修订了《结核病诊断实验室检验规程》(简称"规程")[3],其中分枝杆菌的鉴定程序为结核病流行病学调研和指导临床用药方面提供了可靠的业务保障.在规程中,对MTC的鉴定有明确的实验室鉴定标准,如生长速度缓慢,不产色性,对硝基苯甲酸(PNB)、耐热触酶和吐温-80水解试验阴性,噻吩-2-羧酸肼(TCH)、硝酸盐还原试验及尿素酶分解试验阳性,对5％NaC1不耐受等;培养温度宜37℃,在28℃和42℃环境下不生长等.但笔者在对2913株分枝杆菌进行菌型鉴定时,在1736株确诊为MTC株中发现2株(注:来自同一例患者)能在42℃高温环境下生长的株种,现报道如下.
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结核病实验室诊断中常见干扰型非结核分枝杆菌的监测分析
目的 掌握常见干扰结核病(TB)实验室诊断的非结核分枝杆菌(NTM)菌种组成及生长特性,以提高TB实验室诊断水平.方法 采用分子线性探针(LPA)法对139株经实验室初步鉴定为NTM进行快速分型检测,回顾性对照分析其传统细菌学生长特性.结果 脓肿、戈登、偶发、胞内、堪萨斯、鸟、瘰疠和外来分枝杆菌分别占41.01％、20.14％、13.67％、12.95％、5.76％、4.32％、1.44％和0.72％.2例NTM与结核分枝杆菌(MTB)混合培养阳性菌分别为戈登与脓肿分枝杆菌.脓肿分枝杆菌为TB复诊样本中常见干扰型NTM.结论 综合分析常见干扰TB诊断的NTM的分子分型与细菌学生长特性,可提高TB实验室鉴别诊断准确率.
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非结核型分枝杆菌感染患者31例护理管理体会
目的:提高非结核分枝杆菌感染患者的护理管理水平.方法:收治非结核分枝杆菌感染患者31例,对他们的临床表现、诊治、护理过程及效果进行回顾分析.结果:非结核型分枝杆菌感染患者对大多数抗结核药物呈原始耐药,治疗困难,误诊误治多,龟分枝杆菌对克拉霉素、丁胺卡那霉素为敏感.结论:对久治不愈或反复发作的脓肿患者需提高警惕性,及时行分枝杆菌的菌型鉴定及药敏测定,以免延误了非结核型分枝杆菌感染的诊断和治疗;并提出非结核型分枝杆菌感染患者管理及护理的操作要点.
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DNA-微阵列芯片法检验结核与非结核分枝杆菌的 临床应用价值
目的 探讨DNA-微阵列芯片法检验结核与非结核分枝杆菌的临床应用价值.方法 选择2016年12月—2018年3月该院痰结核培养或结核分杆菌痰涂片阳性标本108份.108份标本均采用改良罗氏培养法、DNA-微阵列芯片法检验,对二者检验结果不一致的标本进行测序检验,并将结果作为检验的金标准.评价改良罗氏法、DNA-微阵列芯片法对结核与非结核分枝杆菌的鉴别效果.结果 改良罗氏培养法对结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌检验的准确率为96.15％、97.56％,与DNA-微阵列芯片92.31％、96.34％对比差异无统计学意义(χ2=0.253、0.265,P>0.05).结论 DNA-微阵列芯片法在结核与非结核分枝杆菌检验中具有较高的准确率,且操作简便、快速,临床应用价值显著.
关键词： DNA-微阵列芯片法 结核分枝杆菌 非结核分枝杆菌
