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167种食品中的李斯特菌检验
通过对南京某地区6类167种食品李斯特菌的初步分离鉴定,发现MMA分离平板上除45°光线下为蓝色或灰蓝色的S型小菌落外,呈现扁平、干燥、边缘不整齐的菌落(R菌落)也为李斯特菌的可疑菌落,同时发现触酶阴性、MR阴性、VP阴性及尿素酶阳性的菌株.结果表明,S型小菌落、尿素酶阴性、MR阳性、VP阳性及触酶阳性均不能作为李斯特菌鉴定的严格标准.
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结核分枝杆菌胶体金法快速鉴别试剂盒的临床应用观察
目前,传统的分枝杆菌菌种鉴定方法需在改良罗氏L-J培养基、硝基苯甲酸PNB和2-噻吩羧酸肼(TCH)鉴别培养基上初步鉴定结核分枝杆菌(MTb)和非结核分枝杆菌(MOTT)后,再观察细菌菌落形态、生长速度、生长温度和色素,并进行一系列生化试验,操作繁琐、费时,影响因素多;
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两种固体培养基对分枝杆菌培养影响的比较
我们根据文献[1]关于在改良罗氏培养基(L-J)中加入丙酮酸钠的报道,试以丙酮酸钠代替L-J中的甘油,对临床分枝杆菌纯分离株进行了与传统L-J法的比较探讨.经504株临床分枝杆菌分离株的培养比较后发现,用丙酮酸钠代替L-J中的甘油,其无论是培养时间或是菌落形态以及数量,都明显优于传统L-J(P≤0.01).
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嗜麦芽窄食单胞菌简易鉴定方法探讨
嗜麦芽窄食单胞菌(stenotrophomo-nas maltophilia),即以前的嗜麦芽假单胞菌,后又称嗜麦芽黄单胞菌,1993年改为现名[1].该菌由于对多种抗菌药物耐药,常成为严重的院内感染菌,且在非发酵菌中已占到第3位[2].国内分离情况也是如此.对嗜麦芽窄食单胞菌的鉴定目前尚无十分理想的方法,按一般非发酵菌鉴定,操作繁琐、费时.为此我们利用该菌对亚胺培南(imipenem)天然耐药这一特性[3],结合菌落形态、动力、氧化酶试验对该菌进行鉴定,经常规应用效果满意,现报告如下.
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触酶阴性金黄色葡萄球菌的鉴定与耐药分析
金黄色葡萄球菌是临床常见致病菌,可引起多种化脓性感染.临床实验室对金黄色葡萄球菌的鉴定较为简单,一般可根据其菌落形态、色素、溶血性、触酶及凝固酶等即可鉴定.
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聚合酶链反应-反向线点杂交技术快速鉴定34种分枝杆菌
依靠传统方法鉴定分枝杆菌的生长特性、色素、生长速度、菌落形态及用生化试验鉴定分枝杆菌的方法费时、费力且没有标准化试剂,缺乏敏感性和特异性,导致很多结果不易判断.高效液相色谱测定分枝菌酸及气相色谱测定脂肪酸均存在菌种鉴定的局限性,受菌株的生长环境、营养状况的影响,并且需要特殊的仪器.PCR产物直接序列测定和限制性内切酶切图谱不适合检测混合性感染,而分枝杆菌的鉴定对结核病、非结核分枝杆菌感染和麻风病的诊断和治疗起着极为重要的作用.本课题旨在建立聚合酶链反应-反向线点杂交技术(PCR-RLB),快速鉴定结核分枝杆菌、非结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌.
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老年根面龋患者菌斑致病菌分析
根面龋是老年人的口腔常见病,是老年口腔疾病防治的重要内容之一。关于根面龋致病菌国内外尚有争议。我们于1999年12月~2000年2月对临床患根面龋老年人的局部菌斑进行分离、培养、鉴定,找出优势菌,旨在为根面龋防治提供参考。 一、材料和方法 1.材料:试验组:年龄60~77岁、患根面龋无牙髓及根尖炎症者15例;对照组;根外露,无根面龋者10例。 2.方法:从试验组患者根面龋洞内或对照组根邻面取菌斑后送实验室。标本经振荡稀释后分别接种于CDC非选择培养基、轻唾培养基、乳酸杆菌和放线菌选择培养基上。CDC培养基和放线菌选择培养基厌氧37℃,培养5 d,其他培养基需氧37℃,培养5 d。培养后根据菌落形态、革兰染色、常规生化反应鉴定菌群属,对每种培养皿进行菌落计数,统计每种菌的菌落形成数目。
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铜绿假单胞菌5种菌落形态与耐药性监测
目的:了解铜绿假单胞菌在临床感染中的菌落形态分布及耐药性变迁.方法:细菌鉴定采用常规手工法或API 20NE鉴定系统,药敏试验为K~B法.结果:统计分析3年中从各类临床标本分离到的铜绿假单胞菌256株,其中典型型菌落占48.4%,黏液型菌落占35.9%,对亚胺培南耐药率分别为10.3%和12.3%.结论:铜绿假单胞菌黏液型菌落检出率有逐年增高的趋势,临床应根据药敏试验合理选择抗生素.
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流脑病人血液中检出C群脑膜炎奈瑟菌
2002年1~3月份,广西壮族自治区来宾县良塘乡发生流脑流行,共发现流脑病人15例,死亡3例.从暴发点患者血液中分离出一株病原菌,经鉴定为革兰染色阴性双球菌,其菌落形态、生长试验及生化反应均符合奈瑟菌特征.采用原中国预防医科院流研所和兰州生物制品研究所生产的诊断血清进行玻片凝集试验,鉴定为C群脑膜炎奈瑟菌.
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一株在普龙亚培养基上菌落形态变异鼠疫菌的发现与研究
自从1929年Бесонова·А·А首先发现鼠疫菌的变异现象以来,在这方面积累了不少资料.特别是菌落形态方面的变异早已被人们所认识.本文报道的菌落形态变异菌株只在普龙亚培养基(龙胆紫、亚硫酸钠琼脂培养基)上生长时菌落形态明显变异,而在普通琼脂培养基上生长时仍呈现典型的鼠疫菌落形态.这在以往材料中尚未见到类似报道.通过对其报道说明普龙亚培养基对特殊变异菌株培养出的菌落形态不具有典型鼠疫菌落的特征,在鼠疫监测中必须引起足够的重视.这对鼠疫监测工作中培养基的选择和应用可能提供有益的资料.
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人型支原体的分离培养和生长特性的研究
目的 研究人型支原体(Mh)的生长曲线、菌落形态演变等生物学特性及临床分离方法.方法 取临床妇科阴道标本58例,同时接种液体培养基与固体培养基.在固体培养基上挑单菌落放人液体培养基进行纯化.选一株纯化的Mh接种于液体培养基,每隔4 h看颜色变化测pH值,并取10μL液体滴种在固体培养基上,计数菌落得出生长曲线.对不同生长时间的菌落拍照.从生长曲线得知对数生长期,并可在此期间进行保种.结果 妇科阴道标本临床分离的Mh阳性率为8.62%;明确了在固体培养基上Mh菌落的生长演变过程;得到了Mh特有的生长曲线,并由此推出Mh在液体中大生长数量及其时间、繁殖一代所需的时间和对数生长期及液体生化反应的pH值颜色改变规律.结论 Mh的分离诊断,应该以固体培养基为基础,显微镜下看到典型的Mh特征性"油煎蛋"菌落为准.在液体培养基中Mh的传代以及保种在40 h左右,即1/2对数生长期好.
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细胞周期素E在幽门螺杆菌感染蒙古沙土鼠胃癌前状态中的表达
哺乳动物的细胞周期受控于一组称之为细胞周期素(cyclin)的蛋白质,而细胞周期失控是许多肿瘤发生、发展的基础,故cyclin与肿瘤的关系受到广泛关注.本研究,旨在探讨cyclin E在幽门螺杆菌(Hp)长期感染蒙古沙土鼠,致胃癌前病变发展过程中的表达及其意义.材料和方法一、材料沙土鼠,SPF级,4周龄,雄性,体重20~30 g.Hp使用标准菌株NCTC 11637,培养液采用空肠弯曲菌培养液的琼脂基础,添加5%的冻融羊血.在一定湿度、微需氧、37℃条件下孵育72 h进行增菌培养,Hp的鉴定包括菌落形态、尿素酶实验、涂片观察等.
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从海分枝杆菌菌落形态变化筛选与毒力相关基因的方法
目的 通过菌落表型的变化筛选并鉴定与毒力相关基因.方法 利用转座子随机插入突变技术建立海分枝杆菌随机插入突变库;通过菌落形态变化表型筛选细菌表面结构发生变化的突变菌株;运用抗性标记挽救法鉴定突变基因并运用生物信息学方法预测基因的功能.结果 通过菌落形态改变筛选出66个突变菌株,并成功鉴定其中的53个突变菌株的转座子插入位点,涉及48个基因;其中已有研究报道的、直接跟毒力相关的基因15个(占筛选基因的31.25%).结论 本研究从海分枝杆菌菌落表型变化筛选与毒力可能相关的基因,为海分枝杆菌致病基因的筛选提供了新策略;同时为研究其致病机制提供了候选基因.
关键词: 海分枝杆菌 MycoMarT7转座子 菌落形态 致病基因 -
菌落形态发生变异的肺炎链球菌的鉴定
根据<全国临床检验操作规程>(第二版)对肺炎链球菌的定义,链球菌属内鉴定的特点之一是生长在血平板上菌落细小、圆形、表面光滑、灰白色、边缘整齐、半透明、初期扁平以后中心塌陷、呈现脐窝状,直径0.5~1.5 mm,周围有草绿色溶血环.我们自2000年至2001年先后检出4株菌落形态不典型的肺炎链球菌,报告如下.
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从痰中分离出1株菌落形态变异的肺炎链球菌
1病历摘要患者,肖×,男,汉族,71岁,因活动后气促伴双下肢浮肿2月,近期出现气促,呼吸困难,咳嗽,咯黄色脓性痰5 d,于2002年11月22日住入我院呼吸内科.查体:体温37.3℃,患者神志清楚,精神一般,BP 135/80 mmHg,R 23次/分,P100次/分,咽部充血,双侧扁桃体肿大,双肺呼吸音粗,可闻及湿罗音.实验室检查:WBC:10.5×109/L,N:0.85,L:0.11,M:0.04,Hb:125g/L,PLT:208×109/L.血细菌培养阴性,痰培养分离出菌落形态变异的S.pneumoniae(肺炎链球菌).临床诊断:慢性阻塞性肺疾病急性加重期.给予青霉素,红霉素治疗,同时用中药辨症施治.3d后体温恢复正常,一周后血常规等指标均正常,痰培养未发现致病菌,症状缓解后患者于2002年12月6日出院.
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浅谈国内支原体培养和鉴定中存在的问题
近几年来,泌尿生殖道的支原体,即解脲脲原体(Ureaplasma Urealyticum,Uu)和人型支原体(M.hominis,Mh)感染,在国内受到了很大的重视,就其流行性和耐药等方面涌现了大量的文献报道.在这些报道中[1~5],支原体的分离培养和鉴定方法均存在着一些问题.其中,尤为突出的就是仅凭肉汤培养基颜色的变化来判断有无支原体生长,而不是根据它们在固体培养基上的典型菌落形态,这是令人疑惑不解的.我们综合国内外有关文献资料,就肉汤颜色变化与支原体培养阴阳性结论的问题进行探讨,以期得到大家的重视.
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疣状毛癣菌感染豚鼠模型的构建
目的 构建疣状毛癣菌感染豚鼠的动物模型.方法 选择健康豚鼠32只,随机分为4组.第1组未给任何处置,第2、4组豚鼠刮毛并摩擦其背部皮肤,第3组豚鼠背部给予刮毛处理.第1、2、3组为实验观察组,分别涂抹疣状毛癣菌菌悬液100 μl;第4组涂抹须毛癣菌菌悬液100μl.采用直接镜检、真菌培养和组织病理方法验证感染结果.结果 第1组直接镜检持续阴性;第2、3、4组豚鼠背部鳞屑直接镜检至第7~9天时均为阳性;将鳞屑接种于沙氏葡萄糖琼脂(SDA)平板上培养,7d后可见真菌生长,2周后各平板接种点均有菌落生长,且与接种前菌落形态基本相同.第2、3、4组取皮损活检HE染色,表皮角质层及部分毛囊漏斗部可见折光性强的菌丝及孢子.结论 成功构建了疣状毛癣菌感染的豚鼠模型.
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659例肠道门诊患者病原菌检验结果
肠道门诊是发现急性肠道传染病人的佳途径。1998年,我们在进行肠道门诊病人的检验中,增加一只山梨醇麦康开平板,以检查有否因出血性大肠杆菌所致的腹泻病人。经过5~10月共6个月的检验,除检到霍乱弧菌外,又检到了出血性大肠杆菌、侵袭性大肠杆菌、致病性大肠杆菌及沙鱼弧菌等。今将检验经过与结果报告如下。材料与方法1 标本来源各肠道门诊点的腹泻病人肛拭标本(已放入硷性胨水中),由专人定期送往本实验室,共计659份。2 检验方法根据硷性胨水是否混浊,如未混浊,则放37℃增菌过夜;如已混浊,则用白金耳取此增菌液,分别划种四号琼脂及山梨醇麦康开琼脂(37℃)/(18~24h)培养后,观察结果。 在四号琼脂平板上挑取可疑V.C菌落,用V.C“O”多价及O139混合诊断血清进行玻片凝集。如阳性则分别用V.C“O”多价及O139诊断血清凝集;如与V.C“O”多价血清凝集,则再用小川及稻叶分型血清凝集之,以决定血清型别。如均不凝集,对个别菌落形态较好的,则接种克氏双糖铁培养基,然后按弧菌科细菌进行鉴定之[1]。
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不同菌落形态的林可霉素产生菌发酵特性的研究
应用摇瓶发酵法对几种不同菌落形态的林可霉素产生菌糖、氮利用、菌丝量、发酵单位、传代稳定性等特性进行研究.结果表明:菌落直径的大小、孢子数量的多少与这些特性有一定的对应关系,其中直径中等、稍干瘪的菌株产量高、后劲足、适宜集约化生产.
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念珠菌显色培养基在临床酵母样真菌鉴定中的应用
我们用念珠菌显色培养基对临床送检可疑真菌感染114株标本进行培养,根据菌落不同颜色的显色对白念珠菌、热带念珠菌、克柔氏念珠菌、光滑念珠菌等进行鉴定,并与常规鉴定方法(沙氏琼脂培养基上的菌落形态、血清芽管试验、米粉吐温80琼脂培养及糖同化试验、墨汁染色、尿素酶试验、咖啡酸试验)比较,现将结果报告如下.