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限制酶分析在假单胞菌及其L型鉴定中的应用
假单胞菌是临床常见的致病菌之一,铜绿假单胞菌为医院内感染常规检测菌.为建立对其快速、准确鉴定的方法,我们对获自中国科学院AS菌种保藏中心的14株假单胞菌标准株(包括铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌和嗜麦芽假单胞菌等)及临床分离到的铜绿假单胞菌,用EcoRⅠ、 HindⅢ、SmaⅠ和PstⅠ(Promega及华美公司)等限制性内切酶分析其染色体的限制酶图谱(REP),其中EcoRI和SmaI对这些菌种的鉴别效果较好.
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嗜麦芽窄食单胞菌简易鉴定方法探讨
嗜麦芽窄食单胞菌(stenotrophomo-nas maltophilia),即以前的嗜麦芽假单胞菌,后又称嗜麦芽黄单胞菌,1993年改为现名[1].该菌由于对多种抗菌药物耐药,常成为严重的院内感染菌,且在非发酵菌中已占到第3位[2].国内分离情况也是如此.对嗜麦芽窄食单胞菌的鉴定目前尚无十分理想的方法,按一般非发酵菌鉴定,操作繁琐、费时.为此我们利用该菌对亚胺培南(imipenem)天然耐药这一特性[3],结合菌落形态、动力、氧化酶试验对该菌进行鉴定,经常规应用效果满意,现报告如下.
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我院2007~2009年临床检出细菌分布及药敏结果分析
目的 合理使用抗生素,及时控制感染,减少耐药菌产生,节省资源.方法 分析2007年1月至2009年8月各临床科室送检标本细菌培养菌株分布,用K-B纸片扩散法,进行药敏试验判读结果,对超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)进行检测.对临床表现和细菌培养阳性符合急性细菌感染患者,根据药物敏感试验选择抗菌药治疗后的观察.结果 共分离出病原菌425株,其中革兰阳性球菌142(33.4%),革兰阳性杆菌11(2.6%),革兰阴性杆菌177(41.6%),真菌95(22.4%).MRSA31株,占分离金黄色葡萄球菌64.6%,MRSE25株,占分离表皮葡萄球菌75.8%,产ESBLs40株,占革兰阴性杆菌22.6%.革兰阴性杆菌对青霉素类、头孢一、二、三代耐药率高,含酶抑制剂的舒普深(除嗜麦芽假单胞菌)对革兰阴性杆菌平均敏感率达79.1%,环丙沙星对铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌、嗜麦芽假单胞菌的敏感率达到81.7%,氨曲南对铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌属的敏感率达到78.9%,亚安培南依次对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌敏感.革兰阳性球菌对多种抗菌药耐药,对万古霉素的敏感率平均达95%,粪屎肠球菌、产MRSA、 MRSE葡萄菌只对万古霉素敏感 .根据细菌培养的药敏试验选择抗菌药,使88.7%患者治疗有效.结论 对可能为产ESBLs革兰阴性杆菌感染依次选择舒普深、亚胺培南、氨曲南、环丙沙星,对可能为产MRSA、 MRSE革兰阳性球菌首选万古霉素.细菌培养和药敏试验结果为临床治疗的重要依据.
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呼吸机相关性肺炎的病原学分析
目的:探讨呼吸机相关性肺炎的病原学及治疗。方法随机选取32例呼吸机相关性肺炎的患者,收集临床相关资料、细菌培养和药敏检测。结果本组32例共检出细菌50株,其中革兰氏阴性菌35例(70%),包括铜绿假单胞菌12株、大肠埃希菌8株、肺炎克雷伯菌6株,鲍曼不动杆菌6株,嗜麦芽假单胞菌3株;革兰氏阳性菌10株(20%),其中金黄色葡萄球菌6株,表皮葡萄球菌3株,粪肠球菌1株;其它菌:真菌5株(10%);检出两种以上细菌混合感染15例。结论呼吸机相关性肺炎的病原学以革兰氏阴性杆菌为主,真菌具有上升趋势,积极根据病原学调整治疗方案。
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30株唐麦芽窄食单胞菌对10种抗生素体外耐药性分析
嗜麦芽窄食单胞菌(stenotrophomonas maltophilia),即以前的嗜麦芽假单胞菌,后又称嗜麦芽黄单胞菌,1993年改为现名[1].本菌在自然界分布很广,是条件致病菌,可引起心内膜炎、败血症、肺炎、尿道感染、结膜炎、伤口感染等.该药对多种抗生素耐药,常成为严重的院内感染菌,所以加强对它的耐药性的监测对有效治疗和预防该菌感染非常重要.为此笔者统计了自1997年1月~1998年9月分离的30株此菌对10种常用抗生素的耐药性,现进行了分析报道如下.
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黄杆菌属的氧化酶试验
黄杆菌属细菌是一类革兰氏阴性无动力、无芽胞、氧化酶阳性、触酶阳性、硝酸盐不还原、发酵利用葡萄糖和其它糖类的杆菌.其中氧化酶试验阳性率100%(该属中芬芳黄杆菌98%).重要的是氧化酶试验是区别产黄色素聚团肠杆菌、嗜麦芽假单胞菌等细菌的一个可靠性试验.
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嗜麦芽窄食单胞菌感染临床分布及耐药分析
嗜麦芽窄食单胞菌(stenotrophomonas maltophilia)即以前的嗜麦芽假单胞菌,后又称嗜麦芽黄单胞菌,1993年改为现名.该菌主要引起呼吸道感染,在非发酵菌感染临床标本分离率方面,仅次于铜绿假单胞菌,不动杆菌列第3位[1].该菌引起的院内感染日益增加,是院内感染的重要病原菌[2].本文就我院2001年1月~2002年6月临床分离的41例该菌的临床分布和耐药性分析如下.
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口服"腰痛宁"胶囊致大疱表皮松解坏死型药疹1例报告
"腰痛宁"胶囊(承德中药集团有限责任公司,生产批号020217-24)是一种以中药为主要成分的制剂,具有消肿止痛、疏散寒邪、温经通络等作用.在临床口服"腰痛宁"胶囊引起的大疱性表皮松解症导致败血症的患者较为罕见.于2000年12月收治1例,经抗炎、激素疗法,支持疗法等治疗痊愈出院.1病例摘要患者女,39岁,口服"腰痛宁"胶囊1粒,2次/d,8d后,病人周身起红斑丘疹,自觉瘙痒.经当地医院治疗,未见好转,皮疹逐渐增多,并融合成片,其上有大水疱,大片脱皮、出水,周身潮红、肿胀,皮损约占皮肤总面积的80%,黏膜水肿黏连剥脱,周身剧烈疼痛,持续低热,少尿,不能进食.来院就诊:查体体温37.8℃,脉博120次/min,呼吸22次/min,血压105/75mmHg,神志清,痛苦面容,心肺听诊无异常,四肢活动正常,WBC:10.3G/L,尿糖(+++),酮体(+),血培养生长嗜麦芽假单胞菌,诊断:大疱性表皮松解坏死型药疹败血症,既往有青霉素、庆大霉素、磺胺类药物过敏史,为过敏体质.
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32株婴幼儿血培养分离鉴定嗜麦芽假单胞菌的药敏分析
目的:回顾性对32株婴幼儿血培养分离鉴定嗜麦芽假单胞菌的药敏分析,为婴幼儿诊治提供科学依据.方法:①采用美国BD原装培养瓶及BD9050全自动血培养仪,进行血培养.②采用美国德灵公司生产的NC21阴性药敏复合板相关配套试剂及德灵Microsan antoscn 4细菌自动鉴定药敏分析仪.判断结果按美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定标准进行.结果:①32株嗜麦芽假单胞菌对18种抗生素敏感的是复方新诺明,敏感率达93.7%,其次是环丙氟哌酸87.5%,丁胺卡那霉素50%,其它15种抗生素耐药率达59.4~100%.②2天~11月年龄组,婴幼儿嗜麦芽假单胞菌感染率达65.6%,其它组随年龄增长感染率下降.结论:婴幼儿患儿免疫功能低下,应密切关注嗜麦芽假单胞菌感染的发生.对这弱体保健工作应引起全社会的关注.
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从尿中和血中同时培养出嗜麦芽假单胞菌1例
一般来说,从尿中和血中单独分离出嗜麦芽假单胞菌是比较常见的,从两个不同的标本中同时分离出嗜麦芽假单胞菌是比较少见的.今年4月,我院内分泌患者由于自身免疫力低下,患有糖尿病入院治疗,从血和尿中同时分离出嗜麦芽假单胞菌,并且药敏试验结果相同.病例介绍:患者女,47岁,因患糖尿病入院,因患者有糖尿病,多发尿路感染,高热.分别做尿细菌培养和血培养,取清晨第一次尿以无菌方法接种于绵羊血平板和中国蓝平板.同时无菌操作取静脉血做需氧培养和厌氧培养.放入BD血培养仪器中.
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嗜麦芽窄食单胞菌感染与耐药性分析
嗜麦芽窄食单胞菌即以前的嗜麦芽假单胞菌,后又称嗜麦芽黄单胞菌,1993年Phlleroni和Bradbury改为现名[1],该菌是院内感染重要病原菌,且对多种抗生素耐药,已引起临床的密切关注,为了解嗜麦芽窄食单胞菌耐药特点,我们对1997年~1999年分离的88株菌株进行了耐药性测定和产诱导型β-内酰胺酶的检测,现分析报告如下。1 材料和方法1.1 材料 1.1.1 菌株来源 88株受试菌株均为我院1997~1999年临床各类标本分离,其中痰62例,咽拭子10例,脓液8例,尿液5例,其他3例。1.1.2 试剂均为法国生物梅里埃产品。1.1.3 质控菌株铜绿假单胞菌 ATCC27853,大肠埃希菌ATCC25922。2 方法1.1 菌种鉴定按常规分离,对双糖铁似非发酵菌,氧化酶阴性,革兰氏阴性杆菌,用Vitek-NFC卡进行鉴定。1.2 药敏测定采用Vitek-GA卡,亚胺培南采用K-B法。1.3 诱导型β-内酶胺酶测定采用双纸片法进行测定[2]。
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122株嗜麦芽窄食单胞菌药物敏感性测定结果
嗜麦芽窄食单胞菌(stenotrophomo-nas maltophilia),以前称为嗜麦芽假单胞菌,后又称嗜麦芽黄单胞菌,1993年改为现名.该菌由于对多种抗菌药物耐药,常成为严重的院内感染菌.
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呼吸系统感染的常见病原菌及耐药性分析
在医院就诊的患者中,呼吸道感染是常见病和多发病,为了解近期呼吸系统感染的常见病原菌及这些细菌对抗生素的敏感性,我们对2000年1月-6月半年期间来我院就诊的呼吸道感染患者做了病原学分析,半年期间共做痰培养222例,分离菌株18种,其中革兰氏阳性球菌97株,占43.6%,主要以肺炎链球菌和甲型链球菌为主,革兰氏阴性菌株77株,占34.6%,主要以铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌及嗜麦芽假单胞菌为主,另外霉菌48株,占21.6%,现报告如下.
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浅谈药品微生物限度检验的重要性
药品微生物限度检验是控制药品质量的重要指标之一,药品染菌程度直接影响其内在质量.药品被微生物污染,其有效成分会遭到破坏,从而失去有效性,如各种含糖类制剂经污染菌氧化或发酵而分解,pH值被改变等.药品被污染后还可产生毒素,应用被绿脓杆菌污染的眼科制剂时,有可能使患者再感染,产生溃疡,甚至失明;应用被肠道致病菌污染的药品,将会导致肠道疾病;应用表面创伤的药品,污染金黄色葡萄球菌,可能使患者发生败血症;吸入污染霉菌或细菌的气雾剂将会导致患者肺部感染等.所以,从60年代初一些发达的国家,相继将非规定灭菌药物染菌限度纳入国家标准,成为药品检验的常规检验之一,而在规定控制的菌类方面仍较一致,如绿脓杆菌、大肠杆菌、沙门氏菌、嗜麦芽假单胞菌、大肠杆菌与大肠杆菌群等都较一致,说明控制菌的危害性及其它菌的限度,已普遍受到各国的极大重视.由于系统的研究,我国也建立了自己的药品微生物限度检验法,即中国药典2000年版附录,除注射剂和输液剂进行无菌检查,其它非规定灭菌制剂及其原辅料都要进行一定限度的微生物检查,同时规定不得有控制菌的存在.因此,为保证人民用药安全有效,为做好这项要求比较严格、操作十分繁琐的工作,笔者认为首先注意以下几个方面:
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幼儿眼部嗜麦芽假单胞菌感染1例
病儿,男,3个月,新生儿出院回家2周后,即发现眼部分泌物增多,先后应用过氯霉素滴眼液、红霉素眼药膏,疗效均不明显,于2006年8月24日来我院诊治,眼部分泌物涂片经革兰染色,检到大量脓细胞及革兰阴性短杆菌.细菌学鉴定:用无菌棉拭子取分泌物划种血液琼脂平板,于37℃下培养24 h,生长出中等大小、湿润、黄绿色菌落;革兰染色为阴性短杆菌,氧化酶阴性,O/F培养基呈弱碱性,鞭毛染色为单端从鞭毛,生化反应葡萄糖(+)、乳糖(+)、赖氨酸(+)、鸟氨酸(-)、枸橼酸盐(-)、乙酰胺(-)、七叶苷(-)、靛基质(-),鉴定为嗜麦芽假单胞菌.
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嗜麦芽假单胞菌引起血型变异1例
1 病例资料患儿,男,3个月,2013年3月25日入院,患儿10 d前无明显诱因下出现发热,体温波动于39.O℃左右,无寒战惊厥,在儿童医院就诊,查血常规:白细胞23.4×109/L,中性粒细胞37.5%,淋巴细胞55.9%,CRP 66 mg/L.入院数天后出现咳嗽,为阵发性,无咳痰,无喘息,无时间规律.诊断为败血症、急性支气管肺炎.
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Kartagener综合征一例
病例资料 患者,女,22岁.自幼体弱,常年咳嗽,近10年咳嗽加重、频繁,有时咳痰、脓涕,加重1周入院.查体:P 82次/分,Bp 12.8/9.07( 96/68mmHg),体温37.6℃,双上颌窦压痛,左肺湿罗音及少许哮呜音,心界向右扩大,律齐,无杂音;肝脾无肿大.化验室检查:外周血WBC 6.8×109,N 76%,L25%;肝、肾功能、血气分析正常.痰培养3次均检出嗜麦芽假单胞菌.心电图示右位心,窦性心率.
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嗜麦芽假单胞菌医院感染分析
目的了解嗜麦芽假单胞菌的医院感染现状及其耐药性的变化,为临床防治提供依据.方法回顾性分析我院2000~2002年嗜麦芽假单胞菌医院感染病例,统计分析2000~2002年嗜麦芽假单胞菌的耐药性变化.结果嗜麦芽假单胞菌感染主要发生在重症监护病房(37.5%)、神经外科(21.88%)和呼吸内科(9.38%);感染部位主要是呼吸道(90.63%);头孢噻肟、头孢三嗪、亚胺硫霉素连续三年都是100%耐药.结论危重患者神经外科、呼吸内科是嗜麦芽假单胞菌的易感人群.因嗜麦芽假单胞菌对多种抗生素耐药,治疗困难,宜尽早加强耐药性监测,合理应用抗生素非常重要.
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从颅脑损伤并感染患儿脑脊液中分离出一株脑膜败血黄杆菌
儿男性,12岁.1999年6月因不慎摔伤致头皮裂伤,到当地卫生院缝合处理,2 d后缝合处的伤口出现红肿疼痛并出现高热、头昏、头痛症状,于第4天转来我院,门诊摄X线颅平片示:右颞顶骨骨折,以"开放性颅脑损伤并感染”收入院.入院时T 40\+oC,R 27次/min,P 120次/min,神志清醒.颈抵抗(+),右颞顶部一斜形伤口已缝合,5 cm长,无裂开,局部红肿.查:血红蛋白111 g/L,白细胞16.32×10\+9/L,中性粒细胞0.90,淋巴细胞0.10.腰穿取脑脊液检验:外观淡黄,浑浊,蛋白(++),糖半定量0.5~1.1 mmol/L,分类以中性分叶粒细胞为主.送脑脊液培养,经细菌培养选用敏感抗生素氧哌嗪青霉素静脉滴注,患儿1周后治愈出院.细菌培养特性与鉴定:①培养特性:将脑脊液分别接种于血平板和麦康凯平板,每种平板接种双份,其中各一块平板放置普通培养,另一块板放置5%~10%二氧化碳环境的烛缸中培养,经35\+oC48 h培养后在血平板上形成菌落大小约1~1.5 cm、圆形、光滑、湿润、微凸、不溶血、边缘整齐的淡黄色菌落,随着培养时间延长,黄色素由淡黄色、黄色至金黄色.在麦康凯平板上菌落较小,约1 mm,为圆形、光滑、湿润、无色半透明的菌落.涂片染色为革兰氏阴性细长杆菌,两端钝圆,无芽胞.②生化反应:本株菌氧化酶(+),触酶(+),动力(-),OF为迟缓发酵,双糖(-)或(±),硫化氢(-),枸椽酸盐(-),硝酸盐还原试验(-),发酵葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、果糖产酸,不发酵木糖、蔗糖、乳糖,乙酰胺、DNA酶、七叶苷、靛基质、ONPG、明胶液化试验均阳性(+),尿素酶、鸟氨酸脱羧酶、赖氨酸脱羧酶、精氨酸双水解酶均阴性.③药物敏感试验:本株菌对氧哌嗪青霉素、氟哌酸、氟嗪酸、丁胺卡那霉素、卡那霉素、庆大霉素、菌必治、复达欣均敏感,对妥布霉素、氨苄青霉素、头孢唑啉、复方新诺明均耐药.鉴定依据:黄杆菌属的鉴定:①菌落微黄到亮黄色;②弱发酵型,无动力,无芽胞;③发酵葡萄糖、果糖、麦芽糖、甘露醇产酸,不发酵木糖、乳糖、蔗糖,不还原硝酸盐,β-半乳糖苷酸和DNA酶阳性.根据培养特性,生化反应结果,本株菌鉴定为脑膜败血黄杆菌[1,2].讨论:黄杆菌属细菌目前仍未能定科,该属细菌对糖的发酵较慢,通常在48 h或1周以上,产酸量较少,常将它按氧化菌来处理.而实际上,它是发酵菌.此菌属的细菌几经修改分类,现有7个种:脑膜败血黄杆菌、水生黄杆菌、短小黄杆菌、金矿黄杆菌、芳香黄杆菌、嗜糖黄杆菌、嗜醇黄杆菌,其中与人类疾病有关的有3种:脑膜败血黄杆菌、短小黄杆菌、芳香黄杆菌,临床上引起感染尤以脑膜败血黄杆菌为常见.黄杆菌因具有典型的黄色素而得名.广泛存在于自然界,为自然界的腐生菌,不是人体正常菌群,但可定植于住院病人,为机会致病菌,可引起外伤感染、手术后的菌血症、亚急性心内膜炎、肺炎、尿道炎、化脓性脑膜炎等.对婴幼儿有很高的选择性和毒性.此菌的毒力作用与其产生的蛋白酶和明胶酶有关,该菌感染的患者的病死率可高达69.5%.本例患儿因头颅开放性损伤而易感染此菌,经氧哌嗪青霉素静脉滴注1周治愈出院.因败血黄杆菌产生黄色素,在鉴定过程中应注意与肠杆菌科的板崎肠杆菌、聚团肠杆菌及非发酵菌的嗜麦芽假单胞菌区别:①板崎肠杆菌、聚团肠杆菌均为肠科细菌,OX(-),动力(+),能很快(18~24 h内)发酵分解葡萄糖产大量酸,而黄杆菌则相反.②嗜麦芽假单胞菌虽是非发酵菌,但OX多数为(-),仅2%(+),动力(+),赖(+),Ⅰ(-),产生的水溶性色素能在菌落周围的琼脂扩散,使血板变绿黄色,有溶血,而黄杆菌则相反.
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嗜麦芽窄食单胞菌研究进展
嗜麦芽窄食单胞菌(stenotrophomonas maltop-hilia,S.m)是一种非发酵革兰氏阴性杆菌,以前曾用过嗜麦芽假单胞菌和嗜麦芽黄单胞菌等名称,1993年Palleroni等(1))将其从黄单胞菌属分离出来,由于该菌株能代谢的物质种类十分有限,与其它细菌形成较大差别,因此,新菌属以该菌特点命名为窄食单胞菌,由于其属内仅有一个种,故称其为嗜麦芽窄食单胞菌.