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一起罕见"恶臭假单胞菌"引起的幼儿园食物中毒
2006年9月22日11:30.昆明市某区幼儿园数十名儿童发生不明原因呕吐、腹泻.市、区疾病预防控制中心(CDC)专业人员和卫生监督部门即赶赴现场进行流行病学调查.经采集幼儿园内凉、熟食品、水及现症患者肛拭,结果在2份酸奶和2份肛拭中检出恶臭假单胞菌.
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首次截获来自美国的不合格进境环保微生物菌剂
目的 通对美国进境的环保微生物菌剂恶臭假单胞菌进行鉴定.方法 从该样品中分离、纯化得到菌株,进行形态学、生理生化测定,并提取其基因组DNA,进行16SrDNA扩增、基因测序等,分析该菌是否是恶臭假单胞菌.结果 综合形态学、生理生化特征,16SrDNA扩增片段序列分析及在数据库NCBI上比对结果,分析该样品中不含有恶臭假单胞菌,与申报进境的商品不符.结论 首次截获从美国进境的不合格环保微生物菌剂恶臭假单胞菌.
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重症监护室患者尿路感染恶臭假单胞菌的耐药性研究
目的 研究医院重症监护室患者尿路感染恶臭假单胞菌情况及其耐药性,为临床合理用药提供依据.方法 采用回顾性调查方法,对医院神经外科重症监护室(NICU)住院患者尿路感染恶臭假单胞菌情况及其耐药性进行了监测.结果 在18个月时间里从该医院NICU住院患者送检标本中共检出病原菌383株,其中恶臭假单胞菌为26株,占6.79%.所检出的恶臭假单胞菌对多数常用抗菌药物耐药率超过60%.结论 NICU尿路感染患者恶臭假单胞菌的分离率较高,且对大部分抗菌药物具有较高的耐药性.
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早餐奶污染恶臭假单胞菌引起食物中毒一例报告
2007年7月中旬江苏省海安县某小学一名学生因食用南方某品牌早餐奶数小时后出现腹痛、腹泻、发热等症状,经投诉由海安县工商部门去销售点采样后送海安县疾病预防控制中心检验,鉴定为恶臭假单胞菌污染牛奶引起的食物中毒.
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限制酶分析在假单胞菌及其L型鉴定中的应用
假单胞菌是临床常见的致病菌之一,铜绿假单胞菌为医院内感染常规检测菌.为建立对其快速、准确鉴定的方法,我们对获自中国科学院AS菌种保藏中心的14株假单胞菌标准株(包括铜绿假单胞菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌和嗜麦芽假单胞菌等)及临床分离到的铜绿假单胞菌,用EcoRⅠ、 HindⅢ、SmaⅠ和PstⅠ(Promega及华美公司)等限制性内切酶分析其染色体的限制酶图谱(REP),其中EcoRI和SmaI对这些菌种的鉴别效果较好.
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结核性拇指骨髓炎合并恶臭假单胞菌感染一例
2003年4月,我院从1例拇指骨髓炎患者的脓液和组织标本中分别分离出恶臭假单胞菌和人型结核分枝杆菌,报告如下.
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从全耐药恶臭假单胞菌检出一种氨基糖苷类修饰酶aac(6′)-Ⅰb基因的新变型基因
目的 研究全耐药恶臭假单胞菌(PPU)耐药机制.方法 应用法国生物梅里埃公司的API鉴定条/PSE5.0药敏条和美国BD公司的Phoenix NMIC/ID-109鉴定/药敏板鉴定和细菌药敏试验,应用PCR法检测1株全耐药PPU临床分离株6种氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因,并对阳性产物测序和同源性分析.结果 在该株菌两种方法药敏结果均为全耐药;4种AMEs基因(aac(6′)-Ⅰb、aac(3)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ)PCR阳性, 测序和同源性分析证实为4种基因且aac(6′)-Ⅰb 为新变型,GenBank注册号为 EU 137667.结论 该株全耐药氨基糖苷类抗菌药物耐药机制主要与4种AMEs(aac(6′)-Ⅰb、aac(3)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ)有关;从全耐药PPU检出一种AMEs基因aac(6′)-Ⅰb 的新变型基因,经检索中文生物医学期刊文献数据库(CMCC)和Medline数据库,本研究是第1篇从PPU检出AMEs 基因aac(6′)-Ⅰb、aac(3)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ)及aac(6′)-Ⅰb新变型耐药基因的报道.
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恶臭假单胞菌感染至婴儿肺炎合并急性心力衰竭1例报告及文献复习
目的 探讨恶臭假单胞菌感染的发病原因、临床表现、治疗及预后.方法 报道1例恶臭假单胞菌感染至婴儿肺炎合并急性心力衰竭的临床资料,并复习相关文献.结果 恶臭假单胞菌感染近年来呈上升趋势,多为院内感染,病情重,可致中毒症状、多系统感染、败血症甚至感染性休克,耐药菌株多.结论 对于反复感染抵抗力差的患儿需注意假单胞菌感染,尽早做培养明确病原菌及敏感药物;主张应用加酶抑制剂的β-内酰胺类抗生素,亦主张大环内酯类和β-内酰胺类联合应用以提高治愈率.
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生物发光标记分析甲苯降解菌的研究
目的 研究驯化的甲苯降解菌在微宇宙中的生长、降解甲苯的状况.方法 采用lux发光标记实验室筛选、驯化的甲苯降解菌--恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida TJI)菌株,投加到模拟甲苯污染的微宇宙中,用顶空气相色谱法监测甲苯降解情况,以平板计数法测定发光菌活菌数,以弱光仪监测发光强度的变化,以了解外源降解菌在微宇宙的生长及甲苯降解作用.结果 被标记的恶臭假单胞菌菌落于暗室中肉眼可见并可用X片感光拍照,菌液发光强度可用弱光仪检测.发光菌落计数显示,投加的外源降解菌在微宇宙中生长良好;发光强度与发光菌活菌数变化趋势一致.微宇宙土著微生物7 d甲苯降解率仅为40.2%,而投加降解菌后达到91.0%.结论 通过lux发光标记可实时跟踪驯化的甲苯降解菌在微宇宙中的生长状况.微宇宙中的土著微生物本身含有甲苯降解能力的菌群,但其降解作用有限,不足以满足自净要求,投加外源高效降解菌可以显著增强生物修复效果.
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氯霉素降解菌的筛选与降解性能
目的 从被氯霉素污染的南明河水中定向筛选高效降解氯霉素的菌株,并初步探讨其降解特性,为水体中氯霉素污染的微生物处理提供有效的菌源与理论依据.方法 采用选择性富集培养、划线分离筛选降解菌,观察其形态,进行生化鉴定确定其种属;并用培养技术和液质联用仪检测菌株对底物氯霉素的利用和降解情况.结果 从南明河水样中定向筛选到2株氯霉素降解菌,分别为嗜水气单胞菌和恶臭假单胞菌;在氯霉素的初始浓度为50 μg/L的无机盐培养液中,经两周降解试验,嗜水气单胞菌对氯霉素去除率为13.79%,而恶臭假单胞菌对氯霉素去除率为89.54%.结论 筛选出的恶臭假单胞菌对氯霉素有较高并且稳定的降解能力,具有潜在的应用价值.
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首次发现恶臭假单胞菌引起的食物中毒
在一次大面积食物中毒中,检出1株革兰氏阴性非发酵菌.用NFC鉴定卡,经Vitek32型全自动微生物分析系统鉴定,确认该菌为恶臭假单胞菌.经流行病学调查、细菌分离、小白鼠毒力实验及患者血清凝集反应,证实该菌为本次食物中毒的致病菌.国内外文献查新检索证明:迄今为止,国内外尚未见恶臭假单胞菌引起食物中毒的报道.本次由恶臭假单胞菌引起的食物中毒在国内外尚属首次发现.
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一株假单胞菌属低温噬菌体的分离及其特性研究
目的 从纳帕海湿地土样中分离和培养低温菌及其噬菌体,并对其特性进行研究.方法 分离纯化低温宿主菌,采用“双层平板法”分离获得噬菌体,通过16S rRNA基因分析对宿主菌进行初步鉴定,对噬菌体进行电镜形态观察,并进行噬菌体基因组酶切片段长度多态性分析及噬菌体生理特性研究.结果 从纳帕海土样中分离获得一株裂解性低温噬菌体,命名为SV-12,其宿主菌S-12鉴定为恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida).噬菌体SV-12有囊膜,头部为典型的正六边形,立体对称结构,直径约68.7 nm;尾管长约122.5 nm,直径约25 nm;在4℃时具有侵染活性,4~ 25℃均能产生边缘清晰、透明的噬菌斑.适感染温度约为10℃,pH耐受范围较广,在pH=10时具有多出斑数.结论 SV-12属于肌尾噬菌体科,为裂解性噬菌体,对氯仿极度敏感.基因组为dsDNA,大小约为74 kb.
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小儿败血症临床流行病学及药敏试验分析
败血症是细菌感染中严重的感染性疾病,为了解目前小儿细菌感染及耐药情况,以指导临床合理选择用药,作者将近几年临床观察作一总结如下。临床资料回顾性分析1990年1月~1999年12月我院收治的资料完整的符合败血症诊断标准的小儿共105例,不包括新生儿,男60例,女45例;<2岁66例,~6岁22例,~12岁17例。本组病例原发病为肺炎50例,免疫功能低下10例,白血病和腹泻病各8例,尿路感染6例,中枢感染、皮肤软组织感染各5例,原发性腹膜炎,CMV感染各1例,原发疾病不明确11例。血培养结果示G+球菌分别为:表皮葡萄球菌35株,链球菌属27株,金黄色葡萄球菌7株,腐生性葡萄球菌6株,微球菌属和赛氏葡萄球菌各1株。G-杆菌分别为:大肠杆菌11株,克雷伯氏菌和枯草杆菌各4株,绿脓杆菌3株,鲁氏不动杆菌、坂崎氏杆菌、巴斯特菌属、洛菲氏不动杆菌、荧光、恶臭假单胞菌各1株。对阳性血培养均做药物试验,前4种菌株耐药情况见表1。
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B33-18 通过补料分批培养重组恶臭假单胞菌将甲苯生物转化为对羟基苯甲酸盐
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恶臭假单胞菌引起耳廓感染1例
P.putida(恶臭假单胞菌)为非发酵菌,是鱼类的一种病原菌,对人体是一种少见的机会致病菌.我科于2000年7月23日从1例耳廓外伤患者的分泌物中培养分离出1株P.putida ,报告如下. 1 病例简介患者杨××,男,25岁,因工作不慎而摔倒在角钢上,当即耳廓外耳轮上部横行断裂,伤口约3 cm.在厂卫生所缝合,4天后因耳廓疼痛,局部发热肿胀前移,原缝合线自行脱落,内有脓性分泌物.于2000年7月19日来我院治疗,分泌物作细菌培养,分离出1株P.putida; 后经清创,同时以羧苄青霉素、诺氟沙星及局部上药治疗,治愈出院.
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恶臭假单胞菌污染全营养混合液17例报告
0 引言肠外营养支持已广泛应用于临床.全营养混合液(TNA)的配制质量十分重要,直接影响营养支持效果和病人生命安全.TNA要求在无菌条件下配制,一般不易发生污染.一旦发生污染 ,可能直接危及病人生命.我科1998年夏季发生17例TNA污染恶臭假单胞菌事件,具有一定流行病学特点.为总结经验教训,引起广大医务人重视,现报告如下.
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复发性口腔溃疡(ROU)合并恶臭假单胞菌感染1例报告
假单胞菌属在正常人类口腔中可分离获得,作为条件致病菌,此属菌中绿脓杆菌致病报告较多,恶臭假单胞菌致病的报告少见,我科曾遇1例,现报告如下:
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二氢嘧啶酶产生菌的筛选及发酵条件的研究
通过筛选确定由恶臭假单胞(Pseudomonas putida)D菌产生的二氢嘧啶酶对5-对羟基苯海因的水解能力较强,该产酶菌发酵条件的研究表明酵母膏对产酶十分重要.甲硫乙基海因对二氢嘧啶酶具有强诱导作用.此产酶菌适培养基组成为(%):甘油1.0,酵母膏1.0,NaCl0.3,K2HPO4·3H2O0.2,甲硫乙基海因0.1,MgCl2·6H2O0.05,28℃,发酵18h,每ml发酵液酶活力为2.26U.
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假单胞菌海因酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
目的:构建海因酶基因工程菌,以便实现对羟基苯甘氨酸的工业化生产。方法:利用PCR技术从恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida) 9801中扩增得到海因酶基因,将该基因插入pMD18-T质粒,转化大肠杆菌(Escherichia coli),通过地高辛标记原位杂交和海因酶活力测定两种方法,筛选出具有海因酶活力的阳性转化子。结果:工程菌E.coli BL21/pMD-dht的海因酶活力达到1700 U/L,比野生菌恶臭假单胞9801菌的酶活力提高8倍。SDS-PAGE显示海因酶的单体分子量约为53 KDa,海因酶的表达量约占菌体总可溶性蛋白的20%。结论:构建的海因酶基因工程菌已初步具有工业化应用价值。
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甲苯生物降解的关键酶基因克隆及表达
目的:克隆、表达恶臭假单胞菌生物降解甲苯的关键酶基因.方法:恶臭假单胞菌WZ-1在含甲苯的MS培养基中培养以鉴定其降解甲苯的能力.设计引物扩增甲苯生物降解的关键酶——甲苯双加氧酶和邻苯二酚1,2双加氧酶基因,PCR扩增目的片段后进行T-A克隆,筛选阳性克隆并鉴定.构建甲苯双加氧酶-pET28a进行体外诱导表达.结果:恶臭假单胞菌WZ-1在含甲苯的MS培养基的生长曲线证明其具有降解甲苯的能力;通过重组技术获得阳性克隆,并以酶切、DNA测序进行鉴定;IPTG诱导后获得重组甲苯双加氧酶的高表达.结论:成功获得了用于降解甲苯的甲苯双加氧酶基因和邻笨二酚1,2双加氧酶基因,并在体外诱导表达了目的蛋白,为后续利用模式生物对苯系物的生物降解建立了实验基础.