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167种食品中的李斯特菌检验
通过对南京某地区6类167种食品李斯特菌的初步分离鉴定,发现MMA分离平板上除45°光线下为蓝色或灰蓝色的S型小菌落外,呈现扁平、干燥、边缘不整齐的菌落(R菌落)也为李斯特菌的可疑菌落,同时发现触酶阴性、MR阴性、VP阴性及尿素酶阳性的菌株.结果表明,S型小菌落、尿素酶阴性、MR阳性、VP阳性及触酶阳性均不能作为李斯特菌鉴定的严格标准.
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结核分枝杆菌胶体金法快速鉴别试剂盒的临床应用观察
目前,传统的分枝杆菌菌种鉴定方法需在改良罗氏L-J培养基、硝基苯甲酸PNB和2-噻吩羧酸肼(TCH)鉴别培养基上初步鉴定结核分枝杆菌(MTb)和非结核分枝杆菌(MOTT)后,再观察细菌菌落形态、生长速度、生长温度和色素,并进行一系列生化试验,操作繁琐、费时,影响因素多;
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分支杆菌分子菌种鉴定方法的研究进展
由于全球范围内肺结核及非结核分支杆菌病的发病呈逐年上升趋势,准确而快速的菌种鉴定技术对结核病的诊断和鉴别诊断及有效化疗都有极其重要的意义.目前国内外采用传统的分支杆菌菌种鉴定方法需依据细菌生长速度、色素产生及多种生化试验等结果综合分析才能获得结果;而BACTEC TB460、TB960培养基系统虽快速(2~6d),但只能初步鉴定结核分支杆菌复合群和非结核分支杆菌,不能将细菌鉴定至种.近年来建立的色谱方法虽能达到部分菌种鉴定的目的,但需特殊仪器,临床尚未普遍开展.目前国内外研究者都致力于使分支杆菌菌种鉴定从细胞表型水平进入分子基因水平.现对分支杆菌分子菌种鉴定方法的研究进展综述如下.
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显色培养基联合简单生化试验鉴定常见氧化酶阴性革兰阴性杆菌的能力验证
目的对显色培养基联合简单生化反应鉴定常见氧化酶阴性革兰阴性杆菌的方案进行能力验证。方法以VITEK 2Compact全自动微生物分析系统鉴定细菌作为参考方法,计算联合应用科玛嘉定位显色培养基、吲哚试验、鸟氨酸脱羧酶试验、赖氨酸脱羧酶试验鉴定临床标本中常见氧化酶阴性革兰阴性杆菌的敏感度、特异性、似然比、约登指数、Kappa值等参数并进行McNemar检验,分析这一方案的真实性、与参考方法的一致性并比较经济成本。结果通过对8个属10个种共318株氧化酶阴性革兰阴性杆菌鉴定结果的分析表明,黏质沙雷菌、嗜麦芽窄食单胞菌、鲍曼不动杆菌的敏感度和特异性均为100%,大肠埃希菌、产气肠杆菌、肺炎克雷伯杆菌的敏感度和特异性均大于90%,阴沟肠杆菌、产酸克雷伯杆菌、弗劳地枸橼酸杆菌和奇异变形杆菌的特异性均大于90%,但灵敏度为75%~90%;除了弗劳地枸橼酸杆菌的Kappa值为0.5947外,其余均大于0.85;McNemar检验P值均大于0.05;本研究方案成本只有参考方法的10%。结论显色培养基联合简单生化试验可快速经济有效地鉴定数种常见氧化酶阴性革兰阴性杆菌。
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三种表型试验单用和联用鉴定金黄色葡萄球菌能力的评估
目的 对单个和联合三个表型生化试验鉴定金黄色葡萄球菌进行评价.方法 以PCR检测spa基因以及Vitek-2系统鉴定结果作为参考方法,分析比较DNA酶试验(DNase)、高盐甘露醇平板生长试验(MSA)、试管法测血浆凝固酶(TCT)单用鉴定金黄色葡萄球菌的敏感度、特异性、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比、约登指数等参数,并分析联合应用三者鉴定金黄色葡萄球菌这一方案与参考方法的一致性、经济成本和相关诊断参数.结果 本研究共收集到葡萄球菌属菌株324株,其中金黄色葡萄球菌293株、非金黄色葡萄球菌31株,单个表型试验不能准确地鉴定金黄色葡萄球菌,联合三个表型试验方案与参考方法的一致性较好(Kappa值为0.9441)、经济成本较低,敏感度和特异性分别为100%、90.3%.结论 DNA酶试验、高盐甘露醇平板生长试验和试管法测血浆凝固酶三者联合可以经济有效地鉴定金黄色葡萄球菌.
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1株与志贺氏菌生化相似、抗原相同的大肠埃希氏菌
目的 为正确鉴定肠侵袭型大肠埃希氏菌与志贺菌提供参考.方法 对采集到的1份感染性腹泻标本进行致病菌分离,对初步鉴定为志贺氏菌的可疑菌进行进一步生化鉴别试验及血清学诊断试验.结果 检出1株一般生化特性符合志贺氏菌,并与其诊断血清发生交叉凝集反应的肠侵袭型大肠埃希氏菌.结论 肠侵袭型大肠埃希氏菌与志贺氏菌有极其相似的生化特征,相同的抗原成分,在分离志贺氏菌时,为避免鉴定错误应当使用经典可靠的生化试验方法,以确保菌株鉴定的准确性.
关键词: 志贺氏菌 肠侵袭型大肠埃希氏菌 交叉凝集 生化试验 -
血浆凝固酶阴性葡萄球菌快速两步鉴定方法
近年来使用医疗器械导致的感染,尤其是免疫缺陷患者的血浆凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)感染增多已引起重视,而常用鉴定法程序繁琐、费高耗材.我们参考Ieven等[1]建立的方法,仅用几种常用细菌生化试验与药敏试验组成的两步法,可将临床分离的86株CNS中的83株(96.5%)快速鉴定到种,报告如下.
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生化检验在糖尿病诊断中的临床价值分析
目的:探讨糖尿病生化检验在其病情诊断中的意义。方法选取该院于2012年7月—2013年2月接收的糖尿病患者124例,列为观察组;另取同期进行常规体检的健康者124名,列为对照组,对两组分别进行血样采集,进行空腹血糖、血脂和糖耐受试验等生化检验,并对比两者检验结果。结果观察组GLU、TC、LDL-C、TG均高于对照组,而HDL-C低于对照组,对比结果,差异有统计学意义(P<0.05);且糖尿病患者的糖耐受能力明显较低。结论对糖尿病患者进行空腹血糖、血脂和糖耐受试验等生化检验,可为其病情的确诊及治疗带来可靠依据。
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经放射线照射后口腔链球菌的分子生物学鉴定
通过生理、生化试验可对口腔及咽喉部的97.9%的口腔链球菌分离株做出鉴定.但是对一些生长缓慢的细菌,或表型特征介于两个种之间的菌株,只靠生化试验不能明确鉴定到种.而分子生物学鉴定方法如16S rDNA序列同源性分析可将细菌准确、快速地鉴定到种.我们采用16S rDNA序列同源性分析的方法对放疗后生化试验表型发生变化的菌株进行了鉴定.
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以脑病为首发症状的肺癌2例误诊分析
1 临床资料病例1 患者,男,46岁,工人,因"后枕部头痛,头晕2周"就诊,患者于2周前不明原因开始头晕,头重脚轻感,后枕部头胀痛,无恶心、呕吐,无肢体麻木及活动障碍,曾行针灸治疗10 d,无效,遂就诊我院.行HCT示:桥脑、延髓可见弥漫性低密度影,考虑脑干脑炎入院.查体:T:36.8,Bp 120/80 mm Hg,神清语利,双眼球可见水平震颤,余颅N(-),颈略抵抗,心肺(-),肢体肌力、肌张力正常,腱反射(++),病理反射未引出,指鼻试验、跟膝腱反射正常,闭目难立征(+),直线行走不稳.腰穿示:颅内压250 mmH2O,常规生化试验正常.入院诊断"脑干脑炎",给予应用甘露醇+氟美松10 mg ivdrip 7 d,阿昔洛韦0.5 q8 h 2周,患者临床症状好转出院.出院后类似症状再发,再次HCT,影像改变同前,故就诊于青医附院,行血AFP+CEA、双肺CT、支气管镜检查,确诊为肺癌.
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臭鼻克雷伯菌的分离鉴定及区药敏分析
我院1997年1月-2000年4月从临床各科送检的标本中分离出臭鼻克雷伯菌,现分析报告如下。1 材料与方法1.1 菌株来源本院耳鼻喉科诊断为急慢性鼻炎患者的鼻分泌物中检出78株,检出率为11.8%,痰中检出74株,脓汁及尿液中各检出2株。1.2 生化试验生化管用上海医学化验所试剂厂,培养基为本室自制,并用标准菌株检验合格方才使用。
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肝素锂抗凝的血浆和不抗凝的血清检测离子的比较
目前大部分医院用患者血清进行生化试验, 各种正常值也是根据血清中的含量所确定. 但是用血清测定有其本身的弊端, 血液从人体抽出到凝固析出血清一般需要1小时以上的时间, 严重影响了结果回报的时间, 而时间对于患者来说意味着生命, 因此需要尽快作出准确的结果. 另外, 现在许多医院都使用全自动生化分析仪, 因为其样本针及各种管道都比较细, 需要血清必须凝固的相当完全, 否则极易堵塞管道, 因此, 急诊常用肝素钠抗凝. 近笔者用肝素锂作为抗凝剂用于测定K, Na, Cl, Ca, P, Mg, 并与血清测定比较, 发现肝素锂抗凝分离出的血浆与血清检测结果没有显著性差异.
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论全面生化反应和血清学在沙门菌临床检验中的应用研究
本文用血清学、生化学等相关学科相结合的方法,综合文献法、实验法、观察法和调查研究法,对全面生化反应和血清学在沙门菌临床检验中的应用研究.首先研究全面生化反应的实验原理以所得出的数据,其次再做血清学实验,根据两次实验结果得出全面生化反应和血清学检验在沙门菌临床检验中的重要作用以及如何预防沙门氏菌.
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沙门氏菌血清学分型
国标常见的沙门氏菌属有140个血清型,血清学分型是沙门氏菌检验中的重要鉴定方法,主要有 O抗原的鉴定、H抗原的鉴定、少数菌的Vi抗原的鉴定.血清学分型比较复杂,常出现H因子没有很好生长发育而无法分型的现象,采用位相变异试验来诱导另一相H因子,可以很好地鉴定其血清型.方法:《食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》GB 4789.4-2016.
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生物化学试验分析前的影响因素
现代医学的进步随之带来的试验技术的先进,使对人类疾病的认识、诊断和治疗越来越依赖实验室检验,许多的诊疗决定完全是根据实验室检验结果来定论,因此实验室结果的准确性在医疗实践中至关重要.但在实际工作中,临床医务人员只重视检验结果的分析,而往往忽略了分析前的影响因素,给疾病的诊断造成错误的判断.为了使检验结果有效地用于临床,医务人员包括实验室工作人员必须充分了解实验项目在体内的生物学影响因素和标本采集的质量保证.笔者根据有关资料[1~3]与临床体会综述影响生化试验分析前的重要因素.
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溶血标本对常规生化检验结果的影响
目的::观察分析常规临床生化检验结果受溶血标本影响程度,为诊疗过程中溶血标本的合理应用提供临床依据。方法:选取正常血清标本,对其临床生化项目进行检验,统计未出现溶血、溶血程度不同的标本相应检验结果并进行分析。结果:溶血为轻度的标本显著影响了LDH、ALP、TP、AST、LDH、UA、CRE、GLU、UREA、HBDH以及CK-MB检验结果;溶血若属重度,则会同时对上述项目以及ALB、APOA、HDL-C等检验结果产生显著影响。结论:溶血标本会对临床大部分生化检验项目产生显著影响。
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Taq Man-MGB探针实时荧光PCR快速检测副溶血性弧菌的方法研究
副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus)为广泛分布于沿海地区的革兰氏阴性嗜盐菌,属弧菌科(Vibrio)弧菌属,是食源性疾病的重要致病菌之一.尤其在夏秋季节,经常由于食用带有大量副溶血性弧菌的海产品或被此菌污染的食品,引起暴发性食物中毒[1],在细菌性食物中毒中比例高、危害大.患者可出现腹泻、肠痉挛、恶心、呕吐和发烧等典型胃肠炎反应.因此在饮用水、食品检测和食物中毒源调查、传染病源调查工作中,常需要对副溶血性弧菌进行检测.传统的检测法需要增菌培养、分纯、镜检和生化试验等步骤;该法的阳性检出周期至少要72 h,操作烦琐,且容易出现假阴性[2].因为在营养不足或应激的情况下,副溶血性弧菌很容易进入不可培养状态.本试验旨在建立一套利用Taq Man-MGB探针实时荧光PCR快速检测副溶血性弧菌的方法,为临床和环境检测副溶血性弧菌提供方法,现将结果报道如下.
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不同试剂添加方式对生化试验结果影响的探讨
目的 探讨全自动生化分析仪不同的试剂添加方法对试验结果的影响.方法 在四组试剂添加方式下测试质控品15项生化指标,分析结果差异.A组:使用新开封的试剂;B组:将剩余试剂盖盖儿冰箱保存,混合使用;C组:将瓶内剩余的试剂倒入新的试剂瓶里;D组:在瓶内剩余试剂基础上加入新的试剂.结果 通过四组添加方法的对比分析,A组分别和B组、C组、D组实验结果中的钙、镁结果比较具有明显的差异(P<0.05),具有统计学意义;而四组其他的相关指标比较无明显的差异(P>0.05),无统计学意义.结论 在试剂添加中采取以上四种方法均可行,但要注意使用时间限制.对于一些不稳定的试剂要采用A组方法,要正确评估试剂用量,科学添加试剂.
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鸡源性肠炎沙门氏菌的流行病学调查
目的 与方法通过对一株分离自患病蛋鸡的沙门氏菌进行了生化鉴定、血清学鉴定、分子生物学检测和攻毒试验,确定了我国鸡群中存在肠炎沙门氏菌的感染;通过血清学试验,对我国部分鸡群进行了血清流行病学调查.结果 结果表明,从临床分离的沙门氏菌与肠炎沙门氏菌的微生物学和生物化学特征相符合,通过血清型鉴定、PCR检测、DNA测序和分析证明分离的肠炎沙门氏菌株与标准株肠炎沙门氏菌相符合;首次全国范围血清流行病学调查,从全国采集603份蛋鸡血清中发现9份阳性样本,利用肠炎沙门氏菌阳性血清检测从当地禽内、蛋样本中分离的8株可疑沙门氏菌,未检测到肠炎沙门氏菌.结论 本研究结果显示,我国部分地区蛋鸡群中存在肠炎沙门氏菌的感染,但是鸡群感染率不高.
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结核分枝杆菌分型鉴定技术及其研究进展
结核分支杆菌的分型鉴定方法,主要分为非核酸法和核酸法.非核酸分型方法即传统分型方法,多是在细菌表型特征的基础上认识细菌的,包括生化分型法、血清分型法和噬菌体分型法.但由于结核分枝杆菌分离株具有高度同源性,通过常规的生化试验和血清学方法是无法鉴别的,所以,对于结核分枝杆菌,唯一可用的传统的菌株鉴定方法只有噬菌体分型法.随着分子生物学理论和技术的飞速发展,1980年以后,逐步建立了一些根据核酸序列进行菌株鉴定的高度特异的基因分型方法,即核酸法.主要包括:限制性片段长度多态性、DNA指纹图谱分析、脉冲场凝胶电泳、PCR酶切分型、随机扩增多态性DNA、DNA序列分析以及基因芯片技术等等.随着上述方法的应用,使结核分枝杆菌的菌株分型进入了一个全新的领域,也进而使结核病流行病学的研究取得了很大的进展.