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肠炎沙门氏菌脉冲场凝胶电泳分型研究
目的为研究肠炎沙门氏菌菌株间的关系,特建立了分子流行病学研究方法-脉冲场凝胶电泳分型方法,并对从食品中分离的肠炎沙门氏菌进行了分型研究.方法1991～2001年间,从河南、黑龙江等省份采集食品样品,分离出肠炎沙门氏菌,挑取单个菌落增菌,用溶菌酶、蛋白酶K和TE缓冲液依次提取菌体DNA后,用限制性内切酶XbaΙ消化胶块,然后在CHEFMapper仪上进行脉冲场凝胶电泳,电泳条件:0.5×TBE缓冲液、14℃、1%琼脂糖、脉冲时间5s～45s、26h、6V/cm.应用λ噬菌体DNA作为脉冲场凝胶分子量标准.结果从鸡肉、牛肉、熟肉及蔬菜中分离出30株肠炎沙门氏菌,其中18株来自河南省,绝大多数菌株(22株)分离于2001年.对所得菌株进行脉冲场凝胶电泳后,结果显示30株肠炎沙门氏菌分为A、B两个型,两型图谱之间有8个条带的差异.A型菌株有19株,占全部菌株的63.3%,B型菌株有11株,占36.7%.A型之内又可以分出2个亚型,其中A1型占78.9%,A2亚型与A1亚型相比的差别在于,A2型在50kb处有一条带缺失.在菌株分型与采集时间和采集地点之间没有相关性,但所有从鸡肉中分离到的菌株均为A1型,提示了某种有待进一步研究的流行病学趋势.结论在研究肠炎沙门氏菌不同菌株之间的分子流行病学关系方面,脉冲场凝胶电泳是一种有效的方法.
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髋关节穿刺液中分离出肠炎沙门氏菌一例
病例摘要:2012年12月,我院从1例右髋关节化脓性关节炎患者髋关节液中分离出肠炎沙门氏菌现报道如下:患者女,39岁,因"脑积水"于2012年8月8日在本院脑外科行侧脑室-腹腔分流术,术后恢复良好.患者在住院期间出现无明显诱因间断性发热伴右髋关节疼痛,行CT检查,髋关节有少量积液,遂行髋关节MR3.0检查于右髋关节有积液征象,行髋关节液穿刺,抽出黄色粘稠样液体约10ML,送涂片培养检查示肠炎沙门菌.
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一起由肠炎沙门氏菌引起食物中毒的微生物学分析
沙门氏菌是引起细菌性食物中毒的常见病原菌之一,全年都有可能发生,夏秋季节尤其多见,多为动物性肉类食品引起.本文就一起由肠炎沙门氏菌引起食物中毒事件做微生物学分析.
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肠炎沙门氏菌引起食物中毒的病原学检验
目的 对一起肠炎沙门氏菌引起的食物中毒事件进行病原学检验.方法 将发生于2012年3月本市发生的一起因进食污染沙门氏菌的猪肉而引起的食物中毒病患32例作为研究对象,通过采样(病患粪便标本)、标本处理(先转种BS培养基,继而分离培养)、标本鉴定之后,进行病原分离鉴定及检验；采用Phoenix100型细菌鉴定仪对分离的菌株进行同源性分析.结果 BS培养基上有圆形突起、表面光滑的菌落,呈现无色透明(或半透明)并且属于中等的菌落,其边缘光滑带可见黑色中心；通过系统生化反应,可知硫化氢与赖氨酸脱羧酶皆为(+),而氰化钾生长、尿素及靛基质皆为(一)；经过了抗原分析后,AF-O多价与“O”9及(Hg,m)皆为(++++),而Vi与盐水对照则为(一).结论 本次研究未能从获取残余食物,从而直接获得肠炎沙门氏菌,但却从病患粪便中分离出了血清型别相同的该菌类.同时经过了相关处理分析后,可知分离出的沙门氏菌和病患血清的凝集效价有着诊断意义,并可以随着病程的发展而呈现递增的趋势.由此可见,本研究中的食物中毒事件属于肠炎沙门氏菌污染猪肉所致.
关键词： 肠炎沙门氏菌 食物中毒 病原学检验 Phoenix100型细菌鉴定仪 -
建立Taqman探针实时荧光PCR检测食品中肠炎沙门氏菌的方法
目的 利用Taqman探针实时荧光PCR检测食品中肠炎沙门氏菌.方法 根据沙门氏菌属共有基因序列和肠炎沙门氏菌的特异序列分别设计2组引物及探针,运用实时荧光PCR进行特异性、灵敏性及模拟样品的检测实验.结果 采用沙门氏菌属探针可检测到25种不同血清型沙门氏菌(共49株),而11株阴性对照菌株未得到扩增;利用肠炎沙门氏菌探针可从25种不同血清型的沙门氏菌(共49株)和11株阴性对照菌株中特异性的检测出全部15株肠炎沙门氏菌;以肠炎沙门氏菌系列稀释度菌液DNA为模板进行实时荧光PCR扩增,菌株的模板浓度与Ct值之间呈现良好线性关系,线性系数(R2) 0.993,扩增效率87％,低检测浓度260 cfu/mL;分别接种肠炎沙门氏菌于四种样品进行模拟样品检测,实时荧光PCR检测结果与经典培养鉴定方法的检测结果相吻合.结论 实时荧光PCR检测食品中肠炎沙门氏菌的方法特异性强、敏感度高,可应用于食品中肠炎沙门氏菌的检测.
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一起由肠炎沙门氏菌引起的食物中毒
1999年7月26日石家庄市第三医院肠道门诊接诊1例急性腹泻病人,当日疫情上报石家庄市卫生防疫站,9 h内病人家属又有6人相继发病.后经病原学检测和流行病学分析为一起由肠炎沙门氏菌引起的食物中毒.
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肠炎沙门氏菌rpoS基因缺陷株的构建及其生长特性观察
目的 利用λ-red同源重组系统构建食源性肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis,SE)CICC21482 rpoS基因缺陷株SE/⊿ rpoS,观察其在胁迫环境中的生长特性,以探讨rpoS基因的生物学作用. 方法 通过PCR扩增两侧为肠炎沙门氏菌rpoS基因同源臂,中间为卡那霉素抗性基因(km')的打靶片段,再电击转入含质粒pkD46的肠炎沙门氏菌中,替换rpoS基因,筛选阳性转化子SE/⊿rpoS并用PCR法验证. 结果 成功构建了肠炎沙门氏菌rpoS基因缺陷株.在常规LB培养基中37℃培养的缺陷株和野生株生长曲线差异无统计学意义(P＞0.05);SE/⊿ rpoS菌株在45℃、2％NaCl和pH4.0应激条件下的生存能力较野生株弱(P＜0.05). 结论 成功构建SE/⊿ rpoS基因缺陷株.该基因在肠炎沙门氏菌克服高温、高渗、酸应激时被诱导表达从而发挥作用.此结果为进一步研究rpoS基因在应激过程中的作用机制提供了基础资料.
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肠炎沙门菌食物中毒中PFGE的应用
目的 对2014年武汉市某区一起食物中毒事件的病原体进行分离鉴定及同源性分析. 方法 参照GB4789-2012和WS/T 13-1996的方法进行病原菌的分离培养,对检出菌进行表型鉴定;采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型方法对检出菌及实验室收集的其他肠炎沙门氏菌进行分子分型和流行病学特征分析;采用WHO推荐的改良K-B法对检出菌进行抗生素敏感试验 结果 流行病学调查及实验室病原学检测证实,本起事件是一起由肠炎沙门氏菌引起的食物中毒,共分离到18株肠炎沙门氏菌.分离白该事件可疑食物及患者肛拭子的肠炎沙门氏菌相似系数为100％,与同一时期散发临床患者分离的肠炎沙门氏菌相似系数约为90％,与2012年健康体检分离株及2013年、2014年临床患者分离株小相似系数＞90％.此次食物中毒株对所检测药物敏感性较好. 结论 此次食物中毒病原菌为本地区流行的肠炎沙门氏菌优势株.PFGE可用于细菌性食物中毒的溯源分析.
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一起由肠炎沙门氏菌引起食物中毒事件的流行病学调查分析
目的：对一起疑似食物中毒事件进行流行病学调查，确定中毒原因。方法：开展疑似食物中毒病人流行病学个案调查和现场卫生学调查，对中毒病人和环境样品进行采样，样品参照GB4789.4-2010食品卫生微生物学检验沙门氏菌检验等标准进行检验。结果：从剩余食物和患者样品中均检出肠炎沙门氏菌。结论：经流行病学调查、卫生学调查及病人临床表现以及实验室检验结果综合分析，确定为一起由肠炎沙门氏菌引起的食物中毒事件。
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沙门氏菌引起的食物中毒
目的 探讨沙门氏菌引起的食物中毒的原因及预防方法.方法 回顾性分析2011年发生的一起餐厅沙门氏菌引起的食物中毒资料.结果 在本资料采集的6份标本中有3份标本分离出沙门氏菌,通过沙门氏菌血清学鉴定检查出其为肠炎沙门氏菌,而另外3份标本中没有检出肠道致病菌.结论 通过患者的临床表现以及实验室鉴定结果,同时按照WS/T13-1996沙门氏菌中毒诊断标准确定为该次中毒事件是由于肠炎沙门氏菌所引起的细菌性食物中毒.
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血液中分离出肠炎沙门氏菌的1例报告
0引言
2012年9月我室从一肾移植术后患者血液中分离出肠炎沙门氏菌，现特予报道。
1病例
患者男，48岁，5个月前患者因“慢性肾功能不全-尿毒症”肾移植手术，术后常规服用免疫抑制剂抗排斥治疗，肾功能正常后出院，肾移植术5个月后，因患者受凉出现发热、咳嗽、畏寒入院。查体：T：38.5℃,血常规：WBC 13.94 N 86.74 L 8.52 M 4.60 HB 149 PLT 111。血培养分离出肠炎沙门氏菌，经敏感药物头孢哌酮/舒巴坦等综合治疗第25d 痊愈出院。 -
一株肠炎沙门氏菌的鉴定
沙门氏菌是重要的肠道致病菌,是一个很大的菌属,其血清型超过2000个,我国已发现216个,能引起多种脊椎动物的肠道感染,其中一部分能引起温血动物和人类的感染,因此受到了人们广泛的关注,肠炎沙门氏菌是其中的一种,常可引起鸡、鸭等禽类感染[1～2],近年来,有不少关于肠炎沙门氏菌引起人类食物中毒的报道[3～7],因此,该菌的检验对于肠道疾病的诊断有重要意义.
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一起肠炎沙门氏菌食物中毒的调查
目的：了解食物中毒的发生过程及其原因,为预防此类事件的发生和加强食品卫生监管提供依据。方法采用流行病学、现场卫生学调查及实验室检测等方法进行调查分析。结果本次食物中毒发病55例,罹患率约为23.5%(55/234)；潜伏期3.5~40 h,平均12 h；中毒的主要原因是进食被肠炎沙门氏菌污染的食品。结论此次事件为肠炎沙门氏菌引起的食物中毒,建议监管部门应加强对餐饮单位食品安全监督力度,餐饮单位应加强自身管理,预防此类事件的发生。
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一起肠炎沙门氏菌引起食物中毒的病原学检测
目的 快速查找食物中毒原因,为食物中毒处理提供依据.方法 依照GB4789.4-2010、GB/T4789.6-2008、霍乱防治手册( 第五版)分别对14名患者的大便、肛拭,16份剩余食物样品进行致病菌检测.结果 从1份食品标本中和2份粪便8份肛拭子中检出肠炎沙门氏菌.结论 根据流行病学调查及实验室检测分析,本次食物中毒为肠炎沙门氏菌污染食物而引起的细菌性食物中毒.
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PFGE分型技术在食物中毒溯源中的应用研究
目的 对开封市某地区一起食物中毒事件的病原体进行分离鉴定及同源性分析,研究脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型技术在食物中毒溯源中的应用.方法 参照GB 4789.4-2010的方法进行病原菌的分离鉴定;采用PFGE分型方法对食物中毒检出菌及实验室收集的其他血清型沙门氏菌进行分子分型;采用微量肉汤稀释法进行抗生素耐药性研究.结果 流行病学调查及实验室病原学检测证实,开封市某地区的食物中毒事件是一起由肠炎沙门氏菌引起的食物中毒,共分离到3株肠炎沙门氏菌.分离自该事件病人肛拭子的肠炎沙门氏菌与在开封市某地区鸡肉中分离的肠炎沙门氏菌相似系数为100％.此食物中毒株对所检测药物敏感性较好,只对个别抗生素产生耐药性.结论 此次食物中毒病原菌为开封市某地区鸡肉中检出率较高的肠炎沙门氏菌.PFGE分型技术在细菌性食物中毒中可以进行溯源分析.
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脉冲场凝胶电泳(PFGE)技术在一起肠炎沙门氏菌食源性疾病暴发中的溯源分析
目的 对一起食源性疾病暴发事件调查中采集的样本进行致病菌检验,使用脉冲场凝胶电泳(Pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)技术对菌株分子流行病学检测以确定引起暴发事件病原菌间的关联性.方法 依据GB 4789方法对采集的样品进行病原菌分离、鉴定及药敏试验(K-B法),应用PFGE检测技术对检出的肠炎沙门氏菌进行分子分型,通过BioNumerics软件进行聚类分析.结果 从4份病人肛拭子标本、1份剩余三明治和1份操作台擦拭物中均分离出肠炎沙门氏菌,经酶切后PFGE电泳聚类图谱相似性100％.结论 经PFGE分子分型分析,确认这是一起由食用了肠炎沙门氏菌污染的食物后引起的食源性疾病.PFGE可有效应用于食物中毒溯源分析及分子流行病学研究.
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一起由沙门氏菌引起的食物中毒的实验室分析
目的 调查引起食物中毒的经过,确定中毒原因.方法 对食物中毒事件进行现场流行病学调查.采集患者粪便样6份进行细菌培养、鉴定.结果 5位患者的粪便中检出肠炎沙门氏菌.结论 流行病学调查以及病原学检测结果证实是一起由肠炎沙门氏菌引起的食物中毒.
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一起学生进食糕点引起肠炎沙门氏菌食物中毒的调查
目的 查明某中学学生集体中毒事件的原因,为采取有效控制措施和预防措施提供依据.方法 运用描述性流行病学方法对事件进行调查分析.结果 发病学生共34名,患者在相同的时间均食用了老船长西饼屋生产的“黄金三明”糕点,罹患率100％；2份剩余的“黄金三明”糕点均检出“肠炎沙门氏菌”；12份病人肛拭子均检出“肠炎沙门氏菌”.结论 该起事件是由老船长西饼屋生产的“黄金三明”被“肠炎沙门氏菌”污染引起的细菌性食物中毒.加强食品加工业的监管与宣传教育,严把食品安全质量关,是控制食物中毒的关键环节.
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一起中学生食物中毒流行病学调查和实验室检测分析
目的 对中学生食物中毒查明原因,为食物中毒应急处理提供依据和参考.方法 依据《食品卫生微生物学检验》(GB/T 4789.4-2008),分别对肛拭子标本、糕点、食品公共用具、容器及加工可疑食品所用原料标本共43份样品进行致病菌检测.结果 从12份肛拭子中和2份糕点样品中检出肠炎沙门氏菌.结论 根据流行病学调查及实验室检测结果分析和综合判断,中学生食物中毒是由肠炎沙门氏菌污染食物引起的.
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搭桥法诱导肠炎沙门氏菌鞭毛抗原及鉴定
目的：了解搭桥法对诱导肠炎沙门氏菌鞭毛的临床意义。方法：从2013年4～6月两次食物中毒事件中分离获得7株具有典型生化反应、O-抗原为D群但缺失鞭毛抗原的沙门氏菌。采用搭桥法对7株菌株进行诱导培养，使其鞭毛抗原成功恢复。结果：综合该菌的生物学特性、生化反应及血清学试验得到准确的种属及血清型鉴定。结论：该菌鞭毛抗原的成功诱导为肠炎沙门氏菌的血清型鉴定提供了参考，为基层实验室开展沙门氏菌的血清学检验鉴定提供省时、简单、高效的方法，具有积极意义。
