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结核分支杆菌株水平鉴定技术及其研究进展
结核分支杆菌菌株分型对结核病流行病学调查和监测、传染源的发现、传播途径的阻断以及发病机制的研究都极为重要.结核分支杆菌的分型方法,主要分为非核酸法和核酸法.非核酸分型方法即传统分型方法,多是在细菌表型特征的基础上认识细菌的,包括生化分型法、血清分型法和噬菌体分型法.但由于结核分支杆菌分离株具有高度同源性,通过常规的生化试验和血清学方法是无法鉴别的,所以,对于结核分支杆菌,唯一可用的传统的菌株鉴定方法只有噬菌体分型法.随着分子生物学理论和技术的飞速发展,1980年以后,逐步建立了一些根据核酸序列进行菌株鉴定的高度特异的基因分型方法,即核酸法.主要包括:限制性片段长度多态性(RFLP)、DNA指纹图谱分析、脉冲场凝胶电泳(PFGE)、聚合酶链反应(PCR)酶切分型、随机扩增多态性(RAPD)DNA、DNA序列分析以及基因芯片技术等等.随着上述方法的应用,使结核分支杆菌的菌株分型进入了一个全新的领域,也进而使结核病流行病学的研究取得了很大的进展,现将对上述各分型方法综述如下.
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组织相溶性抗原基因分型中三种DNA快速抽提法比较
血液DNA抽提的质量和速度是影响组织相溶性抗原(HLA)基因分型效果的一个主要因素,目前普遍采用的标准酚-氯仿抽提法,因耗时较长,难以满足临床需求.为此,我们建立了NP-40法及辛酸法,进一步缩短时间,简化了操作步骤.现将NP-40法、辛酸法与标准酚-氯仿抽提法对比研究结果报告如下.
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中药材中蛋白质含量测定方法的研究
近年来,随着基因工程学、分子生物学和现代分离技术的快速发展,蛋白质也成了一项质量和资源评价的指标,故探索测定蛋白质含量的方法有着重要的意义[1].目前测定蛋白质含量的常用方法有凯氏定氮法、考马斯亮蓝法、紫外分光光度法、双缩脲法、Folin-酚试剂法和双辛可宁酸法[2]等.这些方法也分别应用于测定不同中药材中蛋白质含量.
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汞性肾损伤的临床研究
我们对汞性肾损伤病理、生化及免疫方面进行了一些探讨,现报告如下.一、对象与方法1.研究对象:选择某汞矿汞接触工人体检中测出尿蛋白阳性者(加热醋酸法)56例,收入院观察,将其分为汞作业组(14例)、汞吸收组(25例)和汞中毒组(17例);其中男48例、女8例,年龄22~60岁,平均39岁,汞接触工龄3~38年,平均16年;主要工种为汞冶炼、仪表工、检修工.
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两种方法测尿蛋白的比较
尿蛋白的测定对肾病及尿路感染诊断及愈后有重要意义.临床上尿蛋白定性常采用试纸法和磺柳酸法.我们对来我院就诊的门诊及病房病人200例进行尿蛋白测定,对两种方法进行比较.
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分光光度法测定水中氯化氰
氯化氰(CNCL)是氰化物氯化过程中的初级产物,是一种微溶于水的挥发性气体,即使在低浓度下,仍具有较高的毒性.为改善操作条件,本文提出了用异烟酸-巴比妥酸法测定水中氯化氰.它是一种简便、快速、准确、灵敏的测定方法.
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从生物体中获得胶原蛋白的研究进展
胶原蛋白提取多集中在皮肤和肌腱等含胶原较为丰富的组织,牛、猪、羊、人的胎盘、海洋生物、植物均是其来源.胶原蛋白提取分离方法包括热水浸提提取法、酸法提取、碱法提取、盐法提取、酶法提取等,因其具有良好的物理性能和生物学特性,被广泛应用在医药卫生、化妆品、食品等高附加值领域中.
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DPD法与钒酸法测定血清总胆红素与直接胆红素的比较
血清胆红素是临床的常规检测项目,特别是肝功能的重要指标.测定血清总胆红素与直接胆红素的方法较多,主要有改良J-G法,重氮法,酶法,钒酸氧化法等,临床上常用的是重氮法和钒酸法,现我们对两种方法做一比较,报告如下.
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尿沉渣镜检与热醋酸法测蛋白在临床应用中的价值
尿沉渣检查是目前常见的尿液常规检查项目之一.尿沉渣镜检对诊断泌尿、生殖系统疾病有着重要价值,加热醋酸也可使蛋白质变性,观察凝固现象的程度,判断蛋白质的含量,对判断性蛋白尿和病理性蛋白尿有着重要价值.我科随机收集了征兵体检700名(18~23岁)飞行人员1 000人(30~36岁),同时进行尿十项分析仪测定,尿沉渣镜检及热醋酸法测蛋白,结果进行比较,现报道如下.
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铜绿假单胞菌临床分离株耐药性及质粒分析
对从临床分离的铜绿假单胞菌进行耐药性分析及质粒分析,为临床合理使用抗生素提供依据.对临床收集的56株铜绿假单胞菌,通过K-B纸片扩散法进行耐药性测定;并通过碘淀粉法和酸法测定β-内酰胺酶;提取质粒进行琼脂糖电泳鉴定.临床分离株对头孢西丁、头孢呋辛、呋喃妥因、利福平、万古霉素等的耐药性达到了100%,对卡那霉素、红霉素、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶、复方新诺明、头孢噻肟、头孢哌酮、阿奇霉素、头孢曲松、哌拉西林等抗生素耐药性介于62.5%~ 96.4%之间,环丙沙星、头孢哌酮/舒巴坦、美罗培南耐药性较低介于21.4%~25%之间,铜绿假单胞菌对多黏菌素耐药性低,仅为1.8%;通过碘淀粉法和酸法,56株中有37株β-内酰胺酶阳性菌株,占总菌株的66%;质粒鉴定结果显示,所有菌株均含有1个大约为20 kb的质粒.铜绿假单胞菌临床分离株具有较广的耐药谱,且多数能产β-内酰胺酶;所有菌株都含1个20 kb的大型质粒,可能与其耐药性相关,提示消除质粒可能降低其耐药性.
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结核分枝杆菌分型鉴定技术及其研究进展
结核分支杆菌的分型鉴定方法,主要分为非核酸法和核酸法.非核酸分型方法即传统分型方法,多是在细菌表型特征的基础上认识细菌的,包括生化分型法、血清分型法和噬菌体分型法.但由于结核分枝杆菌分离株具有高度同源性,通过常规的生化试验和血清学方法是无法鉴别的,所以,对于结核分枝杆菌,唯一可用的传统的菌株鉴定方法只有噬菌体分型法.随着分子生物学理论和技术的飞速发展,1980年以后,逐步建立了一些根据核酸序列进行菌株鉴定的高度特异的基因分型方法,即核酸法.主要包括:限制性片段长度多态性、DNA指纹图谱分析、脉冲场凝胶电泳、PCR酶切分型、随机扩增多态性DNA、DNA序列分析以及基因芯片技术等等.随着上述方法的应用,使结核分枝杆菌的菌株分型进入了一个全新的领域,也进而使结核病流行病学的研究取得了很大的进展.
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尿液分析仪检测假阴性问题的分析
尿液分析仪的广泛应用,在一定程度上减轻了检验人员的劳动强度,然而全程质控中如操作不当会出现诸多众所周知且常被忽视的问题,现将本室对德国宝灵曼公司生产的Miditron尿十项分析仪测定全为阴性的2000例标本,再用显微镜作沉渣镜检和用加热醋酸法测蛋白,两者结果比较,报告如下:
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异烟酸-巴比妥酸法测定食酒中的氰化物
食酒中的氰化物是由制酒的一些原料中含有的氰甙类配糖体,在发酵过程中水解产生的,其中氢氰酸(HCN)毒性极强,LD=0.05g.现对于食酒中氰化物的测定,国家标准化学方法有异烟酸-吡唑酮法和吡啶-吡唑酮法.
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实验性ARDS大鼠小肠Gq/11蛋白的动态变化
目的:观察Gq/11蛋白在急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)大鼠肠损伤中的变化.方法:采用尾静脉注射油酸法复制大鼠ARDS模型,根据观测时限再将油酸组分为30 min,60min,901min,120 min 4个组,免疫印迹法检测小肠粘膜中Gq/11蛋白含量,测定血浆、小肠组织匀浆ACE、LDH活性和MDA含量.
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邻苯三酚红钼络合法测定脑脊液蛋白效果评价
随着全自动生化分析仪的广泛应用,越来越多的检验项目能够在生化仪上完成.传统的脑脊液蛋白(CSF-TP)检测方法为硫酸钠-磺柳酸法(B法),虽然其灵敏度高.
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慢性华支睾吸虫病 338例临床分析
广西是我国华支睾吸虫病的严重流行区之一,近年来该病的感染率及感染度有不同程度的提高。本文通过对 338例病例的观察,了解慢性华支睾吸虫病患者的临床特点及吡喹酮的治疗效果,并从一个侧面了解本病当前流行的趋势,为防治本病提供资料。 1 观察对象与方法 1.1 病人来源和确诊方法患者系从 1999年 2月~ 2000年 9月到广西医科大学一附院门诊部或住院部就诊的 515人中用醚酸法 [1]粪检查获华支睾吸虫卵确诊的 338例病人。
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血清启动在无机磷测定中的应用
"中生"公司生产的无机磷试剂盒采用钼酸法测定血清中的无机磷(P),此试剂说明书要求将液体R1试剂和液体R2试剂予先混合成工作试剂,然而工作试剂保存时间只有24 h,常造成试剂浪费.在意大利BT3000型全自动生化分析仪上可以运用血清启动(Serum Starter)进行测定,避免了人工配制工作试剂的麻烦,有效节约试剂,此方法也可推广用于大部分的液体双试剂测定项目.
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胃达康胶囊对大鼠实验性胃溃疡的促愈合作用
目的观察胃达康胶囊对实验性胃溃汤大鼠的影响.方法应用大鼠胃壁粘膜抹酸法用载有醋酸之特制玻管,自大鼠膜胃进入腺胃加酸,制作实验性胃溃疡(胃窦部)模型,并观察胃达康胶囊对溃疡面积、溃疡愈合速度等的影响.结果胃达康胶囊大、中、小剂量组可明显减少实验性大鼠胃溃疡面积,并可提高溃疡愈合速度等病理改变.结论胃达康胶囊确有改善大鼠实验性胃溃疡的作用.
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纤维素酶辅助酸法提取菠萝皮果胶的工艺研究
目的 考察影响酸法提取菠萝皮果胶的主要因素,并确定酸法提取果胶的佳工艺条件.方法 通过正交试验,考察料液比、提取温度、提取时间和提取酸度对菠萝皮果胶提取的影响,从而得到佳的提取工艺.结果 纤维素酶辅助酸法提取菠萝皮果胶的佳工艺务件为:料液比1:20,提取温度80℃,提取时间60 min,提取pH 2.0.结论 纤维素酶辅助酸法具有提取率高、速度快、溶剂用量少、安全、节能、设备简单等优点,试验为优化菠萝皮果胶的提取工艺奠定了基础.
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血清总胆汁酸的酶法测定和在病毒性肝炎上的应用
血清总胆汁酸(TBA)作为肝脏实质性损伤的灵敏诊断指标,已在临床广泛应用,我们采用日本第一化学药品株式会社生产的血清总胆汁酸法试剂盒,但该试验应用双波长、双试剂,操作较为麻烦,我们改为单波长、单试剂,同样获得较好效果,并对180例病毒性肝炎患者进行检测,现报告如下.