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大肠杆菌O157：H7快速增菌培养基检测效果的研究
为了验证对于大肠杆菌O157：H7菌株特异性、复苏效果以及快速生长的特点，比较了3种培养基对于大肠杆菌O157：H7的增菌效果。研究结果表明，8h培养时间内，MicroFast?快速增菌培养基对于冷损伤和热损伤的大肠杆菌O157：H7菌株具有良好的修复和增殖效果。MicroFast?快速增菌培养基营养组分适合O157菌株的生长需求，在MicroFast?快速增菌培养基中，大肠杆菌O157：H7菌株的倍增时间为13.5min，远高于mEC+n的28min，且MicroFast?快速增菌培养基能够完全抑制部分G+细菌以及部分G-细菌的干扰，对于大肠杆菌O157：H7具有特异性的选择。故MicroFast?快速增菌培养基对于大肠杆菌O157：H7菌株具有良好的选择特异性，能够短时间内（8h内）有效富集培养大肠杆菌O157：H7菌株，是一种能够实现大肠杆菌O157：H7菌株快速高效、特异增殖的培养基，将其结合检测金标卡，能够实现8h内快速检测，结果可信可靠。
关键词： MicroFast?快速增菌培养基 大肠杆菌O157:H7 增菌 效果 -
食品增稠剂致病菌检验方法研究
目的 探讨并建立适用于食品增稠剂的致病菌检验前增菌(增菌)方法.方法 选择高粘稠度的食品增稠剂样品,进行不同样品浓度、培养方式和转种量的加标检测对比试验,优选实验数据,改进传统方法；对黄原胶样品进行加标检测、人员比对与方法比较试验,以确认改进后的方法.结果 1∶10样品浓度各试验组的检出率都达不到50％,1∶1000样品浓度各试验组的检出率都能达到100％,1∶100样品浓度,只有振荡培养组的检出率能达到100％；采用增加增菌培养液容量至10×250ml(1∶100的样品浓度)的增容法以及振荡培养等措施,建立了增容法检测增稠剂致病菌的方法.结论 增稠剂样品的浓度、转种量、培养方式等因素对致病菌检验检出率有显著影响,增容法与振荡培养等措施的应用,对于提高方法的检出率是有效的；新方法的加标检测确认结果满意.
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中药改良培养基用于血标本增菌的实验观察
将单味红枣液加入营养肉汤(简称红枣肉汤)做10种细菌90瓶模拟菌血标本的增菌培养,并与营养肉汤进行比较.结果 红枣肉汤增菌阳性率为94.44%,营养肉汤为81.11%,经McNemar χ2检验,差异有统计学意义(P＜0.01).表明使用红枣肉汤作为血液标本的增菌培养基,可提高细菌检出率.
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海水中副溶血性弧菌增菌培养的优化
为优化海水中副溶血性弧菌的检验方法,笔者采用碱性蛋白胨水、氯化钠多粘菌素B肉汤、3％氯化钠碱性蛋白胨水三种增菌培养基及其组合的增菌方法与用TCBS琼脂、弧菌显色培养基两种分离平板分别检验20份海水样品中的副溶血性弧菌.结果显示,采用碱性蛋白胨水+3％ NaCl的碱性蛋白胨水增菌液进行二次增菌,能获得较高的检出率；使用弧菌显色培养基的分离符合率高于TCBS琼脂；增加增菌次数通常能提高分离符合率和检出率.
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驻马店市大中专院校及中学食堂餐具检测结果分析
目的 了解河南省驻马店市大、中专院校及中学食堂餐具消毒的概况.方法 随机抽取学校消毒后餐具,用大肠菌群快速纸片法和增菌的方法对餐具上的大肠菌群和致病菌进行检测.结果 餐具消毒合格率在90%以上,540件餐具中,39件检出大肠菌群,超标率为7.22%.结论 驻马店市大、中专院校及中学食堂的餐具消毒合格率尚未达到100%,还应加强学校食堂的饮食卫生工作.
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阪崎肠杆菌免疫富集及快速检测方法建立
目的 将特异性抗体免疫富集和聚合酶链反应(PCR)方法有机结合,建立乳制品中阪崎肠杆菌免疫富集及快速检测方法.方法 用特异性阪崎肠杆菌单克隆抗体包被的PCR管对样品中病原菌进行特异性免疫富集后,以PCR管中免疫富集的阪崎肠杆菌为模板直接进行PCR扩增,通过特异性、灵敏度、模拟增菌等实验,确认该方法实际检测的可行性并与酶联免疫吸附实验(ELISA)进行比较.结果 免疫富集捕获-PCR(IC-PCR)法检测阪崎肠杆菌纯菌液灵敏度可达102 ～ 103 CFU/mL,是直接PCR的103～ 104倍;特异性验证表明,该方法与常见食源性致病菌无交叉反应;模拟带菌实验显示灵敏度可达到103 CFU/mL;模拟增菌实验显示该方法检测阪崎肠杆菌只需增菌6h,而用ELISA试剂盒需要增菌16 h.结论 该方法灵敏度高、特异性强、检测周期短.
关键词： 阪崎肠杆菌 免疫富集 聚合酶链反应(PCR) 快速检测 增菌 -
沙门氏菌血清学分型
国标常见的沙门氏菌属有140个血清型,血清学分型是沙门氏菌检验中的重要鉴定方法,主要有 O抗原的鉴定、H抗原的鉴定、少数菌的Vi抗原的鉴定.血清学分型比较复杂,常出现H因子没有很好生长发育而无法分型的现象,采用位相变异试验来诱导另一相H因子,可以很好地鉴定其血清型.方法:《食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》GB 4789.4-2016.
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健康相关产品卫生监督质控分析
为了保证国家健康相关产品卫生监督抽检的工作质量,保证监测数据的可靠性、准确性,保护消费者和食品企业的利益,中国疾病预防控制中心营养与食品安全所对本实验室进行了质量检测,现将质控结果报告如下.
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病原性耶尔森氏菌在磷酸盐缓冲液中的低温生长
目的应用PBS对Yersinia属菌进行低温增菌培养试验.方法用生理盐水分别稀释Yersinia属菌,然后接种在0.5%兔溶血的PBS液体内,进行分离培养.结果Yersinia属菌在20～25 d出现一个峰值.结论PBS低温增菌培养方法简便,可用于Yersinia菌属细菌的增菌培养.
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人群脑膜炎奈瑟菌带菌检验方法的研究
目的:研制一种能够在低温下保持脑膜炎奈瑟菌活性并具有增菌作用的培养基.方法:配制一种小牛血清"双抗"培养基,用已知量A、C群脑膜炎奈瑟菌检定其保菌和增菌效果,并用该法在正常人群中检测带菌率,以常规方法的检测结果作配对比较.结果:应用小牛血清"双抗"培养基可使脑膜炎奈瑟菌在4℃24小时内基本不死亡,部分菌株可生存8天,同时可使存活的细菌从3～9 CFU/ml增加到(6～7)×107CFU/ml;对364名正常人检测,其检出率达1.65%,而常规方法检出率为O(P<0.05).结论:小牛血清"双抗"培养基在4℃的不利条件下,有显著保菌作用,同时具有显著增菌作用.
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富营养预增菌液在肉制品沙门菌常规检测方法中替代效果研究
目的非选择性富营养肉汤(EB)预增菌检测肉制品沙门菌的方法建立.方法评估免疫磁珠分离(IMS)作为常规流程分离食品沙门菌的内质控方法;比较样品经乳糖肉汤(LB)和EB两种预增液分步增菌后常规平板分离与IMS的分离效果;终实样比较以EB为预增液的替代流程与IMS的检测敏感性.结果应用IMS检测100件用LB和134件EB分步增菌样品的阳性率没有差异(P＞0.05);48件肉制品用EB预增的常规平板分离阳性率均高于LB,56件肉制品用EB预增液作常规平板分离的检测敏感性接近IMS(P＞0.05).结论以EB为预增菌的肉制品沙门菌分步检测流程,节省了增菌时间,提高常规平板分离的检测敏感性.
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2008年驻马店市43家餐饮业餐具消毒效果调查
目的 了解驻马店市餐饮业餐具消毒的概况.方法 随机抽取43家中小型餐饮业258份样品,用大肠菌群快速纸片法和增菌的方法 对餐具的大肠菌群和致病菌进行了检测.结果 小型餐饮业的餐具消毒效果不如中型餐饮业.结论 餐具消毒柜在餐饮业起到一定作用,应加强对小型餐饮业的管理.
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沙门菌定性检验方法关键环节评价
目的 对沙门菌国家标准检验方法中2种增菌液的增菌效果进行评价.方法 利用“食品药品鉴定系统能力验证计划”提供的考核样本,按照国家标准GB/T4789.4进行检测:用BPW对原始标本进行前增菌,TTB和SC进行二次增菌,然后用3种分离培养基进行分离培养鉴定;同时采用实时荧光PCR方法对前增菌和二次增菌后的增菌效果进行比较分析.结果 采用培养方法,18件样品中有15件样品可检测到沙门菌;而采用实时荧光PCR方法检测到17件样品沙门菌核酸阳性,其中2件样品由于菌液含量低,无法用培养方法检出.与BPW前增菌比较,经SC增菌后菌液浓度并没有显著提高(P＞0.05),而经过TTB增菌后,菌液浓度反而下降(P＜0.05).结论 建议对沙门菌检测方案进行合理优化,尤其是用于监测或大规模样本筛查时,选择前增菌后直接检测或使用SC二次增菌后分离培养鉴定,可降低工作量,避免资源浪费.
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3种不同方法检测围产期B群链球菌感染的临床应用对比
目的 通过比较普通培养法、先增菌再培养法和显色平板法,得到适合实验室快速检测B群链球菌的方法.方法 分别用普通培养法、先增菌再培养法和显色平板法对1 526例围产期孕妇进行B群链球菌检测,并进行比较.结果 普通培养法、先增菌再培养法、显色平板法的阳性率分别为8.1％、9.2％、9.4％,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 显色平板法检测B群链球菌具有较高的灵敏度和特异性,可以直接接种标本,操作简便,阳性率不低于先增菌再培养法,适合各级医疗机构用于围产期GBS筛查.
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一起椰毒假单胞菌酵米面亚种食物中毒分离鉴定方法的改进
目的 为椰毒假单胞菌酵米面亚种食物中毒的实验室分离鉴定寻找更快速、准确的方法.方法 采用增菌和不增菌2种方法,比较菌落生长情况;PDA平板添加或不添加抗生素,比较平板分离效果.结果 不论增菌还是不增菌,PDA平板目标菌的数量无差异,经过增菌的平板杂菌比不增菌的数量多;添加与不添加抗生素的平板目标菌生长速度无差异,添加抗生素的平板菌落比不添加的略大,椰酵假单胞菌生长更纯.结论 在椰毒假单胞菌酵米面亚种的鉴定过程中,同时开展增菌和不增菌培养,既可节约时间、成本,又避免漏检,提高了检出率;PDA平板添加2种抗生素,使培养基选择性更强,菌落特征显著.
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食品中金黄色葡萄球菌2种增菌液增菌效果的实验观察研究
目的 对金黄色葡萄球菌2种增菌液纯菌种和混合菌种不同条件下增菌效果进行比较,寻找一种快速高效的增菌条件,为提高检测效率提供参考依据.方法 通过对纯菌种和混合菌种不同增菌时间菌落,在Baird-Parker琼脂平板上的生长情况来比较验证2种增菌培养基的增菌效果.结果 对纯金黄色葡萄球菌的增菌或污染程度较轻的样品,7.5％氯化钠肉汤的增菌效果优于10％氯化钠胰酪胨大豆肉汤;而对于污染程度高或是杂菌含量高的样品,10％氯化钠胰酪胨大豆肉汤的增菌效果优于7.5％氯化钠肉汤.结论 对于金黄色葡萄球菌含量比较高的样品,采用7.5％氯化钠肉汤增菌;而对于金黄色葡萄球菌含量比较低、而杂菌含量高的样品,则采用10％氯化钠胰酪胨大豆肉汤增菌.
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四种幽门螺杆菌液体培养基增菌效果观察
[目的]寻找一种对幽门螺杆菌(Hp)增殖效果较为理想的液体增菌培养基.[方法]采用猪心浸液添加20%马血清、0.025%硫酸亚铁和丙酮酸钠、0.20%自制粘蛋白(简称CHFPM)为一种新的Hp液体培养基,并与肝浸液添加20%马血清(LH)、猪心浸液添加20%马血清(CH)、猪心浸液添加20%马血清及0.025%硫酸亚铁和丙酮酸钠(CHFP)三种液体培养基作比较,在四种液体增菌培养基中加入同样菌数的新鲜Hp菌,在同样环境中进行培养,每隔24h测其液体吸光度并进行定量计数,通过在四种液体培养基中6株Hp菌的增殖情况,判断其对Hp的增菌效果.[结果]CHFPM增菌效果好,CHFP次之.[结论]添加0.025%硫酸亚铁和丙酮酸钠、0.20%自制粘蛋白可促进Hp的生长,缩短培养周期.
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几种增菌液对志贺菌增菌效果的研究
目的筛选对志贺菌高效果增菌的增菌液.方法应用6种增菌液对30株志贺氏菌增菌,分离培养并计数.结果增菌6h以SS、HE增菌液增菌效果佳,检出率皆为100%;增菌22h以SS、肠道增菌液和亚硒酸盐增菌液增菌效果好,检出率为60%. 结论若增菌时间为6h,以HE和SS增菌液增菌效果好;长时间增菌22～24h,以肠道增菌液,亚硒酸盐增菌液效果好.
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预防性健康体检中沙门菌检验方法的探导
目的 探讨一种操作简单、检验成本低、阳性检出率高的预防性健康体检中沙门菌的检测方法.方法 对食品及公共场所从业人员体检1 045人的粪便标本接种氯化镁孔雀绿(MM)增菌液,分别在37 ℃、42 ℃增菌后,再进行平板分离、生化及血清鉴定,比较两种不同温度增菌后沙门菌的阳性检出率.结果 42℃增菌后检出率(2.78%)高于37 ℃增菌检出率(0.57%),两者之间的差异有统计学意义(χ2=15.371,P<0.05).结论 传统的培养法仍是预防性健康体检中沙门菌常用的检测方法,42 ℃增菌后具有更高的检出率,更适用于预防性健康体检中沙门菌的分离鉴定.
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硫乙醇酸盐培养基在外用药品金黄色葡萄球菌检查中的应用
检查外用药品控制菌金黄色葡萄球菌时,阳性对照菌往往被供试液中的抑菌成分所抑制,为了消除抑菌作用,使阳性对照菌生长,常须进一步选用一些更为烦琐的消除抑菌作用的方法.笔者采用硫乙醇酸盐培养基作为金黄色葡萄球菌检查时的增菌培养基,既简便,又可消除部分外用药品对金黄色葡萄球菌的抑制作用.这种培养基可替代肉汤培养基作为金黄色葡萄球的增菌培养基.
