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应用噬菌体裂解法测定吡嗪酰胺药物敏感性试验的方法学研究
目的 探索利用噬菌体裂解法测定吡嗪酰胺药物敏感性试验的更佳实验条件、时间及其临床应用价值.方法 应用已建立的PhaB法;但在Middlebrook 7H9酸性液体培养基中加入0.4%的丙酮酸钠作为探索实验对照组.然后观察原已建立的PhaB法与加入丙酮酸钠后实验对照组这两者间的空白管溶菌斑数量以及药物佳作用时间,并以此对86例结核分枝杆菌临床分离株进行吡嗪酰胺药物敏感性试验,后与比例法的药物敏感性试验结果进行比较.结果 在Middlebrook 7H9酸性液体培养基中加入丙酮酸钠后的实验对照组,其空白管溶菌斑平均有71个,而PhaB法空白管溶菌斑平均只有53个,两者间平均有18个溶菌斑的差异;药物与细菌的作用:实验对照组1 d时间与比例法药物敏感性试验结果有90.7%的符合率,2 d时间为87.2%,PhaB法的符合率是88.4%.结论 在已建立的PhaB法基础上,于Middlebrook 7H9酸性液体培养基中加入丙酮酸钠,可以提高实验的准确性以及缩短药物与细菌的作用时间.
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丙酮酸钠液腹腔复苏对失血性休克大鼠肠黏膜屏障的保护作用
目的 探讨丙酮酸钠液腹腔复苏对失血性休克大鼠肠黏膜屏障的保护作用.方法 健康清洁级雄性SD大鼠,40只随机(随机数字法)分为4组:假手术组(Ⅰ组)、失血性休克模型组(Ⅱ组),复方氯化钠静脉复苏+ PD-2液腹腔复苏组(Ⅲ组),复方氯化钠静脉复苏+丙酮酸钠腹腔复苏组(Ⅳ组),每组10只.采用Wiggers改良法制备失血性休克模型.Ⅱ组行右颈总动脉、右股静脉、左股动脉插管及全身肝素化.Ⅲ组、Ⅳ组行静脉复苏的同时,分别向腹腔内注入2.5％ PD-2液20 mL和2.5％丙酮酸钠液20 mL.2h后取动脉血测血气(pH、PaCO2、PaO2)和D-乳酸含量,光镜下观察各组大鼠小肠黏膜组织形态变化.结果 血气分析:Ⅲ组、Ⅳ组较Ⅱ组pH水平及PaO2含量明显升高(P＜0.01);与Ⅲ组比较,Ⅳ组pH水平及PO2水平升高更为明显(P＜0.05).D-LA含量:Ⅲ组、Ⅳ组较Ⅱ组明显降低(P＜0.01);与Ⅲ组比较,Ⅳ组D-LA降低更明显(P＜0.05).光镜下Ⅱ组大鼠小肠黏膜层绒毛高度水肿,黏膜下血管塌陷,大片黏膜绒毛坏死、脱落,缺损;Ⅲ组和Ⅳ组小肠黏膜破坏较Ⅱ组明显减轻;Ⅳ组大鼠小肠黏膜绒毛水肿、倒伏及坏死程度均轻于Ⅲ组.小肠上皮损伤指数评分:Ⅳ组高于Ⅱ组及Ⅲ组(P＜0.01 orP＜ 0.05).结论 静脉复苏加腹腔复苏可降低失血性休克大鼠血浆D-LA含量、纠正酸中毒,提高氧分压;并且对于肠黏膜屏障的保护作用,丙酮酸钠液作用优于PD-2液.
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两种固体培养基对分枝杆菌培养影响的比较
我们根据文献[1]关于在改良罗氏培养基(L-J)中加入丙酮酸钠的报道,试以丙酮酸钠代替L-J中的甘油,对临床分枝杆菌纯分离株进行了与传统L-J法的比较探讨.经504株临床分枝杆菌分离株的培养比较后发现,用丙酮酸钠代替L-J中的甘油,其无论是培养时间或是菌落形态以及数量,都明显优于传统L-J(P≤0.01).
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丙酮酸对大鼠移植小肠缺血再灌注损伤的保护作用
目的:探讨丙酮酸(pyruvate)对大鼠移植小肠缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法:建立大鼠小肠移植缺血再灌注损伤的动物模型,实验组和对照组分别经肠腔给予含有丙酮酸钠和等能量的多聚葡萄糖营养液,对不同冷保存缺血、再灌注时间的小肠进行组织病理学观察并利用酶联免疫法检测肠黏膜中的TNF-α和IL-6水平.结果:丙酮酸处理后的小肠组织损伤较对照组明显减轻,小肠黏膜中TNF-α和IL-6水平减低.结论:丙酮酸对大鼠移植小肠缺血再灌注损伤具有保护作用;该保护作用与丙酮酸减少小肠组织中的TNF-α和IL-6水平有关.
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丙酮酸干预小肠缺血/再灌注损伤的研究进展
肠道缺血/再灌注(I/R)损伤一直是基础研究和临床实践中的重要问题.近年来大量研究证实丙酮酸钠(NaPyr)中丙酮酸根[Pyr-]可改善心肌、肾脏以及肝脏损伤后引起的功能障碍[1].同时,丙酮酸对机体其他各脏器如小肠、脑、肺脏等的I/R损伤具有保护作用,并且可以改善严重休克的预后.但这种保护机制尚不十分清楚,可能与丙酮酸具有抗氧化、抑制氧自由基,提供能量等有关.本文对丙酮酸对小肠I/R损伤的保护作用及机制的相关研究进展综述如下.
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丙酮酸钠在深低温停循环顺行选择性脑灌注中的脑保护作用
目的：探索在深低温停循环（DHCA）期间，顺行选择性脑灌注（ASCP）含丙酮酸钠（Pyr）的血液能否有效缓解氧化应激从而发挥脑保护作用。方法随机选取45只新西兰兔，18只作为供血兔，27只用于建立模型并随机分为：假手术（ Sham）组（ n＝9）、ASCP组（ n＝9）和Pyr组（ n＝9）。 Sham组麻醉后开胸，建立体外循环但不转机；Pyr组在DHCA中ASCP 含Pyr溶液（154 mmol／L）与血液的混合液；ASCP组则为氯化钠溶液（154 mmol／L）与血液混合液。在麻醉后（T1）、降温至28℃（ T2）、开放升主动脉后10 min（ T3）、停机后10 min（ T4）及停机后120 min（ T5）五个时点采集血流动力学指标、检测动脉血气和采集颈静脉球部血液。停机后安乐死动物并进行脑组织取材。检测样本中丙二醛（ MDA）含量、超氧化物歧化酶（ SOD）活性及S100B蛋白含量。结果 ASCP组MDA含量高于Sham组和Pyr组（ P＜0．05）。 ASCP组SOD活性低于Sham组和Pyr组（ P＜0．05），与Pyr组在T3、T4和T5三个时点血浆S100B蛋白较组内T1时点高（ P＜0．05），ASCP组T3、T4和T5时点血浆S100B蛋白浓度显著高于同时点的Sham组和Pyr组（ P＜0．05）。结论 DHCA期间ASCP含外源性Pyr的血液可通过缓解氧化应激发挥较为完善的脑保护作用。
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丙酮酸钠羟乙基淀粉对50％总体表面积Ⅲ度烧伤大鼠肾血流量和肾功能的影响
目的 研究丙酮酸钠羟乙基淀粉(HES)胶体液对50％总体表面积(TBSA)Ⅲ度烧伤大鼠肾血流量和肾功能指标的影响.方法 选取SD大鼠180只,100℃水浴烫伤制成50％ TBSAⅢ度烧伤模型,37 ℃水浴制备假伤模型.随机数字表法分为5组:单纯烧伤组(n=20)、假伤组(n=40)、丙酮酸钠HES组(n=40)、醋酸钠HES组(n=40)和氯化钠HES组(n=40),其中前2组大鼠不补液,后3组(统称复苏组)伤后通过颈静脉导管补液,用微量输液泵控制输液速度.静脉补液总量为0.75 mL/kg×1％ TBSA,胶晶比例1:1,伤后12h内输完,前4h各复苏组输入总量的1/2均为醋酸钠林格氏液,后8h输入总量的余1/2为相应不同胶体.单纯烧伤组于伤后4、8h分别选取鼠10只,余4组于伤后4、8、12、24 h各时刻点选取鼠10只,激光多普勒血流仪测定肾血流量(RBF),全自动生化分析仪测定血浆中肌酐和尿素氮含量.采用SPSS17.0统计软件包分析,组间两两比较采用单因素方差分析.结果 伤后4、8h,单纯烧伤组大鼠RBF(32.10±6.40、11.80 ±5.43)BPU较假伤组(146.50±23.73、144.80±24.27) BPU降低,差异有统计学意义(P＜0.05);伤后4、8、12、24 h,丙酮酸钠HES组、醋酸钠HES组、氯化钠HES组大鼠RBF分别为(46.40±8.14、104.80±22.75、89.40±12.07、77.10 ±10.78)、(45.50±8.21、77.20±13.19、70.60 ± 10.55、56.90±8.49)、(45.30±8.76、58.10±11.32、51.70 ±9.65、40.20±8.25) BPU,均较假伤组(146.50 ± 23.73、144.80±24.27、147.60 ±26.55、143.20±23.94) BPU明显降低,差异均有统计学意义(P均小于0.05);伤后8、12、24 h,丙酮酸钠HES组RBF均高于醋酸钠HES组和氯化钠HES组,醋酸钠HES组又高于氯化钠HES组,差异均有统计学意义(P均小于0.05).伤后24 h,丙酮酸钠HES组血浆肌酐(66.70±6.67) μmol/L显著低于醋酸钠HES组(80.20±9.97) μmol/L和氯化钠HES组(91.30±9.50) μmol/L,差异均有统计学意义(P均小于0.05),丙酮酸钠HES组尿素氮(29.00±2.48) mmol/L显著低于醋酸钠HES组(34.60±3.11) mmol/L和氯化钠HES组(44.40±4.89) mmol/L,差异均有统计学意义(P均小于0.05).结论 严重烧伤大鼠静脉复苏时,HES 130/0.4的载体溶液对肾功能有明显的影响,丙酮酸钠HES能显著改善50％ TBSA烧伤大鼠RBF和肾功能指标,优于常用的氯化钠HES和醋酸钠HES.
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智能气功外气对免疫低下小鼠细胞免疫状态的影响
1材料与方法1.1实验动物昆明种系小白鼠,雌雄各半,体重(23士2)g,购于山东医科大学实验动物中心,实验动物质量合格证号:鲁动质9301021.2主要试剂①基础培养液:RPMI1640(GIBCO,USA)干粉,按说明用双蒸水完全溶解后,加入碳酸氢钠2g/L,然后通入CO2调pH至7.0,0.22μm微孔滤膜过滤除菌,经无菌试验合格后置-4C保存备用;②完全培养液:在基础培养液中加入新生小牛血清(达15%)、青霉素100U/ml、链霉素100μg/ml、庆大霉素50U/ml、Hepes10mM、谷氨酰胺2mM、丙酮酸钠1mM,调pH至7.0～7.4;③肿瘤细胞株:YAC-1细胞株(引自山东省医学科学院基础所免疫室),本室传代培养.
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极化液和丙酮酸钠联合治疗严重烫伤多器官功能不全综合征大鼠实验研究
目的 观察极化液和丙酮酸钠联合治疗严重烫伤多器官功能不全综合征(MODS)大鼠效果.方法 80只SD清洁级30％TBSAⅢ度烫伤MODS大鼠按随机数字表法分为极化液治疗组(GIK组)、丙酮酸钠治疗组(SP组)、极化液和丙酮酸钠联合治疗组(GIK+SP组)和对照组,每组20只,观察4组伤前、伤后1、3、5及7 d血糖(GLU)、乳酸(LA)、丙酮酸(PA)、可溶性髓样细胞触发蛋白1(sTREM-1)、高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)和丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平变化情况.结果 4组伤后各时点GLU、LA、LA/PA、sTREM-1、HMGB-1以及MDA水平均高于伤前(P<0.01),SOD水平均低于伤前(P<0.01);GIK组、SP组和GIK+SP组伤后各时点GLU、LA、PA、LA/PA、sTREM-1、HMGB-l及MDA水平低于对照组,PA、SOD水平均高于对照组(P<0.01);GIK+SP组伤后各时点GLU、LA、LA/PA、sTREM-1和HMGB-1以及MDA水平均低于GIK组和SP组,SOD均水平高于GIK组和SP组(P<0.01).结论 严重烫伤MODS大鼠存在高血糖、高乳酸血症、过度炎症反应和氧自由基损伤,极化液和丙酮酸钠具有改善高乳酸血症,降低LA/PA比值以及抗炎和抗氧化作用,且联合治疗比单独治疗效果更好,可作为防治严重烫伤后MODS重要措施.
关键词： 烫伤 极化液 丙酮酸钠 多器官功能不全综合征 大鼠 Sprague-Dawley 炎症 氧化应激 -
液质谱联用法同时检测体外生殖培养液中的3种能量成分
背景：目前，对于体外生殖培养液的质量控制文件或技术标准中，对成分含量的指标及检测方法未做明确规定，为保证该类产品的安全有效性，应及早建立质量标准。目的：建立采用液相质谱联用法检测体外生殖培养液中葡萄糖、乳酸钠、丙酮酸钠3种指标成分的方法，分析不同用途培养液中3种成分的含量。方法：采用超高效液相色谱三重四级杆质谱联用法，使用SUPELCO Discovery HS F5-3色谱柱(15 cm×2.1 mm，3μm)，流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液，梯度洗脱，流速0.35 mL?min-1，柱温40℃；质谱采用电喷雾离子源，负离子模式扫面，扫描方式为多反应监测。结果与讨论：葡萄糖、丙酮酸钠、乳酸钠分别在0.1-10 mg/L(r=0.9998)、0.05-5 mg/L(r=0.9994)、0.1-10 mg/L(r=0.9994)范围线性关系练好；平均加样回收率在96.4%-98.1%之间，相对标准偏差均小于2.8%。说明采用液相质谱联用法检测体外生殖培养液灵敏、快速、准确、专属性强，可为体外生殖培养液的质量标准研究提供依据。
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丙酮酸钠盐水对回收自体血液红细胞功能的影响
目的 评价丙酮酸钠盐水作为洗涤液应用于自体血液回收对回收红细胞功能的影响.方法 使用索林自体血液回收机收集和洗涤30例患者的术野回收血液;15例择期行非体外循环冠状动脉旁路移植术的患者设为0.9％氯化钠溶液组(对照组),使用0.9％氯化钠溶液洗涤;15例择期行膀胱全切术的患者设为丙酮酸钠盐水组(试验组),使用丙酮酸钠盐水洗涤.分别于开始洗涤储血罐中收集的血液时(从患者中心静脉抽血)即刻(T1)、回收红细胞即刻(T2)、回收红细胞21～24℃贮存4 h(T3)和回收红细胞1～6℃贮存24 h(T4)采集血样,测定两组血样的溶血率、2,3-二磷酸甘油酸(2,3-disphosphoglycerate,2,3-DPG)、P50值[血氧饱和度(oxygen saturation,SO2)为50％时的氧分压值(oxygen partial pressure,PO2)]及钠离子(Na+)、钾离子(K+)、血乳酸(lactic acid,Lac)、血糖(blood glucose,Glu)水平.结果 T1时点:两组各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05).T2、T3和T4时点:溶血率、Glu、2,3-DPG和P50值两组之间比较,差异均无统计学意义(P>0.05),Na+、K+和Lac值对照组显著高于试验组(P<0.05).结论 丙酮酸钠盐水作为洗涤液对红细胞的洗涤和贮存效果优于0.9％氯化钠溶液,能够改善回收红细胞的质量.
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失血性休克后液体复苏的研究进展
背景 失血性休克是外伤死亡的主要原因.在重危病例的急救和围手术期的处理中,液体复苏起着关键性的治疗作用. 目的 就重度失血性休克后液体治疗方案的研究进展作一综述. 内容 除了传统的晶体液,近年来开发了诸多新品种的液体用于复苏,如丙酮酸钠溶液等.复苏方式的研究也在静脉复苏的基础上拓展到了腹腔复苏. 趋向 丙酮酸钠溶液以及腹腔复苏是近年来研究提出的新的复苏液体和复苏方案,通过已有的研究已经证实其积极的治疗作用.其应用于失血性休克的方法、时间、疗效等仍需更进一步研究.
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丙酮酸钠提高食品细菌检出率的探讨
随着食品加工业的飞速发展,各种直接入口的加工食品日渐增多.在这些食品的加工过程中,因高温、冷冻、pH改变、射线处理等,大部分微生物已被杀死,但也有一部分细菌的菌体仅遭受一定的损伤,活力降低,这部分菌被称为损伤菌,也称"亚致死菌".
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丙酮酸钠鼻喷剂治疗变应性鼻炎的效果分析
目的:评价丙酮酸钠鼻喷剂对变应性鼻炎患者的治疗作用.方法:采用单中心、随机、平行对照研究方法,共招募53例对蒿属花粉过敏的变应性鼻炎成年患者.在蒿属花粉季进行试验,前2周统一使用鼻用糖皮质激素标准剂量进行治疗,其后患者随机分为2组,实验组(n=23)使用丙酮酸钠鼻喷剂,对照组(n=30)不使用,持续观察2周,比较2组患者的日症状评分和其他抗炎药物评分,以及鼻腔呼出气一氧化氮(nNO)的水平.结果:在2组患者基线人口学特征和过敏症状严重程度一致的前提下,实验组的日症状评分为1.4±0.6,显著低于对照组(1.7±0.4),差异有统计学意义(P=0.006);实验组的其他抗炎药物评分为(4.8±1.2),也显著低于对照组(5.8±1.2),差异有统计学意义(P=0.000).实验组nNO结果为(596.3±134.6)ppb,低于对照组(709.6±311.3)ppb,但差异无统计学意义(P=0.408).结论:使用丙酮酸钠鼻喷剂可能会减轻变应性鼻炎患者的症状,减少其他抗炎药物的使用量,其应用价值和作用机制值得进一步研究.
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丙酮酸钠改善红细胞储存损伤的初步探讨
目的 探讨丙酮酸钠(SP)对红细胞储存损伤的影响.方法 戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠,同时机械通气,通过心脏穿刺取血,CPDA-1作为抗凝剂和储存液,过滤去除白细胞后平分2组(n=8),SP组:添加SP浓缩液使储存红细胞中SP的终浓度为2.5 mmol/L;生理盐水(NS)组:按相同体积比加入等量的生理盐水.400 g离心15min,调整Hct为70％-75％,4℃储存14 d后,用全自动血细胞计数仪测定储存红细胞的血常规;分别用三磷酸腺苷(ATP)、丙二醛(MDA)测定试剂盒测定储存红细胞中ATP、MDA水平.结果储存14 d时,2组血细胞计数各指标无明显差异(P＞0.05),且均在正常范围.NS与SP组红细胞中ATP含量(nmol/mg)为:2.46±0.19 vs 2.82±0.21(P ＜0.05);MDA含量(nmol/mg)为15.45±0.33 vs 14.66±0.87(P ＜0.05).结论 在红细胞储存过程中,SP明显提高了储存红细胞ATP水平、降低了MDA水平,具有改善红细胞储存损伤的作用.
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丙酮酸钠鼻喷剂对轻、中度变应性鼻炎的治疗效果
目的:观察丙酮酸钠鼻喷剂(SP)治疗轻、中度变应性鼻炎(AR)的疗效.方法:轻、中度AR患者80例分为治疗组和对照组,治疗组给予SP喷鼻治疗,对照组给予生理盐水喷鼻治疗,疗程14 d,于治疗前1周及疗程结束后进行症状评分、视觉模拟量表(VAS)评分及生活质量评分,评估疗效,比较两组治疗有效率.结果:治疗组治疗后症状评分、VAS评分及生活质量评分较治疗前改善(P＜0.05),治疗组治疗后各项指标均优于对照组(P＜0.05);治疗组有效率75.0％ (30/40),对照组有效率42.5％ (17/40),差异有统计学意义(P＜0.05);未发生鼻喷剂应相关不良反应.结论:SP对轻、中度AR疗效较好,安全性高.
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丙酮酸钠在ALT赖氏法检测室内质控中的应用
用ALT赖氏法试剂盒内丙酮酸钠标准液作为ALT赖氏法检测室内质控物,每次随样本一同检测,与购置的质控血清进行比较,结果表明:丙酮酸钠优于质控血清,结果稳定可靠,使用方便.
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不同剂量丙酮酸钠对糖尿病大鼠视网膜组织保护作用的研究
目的：研究不同剂量丙酮酸钠对糖尿病大鼠视网膜组织的保护作用。方法将70只Wistar雄性大鼠随机分为正常组及实验组，实验组糖尿病造模成功后再随机分为五组，分别给予含不同浓度丙酮酸钠的纯净水。4个月后取视网膜组织进行丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、Na+-K+-ATP酶的测定。结果对照组和实验组相比差异有统计学意义（P＜0.05），体重显著下降，血糖明显增高，视网膜中GSH-PX、ATP活性显著下降，SOD水平减低，MDA水平显著升高；各组之间各指标比较，差异无统计学意义（P＞0.05），二组各项检测结果相对较为理想。结论丙酮酸钠可改善糖尿病的大鼠的体重、血糖情况，减轻氧化应激反应，改善视网膜的能量代谢，摄入量约为5 g/d时，对糖尿病大鼠视网膜组织的保护作用为理想，增加剂量后疗效不明显。
