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痰模型及目测涂片法检测抗酸杆菌的比较研究
目的 评价痰模型涂片法检测抗酸杆菌的价值.方法 对1089份初诊为活动性肺结核患者的痰标本,分别应用模型涂片法、目测涂片法检测抗酸杆菌,并与罗氏培养结果进行比较.检测结果比较采用x2检验和秩和检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 模型涂片法阳性检出率31.68％(345/1089),高于目测涂片的24.24％(264/1089)(x2=14.955；P＜0.05),模型涂片法与目测涂片法的质量指标合格率分别为痰细胞(94.21％,86.41％)、痰膜大小(98.99％,75.30％)、厚薄(96.14％,74.29％)、染色(94.49％,87.60％)、痰膜脱落(97.43％,86.41％),较目测涂片法均明显提高(x2值分别为37.915、272.799、206.432、31.683、89.011,P值均=0.001).以罗氏培养结果为标准.模型涂片法灵敏度为82.69％(344/416),Kappa值为0.853,优于目测涂片法[灵敏度为63.46％(264/416),Kappa值为0.682].说明模型涂片法与罗氏培养法具有较好的一致性.结论 模型涂片既继承了目测涂片检测抗酸杆菌的简便快速,又较目测涂片制片质量和阳性检出率明显提高,具有较高的敏感度、特异度,适合基层实验室推广应用.
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骨关节结核各类标本进行结核分枝杆菌培养与PCR检测的阳性率结果分析
目的 比较骨关节结核病灶中脓液、干酪、肉芽及死骨组织的结核分枝杆菌培养阳性率,及结核分枝杆菌BACTEC MGIT 960(简称“MGIT 960”)培养、改良罗氏培养基培养、PCR检测的联合阳性率.方法 2011年6月至2012年5月首都医科大学附属北京胸科医院收治的经病理明确诊断为骨关节结核的患者50例,通过手术获取病灶中的脓液(50份)、干酪(42份)、肉芽(48份)及死骨组织标本(43份),分别进行结核分枝杆菌MGIT 960培养及改良罗氏培养基培养,比较4种组织标本的培养阳性率,计算2种培养方法的联合阳性率;对脓液标本单独通过PCR方法进行了阳性率检测;计算脓液标本3种方法的联合阳性率.结果 4种标本MGIT 960培养的阳性率依次为:死骨组织(41.9％,18/43)＞脓液(40.0％,20/50)＞肉芽(33.3％,16/48)=干酪(33.3 ％,14/42);4种标本改良罗氏培养阳性率依次为:肉芽(20.8％,10/48)＞脓液(20.0％,10/50)＞死骨组织(16.3 ％,7/43)＞干酪(14.3％,6/42);脓液的PCR检测阳性率为48.0％(24/50).MGIT 960和改良罗氏培养2种结核分枝杆菌培养方法的联合阳性率为50.0％(25/50),而PCR检测、MGIT960和改良罗氏培养3种方法的联合阳性率为68.0(34/50).结论 骨关节结核患者,应尽可能选择多种标本以提高培养阳性率.MGIT 960培养可以作为首选的细菌学诊断方法,但如果再联合使用改良罗氏培养和PCR扩增技术,能够进一步提高检出阳性率.
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手术标本中结核分枝杆菌检测及临床意义研究
目的 探讨结核病患者手术切除标本进行结核分枝杆菌检测的临床意义.方法 应用罗氏培养、液体培养及定量RT-PCR方法检测12例不同化疗疗程后行手术,术中取材的标本中结核分枝杆菌.结果 不同化疗疗程的手术标本中可以应用罗氏培养法及液体培养法检测到结核分枝杆菌,并有病例存在结核分枝杆菌持留菌特征性ICL及ACR的高表达.结论 手术标本是结核茵培养及持留菌检测的很好材料,对患者术后化疗指导有指导意义.
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传统方法和PCR法在结核分枝杆菌复合群菌种鉴定中的对比研究
目的 对结核分枝杆菌复合群菌种鉴定的传统方法与PCR法进行对比研究,为临床应用提供科学依据.方法 分别采用传统结核分枝杆菌菌种鉴定方法(对硝基苯甲酸和噻吩-2-羧酸肼)和PCR法,对2010年4月至2011年5月新疆喀什胸科医院住院、临床确诊肺结核患者的313份(例)晨痰标本临床分离株进行菌种鉴定.立意抽样法抽出100份结核分枝杆菌、牛分枝杆菌及非洲分枝杆菌Ⅰ型菌株,用Spoligotyping法检测前两种方法结果的可靠性.结果 传统方法检测出结核分枝杆菌253株,牛分枝杆菌60株；而PCR法检测出结核分枝杆菌306株,牛分枝杆菌1株,非洲分枝杆菌Ⅰ型6株,两者间差异无统计学意义(x2 =5.05,P=0.08),两者检测的一致率为79.87％(250/313).传统方法和PCR法鉴定结果差异虽无统计学意义,但传统方法检测出牛分枝杆菌60株,而PCR法仅检测出牛分枝杆菌1株,差异有统计学意义(x2=4.16,P=0.04),故用立意抽检100份菌株,用Spoligotyping检测出牛分枝杆菌2株,结核分枝杆菌90株、非洲分枝杆菌Ⅰ型6株,2株未能检出菌型；其和传统方法与PCR法的一致率分别为38.78％[(2+36)/98]、98.98％[(1+90+6)/98].结论 经过Spoligotyping法检测可知,在结核分枝杆菌复合群菌种鉴定中传统方法较PCR法耗时、繁琐,且不能较准确地鉴定出菌种,而PCR法可准确、快速的将其鉴定到亚种.
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培养滤液MPT64抗原检测结核分枝杆菌复合群生长的效能分析
目的 评价以培养滤液MPT64抗原作为结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)生长指示实验(简称“MPT64检测法”)的检测效能,为建立新型结核分枝杆菌培养方法提供科学依据.方法对799例应用BACTEC MGIT 960分枝杆菌快速培养仪器法(简称“仪器法”)进行分枝杆菌培养的培养液在培养的第42天进行MPT64检测,对1265例每隔7 d(即培养第1～6周末)进行1次MPT64检测,以出现阳性检测结果或第42天为检测终点,并和仪器法比较.应用x2检验统计分析所有样本(2064例)的检测结果,分析MPT64检测法的准确度；对1265例临测样本应用t检验分析MPT64检测法的快速性.结果 (1)在2064例分枝杆菌培养的临床样本中,仪器法报告298例MTBC、108例非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)、1521例培养阴性及137例污染(后三者即无MTBC生长),其中分别有279、6、0、2例MPT64检测阳性(即有MTBC生长),两者间差异无统计学意义(x2 =0.12,P=0.742):与仪器法的总体一致性为98.69％(2037/2064)；对仪器法报告为MTBC者MPT64检测法的阳性率为93.62％(279/298),具有较高的阳性符合水平.(2)在每周进行MPT64监测的1265例培养液样本中,两种方法均检测到MTBC者168例.其中:仪器法在培养1～6周报告阳性率分别为25.60％(43/168)、66.67％(112/168)、92.26％(155/168)、98.21％(165/168)、98.81％ (166/168)和100.00％( 168/168)；MPT64检测法的阳性检出率则分别为17.26％ (29/168)、61.90％(104/168)、89.88％(151/168)、95.24％(160/168)、98.81％(166/168)和100.00％(168/168).两者阳性报告时间差异无统计学意义(t=1.68,P=0.366).结论 MPT64检测法具有准确、快速、简便的特点,值得在临床中推广应用.
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纳米磁珠富集处理临床标本在分枝杆菌培养中的初步应用
目的 以罗氏培养基作为培养检测介质,验证采用PEG600纳米磁珠富集临床标本中分枝杆菌的可行性.方法 采用PEG600纳米磁珠富集法、离心法(3000×g,20 min)和直接接种法3种方式处理94份临床标本(来源于南京市胸科医院2012年12月至2013年3月间门诊和病房的94例肺结核患者),在固体罗氏培养基上进行培养.比较3种方法的培养阳性率、污染率以及平均初生长时间.对于计数资料采用卡方检验进行统计分析,以Kolmogorov-Smirnov法检测正态性,非正态分布的计量资料采用Wilcoxon秩和检验进行分析,P＜0.05为差异有统计学意义.结果 直接接种法、离心法、磁珠富集法的阳性率分别为29.79％(28/94)、43.62％(41/94)、41.49％(39/94);污染率分别为2.91％(3/103)、4.85％(5/103)、3.88％(4/103);平均初生长时间[中位数(上下四分位数)]分别为28(21,40)、21 (21,35)、21 (21,35)d.磁珠富集法、离心法阳性率均高于直接接种法,差异均有统计学意义(x2值分别为9.09、11.08,P值均＜0.01).磁珠富集法、离心法的初生长时间均短于直接接种法,差异均有统计学意义(Z值分别为3.983、-3.980,P值均＜0.01).离心法与磁珠富集法之间在阳性率与平均初生长时间上差异均无统计学意义(阳性率比较:x2=0.25,P=0.62;平均初生长时间比较:Z=0.557,P=0.577).结论 磁珠富集法在培养的阳性率与初生长时间上均优于直接接种法,与离心法所得结果相似;由于其对环境的污染概率小,易于批量处理,具备很好的临床应用前景.
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液体培养法联合菌种鉴定技术诊断HIV与分枝杆菌双重感染
目的 利用分枝杆菌液体培养法联合菌种鉴定技术诊断HIV与分枝杆菌双重感染,以了解目前华北地区HIV与分枝杆菌双重感染的情况.方法 对2009-2011年收治的53例疑似HIV与分枝杆菌双重感染患者的可疑感染部位标本进行分枝杆菌液体培养及菌种鉴定.收集所有经确诊为HIV与分枝杆菌双重感染患者的临床资料、影像学及相关实验室检查结果进行分析与总结.结果 53例疑似HIV与分枝杆菌双重感染的患者中,病原学证实存在分枝杆菌感染的患者为19例,11例(57.9％)为单纯肺脏累及,2例(10.5％)为肺外累及,4例(21.1％)为分枝杆菌血症,2例(10.5％)为肺脏累及和分枝杆菌血症并存.16例患者为结核分枝杆菌感染,3例患者为鸟胞内分枝杆菌复合体感染.15例(78.9％,15/19)患者CD4+ T淋巴细胞计数＜ 100个/μl.结论 联合应用液体培养法与菌种鉴定技术对于诊断HIV与分枝杆菌双重感染是有效的,值得在临床推广应用.
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对BACTECTM MGIT960培养报告结果为阴性的培养管中颗粒性物质的研究
目的 探讨使用BACTECTM MGIT9660进行分枝杆菌培养时,仪器报告结果为阴性的MGIT960培养管中颗粒的性质及成因.方法 收集北京市结核病胸部肿瘤研究所2010年1月至2010年12月进行分枝杆菌培养的标本中31份仪器报告阴性但有颗粒形成的培养管,分别对颗粒性物质进行抗酸染色、罗氏培养和BACTECTM MGIT960传代培养.对培养阳性的标本进行菌种鉴定、药敏试验.选择8株培养阳性的标本进行低细菌载量接种试验来分析颗粒形成的原因,包括2株结核分枝杆菌复合群,3株蟾蜍分枝杆菌和 3株胞内分枝杆菌,每株将1个麦氏浓度的菌悬液用生理盐水连续稀释至10-5、10-6、10-7 、10-8倍,各接种到2支培养管.结果 31份仪器报告阴性但有颗粒形成的培养管,有29份经再次传代培养后荻得阳性培养结果,其中2 4份(24/29)用颗粒直接涂片后进行显微镜抗酸杆菌检查结果为阳性.29份培养阳性的菌株包括7株蟾蜍分枝杆菌,4株胞内分枝杆菌和 18株结核分枝杆菌复合群.接种量为l0-6、10-7、l0-8浓度的蟾蜍分枝杆菌培养管中均有颗粒形成,阳性比例分别为4/6、5/6、6/6.结论 BACTECTM MGIT960进行结核分枝杆菌培养时,仪器报阴性的MGIT960培养管中颗粒多为活的分枝杆菌；BACTECTM MGIT960系统颗粒的形成与低细菌载量有关,颗粒形成也有一定的种属特异性,主要集中在蟾蜍分枝杆菌和胞内分枝杆菌.
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不同痰标本处理方法对结核分枝杆菌罗氏培养检测结果的影响
目的 分析采用简单法和离心法处理痰标本,以及采用离心法处理痰标本时不同离心条件对罗氏培养检测结果的影响.方法 收集2010年9-11月北京市结核病胸部肿瘤研究所国家结核病临床实验室进行细菌学检查的疑似结核病患者痰标本198份,其中涂片阳性的痰标本99份,涂片阴性的痰标本99份.同时应用简单法和离心法对198份痰标本进行罗氏培养；离心法培养时分别采用5种不同的离心条件:3000×g离心15 min、3000×g离心8 min、3000×g离心25 min、2000×g离心15 min、5000×g离心15 min.结果 任何一种方法培养阳性即认定标本培养阳性,198份痰标本中共有126份培养阳性,其中97份来自涂阳痰标本,29份来自涂阴痰标本；简单法的阳性率为93.65％(118/126),离心法高的阳性率为96.03％(121/126).简单法的平均初生长时间为(20±8.56)d,离心法(3000×g离心15 min)的平均初生长时间为(22±9.10)d,两者间差异有统计学意义(Z=-4.81,P＜0.001).在125份离心法培养阳性的标本中,3000×g离心15 min、3000×g离心8 min、3000×g离心25 min、2000×g离心15 min、5000×g离心15 min,5种不同离心条件下的培养阳性率分别为96.03％(121/126)、89.68％(113/126)、95.24％(120/126)、92.06％(116/126)和96.03％(121/126).结论 罗氏培养过程中,简单法的阳性率与离心法接近,但由于简单法操作简单、污染率较低,初生长时间较短,因而可能更符合临床的需要；应用离心法进行罗氏培养时,离心力或离心时间的变化可能会影响培养的阳性率.
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手工MGIT系统在基层结核病实验室中检测分枝杆菌的效果评价
目的 对手工MGIT液体培养系统(manual mycobacteria growth indicator tube system,M-MGIT)检测分枝杆菌的效果进行评价.方法 收集2012年1月至2013年2月北京市朝阳区疾病预防控制中心结核病门诊初诊患者526例,收集首次痰标本526份,分别对同份标本进行罗氏(L(o)wenstein-Jensen,L-J)固体培养、全自动BACTEC MGIT 960系统培养(A-MGIT)和M-MGIT系统培养,统计学分析采用x2检验和t检验,以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 526份标本中,3种分离培养方法共分离出261株分枝杆菌菌株,检出率为49.6％;M MGIT法、AMGIT法和LJ法阳性检出率分别为48.7％(256/526)、49.0％(258/526)和41.3％(217/526).MMGIT和A-MGIT培养法检出率均高于L-J培养法,差异有统计学意义(x2值分别为5.84、6.45,P值均＜0.05),但M-MGIT和A-MGIT培养法检出率差异无统计学意义(x2=0.02,P＞0.05).M-MGIT法、A-MGIT法和L-J法阳性菌株平均报告时间分别为13 d[(13±6)d]、12 d[(12±6)d]和24 d[(24±9)d],M-MGIT和A-MGIT法阳性报告时间明显短于LJ法,差异有统计学意义(t值分别为15.84、18.32,P值均＜0.05),M MGIT和A-MGIT之间的差异无统计学意义(t=1.89,P＞0.05).MMGIT法、A-MGIT法和L-J法污染率分别为4.6％(24/526)、4.9％(26/526)和4.1％(43/1052),差异无统计学意义(x2=0.64,P＞0.05).结论 M-MGIT液体培养系统能快速检测分枝杆菌,检出率高,阳性报告时间短,成本低廉,适合基层结核病实验室应用.
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液基夹层杯技术检测抗酸杆菌应用性研究
目的 评价液基夹层杯技术检测抗酸杆菌的应用价值.方法收集1 190例肺结核可疑症状者的642份晨痰标本和1 140份即时痰标本,每份痰标本均采用液基夹层杯技术、直接涂片查找抗酸杆菌技术和罗氏结核分枝杆菌培养技术进行检测,比较直涂法、液基法与培养法对痰标本的阳性检出率,并在以培养法为金标准的前提下考察液基法、直涂法的灵敏度和特异度,同时评价晨痰和即时痰、1次痰和2次痰对肺结核涂阳病人发现的差异.结果 液基法、直涂法和培养法对642份晨痰标本的阳性检出率分别为23.5%、12.7%和26.6%,对1 140份即时痰的阳性检出率分别为18.1%、9.6%和23.3%.以培养法作为金标准,液基法的灵敏度和特异度分别为68.9%和95.8%,并与直涂法相对应的指标差异有统计学意义(P＜0.05).液基法检测表明:642份晨痰阳性检出率显著高于1 140份即时痰阳性检出率(P＜0.05).结论 液基法能够提高痰标本的灵敏度,特异度较高,操作标准化,且所需设备简单,便于基层开展,是一种可能具有推广价值的检测方法.
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中国区县级结核病防治机构结核分枝杆菌涂片和培养结果多中心比对分析研究
目的 分析我国区县级结核病防治机构(简称“结防机构”)就诊患者痰涂片和培养结果之间的关系.方法 选取全国耐药性基线调查期间通过分层整群抽样方法随机抽取的18个区县级结防机构,自2007年4-12月连续纳人的1230例初治和复治涂阳患者痰标本,共计3550份,采取“三涂两培”的方法(即3份痰标本均为阳性,选取阳性级别高的2份痰标本进行培养；3份痰标本2份阳性,选取2份阳性痰标本进行培养；3份痰标本1份阳性,选取阳性标本和1份质量好的阴性标本进行培养),完成涂片和培养试验,计算患者即时痰、夜间痰和晨痰不同痰标本的涂片阳性率和培养阳性率,分析涂片和培养结果的相关关系.结果 结核病患者即时痰、夜间痰和晨痰涂片阳性率分别为78.8％(917/1164)、87.0％(1070/1230)和90.0％(1040/1156),即时痰、夜间痰和晨痰培养阳性率分别为96.9％(504/520)、97.1％(881/907)和97.8％(709/725),对2147份痰标本涂片结果阳性级别和培养结果阳性级别进行趋势x2检验,发现两者存在一定的线性趋势相关关系(x2=206.2,P＜0.01).结论 涂片结果在一定程度上可为培养结果提供依据,涂片阳性级别越高,培养阳性级别也越高.
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38例骨关节结核患者病灶标本分枝杆菌培养及药物敏感性试验结果分析
目的 对骨关节结核病灶脓液与肉芽组织分枝杆菌的培养阳性率及药物敏感性试验(简称“药敏试验”)结果进行分析.方法 选择2008年10月至2009年10月在首都医科大学附属北京胸科医院骨科住院并进行手术治疗的骨关节结核患者38例,术中同时采集病灶部位脓液及肉芽组织,采用改良罗氏培养基进行分枝杆菌培养,对培养阳性菌株进行12种抗结核药物(异烟肼、利福平、利福喷丁、乙胺丁醇、链霉素、卡那霉素、阿米卡星、卷曲霉素、氧氟沙星、左氧氟沙星、对氨基水杨酸、丙硫异烟胺)的药敏试验,并分析培养阳性率与患者病程、疗程的关系.结果 38例患者肉芽组织培养阳性率为36.8％ (14/38),高于脓液培养(21.1％,8/38),差异有统计学意义(Fisher确切概率法,P＜0.001);对14例患者肉芽组织培养阳性的菌株进行12种抗结核药物的药敏试验显示:全敏感4例,占28.6％(4/14);单耐药3例,占21.4％(3/14);多耐药5例,占35.7％(5/14);耐多药1例,占7.1％(1/14);广泛耐药1例,占7.1％(1/14).病程＜12个月与病程＞12个月的患者,脓液分枝杆菌培养阳性率分别为26.9％(7/26)、8.3％(1/12),差异无统计学意义(Fisher确切概率法,P=0.393);肉芽组织分枝杆菌培养阳性率分别为46.2％(12/26)、16.7％(2/12),差异无统计学意义(Fisher确切概率法,P=0.147).术前化疗疗程＜2个月的患者脓液分枝杆菌培养阳性率(38.9％,7/18)高于疗程＞2个月的患者(5.0％,1/20),差异有统计学意义(Fisher确切概率法,P=0.016);术前化疗疗程＜2个月的患者肉芽组织分枝杆菌培养阳性率(61.1％,11/18)高于疗程＞2个月的患者(15.0％,3/20),差异有统计学意义(Fisher确切概率法,P=0.006).结论 骨关节结核患者病灶标本分枝杆菌耐药率较高,术中应尽量采集肉芽组织进行分枝杆菌罗氏培养,以提高培养阳性率;术前化疗时间＜2个月能提高分枝杆菌培养阳性率.
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某高级中学结核病爆发分离菌株的实验室鉴定
目的 鉴定从某中学结核病爆发分离菌株的种属.方法 2006年5-8月辽宁省某高级中学部分学生出现活动性结核病的临床表现,从10例涂片阳性患者的痰标本中分离得到3份菌株经表型鉴定方法,传统生化方法,扩增hupB基因、dnaA-dnaN和NTF-1区;Spoligotyping以及MIRU基因分型;16S rRNA基因、16S-23S ITS和hsp65基因测序以及hsp65基因限制性酶切分析进行鉴定.结果 临床分离株经生化方法初步鉴定1株为结核分枝杆菌复合群和2株为非结核分枝杆菌,随后经表型鉴定和扩增hupB基因、dnaA-dnaN和NTF-1区;Spoligotyping以及MIRU基因分型,说明属于结核分枝杆菌复合群的菌株为结核分枝杆菌北京基因型现代株,MIRU基因型为223325173533.经16S rRNA基因、16S-23S ITS和hsp65基因测序以及hsp65基因限制性酶切分析说明属于非结核分枝杆菌的菌株为猪分枝杆菌.结论 从结核病爆发累及病人的标本中分离出结核分枝杆菌北京基因型现代株和猪分枝杆菌,猪分枝杆菌在暴发流行中的意义尚需进一步研究.
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胶体金法结合涂片形态学特征快速鉴别结核分枝杆菌复合群的应用评价
目的 探讨结核分枝杆菌抗原胶体金法结合涂片形态学特征鉴别结核分枝杆菌复合群的应用价值.方法 采用涂片形态学特征和结核分枝杆菌抗原胶体金法对853株分枝杆菌临床分离株进行鉴别并与传统菌种鉴定结果进行比较.结果 涂片法鉴别结核分枝杆菌的敏感度为98.4％(750/762),特异度为96.7％(88/91)；胶体金试验鉴别结核分枝杆菌的敏感度为99.0％(754/762),特异度为98.9％(90/91)；两种方法均为阳性,可报告菌株中含有结核分枝杆菌复合群(MTC),其阳性预测值为100.0％(741/741)；两种方法均为阴性,可报告非结核分枝杆菌(NTM),其阴性预测值为100.0％(87/87).结论 结合涂片形态和结核分枝杆菌抗原胶体金两种方法鉴别结核分枝杆菌可以提高检测的准确性,是一种快速、简便,适于各级实验室使用的方法.
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MGIT960与罗氏培养法在结核分枝杆菌培养及药敏试验中的比对分析
目的 比对全自动Bactec MGIT960(MGIT960)系统与改良罗氏(L-J)培养方法2者在结核分枝杆菌培养、鉴定及药敏试验中的优越性.方法 按国家疾病预防控制中心(CDC)-碧迪项目辽宁工作方案要求和国际标准WS288-2009<肺结核诊断标准>纳入临床病例.本实验共纳入病例435例,其中男性319例,女性116例,平均年龄52.3岁(10～86岁).上述每份病例标本均分别进行痰液涂片抗酸染色(萋-尼法)镜检,L-J固体培养和MGIT960系统液体培养.培养阳性者分别进行一线药物异烟肼(INH)、利福平(RIF)、链霉素(STR)和乙胺丁醇(EMB)的L-J法药敏试验(比例法)和MGIT960药敏试验;分别计算出抗酸染色镜检与MGIT960和L-J培养的符合率;L-J培养和MGIT960培养阳性检出率;L-J和MGIT960两种培养方法药敏试验所需的培养时间及符合率等.结果 MGIT960培养法和L-J培养法与痰涂片镜检的阳性符合率分别为90.8%(187/206)和89.3%(184/206);MGIT960与L-J结果符合率92.8%(219/236);MGIT960和L-J平均培养时间分别为9.5 d和31.5 d;MGIT960和L-J一线药物INH、RIF、STR和EMB敏感性试验的符合率分别为92.7%、95.9%、91.8%和97.3%.结论 全自动MGIT960系统培养方法的敏感度和特异度高于L-J培养法,报告时间平均缩短至9.5 d,该系统是目前为理想的快速结核分枝杆菌培养、鉴定和药敏试验检测系统.
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四县(区)结核病防治机构固体培养能力建设调查
目的 评估固体培养试验在我国县(区)级结核病防治机构(简称“结防机构”)应用的可行性.方法 选取黑龙江省北林区和兰西县及湖南省湘潭县和岳阳县4个县(区)级结核病实验室,自2010年5月至2011年2月连续纳入2059例具有肺结核可疑症状的初诊患者,收集患者痰标本完成分枝杆菌涂片镜检和固体培养试验,按月统计涂阳培阴率和污染率.按照培养试验室内质量控制要求,初诊患者涂阳培阴率要求低于10％,污染率要求控制在2％～5％.结果 (1)全部患者涂片和培养阳性率分别为18.3％(376/2059)和26.6％(547/2059),差异有统计学意义(x2=129.2,P＜0.01).(2)北林区涂阳培阴率为16.5％(23/139),超过正常要求低于10％的水平.湘潭县和岳阳县培养污染率分别为5.6％(157/2800)和9.7％(252/2590),超过正常要求低于5％的水平.其余县(区)涂阳培阴率和培养污染率均处于正常范围.结论 4个县(区)级实验室初步具备了分枝杆菌固体培养试验能力.
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河南省2010年结核病流行病学抽样调查点细菌学检测结果分析
目的 了解河南省人群中结核分枝杆菌的流行特征.方法 依据《全国第五次结核病流行病学抽样调查实施细则》的抽样规则,抽取河南省36个点代表,共涉及18个地市的36个县,实检49 091名,均进行X线摄片检查,共发现肺结核可疑症状者和(或)X线胸片异常者2877例,收集此部分人群的痰标本,对痰标本进行涂片镜检、分离培养、菌株鉴定,以及一、二线抗结核药物(异烟肼、利福平、乙胺丁醇、链霉素、对氨基水杨酸、卡那霉素、氧氟沙星、丁胺卡那霉素、卷曲霉素)的耐药试验.结果 在2877例可疑肺结核患者中发现痰涂片阳性者35例,涂阳率1.22％；分离培养的2875例中获得45株结核分枝杆菌,结核分枝杆菌阳性率为1.57％,其中北京基因型菌株占91.11％(41/45),非北京基因型占8.89％(4/45).肺结核患者任一耐药率和耐多药率分别为28.89％(13/45)、6.67％(3/45).结论 河南省结核分枝杆菌以北京基因型为主,仍为耐药结核病的高负担地区,需采取更加有效的防治策略和措施来控制结核病.
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痰涂片镜检在涂阳肺结核患者随访中的准确性研究
目的 以MTB分离培养的结果为参考,探讨痰涂片镜检在涂阳肺结核随访患者中的疗效监测及评估其准确性.方法 纳入2010年1月至2011年7月黑龙江省和浙江省各2个县(市)787例涂阳肺结核患者.收集经标准化抗结核药物治疗至2个月末的679例随访患者痰标本,开展MTB痰涂片镜检和分离培养.以MTB分离培养的结果为参考,对有培养结果的670例患者计算痰涂片镜检用于疗效监测的敏感度和特异度,以评估痰涂片镜检对疗效监测的准确性.结果 679例随访患者抗结核药物治疗2个月末,痰涂片镜检结果有522例(76.9％)发生阴转,其中初治患者454例(454/578,78.5％)痰涂片镜检阴转,高于复治患者[68例(68/101,67.3％)],二者差异有统计学意义(x2=6.09,P=0.014).670例患者治疗至2个月末分离培养结果有582例(86.9％)阴性,其中初治患者502例(502/569,88.2％),复治患者80例(80/101,79.2％),二者分离培养阴转率的差异有统计学意义(x2=6.11,P=0.013).以分离培养结果为参考标准,治疗至2个月末痰涂片镜检的敏感度和特异度分别为69.3％(61/88,95％CI:59.7％～78.9％)和83.7％(487/582,95％CI:80.7％～86.7％).其中,初治患者的敏感度和特异度分别为64.2％(43/67,95％CI:52.7％～75.7％)和84.1％(422/502,95％CI:80.9％～87.3％);复治患者分别为85.7％(18/21,95％CI:70.7％～100.0％)和81.3％(65/80,95％CI:72.8％～89.8％);治疗至2个月末痰涂片镜检对初治与复治患者疗效监测的敏感度、特异度差异均无统计学意义(x2=3.28,P=0.070;x2=0.40,P=0.527).结论 在结核病治疗过程中应用痰涂片镜检进行疗效监测的敏感度和特异度均较低,应结合分离培养技术提高其准确性.
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液体MGIT培养与改良罗氏培养方法在HIV感染与AIDS患者结核病筛查中的对比研究
目的 比较液体分枝杆菌培养管(MGIT)培养与改良罗氏培养方法在HIV感染与AIDS患者中检测分枝杆菌的效果.方法 2013年1月至2015年12月在广西壮族自治区南宁市、来宾市和贵港市就诊的HIV感染与AIDS患者中,选取未服用过抗结核药物的1684例HIV感染与AIDS患者,对所收集到的3368份痰标本同时使用液体MGIT培养与改良罗氏培养进行分枝杆菌分离培养.对两种培养方法的痰标本阳性检出率、污染率,结核分枝杆菌复合群、非结核分枝杆菌(NTM)感染患者的阳性检出率,以及在无肺结核主要临床症状、胸片无异常,但是痰培养结果为阳性的患者及活动性肺结核患者的阳性检出率的差异进行比较.结果 在1684例患者的3368份痰标本中,液体MGIT培养分枝杆菌阳性检出率(15.5％,522/3368)高于改良罗氏培养法(11.6％,392/3368),差异有统计学意义(x2=95.64,P=0.000);液体MGIT培养污染率(7.0％,235/3368)高于改良罗氏培养法(3.4％,115/3368),差异有统计学意义(x2=85.31,P=0.000);液体MGIT培养在结核分枝杆菌复合群感染患者中阳性检出率为88.7％(149/168),在NTM感染患者中阳性检出率为91.3％(115/126),均高于改良罗氏培养[分别为78.6％(132/168)和62.7％(79/126)],差异均有统计学意义(x2=4.66,P=0.031;x2=21.12,P=0.000);液体MGIT培养在无肺结核主要临床症状和胸片无异常、但是痰培养结果为阳性的患者及诊断为活动性肺结核的患者中阳性检出率分别为8.0％(63/785)和62.0％(176/284),均高于改良罗氏培养[分别为5.7％(45/785)和48.2％(137/284)],差异均有统计学意义(x2=9.63,P=0.002;x2 =28.31,P=0.000).结论 在HIV感染与AIDS患者中进行结核病筛查,液体MGIT培养方法阳性检出率优于改良罗氏培养,但污染率比改良罗氏培养高;两种方法联合培养可提高结核病筛查阳性检出率.
