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300株抗酸分枝杆菌菌种初步鉴定
资料与方法: 1.资料来源:300株抗酸分枝杆菌源于阳泉市1993年~1998年1 200例结核病患者的痰中,其中男性204例(68%),女性96例(32%),平均年龄40岁。2.标本菌株:由北京市结核病研究所生物室提供,结核分枝杆菌(H37Rv)、牛分枝杆菌及非结核分枝菌株12株,本院检验科细菌室传代培养做对照。3.方法:(1)分别观察在28℃、37℃及45℃环境中罗氏(L-J)和丙酮酸钠培养基上细菌生长速度、菌落形态及色素,以判定菌种;(2)挑取菌落涂片抗酸染色,证实为抗酸杆菌;(3)鉴别培养:将L-J培养基上生长3周的菌落以10-3mg湿重接种于TCH培养基上,以10-2mg湿重接种于PNB培养基上,置于37℃环境中进行培养;(4)生物化学反应:包括硝酸还原、耐热触酶、吐温80水解、尿素酶、芳香硫酸酯酶及烟酸等试验。4.判定:(1)PNB培养阴性者,做硝酸还原试验,若出现阳性或强阳性,同时TCH和L-J培养基菌落生长呈阳性,判定为结核分枝杆菌。(2)PNB培养阴性,硝酸还原试验阴性,TCH培养阴性,只有L-J培养阳性者判定为牛分枝杆菌。(3)三种培养基上菌落生长均呈阳性者判定为非结核分枝杆菌。
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进行性系统性硬化症患者食管NOS表达、血清NO含量与食管动力变化研究
目的:探讨一氧化氮(NO)在进行性系统性硬化症(PSS)发病机制中的作用.方法:12例PSS患者和12名健康受试者纳入本研究.应用PCpolygraf HR高分辨多通道测压系统检测PSS患者的食管下段括约肌压力(LESP)、食管下段括约肌长度(LESL)及食管远段蠕动幅度等动力参数;应用Digitrapper MK Ⅲ动态食管内pH监测仪检测其24h食管内pH各项参数;应用NADPH-d组化染色观察食管一氧化氮合酶(NOS)表达;应用硝酸还原酶法测定血清NO含量.结果:PSS患者的LESP显著低于对照组[(1.21±0.11)kpavs(2.38±0.16)kpa,P<0.05)];75%的PSS有一过性LES松弛;PSS的食管下段蠕动幅度明显低于对照组[(5.18±1.04)kpa vs(14.93±2.12)kpa,P<0.01J];PSS的食管内24h pH值显著高于对照组;PSS血清NO含量显著高于对照组[(106.47±18.21)μmol/L vs(82.32±15.3)μmol/L,P<0.01].其食管黏膜NOS呈强阳性反应,而对照组呈阴性反应.结论:内源性NO可能参与PSS食管动力功能紊乱的发病.
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血管紧张素Ⅱ对大鼠HSC合成PAI-I的影响及NO的干预作用
目的:明确血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对大鼠肝星形细胞(HSC)细胞外基质降解的影响以及一氧化氮(NO)对其的干预作用.方法:采用原位酶灌注法分离培养HSC,发色底物法测定纤溶酶原激活物抑制物-I(PAI-I)活性,硝酸还原酶法测定NO浓度;采用半定量RT-PCR法检测PAI-I mRNA的表达.结果:AngⅡ能剂量依赖性地促进HSC合成和释放PAI-I,NO、依那普利和氯沙坦均能减弱这种作用.结论:AngⅡ能通过Ⅰ型受体抑制细胞外基质降解,NO可以拮抗这种作用.促进细胞外基质代谢是依那普利和氯沙坦抑制肝纤维化的机制之一.
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头颈部鳞状细胞癌中诱生型一氧化氮合酶的表达及其临床意义
本研究采用硝酸还原酶法测定血清一氧化氮(nitric oxibe ,NO)水平,采用逆转录聚合酶链反应(revevse transriptase polymerase chain reaction,RTPCR)法检测组织中诱生型一氧化氮合酶(inducible NOS,iNOS)mRNA表达,探讨其在头颈部鳞状细胞癌(简称鳞癌)发病机制中的作用.
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黄芪抑制血管平滑肌细胞增殖及其作用机制
目的观察黄芪(AS)对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的抑制作用,了解黄芪是否通过刺激VSMC产生一氧化氮(nitric oxide,NO),使细胞周期停滞于G0/G1期,从而抑制平滑肌细胞增殖.方法 [3H]-胸腺嘧啶核苷酸([3H]-TdR)掺入测定VSMC DNA合成,流式细胞仪检测细胞周期情况,硝酸还原酶法测定细胞培养上清中NO水平.结果黄芪以剂量依赖关系抑制血清诱导的VSMC[3H]-胸腺嘧啶核苷酸掺入,使G0/G1期细胞比例明显增多,S期细胞比例显著减少,黄芪刺激VSMC后,细胞培养上清中NO水平呈剂量依赖上升.结论黄芪能抑制VSMC增殖,使细胞周期停滞于G0/G1期,这一过程可能与黄芪刺激VSMC产生NO有关.
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喉癌喉咽癌患者血清一氧化氮浓度和组织一氧化氮合酶的表达
我们采用硝酸还原酶法测定健康人和喉癌喉咽癌患者血清一氧化氮(NO)水平,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测喉癌喉咽癌患者癌组织、癌旁组织、正常喉粘膜及喉良性肿瘤组织和正常人喉粘膜组织中诱生型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达情况,探讨NO、iNOS与喉癌喉咽癌临床分期、病理分级、淋巴结转移以及预后之间的关系.